CN110507599A - 一种含细胞提取液的面膜精华液及该细胞提取液的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种含细胞提取液的面膜精华液，包括以下按照质量百分比的原料：甘油、丙二醇、聚乙二醇‑32、透明质酸、海藻糖、β‑葡聚糖、银耳多糖、卡波姆、汉生胶、柠檬酸、羟苯甲酯、乙二胺四乙酸二钠盐、细胞提取液、纯水；本发明还公开了面膜精华液中细胞提取液的制备方法；本发明制作生产的含细胞提取液的面膜精华液，相比传统的面膜中的精华液更具有亲肤性，由于面膜精华液中的细胞提取液包括各种细胞因子、氨基酸、寡肽、细胞信号因子，而细胞因子、细胞信号分子等可激活皮肤细胞各种信号通路，保湿的同时促使机体自身细胞的更新、生长，短期内就可达到淡化细纹，收缩毛孔，提亮肤色的效果。

Description

一种含细胞提取液的面膜精华液及该细胞提取液的制备方法
技术领域
本发明涉及面膜领域，具体是一种含细胞提取液的面膜精华液及该细胞提取液的制备方法。
背景技术
面膜，是美容保养品的一种载体，由于其上富含丰富的精华液，使得敷在脸上用于补水保湿、美白、抗衰老、平衡油脂。
但是现在很多细胞类型面膜，为了简化生产过程，降低成本，大多采用酶解的方式获得蛋白水解物，蛋白被降解，失去原本的生物活性，只能做为基础营养物质，基于此，我们提出一种含细胞提取液的面膜精华液。
发明内容
本发明的目的在于提供一种含细胞提取液的面膜精华液及该细胞提取液的制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种含细胞提取液的面膜精华液，包括以下按照质量百分比的原料：甘油2-10％、丙二醇1-5％、聚乙二醇-32 1-5％、透明质酸0.005-1％、海藻糖0.5-5％、β-葡聚糖0.5-5％、银耳多糖0.49-5％、卡波姆0.04-0.5％、汉生胶0.005-0.1％、柠檬酸0.05-0.5％、羟苯甲酯0.01-0.5％、乙二胺四乙酸二钠盐0.01-0.1％、细胞提取液10-20％、纯水60％-75％。
作为本发明进一步的方案：包括以下按照质量百分比的原料：甘油3-8％、丙二醇2-4％、聚乙二醇-32 1.5-4％、透明质酸0.01-0.5％、海藻糖1-4％、β-葡聚糖1-4％、银耳多糖0.5-4％、卡波姆0.08-0.2％、汉生胶0.01-0.09％、柠檬酸0.1-0.4％、羟苯甲酯0.05-0.4％、乙二胺四乙酸二钠盐0.02-0.08％、细胞提取液12-18％、纯水65％-70％。
作为本发明再进一步的方案：包括以下按照质量百分比的原料：甘油6％、丙二醇3％、聚乙二醇-32 2％、透明质酸0.01％、海藻糖2％、β-葡聚糖1％、银耳多糖1％、卡波姆0.1％、汉生胶0.05％、柠檬酸0.2％、羟苯甲酯0.1％、乙二胺四乙酸二钠盐0.05％、细胞提取液15％、纯水68.49％。
所述含细胞提取液的面膜精华液中的细胞提取液的制备方法，步骤如下：
1)在无菌环境下将去除血管和包膜组织的新鲜动物器官用手术剪将剩余组织剪碎；
2)将剪碎的组织块放入离心管中，用体积两倍的37℃预温的磷酸盐缓冲液(PBS)+0.25％胰蛋白酶进行消化2min，液体浑浊时将组织消化液吸出转入另一离心管，加入2％的血清和胰蛋白酶中；未消化完成的组织块继续加入胰蛋白酶消化液进行消化，直至组织块全部消化成组织消化液；
3)组织消化液经细胞筛过滤去除大块细胞团，然后进行一次离心处理；
4)收集的细胞用RPM1640+10％金源康胎牛血清(FBS)重悬、计数，转入细胞瓶培养；
5)选取可以传代的细胞进行扩大培养，达到一定数量后用胰蛋白酶消化、收集细胞，开始细胞质提取操作；
6)细胞消化后用磷酸盐缓冲液(PBS)重悬、计数，洗涤一至二次；
7)取准备好的磷酸盐缓冲液(PBS)+20％甘油，按照1～5*107cells/ml的浓度对细胞进行重悬，并放入-80℃冰箱快速冷冻，1h后取出融化，重复三次后，进行二次离心处理，取上清，得细胞精华，即为细胞提取液。
作为本发明再进一步的方案：步骤3)中，所述一次离心处理的转速为1000-2000r/min。
作为本发明再进一步的方案：步骤3)中，所述一次离心处理的时间为2-8min。
作为本发明再进一步的方案：步骤7)中，所述二次离心处理的转速为3000-5000r/min。
作为本发明再进一步的方案：步骤7)中，所述二次离心处理的时间为2-8min。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明制作生产的含细胞提取液的面膜精华液，相比传统的面膜中的精华液更具有亲肤性，由于面膜精华液中的细胞提取液是人工能够生产出的不需要活体动物的最接近于细胞生长环境的溶液，其包括各种细胞因子、氨基酸、寡肽、细胞信号因子，而细胞因子、细胞信号分子可激活皮肤细胞各种信号通路，保湿的同时促使机体自身细胞的更新、生长，短期内就可达到淡化细纹，收缩毛孔，提亮肤色的效果。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明的技术方案作进一步详细地说明。
实施例1
一种含细胞提取液的面膜精华液，包括以下按照质量百分比的原料：甘油6％、丙二醇3％、聚乙二醇-32 2％、透明质酸0.01％、海藻糖2％、β-葡聚糖1％、银耳多糖1％、卡波姆0.1％、汉生胶0.05％、柠檬酸0.2％、羟苯甲酯0.1％、乙二胺四乙酸二钠盐0.05％、细胞提取液15％、纯水68.49％。
所述含细胞提取液的面膜精华液中的细胞提取液的制备方法，步骤如下：
1)在无菌环境下将去除血管和包膜组织的新鲜动物器官用手术剪将剩余组织剪碎；
2)将剪碎的组织块放入离心管中，用体积两倍的37℃预温的磷酸盐缓冲液(PBS)+0.25％胰蛋白酶进行消化2min，液体浑浊时将组织消化液吸出转入另一离心管，加入2％的血清和胰蛋白酶中；未消化完成的组织块继续加入胰蛋白酶消化液进行消化，直至组织块全部消化成组织消化液；
3)组织消化液经细胞筛过滤去除大块细胞团，然后进行1500rpm/5min的一次离心处理；
4)收集的细胞用RPM1640+10％金源康胎牛血清(FBS)重悬、计数，转入细胞瓶培养；
5)选取可以传代的细胞进行扩大培养，达到一定数量后用胰蛋白酶消化、收集细胞，开始细胞质提取操作；
6)细胞消化后用磷酸盐缓冲液(PBS)重悬、计数，洗涤一至二次；
7)取准备好的磷酸盐缓冲液(PBS)+20％甘油，按照1～5*107cells/ml的浓度对细胞进行重悬，并放入-80℃冰箱快速冷冻，1h后取出融化，重复三次后，进行4000rpm/5min的二次离心处理，取上清，得细胞精华，即为细胞提取液。
实施例2
一种含细胞提取液的面膜精华液，包括以下按照质量百分比的原料：甘油2％、丙二醇5％、聚乙二醇-32 5％、透明质酸0.005％、海藻糖0.5％、β-葡聚糖0.5％、银耳多糖0.49％、卡波姆0.04％、汉生胶0.005％、柠檬酸0.05％、羟苯甲酯0.5％、乙二胺四乙酸二钠盐0.01％、细胞提取液18％、纯水67.9％。
所述含细胞提取液的面膜精华液中的细胞提取液的制备方法，步骤如下：
1)在无菌环境下将去除血管和包膜组织的新鲜动物器官用手术剪将剩余组织剪碎；
2)将剪碎的组织块放入离心管中，用体积两倍的37℃预温的磷酸盐缓冲液(PBS)+0.25％胰蛋白酶进行消化2min，液体浑浊时将组织消化液吸出转入另一离心管，加入2％的血清和胰蛋白酶中；未消化完成的组织块继续加入胰蛋白酶消化液进行消化，直至组织块全部消化成组织消化液；
3)组织消化液经细胞筛过滤去除大块细胞团，然后进行1000rpm/2min的一次离心处理；
4)收集的细胞用RPM1640+10％金源康胎牛血清(FBS)重悬、计数，转入细胞瓶培养；
5)选取可以传代的细胞进行扩大培养，达到一定数量后用胰蛋白酶消化、收集细胞，开始细胞质提取操作；
6)细胞消化后用磷酸盐缓冲液(PBS)重悬、计数，洗涤一至二次；
7)取准备好的磷酸盐缓冲液(PBS)+20％甘油，按照1～5*107cells/ml的浓度对细胞进行重悬，并放入-80℃冰箱快速冷冻，1h后取出融化，重复三次后，进行3000rpm/2min的二次离心处理，取上清，得细胞精华，即为细胞提取液。
实施例3
一种含细胞提取液的面膜精华液，包括以下按照质量百分比的原料：甘油10％、丙二醇4％、聚乙二醇-32 1.5％、透明质酸0.5％、海藻糖1％、β-葡聚糖4％、银耳多糖0.5％、卡波姆0.5％、汉生胶0.09％、柠檬酸0.5％、羟苯甲酯0.01％、乙二胺四乙酸二钠盐0.1％、细胞提取液10％、纯水67.3％。
所述含细胞提取液的面膜精华液中的细胞提取液的制备方法，步骤如下：
1)在无菌环境下将去除血管和包膜组织的新鲜动物器官用手术剪将剩余组织剪碎；
2)将剪碎的组织块放入离心管中，用体积两倍的37℃预温的磷酸盐缓冲液(PBS)+0.25％胰蛋白酶进行消化2min，液体浑浊时将组织消化液吸出转入另一离心管，加入2％的血清和胰蛋白酶中；未消化完成的组织块继续加入胰蛋白酶消化液进行消化，直至组织块全部消化成组织消化液；
3)组织消化液经细胞筛过滤去除大块细胞团，然后进行2000rpm/8min的一次离心处理；
4)收集的细胞用RPM1640+10％金源康胎牛血清(FBS)重悬、计数，转入细胞瓶培养；
5)选取可以传代的细胞进行扩大培养，达到一定数量后用胰蛋白酶消化、收集细胞，开始细胞质提取操作；
6)细胞消化后用磷酸盐缓冲液(PBS)重悬、计数，洗涤一至二次；
7)取准备好的磷酸盐缓冲液(PBS)+20％甘油，按照1～5*107cells/ml的浓度对细胞进行重悬，并放入-80℃冰箱快速冷冻，1h后取出融化，重复三次后，进行5000rpm/8min的二次离心处理，取上清，得细胞精华，即为细胞提取液。
实施例4
一种含细胞提取液的面膜精华液，包括以下按照质量百分比的原料：甘油8％、丙二醇1％、聚乙二醇-32 4％、透明质酸1％、海藻糖4％、β-葡聚糖5％、银耳多糖4％、卡波姆0.08％、汉生胶0.01％、柠檬酸0.1％、羟苯甲酯0.05％、乙二胺四乙酸二钠盐0.02％、细胞提取液12％、纯水60.74％。
所述含细胞提取液的面膜精华液中的细胞提取液的制备方法，步骤如下：
1)在无菌环境下将去除血管和包膜组织的新鲜动物器官用手术剪将剩余组织剪碎；
2)将剪碎的组织块放入离心管中，用体积两倍的37℃预温的磷酸盐缓冲液(PBS)+0.25％胰蛋白酶进行消化2min，液体浑浊时将组织消化液吸出转入另一离心管，加入2％的血清和胰蛋白酶中；未消化完成的组织块继续加入胰蛋白酶消化液进行消化，直至组织块全部消化成组织消化液；
3)组织消化液经细胞筛过滤去除大块细胞团，然后进行1500rpm/5min的一次离心处理；
4)收集的细胞用RPM1640+10％金源康胎牛血清(FBS)重悬、计数，转入细胞瓶培养；
5)选取可以传代的细胞进行扩大培养，达到一定数量后用胰蛋白酶消化、收集细胞，开始细胞质提取操作；
6)细胞消化后用磷酸盐缓冲液(PBS)重悬、计数，洗涤一至二次；
7)取准备好的磷酸盐缓冲液(PBS)+20％甘油，按照1～5*107cells/ml的浓度对细胞进行重悬，并放入-80℃冰箱快速冷冻，1h后取出融化，重复三次后，进行4000rpm/5min的二次离心处理，取上清，得细胞精华，即为细胞提取液。
实施例5
一种含细胞提取液的面膜精华液，包括以下按照质量百分比的原料：甘油3％、丙二醇2％、聚乙二醇-32 1％、透明质酸0.5％、海藻糖5％、β-葡聚糖2.32％、银耳多糖5％、卡波姆0.2％、汉生胶0.1％、柠檬酸0.4％、羟苯甲酯0.4％、乙二胺四乙酸二钠盐0.08％、细胞提取液20％、纯水60％。
所述含细胞提取液的面膜精华液中的细胞提取液的制备方法，步骤如下：
1)在无菌环境下将去除血管和包膜组织的新鲜动物器官用手术剪将剩余组织剪碎；
2)将剪碎的组织块放入离心管中，用体积两倍的37℃预温的磷酸盐缓冲液(PBS)+0.25％胰蛋白酶进行消化2min，液体浑浊时将组织消化液吸出转入另一离心管，加入2％的血清和胰蛋白酶中；未消化完成的组织块继续加入胰蛋白酶消化液进行消化，直至组织块全部消化成组织消化液；
3)组织消化液经细胞筛过滤去除大块细胞团，然后进行1500rpm/5min的一次离心处理；
4)收集的细胞用RPM1640+10％金源康胎牛血清(FBS)重悬、计数，转入细胞瓶培养；
5)选取可以传代的细胞进行扩大培养，达到一定数量后用胰蛋白酶消化、收集细胞，开始细胞质提取操作；
6)细胞消化后用磷酸盐缓冲液(PBS)重悬、计数，洗涤一至二次；
7)取准备好的磷酸盐缓冲液(PBS)+20％甘油，按照1～5*107cells/ml的浓度对细胞进行重悬，并放入-80℃冰箱快速冷冻，1h后取出融化，重复三次后，进行4000rpm/5min的二次离心处理，取上清，得细胞精华，即为细胞提取液。
实施例6
一种含细胞提取液的面膜精华液，包括以下按照质量百分比的原料：甘油3％、丙二醇2％、聚乙二醇-32 1％、透明质酸0.5％、海藻糖5％、β-葡聚糖2.32％、银耳多糖5％、卡波姆0.2％、汉生胶0.1％、柠檬酸0.4％、羟苯甲酯0.4％、乙二胺四乙酸二钠盐0.08％、细胞提取液15％、纯水65％。
所述含细胞提取液的面膜精华液中的细胞提取液的制备方法，步骤如下：
1)在无菌环境下将去除血管和包膜组织的新鲜动物器官用手术剪将剩余组织剪碎；
2)将剪碎的组织块放入离心管中，用体积两倍的37℃预温的磷酸盐缓冲液(PBS)+0.25％胰蛋白酶进行消化2min，液体浑浊时将组织消化液吸出转入另一离心管，加入2％的血清和胰蛋白酶中；未消化完成的组织块继续加入胰蛋白酶消化液进行消化，直至组织块全部消化成组织消化液；
3)组织消化液经细胞筛过滤去除大块细胞团，然后进行1500rpm/5min的一次离心处理；
4)收集的细胞用RPM1640+10％金源康胎牛血清(FBS)重悬、计数，转入细胞瓶培养；
5)选取可以传代的细胞进行扩大培养，达到一定数量后用胰蛋白酶消化、收集细胞，开始细胞质提取操作；
6)细胞消化后用磷酸盐缓冲液(PBS)重悬、计数，洗涤一至二次；
7)取准备好的磷酸盐缓冲液(PBS)+20％甘油，按照1～5*107cells/ml的浓度对细胞进行重悬，并放入-80℃冰箱快速冷冻，1h后取出融化，重复三次后，进行4000rpm/5min的二次离心处理，取上清，得细胞精华，即为细胞提取液。
实施例7
一种含细胞提取液的面膜精华液，包括以下按照质量百分比的原料：甘油3％、丙二醇2％、聚乙二醇-32 1％、透明质酸0.5％、海藻糖5％、β-葡聚糖2.32％、银耳多糖5％、卡波姆0.2％、汉生胶0.1％、柠檬酸0.4％、羟苯甲酯0.4％、乙二胺四乙酸二钠盐0.08％、细胞提取液10％、纯水70％。
所述含细胞提取液的面膜精华液中的细胞提取液的制备方法，步骤如下：
1)在无菌环境下将去除血管和包膜组织的新鲜动物器官用手术剪将剩余组织剪碎；
2)将剪碎的组织块放入离心管中，用体积两倍的37℃预温的磷酸盐缓冲液(PBS)+0.25％胰蛋白酶进行消化2min，液体浑浊时将组织消化液吸出转入另一离心管，加入2％的血清和胰蛋白酶中；未消化完成的组织块继续加入胰蛋白酶消化液进行消化，直至组织块全部消化成组织消化液；
3)组织消化液经细胞筛过滤去除大块细胞团，然后进行1500rpm/5min的一次离心处理；
4)收集的细胞用RPM1640+10％金源康胎牛血清(FBS)重悬、计数，转入细胞瓶培养；
5)选取可以传代的细胞进行扩大培养，达到一定数量后用胰蛋白酶消化、收集细胞，开始细胞质提取操作；
6)细胞消化后用磷酸盐缓冲液(PBS)重悬、计数，洗涤一至二次；
7)取准备好的磷酸盐缓冲液(PBS)+20％甘油，按照1～5*107cells/ml的浓度对细胞进行重悬，并放入-80℃冰箱快速冷冻，1h后取出融化，重复三次后，进行4000rpm/5min的二次离心处理，取上清，得细胞精华，即为细胞提取液。
实施例8
一种含细胞提取液的面膜精华液，包括以下按照质量百分比的原料：甘油3％、丙二醇2％、聚乙二醇-32 1％、透明质酸0.5％、海藻糖3％、β-葡聚糖2.32％、银耳多糖2％、卡波姆0.2％、汉生胶0.1％、柠檬酸0.4％、羟苯甲酯0.4％、乙二胺四乙酸二钠盐0.08％、细胞提取液10％、纯水75％。
所述含细胞提取液的面膜精华液中的细胞提取液的制备方法，步骤如下：
1)在无菌环境下将去除血管和包膜组织的新鲜动物器官用手术剪将剩余组织剪碎；
2)将剪碎的组织块放入离心管中，用体积两倍的37℃预温的磷酸盐缓冲液(PBS)+0.25％胰蛋白酶进行消化2min，液体浑浊时将组织消化液吸出转入另一离心管，加入2％的血清和胰蛋白酶中；未消化完成的组织块继续加入胰蛋白酶消化液进行消化，直至组织块全部消化成组织消化液；
3)组织消化液经细胞筛过滤去除大块细胞团，然后进行1500rpm/5min的一次离心处理；
4)收集的细胞用RPM1640+10％金源康胎牛血清(FBS)重悬、计数，转入细胞瓶培养；
5)选取可以传代的细胞进行扩大培养，达到一定数量后用胰蛋白酶消化、收集细胞，开始细胞质提取操作；
6)细胞消化后用磷酸盐缓冲液(PBS)重悬、计数，洗涤一至二次；
7)取准备好的磷酸盐缓冲液(PBS)+20％甘油，按照1～5*107cells/ml的浓度对细胞进行重悬，并放入-80℃冰箱快速冷冻，1h后取出融化，重复三次后，进行4000rpm/5min的二次离心处理，取上清，得细胞精华，即为细胞提取液。
实验数据
表1
表2
表3
本实验采用Visia皮肤检测仪检测，Visia皮肤检测仪是一种能对皮肤的病理学特征进行定量分析的仪器。Visia皮肤检测仪能对皮肤色斑、毛孔、皱纹、平整度、卟啉、紫外线斑和日光损伤定量评估。本次实验对5人皮肤进行了跟踪检测，对其皮肤皱纹、纹理和毛孔数据进行整理，见表1、表2和表3，根据数值可看出，该方法/该产品在紧致皮肤细化纹理与收缩毛孔等方面都有成效。
本发明制作生产的含细胞提取液的面膜精华液，相比传统的面膜中的精华液更具有亲肤性，由于面膜精华液中的细胞提取液是人工能够生产出的不需要活体动物的最接近于细胞生长环境的溶液，其包括各种细胞因子、氨基酸、寡肽、细胞信号因子，而细胞因子、细胞信号分子可激活皮肤细胞各种信号通路，保湿的同时促使机体自身细胞的更新、生长，短期内就可达到淡化细纹，收缩毛孔，提亮肤色的效果。
上面对本发明的较佳实施方式作了详细说明，但是本发明并不限于上述实施方式，在本领域的普通技术人员所具备的知识范围内，还可以在不脱离本发明宗旨的前提下作出各种变化。

Claims (8)

1.一种含细胞提取液的面膜精华液，其特征在于，包括以下按照质量百分比的原料：甘油2-10%、丙二醇1-5%、聚乙二醇-32 1-5%、透明质酸0.005-1%、海藻糖0.5-5%、β-葡聚糖0.5-5%、银耳多糖0.49-5%、卡波姆0.04-0.5%、汉生胶0.005-0.1%、柠檬酸0.05-0.5%、羟苯甲酯0.01-0.5%、乙二胺四乙酸二钠盐0.01-0.1%、细胞提取液10-20%、纯水60%-75%。
2.根据权利要求1所述的含细胞提取液的面膜精华液，其特征在于，包括以下按照质量百分比的原料：甘油3-8%、丙二醇2-4%、聚乙二醇-32 1.5-4%、透明质酸0.01-0.5%、海藻糖1-4%、β-葡聚糖1-4%、银耳多糖0.5-4%、卡波姆0.08-0.2%、汉生胶0.01-0.09%、柠檬酸0.1-0.4%、羟苯甲酯0.05-0.4%、乙二胺四乙酸二钠盐0.02-0.08%、细胞提取液12-18%、纯水65%-70%。
3.根据权利要求1所述的含细胞提取液的面膜精华液，其特征在于，包括以下按照质量百分比的原料：甘油6%、丙二醇3%、聚乙二醇-32 2%、透明质酸0.01%、海藻糖2%、β-葡聚糖1%、银耳多糖1%、卡波姆0.1%、汉生胶0.05%、柠檬酸0.2%、羟苯甲酯0.1%、乙二胺四乙酸二钠盐0.05%、细胞提取液15%、纯水68.49%。
4.一种如权利要求1-3任一所述的含细胞提取液的面膜精华液中的细胞提取液的制备方法，其特征在于，步骤如下：
1）在无菌环境下将去除血管和包膜组织的新鲜动物器官用手术剪将剩余组织剪碎；
2）将剪碎的组织块放入离心管中，用体积两倍的37℃预温的磷酸盐缓冲液+0.25% 胰蛋白酶进行消化2min，液体浑浊时将组织消化液吸出转入另一离心管，加入2%的血清和胰蛋白酶中；未消化完成的组织块继续加入胰蛋白酶消化液进行消化，直至组织块全部消化成组织消化液；
3）组织消化液经细胞筛过滤去除大块细胞团，然后进行一次离心处理；
4）收集的细胞用RPM1640+10% 金源康胎牛血清重悬、计数，转入细胞瓶培养；
5）选取可以传代的细胞进行扩大培养，达到一定数量后用胰蛋白酶消化、收集细胞，开始细胞质提取操作；
6）细胞消化后用磷酸盐缓冲液重悬、计数，洗涤一至二次；
7）取准备好的磷酸盐缓冲液+20%甘油，按照1~5 *107cells/ml的浓度对细胞进行重悬，并放入-80℃冰箱快速冷冻，1h后取出融化，重复三次后，进行二次离心处理，取上清，得细胞精华，即为细胞提取液。
5.根据权利要求4所述的含细胞提取液的面膜精华液中的细胞提取液的制备方法，其特征在于，步骤3）中，所述一次离心处理的转速为1000-2000r/min。
6.根据权利要求4所述的含细胞提取液的面膜精华液中的细胞提取液的制备方法，其特征在于，步骤3）中，所述一次离心处理的时间为2-8min。
7.根据权利要求4所述的含细胞提取液的面膜精华液中的细胞提取液的制备方法，其特征在于，步骤7）中，所述二次离心处理的转速为3000-5000r/min。
8.根据权利要求4所述的含细胞提取液的面膜精华液中的细胞提取液的制备方法，其特征在于，步骤7）中，所述二次离心处理的时间为2-8min。
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101562560B1 (ko) * 2015-04-29 2015-10-30 임정하 피부노화방지 및 피부주름개선용 천연추출물 숙성 발효 조성물, 이를 포함하는 천연 화장품 및 이의 제조방법
CN106361595A (zh) * 2016-11-07 2017-02-01 北京痘博士痤疮医学研究院 一种智妍导入溶媒精华液
CN107982162A (zh) * 2018-01-17 2018-05-04 李福禄 一种面膜精华液配方

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101562560B1 (ko) * 2015-04-29 2015-10-30 임정하 피부노화방지 및 피부주름개선용 천연추출물 숙성 발효 조성물, 이를 포함하는 천연 화장품 및 이의 제조방법
CN106361595A (zh) * 2016-11-07 2017-02-01 北京痘博士痤疮医学研究院 一种智妍导入溶媒精华液
CN107982162A (zh) * 2018-01-17 2018-05-04 李福禄 一种面膜精华液配方

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
刘利兵等: "《实验基础医学》", 30 June 2009, 第四军医大学出版社 *

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