CN111118137A - 一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒 - Google Patents
一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111118137A CN111118137A CN201811293663.1A CN201811293663A CN111118137A CN 111118137 A CN111118137 A CN 111118137A CN 201811293663 A CN201811293663 A CN 201811293663A CN 111118137 A CN111118137 A CN 111118137A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- gdna
- kit
- gene
- patient
- pcr amplification
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Pathology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒,其特征在于包括:血小板无力症患者cDNA的PCR扩增、测序发现患者ITGA2B基因第508~607位(编码区的第477~506位)发生缺失,导致CDS 160~CDS192缺失。通过gDNA的检测确定患者为EXON4的第72位碱基C→G点突变和intron 4的+5位G→C点突变复合突变体,使用金属溶胶液、石英片和试剂组;本试剂盒对血小板无力症进行基因诊断时,先通过对血小板无力症相关ITGA2B和ITGA3基因mRNA检测,再对具体异常位置gDNA进一步分析的方法是可行可靠的。并且相对于直接对gDNA各个外显子做PCR扩增测序的方法,该方法操作简单、快速,无需进行前期质粒载体构建,可有效缩短实验周期和成本。
Description
技术领域
本发明涉及血小板无力症基因检测技术领域,具体为一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒。
背景技术
血小板无力症1918年由Glanzmann首先报道本病,故本病又称“Glanzmann病(Glanzmann thrombasthenia,GT)”,是一种遗传性出血病。特点为血细胞对多种生理诱聚剂反应低下或缺如,由血小板膜糖蛋白Ⅱb(GPⅡb) 和(或)Ⅲa(GPⅢa)质或量的异常引起。1990年国际血栓与止血学会标准化委员会将GT定义为由于GPⅡb或GPⅢa基因缺陷引起的血小板对多种诱聚剂(如腺苷二磷酸、凝血酶、胶原等)的先天性遗传性无聚集或反应减低。
本病是由于血小板膜糖蛋白Ⅱb(GPⅡb)和(或)Ⅲa(GPⅢa)质或量的异常引起。GPⅡb-Ⅲa复合物是钙依赖性多聚体,是纤维蛋白原受体,也能结合vWF、纤维结合蛋白和血栓敏感蛋白,在各种生理诱聚剂,如ADP、TXA2的作用下,介导血小板聚集。因此受体的异常可导致血管损伤处血小板血栓不能形成发生出血不止或淤斑。
GPⅡb-Ⅲa受体同时也能帮助血小板α颗粒摄取纤维蛋白原,因此,GT患者血小板纤维蛋白原水平显著下降。GPⅡb-Ⅲa复合物是连接膜外侧的纤维蛋白原和膜内侧的肌动蛋白丝主要附着点,参与血块回缩功能故GT患者常出现血块。
发明内容
本发明的目的在于提供一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒,以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
1 . 一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒,其特征在于包括:血小板无力症患者cDNA的PCR扩增、测序发现患者ITGA2B基因第508~607位(编码区的第477~506位)发生缺失,导致CDS 160~CDS192缺失。通过gDNA的检测确定患者为EXON4的第72位碱基C→G点突变和intron 4的+5位G→C点突变复合突变体。
方法:
对血小板无力症进行基因诊断时,先通过对血小板无力症相关ITGA2B和ITGA3基因mRNA检测,再对具体异常位置gDNA进一步分析的方法是可行可靠的。并且相对于直接对gDNA各个外显子做PCR扩增测序的方法
PCR扩增,反应体系为模板DNA 1ng/ uL、引物1uL、H2O 3 .8uL、2×Taq PCR MasrerMix 50uL;和/或,所述PCR反应的反应程序为 95℃预变性2min,95℃预变性30s,60℃退火温度30s,72℃延伸1min,循环次数30次,72℃再 延伸10min。
试剂盒:
包括试剂组成为:D-吡喃葡萄糖 0 .25-0 .5g/L,甘氨酸-盐酸缓冲液 0 .1mol/L,NADH 25mmol/L,葡萄糖 0 .1-0 .5g/L,腺苷三磷酸 2mmol/L,磷酸烯醇式丙酮酸,TOOS缓冲液 0 .1mol/L,聚乙二醇 1-1 .5g/L,喃葡萄糖 0 .05-0 .1g/L;丙氨酸脱氢酶 1000-5000U/L,2mmol/L,CTAB 5mmol/L,三氯甲烷 0 .1ml/L,丙三醇 0 .1-0 .75ml/L,聚乙二醇0 .3-0 .5g/L,葡聚糖 1-2 .34g/L,D-吡,己糖激酶 2500-4000U/L,丙酮酸激酶 3000U/L,葡聚糖 0 .7-1 .5g/L。
石英片优选方案:所述的石英片 为波数范围是700-2000cm-1无明显拉曼峰的基底石英片。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:本试剂盒对血小板无力症进行基因诊断时,先通过对血小板无力症相关ITGA2B和ITGA3基因mRNA检测,再对具体异常位置gDNA进一步分析的方法是可行可靠的。并且相对于直接对gDNA各个外显子做PCR扩增测序的方法,该方法操作简单、快速,无需进行前期质粒载体构建, 可有效缩短实验周期和成本。
具体实施方式
下面将结合对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
GPⅡb与GPⅢa在粗面内质网内合成后很快地形成复合物,复合物形成有助于防止糖蛋白被蛋白溶解酶消化。GPⅡb和GPⅢa都为血小板受体功能所必需,因此,两者之一的缺陷均可导致相同的功能障碍。
GPⅡb和GPⅢa是由不同的基因编码,它们均位于17号染色体(17q21~23)20世纪90年代以后对GT的基因缺陷的研究进展很快,已经发现的基因突变类型包括点突变、缺失和***基因突变还可以引起变异型GT血小板尽管有足量的GPⅡb-Ⅲa,但是,GPⅡb-Ⅲa四级结构异常,不具备受体活性同样不能结合纤维蛋白原。本病纯合子型患者的血小板膜GPⅡb和GPⅢa含量可降至正常者5%以下,杂合子含量也可降至正常人约60%。
本病患者磷酸甘油醛脱氢酶、丙酮酸激酶、谷胱苷肽过氧化物酶和谷胱苷肽还原酶异常,活力降低从而使血小板功能和血块回缩不良。
一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒,其特征在于包括:血小板无力症患者cDNA的PCR扩增、测序发现患者ITGA2B基因第508~607位(编码区的第477~506位)发生缺失,导致CDS 160~CDS192缺失。通过gDNA的检测确定患者为EXON4的第72位碱基C→G点突变和intron 4的+5位G→C点突变复合突变体。
方法:
对血小板无力症进行基因诊断时,先通过对血小板无力症相关ITGA2B和ITGA3基因mRNA检测,再对具体异常位置gDNA进一步分析的方法是可行可靠的。并且相对于直接对gDNA各个外显子做PCR扩增测序的方法
PCR扩增,反应体系为模板DNA 1ng/ uL、引物1uL、H2O 3 .8uL、2×Taq PCR MasrerMix 50uL;和/或,所述PCR反应的反应程序为 95℃预变性2min,95℃预变性30s,60℃退火温度30s,72℃延伸1min,循环次数30次,72℃再 延伸10min。
小儿血小板无力症:
本病属血小板聚集功能障碍性疾病,为常染色体隐性遗传。其特点是血小板的形态、数量正常,出血时间延长,血块收缩不良或不收缩,聚集功能缺陷。1.护理 在诊断明确的病儿,医务人员应尽量向家长说明病情,告诉家长如何护理孩子,教育孩子自我保护,避免外伤,减少出血。2.局部出血 不重时,多可用吸收性明胶海绵、凝血酶等压迫止血,***月经过多时可采用避孕药如炔雌醇/炔诺酮(复方炔诺酮)以控制月经量。3.1-脱氧-8-精氨酸加压素(DDAVP) 本药可提高血浆凝血因子Ⅷ活性和抗利尿作用,但对储存池的病人使用亦有效。DDAVP 0.2~0.3μg/kg皮下注射或溶于20ml生理盐水中缓慢静注,可使60%~70%的储存池病病人改善临床出血症状,出血时间缩短或恢复正常,但对BSS及GT病人常无效。4.严重出血 严重出血者需输注血小板浓缩制剂,反复输注易产生抗小板抗体而失效,因此有条件者宜做ABO及HLA配型,给予去白细胞的同型血小板制剂,不易引起同种免疫。对于已产生抗血小板抗体的病人,可使用血浆交换以减少抗体后再输同型血小板制剂,有时可静脉给予人血丙种球蛋白亦有帮助。5.骨髓移植或基因治疗 严重的病儿如能找到合适的供体可进行异基因骨髓移植、脐血干细胞移植,一旦成功即可根治。基因治疗正在研究中,目前尚无成功的报道。
本病属常染色体隐性遗传。GT在特定的人群中发病率较高,并且往往与近亲结婚有关。***人、***犹太人、法国吉卜赛人以及南部印第安人中有较多的携带者。本病是由于αⅡb(GPⅡb;CD41)和/或β3(GPⅢα;CD61)质或量的异常所致。由于血小板在生理性诱导剂作用下产生聚集时,以及血小板α颗粒摄取纤维蛋白原时,均需要GPⅡb/Ⅲa受体的参与,因此,GPⅡb和(或)GPⅢa的异常导致本病血小板黏附及聚集等试验异常。现已在分子水平发现多种分子缺陷包括发生在aⅡbβ-折叠结构域,β3 MIDAS结构域以及影响受体活化三种突变类型,涉及到点突变、缺失、倒位等多种突变形式。
治疗处理:
1.出血严重时可以输注血小板悬液,2.局部出血可用压迫止血。
但是,多次输注可引起同种免疫反应,且有GPⅡb-Ⅲa抗体形成,因此,最好输注去除白细胞的AB0和HLA配型一致的单采血小板。3.禁用抗血小板药物 对于长期慢性失血者应补充铁剂,必要时补充叶酸。保持口腔卫生,对于减少牙龈出血非常重要。4.炔诺酮(妇康片)和避孕丸可以有效地控制月经,近年来有报道用重组人因子VⅡa取得较好的止血效果。杂合型患者为供体为HLA相合的出血严重的纯合型患者进行骨髓移植,症状可以明显改善。
5.轻度出血患者 通常采用局部压迫止血即可,如牙龈出血,局部使用吸收性明胶海绵及凝血酶即能控制。全身或局部使用抗纤溶药物可作为牙龈出血和拔牙的辅助措施。对于拔牙、***环切、扁桃体摘除、分娩及其他需要外科处理的患者,应预防性输注血小板直至创面完全愈合。鼻出血有时很难控制,甚至需要采取动脉结扎或动脉栓塞方能止血。对于月经过多的女性患者可服用避孕药。对于多数严重出血的患者,输注血小板可能是最有效的措施,但反复输注有可能传染病毒性疾病或产生同种免疫,后者导致血小板输注无效。对于严重出血而血小板输注无效的患者异基因骨髓移植可能有效,迄今已有2例异基因骨髓移植治疗本病获得成功的报道,但在考虑这种措施时应权衡利弊,因为骨髓移植本身风险很大。
金属溶胶液:
金属溶胶液为金溶胶液或银溶胶液; 所述的银溶胶的制备方法如下 :常温下将2.5mL 10-2mol/L AgNO3加入到75mL蒸馏水
中,加入5mL of 10-2mol/L巯基乙酸;搅拌10min后滴入2 .5mL10-2mol/L NaI,搅拌20min后, 得到浅绿色的AgI溶胶,加入20mg NaBH4还原,继续搅拌约10min,生成黄褐色银溶胶,得到 的是形状均一的球形粒子。
试剂盒:
包括试剂组成为:D-吡喃葡萄糖 0 .25-0 .5g/L,甘氨酸-盐酸缓冲液 0 .1mol/L,NADH 25mmol/L,葡萄糖 0 .1-0 .5g/L,腺苷三磷酸 2mmol/L,磷酸烯醇式丙酮酸,TOOS缓冲液 0 .1mol/L,聚乙二醇 1-1 .5g/L,喃葡萄糖 0 .05-0 .1g/L;丙氨酸脱氢酶 1000-5000U/L,2mmol/L,CTAB 5mmol/L,三氯甲烷 0 .1ml/L,丙三醇 0 .1-0 .75ml/L,聚乙二醇0 .3-0 .5g/L,葡聚糖 1-2 .34g/L,D-吡,己糖激酶 2500-4000U/L,丙酮酸激酶 3000U/L葡聚糖 0 .7-1 .5g/L。
Claims (2)
1.一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒,其特征在于包括:血小板无力症患者cDNA的PCR扩增、测序发现患者ITGA2B基因第508~607位(编码区的第477~506位)发生缺失,导致CDS 160~CDS192缺失;
通过gDNA的检测确定患者为EXON4的第72位碱基C→G点突变和intron 4的+5位G→C点突变复合突变体,金属溶胶液,
方法:
对血小板无力症进行基因诊断时,先通过对血小板无力症相关ITGA2B和ITGA3基因mRNA检测,再对具体异常位置gDNA进一步分析的方法是可行可靠的;
并且相对于直接对gDNA各个外显子做PCR扩增测序的方法;
PCR扩增,反应体系为模板DNA 1ng/ uL、引物1uL、H2O 3 .8uL、2×Taq PCR MasrerMix 50uL;和/或,所述PCR反应的反应程序为 95℃预变性2min,95℃预变性30s,60℃退火温度30s,72℃延伸1min,循环次数30次,72℃再延伸10min;
金属溶胶液:
金属溶胶液为金溶胶液或银溶胶液;所述的银溶胶的制备方法如下:常温下将2 .5mL10-2mol/L AgNO3加入到75mL蒸馏水中,加入5mL of 10-2mol/L巯基乙酸;搅拌10min后滴入2 .5mL10-2mol/L NaI,搅拌20min后,得到浅绿色的AgI溶胶,加入20mg NaBH4还原,继续搅拌约10min,生成黄褐色银溶胶,得到的是形状均一的球形粒子;
试剂盒:
包括试剂组成为:D-吡喃葡萄糖 0 .25-0 .5g/L,甘氨酸-盐酸缓冲液 0 .1mol/L,NADH 25mmol/L,葡萄糖 0 .1-0 .5g/L,腺苷三磷酸 2mmol/L,磷酸烯醇式丙酮酸,TOOS缓冲液 0 .1mol/L,聚乙二醇 1-1 .5g/L,喃葡萄糖 0 .05-0 .1g/L;丙氨酸脱氢酶 1000-5000U/L,2mmol/L,CTAB 5mmol/L,三氯甲烷 0 .1ml/L,丙三醇 0 .1-0 .75ml/L,聚乙二醇0 .3-0 .5g/L,葡聚糖 1-2 .34g/L,D-吡,己糖激酶 2500-4000U/L,丙酮酸激酶 3000U/L
葡聚糖 0 .7-1 .5g/L。
2.根据权利要求1所述的一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒,其特征在于:所述的石英片为波数范围是700-2000cm-1无明显拉曼峰的基底石英片。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201811293663.1A CN111118137A (zh) | 2018-11-01 | 2018-11-01 | 一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201811293663.1A CN111118137A (zh) | 2018-11-01 | 2018-11-01 | 一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN111118137A true CN111118137A (zh) | 2020-05-08 |
Family
ID=70494248
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201811293663.1A Pending CN111118137A (zh) | 2018-11-01 | 2018-11-01 | 一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN111118137A (zh) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN115851743A (zh) * | 2022-09-20 | 2023-03-28 | 湖南家辉生物技术有限公司 | 导致血小板无力症的itga2b基因复合突变体、复合突变体蛋白和应用 |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20070099209A1 (en) * | 2005-06-13 | 2007-05-03 | The Regents Of The University Of Michigan | Compositions and methods for treating and diagnosing cancer |
CN105603125A (zh) * | 2016-03-09 | 2016-05-25 | 华南农业大学 | 一种快速检测禽病病毒的检测试剂盒及其检测方法 |
CN105671127A (zh) * | 2016-03-07 | 2016-06-15 | 王爰 | 一种稳定的酶法血清镁离子检测试剂盒 |
-
2018
- 2018-11-01 CN CN201811293663.1A patent/CN111118137A/zh active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20070099209A1 (en) * | 2005-06-13 | 2007-05-03 | The Regents Of The University Of Michigan | Compositions and methods for treating and diagnosing cancer |
CN105671127A (zh) * | 2016-03-07 | 2016-06-15 | 王爰 | 一种稳定的酶法血清镁离子检测试剂盒 |
CN105603125A (zh) * | 2016-03-09 | 2016-05-25 | 华南农业大学 | 一种快速检测禽病病毒的检测试剂盒及其检测方法 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
刘金蕾: "血小板无力症基因诊断方法探究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库医药卫生科技辑》, no. 04 * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN115851743A (zh) * | 2022-09-20 | 2023-03-28 | 湖南家辉生物技术有限公司 | 导致血小板无力症的itga2b基因复合突变体、复合突变体蛋白和应用 |
CN115851743B (zh) * | 2022-09-20 | 2024-02-20 | 湖南家辉生物技术有限公司 | 导致血小板无力症的itga2b基因复合突变体、复合突变体蛋白和应用 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Kreuz et al. | Efficacy and tolerability of a pasteurised human fibrinogen concentrate in patients with congenital fibrinogen deficiency | |
Muszbek et al. | Factor XIII: a coagulation factor with multiple plasmatic and cellular functions | |
Verstraete et al. | Excessive consumption of blood coagulation components as cause of hemorrhagic diathesis | |
de Vries et al. | Precipitating antifibrinogen antibody appearing after fibrinogen infusions in a patient with congenital afibrinogenemia | |
Macintyre et al. | The haemostatic effects of hydroxyethyl starch (HES) used as a volume expander | |
US20230000911A1 (en) | Human blood-derived products having decreased fibrinolytic activity and uses thereof in hemostatic disorders | |
Castaman et al. | Bleeding tendency and efficacy of anti-haemorrhagic treatments in patients with type 1 von Willebrand disease and increased von Willebrand factor clearance | |
Digilio et al. | Comparison of occurrence of genetic syndromes in ventricular septal defect with pulmonic stenosis (classic tetralogy of Fallot) versus ventricular septal defect with pulmonic atresia | |
Deprest et al. | Amniopatch for iatrogenic rupture of the fetal membranes | |
JPH0780783B2 (ja) | 出血障害の治療のための第▲VII▼a因子を含有する治療組成物 | |
Franchi et al. | Mutations in the thrombomodulin and endothelial protein C receptor genes in women with late fetal loss | |
McGowan et al. | Deep vein thrombosis followed by internal jugular vein thrombosis as a complication of in vitro fertilization in a woman heterozygous for the prothrombin 3′ UTR and factor V Leiden mutations | |
Fuller | Fibrinogen: A multifunctional acute phase protein | |
US9694054B2 (en) | Fibrinogen preparations enriched in fibrinogen with an extended alpha chain | |
CN111118137A (zh) | 一种用于血小板无力症的基因检测方法及试剂盒 | |
Sundqvist et al. | Pregnancy and parturition in a patient with severe Glanzmann's thrombasthenia | |
Eshghi et al. | Factor XIII deficiency: a review of literature | |
Mikhail et al. | An update on type 2B von Willebrand disease | |
de Paepe | The Ehlers-Danlos syndrome: a heritable collagen disorder as cause of bleeding | |
CN111770767B (zh) | 用于从生物流体中去除纤溶蛋白的体外设备和基质、其方法和用途 | |
CN105431165A (zh) | 用于治疗心肺手术后的术后并发症的组合物和方法 | |
Rush et al. | The treatment of patients with factor-V deficiency | |
Yamada et al. | Management of pregnancy with congenital antithrombin III deficiency: two case reports and a review of the literature | |
Maclean et al. | Hemophilia a and b | |
Stanchev et al. | Prothrombin deficiency caused by compound heterozygosity for two novel mutations in the prothrombin gene associated with a bleeding tendency |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination |