CN111007242A - 基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法、装置及应用 - Google Patents

基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法、装置及应用 Download PDF

Info

Publication number
CN111007242A
CN111007242A CN201911327378.1A CN201911327378A CN111007242A CN 111007242 A CN111007242 A CN 111007242A CN 201911327378 A CN201911327378 A CN 201911327378A CN 111007242 A CN111007242 A CN 111007242A
Authority
CN
China
Prior art keywords
porous membrane
antibody
membrane layer
mixed solution
detected
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201911327378.1A
Other languages
English (en)
Inventor
龚培超
蒋凯
张涛
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Suzhou Helmen Precision Instrument Co ltd
Original Assignee
Suzhou Helmen Precision Instrument Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Suzhou Helmen Precision Instrument Co ltd filed Critical Suzhou Helmen Precision Instrument Co ltd
Priority to CN201911327378.1A priority Critical patent/CN111007242A/zh
Publication of CN111007242A publication Critical patent/CN111007242A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
    • G01N33/537—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with separation of immune complex from unbound antigen or antibody
    • G01N33/539—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with separation of immune complex from unbound antigen or antibody involving precipitating reagent, e.g. ammonium sulfate
    • G01N33/541—Double or second antibody, i.e. precipitating antibody

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)

Abstract

本发明涉及基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法、装置及应用，配置过量未标记特异性抗体Ab和荧光标记的特异性抗体Ab+，与含待测抗原Ag的检测样本混合获得混合溶液A，倒入第一分离腔、以第一多孔膜层分离得到混合溶液B，导入第二分离腔、以第二多孔膜层分离后检测膜上荧光强度，获得检测样本中待测抗原的浓度；应用于针对大分子量蛋白的双抗体夹心荧光免疫法检测。本发明利用高分子多孔膜的不同分离尺寸，分离不同颗粒，获取被标记待测物抗原，检测荧光强度获得待测物的浓度信息；通过不同孔径控制反应物的分离，原理简单，配合可分离的多层试剂管，操作简单，结果准确度高，不需大型设备且可以自动化或人工同时完成多组检测。

