CN110850098B - 用于Western blot实验的自动洗膜装置 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及Western blot实验技术领域,公开了一种用于Western blot实验的自动洗膜装置,包括壳体,设置在壳体内顶部向清洗装置中注液的第一储液箱、第二储液箱、第三储液箱,第四储液箱,储液装置的下方设置有清洗装置,清洗装置包括清洗盘,清洗盘的下方依次设置有与其同轴的漏液盘,二者之间均可相对旋转;其上均设置有漏液孔,清洗盘、漏液盘可跟随轴杆震动;漏液盘的下方由外环向内环分别设置有第一回收箱、第二回收箱、第三回收箱、第四回收箱;能够实现转膜之后实验步骤的自动化,同时能够分类回收液体重复利用。
Description
技术领域
本发明涉及Western blot实验技术领域,尤其是一种用于Western blot实验的自动洗膜装置。
背景技术
蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法,由瑞士米歇尔弗雷德里希生物研究所(FriedrichMiescher Institute)的HarryTowbin在1979年提出,在尼尔·伯奈特(Neal Burnette)于1981年所著的《分析生物化学》(Analytical Biochemistry)中首次被称为WesternBlot。
蛋白免疫印迹(WesternBlot)是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从凝胶转移到固相支持物NC膜(硝酸纤维素膜)或PVDF膜(聚偏二氟乙烯膜)上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术,现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。
蛋白免疫印迹实验整个过程包括蛋白样品制作、电泳、转膜、封闭、洗膜、孵育一抗、洗膜、孵育二抗、显色等步骤;转膜之后的实验步骤,操作简单且步骤繁琐,均为重复式、傻瓜式的人工操作,极耗费人力、时间。目前国内外常用的办法是:将PVDF膜放入可盛液体的盒子里放到摇床上摇晃,并定时更换封闭液(脱脂牛奶)、TBST缓冲液,一抗,以及二抗。这些实验步骤更换的间隔时间短且次数频繁,给研究人员带来诸多不便。虽然目前市场上也有一些自动洗膜装置,但这些装置大多只能完成TBST洗膜操作,却不能将转膜之后的步骤整体程序化,并不能完全解放研究人员:而且这些装置大多装置复杂,体型庞大,制作成本高且不易搬运。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种用于Western blot实验的自动洗膜装置,能够自动完成转膜之后的封闭、洗膜、一抗、二抗等步骤。
本发明所采用的技术方案是:用于Western blot实验的自动洗膜装置,包括壳体,设置在壳体内顶部的储液装置,储液装置包括分别储存封闭液、TBST、一抗和二抗的第一储液箱、第二储液箱、第三储液箱、第四储液箱;储液装置的下方设置有清洗装置,清洗装置包括清洗盘,清洗盘的下方设置有与其同轴的漏液盘;清洗盘上设置有漏液孔a1、漏液孔a2、漏液孔a3、漏液孔a4;第一储液箱、第二储液箱、第三储液箱、第四储液箱上均设置有流向清洗盘内的流出管道。
进一步地,回收装置包括漏液盘和第一回收箱、第二回收箱、第三回收箱、第四回收箱;漏液盘上设置有漏液孔b1、漏液孔b2、漏液孔b3、漏液孔b4;清洗盘和漏液盘之间可相对旋转,清洗盘和漏液盘可跟随轴杆左右震动;第一回收箱与漏液孔a1和漏液孔b1对应,第二回收箱与漏液孔a2和漏液孔b2对应,第三回收箱与漏液孔a3和漏液孔b3对应,第四回收箱与漏液孔a4和漏液孔b4对应。
进一步地,漏液孔a1、漏液孔a2、漏液孔a3、漏液孔a4沿所述清洗盘径向呈放射状设置,漏液孔b1、漏液孔b2、漏液孔b3、漏液孔b4沿所述漏液盘径向呈扇状设置,清洗盘和漏液盘能够通过相对旋转使得清洗盘、漏夜盘的漏液孔对齐,从而实现漏液。
进一步地,第一回收箱、第二回收箱、第三回收箱、第四回收箱内分别设置有与第一储液箱、第二储液箱、第三储液箱、第四储液箱连通的回抽装置,能够将分类回收的液体再利用。
进一步地,清洗盘、漏液盘之间通过控制杆连接,控制杆内设置有控制***。
进一步地,在漏液盘的背面对称设置有轴杆,轴杆的一端连接在漏液盘的外沿,另一端连接在调控轴上,轴杆对漏液盘起支撑作用,轴杆可伸缩,配合控制轴实现漏液盘的左右震荡。
进一步地,流出管道上设置有控制阀门,调控液体流速。
进一步地,封闭液为牛奶。
本发明的有益效果是:
1、通过分类的储液箱向摇晃盘中注入所需液体实现自动清洗、封闭、孵育等步骤。
2、通过漏夜盘、与清洗盘上的漏液孔的移动实现自动分类回收相应液体。
3、将分类回收的液体再回抽到相应储液箱中,节省实验成本。
4、通过智能调控***控制每个程序,同时能自定义设置封闭,洗膜,一二抗孵育时间及次数,从而将wb后半部分整体程序化,完全解放研究人员。
附图说明
图1是本发明自动洗膜装置的内部结构示意图。
图2是本发明自动洗膜装置的外部结构示意图。
图3是本发明清洗盘与漏夜盘的连接结构示意图。
图4是本发明清洗盘的结构示意图。
图5是本发明漏夜盘的结构示意图。
图6是本发明轴杆与控制杆、调控轴的连接结构示意图。
图7是本发明图6轴杆收缩状态的示意图。
图中标记为:11-第一储液箱,12-第二储液箱,13-第三储液箱,14-第四储液箱,21-第一回收箱,22-第二回收箱,23-第三回收箱,24-第四回收箱,3-清洗盘,31-漏液孔a1,32-漏液孔a2,33-漏液孔a3,34-漏液孔a4,4-漏液盘,41-漏液孔b1,42-漏液孔b2,43-漏液孔b3,44-漏液孔b4,5-壳体,51-盖,6-总控制***,7-轴杆,71-弹簧,9-控制杆,10-流出管道,11-调控轴。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明进一步说明。
如图1、图2所示,本发明的用于Western blot实验的自动洗膜装置,包括壳体5,设置在壳体5内的储液装置、清洗装置、回收装置。具体的,壳体5为分体式结构,在其顶部设置有盖51,方便向第一储液箱11、第二储液箱12、第三储液箱13、第四储液箱14内注入相应液体。
具体的,储液装置包括分别存储封闭液、TBST缓冲液、一抗、二抗的第一储液箱11、第二储液箱12、第三储液箱13、第四储液箱14,第一储液箱11、第二储液箱12、第三储液箱13、二抗储存14箱设置在壳体内顶部,封闭液具体为牛奶,为了便于注入相应液体,第一储液箱11、第二储液箱12、第三储液箱13、第四储液箱14上均设置有注入口。
清洗装置设置在储液装置的下方,清洗装置包括清洗盘3,PVDF膜放置在清洗盘3中清洗,在第一储液箱11、第二储液箱12、第三储液箱13、第四储液箱14的底部均设置有流出管道10,流出管道10的下端贴于清洗盘3的内壁设置,防止注液过程中液体飞溅以及控制液体倾倒,液体通过该流出管道10流向清洗盘3,同时流出管道10上设置有控制阀门,具体的为智能控制阀门,该阀门在总控制***6的的控制下调节液体的流速。
回收装置包括漏液盘4和第一回收箱21、第二回收箱22、第三回收箱23、第四回收箱24;漏液盘上设置有漏液孔b141、漏液孔b242、漏液孔b343、漏液孔b444。为了实现清洗盘3、漏液盘4的相对旋转以及震荡,清洗盘3、漏液盘4之间通过控制杆9连接,控制杆9内设置有控制***,控制杆9上设置有调控轴11,清洗盘3、漏液盘4均能够控制杆9的带动下相对旋转实现漏液,在调控轴11的带动下上下震动,当需要震荡洗膜的时候,控制杆9带动清洗盘3、漏液盘4上升后在调控轴11的作用下上下震荡,当清洗完成需要漏液时,控制杆9带动清洗盘3、漏液盘4下降,使漏液盘与回收箱连接实现漏液。在漏液盘4的背面对称设置有轴杆7,轴杆7的一端连接在漏液盘4的外沿,另一端连接在相应的调控轴11上,配合控制杆9及调控轴11实现清洗盘3、漏液盘4的左右震荡洗膜。轴杆7可伸缩,具体结构如图6所示,轴杆包括两节连杆,一节连杆与控制杆连接,一节连杆与漏夜盘4的边缘连接,两节连杆之间铰接连接,使得轴杆7可以折叠一定角度,与控制杆连接的一节连杆上设置有弹簧,使得轴杆7可以伸缩一定长度,轴杆7收缩后的状态如图7所示。当漂洗时,控制杆9带着清洗盘3、漏液盘4上升后,依靠轴杆7上的弹簧带动清洗盘3以及漏液盘4左右震荡。
具体的,为了实现清洗完后的封闭液、缓冲液、一抗、二抗的自动回收,如图4所示,清洗盘3上设置有漏液孔a131、漏液孔a232、漏液孔a333、漏液孔a434,漏液孔a131、漏液孔a232、漏液孔a333、漏液孔a434沿清洗盘3径向呈放射状设置,为了使得清洗后的液体尽快回收,可以沿清洗盘3轴向等距设置几组漏液孔a131、漏液孔a232、漏液孔a333、漏液孔a434,如图5所示,漏液孔b141、漏液孔b242、漏液孔b343、漏液孔b444沿漏液盘4径向呈扇状设置,具体的,漏液孔b141、漏液孔b242、漏液孔b343、漏液孔b444在漏液盘4的径向等距设置,同时,漏液孔b141、漏液孔b242、漏液孔b343、漏液孔b444在漏液盘4的周向等距设置,最终呈扇形排列,漏液孔b141、漏液孔b242、漏液孔b343、漏液孔b444也设置成多组,具体的与清洗盘上的漏液孔的组数相等,最终保证通过旋转能够使清洗盘3上的漏液孔a131与漏液盘4上的漏液孔b141能够对应,漏液孔a232与漏液孔b242对应,漏液孔a333与漏液孔b343对应,漏液孔a434与漏液孔b444对应。洗膜时,通过旋转漏液盘使得漏液盘与清洗盘的所有漏液孔均错开,防止清洗过程中液体从清洗盘3中遗漏;洗膜完成后,旋转漏液盘使得漏液盘与清洗盘的相应漏液孔对应,实现液体的分类回收。
具体的,如图1、3所示,第一回收箱21与漏液孔a131和漏液孔b141对应,第二回收箱22与漏液孔a232和漏液孔b242对应,第三回收箱23与漏液孔a333和漏液孔b343对应,第四回收箱24与漏液孔a434和漏液孔b444对应。实现回收清洗盘4中漏下的牛奶、TBST缓冲液一抗以及二抗的分类回收。同时,在每个回收箱中均设置有回抽装置,回抽装置可以采用现有的回抽结构,能够将液体回抽至相应储液箱即可,可将回收的液体回吸到对应的储液箱中重复利用。
还设置有总控制器,流出管道上的控制阀门,控制杆内的控制***同均由总控制器控制,且总控制器上连接有显示屏,如图2所示,显示屏嵌入壳体5的外表面,便于实验步骤的操作控制及次数、时间等参数设定。
本发明的洗膜装置,具体使用时:
1、按照预先设定好的程序由第一储液箱11向清洗盘3中注入封闭液,然后清洗盘3在控制杆9和调控杆11的带动下震动封闭1h,然后轴杆7带动漏液盘4顺时针转动一定角度至漏液孔a131与漏液孔b141重合打开,封闭液从重合的漏液孔a131与漏液孔b141漏下回收至第一回收箱21内;轴杆7带动漏液盘顺时针转动一定角度至漏液孔漏液孔a131与漏液孔b141完全错开使其关闭,向清洗盘3中注入TBST缓冲液,震荡清洗10min,漏液盘4顺时针转动一定角度至漏液孔a232和漏液孔b242打开,回收TBST缓冲液至第二回收箱22内,漏液盘逆时针转动一定角度,漏液孔a232和漏液孔b242完全错开使其关闭,按照上述步骤重复3次,最后一次,漏液盘顺时针转动一定角度漏液孔a232和漏液孔b242关闭。
2、向清洗盘3中注入一抗,震荡孵育24h,漏液盘顺时针转动一定角度至漏液孔a333和漏液孔b343重合使其打开,回收一抗至第三回收箱23内;漏液盘4逆时针转动一定角度至漏液孔a333和漏液孔b343完全错开使其关闭,向清洗盘4中注入TBST缓冲液,震荡清洗10min,漏液盘4逆时针转动一定角度至漏液孔a232和漏液孔b242重合使其打开,回收TBST缓冲液至第二回收箱22内,重复上述步骤3次,最后一次漏液盘4逆时针转动一定角度至漏液孔a232和漏液孔b242完全错开使其关闭;
3、向清洗盘4中注入二抗,震荡孵育1h,漏液盘4顺时针转动一定角度至漏液孔a434和漏液孔b444重合使其打开,回收二抗至第四回收箱24内。
Claims (4)
1. 用于Western blot实验的自动洗膜装置,其特征在于:包括壳体,设置在壳体内顶部的储液装置,所述储液装置包括分别储存封闭液、TBST、一抗和二抗的第一储液箱、第二储液箱、第三储液箱、第四储液箱;储液装置的下方设置有清洗装置,所述清洗装置包括清洗盘;所述清洗盘上设置有漏液孔a1、漏液孔a2、漏液孔a3、漏液孔a4, 所述漏液孔a1、漏液孔a2、漏液孔a3、漏液孔a4沿所述清洗盘径向呈放射状设置;所述第一储液箱、第二储液箱、第三储液箱、第四储液箱上均设置有流向清洗盘内的流出管道, 所述流出管道的下端贴于清洗盘的内壁设置;所述清洗盘下方设置有回收装置,所述回收装置包括漏液盘和第一回收箱、第二回收箱、第三回收箱、第四回收箱;漏液盘上设置有漏液孔b1、漏液孔b2、漏液孔b3、漏液孔b4,漏液孔b1、漏液孔b2、漏液孔b3、漏液孔b4在漏液盘的径向等距设置,同时,漏液孔b1、漏液孔b2、漏液孔b3、漏液孔b4在漏液盘的周向等距设置;清洗盘、漏液盘之间通过控制杆连接,控制杆内设置有控制***,控制杆上设置有调控轴,清洗盘、漏液盘均能够在控制杆的带动下相对旋转实现漏液,在调控轴的带动下上下震动,所述第一回收箱与所述漏液孔a1和漏液孔b1对应,所述第二回收箱与所述漏液孔a2和漏液孔b2对应,所述第三回收箱与所述漏液孔a3和漏液孔b3对应,所述第四回收箱与所述漏液孔a4和漏液孔b4对应;在所述漏液盘的背面对称设置有轴杆,所述轴杆的一端连接在漏液盘的外沿,另一端连接在调控轴上,所述轴杆可伸缩,轴杆包括两节连杆,一节连杆与控制杆连接,与控制杆连接的一节连杆上设置有弹簧,一节连杆与漏液盘的边缘连接,两节连杆之间铰接连接。
2.根据权利要求1所述的用于Western blot实验的自动洗膜装置,其特征在于:所述第一回收箱、第二回收箱、第三回收箱、第四回收箱内分别设置有与第一储液箱、第二储液箱、第三储液箱、第四储液箱连通的回抽装置。
3.根据权利要求1或2所述的用于Western blot实验的自动洗膜装置,其特征在于:所述流出管道上设置有控制阀门。
4.根据权利要求3所述的用于Western blot实验的自动洗膜装置,其特征在于:所述封闭液为牛奶。
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