CN111171121B

CN111171121B - 一种转录因子及其在激活香蕉MaSBE2.3表达上的应用

Info

Publication number: CN111171121B
Application number: CN201911174856.XA
Authority: CN
Inventors: 苗红霞; 金志强; 孙佩光; 徐碧玉; 刘菊华; 贾彩红; 赵东方
Original assignee: Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences
Current assignee: Institute of Tropical Bioscience and Biotechnology Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences
Priority date: 2019-11-26
Filing date: 2019-11-26
Publication date: 2021-02-02
Anticipated expiration: 2039-11-26
Also published as: CN111171121A

Abstract

本发明提供了一种转录因子MaARF2，其是由核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的基因编码的蛋白质。本发明还提供了转录因子MaARF2的编码基因及应用。本发明的转录因子MaARF2能够与香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3启动子区结合，能够与MaSBE2.3基因互作，且调控其上调表达，例如将转录因子MaARF2基因和香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3启动子导入香蕉果实薄片中，可以显著激活香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3的上调表达，这对调控支链淀粉含量或提高作物产量、改善淀粉品质、培育优质香蕉新品种具有重要意义，为改良香蕉或其他果实支链淀粉品质提供了候选转录因子资源。

Description

一种转录因子及其在激活香蕉MaSBE2.3表达上的应用

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种转录因子及其在激活香蕉MaSBE2.3表达上的应用。

背景技术

支链淀粉含量直接影响植物产量、品质及加工性能，而淀粉分支酶(Starchbranching enzyme,SBE)基因是影响支链淀粉合成的关键酶基因。它能切开α-1,4-D-葡聚糖直链供体(直链淀粉或支链淀粉的直链区)的α-1,4-糖苷键，并同时催化所切下的短链与受体链(原链或其他链)间α-1,6-糖苷键的形成，从而产生分支。

在玉米和水稻中报道，转录因子ZmNAC36和OsbZIP8能够与SBE基因启动子结合，并调控其上调表达(Zhang et al.,2014；Wang et al.,2018)。生长素响应因子(Auxinresponse factor,ARF)作为一类调控植物生长发育与信号转导的转录因子，在侧根发生、顶端优势、向性运动、细胞伸长、细胞***和细胞分化等方面具有重要功能(Hagen et al.,2002)。同时，ARF转录因子能够激活或抑制受生长素快速诱导的靶基因Aux/IAA、SAUR和GH3的表达(Liscum et al.,2002；Hagen et al.,2002)。然而，ARF转录因子是否能够与SBE基因互作并调控其表达，目前还未见报道。因此，开展香蕉转录因子MaARF2与MaSBE2.3基因的研究对调控支链淀粉合成或提高作物产量、改善淀粉品质、培育优质香蕉新品种具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中的不足，提供一种可激活香蕉果实淀粉分支酶基因SBE2.3表达的转录因子MaARF2及其编码基因和应用。

本发明的第一个方面是提供一种转录因子MaARF2，其是由核苷酸序列如SEQ IDNO:1所示的基因编码的蛋白质。

本发明的第二个方面是提供一种转录因子MaARF2基因，其核苷酸序列如SEQ IDNO:1所示。

本发明的第三个方面是提供一种重组载体，其包含原始载体和本发明第二个方面所述的转录因子MaARF2基因。

其中，所述原始载体可以采用基因重组领域中常用的载体，例如病毒、质粒等。本发明对此不进行限定。在本发明的一个具体实施方式中，所述原始载体采用pGreenII 62SK载体质粒，但应当理解的是，本发明还可以采用其他质粒、或者病毒等。

优选地，所述原始载体为pGreenII 62SK载体质粒，SEQ ID NO:1所示核苷酸序列位于pGreenII 62SK载体质粒的Sac I和EcoR I两种限制性内切酶位点之间。

本发明的第四个方面是提供如本发明第一个方面所述的转录因子MaARF2、或者本发明第二个方面所述的转录因子MaARF2基因、或者本发明第三个方面所述的重组载体在激活香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3表达中的应用。

本发明的第五个方面是提供一种香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3启动子，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

本发明的第六个方面是提供另一种重组载体，其包含原始载体和本发明第五个方面所述的香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3启动子。

其中，所述原始载体可以采用基因重组领域中常用的载体，例如病毒、质粒等。本发明对此不进行限定。在本发明的一个具体实施方式中，所述原始载体采用pGreenII 0800载体质粒，但应当理解的是，本发明还可以采用其他质粒、或者病毒等。

优选地，所述原始载体为pGreenII 0800载体质粒，SEQ ID NO:2所示核苷酸序列位于pGreenII 0800载体质粒的Xho I和Sma I两种限制性内切酶位点之间。

本发明的第七个方面是提供如本发明第五个方面所述的香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3启动子、或者本发明第六个方面所述的重组载体在激活香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3表达中的应用。

其中，第五个方面所述的香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3启动子与本发明第一个方面所述的转录因子MaARF2互作，从而激活香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3表达。

本发明的第八个方面是提供一种用于扩增转录因子MaARF2基因的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。

本发明的第九个方面是提供一种用于扩增香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3启动子的引物对，其核苷酸序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示。

本发明的转录因子MaARF2能够与香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3启动子区结合，能够与MaSBE2.3基因互作，且调控其上调表达，例如将转录因子MaARF2基因和香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3启动子导入香蕉果实中，可以显著激活香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3的上调表达，这对调控支链淀粉含量或提高作物产量、改善淀粉品质、培育优质香蕉新品种具有重要意义，为改良香蕉或其他果实支链淀粉品质提供了候选转录因子资源。

附图说明

图1为MaSBE2.3基因启动子自激活和酵母单杂交验证以及MaARF2与MaSBE2.3基因启动子酵母单杂交互作验证结果，A：MaSBE2.3基因启动子自激活和酵母单杂交验证；B：MaARF2与MaSBE2.3基因启动子酵母单杂交互作验证。p53 promoter：阳性对照启动子；MaSBE2.3 promoter：MaSBE2.3基因启动子；AD-Rec-p53+p53 promoter：阳性对照组合；AD+Empty-MaSBE2.3 promoter：阴性对照组合；MaARF2+MaSBE2.3 promoter：转录因子MaARF2和MaSBE2.3基因启动子互作验证。

图2为pGreenII 0800-MaSBE2.3 promoter双酶切验证电泳结果图，M：DL2000 DNAMarker；泳道1：为pGreenII 0800-MaSBE2.3 promoter重组质粒双酶切结果。

图3为pGreenII 62SK-ARF2双酶切验证电泳结果图，M：DL2000 DNA Marker；泳道1：为pGreenII 62SK-ARF2重组质粒双酶切结果。

图4为pGreen-MaSBE2.3 promoter和pGreenII 62SK-MaARF2载体构建模式图和LUC活性检测，A：pGreenII 0800-MaSBE2.3 promoter和pGreenII 62SK-MaARF2载体构建模式图；B：LUC活性检测；SK：pGreenII 62SK载体；SK+MaARF2：pGreenII 62SK-MaARF2载体。

具体实施方式

为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

一、基因获得

1、香蕉转录因子MaARF2基因的获得

以巴西蕉果实cDNA为模板，以

5’-ATGGGGATCGATTTGAACACGATAG-3’

5’-CTAAATTGGAGCTGCACGCAAAGCA-3’

为引物，通过PCR方法扩增获得的一种含有碱基序列为2,118bp，其序列如SEQ IDNo.1所示。

2、香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3启动子的获得

以巴西蕉果实DNA为模板，以

5’-AGGTTCTATATACTTAATTACTC-3’

5’-TCGTATGGAGCTGAGGCGGGTGATC-3’

为引物，通过PCR方法扩增获得的一种含有碱基序列为1,824bp，其序列如SEQ IDNo.2所示

二、酵母单杂交

(1)酵母单杂交文库的构建与筛选

应用RNA提取试剂盒(TIANGEN Biotech)提取抽蕾后0d、20d和80d巴西蕉果肉中总RNA，然后通过MathchmakerTM酵母单杂交试剂盒(Clontech,Mountain View,CA)构建cDNA文库，并装载于猎物载体pGADT7-Rec(Clontech)。上述MaSBE2.3启动子质粒经Sac I和XhoI双酶切、回收、连接，构建于诱饵载体pAbAi(Clontech)。将携带cDNA文库的pGADT7-Rec猎物载体和携带MaSBE2.3启动子序列的pAbAi诱饵载体共转化Y1 HGold酵母菌株(Clontech)，在SD/-Leu+AbA²⁰⁰筛选培养基上30℃培养3d。通过PCR检测、测序分析以及香蕉A基因组数据库比对注释，获得候选转录因子MaARF2。

(2)MaSBE2.3启动子自激活实验及其与转录因子MaARF2互作验证

为进一步验证MaSBE2.3启动子与MaARF2互作，MaSBE2.3启动子自激活活性在pAbAi SD/-Ura+AbA²⁰⁰培养基上被验证，见图1A，在选择培养基SD/-Ura+AbA²⁰⁰上，pAbAi-MaSBE2.3 promoter菌株不能生长，说明MaSBE2.3启动子没有自激活活性。

通过构建转录因子MaARF2基因于猎物载体pGADT7 AD，MaSBE2.3启动子于诱饵载体pAbAi，然后共转化酵母菌株Y1 HGold(Clontech)，在SD/-Leu+AbA²⁰⁰筛选培养基上于30℃培养3d能够正常生长，见图1B，在筛选培养基SD/-Leu+AbA²⁰⁰上，pGADT7 AD-MaARF2+pAbAi-MaSBE2.3 promoter菌株能够正常生长，说明MaARF2能够与MaSBE2.3启动子互作。

三、重组载体的构建

1、pGreenII 0800-MaSBE2.3 promoter载体

将上述香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3启动子的核苷酸序列，利用Xho I和SmaI两种限制性内切酶分别对目的片段及pGreenII 0800载体质粒双酶切，将酶切后的目的片段与pGreenII 0800载体片段进行回收、连接、转化及测序验证正确，即得香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3启动子载体pGreenII 0800-MaSBE2.3 promoter(图2)。

2、pGreenII 62SK-MaARF2载体

将上述香蕉转录因子MaARF2基因的核苷酸序列，利用Sac I和EcoR I两种限制性内切酶分别对目的片段及pGreenII 62SK载体质粒双酶切，将酶切后的目的片段与pGreenII 62SK载体片段进行回收、连接、转化及测序验证正确，即得香蕉转录因子MaARF2基因的pGreenII 62SK-MaARF2载体(图3)。

四、重组载体转化至香蕉果实薄片及双荧光素酶活性检测方法

(1)pGreenII 0800-MaSBE2.3 promoter载体的农杆菌转化

取200μL冰浴上融化的根癌农杆菌GV3101感受态细胞，加入pGreenII 0800-MaSBE2.3 promoter重组质粒2μg，轻轻混匀，在冰浴中放置30min；转入液氮中冷冻3min，迅速置37℃水浴中温育5min；加入800μL YEP液体培养基，28℃250rpm预培养4～5h；吸取300μL菌液至含有25mg/L Rif和50mg/L Kan的YEP固体选择培养基上，均匀涂布于整个平板；将平板置于28℃至液体被吸收，倒置平板，28℃培养23d，挑选单菌落，验证检测，将转化正确的农杆菌菌液用于下一步实验。

(2)pGreenII 62SK-MaARF2载体的农杆菌转化

取200μL冰浴上融化的根癌农杆菌GV3101感受态细胞，加入pGreenII 62SK-MaARF2重组质粒2μg，轻轻混匀，在冰浴中放置30min；转入液氮中冷冻3min，迅速置37℃水浴中温育5min；加入800μL YEP液体培养基，28℃，250rpm预培养4～5h；吸取300μL菌液至含有25mg/L Rif和50mg/L Kan的YEP固体选择培养基上，均匀涂布于整个平板；将平板置于28℃至液体被吸收，倒置平板，28℃培养2～3d，挑选单菌落，验证检测，将转化正确的农杆菌菌液用于下一步实验。

(3)根癌农杆菌介导香蕉果实薄片遗传转化

在超净工作台上将香蕉果实薄片(厚度1mm)浸泡于5mL 75％乙醇的无菌离心管中1min，浸泡期间充分晃动，然后用无菌水冲洗3次；20％次氯酸钠溶液浸泡15min，浸泡期间充分晃动，用无菌水冲洗3次。将已经转化pGreenII 0800-MaSBE2.3 promoter重组载体的根癌农杆菌GV3101菌液与已经转化pGreenII 62SK-MaARF2重组载体的根癌农杆菌GV3101菌液按照1:7的体积比接种到10mL含有50mg/L Kan的YEP液体培养基中过夜活化培养；吸取活化培养的菌液1mL到新的50mL含有50mg/L Kan的YEP液体培养基中培养至OD600＝0.6；将所需浓度的菌液于超净工作台上转移到50mL无菌离心管中，4℃,6000rpm离心5min，弃去上清液，加入等体积(离心前菌液体积)的MS液体培养基将菌体重新悬浮；将菌液转移到100mL无菌三角瓶中，加入0.1％体积(重悬菌液体积)的乙酰丁香酮(AS)，充分混匀，然后将香蕉果实薄片转移至农杆菌菌液中浸泡15min，期间摇动菌液使果实薄片于菌液充分接触；将薄片取出置于无菌滤纸上，吸干薄片表面多余的菌液，然后将其转移到含有乙酰丁香酮的MS培养基上，25℃培养3d；将共培养的香蕉果实薄片用于双荧光素酶活性检测。

(4)双荧光素酶活性检测方法

应用Dual-LUC Reporter分析***检测共培养3d香蕉果实薄片中海肾荧光素酶-萤火虫荧光素酶(REN-LUC)活性，实验三次重复。首先在冰上研磨香蕉果实薄片呈浆，等体积加入细胞裂解液，充分混匀。冰上孵育5min，充***解细胞。13000rpm离心1min，取上清。取20μL细胞裂解液，加至黑色酶标板中，设置3孔重复。配制LUC反应液和REN反应液，即LUC底物(50X)和REN底物(50X)分别用对应的缓冲液稀释至1倍工作液。并孵育至室温。加入100μL LUC反应液，震板混匀，检测LUC的活力，检测尽量在30min内完成。加入100μL REN反应液，震板混匀，检测REN的活力，检测尽量在30min内完成。计算LUC/REN比值，得到相对LUC活性。结果如图4B所示，在MaARF2和MaSBE2.3 promoter同时存在的条件下，与对照(只有MaSBE2.3 promoter存在)相比较，LUC活性增加了约3.5倍，说明MaARF2激活了MaSBE2.3基因上调表达。

本发明基于酵母单杂交实验发现转录因子MaARF2能够与香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3启动子区结合。通过构建pGreenII 0800-MaSBE2.3 promoter和pGreenII62SK-MaARF2载体，在香蕉果实薄片中共表达ARF2-MaSBE2.3 promoter，双荧光素酶活性检测发现MaARF2可以极显著激活MaSBE2.3基因上调表达(p<0.01)。这些结果显示，MaARF2能够与MaSBE2.3基因互作，且调控其上调表达，为改良香蕉或其他植物支链淀粉品质提供了候选转录因子资源。

以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只是作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。

序列表

<110> 中国热带农业科学院热带生物技术研究所

<120> 一种转录因子及其在激活香蕉MaSBE2.3表达上的应用

<160> 6

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 2118

<212> DNA

<213> Artificial

<400> 1

atgggcatcg atttgaacac gatagaggag gaggcggagg aggaggagga cgaggagtcg 60

gagcagcagc ccgcccacca cgtcgcttcc gctgtggcgg ccgaggagga agcttgtcgg 120

gccgcgtcgg tgtgcctcga attgtggcac gcgtgtgccg ggccccggat ttggctgccg 180

aagaagggga gcttggtcgt gtacttgccg caggggcatc ttgagcacct gagggacggc 240

ggcggcggca cccccagagg ggggatcggc ggctacgatg tgccgcctca tgtcttgtgc 300

cgtgtggttg acgtcaagct ccatgctgat gcggctacgg acgacgtcta tgctcagctc 360

tctcttgtcg ctgaaaacga ggaatacgaa gcaagattga agaagggtga ggttgaacaa 420

aatgcggaag aagaaaatga tgaatctata agcaagtcgc tgattcccca tatgttctgc 480

aagaccctca ctgcctctga cacgagcaca catggagggt tctctgtgcc acgccgagct 540

gctgaggact gtttccctcc cctggattat aaacagcaga ggccttcgca ggagctcatc 600

acaaaagatt tgcatggcac tgaatggagg tttcgacata tctacagagg tcaaccgcgt 660

aggcatcttc ttacaactgg atggagtgca tttgtaaata ggaagaagct catctcaggg 720

gatgcggtgc tctttcttcg gggaaatgat gggatgctca gattgggtgt caggagagca 780

gctcaattta aaaacatctg tccagtttcg gaacatcaaa gtgggaatat gaacttagcc 840

gcgtttgctg ttgttgcaaa tgctgtgtcc gacttttttg tctttgacat ctattataac 900

ccaagggtga gctcgtcaga gttcataatt ccatatcgga aatttgtgaa aagtttatct 960

aattccattt ctgtgggaat gaggtttaaa ctgctatatg aaggtgacga tgccacagac 1020

agaaggtcca caggactgat aactgggatc agtgacatgg accctgtaag atggcctggt 1080

tcaaagtgga gatgcctttt ggtaaactgg gatgatgttg taaatgctaa tcaacaaact 1140

aggttatcac catgggaaat caaaccaacc tgttcagttt taagctctgg aagcttgtcg 1200

acaacaggtt gcaagagggc caaagttact cttccctcag tcaatatgga tttccctatt 1260

ccaaatggaa atcaatgtct ggacttgagg gaatctgcaa gtttccataa ggtcttgcaa 1320

ggtcaagaat tttcgaggtt tagaattcca agtagtgttg gtgtactagc ctctcatgtt 1380

tctgaggttg aaaaatgtca gcactcagag ggctttagca aatctctcgg actccacaag 1440

gtctttcaag gtcaagaagt tttctcaaac catccaccaa tccttggagc tcattctgat 1500

gctgatgcaa ggaatggtgt gtatggcctt tttgatggtc ttcatacatt tcatgctgta 1560

agcagattgt ctacagcatc tttgggatat ggcactattg ttcaaccatc atctccatca 1620

attcaagcat catccccatc ctcggtgttg atgtttcaag aagcaagttc caagacatca 1680

atggtccagc ctgtgccatg caggaatggt caagatggtg gtgacggtgg cagctgtttt 1740

gccaacttaa ctggcatgga agccttgcat agaaaagaag caaccttgcc aatctggcct 1800

ccgattatgg gttttcattt tgccaatcag caacacaaaa tgattgaagt ccatgctccc 1860

atcttggata ataagttgga cacacaaaat gaccagaatg tcagccgaaa tggttgcaga 1920

ctttttggct tttccttgac tgagaagatt cctgtagcag attcagttgg caaacctctt 1980

cctgtctctt caacctcaac tcaggtcaag cttgatgctg ccttctcgac ttcagtggct 2040

caaacacctg ctaagcctgt cggttgcagt tgcaatggaa taagtgcagc ttacaccatg 2100

tgtactgctc cattttag 2118

<210> 2

<211> 1824

<212> DNA

<213> Artificial

<400> 2

aggttctata tacttaatta ctctcaaatt tgaatatatt accaaatggc ttgggtccac 60

gtgggtcttg agatgccata gacctgttgt gttttcgaag atttaaaaaa tgatagaaaa 120

attgaacagg taattttttt tcaaaggggt ccctctccgt caccacttgg ctaccaataa 180

catatgaggt gtttaactag ctgtaaccat tgagctcgag gaataaactt cagtgataaa 240

atttaagggt tcagaaattc atatattaaa tgcagtaaat acaacttatt tgattccagt 300

tggtgctgat gttgatgaaa aaaagattga gcttctcttg tcccaagtcc atggtaatga 360

cttgacggaa cttattgcta ctgggagaga caagattgcc tcggtgcctt gtggtggtgg 420

cggtgctgtt gcagttgctg caattgctgg aggtggtggt ggtgcttctg cagcccctgc 480

agtttctgaa ccaaagaaag aggaaaaggt agaagagaag gaagaatcag atgatgtaag 540

ttacttttta tgatttaact gcagagtttc taatgttcag tccttttggc tggaaacacc 600

ttggctatag atgcagtaat cgacttatct ctggatgata cctttgaaaa aaaagacaaa 660

cctttcctgt ccagccttat tatttgattg actgattgtg ctctaatcgc atttgtgcag 720

gacatgggct ttagcttgtt cgactgattg gtctactgta gtccagcaga agctgctgtt 780

tttggtgcag taattaggga aaaatcaatc tgcattgaag cttcagcttt gatgtttgtt 840

gtttattttc cctttttttt tccatcatga tctctaattt tgttcctcaa catattgctc 900

ggttatattt ctgcttcact caagtcgaca aacttgttag gagtttgatt gagatttaac 960

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taacggagat ttcattcatg tagttgtgcc tcgcttctct agtttctgtt gatacgcaaa 1080

gccatgtcga tagatatcag tggtcctatc tttgtttacg cagtttacgt tttagcatgc 1140

ctggtgccta gtgataatga ttgttgcaga tggagacgaa tacatcaacg tcggacgatc 1200

atatggtgac cacttgtcgg atgcagatca atataccacc ttacctcact gattggcaac 1260

taggatggag ggttcagtca cacatcgcaa cttcgatgga gggtcgtcaa ccatccacca 1320

aagtaagaat ctcaaagcac gaacggacgg ccttcaacga tttcggttca cacagattga 1380

ggtgcgattg ggcccatggg cgatcgatga acggtcgaga tgagacgaat cgaccagctt 1440

ttttgttcat gagctacgtg cggtattcga acggaccaaa aggccccacc aaaaaaaaaa 1500

gtgtttttac tcttcaattt ttatttattt aatatttgat ataatgagag attttgcata 1560

agaaaatata tagaatgtga cattaacgta ttttcgaaaa taaataaata aaatgagaaa 1620

aaagtgaacg gcctttacag tgtggggcag ctgaatctgg agaaagcaaa gcaaaaccgt 1680

tcattcctca ccccctgcct tcgccagttt cgctgacgcg gcctcgttcc ccacctgtat 1740

taaacgacac gtccgctggg gcccagttcc catctccatg cacctctccg ccccacgcgg 1800

atcacccgcc tcagctccat acga 1824

<210> 3

<211> 25

<212> DNA

<213> Artificial

<400> 3

atggggatcg atttgaacac gatag 25

<210> 4

<211> 25

<212> DNA

<213> Artificial

<400> 4

ctaaattgga gctgcacgca aagca 25

<210> 5

<211> 23

<212> DNA

<213> Artificial

<400> 5

aggttctata tacttaatta ctc 23

<210> 6

<211> 25

<212> DNA

<213> Artificial

<400> 6

tcgtatggag ctgaggcggg tgatc 25

Claims

1.转录因子MaARF2、或者转录因子MaARF2基因、或者重组载体在激活香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3表达中的应用，其中，所述转录因子MaARF2是由核苷酸序列如SEQ IDNO:1所示的基因编码的蛋白质，所述转录因子MaARF2基因核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，所述重组载体包含原始载体和转录因子MaARF2基因。

2.一种香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3启动子，其特征在于，其核苷酸序列如SEQIDNO:2所示。

3.一种重组载体，其特征在于，其包含原始载体和权利要求2所述的香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3启动子。

4.如权利要求2所述的香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3启动子、或者权利要求3所述的重组载体在激活香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3表达中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，权利要求2所述的香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3启动子与转录因子MaARF2互作，所述转录因子MaARF2是由核苷酸序列如SEQ IDNO:1所示的基因编码的蛋白质。

6.一种用于扩增香蕉果实淀粉分支酶基因MaSBE2.3启动子的引物对，其特征在于，其核苷酸序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示。