Description

基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法、装置及应用
技术领域
本发明涉及利用特殊方法来研究或分析材料的技术领域，特别涉及一种基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法、装置及应用。
背景技术
以荧光物质标记抗体、进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术（fluorescentantibody technique），用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称为荧光抗体法；用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法，这两种方法总称为免疫荧光技术。
现有的荧光免疫检测方法包括免疫层析试纸条技术和免疫磁珠检验技术。
免疫层析（lateral flow immunoassay, LFIA ）快速检测试纸条多以胶体金或者荧光色素作为标记物，是利用混合物中各组分的物理性质之差，如吸附力、分子形状和大小、分子极性、分子亲和力、分配系数等而建立来的一种分离技术；层析***是由固相和流动相组成，当待分离混合物随流动相通过固定相时，由于混合物各组分的理化性质差异，与固定相相互作用弱的组分随流动相移动时受到的阻滞作用小，向前移动速度快，与固定相相互作用强的组分向前移动速度慢，从而实现混合物中各组分的分离。
免疫层析技术是建立在层析技术和抗体-抗原特异性免疫反应基础上的一种免疫检测技术，以固定有检测线（T）和控制线（C）的条状纤维层材料作为固定相，测试液为流动相，通过毛细作用使待测物在层析条上移动；待测物在T线处发生特异性免疫反应，游离物在C线处发生免疫反应。
免疫层析检测方法存在着检测复杂的问题，包括需要孵育试样（条状纤维层材料）、配置激发荧光的大型或小型层析设备、单次可检测试样有限等，最重要的是在检测过程中，试样存在受到污染的可能性，检测结果不精确。
免疫磁珠检验技术是应用在抗体（蛋白）包被的免疫磁珠纯化技术，无需复杂的层析设备，以磁性吸附步骤就可以方便的从单抗表达产物中分离单抗，有效解决传统层析技术的不足之处；在这种检验技术中，磁珠作为核心金属粒，其外层顺次包裹高分子材料和功能配基，磁珠和待测物结合后，在磁场作用下进行分离，可用于分析和随后的检测。
免疫磁珠检验技术的优点在于高质量、高通量，自动化，但是也存在着磁珠需要修饰才可以和被检物进行特异性结合的不足。
发明内容
本发明解决了现有技术中存在的问题，提供了一种优化的基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法、装置及应用，反应样品通过多层多孔膜进行逐层分离，最后提取到被标记待测物，通过对被标记待测物进行光照射激发荧光过程进行光学检测，分析荧光信号并进行信号处理分析，从而获取待测抗原（抗体）浓度信息。
本发明所采用的技术方案是，一种基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法，所述方法包括以下步骤：
步骤1：获取检测样本，所述检测样本中含有待测抗原Ag；
步骤2：基于待测抗原，配置过量未标记特异性抗体Ab和进行荧光标记的特异性抗体Ab+；将检测样本和抗体Ab、抗体Ab+混合并充分反应，获得混合溶液A；
步骤3：将混合溶液A以第一多孔膜层分离，第一多孔膜层分离直径大于预设直径的大细胞和/或大蛋白，得到混合溶液B；
步骤4：将混合溶液B以第二多孔膜层分离，检测荧光强度，获得检测样本中待测抗原的浓度。
优选地，所述混合溶液B包括检测样本和抗体Ab、抗体Ab+混合并充分反应后得到的双抗夹心蛋白Ab+-Ag-Ab、过量的抗体Ab、过量的抗体Ab+。
优选地，所述抗体Ab的直径大于抗体Ab+的直径。
优选地，所述抗体Ab的直径大于等于200nm。
优选地，步骤4中，第二多孔膜层的膜孔直径小于抗体Ab的直径且大于抗体Ab+的直径。
优选地，所述步骤4包括以下步骤：
步骤4.1：将混合溶液B以第二多孔膜层分离，第二多孔膜层将混合溶液B分离为膜上的双抗夹心蛋白Ab+-Ag-Ab和过量的抗体Ab、膜下的过量的抗体Ab+；
