CN1109677C - 氨基苯磺酸衍生物的单水合物及其制备方法 - Google Patents

Abstract

下述式(I)表示的氨基苯磺酸衍生物的单水合物，例如2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸的单水合物，它基本上没有由于吸收湿气造成的重量改变，在制备治疗心脏病的含有上述单水合物的药物组合物过程中能够被准确地称重。

Description

氨基苯磺酸衍生物的单水合物及其制备方法

本发明涉及氨基苯磺酸衍生物的单水合物，含有所述水合物作为活性成分的药物组合物，以及制备氨基苯磺酸衍生物单水合物的方法。

氨基苯磺酸衍生物用以下通式(I)表示：其中R¹表示氢原子，C₁-C₆烷基，C₃-C₇环烷基，卤代C₁-C₄烷基，卤原子或C₆-C₁₂芳基；R²表示氢原子，C₁-C₆烷基或C₇-C₁₂芳烷基，该芳烷基可以有一个或多个选自氰基，硝基，C₁-C₆烷氧基，卤原子，C₁-C₆烷基及氨基的取代基；n表示1-4的整数。该化合物具有抑制细胞内过多积累Ca⁺⁺的活性(日本未审查公开专利(KOKAI)No(平)3-7263/1991)。还发现这些化合物可用于预防和治疗心肌缺血症如心肌梗塞或心绞痛，心力衰竭，高血压，心律失常等(日本未审查公开专利(KOKAI)No(平)3-7263/1991和(平)4-139127/1992)。

在上述化合物中，2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸(日本未审查公开专利(KOKAI)No(平)3-7263/1991实施例1中和日本未审查公开专利(KOKAI)No(平)4-139127/1992制备例1中作为No12号化合物公开的物质)能有效地抑制钙离子流入心肌细胞，并且是很安全的，因此该化合物极有希望用作预防和治疗心脏病药物的活性成份。

制备上述化合物的方法公开于日本专利公报(KOKOKU)No(平)6-86438/1994中，按照该方法，上述式(I)化合物是以无水晶体形式得到的。但是本发明发明人的研究发现，这些无水晶体是吸湿性的，当被放置时由于逐渐吸收湿气增加重量，最后能形成单水合物。当本发明人为了提供2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸作为治疗和预防心脏病的药物而特别着力研究制备药物制剂时，他们要面临的问题是：因为在制备过程中上述化合物逐渐吸收潮气并改变重量，因此不能准确地称量该物质，因为在每批配方中活性成分的含量不一样，因此不能稳定地制备出含量一致的制剂。为了提供含上述氨基苯磺酸作为活性成分的药物，从制备和分配稳定的并且保证有恒定质量的药物观点出发，需要使用上述化合物的单水合物代替其无水结晶。

日本未审查公开专利(KOKAI)No(平)3-7263/1991和(平)4-139127/1992公开了上述氨基苯磺酸衍生物的酸加成盐和碱加成盐。但是这些公开没有教导也没有建议这些化合物有形成水合物的性能，而且虽然上述公开特别描述了2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸的游离形式(无水结晶)，但它们没有教导也没有建议该化合物是否能够形成单水合物。

一般而言，从无水晶体制备其水合物使用下述方法：例如(1)将无水结晶放于蒸气-增湿器中以便适当地潮湿；或者(2)用湿蒸气有效地喷淋无水结晶，以便适当地加湿。但是当制备大量水合物时，上述方法(1)需要长时间的加湿，这将很难得到恒定含量的水合物，这是因为在蒸气增湿器或容器中形成的湿气是部分不均匀加湿的。方法(2)也很难制备出恒定含量的水合物，这是因为当无水晶体不以充分分散时也会造成部分不均匀加湿。另外，上述方法(1)及(2)很难控制加湿的条件，因此很容易使所吸收的湿气的量超过相当于无水晶体所需要的数量。此时出现的问题是必须全部重新制备无水晶体。本发明人试图基本按照方法(1)制备单水合物，如以下制备例所述，他们确信该方法有许多问题，例如制备单水合物需要很长的时间，湿气要在蒸气增湿气或容器中形成并且必须经常擦去湿气。

本发明发明人研究了造成上述问题的原因，结果他们发现，当将2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸的无水结晶和空气中的潮气或和药物制造过程中使用的水接触时，该化合物能逐渐地吸收一分子水作为结晶水转变成其单水合物。本发明人还发现，单水合物一旦形成就是稳定的，它不再由于吸湿而产生重量变化，因此当用于加工制剂时能够准确地称量该单水合物，因而能够提供含恒定含量的活性成分的药物组合物。根据上述发现完成了本发明。另外本发明人对于制备氨基苯磺酸衍生物的单水合物的常规方法进行了各种研究，其结果成功地完成了本发明。

本发明提供下述通式(I)表示的氨基苯磺酸衍生物的单水合物：

其中R¹表示氢原子，C₁-C₆烷基，C₃-C₇环烷基，卤代C₁-C₄烷基，卤原子或C₆-C₁₂芳基；R²表示氢原子，C₁-C₆烷基或C₇-C₁₂芳烷基，该芳烷基可以有一个或多个选自氰基，硝基，C₁-C₆烷氧基，卤原子，C₁-C₆烷基和氨基的取代基；n表示1-4的整数。(在说明书中术语“单水合物”是指单水合的晶体)。按照本发明的优选实施方案，氨基苯磺酸衍生物的单水合物为其中R¹是氢原子或C₁-C₆烷基，R²是氢原子以及n是2，2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸单水合物是本发明特别优选的

实施方案。

本发明的另一方面提供了制备上述通式(I)表示的氨基苯磺酸衍生物的单水合物的制备方法，该方法的步骤包括将上述氨基苯磺酸衍生物的无水结晶悬浮于水中或含水的有机溶剂中，或者将上述无水晶体溶解于水中或含水的有机溶剂中，然后将所得溶液进行结晶化处理，再将所得晶体干燥(在本说明书中术语“无水晶体”是指基本不含结晶水的晶体)。上述方法的优选实施方案提供了制备其中R¹是氢原子或C₁-C₆烷基，R²是氢原子以及n是2的氨基苯磺酸衍生物单水合物的方法；也提供了制备其中R¹是甲基，R²是氢原子以及n是2的氨基苯磺酸衍生物的单水合物的方法。

本发明另一方面提供2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺单水合物，它是通过下述步骤制备的：即将2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸的无水晶体悬浮于水中或含水的有机溶剂中，或者将上述无水晶体溶解于水中或含水有机溶剂中，将所得溶液进行结晶化处理，然后干燥得到的结晶；本发明还提供含有作为活性成分的上述通式(I)表示的氨基苯磺酸衍生物的单水合物的药物组合物；以及其中所述的活性成分是2-(1-哌嗪基)-5-甲基-苯磺酸的上述定义的药物组合物。

图1是本发明单水合物的热分析结果，在此图中，TG是热重量分析结果，DTA是差热分析结果。

图2是于日本未审查公开专利(KOKAI)No.(平)3-7263/1991实施例1中公开的无水晶体的热分析结果，在此图中，TG是热重量分析结果，DTA是差热分析结果。

图3是本发明单水合物的粉末X-射线衍射图，在此图中横座标是晶格距离(d：埃)，纵座标是强度(I)。

图4是日本未审查专利公开(KOKAI)No.(平)3-7263/1991实施例1中公开的无水晶体的粉末X-射线衍射图，在此图中横座标是晶格距离(d，埃)，纵座标是强度(I)。

图5是当将本发明的标记的单水合物对雄性鼠单独口服给药时，给药剂量和血浆中放射性浓度变化过程中的AUC的关系。

图6是当将本发明的标记的单水合物对雄性鼠单独口服给药时，给药剂量和血浆中放射性浓度变化过程中的C_max的关系。

氨基苯磺酸衍生物的单水合物是以上述通式(I)表示的化合物的单水合物。在该通式中，以R¹定义的C₁-C₆烷基的实例包括，例如甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基，戊基，异戊基，新戊基，叔戊基，己基和异己基。C₃-C₇环烷基的实例包括，例如环丙基，叔丁基，环戊基，环己基和环庚基，C₁-C₄卤代烷基的实例包括，例如三氟甲基，三氟乙基或五氟乙基。卤原子的实例包括氟原子，氯原子和溴原子。C₆-C₁₂芳基的实例包括例如苯基和萘基。

以R²定义的C₁-C₆烷基的实例包括，例如甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基，戊基，异戊基，新戊基，叔戊基，己基和异己基。C₇-C₁₂芳烷基的实例包括，例如苄基，苯乙基和萘甲基。芳烷基可以有一个或多个选自下述的取代基，氰基；硝基；C₁-C₆烷氧基如甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，丁氧基，异丁氧基，叔丁氧基，戊氧基，异戊氧基，叔戊氧基或己氧基；卤原子如氟原子，氯原子或溴原子；C₁-C₆烷基如甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基，戊基，异戊基，新戊基，叔戊基，己基，异己基；以及氨基。

本发明的单水合物的优选实例包括在上述通式(I)中其中R¹是氢原子或C₁-C₆烷基，R²是氢原子及n是2的化合物的单水合物。本发明特别优选的具体的单水合物的实例包括在下述表1中举出的那些化合物的单水合物。

                   表1

化合物No.       R¹              R²        n

1               H                H           2

2               CH₃             H           2

3               CH₂CH₃        H            2

4               (CH₂)₂CH₃    H            2

5               CH(CH₃)₂      H            2

6               (CH₂)₃CH₃    H            2

7               (CH₂)₄CH₃    H            2

8               (CH₂)₅CH₃    H            2

9               苯基             H            2

10               H               H            3

11               CH₃            H            3

12               CH₂CH₃        H            3

13               (CH₂)₂CH₃    H            3

14               CH(CH₃)₂      H            3

15               (CH₂)₃CH₃    H            3

16               (CH₂)₄CH₃    H            3

17               (CH₂)₅CH₃    H            3

18               苯基             H            3

19               H                CH₃         2

20               CH₃             CH₃        2

21               CH₂CH₃        CH₃         2

22               (CH₂)₂CH₃    CH₃         2

23               CH(CH₃)₂      CH₃         2

24               苯基             CH₃         2

25               H               (CH₂)₂CH₃ 2

26               CH₃            (CH₂)₂CH₃ 2

27               CH₂CH₃        (CH₂)₂CH₃ 2

28               (CH₂)₂CH₃    (CH₂)₂CH₃ 2

29           CH(CH₃)₂         (CH₂)₂CH₃      2

30            苯基               (CH₂)₂CH₃      2

31            H                  苄基               2

32            CH₃               苄基               2

33            CH₂CH₃           苄基              2

34            (CH₂)₂CH₃      苄基               2

35            CH(CH₃)₂         苄基              2

36            CH₃               2-氰基苄基         2

37            (CH₂)₂CH₃      2-氰基苄基         2

38            CH₃               3-硝基苄基         2

39            (CH₂)₂CH₃      3-硝基苄基         2

40            CH₃               4-甲氧苄基         3

41            (CH₂)₂CH₃      4-甲氧苄基         3

42            CH₃               3，4-二甲氧苄基    3

43            (CH₂)₂CH₃      3，4-二甲氧苄基    3

44            CH₃               2-氟苄基           3

45            (CH₂)₂CH₃      3-氯苄基           3

46            CH₃               4-溴苄基           3

47            (CH₂)₂CH₃      2-甲基苄基         3

48            CH₃               3-乙基苄基         3

49            (CH₂)₂CH₃      4-丙基苄基         2

50            CH₃               3-氨基苄基         2

51            (CH₂)₂CH₃      4-氨基苄基         2

上述化合物的药学上可接受的盐的单水合物也属于本发明的范围。这些盐的实例包括，例如碱金属盐和碱土金属盐如钠盐，钾盐，镁盐，钙盐或铝盐；铵盐；胺盐例如低级烷基胺如三乙胺盐，羟基-低级烷基胺盐如2-羟基乙胺盐，双-(2-羟乙基)胺的盐，三(羟甲基)氨基甲烷盐或N-甲基-D-葡糖胺盐，环己烷胺盐如二环己基胺盐，苄胺盐如N，N-二苄基亚乙基二胺盐或二苄基胺盐；无机酸盐例如盐酸盐，氢溴酸盐，硫酸盐或磷酸盐；有机酸盐例如富马酸盐，琥珀酸盐，草酸盐或乳酸盐。

本发明的更优选的实例包括，例如其中R¹是甲基，R²是氢原子及n是2的式(I)化合物的单水合物。作为本发明特别优选的实例的2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸单水合物的结晶是不同于日本未审查公开专利(KOKAI)No(平)3-7263/1991实施例1中作为No12化合物公开的2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸的无水晶体的。上述本发明的单水合物能长期稳定，当于室温干燥时，结晶水一般不会失去。但是当于大气压下或减压下加热至60℃或更高温度时，例如100-120℃，该单水合物会释放出结晶水，转变为日本未审查公开专利(KOKAI)No.平-3-7263/1991实施例1中公开的无水晶体。

对于本发明的特别优选的实例的2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸的单水合物，在实施例部分通过给出试验数据及光谱描述了它的各种物理化学性质。但是应该理解，这些试验数据及光谱只用于参考的目的。某些晶体是不是属于本发明的单水合物不要根据这些结晶是否具有和本说明书所记载的完全一样的试验数据及光谱来决定。本领域的技术人员很容易明白，这些试验数据和光谱由于许多因素如测量仪器，测定方法及测定条件等是会有误差的。因此上述决定应考虑到这些误差并且根据这些晶体是否基本上具有下述的物理化学特性作出决定。虽然对于制备本发明单水合物的方法无特殊的限制，但一般是通过按照日本未审查公开专利(KOKAI)No(平)3-7263/1991实施例1中公开的方法先制备出式(I)化合物的无水晶体，然后使该无水晶体和水，溶剂中的水份或空气中的水份接触适当时间制备的。但是对于制备本发明的单水合物。使用如下所述的本发明的方法是优选的。

本发明的另一方面提供了制备式(I)的氨基苯磺酸衍生物单水合物的方法，该方法包括的步骤是，将所述氨基苯磺酸的无水晶体悬浮于水中或含水有机溶剂中，或者将所述无水晶体溶解于水中或含水有机溶剂中，然后将所得溶液进行结晶化处理，并干燥所得晶体。用作本发明原料的式(I)的氨基苯磺酸衍生物，即上述方法中所述的氨基苯磺酸衍生物能用公知的方法制备(日本专利公报/KOKOKU)No.(平)6-86438/1994)。例如5-甲基-2-(1-哌嗪基)苯磺酸可通过在封管中使2-氟-5-甲基苯磺酸和哌嗪于加热条件下及在碘化亚铜或铜粉存在下的反应来得到。该化合物相应于其中R¹是甲基，R²是氢原子及n是2的式(I)化合物(表1中化合物No2)。

氨基苯磺酸衍生物的单水合物可通过将式(I)表示的氨基苯磺酸衍生物悬浮于水中或含水有机溶剂中，通过过滤回收所得晶体，再干燥来制备。作为有机溶剂可以使用可知水混溶的有机溶剂如甲醇，乙醇，2-丙醇，丙酮和四氢呋喃。悬浮操作优选在搅拌下完成，操作温度优选室温加热到35℃或以下温度范围，室温已经足够。对水中含水有机溶剂的体积无特别限制，可选择只要能充分浸没上述式(I)的氨基苯磺酸。通常所用溶剂的数量为式(I)氨基苯磺酸衍生物重量的1-50倍(V/W)。虽然对于含水有机溶剂中的水含量比无特殊限制，但应使用和上述式(I)的氨基苯磺酸衍生物等摩尔量的水或更多一些。悬浮操作的时间通常为1小时或更多，优选2小时或更多，虽然较短的时间也是足够的。完成悬浮操作后，过滤收集所得晶体，干燥后得到本发明的单水合物。干燥过程的压力和温度可考虑构成单水合物的结晶水对晶体的键合强度(即单水合物的稳定性)而确定，观察晶体重量不再变化(即减少)可以确定干燥过程的完成。

本发明的氨基苯磺酸单水合物也可以通过将式(I)的氨基苯磺酸衍生物溶解于水或含水有机溶剂中所得到的溶液进行结晶化处理，过滤回收所得晶体，再进行干燥来制备。结晶化处理的实例包括：例如(a)包括下述步骤的方法：将通式(I)的氨基苯磺酸衍生物于加热或回流并搅拌下溶解于水或含水有机溶剂中，冷却该溶液使沉淀并使晶体生长；(b)包括下述步骤的方法：将上述通式(I)氨基苯磺酸衍生物溶解于碱性或酸性水溶液中或含水有机溶剂中，用酸或碱调节氢离子浓度，使沉淀并使晶体生长；(C)将通式(I)的氨基苯磺酸衍生物溶解于水中或含水有机溶剂中，然后加入减少上述式(I)氨基苯磺酸衍生物溶解度的溶剂，使沉淀并使晶体生长。

作为有机溶剂，可以使用和水混溶的有机溶剂如甲醇，乙醇，2-丙醇，丙酮或四氢呋喃。作为酸可以使用无机酸如盐酸或硫酸，或者有机酸如乙酸，甲磺酸或对甲苯磺酸，作为碱可以使用碱金属或碱土金属碱如氢氧化锂，氢氧化钠，氢氧化钾，氢氧化钡，氢氧化钙，碳酸钠，碳酸钾，碳酸氢钠，碳酸氢钾；或者有机碱如吡啶或三乙胺。这些酸和碱可以用水稀释或以用有机溶剂溶解的溶液形式被使用。溶解通式(I)氨基苯磺酸衍生物所用温度，水；含水有机溶剂；碱性溶剂或酸性溶剂的数量；调节氢离子浓度所用的酸或碱的数量以及使沉出的结晶生长的温度均可考虑通式(I)氨基苯磺酸衍生物在所用溶剂中的溶解度而适当地选择。

在上述方法(a)中，溶解上述通式(I)氨基苯磺酸衍生物所用的温度可以优选例如溶剂的回流温度，水或含水有机溶剂的体积可以优选例如在溶剂回流温度下完全溶解上述通式(I)氨基苯磺酸衍生物所需的最小体积。使晶体生长的温度可以优选室温或更低，更优选25℃或更低。对含水有机溶剂中水含量的比例无特殊限制，可考虑上述通式(I)氨基苯磺酸衍生物在该溶剂中的溶解度而适当加以选择。使沉出的结晶生长的时间通常为1小时或更多，优选2小时或更多。生长完成后，过滤收集结晶，干燥后得到本发明的单水合物，干燥过程可按上述方法完成。

当本发明的单水合物是上述通式(I)化合物的盐的单水合物时，本发明的单水合物可以通过下述方法制备：例如包括用常规方法制备上述通式(I)氨基苯磺酸衍生物的盐，再按上述方法制备所得到的盐的单水合物的步骤的方法；包括按本发明方法制备游离形式的化合物单水合物，再用常规方法将所得产品转变成该盐的单水合物的步骤的方法；或者包括在按本发明方法制备单水合物过程的同时，通过用常规方法制备其盐的步骤的方法。

本发明的单水合物的特征在于，它们基本上不吸水和/或吸湿。因此，例如，使用本发明的2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸的单水合物作为药物组合物的活性成分，代替日本未审查公开专利(KOKAI)No(平)3-7263/1991实施例1中公开的无水晶体的2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸，使有可能准确地称量该活性成分，能提供具有恒定含量的活性成分的药物组合物。

本发明的单水合物用于制备用于预防和治疗心肌缺血症如心肌梗塞，心绞痛，心力衰竭，高血压，心律失常等的药物组合物。对药物组合物的形式无特殊限制，其实例包括，例如口服给药的制剂如片剂，胶囊，粉剂，细小的颗粒剂，颗粒剂，溶液或糖浆；或者非肠道给药制剂如注射剂，液滴浸渗剂，栓剂，吸入剂和补片剂。

为制备上述药物组合物，可以任意使用药理学及制药学上可接受的添加剂。为制备适于口服给药，透皮给药或透粘膜给药的药物组合物，可以加入赋形剂如葡萄糖，乳糖，D-甘露糖醇，淀粉或微晶纤维素；崩解剂或崩解助剂如羧甲基纤维素，淀粉或羧甲基纤维素钙；粘合剂如羟丙基纤维素，羟丙基甲基纤维素，聚乙烯吡咯烷酮或明胶；润滑剂如硬脂酸镁、滑石；包衣剂如羟丙基甲基纤维素，蔗糖，聚乙二醇或二氧化钛；基质如凡士林，液体石腊，聚乙二醇、明胶，中国粘土，甘油，纯水或硬的脂肪。也可以使用制药添加剂如推进剂例如氟利昂，***或压缩气体；粘合剂如聚丙烯酸钠，聚乙烯醇，甲基纤维素，聚异丁烯或聚丁烯、或底基布如棉布或塑料片。

为了制备适于注射给药或液滴浸渗给药的药物组合物，可以使用的制药添加剂例如溶解剂或助溶解剂，它能使形成水性注射剂或者使用前溶解的注射剂，例如注射用蒸馏水，生理盐水或丙二醇；等渗剂如葡萄糖，氯化钠，D-甘露糖醇或甘油，PH调节剂如无机酸，有机酸，无机碱或有机碱。

通过下述实施例可以对本发明作出更具体的说明，但是本发明的范围不受这些实施例的限制。实施例1：本发明单水合物的制备

(a)按照日本未审查公开专利(KOKAI)No(平)3-7263/1991实施例1中描述的方法，使2-氟-5-甲基苯磺酸(0.76g)和哌嗪(3.44g)在封管中于碘化亚铜(0.76g)和铜粉(0.26g)存在下，于160℃反应8小时，再将反应产物用硅胶色谱法提纯(洗脱剂：氯仿∶甲醇∶乙酸＝100∶100∶3)，得到2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸的无水晶体(0.67g，产率65.0％)。

(b)将上述方法(a)中得到的无水结晶(0.4506g)和蒸馏水(1.35ml)加入到5ml圆底烧瓶中，于5℃搅拌混合物2小时，通过吸滤从悬浮液中回收结晶，留于园底***晶体通过用滤液洗涤回收，合并结晶于50℃及90mmHg下干燥3小时，得到5-甲基-2-(1-哌嗪基)苯磺酸单水合物，为白色晶体(0.4485g，产率：93.0％)。从以下列出的元素分析结果证明该化合物是单水合物。元素分析

单水合物的计算值：C：48.16，H：6.61，N：10.21，S：11.69

          测定值：C：48.16，H：6.55，N：10.09，S：11.87

无水晶体计算值：(作为参考)

                  C：51.54，H：6.29，N：10.93，S：12.51实施例2：本发明单水合物的热分析（TG-DTA)

将日本未审查公开专利(KOKAI)No.(平)3-7263/1991实施例1中公开的无水晶体和本发明的单水合物用热分析仪(RIGAKU TAS-200)作热分析，热分析各用10mg样品在氮气氛中进行。测定在50-400℃温度范围内，以5°/分的升温速度进行。使用方法(a)中得到的化合物作为无水晶体。

对于本发明单水合物，从约60℃开始可以观察到由于释放结晶水而出现的失重及热吸收峰。失重为6.57％，相当于失去一分子水。伴随着失重的热吸收峰也可以在300℃及320℃观察到(图1)。另一方面，无水晶体于300℃及320℃也显示出伴随着失重的热吸收峰，但在100℃以下时，观察不到由于释放结晶水的失重或热吸收峰(图2)。在热分析仪中通过将上述方法(b)中得到的单水合物加热到110℃除去结晶水就地制备出样品，在冷却至室温以后转换重量对其进行热分析，所得结果和用无水晶体得到的结果相同(图2)。实施例3：本发明单水合物的X-射线衍射分析

于室温干燥的氮气流中(50ml/分)用X-射线衍射仪(philips，pw1700)对本发明的单水合物作粉末X-射线衍射分析。得到的粉末X-射线衍射图如图3所示。上述实施例1的方法(a)中得到的无水晶体的粉末X-射线衍射分析也在同样条件下完成，所得粉末衍射图如图4。单水合物和无水晶体有不同的粉末衍射图，由此证明上述结晶粉末是彼此不同的。将分析后的单水合物样品就地加热到110℃制成无水晶体，冷至25℃，再进行粉末X-射线分析，其结果得到和图4相同的粉末X-射线衍射图。实施例4：本发明单水合物的吸湿性

本发明的单水合物的每一个样品放置于干燥器中，调节相对湿度到57％或98％，于20℃储存16天。在此期间测定重量变化。作为对照，将实施例1方法(a)中得到的无水晶体也放到调节至相对湿度57％或98％的干燥器中，并测定重量变化。结果列于表2(此表中每个％值代表重量的增加)。在上述两个相对湿度条件下基本上未发现单水合物的重量改变，另一方面，无水晶体重量大约增加了7％，相当于1摩尔结晶水的重量。

                               表2结晶        RH¹(％)   0天     1天     3天     16天无水晶体    57         0.00    6.99    7.08    6.89(％)无水晶体    98         0.00    7.35    7.36    7.12单水合物    57         0.00    0.11    0.20    0.21单水合物    98         0.00    0.28    0.40    0.39¹RH：相对湿度(％)

实施例5血浆浓度(1)

上述式(II)表示的标记的2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸单水合物(下文称为“标记化合物”)对雄性鼠(n＝3)以1mg/kg的剂量口服给药，相当于0.94mg/kg2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸的无水晶体(下文称为“无水晶体”)。测定血浆中的放射性并计算AUC(0-∞)(1039.86ng eq·h/ml)。标记化合物也对雄性鼠(n＝3)以0.3mg/kg的剂量静脉给药(相当于0.28mg/kg无水晶体)，测定血浆中的放射性以便计算AUC(0-∞)(816.28ng eq·h/ml)，使用上述AUC(0-∞)的数值及所用剂量依下述公式1计算生物利用率：<公式1>：生物利用率 $=\frac{1039.86}{816.28}\&times;\frac{0.28}{0.94}\&times;100=38(\%)$

实施例6：血浆浓度(2)

用标记化合物以剂量0.1mg/kg，0.3mg/kg，1mg/kg或3mg/kg(分别相当于无水晶体0.094mg/kg，0.28mg/kg，0.94mg/kg或2.8mg/kg)以口服给药方式对雄性鼠(n＝5)给药，观察血浆中的放射性，从血浆放射性变化过程计算出的T_max，C_max，t1/2和AUC摘于表3。AUC和剂量之间的关系以及C_max和剂量之间的关系表示于图5和图6。

                             表3

剂量(mg/kg)       T_max(hr)   C_max(ng/ml)   t1/2(hr)      AUC(ng.hr/ml)

0.1               2.2±0.5    16.2±2.6      1.77±0.34    64.1±12.3

0.3               2.2±0.5    69.0±17.8     1.33±0.09    270.5±88.4

1                 1.8±0.5    171.6±31.1    1.64±0.17    574.4±113.2

3                 2.0±0.0    501.5±133.8   1.30±0.08    1769.2±498.4

                                             平均±5.0(n＝5)

如实施例4所表明的，无水晶体显示大约7％的重量变化(一分子水相当于2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸单水合物总重量的约7％)。很明显无水晶体由于在吸收湿气过程中通过水合引起约最大7％的重量变化。因此，当称量作为无水晶体得到的晶体时，活性物质的给药剂量依赖于水合的程度可以有93-100％范围内的变化，这是因为由于吸收湿气的水合程度是未知的。另一方面，例如晶体是以单水合物被称重，由于同样原因活性物质的给药剂量可能有100-107％的重量变化。因此，无水晶体的称重过程可能引起对于预期剂量有93-107％范围的活性物质剂量的起伏。

如实施例6所示，本发明单水合物的血浆浓度对给药剂量表现出线性正比关系。因此，用无水晶体称重并给药，血浆中浓度同样会在14％范围内起伏。在实施例5中计算口服给药吸收率时，吸收率是用公式I计算得到的，因此公式1中表示剂量的分母和分子的数值可以独立地起伏。当认为生物利用率的平均起伏为38％时，得到下述结果：

       最大值＝(107％/93％)×38％＝43.72％

       最小值＝(93％/107％)×38％＝33.03％该结果指出，生物利用率的起伏范围可能扩大，到33.03～43.72％(差值＝10.69％)。

相反，本发明的单水合物是稳定的，并且不会有上述的起伏。因此本发明单水合物的优点是，能够很容易地确定达到所需要的给药剂量，并且能容易地保证给药的安全范围，并且可以选择各种给药方式。另外，当本发明的单水合物用作临床治疗心力衰竭患者的药物时，检查心脏功能改进的效果并且依赖于改进的病情恰当地控制药物剂对临床是十分重要的。通过使用本发明的单水合物，药物在血浆中的浓度能被适当地维持并能控制得到的效果。实施例7：在蒸气加湿器中制备单水合物

蒸气从一盛水的蒸浴中产生，加热至50℃，并有一隔绝外部空气的塑料片遮蔽物。将用日本未审查公开专利(KOKAI)No.(平)3-7263/1991公开的方法制备的5-甲基-2-(1-哌嗪基)苯磺酸无水晶体(4886.16g)分散于不锈钢扁平容器中并放置于上述塑料片遮蔽物内。随时分开晶体并清扫于遮蔽物和不锈钢容器内壁上形成的湿气。22.5小时之后，重量不再增加，得到总重量为5217.65g的5-甲基-2-(1-哌嗪基)苯磺酸单水合物，为白色晶体。元素分析结果证明，该晶体是单水合物。元素分析

计算值(无水晶体)：C：51.54，H：6.29，N：10.93，S：12.51

      (单水合物)：C：48.16，H：6.61，N：10.21，S：11.69

测定值            C：47.98，H：6.77，N：10.22，S：11.53实施例8：用水中悬浮的方法制备单水合物

将5-甲基-2-(1-哌嗪基)苯磺酸无水晶体(10.00g)和蒸馏水(30ml)放入100ml园底烧瓶中，于5℃搅拌混合物2小时，吸滤从悬浮液中回收结晶，再将残留于园底烧瓶中的结晶用蒸馏水(3ml)洗涤以回收。合并晶体，于50℃及90mmHg干燥3小时，得到5-甲基-2-(1-哌嗪基)苯磺酸单水合物，为白色晶体(10.36g，产率96.8％)，于同样条件下进一步干燥27小时后，单水合物的重量及外观不再改变，用KarlFischer水份测定仪测出的水合量是6.96％，进一步证明了该产品是单水合物。(计算值：6.56％)实施例9：通过从水中结晶的方法制备单水合物：

将5-甲基-2-(1-哌嗪基)苯磺酸无水晶体(10.00g)和蒸馏水(75ml)放于200ml园底烧瓶中，于搅拌下回流加热使晶体完全溶解，搅拌下将溶液冷至5℃，于同样温度继续搅拌2小时，吸滤收集沉出的结晶并用蒸馏水(2ml)洗涤，于50℃及90mmHg下干燥3小时得到的晶体，得到5-甲基-2-(1-哌嗪基)苯磺酸单水合物，为白色晶体(9.46g，产率87.8％)，于同样条件下进一步干燥27小时后，单水合物的重量及外观不再改变。用Karl.Fischer水分测定仪测出的水含量是6.75％，这进一步证明了该产品是单水合物。实施例10：通过从含水乙醇中结晶的方法制备单水合物

将5-甲基-2-(1-哌嗪基)苯磺酸无水晶体(10.00g)和含50％(V/V)水的乙醇(80ml)放于200ml园底烧瓶中，搅拌下回流加热使其完全溶解，搅拌下将溶液冷至5℃，于同样温度下继续搅拌2小时，吸滤收集沉出的结晶，用含50％水(V/V)的乙醇(20ml)洗涤。于50℃及90mmHg下干燥结晶3小时，得到5-甲基-2-(1-哌嗪基)苯磺酸单水合物，为白色晶体(9.49g，产率88.7％)。于同样条件下继续干燥27小时后，单水合物的重量及外观不再改变。用Karl Fischer水份测定仪测出的水含量是6.74％，这进一步证明了该产品是单水合物。

氨基苯磺酸衍生物的单水合物，特别是本发明提供的2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸单水合物于室温长时间放置是稳定的。本发明的单水合物基本上没有由于吸收湿气造成的重量变化。因之可以制备有恒定含量的氨基苯磺酸衍生物，特别是2-(1-哌嗪基)-5-甲基氨基苯磺酸作为活性成分的药物组合物。另外，按照本发明的方法，用于治疗心脏病的氨基苯磺酸衍生物的单水合物可以方便地并重复地被制备。

Claims (14)

1、下述式(I)表示的氨基苯磺酸衍生物的单水合物：其中R¹表示氢原子，C₁-C₆烷基，C₃-C₇环烷基，卤代C₁-C₄烷基，卤原子或C₆-C₁₂芳基；R²表示氢原子，C₁-C₆烷基或C₇-C₁₂芳烷基，该芳烷基可以有一或多个选自下述的取代基：氰基，硝基，C₁-C₆烷氧基，卤原子，C₁-C₆烷基及氨基；n表示1-4的整数。

2、按照权利要求1的所述氨基苯磺酸衍生物的单水合物，其中R¹表示氢原子或C₁-C₆烷基，R²表示氢原子以及n是2。

3、按照权利要求1的所述氨基苯磺酸衍生物的单水合物，该单水合物是2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸的单水合物。

4、制备权利要求1中通式(I)表示的氨基苯磺酸衍生物的单水合物的方法，包括的步骤是：将氨基苯磺酸衍生物的无水晶体悬浮于水中或含水有机溶剂中，或者将上述无水晶体溶解于水中或含水有机溶剂中，将所得溶液进行结晶化处理，再干燥所得晶体。

5、按照权利要求4的制备氨基苯磺酸衍生物的单水合物的方法，其中R¹是氢原子或C₁-C₆烷基，R²是氢原子，n是2。

6、按照权要求4制备氨基苯磺酸衍生物的单水合物的方法，其中R¹是甲基，R²是氢原子，以及n是2。

7、含有权利要求1中式(I)表示的氨基苯磺酸衍生物的单水合物作为活性成分的药物组合物。

8、按照权利要求7的药物组合物，其中所述活性成分是2-(1-哌嗪基)5-甲基苯磺酸。

9、权利要求1的氨基苯磺酸衍生物的单水合物的用途，用于制备含上述单水合物作为活性成分的药物组合物。

10、权利要求3的单水合物的用途，用于制备含所述单水合物作为活性成分的药物组合物。

11、一种用于心肌缺血症的预防和治疗剂，其中含有权利要求1中式(I)表示的氨基苯磺酸衍生物的单水合物或其可接受的盐作为有效成分。

12、一种用于心肌缺血症的预防和治疗剂，其中含有2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸的单水合物或其可接受的盐作为有效成分。

13、一种用于心肌梗塞，心绞痛，心力衰竭，高血压或心律失常的预防和治疗剂，其中含有权利要求1中式(I)表示的氨基苯磺酸衍生物的单水合物或其可接受的盐作为有效成分。

14、一种用于心肌梗塞，心绞痛，心力衰竭，高血压或心律失常的预防和治疗剂，其中含有2-(1-哌嗪基)-5-甲基苯磺酸的单水合物或其可接受的盐作为有效成分。

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