CN110448504A

CN110448504A - 一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物及其制备方法

Info

Publication number: CN110448504A
Application number: CN201910819779.2A
Authority: CN
Inventors: 赵伟
Original assignee: Guangzhou Jianeng Biotechnology Co Ltd
Current assignee: Guangzhou Jianeng Biotechnology Co Ltd
Priority date: 2019-08-31
Filing date: 2019-08-31
Publication date: 2019-11-15

Abstract

本发明公开了一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物及其制备方法，属于化妆品技术领域，其技术要点：一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物，按照重量百分比计，其原材料包括如下组分：桃树脂40‑60%、大麦籽25‑40%、茯苓菌核15‑30%，以及余量为水。其制备方法包括：粉碎、提取、过滤、微滤、超滤，以及配制。本发明不仅操作简单方便，而且还具有即时紧致、长效抗衰，保湿滋润等多重效果，而且还具有稳定性好、成本低廉、应用简单的优点。

Description

一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物及其制备方法

技术领域

本发明属于化妆品技术领域，更具体地说，它涉及一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物及其制备方法。

背景技术

皮肤作为有机体与外界环境之间的物理屏障，承受着紫外线、干燥、不良化妆品刺激、细菌等各种由于外界环境所致的压力及自身的精神压力、衰老引起的皱纹形成、弹性降低等。近年来，关注抗衰老产品的人越来越多，而消费者对于抗衰的功能理解逐渐上升到广义层面，抗衰老已不仅仅局限于除皱，紧致，增加胶原蛋白，预防皱纹等方面，也包括肌肤水润，肤色提升，毛孔细腻，亮泽通透，细腻柔嫩等诉求也被加入广义抗衰的范畴。

目前市场上已有的抗皱原料包括维生素A类化合物、信号肽、透明质酸、胶原蛋白等其他高分子活性物等，都存在应用困难、使用成本昂贵等缺点，例如：维A酸，1986年在美国皮肤病学会杂志上首先刊登介绍了其治疗皮肤光老化有效性报告，但是刺激性大，对光、热和空气都不耐受，稳定性差；而资生堂在1989年起截止今日都在研究维生素A制剂，对其的结构改造、包裹或者缓释，都是对维A酸这把双刃剑的妥协。

同时早期的信号肽，生产技术被Sederma、ISP、Lipotec等国外大公司垄断，到目前为止，国内能做出多肽的厂家也不多，不可否认这些多肽的效果，但价格昂贵，使用成本高，让很多厂家望而却步，消费者也只能在高端产品才能购买到此类功效的产品。而透明质酸外用与注射效果相差甚远，而注射又存在较大风险；人源胶原蛋白目前都是发酵来源，价格达到透明质酸的数倍。

因此我们有必要去研究新型的即时紧致、长效抗衰，保湿滋润等多重效果、稳定性好、成本低廉、应用简单的原料。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明的目的一在于提供一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物，具有即时紧致、长效抗衰、嫩肤的作用。

为实现上述目的一，本发明提供了如下技术方案：一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物，按照重量百分比计，其原材料包括如下组分：

进一步的，按照重量百分比计，其原材料包括如下组分：

通过采用上述技术方案，桃树脂是蔷薇科植物桃或山桃等树皮中分泌出来的树脂，又名桃油，桃脂，桃花泪，桃树胶，桃凝。它是桃树自然分泌，或在外力作用下以用于自愈伤口而产生的物质。上述桃树脂的主要组成为半乳糖、鼠李糖、α-葡萄糖醛酸等，它具有补水保和排毒的作用，能够使得皮肤变的光滑且富有弹性、淡化色斑和抗皱防衰老的功效。而大麦籽是禾本科大麦属的一种禾谷类作物，因其内外颖壳分离，籽粒裸露，故又称裸大麦、元麦、米大麦。大麦籽含有β-葡聚糖、膳食纤维、维生素B1、维生素B2、尼克酸、维生素E，以及无机元素钙、磷、铁、铜、锌和微量元素硒等矿物元素。其中，β-葡聚糖的分子结构，它的是一种无分支线性的黏性多糖，通过β-(1,3)和β-(1,4)糖苷键将β-D-吡喃葡萄糖单位连接而成。在大麦籽中的β-葡聚糖分子，因为β-(1,3)键的存在，可使葡聚糖可以溶于水，因此它能明显会提高上述组合物(即在化妆品原料体系)的保湿能力。

其次茯苓菌核，又称玉灵、茯灵、万灵桂、茯菟。它是拟层孔菌科真菌茯苓菌核的干燥菌核，为寄生在松树根上的菌类植物，外皮黑褐色，里面白色或粉红色。茯苓菌核具有营养肌肤、光洁皮肤、美白去皱、消除斑点以及延缓皮肤衰老的功效。

由此桃树脂的活性物质涂覆在皮肤上后，可与大麦籽β-葡聚糖以及茯苓菌核中的活性物质聚合，上述形成的聚合物铺展在皮肤上成网状结构，聚合成膜，靠手动涂抹后可以有效拉平、舒展皱纹，提高其即时紧致、长效抗衰，以及嫩肤的作用。

针对现有技术存在的不足，本发明的目的二在于提供一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物的制备方法，它不仅操作简单，应用的原材料简单，成本低廉，稳定好；而且还具有即时紧致、长效抗衰、保湿滋润等多种功效。

为实现上述目的二，本发明还提供了如下技术方案：一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物的制备方法，包括原材料的粉碎、提取、过滤以及配制。

进一步的，包括如下操作步骤：

步骤一、粉碎：取大麦籽与茯苓菌核粉碎；

步骤二、提取：在桃树脂、大麦籽和茯苓菌核中加入水，浸泡至少1h，加入复合酶进行提取操作，去除残渣后得到粗提液；

步骤三、过滤：粗提液沉降后过滤得到滤液；

步骤四、微滤：滤液经微滤操作得到渗出液，然后加水继续微滤，直至渗出液的总量等于滤液在步骤三中得到的初始量；

步骤五、超滤：将步骤四得到的渗出液经超滤操作，除去清液，留下浓液；

步骤六、配制：将上述步骤中的浓液，用去离子水配成相当于生药的10％。

通过采用上述技术方案，上述大麦籽、茯苓菌核和桃树脂这类原材料均是采天然植物为原材料，绿色环保无污染，采用植物类的复合酶(例如胶酶、纤维素酶以及蛋白酶)提取，能够有效酶解原材料(即药材)，使得原材料中的有效成分能够被充分分解出来；随后再采用初步过滤、微滤和超滤，即多种过滤方式配合使用，不仅能够有效筛分复合酶，有效实现酶和滤液(也可以为浓液或者渗出液)之间有效分离；而且还能去除滤液中的不容物质，降低上述不容物质对皮肤的刺激作用，得到滤液的分子量相对较低，有利于促进对皮肤的吸收作用。

进一步的，在步骤一中，粉碎后得到的大麦籽与茯苓菌核的颗粒大小均控制在80-120目之间。

由于大麦籽具有外壳而茯苓菌核是成块状，直接采用复合酶提取效率较低，通过采用上述技术方案，粉碎处理后可以有效提高复合酶与上述大麦籽、茯苓菌核之间的接触面积，大大提高了酶解的效率和质量。

进一步的，在步骤二中，所述复合酶为0.5-2w/w％的果胶酶、0.5-2w/w％的纤维素酶和0.5-1w/w％的蛋白酶中的两种或两种以上。

进一步的，纤维素酶为C1酶、Cx酶和β葡糖苷酶；C1酶是对纤维素最初起作用的酶，破坏纤维素链的结晶结构；Cx酶是作用于经C1酶活化的纤维素、分解β-1，4-糖苷键的纤维素酶；β葡糖苷酶可以将纤维二糖、纤维三糖及其他低分子纤维糊精分解为葡萄糖。

进一步的，蛋白酶为植物蛋白酶，优选为木瓜蛋白酶。

通过采用上述技术方案，天然植物中富含有果胶、纤维素和蛋白质这类物质，采用复合酶(果胶酶、纤维素酶以及蛋白酶)提取，能够有效提高对原材料的酶解作用，提高了原材料中活性成分(即有效成分)更为高效的释放。

进一步的，在步骤二中，提取时的温度控制在0-85℃，提取时间为2-3h。

进一步的，在提取时，较佳的提取温度为50-55℃。

进一步的，在步骤二中，提取时pH为3-6.5，较佳的pH为4.5-5.5。

通过采用上述技术方案，果胶酶是由黑曲霉经发酵精制而得。果胶酶主要用于果蔬汁饮料及果酒的榨汁及澄清，对分解果胶具有良好的作用。果胶酶合适的温度为15-55℃左右，最适温度为50℃；pH为3-6。而纤维素酶是由多种水解酶组成的一个复杂酶系，自然界中很多真菌都能分泌纤维素酶。纤维素酶适合的温度为28-30℃，pH为4.5-6.5。

此外，蛋白酶是生物体内的一类酵素(酶)，它们能够有效分解蛋白质。分解方法是打断那些将氨基酸连结成多肽链的肽键。其中，木瓜蛋白酶从木瓜中提取得到，其最适合的温度为55℃左右。由此可在50-55℃的温度下，在4.5-5.5的pH下，复合酶的活性最强。

进一步的，在步骤四中，过滤膜的孔径为30nm，微滤控制的压力为2-4bar，在50-85℃温度下，微滤操作至渗出液不再渗出为止。

通过采用上述技术方案，在30nm孔径的过滤膜下进行加压微滤操作，有效提高了过滤的效率。

进一步的，在步骤五中，过滤膜的截留分子量控制在5000D，超滤控制的压力8-12bar，在50-85℃温度下进行超滤操作。

通过采用上述技术方案，在超滤过程中进行加压操作，能够在保证超微有效进行的基础上，还有提高超微的效率。

进一步的，在步骤六中，还加入重量百分比为0.3％-1％的防腐剂，并进行灭菌处理；所述防腐剂选自尼泊金甲酯、氯苯甘醚、苯氧乙醇、馨鲜酮、己二醇中的一种或多种。

进一步优选的，防腐剂包括重量百分比为0.15％的尼泊金甲酯和0.15％的氯苯甘醚。

通过采用上述技术方案，加入尼泊金甲酯、氯苯甘醚等防腐剂，可以提高组合物的保存时间。

本发明的一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物在日用领域中的应用，尤其是乳液、精华水、化妆液中的应用。

综上所述，本发明具有以下有益效果：

1、本发明具有即时紧致、长效抗衰，保湿滋润等多重效果，而且还具有稳定性好、成本低廉、应用简单的优点；

2、天然植物来源，不会产生污染，安全性高；

3、优化的，采用多种过滤方式配合使用，不仅能够有效筛分复合酶，有效实现酶和滤液(也可以为浓液或者渗出液)之间有效分离；而且还能去除滤液中的不容物质，降低上述不容物质对皮肤的刺激作用，得到滤液的分子量相对较低，有利于促进对皮肤的吸收作用。

附图说明

图1为一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物的制备方法的工艺流程图。

具体实施方式

以下结合实施例对本发明作进一步详细说明。

一、实施例实施例1：一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物，按照重量百分比计，其原材料包括桃树脂50％、大麦籽30％、茯苓菌核20％，以及余量为水。

其制备方法，如图1所示，包括如下操作步骤：

步骤一、粉碎：在型号为WF-180的万能粉碎机小型粉碎机(厂家为江阴盟创机械设备有限公司)内加入大麦籽与茯苓菌核进行粉碎操作，得到的大麦籽与茯苓菌核的颗粒大小均在80-120目。

步骤二、提取：将100kg的原材料(即50kg的桃树脂、30kg粉碎后的大麦籽和20kg粉碎后的茯苓菌核)在3000kg的去离子水内浸泡1h，然后再加入1kg的果胶酶、1kg的纤维素酶和0.6kg的木瓜蛋白酶；接着再采用中药提取过滤浓缩外循环设备(厂家是合肥清普膜科技有限公司)在65℃下提取2h，经过滤器(厂家是合肥清普膜科技有限公司的陶瓷膜过滤器)除去残渣后即可得到粗提液。

具体生产过程中也可以采用专利号为CN201620115696.7的一种植物提取装置。

步骤三、过滤：将步骤二中的粗提液静置30分钟，此时粗提液中物质沉降后经B870型号板框式聚丙烯滤板(兴源环保)进行过滤，得滤液。

步骤四、微滤：将上述滤液用截留孔径30nm的过滤膜，操作压力为4bar，温度保持在65℃，微滤至渗出液不再渗出为止，随后补充等量的水继续微滤，直至渗出液的量等于起始滤液的量。

步骤五、超滤：把步骤四中得到的滤液，采用截留分子量为5000D的过滤膜，操作压力为10bar，温度在65℃下进行超滤操作，除去过滤下来的清液，留下浓液。

步骤六、配制：将上述步骤中的浓液，用去离子水配成相当于生药的10％，加入0.15W/W％的尼泊金甲酯和0.15W/W％的氯苯甘醚，并在95℃灭菌30min。

实施例2：一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物，按照重量百分比计，其原材料包括桃树脂40％、大麦籽30％、茯苓菌核30％，以及余量为水。

其制备方法包括如下操作步骤：

步骤二、提取：将100kg的原材料(即40kg的桃树脂、30kg粉碎后的大麦籽和30kg粉碎后的茯苓菌核)在3000kg的去离子水内浸泡1.5h，然后再加入2kg的果胶酶、0.5kg的纤维素酶和0.5kg的木瓜蛋白酶；接着再采用中药提取过滤浓缩外循环设备(厂家是合肥清普膜科技有限公司)在85℃下提取2.5h，经过滤器(厂家是合肥清普膜科技有限公司的陶瓷膜过滤器)除去残渣后即可得到粗提液。

步骤三、过滤：将步骤二中的粗提液静置45分钟，此时粗提液中物质沉降后经B870型号板框式聚丙烯滤板(兴源环保)进行过滤，得滤液。

步骤四、微滤：将上述滤液用截留孔径30nm的过滤膜，操作压力为3bar，温度保持在50℃，微滤至渗出液不再渗出为止，随后补充等量的水继续微滤，直至渗出液的量等于起始滤液的量。

步骤五、超滤：把步骤四中得到的滤液，采用截留分子量为5000D的过滤膜，操作压力为12bar，温度在50℃下进行超滤操作，除去过滤下来的清液，留下浓液。

实施例3：一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物，按照重量百分比计，其原材料包括桃树脂60％、大麦籽25％、茯苓菌核15％，以及余量为水。

其制备方法包括如下操作步骤：

步骤二、提取：将100kg的原材料(即60kg的桃树脂、25kg粉碎后的大麦籽和15kg粉碎后的茯苓菌核)在3000kg的去离子水内浸泡2.5h，然后再加入2kg的果胶酶、2kg的纤维素酶和1kg的木瓜蛋白酶；接着再采用中药提取过滤浓缩外循环设备(厂家是合肥清普膜科技有限公司)在50℃下提取3h，经过滤器(厂家是合肥清普膜科技有限公司的陶瓷膜过滤器)除去残渣后即可得到粗提液。

步骤三、过滤：将步骤二中的粗提液静置60分钟，此时粗提液中物质沉降后经B870型号板框式聚丙烯滤板(兴源环保)进行过滤，得滤液。

步骤四、微滤：将上述滤液用截留孔径30nm的过滤膜，操作压力为2bar，温度保持在85℃，微滤至渗出液不再渗出为止，随后补充等量的水继续微滤，直至渗出液的量等于起始滤液的量。

步骤五、超滤：把步骤四中得到的滤液，采用截留分子量为5000D的过滤膜，操作压力为8bar，温度在85℃下进行超滤操作，除去过滤下来的清液，留下浓液。

二、对比例对比例1：一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物，与实施例1的不同之处在于：其配方与实施例1的一致，但是其制备方法不同。

配方是：按照重量百分比计，其原材料包括桃树脂50％、大麦籽30％、茯苓菌核20％，以及余量为水。

上述对比例1的制备方法，包括如下步骤：

①提取：将100kg的原材料(即50kg的桃树脂、30kg粉碎后的大麦籽和20kg粉碎后的茯苓菌核)在3000kg的去离子水95℃搅拌提取3h，除去残渣，得到粗提液；

②冷藏：上述粗提液放入4℃的冷库内，冷藏10h；

③过滤：经板框式硅藻土过滤器(厂家为山东工大机械有限公司)进行硅藻土拌土过滤；

④配制：用去离子水配成相当于生药的10％，加入0.15W/W％的尼泊金甲酯和0.15W/W％的氯苯甘醚，并在95℃灭菌30min，即为本方案的提取液。

对比例2：一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物，与实施例1的不同之处在于：其配方与实施例1的一致，但是其制备方法不同。

上述对比例1的制备方法，包括如下步骤：

①提取：将100kg的原材料(即50kg的桃树脂、30kg粉碎后的大麦籽和20kg粉碎后的茯苓菌核)在2000kg的去离子水40℃搅拌提取1h，合并粗提液；

②冷藏：上述粗提液放入4℃的冷库内，冷藏5h；

③过滤：采用纱布过滤；

配制：用去离子水配成相当于生药的10％，加入重量百分比为0.15W/W％的尼泊金甲酯和0.15W/W％的氯苯甘醚，并在95℃灭菌30min，即为本方案的提取液。

三、试验检测分析试验一：即时紧致效果实验试验对象：

S1、分别取50W/W％的实施例1-3、对比例1-2中得到的具有即时紧致、长效抗衰的组合物以及50ml去离子水备用。

S2、按表1的化妆水配比将A相原料(即去离子水、甘油、甲基丙二醇、羟苯甲酯以及氯苯甘醚)依次加入主锅，搅拌升温至85℃10min,使原料溶解完全；2、降温至50℃加入B相原料(即50W/W％的实施例1中得到的具有即时紧致、长效抗衰的组合物以及泛醇)，搅拌均匀即可，即可得到试验样品1。

S3、将B相原料中的50W/W％的实施例1中得到的具有即时紧致、长效抗衰的组合物依次换成等量的实施例2、实施例3、对比例1、对比例2中得到的具有即时紧致、长效抗衰的组合物，以及去离子水。然后按照S2中的制备方法依次得到试验样品2、试验样品3、对照样品2，以及空白对照组。

表1化妆水配方

试验方法：随机寻找60名40-60岁身体健康的女性志愿者(近三个月没有参加过任何药品，化妆品或保健品的临床测试方法：采用随机、双盲、对照的方法)参加本次实验，每组10名，让志愿者分别在眼角涂抹含试验样品1-3、对照样品1-2，以及空白对照组。

然后通过志愿者自评(有即时紧致效果为10分，没有即时紧致效果为0分，计算均值)和硅胶印模中皱纹数目及长度的实验数据来说明即时紧致的效果。

备注：表2-2中，**表示显著性高，P<0.01；*表示显著差异，P<0.05。

试验结果：如表2-1和表2-2所示，试验样品1-3的自评得分均在8.0分以上，皱纹变少变化很明显，对照样品的自评得分为3.3和3.7，皱纹变少，空白对照组的自评得分为0，皱纹变化不明显。由此说明试验样品1-3和对照样品1-2均是具有一定的即时紧致效果；但是试验样品1-3的即时紧致效果明显突出，且试验样品1-3的即时紧致效果好于对照样品1-2的即时紧致效果。由以上的结果可以看出，本发明即时紧致的效果具有明显的统计下意义。

表2-1志愿者的自评结果

样品	自评得分
		空白对照组	0
试验样品1	9.3
		试验样品2	8.3
试验样品3	8.0
		对照样品1	3.7
对照样品2	3.3

表2-2印模分析结果

样品	皱纹数目	皱纹长度
			空白对照组	0	0
试验样品1	-9.3％**	-13.5％**
			试验样品2	-8.5％**	-11.8％**
试验样品3	-8.2％**	-11.6％**
			对照样品1	-3.5％*	-2.9％
对照样品2	-3.7％*	-1.9％

试验二：皮肤弹性测试试验对象：

S1、分别取12W/W％的实施例1-3、对比例1-2中得到的具有即时紧致、长效抗衰的组合物以及50ml去离子水备用。

S2、按表3-1的乳液配比将水相(即去离子水、甘油、丁二醇、透明质酸钠、羟苯甲酯以及氯苯甘醚)加入主锅，开启搅拌，并升温至85℃；然后再将预混2(鲸蜡硬脂醇、EmulgadeSucro(巴斯夫)、鲸蜡醇磷酸酯钾、角鲨烷、辛酸/癸酸甘油三酯、异壬酸异壬酯、牛油果树果脂，以及EMT10(赛比克))加入油锅，升温搅拌至85℃至完全溶解后加入红球藻和AVC搅拌分散均匀后加入主锅，均质3min后再加入预混3(即DC345(陶氏)和CM1000(瓦克))，继续均质3min后降温。最后降温至40℃加入C相原料(即龙胆双因子抗敏素(伽能)、实施例1中得到的具有即时紧致、长效抗衰的组合物，以及玫瑰香精)，搅拌至分散均匀，即可试验样品1。

S3、将C相原料中的12W/W％的实施例1中得到的具有即时紧致、长效抗衰的组合物依次换成等量的实施例2、实施例3、对比例1、对比例2中得到的具有即时紧致、长效抗衰的组合物，以及去离子水。然后按照S2中的制备方法依次得到试验样品2、试验样品3、对照样品2，以及空白对照组。

表3-1乳液配方

试验方法：30名身体健康志愿者参加本次实验(与以上实验为不同人员)，男女不限，年龄在50-65岁之间，每组5名成员。并且30名身体健康志愿者(即受试者)最近三个月没有参加过任何药品，化妆品或保健品的临床测试方法：采用随机、双盲、对照的方法。

具体操作步骤如下：

1、用提前准备好的模板在受试者左右手臂标识出仪器测定的区域，每个区域大小为2.5cm²；

2、受试者在左右臂随机的5个区域分别涂抹试样样品1-3和对照样品1-2中的任意一种样品，剩下的2个区域涂抹空白对照；

3、除去左右手臂的空白对照区，在所有测试区用皮肤记号笔标记，早晚各使用一次，连续使用4个月样品，样品使用量为1.5-2mg/cm²；

3、30d内不能使用其他任何护肤品或药品；

4、本次测试仪器为Corneometer(CK)，皮肤弹性测试仪；测试时间点为样品使用前和样品使用4个月后(对照组为样品涂抹前，试样样品1-3和对照样品1-2为使用4个月后测试)，测试之前先用水洗净皮肤，待30min后皮肤干后再进行测定(实验室环境温度控制在22±2℃，相对湿度为50±5％)；

5、实验期间保持原有生活规律。

检测的公式为：R5＝Ur/Ue

其中，Ur指皮肤快速恢复的部分，Ue指由于吸力快速弹起的部分。

备注：在皮肤测试的第一次循环中，皮肤恢复过程中的弹性部分与加负压过程中的弹性部分之比，越接近与1，说明皮肤弹性越好。

表3-2中：**表示显著性高，P<0.01；*表示显著差异，P<0.05。

试验结果：如表3-2可知，试验样品1-3的R5的数值均大于0.8，试验样品1-3的皮肤粘弹性比涂抹前增加明显，P<0.01；而对照样品1-2的R5改变不明显，P<0.05，其数值保持在0.79左右。由以上的结果可以看出，试验样品1-3具有增加皮肤弹性，长效抗衰的效果，具有明显的统计下意义。

表3-2皮肤粘弹性测试结果

试验三：促进胶原蛋白ColI的表达实验试验对象：分别取50克实施例1-3和对比例1-2中得到的具有即时紧致、长效抗衰的组合物，依次放在5个洁净烧杯内，依次编号为烧杯a-e，随后分别在前3个洁净烧杯a-c中加入50ml的去离子水混合均匀，分别作为试验样品1-3；将中间2个洁净烧杯d-e中加入50ml的去离子水混合均匀，分别作为对照样品1-2；然后将第6个洁净烧杯f中加入50ml的去离子水，混合均匀后，作为空白对照组。

试验方法：

1、将成纤维细胞培养至对数期，用胰蛋白酶分散细胞，获得细胞悬液，计数；

2、按照1×104个/ml接种于96孔板，每孔加入200μl，分别加入100μg/ml的试验样品1-3和对照样品1-2，或者空白对照组；

3、培养24h后用RT-PCR的方法检测ColI mRNA的表达水平。

备注：表4中，**表示显著性高，P<0.01；*表示显著差异，P<0.05。

试验结果：由表4可知，与空白对照组相比较，试验样品1-3的Col I/GAPDH数值大于0.8，变化显著，P<0.01。而对照样品1-2的Col I/GAPDH数值与空白对照组相比较，变化不明显，P<0.05。因此本发明的试验样品1-3对成纤维细胞中I型胶原的表达有显著的促进作用，进一步验证了具有增加皮肤弹性的功效。

表4Col I的定量分析结果

样品	Col I/GAPDH
		空白对照组	0.703±0.043
试验样品1	0.928±0.059**
		试验样品2	0.901±0.046**
试验样品3	0.882±0.078**
		对照样品1	0.759±0.033*
对照样品2	0.748±0.078*

试验四：皮肤光泽度测试试验对象：

S1、分别取30W/W％的实施例1-3、对比例1-2中得到的具有即时紧致、长效抗衰的组合物以及50ml去离子水备用。

S2、按照表5-1的精华水配方将A相原料(即去离子水以及丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物)在室温下溶胀后搅拌分散完全，得到A相混合物。接着再将B相原料中的甘油、甲基丙二醇、黄原胶、羟苯甲酯以及EDTA 2Na按顺序加入烧杯预混后，加入A相混合物，搅拌并加热至80℃至完全溶解，加入再加入B相剩余的原料氯苯甘醚原料搅拌至完全溶解，降温。然后降温至65℃加入C相原料(即10％NaOH水溶液)，搅拌至分散均匀。最后温度控制在45℃左右时加入D相(实施例1中得到的具有即时紧致、长效抗衰的组合物，以及PEG-40氢化蓖麻油和玫瑰香精)，搅拌至完全溶解即可得到试验样品1。

S3、将B相原料中的30W/W％的实施例1中得到的具有即时紧致、长效抗衰的组合物依次换成等量的实施例2、实施例3、对比例1、对比例2中得到的具有即时紧致、长效抗衰的组合物，以及去离子水。然后按照S2中的制备方法依次得到试验样品2、试验样品3、对照样品2，以及空白对照组。

表5-1精华水配方

试验方法：本研究采用国际上通用的基于CIE L*a*b*颜色体系的色度仪Skin-Glossymeter GL200(皮肤光泽度测试探头)，L*值表征的是皮肤的亮度，其变化表示产品使用前后皮肤光泽度的变化，L*越大，皮肤越亮，反之，皮肤颜色越暗沉。另外由测得的L*和b*可以计算得到ITAo，也可以用来评价亮白效果。

实验设计采用空白对照、随机、双盲的方法，比较对照组(即表1的化妆水)和用添加50％实施例和对比例的精华水前后的皮肤的L*值和ITAo值。受试志愿者人数为60人(30-60岁，与以上实验为不同人员)，其中男性26人，女性14人。志愿者均为干性皮肤，皮肤相对粗糙暗沉，非过敏体质，且测试部位无疤痕或者毛发，测试期间，受试志愿者分别在左前臂和右前臂分别涂抹表1的化妆水或者含有实施例和对比例的精华水，每天早晚分别涂抹一次(剂量为4mg/cm²)，测试周期为8周。测试之前先用水洗净皮肤，待30min后皮肤干后再进行测定(实验室环境温度控制在22±2℃，相对湿度为50±5％)。

备注：表5-2中，**表示显著性高，P<0.01；*表示显著差异，P<0.05。

试验结果：如表5-2可知，与对照组比较，试样样品1-3的8周后L*值在58-63之间，皮肤亮；而ITA^o的数值在38-44之间，此时可知试样样品1-3的L*值与ITA^o变化明显，P<0.01。

与对照组比较，对照样品1-2中8周后L*值在54-57之间，而ITA^o的数值在36-37之间，对照样品1-2的L*值与ITA^o变化不太明显，P<0.05。由表5-2可知，本发明试样样品1-3对成纤维细胞中I型胶原的表达有显著的促进作用，进一步验证了具有增加皮肤弹性的功效。

表5-2L*值和ITA^o结果

具体实施例仅仅是对本发明的解释，其并不是对本发明的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本发明的权利要求范围内都受到专利法的保护。

Claims

1.一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物，其特征在于，按照重量百分比计，其原材料包括如下组分：

桃树脂 40-60%；

大麦籽 25-40%；

茯苓菌核 15-30%；

余量为水。

2.根据权利要求1所述的一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物，其特征在于，按照重量百分比计，其原材料包括如下组分：

桃树脂 40-50%；

大麦籽 30%；

茯苓菌核 20-30%；

余量为水。

3.一种根据权利要求1或2所述的一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物的制备方法，其特征在于，包括原材料的粉碎、提取、过滤以及配制。

4.根据权利要求3所述的一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物的制备方法，其特征在于，包括如下操作步骤：

步骤一、粉碎：取大麦籽与茯苓菌核粉碎；

步骤三、过滤：粗提液沉降后过滤得到滤液；

步骤六、配制：将上述步骤中的浓液，用去离子水配成相当于生药的10%。

5.根据权利要求4所述的一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物的制备方法，其特征在于，在步骤一中，粉碎后得到的大麦籽与茯苓菌核的颗粒大小均控制在80-120目之间。

6.根据权利要求4所述的一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物的制备方法，其特征在于，在步骤二中，所述复合酶为0.5-2 w/w %的果胶酶、0.5-2 w/w %的纤维素酶和0.5-1 w/w %的蛋白酶中的两种或两种以上。

7.根据权利要求6所述的一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物的制备方法，其特征在于，在步骤二中，提取时的温度控制在0-85℃，提取时间为2-3h。

8.根据权利要求4所述的一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物的制备方法，其特征在于，在步骤四中，过滤膜的孔径为30nm，微滤控制的压力为2-4bar，在50-85℃温度下，微滤操作至渗出液不再渗出为止。

9.根据权利要求4所述的一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物的制备方法，其特征在于，在步骤五中，过滤膜的截留分子量控制在5000D，超滤控制的压力8-12bar，在50-85℃温度下进行超滤操作。

10.根据权利要求4所述的一种具有即时紧致、长效抗衰的组合物的制备方法，其特征在于，在步骤六中，还加入重量百分比为0.3%-1%的防腐剂，并进行灭菌处理；所述防腐剂选自尼泊金甲酯、氯苯甘醚、苯氧乙醇、馨鲜酮、己二醇中的一种或多种。