CN110818794A - 一种用于检测人cd117蛋白的单克隆抗体、偶联蛋白、抗原表位肽以及杂交瘤细胞株 - Google Patents

一种用于检测人cd117蛋白的单克隆抗体、偶联蛋白、抗原表位肽以及杂交瘤细胞株 Download PDF

Info

Publication number
CN110818794A
CN110818794A CN201911184302.8A CN201911184302A CN110818794A CN 110818794 A CN110818794 A CN 110818794A CN 201911184302 A CN201911184302 A CN 201911184302A CN 110818794 A CN110818794 A CN 110818794A
Authority
CN
China
Prior art keywords
protein
epitope peptide
human
monoclonal antibody
amino acid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201911184302.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110818794B (zh
Inventor
王亚杰
徐星星
常秋霜
洪赟智
李森
刘玲玲
齐华
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
HENAN CELLNOVO BIOTECHNOLOGY Co Ltd
Original Assignee
HENAN CELLNOVO BIOTECHNOLOGY Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by HENAN CELLNOVO BIOTECHNOLOGY Co Ltd filed Critical HENAN CELLNOVO BIOTECHNOLOGY Co Ltd
Priority to CN201911184302.8A priority Critical patent/CN110818794B/zh
Publication of CN110818794A publication Critical patent/CN110818794A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110818794B publication Critical patent/CN110818794B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/70503—Immunoglobulin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/795—Porphyrin- or corrin-ring-containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/40—Fusion polypeptide containing a tag for immunodetection, or an epitope for immunisation

Abstract

本发明涉及一种用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体、偶联蛋白、抗原表位肽以及杂交瘤细胞株，属于免疫学技术领域。本发明中选择以NRQKPVVDHSVRINS为核心的多肽序列作为抗原表位肽制备单克隆抗体，为提高抗原表位肽的免疫效果，在前述的核心序列N端或者C端增加至少1个同时不超过10个氨基酸，使其N端或者C端为含有巯基的氨基酸；将抗原表位肽上的巯基通过偶联剂与载体蛋白上的氨基偶联获得人CD117抗原，用其对于动物进行免疫，获得人CD117单克隆抗体。本发明中为国内生产人CD117抗体提供了一个新的途径，获得单克隆抗体具有较高的特异性和灵敏度，且价格便宜。

Description

一种用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体、偶联蛋白、抗原表 位肽以及杂交瘤细胞株
技术领域
本发明涉及一种用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体、偶联蛋白、抗原表位肽以及杂交瘤细胞株，属于免疫学技术领域。
背景技术
CD117蛋白是一种分子量为145kDa的糖基化磷蛋白，有1个跨膜区，氨基端位于细胞膜外侧，羧基端位于细胞质膜内侧。CD117蛋白具有5个免疫球蛋白样结构域和一个III型酪氨酸激酶生长因子结构域，在调节细胞存活和增殖、造血、干细胞维持、肥大细胞发育、迁移和功能以及黑色素生成等方面发挥重要作用。
CD117蛋白在造血干细胞、黑色素细胞、肥大细胞、Cajal细胞、生殖细胞、皮肤基底细胞和乳腺导管上皮等正常组织细胞中表达，在胃肠道间质瘤(GIST)、肺小细胞癌和黑色素瘤、肥大细胞疾病、急性髓系白血病(AML)、和尤文氏肉瘤等异常组织中表达。在临床中常用于胃肠道间质瘤(85-95％阳性率)的诊断，也可与CD34联合使用。近年来，CD117蛋白作为GIST的特异性免疫组化标志物，可以用于靶点用药(格列卫)指导治疗GIST患者。
目前临床上常用免疫组织化学(IHC)的免疫学方法来检测肿瘤细胞中蛋白的表达状况，特异性识别CD117蛋白的单克隆抗体对IHC检测CD117表达水平具有重要的意义。免疫学方法(IHC)检测的核心为与CD117蛋白特异性结合的单克隆抗体，其特异性、灵敏度以及稳定性的优劣直接决定整个检测的可靠性。国内使用的抗CD117单克隆抗体多来源于国外进口抗体(克隆号：YR145，EP10，A4502)，造价高昂；为获得与进口试剂效果相当或者优异的抗CD117单克隆抗体，同时减轻病患负担，降低诊断及治疗费用，研制出一种具备临床应用的抗CD117单克隆抗体具有重要的意义。
发明内容
本发明的目的是提供一种用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体，其具有较高的特异性和灵敏度。
本发明还提供了一种人CD117偶联蛋白，其能够作为抗原用于制备上述的用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体。
本发明还提供了一种抗原表位肽，其能够用于制备上述的人CD117偶联蛋白。
本发明还提供了一种杂交瘤细胞株，该杂交瘤细胞株能够生产上述的用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体。
为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：
一种用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体，该单克隆抗体是由人CD117单克隆抗体杂交瘤细胞株分泌获得；所述人CD117单克隆抗体杂交瘤细胞株是以人CD117偶联蛋白为抗原制备而成，所述人CD117偶联蛋白是由抗原表位肽与载体蛋白偶联制备而成；所述抗原表位肽的氨基酸序列为x-NRQKPVVDHSVRINS-y，所述x为0-10个氨基酸构成的辅助序列，所述y为0-10个氨基酸构成的辅助序列。
本发明中根据Uniprot公布的P10721蛋白序列，选择以NRQKPVVDHSVRINS为核心的多肽序列作为抗原表位肽制备单克隆抗体；同时为提高抗原表位肽的免疫效果，在前述的核心序列N端或者C端增加至少1个同时不超过10个氨基酸，使其N端或者C端为含有巯基的氨基酸；将抗原表位肽上的巯基通过偶联剂与载体蛋白上的氨基偶联获得人CD117偶联蛋白；以该人CD117偶联蛋白为抗原，用其对动物进行免疫，获得人CD117单克隆抗体。国内使用的抗CD117单克隆抗体多来源于国外进口抗体，本发明中为国内生产人CD117抗体提供了一个新的途径，获得单克隆抗体具有较高的特异性和灵敏度；且价格便宜，能够减轻病患负担，降低诊断费用。
本发明中的人CD117单克隆抗体是由人CD117杂交瘤细胞株分泌获得；所述人CD117杂交瘤细胞株由人CD117偶联蛋白为抗原制备得到。在抗体制备过程中抗原的选择最为关键，而其他过程如动物免疫、细胞融合、腹水注射和纯化过程为本领域的常规方法。本发明中的抗原表位肽通过常规的化学方法进行合成得到。
优选的，所述的抗原表位肽和载体蛋白通过SMCC法进行偶联。SMCC是一类含有N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)活性酯和马来酰亚胺的双功能偶联剂，可以将分别含有巯基和氨基的化合物键接在一起。因此，可以在抗原表位肽上连接具有巯基的氨基酸或氨基酸序列，或者直接合成含有辅助序列的抗原表位肽。具体的，所述x为1-10个氨基酸构成的辅助序列，该辅助序列的N端为含有巯基的氨基酸。具体的，所述y为1-10个氨基酸构成的辅助序列，该辅助序列的C端为含有巯基的氨基酸。
更为优选的，所述x为CSP，y为0，组成的抗原表位肽的氨基酸序列为CSPNR QKPVVDHSVR INS。本发明中使用前述的人CD117抗原表位肽制备成抗原，免疫小鼠获得的杂交瘤细胞株较多，杂交瘤细胞株分泌的抗体特异性强和灵敏度高。
具体的，所述载体蛋白为血蓝蛋白、牛血清白蛋白、鸡卵白蛋白中的任一种。载体蛋白首选是KLH(血蓝蛋白)，也可以使用BSA(牛血清白蛋白)和OVA(鸡卵白蛋白)，三者为常规载体蛋白。
一种人CD117偶联蛋白，是由抗原表位肽与载体蛋白偶联制备得到；所述抗原表位肽的氨基酸序列为x-NRQKPVVDHSVRINS-y；所述x为0-10个氨基酸构成的辅助序列，所述y为0-10个氨基酸构成的辅助序列。
本发明中提供的人CD117偶联蛋白，是在人CD117抗原表位核心序列的N端或者C端增加至少1个同时不超过10个氨基酸，使其N端或者C端为含有巯基的氨基酸；将抗原表位肽上的巯基通过偶联剂与载体蛋白上的氨基偶联获得人CD117偶联蛋白；使用前述的人CD117偶联蛋白作为CD117抗原，免疫小鼠获得的杂交瘤细胞株较多，杂交瘤细胞株分泌的抗体特异强和灵敏度高。
优选的，所述x为1-10个氨基酸构成的辅助序列，该辅助序列的N端为含有巯基的氨基酸。优选的，所述y为1-10个氨基酸构成的辅助序列，该辅助序列的C端为含有巯基的氨基酸。
更为优选的，所述x为CSP，y为0，组成的抗原表位肽的氨基酸序列为CSPNR QKPVVDHSVR INS。
优选的，所述载体蛋白为血蓝蛋白、牛血清白蛋白、鸡卵白蛋白中的任一种。
一种抗原表位肽，所述抗原表位肽的氨基酸序列为x-NRQKPVVDHSVRINS-y；所述x为0-10个氨基酸，所述x的N端为含有巯基的氨基酸；所述y为0-10个氨基酸，所述y的C段为含有巯基的氨基酸。
本发明中提供的抗原表位肽，是根据Uniprot公布的P10721蛋白序列，通过结构分析获得，其能够用于制备人CD117抗原，用其免疫获得的单克隆抗体具有较高的特异性和灵敏度。
优选的，所述x为1-10个氨基酸构成的辅助序列，该辅助序列的N端为含有巯基的氨基酸。优选的，所述y为1-10个氨基酸构成的辅助序列，该辅助序列的C端为含有巯基的氨基酸。
更为优选的，所述x为CSP，y为0，组成的抗原表位肽的氨基酸序列为CSPNR QKPVVDHSVR INS。
优选的，所述载体蛋白为血蓝蛋白、牛血清白蛋白、鸡卵白蛋白中的任一种。
一种杂交瘤细胞株，是以人CD117偶联蛋白为抗原制备而成；所述人CD117偶联蛋白是由抗原表位肽与载体蛋白偶联制备而成；所述抗原表位肽的氨基酸序列为x-NRQKPVVDHSVRINS-y，所述x为0-10个氨基酸构成的辅助序列，所述y为0-10个氨基酸构成的辅助序列。
本发明中的提供的杂交瘤细胞株，可以由人CD117偶联蛋白为抗原采用常规的动物免疫、细胞融合的免疫学方法获得，所获得杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体具有较高的特异性和灵敏度。
优选的，所述x为1-10个氨基酸构成的辅助序列，该辅助序列的N端为含有巯基的氨基酸。优选的，所述y为1-10个氨基酸构成的辅助序列，该辅助序列的C端为含有巯基的氨基酸。
更为优选的，所述x为CSP，y为0，组成的抗原表位肽的氨基酸序列为CSPNR QKPVVDHSVR INS。
优选的，所述载体蛋白为血蓝蛋白、牛血清白蛋白、鸡卵白蛋白中的任一种。
附图说明
图1为本发明中单克隆抗体的Westernblot结果图；
图2为本发明中免疫组化法检测阑尾组织中CD117表达情况图；
图3为本发明中免疫组化法检测睾丸组织中CD117表达情况图。
具体实施方式
下述实施例仅对本发明作进一步详细说明，但不构成对本发明的任何限制。
实施例1
本实施例中的抗原表位肽，氨基酸序列为NRQKPVVDHSVRINS。该序列是根据Uniprot公布的P10721蛋白序列所设计，为CD117蛋白抗原表位的核心多肽序列。
实施例2
本实施例中的抗原表位肽，氨基酸序列为CSPNRQKPVVDHSVRINS。该抗原表位肽是在实施例1中的核心多肽序列的基础上在N端添加了“CSP”辅助序列，该抗原表位肽可以通过化学方法直接合成。
实施例3
本实施例中的人CD117偶联蛋白包括两部分，合成人CD117抗原表位肽和载体蛋白。合成的人CD117抗原表位肽序列为CSPNRQKPVVDHSVRINS；载体蛋白为KLH(血蓝蛋白)。
本实施例中的人CD117偶联蛋白由生物公司进行多肽合成以及偶联。
实施例4
本实施例中的杂交瘤细胞株，由包括如下步骤的方法制得：
1、动物免疫：将合成人CD117抗原表位肽和KLH偶联后的抗原(人CD117抗原的实施例1)与水溶性佐剂按照1:1体积比混合，采用肌肉注射方法免疫6-8周龄BALB/c小鼠，免疫剂量为50μg/只，间隔三周后进行第二次免疫，免疫剂量同第一次。
免疫两次后取尾血以ELISA法梯度稀释测定血清效价：
a、将合成人CD117抗原表位肽和KLH偶联后的抗原按照50ng每孔包被ELISA检测板；
b、采集血清按照1:1000、1:2000、1:4000、1:8000、1:16000、1:32000、1:64000倍比稀释，同时设置阴性对照孔，37度孵育30min，PBST洗涤3次，每次5min；
c、HRP标记羊抗鼠IgG按照1:5000稀释，37度孵育30min，PBST洗涤3次，每次5min；
d、加入底物TMB显色，读数。
根据结果确定是否加强免疫，选取抗体效价最高的小鼠进行细胞融合。本实施例中共免疫3只小鼠，血清效价数据分别为：1:16000、1:32000、1:16000；对比后选择2号小鼠进行下一步实验。
2、细胞融合：骨髓瘤细胞采用BALB/c来源的sp2/0，融合时处于对数生长期；取已免疫小鼠脾脏，制成淋巴细胞单细胞悬液；将小鼠脾淋巴细胞与骨髓瘤细胞以1:5混合，滴加37℃的50％PEG(pH8.0)1mL，加入不完全培养基及其余终止液，离心弃上清后加入HAT培养基悬浮混匀，定容到50mL，滴加到96孔细胞培养板中，置于37℃、5％CO2恒温培养箱中进行培养。
3、筛选和克隆：挑选融合7-10天内的细胞克隆，使用CD117多肽进行间接ELISA检测，从808孔中筛选出136株单克隆细胞株。从136株细胞株中通过阑尾组织石蜡切片筛选出8个特异性较高的细胞株。对阳性孔细胞进行有限稀释，每次有限稀释后5-6天测定ELISA值，挑取OD450阳性值较高的单克隆孔进行有限稀释，直至ELISA测定96孔板全板结果为阳性。挑取阳性值高的单克隆细胞株。
实施例5
本实施例中的用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体，由包括如下步骤的方法制得：
腹水单克隆抗体的制备与纯化：取8-10周龄的BALB/c小鼠腹腔注射0.5mL液体石蜡，一周后用1mL注射器腹腔注射经PBS洗涤重悬的单克隆细胞悬液，该细胞株为实施例4的8株中最优的一株，细胞用量为5×106/只，注射3只处理后小鼠。待小鼠腹水积聚后收集腹水，离心取上清，Protein A柱层析法进行腹水纯化，纯化后的单抗浓度测定、分装、冻存在-20℃。
试验例1以实施例5中纯化的单克隆抗体为一抗的蛋白印迹(Western-Blot)检测
1、样品制备：准备小鼠脑组织样品、***瘤组织(睾丸组织)，研磨破碎后用含1mM PMSF的RAPI裂解后，加入5×SDS-PAGE Loading buffer制样。
2、电泳以及转膜：按照80V 20min，然后120V电泳至溴酚蓝至凝胶底部。然后开始转膜，提前用转移缓冲液浸泡NC膜与滤纸，三明治形式置于湿转转膜仪，顺序为：电极(-)-海绵-滤纸-凝胶-NC膜-滤纸-海绵-电极(+)，恒压90V、90min。
3、封闭：用封闭液(含5％脱脂奶的TBST)浸没NC膜并置于37℃孵育2小时。
4、一抗孵育：将NC膜置于CD117鼠单抗(以封闭液将抗体按1:4000稀释)中，37℃温箱孵育1h后，再用TBST洗膜3次，每次5min。
5、二抗孵育：将NC膜置于HRP标记的羊抗鼠IgG二抗(以封闭液将抗体按1:5000稀释)中，37℃摇床孵育30min后，TBST洗膜3次，每次5min。
6、显色：ECL发光液中A与B组分按1：1混匀后加在NC膜上，在曝光仪中曝光。
蛋白印迹检测结果如图1所示，其中M为Marker，1为小鼠脑组织裂解液；2为睾丸组织裂解液。CD117蛋白为糖蛋白，在不同组织中会存在因为蛋白翻译后修饰的不同，造成分子量产生差异，因此两种组织中的CD117蛋白的大小存在差异。
试验例2纯化的单克隆抗体为一抗的免疫组化检测
1、分别取阑尾、睾丸组织的蜡块，使用Leica组织切片机进行切片，组织厚度为3μm，65℃干烤2h。
2、使用Leica Bond Max免疫组化自动染色机对本发明中抗体进行免疫组化染色测试，使用机器自带的脱蜡与水化条件，具体步骤为：60℃孵育30min，应用脱蜡溶液(Leica)洗3遍。抗原修复采用抗原修复液2(ER2，Leica)，100℃孵育30min。
一抗使用本发明抗体，采用抗体稀释液(Leica)稀释到终浓度为0.5μg/mL，150μL。抗体室温孵育30min。使用配套的二抗(Leica)150μL，室温孵育8min。使用多聚物检测液(Leica)150μL，室温孵育8min。使用内源性过氧化物酶封闭液150μL室温孵育5min。使用DAB显色液(Leica)150μL，室温孵育10min。苏木素复染，室温孵育5min。
3、脱水和透明：去离子水清洗3min；85％乙醇1min；95％乙醇1min；100％乙醇2min、2次；二甲苯2min、3次；中性树胶封片。
4、镜检：在显微镜下观察组织中CD117蛋白的表达水平。
镜检结果如图2和图3所示所示，图2为阑尾组织(40×)，图3为睾丸组织(40×)，从图中可以看出细胞内CD117蛋白定位于细胞膜、细胞质，在阑尾、睾丸组织中呈现特异性表达。
<110> 河南赛诺特生物技术有限公司
<120> 一种用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体、偶联蛋白、抗原表位肽以及杂交瘤细胞株
<160> 2
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列
<221> 人CD117抗原表位肽
<400> 1
Asn Arg Gln Lys Pro Val Val Asp His Ser Val Arg Ile Asn Ser
1 5 10 15
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<221> 合成人CD117抗原表位肽
<400> 2
Cys Ser Pro Asn Arg Gln Lys Pro Val Val Asp His Ser Val Arg
1 5 10 15
Ile Asn Ser
16 18

Claims (10)

1.一种用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体，其特征在于：是由人CD117单克隆抗体杂交瘤细胞株分泌获得；所述人CD117单克隆抗体杂交瘤细胞株是以人CD117偶联蛋白为抗原制备而成，所述人CD117偶联蛋白是由抗原表位肽与载体蛋白偶联制备而成；所述抗原表位肽的氨基酸序列为x-NRQKPVVDHSVRINS-y，所述x为0-10个氨基酸构成的辅助序列，所述y为0-10个氨基酸构成的辅助序列。
2.根据权利要求1所述的用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体，其特征在于：所述x为1-10个氨基酸构成的辅助序列，该辅助序列的N端为含有巯基的氨基酸。
3.根据权利要求1所述的用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体，其特征在于：所述y为1-10个氨基酸构成的辅助序列，该辅助序列的C端为含有巯基的氨基酸。
4.根据权利要求1所述的用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体，其特征在于：所述抗原表位肽的氨基酸序列为CSPNRQKPVVDHSVRINS。
5.根据权利要求1-4任一项所述的用于检测人CD117蛋白的单克隆抗体，其特征在于：所述载体蛋白为血蓝蛋白、牛血清白蛋白、鸡卵白蛋白中的任一种。
6.一种人CD117偶联蛋白，其特征在于：是由抗原表位肽与载体蛋白偶联制备得到；所述抗原表位肽的氨基酸序列为x-NRQKPVVDHSVRINS-y；所述x为0-10个氨基酸构成的辅助序列，所述y为0-10个氨基酸构成的辅助序列。
7.根据权利要求6所述的人CD117偶联蛋白，其特征在于：所述抗原表位肽的氨基酸序列为CSPNRQKPVVDHSVRINS。
8.一种抗原表位肽，其特征在于：该抗原表位肽的氨基酸序列为x-NRQKPVVDHSVRINS-y；所述x为0-10个氨基酸，所述x的N端为含有巯基的氨基酸；所述y为0-10个氨基酸，所述y的C段为含有巯基的氨基酸。
9.根据权利要求8所述的抗原表位肽，其特征在于：所述抗原表位肽的氨基酸序列为CSPNRQKPVVDHSVRINS。
10.一种杂交瘤细胞株，其特征在于：是以人CD117偶联蛋白为抗原制备而成；所述人CD117偶联蛋白是由抗原表位肽与载体蛋白偶联制备而成；所述抗原表位肽的氨基酸序列为x-NRQKPVVDHSVRINS-y，所述x为0-10个氨基酸构成的辅助序列，所述y为0-10个氨基酸构成的辅助序列。
CN201911184302.8A 2019-11-27 2019-11-27 一种用于检测人cd117蛋白的单克隆抗体、偶联蛋白、抗原表位肽以及杂交瘤细胞株 Active CN110818794B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911184302.8A CN110818794B (zh) 2019-11-27 2019-11-27 一种用于检测人cd117蛋白的单克隆抗体、偶联蛋白、抗原表位肽以及杂交瘤细胞株

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911184302.8A CN110818794B (zh) 2019-11-27 2019-11-27 一种用于检测人cd117蛋白的单克隆抗体、偶联蛋白、抗原表位肽以及杂交瘤细胞株

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110818794A true CN110818794A (zh) 2020-02-21
CN110818794B CN110818794B (zh) 2021-08-31

Family

ID=69542503

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911184302.8A Active CN110818794B (zh) 2019-11-27 2019-11-27 一种用于检测人cd117蛋白的单克隆抗体、偶联蛋白、抗原表位肽以及杂交瘤细胞株

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110818794B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112946300A (zh) * 2021-03-19 2021-06-11 苏冬梅 基于“Western Blot”法的阿尔茨海默病早期检测试剂盒及其制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH06141852A (ja) * 1992-10-30 1994-05-24 Nichirei Corp 抗体及びそれを産生するハイブリド−マ
CN103694351A (zh) * 2007-06-05 2014-04-02 耶鲁大学 受体酪氨酸激酶抑制剂及其使用方法
WO2015050959A1 (en) * 2013-10-01 2015-04-09 Yale University Anti-kit antibodies and methods of use thereof

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH06141852A (ja) * 1992-10-30 1994-05-24 Nichirei Corp 抗体及びそれを産生するハイブリド−マ
CN103694351A (zh) * 2007-06-05 2014-04-02 耶鲁大学 受体酪氨酸激酶抑制剂及其使用方法
WO2015050959A1 (en) * 2013-10-01 2015-04-09 Yale University Anti-kit antibodies and methods of use thereof

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
GENBANK: "KIT protein", 《NCBI》 *
吕世静等: "《临床免疫学检验》", 31 August 2015, 中国医药科技出版社 *
曹雪涛等: "《医学免疫学》", 31 December 2018, 中国协和医科大学出版社 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112946300A (zh) * 2021-03-19 2021-06-11 苏冬梅 基于“Western Blot”法的阿尔茨海默病早期检测试剂盒及其制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN110818794B (zh) 2021-08-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2256497B1 (en) Method for quantification of soluble lr11
CN114507287B (zh) 一种抗cldn18.2重组兔单克隆抗体及其应用
CN111410690A (zh) 抗ck19蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用
CN108277214B (zh) 一种应激磷酸化抗原多肽、抗体、制备方法以及应用
CN114480298A (zh) 一株分泌抗tigit单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用
CN114516919B (zh) 一种抗pla2r重组兔单克隆抗体及其应用
CN114075552B (zh) 分泌抗fgl1单克隆抗体的杂交瘤细胞株及其应用
CN110818794B (zh) 一种用于检测人cd117蛋白的单克隆抗体、偶联蛋白、抗原表位肽以及杂交瘤细胞株
Scully et al. AIDS-related Kaposi's sarcoma displays differential expression of endothelial surface antigens.
CN115073602A (zh) 一种抗cd3重组兔单克隆抗体及其应用
CN103698536A (zh) 肿瘤蛋白p185检测试剂盒
CA3082923C (en) Antibody specifically binding to bovine pregnancy-associated glycoprotein 1 and use thereof
CN102084249A (zh) 针对胃泌素释放肽前体的抗体及其应用
EP0226888A2 (en) Monoclonal antibodies specific to galactosyltransferase isoenzyme II and their use in cancer immunoassays
US11906520B2 (en) Composition and methods for detecting cancer
CN112062832B (zh) Galectin-3抗原表位肽、抗原、抗体、杂交瘤细胞株及试剂盒
CN112390895B (zh) Ck20抗原、杂交瘤细胞株、单克隆抗体及其应用
CN103266089A (zh) 抗人和肽素单克隆抗体mcco1及其应用
US7517663B2 (en) Rabbit monoclonal antibody against Id1 protein
US20040142400A1 (en) High affinity monoclonal antibody for recognizing the estrogen receptor (ER) and method for creating the antibody
CN114213542B (zh) Cps-i抗体及其用途
CN114736300B (zh) 一种抗her2重组兔单克隆抗体及其应用
CN107056931A (zh) 一种抗原肽和nod1抗体及应用、制备方法和试剂盒
CN114507286B (zh) 一种抗pd-l1重组兔单克隆抗体及其应用
CN113621064B (zh) 抗cd117蛋白单克隆抗体及其细胞株、制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant