CN110604819A

CN110604819A - 控制释放组合物及其使用方法

Info

Publication number: CN110604819A
Application number: CN201910863593.7A
Authority: CN
Inventors: F·阿尔阿拉维; O·博克; I·G·图克
Original assignee: Bayer New Zealand Ltd
Current assignee: Bayer New Zealand Ltd
Priority date: 2012-02-27
Filing date: 2013-02-27
Publication date: 2019-12-24
Also published as: MX366726B; KR102100271B1; SI2819699T1; CA2865555C; SV2014004796A; ES2740958T3; ZA201406267B; KR20140126340A; NI201400096A; JP2015508098A; EP2819699B1; PT2819699T; CR20140396A; PL2819699T3; CL2014002227A1; RU2627429C2; US20150045337A1; EP2819699A1; HUE045495T2; RU2014135524A

Abstract

本发明涉及一种组合物，所述组合物包括治疗有效量的至少一种活性剂和基剂，所述基剂包括一定量的胶体二氧化硅；至少一种油；和至少一种表面活性剂，其中在1001/s的剪切速率和20℃的温度下，所述组合物的粘度低于1000mPas。

Description

控制释放组合物及其使用方法

本申请是2013年2月27日提交的发明名称为“控制释放组合物及其使用方法”的第201380011138.5号中国专利申请的分案申请。

发明领域

本发明涉及一种控制释放组合物及其使用方法，并且优选地，但不是专门地涉及用于治疗泌乳动物的乳腺炎的低粘度控制释放组合物。

背景技术

为了治疗患有乳腺炎或其它微生物感染的泌乳动物，抗生素组合物是最经常使用的。有许多在泌乳期间用于治疗***内乳腺炎的市售抗生素组合物。

然而，在用抗生素治疗中遇到的主要问题之一是活性剂在治疗期间的不良控制释放。这可能导致在保持活性剂浓度高于杀死90％微生物的最小抑制浓度(称为MIC90)方面出现问题。例如，如果抗生素释放得太快，抗生素可能随着施用后的第一次产奶而流出来。然后，所述抗生素的浓度可能在接受后续施用前的剩余时间内，往往在12个小时之后太低。这可能导致不能有效治疗感染、较长的治疗期，和/或最终对抗生素的耐药性增加。

为了解决这些问题，组合物例如NitroClox^TM(长效)LA和Orbenin^TMLA常常被设计成具有较高的粘度，减慢活性剂从组合物中释放概况的已知技术。事实上，这是对被称为长效制剂的泌乳和不泌乳奶牛乳腺炎疗法采取的方法，其中所述活性剂在一段较长时间内从通常较厚糊剂中慢慢释放。例如，如果抗生素在泌乳期间每48小时施用一次，抗菌素在治疗后约36小时内以高于MIC90的浓度来缓慢释放。然后，所述抗生素的浓度在接受后续施用前的剩余时间内，往往在12个小时之后太低。再次，这可导致不能有效治疗感染。

化学家开发高粘度组合物的其它原因是因为它可以提高组合物的物理稳定性。

然而，在泌乳期间的许多病状例如乳腺炎的治疗中，较高粘度可导致其它问题。例如，高粘度可导致奶中长期存在低水平的抗生素，并且这类奶必须禁止进入市场。较长扣留期(WHP)导致收入损失。

此外，较高粘度组合物需要更大的力来输注或注射制剂。这可能会导致与通过注射器向***输注(本文中称为可注射能力)难度增加相关的问题。

对于乳腺炎的治疗，所述组合物的高粘度也可能导致在***中的较差分布。

对于增加组合物粘度的增稠剂或其它赋形剂的需要也可能使制造过程更费时和代价高的。此外，通常在行业中应理解所述组合物的粘度越高，在制造过程中进行处理可能越困难。

可能在用于治疗乳腺炎组合物的许多悬浮液中遇到的另一个问题是在存储期间的悬浮液的沉淀。当然，组合物的较高粘度可有助于使悬浮液物理稳定，但较高的粘度通常不能防止沉淀，它只减慢沉淀。因此，即使是粘稠的悬浮液将最终沉淀并且沉淀物可随后结块，常常证明很难在施用之前再分散。高粘度的组合物会阻碍沉积物的可再分散性。

因此，在行业中一直需要开发用于治疗动物的泌乳期间病状诸如乳腺炎的经过改进的组合物。在乳腺炎治疗的情况下，这样的组合物的期望的性状可以包括：

-活性剂的可控制释放概况；

-较短的扣留期(WHP)-例如，对于动物的泌乳期间的病状如乳腺炎的治疗；

-存储之后，或施用之前的良好可再分散性；

-可注射性或其它施用方式的简化；

-所述组合物进入所要治疗区域的良好分布；

-所述组合物的基剂适合与用于治疗或预防任何疾病或病状的不同活性剂一起使用，但可使活性剂控制和/或持续释放；

-所述组合物的基剂适合于考虑到不同的治疗方案(即不同的控制释放概况)；和/或

-容易制造，并且使用药学上可接受的赋形剂。

本发明的目标在于解决前述问题或至少为公众提供一种有用的选择。

本说明书所引用的包括任何专利或专利申请在内的所有参考文献都以引用方式并入本文。不承认任何参考文献构成现有技术。参考文献的论述内容陈述了作者所主张的观点，并且申请人保留对所引用文件的准确性和相关性提出质疑的权利。应明确理解的是，虽然本文提到了许多现有技术公布，但这一参考文献并不构成以下承诺：这些文件中的任何文件形成新西兰或任何其它国家的本领域的一般常识的一部分。

本说明书全文中，词“包含(comprise)”或其变化形式，诸如“包含(comprises)”或“包含(comprising)”，将理解为意味着包含陈述元件、整数或步骤，或元件、整数或步骤的群，但不排除任何其它元件、整数或步骤，或元件、整数或步骤的群。

通过仅由实施例给出的以下描述，本发明的其它方面和优点将变得显而易见。

发明公开内容

根据本发明的一个方面，提供了一种组合物，

所述组合物包含治疗有效量的一种或多种活性剂，以及

基剂，其包括，

一定量的胶体二氧化硅

至少一种油；和

至少一种表面活性剂，

其中在1001/s的剪切速率和20℃的温度下，所述组合物的粘度低于1000mPas。

本发明人惊奇地发现，所述组合物在治疗乳腺炎的情况下是特别有效的，因为它可能有助于提供：

-活性剂的可控制释放概况，其例如可用于在治疗期间保持活性剂的浓度高于MIC90；

-有助于可注射性、可再分散性和/或在***中的良好分布的低粘度，和/或

-与其它当前可获得的乳腺炎组合物相比，较短的WHP。

如将进一步论述的，本发明人已经认识到本发明对于乳腺炎的抗生素治疗的特别重要性。然而，本领域技术人员应合理地预期所公开的组合物的相同的发明概念也适用于为治疗其它病状所需要的基本上任何活性剂或化合物的可控制释放概况。

不希望被一定作用模式所限制，据信，这种可控制释放可能是由于表面活性剂与胶体二氧化硅的相互作用，结果是活性剂从所述组合物中释放概况的变化。

重要的是，活性剂的释放概况的这种控制可以在没有过度地改变所述组合物的粘度，尤其是没有组合物粘度大幅度增加的情况下来实现。

如在图2中例示，体外研究表明，本发明人能够在180分钟的时间内将溶解介质中的药物回收(等同于体内的释放概况降低)从约50％w/w降低至5％w/w。这种有益的效果可在所述组合物的粘度仅从90mPas轻微增加至118mPas(在1001/s的剪切速率、20℃的温度下)时获得。如图2所示，这种5％w/w的回收率与通过竞争产品Orbenin^TMLA获得的回收率相似。然而，Orbenin^TMLA具有1080mPas的粘度，约为本发明的此实施例中发现的粘度的10倍。

很显然，如果产生对于较高粘度组合物的需求，这可以通过使用本领域众所周知的增稠剂来实现。

例如，在泌乳期间治疗乳腺炎时，可以获得较低粘度的组合物，这有助于提供许多有利的特性，如简易的可再分散性、可注射性、制造和/或较短的WHP。可以提供这样的特征，同时改变所述组合物的活性剂的释放概况，以满足所需的要求。在例如乳腺炎的治疗中，此受控制释放可以用于确保在整个治疗期间所述活性剂保持高于MIC90。

本发明人进行了如本文中所例示的初步试验，这些试验说明了显著优点。

所述组合物的优选实施方案

活性剂

优选地，所述活性剂是抗生素、若干种抗生素的组合或抗生素与非抗生素活性剂的组合。本发明人承认优选的抗生素是氯唑西林，由于其在治疗乳腺炎中的有效性。

优选地，氯唑西林以氯唑西林钠形式来给出。当然，也可以使用其它形式的氯唑西林，如苄星氯唑西林(cloxacillin benzathine)。

其它优选的活性剂包括β-内酰胺类、青霉素类、头孢菌素类、氨基糖苷类、喹诺酮类、磷霉素、磺胺类、四环素类和大环内酯抗生素。

活性剂的优选组合包括阿莫西林和克拉维酸；青霉素活性剂和氨基糖苷；氯唑西林和泰乐菌素；以及抗生素和非甾体类抗炎药。

然而，基本上任何抗生素、非抗生素活性剂，或它们的功能衍生物可以用于本发明中。

例如，本发明人已经例证当活性剂是泰乐菌素基剂、头孢匹林钠或苄星头孢匹林抗生素时，本发明也以类似的方式起作用。

也令人惊讶地发现，释放速率可根据所用活性剂的种类而受到影响。当二氧化硅和表面活性剂的类型/量保持恒定时，替换不同于头孢匹林和氯唑西林(两者都保持在约4.5％w/w的浓度下)的活性剂产生了非常不同的释放速率。与氯唑西林相比，头孢匹林释放慢得多。这说明了通过调整活性剂(如果合适，二氧化硅和表面活性剂)的类型和可能浓度，基本上可实现任何活性剂的所希望的释放。

优选地，所述活性剂是微粉化的。术语微粉化应被视为是指质量平均直径d50为1-20μm之间的颗粒。此外，较大的颗粒可在所述注射器喷嘴前形成可能影响可注射性的桥接。

在整个说明书中，术语可注射能力或可注射性应被视为意味着易于通过注射器将药物施用至动物。这通常受粘度，以及药物或配制赋形剂的粒径影响，其有时在施用药物期间可能部分地或完全阻塞注射器路径的尖端。

胶体二氧化硅

在本说明书中，术语胶体二氧化硅应视为意指具有介于约1nm与1000nm(1μm)之间的单一的二氧化硅颗粒的最大直径的气相法无定形二氧化硅颗粒。

对胶体二氧化硅的已知特性和用途的进一步论述将在本说明书中稍后提供。这有助于说明本发明的胶体二氧化硅用途非常不同于作为增稠剂和/或抗结块剂的先前已知用途。

优选地，所述胶体二氧化硅是气相法胶体二氧化硅。

许多不同类型的气相法胶体二氧化硅是当前可获得的。本领域技术人员会明白，所有当前可获得和将来类型的气相法胶体二氧化硅会提供与本文所论述相同的优点。如在本说明书中所例示，气相法胶体二氧化硅被发现是特别有效的。

优选地，所述气相法胶体二氧化硅具有疏水性。

本发明人确定与亲水性胶体二氧化硅相比，疏水性胶体二氧化硅可显著更有效地改变所述活性剂的释放概况，同时保持粘度相对较低和/或基本不变。

这是一个令人惊讶的结果，因为使用疏水性胶体二氧化硅的制剂具有比使用它的亲水性对应部分的制剂低的粘度。亲水性胶体二氧化硅已知用作增稠剂，其由于增稠的组合物而赋予较慢的释放概况。

相反，当本发明人使用亲水性二氧化硅时，与使用疏水性二氧化硅相比，将表面活性剂包含在内往往能更大地增加组合物的粘度。这是一个特别令人惊奇的结果，因为在本发明中使用疏水性二氧化硅而不是亲水性二氧化硅往往提供对于活性剂释放的更大控制。

优选市售的疏水性胶体二氧化硅是R972(由Aerosil提供)。

优选地，胶体二氧化硅的浓度在0.1-5％w/w之间。发现这个量在泌乳期间根据本文所论述的优选剂量方案来治疗乳腺炎时是特别有效的。

更优选地，胶体二氧化硅的浓度在1-3％w/w之间。胶体二氧化硅的特别优选的量是在1.75％w/w的数量级。例如，发现这个量允许活性剂在治疗期间(通常为24小时)的合适释放，以保持氯唑西林超过MIC90，同时与竞争参考产品相比，还提供了有利地较短的WHP。这只是本发明的控制释放机制如何可以被有效地利用的一个示例。

如上面所论述的，所使用的胶体二氧化硅的量可以部分地由所使用的活性剂的类型和所需的释放速率来控制。例如，与氯唑西林相比，头孢匹林被展示为显著地更慢地从组合物的基剂释放。

出于这个原因，人们可以决定降低胶体二氧化硅的量，以达到与使用氯唑西林时提供的释放速率类似的释放速率，如果需要的话。

体内协议在行业中是众所周知的，并且提供测定奶中来自给定组合物的活性剂浓度的简单测试。从这些研究中，本领域技术人员将能够容易地调整胶体二氧化硅的量(或与此有关的活性剂或表面活性剂的数量/类型)来实现基本上任何组合物的期望的释放速率。

总的来说，本发明人发现组合物基剂中的胶体二氧化硅浓度越高，活性剂的释放速率越慢。重要的是，这个减慢释放速率可以在没有过度地影响所述组合物的粘度的情况下来实现。在竞争性组合物中，例如NitroClox^TMLA或Orbenin^TMLA，类似的释放速率只能通过更高的粘度来实现，其具有如论述的许多缺点。

表面活性剂

在整个说明书中，术语表面活性剂应被视为意指降低液体的表面张力的任何化合物、降低两种液体之间的界面张力的任何化合物、降低液体和固体之间的界面张力的任何化合物。表面活性剂也可作为乳化剂、洗涤剂、润湿剂等。

优选地，所述表面活性剂是非离子型表面活性剂。

然而，本发明人认为两性、阴离子或阳离子表面活性剂应也起作用。

优选地，所述非离子表面活性剂具有在0.5与30之间的亲水-亲油平衡(HLB)范围。

更优选地，所述非离子表面活性剂具有4与16之间的HLB范围。

更优选地，所述表面活性剂选自由山梨糖醇酯、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧乙烯硬脂酸酯和聚环氧乙烷单油酸酯以及它们的组合。

出乎意料的是，在控制所选择活性剂的释放速率方面，一些表面活性剂似乎比其它表面活性剂更好地起作用。

例如，与0.1％w/w Span 80相比，0.1％w/w的PEG12-油酸酯可更有效地减慢氯唑西林的释放速率，而所有其它变量保持不变。

优选地，所述表面活性剂为0.01至10％w/w之间的浓度。

本发明人发现，在所述组合物的基剂中的表面活性剂越多，活性剂的释放速率越慢。

出于这个原因，表面活性剂的量/类型和/或表面活性剂与胶体二氧化硅的比率可以提供控制活性剂的释放速率的手段。

优选地，胶体二氧化硅与表面活性剂的比率为1:100与500:1之间。

最优选地，胶体二氧化硅与表面活性剂的比率为1:5和6:1之间。

任选地，所述基剂可以包括多于一种类型的表面活性剂。可以合理地预期所得到的组合物的释放概况(以及其它特性，如WHP)可以通过在单一组合物中和/或在治疗过程中施用的不同组合物中使用表面活性剂的组合来更精细地控制。

油

在许多组合物中，需要油作为媒介物。例如，包括活性剂如氯唑西林或头孢匹林的抗生素组合物通常基于油性媒介物。例如，这有助于组合物通过***管输注或注射来进行施用和/或在它的贮藏寿命期间获得足够的化学稳定性。

优选地，所述油具有低的粘度。

使用低粘度的油有助于确保所得到的组合物保持低粘度。这可有助于确保所述组合物在***内具有良好的分布，在存储之后易于再分散，并且易于通过注射器施用。

优选地，所述油的粘度在20℃下在1与100mPas之间。

更优选地，所述油的粘度在20℃下低于40mPas。

更优选地，所述油选自由中链甘油三酸酯(如Miglyol 812或Miglyol 840)、油酸乙酯、轻质液体石蜡、芝麻油和花生油组成的组。然而，应当理解，其它相似的低粘度的油可以用于本发明。

优选地，所述油具有0.80与0.99g/cm³之间的低密度。

如在图6中例示，本发明人发现，使用不同的油改变了活性剂的回收率。这种效应并不如与改变所使用的表面活性剂的类型/数量、胶体二氧化硅或活性剂相比时那样明显。因此，有可能这样的变化可能仅仅归因于油的粘度，以及所得组合物的粘度。因此，在一个优选实施方案中，较低粘度的油被用于保持组合物的较低粘度。

然而，本发明人还认为，油可以与组合物基剂中的一种或多种组分相互作用，从而以与仅仅粘度相关的控制释放不同的方式来影响活性剂的回收率。

最终组合物的粘度

显然，所述组合物的粘度可以进行调整以适应所需要的特定要求。对于一些组合物，可使用相对高的粘度。在其它情况下，低粘度可以通过不添加赋形剂例如增粘剂或高粘度油来保持。如有必要，这类粘度调节剂还可以有助于活性物的释放概况。

下文所论述的优选粘度范围和数值是本发明人已经发现对于泌乳期间***内乳腺炎的治疗尤其有利的那些范围和数值。

除非另有说明，否则本说明书中提及的组合物的粘度基于在1001/s的剪切速率和在20℃的温度下使用同心圆筒法的测量。当在这些条件下测量时，根据本发明的组合物的粘度低于1000mPas。

更优选地，最终的组合物具有低于300mPas的粘度。

最优选地，所述组合物具有低于150mPas的粘度。

NitroClox^TMLA和Orbenin^TMLA在1001/s的剪切速率和20℃的温度下具有高于1000mPas的粘度。同样，不泌乳奶牛乳腺炎疗法或包括胶体二氧化硅的其它组合物通常具有远高于此上限的粘度。

本发明人确定了与竞争组合物如NitroClox^TMLA和Orbenin^TMLA相比时，优选具有低于1000mPas(并且更优选低于300mPas)的粘度的用于在泌乳期间治疗乳腺炎的组合物可在良好的可注射性、可再分散性、***分布和/或短WHP方面提供更好的特性。在确保活性剂的释放概况得到适当地控制，以允许活性剂在整个治疗期间保持基本上高于MIC90时，可维持这些有益的特性。

治疗的优选方法

优选地，本文所述的组合物用于在泌乳期间以***内输注来治疗乳腺炎。

在泌乳期间出现乳腺炎的情况下，所述组合物可在牛、羊或通常用于商业奶生产的其它动物中使用。

这有助于将本发明的优选用途与不泌乳期乳腺炎治疗(即泌乳期以外的治疗)区分开来。

然而，很清楚的是，取决于所选择的活性剂，本发明可用于治疗基本上任何病状或疾病。所述组合物的潜在发明概念不应限于用于***内治疗乳腺炎的组合物。

根据本发明的另一个方面，提供了用基本上如本文所描述的组合物治疗有需要的动物的微生物感染的方法，其中所述方法包括通过***内输注来施用组合物的步骤。

施用所述组合物的方法通常可通过***管来输注。

优选地，所述方法包括1-10g组合物的1-12个剂量之间的剂量方案，其具有每12、24或48小时施用的治疗方案。

更优选地，所述方法包括5g组合物的3个或6个剂量的剂量方案，其中24小时的治疗方案在48小时(3个剂量)至120小时(6个剂量)的治疗期内实施。

这种剂量方案可能足以在泌乳期间成功治疗患有临床前或临床乳腺炎的动物。

在所计算的WHP之后，正常的挤奶生产可以再次重新开始。再次，本发明人发现在将相同的治疗期进行比较时，本发明的WHP可能基本上低于其它当前可获得的制剂例如NitroClox^TMLA。

图14例示了相对于具有108小时WHP的NitroClox^TMLA(治疗方案是在24小时的时间间隔下三个剂量)，具有72小时WHP的本发明的一种组合物。根据下段的假设，由于WHP缩短36小时，这将等同于每头奶牛增加24美元利润。当这乘以大型奶牛场，或甚至整个国家时，人们可以很容易地看到本发明的重要性。

每头奶牛增加24美元的利润采用新西兰乳品行业一般所了解的情形，其概述如下。每次挤奶通常提供大约10L奶(相当于1kg固体奶)，并且农民将1kg固体奶卖给公司如Fonterra得到8美元。此外，每个奶牛通常每12小时挤奶。

本发明的一个特别有利用途可为在治疗期间具有不同释放概况的不同组合物的联合治疗。

为了说明这一点，乳腺炎治疗可以包括在治疗期的前半部分初次使用相对较慢的活性剂释放组合物，但后续治疗可以使用更快的活性剂释放组合物。

这可能是有帮助的，因为在治疗期的开始可能需要较少的治疗。它也可有助于确保活性剂保持高于MIC90。在治疗期结束时，较快的释放组合物可以基本上用于补足活性剂的水平。然而，因为所述活性剂较快释放，所以WHP期仍然可以保持较短。

优选的制造方法

根据本发明的另一个方面，提供一种制造基本上如上描述的组合物的方法，其包括以下步骤：

a)将所述油和表面活性剂在容器中混合以形成均匀的油混合物；

b)将所述活性剂分散于所述油混合物中；并且

c)然后将所述胶体二氧化硅添加至所述油混合物。

任选地，在步骤a)中将至少一种防腐剂与油和表面活性剂混合。例如，对羟基苯甲酸甲酯和对羟基苯甲酸丙酯可用作防腐剂。

优选地，从步骤a)中形成的油混合物进行热灭菌。例如，本发明人利用在140℃下的3小时孵育，并且随后使混合物冷却。

优选地，步骤b)和步骤c)利用高剪切分散设备。

优选地，在步骤c)中的胶体二氧化硅在被加入到油混合物之前也进行热灭菌。

优选地，步骤c)之后形成的油混合物是均匀混合的。

本发明人确定所述组合物的优选低粘度也有助于制造过程。不像其它的组合物，不存在搀进增稠剂(如羟基甘油)所需要的额外加热步骤。

此外，在制造组合物后并且在施用前、当需要填充注射器时，较低的粘度可能有帮助。

微粉化活性剂的优选使用也有助于防止所述组合物的快速沉淀。此外，本发明人认为与非微粉化的等效物相比，微粉化活性剂的释放可能更容易控制，这有可能是因为粒径分布可能更一致。还有，与来自所述组合物中的其它组分的任何相互作用有可能通过较小微粉化颗粒的较大表面面积而得到增强。

胶体二氧化硅的额外背景

气相法胶体二氧化硅，如胶体二氧化硅通常用作粘度调节剂，更具体地说用作液体制剂中的增稠剂。胶体二氧化硅如何使用的一些实例如下。根据本领域中的通常理解，胶体二氧化硅已知有助于改变活性剂从组合物中的释放，但只有在它作为增稠剂时才如此。如之前论述的，通常组合物变得越厚，活性剂的释放概况越慢，反之亦然。这是与本发明完全不同的概念。

NZ523128公开了一种兽医用顿服产品，其包括溶解于溶剂中，然后吸附在吸着介质，例如Aerosil R972气相法二氧化硅上的活性剂，然后将溶剂分散到另一种液体中，所述液体包含溶解或悬浮于其中的另一种活性剂。

WO 03070155公开了用于口服施用的制剂，其包含与表面活性剂和胶体二氧化硅一起悬浮于油性基质中的活性剂。所述组合物通过添加氢化植物油，包括黄蜂蜡作为助悬剂，卵磷脂来制成粘稠溶液。二氧化硅被用作分散助剂，并且盐酸假麻黄碱在明胶胶囊中使用。

WO0160409公开了一种糊状制剂，包括活性剂、气相法二氧化硅、粘度调节剂、吸收剂、着色剂和载体。粘度调节剂包括聚PEG200-600、单乙胺、甘油和丙二醇。

WO9824436公开了一种凝胶制剂，其包括胶体二氧化硅和三醋精。

JP 3153623(基于摘要的英文翻译)公开了一种用于口服施用的半固体药物组合物。所述组合物包括药物、生理上允许的液体、可食用的油、胶体二氧化硅、硬脂酸铝或高分子量聚乙二醇。

US 4980175公开了一种用于口服施用的液体组合物，其包括悬浮于中链甘油三酯中的抗酸剂成分(氢氧化铝等)和胶体二氧化硅。包括乳化剂(六甘油单油酸酯)以减少油的味道。

US 4781920公开了一种驱虫糊剂，其包括矿物油、聚山梨酯20表面活性剂、气相法二氧化硅和四咪唑树脂酸盐。

这些文献没有公开组分(特别是表面活性剂和胶体二氧化硅)的组合将相互作用以提供活性剂的控制释放机制。此外，确实包括表面活性剂和胶体二氧化硅的那些组合物被描述为不属于本发明范围之内的粘稠液体组合物或糊剂(具有低于1000mPas的粘度的组合物)。在这些组合物中使用的胶体二氧化硅通常用作粘度调节剂(增稠剂)，以直接赋予控制释放。

在其它情况下，气相法胶体二氧化硅作为自由流动剂用于片剂或粉末制剂。AEROSIL在其网站上论述胶体二氧化硅的其它典型应用，如防结块剂和稳定剂(www.aerosil.com)。

气相法胶体二氧化硅以颗粒形式存在(取决于聚集和/或附聚的水平，被称为一级、二级或三级颗粒)。

在机械应力下，二氧化硅三级结构被分解为一级或二级聚集物，所述***变得更加具有流动性，且粘度下降。一旦返回到静止，聚集二氧化硅颗粒的三级结构再次建立起来，粘度返回到其原始值。

如在Technical Information 1279,Aerosil,Degussa中说明，疏水性(“R”)等级已在制造过程中被处理以获得疏水性表面。在此过程中，硅烷醇基团反应。有趣的是，与亲水性类型相比，疏水性类型往往表现出较低的增稠效率。

因此，对于液体剂型，亲水性气相法二氧化硅被建议用于粘度控制，因此用于较慢的活性剂释放，并且疏水性气相法二氧化硅被建议用于稳定，以防止硬质沉积物(即结块)的形成，特别是在存储期间(www.aerosil.com)。

制剂化学中使用的一般原理是：制剂中的增稠剂浓度增加、粘度越大，活性剂从所得制剂中的释放速率越慢。

因此，令人惊讶地发现，改变本发明组合物的组分基本上影响活性剂的释放概况而没有过分影响粘度。这清楚地在本说明书中提供的实施例中例示。

如在图10中例示，从优选组合物中的氯唑西林释放可被精细地控制并且在奶中的浓度增大至高于MIC90＝0.5mg/L(在新西兰关于氯唑西林，数字取自Salomon等人,1998JDairy Sci 81:570-578)历时治疗后超过48小时(实施例17)。这是不能用当前在市场上具有48个小时治疗方案的产品，例如NitroClox^TMLA(图13)和Orbenin^TMLA(图15)来获得的，尽管粘度在比较时高得多。

胶体二氧化硅已经用于由Pfizer制造的Orbenin^TMLA制剂中，但只用于常规用途，如增稠剂和/或抗结块剂。其它增稠剂，羟基甘油，与胶体二氧化硅一起加入以增加制剂的粘度，从而用来实现活性剂的缓慢释放。与本发明不同，表面活性剂未包含于Orbenin^TMLA制剂中。

由于在Orbenin^TMLA组合物中使用增稠剂，它具有比本发明实现的粘度高得多的粘度(如实施例中所述)。如前面所论述的，这会导致可注射性的问题。因此，本发明人认为能够实现较低粘度，同时能有效地控制活性剂释放的本发明具有超过Orbenin^TMLA的显著优点。

WO 87/03876还公开了在不泌乳期间的乳腺炎的治疗/预防制剂。WO 87/03876论述了使用添加有另外的增稠剂的胶体二氧化硅，以提供粘稠制剂。另一方面，这种高粘性制剂的结果是提供了活性剂在更长治疗期的控制释放(与泌乳期相反，在不泌乳期)。这不同于本发明中的胶体二氧化硅的使用。

WO 03/063877也公开了在不泌乳期间使用胶体二氧化硅来治疗乳腺炎。再次，其目的是提供一种使用胶体二氧化硅作为增稠剂用于缓慢释放抗生素的高粘度制剂。

US 4,401,674公开了含有青霉素和分子筛的***内制剂。胶体二氧化硅不同于分子筛。分子筛通常为几微米(μm)的直径，使它们显著地大于胶体二氧化硅颗粒。不同于胶体二氧化硅，分子筛没有增稠性能，并且因此，通常不作为增稠剂使用。

US 4,401,674的第1栏，第54至58行论述，如果制剂是用于泌乳奶牛，乳化剂(或者椰子油)可以被添加到组合物中以“加速所述组合物与***中的水性分泌物的混合”。这是完全不同于本发明的概念，其中表面活性剂似乎与二氧化硅结构化学相互作用，以赋予释放速率的变化。例如，活性剂的释放速率随着表面活性剂浓度增加而减慢。取决于表面活性剂、二氧化硅和/或活性剂的类型/量，活性剂从所述组合物中的释放速率可以改变，重要地是不过度地影响粘度。

此外，US 4,401,674没有公开或教导乳化剂会改变活性剂的释放速率。它仅仅是为了加速所述组合物的混合。

附图简述

通过仅借助实施例给出的以下描述并且参阅附图，本发明的另外方面将变得显而易见，在附图中：

图1乳腺炎治疗组合物(泌乳期治疗)之间的动态粘度对比

图2表面活性剂对活性剂回收率的影响(体外)

图3表面活性剂对活性剂回收率的影响(体外)

图4胶体二氧化硅浓度对于活性剂回收率的影响(体外)

图5胶体二氧化硅的类型(疏水性对亲水性)对于活性剂回收率的影响(体外)

图6油对于活性剂回收率的影响(体外)

图7治疗后2小时组织中的氯唑西林生物利用度的例证(体内)

图8活性剂类型对奶中的活性剂浓度的影响(体内)

图9活性剂类型对奶中的活性剂浓度的影响(体内)

图10组合物特性对于WHP的影响(体内)

图11实施例组合物1的治疗数量对于WHP的影响(体内)

图12基于ACVM准则的实施例1组合物的WHP测定(体内)

图13实施例1组合物与NitroClox^TMLA之间的治疗的比较(体内)

图14实施例1组合物与NitroClox^TMLA之间的WHP的比较(体内)

图15实施例1组合物与Orbenin^TMLA之间的治疗的比较(体内)

图16实施例1组合物与Orbenin^TMLA之间的WHP的比较(体内)

用于执行本发明的最佳模式

第1部分：实施例组合物

实施例1
				mg	w/w-％
氯唑西林钠	231	4.62％
			对羟基苯甲酸甲酯	3.75	0.075％
对羟基苯甲酸丙酯	1.25	0.025％
			Aerosil R972Pharma	87.5	1.75％
Span 80	25	0.50％
			Miglyol 812	4651.5	93.03％
总计	5000	100.00％

实施例2
				mg	w/w-％
头孢匹林钠	220.9	4.42％
			对羟基苯甲酸甲酯	3.75	0.075％
对羟基苯甲酸丙酯	1.25	0.025％
			Aerosil R972Pharma	87.5	1.75％
Span 80	25	0.50％
			Miglyol 812	4651.5	93.03％
总计	5000	100.00％

实施例3
				mg	w/w-％
氯唑西林钠	231	4.62％
			Aerosil R972Pharma	100	2.00％
Span 80	25	0.50％
			Miglyol 812	4644	92.88％
总计	5000	100.00％

实施例4
				mg	w/w-％
氯唑西林钠	231	4.62％
			Aerosil R972Pharma	150	3.00％
Span 80	100	2.00％
			Miglyol 812	4519	90.38％
总计	5000	100.00％

实施例5
				mg	w/w-％
氯唑西林钠	459	9.18％
			Aerosil R972Pharma	87.5	1.75％
Span 80	100	2.00％
			Miglyol 812	4354	87.07％
总计	5000	100.00％

实施例6
				mg	w/w-％
氯唑西林钠	459	9.18％
			Aerosil R972Pharma	112.5	2.25％
PEG12油酸酯	5	0.10％
			Miglyol 812	4423.5	88.47％
总计	5000	100.00％

实施例7
				mg	w/w-％
氯唑西林钠	459	9.18％
			Aerosil R972Pharma	112.5	2.25％
PEG12油酸酯	2.5	0.05％
			Miglyol 812	4426	88.52％
总计	5000	100.00％

实施例8
				mg	w/w-％
氯唑西林钠	459	9.18％
			Aerosil R972Pharma	112.5	2.25％
Span 80	2.5	0.05％
			Miglyol 812	4426	88.52％
总计	5000	100.00％

实施例9
				mg	w/w-％
氯唑西林钠	459	9.18％
			Aerosil R972Pharma	112.5	2.25％
Span 80	5	0.10％
			Miglyol 812	4423.5	88.47％
总计	5000	100.00％

实施例10
				mg	w/w-％
氯唑西林钠	459	9.18％
			Aerosil R972Pharma	112.5	2.25％
Span 80	25	0.50％
			Miglyol 812	4403.5	88.07％
总计	5000	100.00％

实施例11
				mg	w/w-％
氯唑西林钠	459	9.18％
			Aerosil R972Pharma	112.5	2.25％
Span 80	50	1.00％
			Miglyol 812	4378.5	87.57％
总计	5000	100.00％

实施例12
				mg	w/w-％
氯唑西林钠	459	9.18％
			Aerosil R972Pharma	112.5	2.25％
Span 80	100	2.00％
			Miglyol 812	4328.5	86.57％
总计	5000	100.00％

实施例13
				mg	w/w-％
氯唑西林钠	459	9.18％
			Aerosil R972Pharma	150	3.00％
Span 80	100	2.00％
			Miglyol 812	4291	85.82％
总计	5000	100.00％

实施例14
				mg	w/w-％
氯唑西林钠	459	9.18％
			Aerosil 200Pharma	150	3.00％
Span 80	100	2.00％
			Miglyol 812	4291	85.82％
总计	5000	100.00％

实施例15
				mg	w/w-％
氯唑西林钠	459	9.18％
			Aerosil R972Pharma	150	3.00％
Span 80	100	2.00％
			花生油	4291	85.82％
总计	5000	100.00％

实施例16
				mg	w/w-％
氯唑西林钠	200	2.00％
			泰乐菌素基剂	250	2.50％
Aerosil R972Pharma	400	4.00％
			Span 80	200	2.00％
对羟基苯甲酸甲酯	0.4	0.004％
			对羟基苯甲酸丙酯	0.2	0.002％
Miglyol 812	8949.4	89.49％
			总计	10000	100.00％

实施例17
				mg	w/w-％
氯唑西林钠	437	8.74％
			Aerosil R972Pharma	150	3.00％
Span 80	100	2.00％
			对羟基苯甲酸甲酯	0.4	0.008％
对羟基苯甲酸丙酯	0.2	0.004％
			Miglyol 812	4312.4	86.25％
总计	5000	100.00％

注意，在实施例1-17(以及下面示出的实施例18)中使用的氯唑西林钠是微粉化形式。

第2部分：活性剂的控制释放速率的例证

图1示出了与目前市场上的参考产品相比，本发明优选组合物的相对低粘度。溶解介质中的回收率(在图2-6中示出)被本发明人认为是指示体内释放速率。

图2清楚地示出了本发明的主要优点之一。相比于Orbenin^TMLA，图2中的两个试验组合物具有非常低的粘度(90-150mPas相比于1080mPas)。Orbenin^TMLA能够通过使用增粘剂(羟基甘油)，来保持相对缓慢的氯唑西林释放(约5％)。与目前的组合物相比，Orbenin^TMLA的粘度可以在图1中可视化。

在图2中所描绘的两种试验组合物不包含增粘剂以赋予缓慢回收概况。替代地，仔细选择表面活性剂(Span80相比于PEG12-油酸酯)可用于显著改变氯唑西林的回收概况，而不使粘度显著上升。含有PEG12-油酸酯的试验组合物具有与Orbenin^TMLA基本相同(即使不是更慢)的回收概况，但是粘度有益地仍然相对较低(180mPas)。

图3示出了活性剂的回收率不仅会受到表面活性剂类型的选择影响，而且受到其浓度影响。这由Span80的浓度(HLB＝4.3)从0.05％上升到1％(实施例8至11)来例示。只发现粘度的较小上升，但是提供活性剂回收的不成比例的减少。

类似地，展示PEG12-油酸酯的浓度(HLB＝13.7)(实施例6和7)的变化，并且回收概况相应地改变。因此，这说明了不同类型和浓度的表面活性剂可用于在体内控制组合物的释放概况。

图4示出了胶体二氧化硅的浓度也影响活性剂的回收率。发现当胶体二氧化硅(在此情况下Aerosil R972)的浓度从1.75％w/w增加至3％w/w时，回收率降低。

再次，虽然当二氧化硅浓度从1.75％增加到3％时，回收概况明显减慢，但是粘度仅从90mPas稍微增加至127mPas。

图5示出了胶体二氧化硅的类型也可以影响活性剂的回收率。在这里，展示与亲水性胶体二氧化硅(Aerosil 200)相比，疏水性胶体二氧化硅(Aerosil R972)显著降低回收率。这是一个与和使用亲水性二氧化硅的相同组合物相比，疏水性二氧化硅赋予组合物较低粘度反其道而行之的。这违背了本领域中的共识。

图6示出所使用的油的类型也可以影响活性剂的回收率。

图7示出了治疗后两小时氯唑西林在不同组织中的分布。在这种情况下，组织定义为直接在挤奶后的***其余部分，它包括细胞外液、血管和潜在的未挤出来的一些剩余奶。

图8和图9示出在其它条件基本上相等的情况下，不同的活性剂如何也可以对活性剂本身的释放概况具有影响。在图8中，在实施例组合物1中的氯唑西林被替换为头孢匹林(如实施例组合物2所示)时，释放概况基本上减慢。在图9中，也可在氯唑西林与泰乐菌素之间发现差异。这确实是一个令人惊讶的结果，并表明，所述活性剂的释放可能受通过所述组合物的基剂中的一些或全部赋形剂形成的可能结构性网络的相互作用的影响。

图10-14示出了组合物的WHP可能如何受所述组合物的特性影响。

图10示出了如何胶体二氧化硅的量从1.75％增加至3.00％w/w可显著改变WHP。

图11示出治疗的数量不会影响WHP。不管是否用6X24小时或3X24小时方案治疗动物，所述WHP近似相等。

图12显示根据ACVM(农业化合物和兽药)准则的实施例1组合物的计算WHP。

图13示出实施例1组合物相对于NitroClox^TMLA的有效性。特别令人感兴趣的是，每次治疗后，与NitroClox^TMLA相比，以实施例1组合物施用时，活性剂的量较高，这表明治疗后24小时，实施例1的生物利用度较高。类似于NitroClox^TMLA，治疗后24小时实施例1组合物未降低至低于MIC90(实线)，但是在0小时在最终治疗后从奶中更迅速地去除。

图14反映了在图13所示的结果。与NitroClox^TMLA的108小时相比，实施例1组合物计算为具有仅72小时的WHP。

图15将实施例1组合物与Orbenin^TMLA比较，尽管具有不同的治疗方案(分别为6X24小时与3X48小时)。可以看出，虽然与使用Orbenin^TMLA的治疗方案相比，使用实施例1组合物的治疗方案提供了奶中更长时间和更一致水平的活性剂，但是在最终治疗后活性剂从奶中更快地释放。正如可以看到的，Orbenin^TMLA的最终治疗是96小时，而用实施例1组合物的最终治疗是在120小时；提供了一个更长的治疗期。图16示出了分别与Orbenin的3×48小时的5×24小时的治疗方案相比，在实施例1组合物的6×24小时的治疗方案中，所计算的WHP是短12小时和24小时。

第3部分：制造方法

a)将Miglyol 812、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯和Span80充分混合以形成均匀的油混合物。

b)将混合物在140℃消毒3小时，然后冷却至室温。

c)在单独的容器中，装入所需量的Aerosil R972Pharma。

d)在140℃下消毒3小时，然后冷却至室温。

e)将氯唑西林钠在经过消毒的油混合物中分散和均化。

f)将经过消毒的Aerosil R972Pharma分散于经过消毒的油悬浮液中。

g)将混合物均化。

第3部分：动物实验

作为在2011年11月开展的一项研究的一部分，研究如下实施例18制剂在牛乳腺炎治疗中的疗效。

实施例18
				mg	w/w-％
氯唑西林钠	229.2	4.584*
			对羟基苯甲酸甲酯	3.75	0.075
对羟基苯甲酸丙酯	1.25	0.025
			山梨糖醇单油酸酯(Span 80)	25	0.5
疏水性二氧化硅(Aerosil R972Pharma)	87.5	1.75
			分馏椰子油(Miglyol 812N)	4653.3	93.066
总计	5000	100

*增加5％超额

在研究中使用的动物是确诊患有临床乳腺炎的奶牛。在第0天，获得用于细菌学分析的奶样品并且动物用实施例18的***内输注液治疗三次，每次治疗间隔24小时。每次治疗的剂量为呈钠盐形式的200mg氯唑西林。

在第28及35天，获得其它奶样品用于细菌学分析，以确定治愈率。成功的细菌学治愈要求动物临床治愈乳腺炎，并且在第0天样品中确定的病原体不存在于第28和35天的样品中。

当约100头奶牛用实施例18治疗时，2012年11月1日获得的中期结果提供了69.6％细菌治愈比率，这些奶牛加入实验时患有临床乳腺炎，并且在加入时确定具有革兰氏阳性菌。

一项可比较的研究由以下文献报告：MD Wraight,New Zealand VeterinaryJournal 51(1),26-32,2003“A comparative efficacy trial between cefuroxime andcloxacillin as intramammary treatments for clinical mastitis in lactatingcows on commercial dairy farms”。在这项研究中，长效制剂中的200mg氯唑西林每48小时***内施用历经三次治疗，从而产生64.3％细菌治愈比例。

实施例18的中期研究结果表明本发明组合物的高疗效，甚至在与使用相同活性剂的更密集长效疗法相比时更是如此。这表明，通过使用本发明的组合物获得的有利的、较短的扣留期不会降低或损害疗效。

第4部分：制剂稳定性

对实施例18的三个批料进行稳定性研究。将这些批料装入5mL的聚乙烯注射器中并且在25℃/60％RH、30℃/65％RH和40℃/75％RH的指定存储温度和湿度条件下存储。所述批料的物理和化学特性以ACVM所建议的固定时间间隔来记录。根据稳定性数据，在25℃存储温度下，预期至少18个月的贮藏寿命。

仅借助实施例对本发明的方面进行了描述，并且应了解的是，在不脱离随附权利要求书中限定的本发明的范围的情况下可以对本发明进行修改和添加。

Claims

1.一种从***内组合物中延长抗生素的释放的方法，所述***内组合物配制用于治疗乳腺炎，

所述组合物包含：

至少一种油；

治疗有效量的抗生素，其分散于所述油中，以及

含量为3％w/w以下的疏水性胶体二氧化硅；

其中所述方法还包括在所述组合物中包含至少一种非离子表面活性剂。

2.如权利要求1所述的方法，其中所述抗生素选自由以下组成的组：β-内酰胺、氨基糖苷、喹诺酮类、磺胺类、四环素类和大环内酯抗生素。

3.如权利要求2所述的方法，其中所述β-内酰胺选自由青霉素和头孢菌素组成的组。

4.如权利要求2所述的方法，其中所述抗生素选自由以下组成的组：氯唑西林(cloxacillin)、泰乐菌素(tylosin)、头孢匹林(cephapirin)，以及它们的组合。

5.如权利要求1所述的方法，其中所述组合物包括至少两种抗生素。

6.如权利要求5所述的方法，其中所述至少两种抗生素是：

-青霉素活性剂与氨基糖苷；或

-氯唑西林和泰乐菌素。

7.如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述抗生素是微粉化的。

8.如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述表面活性剂选自由以下组成的组：山梨糖醇酯、聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧乙烯硬脂酸酯、聚环氧乙烷单油酸酯以及它们的组合。

9.如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中包含的所述表面活性剂的浓度在0.01％w/w与10％w/w之间。

10.如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述基剂中的胶体二氧化硅与表面活性剂的比率在1:5与6:1之间。

11.如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述组合物包括一种以上的表面活性剂。

12.如权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述油选自由以下组成的组：中链甘油三酸酯、轻质液体石蜡、油酸乙酯和芝麻油。

13.如权利要求1至12中任一项所述的方法的延长释放组合物在制备用于治疗或预防有需要的动物的临床前或临床乳腺炎的药物中的用途。

14.如权利要求13所述的用途，其中所述治疗或预防包括通过向所述动物***内输注来施用所述药物。

15.如权利要求14所述的用途，其中施用所述药物包括5g药物的1-6个剂量的剂量方案，所述剂量在0至120小时的一段时间内以3×24小时或6×24小时施用。

16.如权利要求13至15中任一项所述的用途，其用于在非人类动物泌乳期间治疗或预防乳腺炎。

17.一种用于治疗乳腺炎的控制释放***内组合物，

所述组合物包括治疗有效量的至少一种活性剂，以及

非水性基剂，其被配置来提供所述至少一种活性成分的受控制释放，所述基剂包括

一定量的胶体二氧化硅，其中所述胶体二氧化硅是疏水性类型；

至少一种油；和

至少一种非离子表面活性剂，所述非离子表面活性剂选自HLB值为16以下的表面活性剂，

其中所述活性剂是抗生素，其分散于所述至少一种油中；

其中在100 1/s的剪切速率和20℃的温度下，所述组合物的粘度低于1000mPas；且

其中所述疏水性胶体二氧化硅的浓度为1％w/w至3％w/w以下；

其中所述基剂中的胶体二氧化硅与表面活性剂的比率在1:5与6:1之间。

18.一种制造如权利要求17所述的组合物的方法，其包括以下步骤：

b)将所述活性剂分散于所述油混合物中；并且

c)然后将所述胶体二氧化硅添加至所述油混合物。

19.如权利要求17所述的组合物在制备用于治疗或预防有需要的动物的临床前或临床乳腺炎的药物中的用途。