步骤4.2：检测第二多孔膜层上的混合物的荧光强度，获得双抗夹心蛋白Ab+-Ag-Ab的浓度；
步骤4.3：基于步骤4.2的结果，获得检测样本中待测抗原的浓度。
优选地，所述第一多孔膜层的膜孔直径小于5μm。
一种采用所述的基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法的检测装置，所述检测装置包括自上而下可拆卸设置的第一分离腔、第二分离腔和第三分离腔；
所述第一分离腔包括第一腔壁及设于第一腔壁底部的第一多孔膜层，所述第一腔壁顶部可拆卸设有盖体；
所述第二分离腔包括第二腔壁及设于第二腔壁底部的第二多孔膜层，所述第二腔壁的顶部通过第一多孔膜层与第一分离腔空间连通；
所述第三分离腔的顶部通过第二多孔膜层与第二分离腔空间连通。
一种采用所述的基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法的应用，所述基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法应用于针对大分子量蛋白的双抗体夹心荧光免疫法检测。
优选地，所述大分子量蛋白包括至少两个结合位点。
本发明提供了一种优化的基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法、装置及应用，获取含有待测抗原Ag的检测样本后，配置过量未标记特异性抗体Ab和进行荧光标记的特异性抗体Ab+，共同混合并充分反应获得混合溶液A，将混合溶液A倒入第一分离腔、以第一多孔膜层分离得到混合溶液B，将混合溶液B导入第二分离腔、以第二多孔膜层分离后，检测第二多孔膜层上的荧光强度，获得检测样本中待测抗原的浓度；主要应用于针对大分子量蛋白的双抗体夹心荧光免疫法检测。
本发明利用高分子多孔膜的不同分离尺寸，对免疫层析过程不同颗粒进行分离，从而获取被标记的待测物抗原，通过检测荧光强度，可以获得待测物的浓度信息；通过不同孔径控制反应物的分离，原理简单，配合可分离的多层试剂管，操作简单，结果准确度高，不需大型设备且可以同时完成多组检测，自动化或人工操作均可。
附图说明
图1为本发明的方法流程图；
图2为本发明的装置***图结构示意图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的详细描述，但本发明的保护范围并不限于此。
本发明涉及一种基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法。
本发明中，高分子多孔膜，又称为高分子分离膜，是一种能分离微小粒子、分子及离子等微物质的分离材料；从分离物质的尺寸上看，它可分离尺寸小于1nm的微物质；从分离物质的分子量上看，它可分离分子量小于100的小分子。在微物质分离材料中，除少量为无机高分子和金属材料外，主要为高分子材料，属于功能性高分子聚合物；
进一步来说，高分子分离膜属于微观分离，可分离分子级大小的物质如无机离子、分子量小于100的分子、细菌及病毒等，按照功能可分为选择性透过膜、渗透膜、反渗透膜、超滤膜、微滤膜和离子交换膜等，按照内部结构不同可分为多孔膜和致密膜两种，其中，致密膜的内部致密无孔隙，常用的离子交换膜、渗透膜、反渗透膜及气体分离膜都属于致密膜，而多孔膜的内部则含有很多微小孔隙，微孔过滤膜及超滤膜都属于此类膜；
其中，微孔过滤膜是一种内部含有许多微孔且孔径分布比较均匀的高分子膜，其孔径一般在0.03~65um之间，可按孔径大小分离质子或粒子。
本发明中，方法、装置及应用主要涉及夹心法荧光免疫层析技术，包括双抗原夹心法和双抗体夹心法，其中，双抗夹心法是待测物和两个抗体结合，形成荧光标记“抗体A-抗原-抗体B”形式的夹心结构；更适用于较大分子量的蛋白检测，要求两株抗体针对一个抗原的不同位点才可以实现。
所述方法包括以下步骤。
步骤1：获取检测样本，所述检测样本中含有待测抗原Ag。
步骤2：基于待测抗原，配置过量未标记特异性抗体Ab和进行荧光标记的特异性抗体Ab+；将检测样本和抗体Ab、抗体Ab+混合并充分反应，获得混合溶液A。
所述抗体Ab的直径大于抗体Ab+的直径。
所述抗体Ab的直径大于等于200nm。
本发明中，修饰荧光标记的抗体Ab+为较小尺寸，约在100nm以下，抗体Ab为较大尺寸，大约200nm以上，至1μm均可。
本发明中，对于过量的定义，可以由本领域技术人员根据检测样本的实际情况进行判断处理，一般为额定用量的1.5-3倍。
步骤3：将混合溶液A以第一多孔膜层1分离，第一多孔膜层1分离直径大于预设直径的大细胞和/或大蛋白，得到混合溶液B。
所述混合溶液B包括检测样本和抗体Ab、抗体Ab+混合并充分反应后得到的双抗夹心蛋白Ab+-Ag-Ab、过量的抗体Ab、过量的抗体Ab+。
所述第一多孔膜层1的膜孔直径小于5μm。
本发明中，第一多孔膜层1主要用于粗过滤，过滤μm级别的体液、或血液中的红细胞、白细胞等大型细胞、杂质，一般大于1um以上。
本发明中，抗体Ab、抗体Ab+一般设置为过量，进而保证抗原反应的完整。
步骤4：将混合溶液B以第二多孔膜层2分离，检测荧光强度，获得检测样本中待测抗原的浓度。
步骤4中，第二多孔膜层2的膜孔直径小于抗体Ab的直径且大于抗体Ab+的直径。
所述步骤4包括以下步骤：
步骤4.1：将混合溶液B以第二多孔膜层2分离，第二多孔膜层2将混合溶液B分离为膜上的双抗夹心蛋白Ab+-Ag-Ab和过量的抗体Ab、膜下的过量的抗体Ab+；
步骤4.2：检测第二多孔膜层2上的混合物的荧光强度，获得双抗夹心蛋白Ab+-Ag-Ab的浓度；
步骤4.3：基于步骤4.2的结果，获得检测样本中待测抗原的浓度。
本发明中，第二多孔膜层2主要用于分离提取含荧光标记的待测物，其精度需要进行预判。
本发明中，由于抗体Ab的直径较大，故第二多孔膜层2上存在带有荧光标记的双抗夹心蛋白Ab+-Ag-Ab和过量的抗体Ab，即在膜上直接进行反应拦截，进而减少对第二多孔膜层2孔径大小精度的要求。
本发明还涉及一种采用所述的基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法的检测装置，所述检测装置包括自上而下可拆卸设置的第一分离腔3、第二分离腔4和第三分离腔5；
所述第一分离腔3包括第一腔壁6及设于第一腔壁6底部的第一多孔膜层1，所述第一腔壁6顶部可拆卸设有盖体7；
所述第二分离腔4包括第二腔壁8及设于第二腔壁8底部的第二多孔膜层2，所述第二腔壁8的顶部通过第一多孔膜层1与第一分离腔3空间连通；
所述第三分离腔5的顶部通过第二多孔膜层2与第二分离腔4空间连通。
本发明中，将第一分离腔3、第二分离腔4和第三分离腔5自上而下组合在一起，相邻的腔体间以多孔膜层进行分隔，其中，第一多孔膜层1的膜孔直径小于5μm，第二多孔膜层2的膜孔直径小于抗体Ab的直径且大于抗体Ab+的直径即可。
本发明中，第一分离腔3、第二分离腔4和第三分离腔5可以拆卸的组装在一起，可以通过边缘处进行螺纹连接或凹凸扣进行扣合，此为本领域技术人员容易理解的内容，本领域技术人员可以依据需求自行设置。
本发明中，在任一分离腔中处理完毕后，即可以卸除不需要的分离腔，保留需要进行检测荧光强度的分离腔或多孔膜层即可，以本发明为例，为检测第二多孔膜层2的膜上荧光强度。
本发明还涉及一种采用所述的基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法的应用，所述基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法应用于针对大分子量蛋白的双抗体夹心荧光免疫法检测。
所述大分子量蛋白包括至少两个结合位点。
本发明获取含有待测抗原Ag的检测样本后，配置过量未标记特异性抗体Ab和进行荧光标记的特异性抗体Ab+，共同混合并充分反应获得混合溶液A，将混合溶液A倒入第一分离腔3、以第一多孔膜层1分离得到混合溶液B，将混合溶液B导入第二分离腔4、以第二多孔膜层2分离后，检测第二多孔膜层2上的荧光强度，获得检测样本中待测抗原的浓度；主要应用于针对大分子量蛋白的双抗体夹心荧光免疫法检测。
本发明利用高分子多孔膜的不同分离尺寸，对免疫层析过程不同颗粒进行分离，从而获取被标记的待测物抗原，通过检测荧光强度，可以获得待测物的浓度信息；通过不同孔径控制反应物的分离，原理简单，配合可分离的多层试剂管，操作简单，结果准确度高，不需大型设备且可以同时完成多组检测，自动化或人工操作均可。

Claims (10)

1.一种基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：
步骤1：获取检测样本，所述检测样本中含有待测抗原Ag；
步骤2：基于待测抗原，配置过量未标记特异性抗体Ab和进行荧光标记的特异性抗体Ab+；将检测样本和抗体Ab、抗体Ab+混合并充分反应，获得混合溶液A；
步骤3：将混合溶液A以第一多孔膜层分离，第一多孔膜层分离直径大于预设直径的大细胞和/或大蛋白，得到混合溶液B；
步骤4：将混合溶液B以第二多孔膜层分离，检测荧光强度，获得检测样本中待测抗原的浓度。
2.根据权利要求1所述的一种基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法，其特征在于：所述混合溶液B包括检测样本和抗体Ab、抗体Ab+混合并充分反应后得到的双抗夹心蛋白Ab+-Ag-Ab、过量的抗体Ab、过量的抗体Ab+。
3.根据权利要求1所述的一种基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法，其特征在于：所述抗体Ab的直径大于抗体Ab+的直径。
4.根据权利要求3所述的一种基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法，其特征在于：所述抗体Ab的直径大于等于200nm。
5.根据权利要求3所述的一种基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法，其特征在于：步骤4中，第二多孔膜层的膜孔直径小于抗体Ab的直径且大于抗体Ab+的直径。
6.根据权利要求5所述的一种基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法，其特征在于：所述步骤4包括以下步骤：
步骤4.1：将混合溶液B以第二多孔膜层分离，第二多孔膜层将混合溶液B分离为膜上的双抗夹心蛋白Ab+-Ag-Ab和过量的抗体Ab、膜下的过量的抗体Ab+；
步骤4.2：检测第二多孔膜层上的混合物的荧光强度，获得双抗夹心蛋白Ab+-Ag-Ab的浓度；
步骤4.3：基于步骤4.2的结果，获得检测样本中待测抗原的浓度。
7.根据权利要求1所述的一种基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法，其特征在于：所述第一多孔膜层的膜孔直径小于5μm。
8.一种采用权利要求1~7之一所述的基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法的检测装置，其特征在于：所述检测装置包括自上而下可拆卸设置的第一分离腔、第二分离腔和第三分离腔；
所述第一分离腔包括第一腔壁及设于第一腔壁底部的第一多孔膜层，所述第一腔壁顶部可拆卸设有盖体；
所述第二分离腔包括第二腔壁及设于第二腔壁底部的第二多孔膜层，所述第二腔壁的顶部通过第一多孔膜层与第一分离腔空间连通；
所述第三分离腔的顶部通过第二多孔膜层与第二分离腔空间连通。
9.一种采用权利要求1~7之一所述的基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法的应用，其特征在于：所述基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法应用于针对大分子量蛋白的双抗体夹心荧光免疫法检测。
10.根据权利要求9所述的基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法的应用，其特征在于：所述大分子量蛋白包括至少两个结合位点。
CN201911327378.1A 2019-12-20 2019-12-20 基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法、装置及应用 Pending CN111007242A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911327378.1A CN111007242A (zh) 2019-12-20 2019-12-20 基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法、装置及应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911327378.1A CN111007242A (zh) 2019-12-20 2019-12-20 基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法、装置及应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111007242A true CN111007242A (zh) 2020-04-14

Family

ID=70117336

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911327378.1A Pending CN111007242A (zh) 2019-12-20 2019-12-20 基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法、装置及应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111007242A (zh)

Citations (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS62294965A (ja) * 1986-06-16 1987-12-22 Toshiba Corp 網状赤血球の分析方法
WO1989003044A1 (en) * 1987-09-28 1989-04-06 New Horizons Diagnostics Corporation Colloidal gold particle concentration immunoassay
US4948726A (en) * 1986-06-02 1990-08-14 Longoria Claude C Enzyme immunoassay based on membrane separation of antigen-antibody complexes
US4960692A (en) * 1986-03-18 1990-10-02 Fisher Scientific Company Assay employing binding pair members on particles and on a filter or membrane
EP0496345A1 (en) * 1991-01-22 1992-07-29 NAGASE & COMPANY, LTD. Method for detecting and quantifying cariogenic bacteria
JPH05322897A (ja) * 1992-05-21 1993-12-07 Mitsubishi Yuka B C L:Kk フィルターを用いる細菌の酵素免疫測定法
JPH0772155A (ja) * 1992-11-20 1995-03-17 Mitsubishi Chem Corp 抗原・抗体反応の測定方法
KR20020091628A (ko) * 2001-05-31 2002-12-06 국방과학연구소 다중필터를 이용한 경쟁여과면역분석법 및 이에 이용되는면역분석용 키트
CN102411050A (zh) * 2011-07-27 2012-04-11 中国检验检疫科学研究院 多种小分子化合物的同步量子点荧光免疫检测法及试剂盒
CN103308683A (zh) * 2012-03-14 2013-09-18 上海新波生物技术有限公司 糖类抗原19-9时间分辨免疫荧光分析法及试剂盒
CN103980346A (zh) * 2009-10-01 2014-08-13 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 多步骤的最终过滤
CN104833626A (zh) * 2014-05-16 2015-08-12 麦君宇 用于生物分子分析的方法和装置
CN105158460A (zh) * 2015-06-10 2015-12-16 北京化工大学 一种基于聚电解质多层膜基片电泳流动型elisa方法
CN209590052U (zh) * 2018-10-19 2019-11-05 上海快灵生物科技有限公司 微孔膜截留集聚生化检测装置

Patent Citations (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4960692A (en) * 1986-03-18 1990-10-02 Fisher Scientific Company Assay employing binding pair members on particles and on a filter or membrane
US4948726A (en) * 1986-06-02 1990-08-14 Longoria Claude C Enzyme immunoassay based on membrane separation of antigen-antibody complexes
JPS62294965A (ja) * 1986-06-16 1987-12-22 Toshiba Corp 網状赤血球の分析方法
WO1989003044A1 (en) * 1987-09-28 1989-04-06 New Horizons Diagnostics Corporation Colloidal gold particle concentration immunoassay
EP0496345A1 (en) * 1991-01-22 1992-07-29 NAGASE & COMPANY, LTD. Method for detecting and quantifying cariogenic bacteria
JPH05322897A (ja) * 1992-05-21 1993-12-07 Mitsubishi Yuka B C L:Kk フィルターを用いる細菌の酵素免疫測定法
JPH0772155A (ja) * 1992-11-20 1995-03-17 Mitsubishi Chem Corp 抗原・抗体反応の測定方法
KR20020091628A (ko) * 2001-05-31 2002-12-06 국방과학연구소 다중필터를 이용한 경쟁여과면역분석법 및 이에 이용되는면역분석용 키트
CN103980346A (zh) * 2009-10-01 2014-08-13 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 多步骤的最终过滤
CN102411050A (zh) * 2011-07-27 2012-04-11 中国检验检疫科学研究院 多种小分子化合物的同步量子点荧光免疫检测法及试剂盒
CN103308683A (zh) * 2012-03-14 2013-09-18 上海新波生物技术有限公司 糖类抗原19-9时间分辨免疫荧光分析法及试剂盒
CN104833626A (zh) * 2014-05-16 2015-08-12 麦君宇 用于生物分子分析的方法和装置
CN105158460A (zh) * 2015-06-10 2015-12-16 北京化工大学 一种基于聚电解质多层膜基片电泳流动型elisa方法
CN209590052U (zh) * 2018-10-19 2019-11-05 上海快灵生物科技有限公司 微孔膜截留集聚生化检测装置

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4028056A (en) Substance separation technique
JP3119802B2 (ja) 固相免疫分析のための使い捨ての親和性クロマトグラフィー反応容器
US20100300882A1 (en) Devices and methods for in-line sample preparation of materials
JP2008200037A (ja) 高スループットの細胞ベースアッセイ、その使用方法及びキット
EP3290920B1 (en) Method for collecting microbial antigen
JP2015058394A (ja) 成分分離方法、成分分析方法及び成分分離装置
CN111257464A (zh) 定量测定水环境中微塑料的方法
US11931739B2 (en) Devices, methods, and kits for isolation and detection of analytes using microslit filters
US20210215584A1 (en) Devices, methods, and kits for sample analysis using microslit filters
CN205193076U (zh) 一种生物素-亲和素***快速检测卡
US20230408501A1 (en) Detection of target analytes at picomolar concentrations
CN111474356A (zh) 一种双免疫磁珠分选试剂及其制备方法和在体液外泌体富集中的应用
EP0972195B1 (en) Detection of low level analytes in samples
CN104807688A (zh) 一种萃取富集大体积环境水样中微量多环芳烃的方法
CN111007242A (zh) 基于多层高分子多孔膜的荧光免疫检测方法、装置及应用
JP2007003410A (ja) ヘモグロビンＡ１ｃの測定方法及びヘモグロビンＡ１ｃ測定用キット
CN111007241A (zh) 基于双层多孔膜的荧光竞争法免疫检测方法、装置及应用
CN110354920B (zh) 一种纸基微流控芯片及基于其的磷酸化多肽的富集检测方法
US8932864B2 (en) Method of identifying glycated protein in sample and device for the glycated protein
JP2007147539A (ja) 免疫分析法、タンパク質分析装置及び免疫分析用マイクロフローセル
CN115960821A (zh) 一种适用于工业化水平的外泌体纯化方法和质量控制方法
CN116773500B (zh) 一种细胞外囊泡的分离和鉴定方法
JP2011059131A (ja) 免疫分析法及び細胞培養によるタンパク質生産プラントのタンパク質分析装置
FI84106B (fi) Foerfarande foer bestaemning av totaldigoxinhalterna.
Zhu et al. New method for measuring the pore sizes and pore size distributions of filter membranes—the fluorescence probe method

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination