CN110423216B - 一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物及其制备方法和应用 - Google Patents

一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种2‑(1‑金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物及其制备方法和应用，2‑(1‑金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物的化学结构式如式（I）所示：

Description

一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物及其制备方 法和应用
技术领域
本发明涉及一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物及其制备方法和应用。
背景技术
金刚烷具有独特的化学性质和物理性质，可以应用在医药(Chemical Reviews,2013,113(5):3516-3604)、农药(化学试剂,2016,38(03):224-230)、光电材料(Tetrahedron,2013,69(48):10357-10360)等多个领域中。据文献报道，金刚烷衍生物具有抗肿瘤(Investigational New Drugs,2009,27(6):586-594、应用化学,2018,35(4):420-426)、抗病毒(Journal of Infectious Diseases,1989,159(3):430-435、中国新药杂志,2016,25(7):798-803)、抗抑郁(兰州大学学报,1984,37(3):66-76、生物化工,2017,3(01):70-72)等生物活性，正引起药物研发者越来越多的关注。此外，在医药领域，具有“亲脂性子弹”(金刚烷通常被认为能提供特殊的亲脂性)的金刚烷还可作为已知药效剂的“附加剂”，例如磺酰脲类降血糖药物(Journal ofMedicinal Chemistry,1963,6(6):760)，合成代谢类固醇(Journal ofMedicinal Chemistry,1965,8(5):580)，核苷(Journal ofMedicinalChemistry,1967,10(2):189-199)等，其常常被用于增强药物的亲脂性和稳定性，从而改善其药物代谢动力学。
酰胺类化合物具有广谱生物活性，从而广泛应用于医药和农药等领域。据文献报道，酰胺类化合物具有抗肿瘤(有机化学,2018,38(10):2657-2697)、抗病毒(应用化学,2012,29(7):762-768)、抗癌(中国科学:化学,2016,46(09):823-847)、杀虫(ChineseChemical Letters,2013,24:673-676)、杀菌(有机化学,2003,23(10):1131-1134)、除草(有机化学,2013,33(12):2538-2544)等活性。同时，酯类化合物具有广泛的抗肿瘤(药学学报,2013,48(06):874-880、生命科学,2015,27(09):1181-1192)、杀菌(农药,2009,48(2):150-152、应用化学,2001(08):640-642)以及除草(Chem Industry Engin Prog,2002,21(3):169-171,185、粮食与油脂,2010(7):41-43)等方面的生物活性，在药物创制领域也受到广泛关注。
鉴于金刚烷类衍生物、酰胺类以及酯类化合物均具有良好的生物活性，为了发现新型的药物先导，本发明利用活性亚结构拼接的方法将金刚烷、酰胺以及酯基三种结构相拼接，设计合成了一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物，有望具有较好的生物活性。
本发明设计并合成的系列2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物，其结构以及生物活性研究均未见有文献报道。
发明内容
为了解决现有技术存在的上述技术问题，本发明的目的在于提供一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物及其制备方法和应用，本发明的2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物的制备方法简单，且该2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物表现出一定的抗肿瘤活性。
所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物，其特征在于其化学结构式如式(I)所示：
Figure BDA0002179708870000021
Figure BDA0002179708870000031
式(I)中，R为苯基、取代苯基或取代吡啶基；所述取代苯基的苯环上的H或取代吡啶基的吡啶环上的H被取代基单取代或多取代，所述单取代或多取代的取代基各自独立地选自C1～C5的烷基、C1～C3的烷氧基、硝基、C1～C5卤代烷基或卤素。
所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物，其特征在于所述单取代或多取代的取代基各自独立地选自甲基、叔丁基、正戊基、甲氧基、硝基、三氟甲基、F或Cl。
所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物，其特征在于式(I)中，所述R为苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、4-氯苯基、2-氟苯基、3-氟苯基、4-氟苯基、2-硝基苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、4-叔丁基苯基、4-正戊基苯基、4-甲氧基苯基、2,3-二氯苯基、2,4-二氯苯基、2-三氟甲基苯基、2,4,5-三氟苯基、3-硝基-4甲基苯基、2,6-二氟苯基、2,3,5,6-四氟苯基、2-氯吡啶基、5,6-二氯吡啶基或2,6-二氯-5-氟吡啶基。
所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物的合成方法，其特征在于包括以下步骤：
1)将式(Ⅲ)所示的取代甲酰氯溶解于溶剂A中，配制得到取代甲酰氯溶液，备用；
2)将如式(Ⅱ)所示的中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺、溶剂B和缚酸剂混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加步骤1)配制的取代甲酰氯溶液，滴加完毕后，室温反应，TLC监测至反应结束后，过滤，滤液脱溶除去溶剂，脱溶残余物经柱层析分离制得如式(I)所示的2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物；
Figure BDA0002179708870000041
式(Ⅲ)中，R为苯基、取代苯基或取代吡啶基；所述取代苯基的苯环上的H或取代吡啶基的吡啶环上的H被取代基单取代或多取代，所述单取代或多取代的取代基各自独立地选自C1～C5的烷基、C1～C3的烷氧基、硝基、C1～C5卤代烷基或卤素。
所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物的合成方法，其特征在于步骤1)中的溶剂A和步骤2)中的溶剂B相同，所述溶剂B为四氢呋喃或乙腈，优选为四氢呋喃；步骤1)中，配制的取代甲酰氯溶液的浓度为0.25～0.5mol/L。
所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物的合成方法，其特征在于如式(Ⅱ)所示的N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺与如式(Ⅲ)所示的取代甲酰氯的投料摩尔比为1:1～5.0，优选为1:1～1.5。
所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物的合成方法，其特征在于步骤2)中，所述缚酸剂为三乙胺或吡啶，优选为三乙胺；如式(Ⅱ)所示的N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺与缚酸剂的摩尔比为1:1～5，优选为1:1.2～2。
所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物的合成方法，其特征在于如式(Ⅱ)所示的N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺与溶剂B的摩尔比为1:30～150，优选为1:70～120；步骤2)中，室温下反应的时间为1～5小时，优选为2～4小时。
所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物的合成方法，其特征在于步骤2)中，柱层析分离采用的洗脱剂为体积比1:3～8的乙酸乙酯与石油醚的混合液。
所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物在制备抗肿瘤药物的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果体现在：
本发明提供了一类新型的2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物，该类化合物制备方法简单，表现出一定的抗肿瘤活性，本发明在实施例中进行了酪氨酰-DNA磷酸二酯酶1(TDP1)、酪氨酰-DNA磷酸二酯酶2(TDP2)以及拓扑异构酶I(TOP I)的抑制活性测试。结果表明合成的化合物Ia-Iw中，大部分化合物对酪氨酰DNA磷酸二酯酶I(TDP I)、拓扑异构酶I(TOP I)表现出一定的抑制活性。化合物Ib、Ir、Is对TDP I表现出中等抑制活性，其抑制率均达50％以上，其中化合物Is对TDP I的抑制率可达65.9％；化合物Ie、Ii、Is、Iu对TOPI的抑制率均大于35％，其中化合物Ii对TOP I的抑制率可达49.4％。此外，化合物Ic、Iu对酪氨酰-DNA磷酸二酯酶II(TDP2)也表现出一定抑制活性。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明，但本发明的保护范围并不限于此。
实施例1 化合物Ia(R＝苯基)的合成：
将1.5mmol苯甲酰氯溶解于5mL四氢呋喃中，配制得到苯甲酰氯(1.5mmol)的四氢呋喃溶液(5mL)。
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(10mL)以及缚酸剂三乙胺(1.8mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加苯甲酰氯(1.5mmol)的四氢呋喃溶液(5mL)。滴加完毕后，室温反应3h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到白色固体(洗脱剂为体积比1:5的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为67.4％。m.p.:101～104℃；
1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ7.97(dd,J＝8.0,0.5Hz,2H),7.68–7.63(m,1H),7.56–7.50(m,2H),6.17(s,1H),4.27(t,J＝5.5Hz,2H),3.43(q,J＝5.5Hz,2H),1.94(s,3H),1.74(d,J＝2.5Hz,6H),1.69–1.58(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C20H25NO3[M+H]+327.1859,found 327.1723。
实施例2 化合物Ib(R＝2-氯苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(12mL)以及缚酸剂三乙胺(2.7mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加2-氯苯甲酰氯(2.0mmol)的四氢呋喃溶液(6mL)。滴加完毕后，室温反应4h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到白色固体(洗脱剂为体积比1:4的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为2-氯苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为65.3％。m.p.:120～123℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.83(dd,J＝7.5,1.0Hz,1H),7.49–7.42(m,2H),7.37–7.32(m,1H),6.11(s,1H),4.44(t,J＝5.0Hz,2H),3.66(q,J＝5.5Hz,2H),2.03(s,3H),1.85(d,J＝2.5Hz,6H),1.76–1.66(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C20H24ClNO3[M+H]+361.1418,found 361.1457。
实施例3 化合物Ic(R＝3-氯苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(12mL)以及缚酸剂三乙胺(2.7mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加3-氯苯甲酰氯(2.0mmol)的四氢呋喃溶液(6mL)。滴加完毕后，室温反应3h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到白色固体(洗脱剂为体积比1:3的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为3-氯苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为52.5％。m.p.:127～130℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.94(s,1H),7.86(d,J＝7.5Hz,1H),7.48(d,J＝7.5Hz,1H),7.34(t,J＝8.0Hz,1H),6.23(s,1H),4.38(t,J＝5.0Hz,2H),3.60(dd,J＝10.5,5.5Hz,2H),1.97(s,3H),1.80(s,6H),1.70–1.61(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C20H24ClNO3[M+H]+361.1433,found 361.1486。
实施例4 化合物Id(R＝4-氯苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(12mL)以及缚酸剂三乙胺(2.7mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加4-氯苯甲酰氯(2.0mmol)的四氢呋喃溶液(6mL)。滴加完毕后，室温反应4h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到白色固体(洗脱剂为体积比1:4的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为4-氯苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为50.4％。m.p.:136～138℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.97(d,J＝8.5Hz,2H),7.42(d,J＝8.5Hz,2H),6.07(s,1H),4.42(t,J＝5.0Hz,2H),3.64(dd,J＝10.5,5.0Hz,2H),2.02(s,3H),1.83(d,J＝2.5Hz,6H),1.75–1.66(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C20H24ClNO3[M+H]+361.1419,found 361.1399。
实施例5 化合物Ie(R＝2-氟苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(8.5mL)以及缚酸剂三乙胺(2.25mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加2-氟苯甲酰氯(1.5mmol)的四氢呋喃溶液(4mL)。滴加完毕后，室温反应3h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到黄色固体(洗脱剂为体积比1:4的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为2-氟苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为66.7％。m.p.:107～109℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.95(td,J＝7.5,2.0Hz,1H),7.58–7.52(m,1H),7.24(t,J＝7.5Hz,1H),7.16(dd,J＝10.5,8.5Hz,1H),6.13(s,1H),4.43(t,J＝5.0Hz,2H),3.66(dd,J＝10.5,5.5Hz,2H),2.04(s,3H),1.86(d,J＝2.5Hz,6H),1.77–1.68(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C20H24FNO3[M+H]+345.1744,found 345.1771。
实施例6 化合物If(R＝3-氟苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(8.5mL)以及缚酸剂三乙胺(2.25mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加3-氟苯甲酰氯(1.5mmol)的四氢呋喃溶液(4mL)。滴加完毕后，室温反应3h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到白色固体(洗脱剂为体积比1:3的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为3-氟苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为66.8％。m.p.:121～124℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.75(d,J＝7.5Hz,1H),7.62(d,J＝9.0Hz,1H),7.38–7.31(m,1H),7.22–7.15(m,1H),6.33(s,1H),4.35(t,J＝5.5Hz,2H),3.57(q,J＝5.5Hz,2H),1.93(s,3H),1.77(d,J＝1.0Hz,6H),1.67–1.58(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C20H24FNO3[M+H]+345.1717,found 345.1773。
实施例7 化合物Ig(R＝4-氟苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(8.5mL)以及缚酸剂三乙胺(2.25mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加4-氟苯甲酰氯(1.5mmol)的四氢呋喃溶液(4mL)。滴加完毕后，室温反应3h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到黄色固体(洗脱剂为体积比1:4的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为4-氟苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为57.2％。m.p.:115～117℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.06–8.02(m,2H),7.13–7.08(m,2H),6.11(s,1H),4.41(t,J＝5.5Hz,2H),3.63(q,J＝5.5Hz,2H),2.01(s,3H),1.82(d,J＝2.5Hz,6H),1.75–1.64(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C20H24FNO3[M+H]+345.141,found 345.1743。
实施例8 化合物Ih(R＝2-硝基苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(14.6mL)以及缚酸剂三乙胺(3.0mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加2-硝基苯甲酰氯(2.0mmol)的四氢呋喃溶液(7.5mL)。滴加完毕后，室温反应4h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到淡黄色固体(洗脱剂为体积比1:4的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为2-硝基苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为49.6％。m.p.:116～119℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.87–8.82(m,1H),8.46–8.41(m,1H),8.37(d,J＝8.0Hz,1H),7.68(t,J＝8.0Hz,1H),6.07(s,1H),4.49(t,J＝5.0Hz,2H),3.68(q,J＝5.5Hz,2H),2.03(s,3H),1.84(d,J＝2.5Hz,6H),1.75–1.67(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C20H24N2O5[M+H]+372.1742,found 372.1712。
实施例9 化合物Ii(R＝3-甲基苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(12mL)以及缚酸剂三乙胺(3.0mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加3-甲基苯甲酰氯(1.5mmol)的四氢呋喃溶液(6mL)。滴加完毕后，室温反应3h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到淡黄色固体(洗脱剂为体积比1:6的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为3-甲基苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为64.7％。m.p.:98～100℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.86–7.82(m,2H),7.38(d,J＝7.5Hz,1H),7.33(t,J＝15.5,8.0Hz,1H),6.18(s,1H),4.42(t,J＝5.0Hz,2H),3.64(q,J＝5.5Hz,2H),2.40(s,3H),2.02(s,3H),1.84(d,J＝2.5Hz,6H),1.76–1.66(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C21H27NO3[M+H]+341.2045,found 341.2012。
实施例10 化合物Ij(R＝4-甲基苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(12mL)以及缚酸剂三乙胺(2.0mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加4-甲基苯甲酰氯(1.5mmol)的四氢呋喃溶液(6mL)。滴加完毕后，室温反应3h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到淡黄色固体(洗脱剂为体积比1:6的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为4-甲基苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为54.4％。m.p.:93～95℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.93(d,J＝8.0Hz,2H),7.25(d,J＝8.0Hz,2H),6.13(s,1H),4.41(t,J＝5.0Hz,2H),3.64(q,J＝4.5Hz,2H),2.42(s,3H),2.02(s,3H),1.84(d,J＝2.5Hz,6H),1.74–1.65(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C21H27NO3[M+H]+341.2023,found 341.2062。
实施例11 化合物Ik(R＝4-叔丁基苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(14.6mL)以及缚酸剂三乙胺(3.0mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加4-叔丁基苯甲酰氯(1.5mmol)的四氢呋喃溶液(7.5mL)。滴加完毕后，室温反应3h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到黄色固体(洗脱剂为体积比1:6的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为4-叔丁基苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为49.9％。m.p.:122～124℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.97(d,J＝8.5Hz,2H),7.48(d,J＝8.5Hz,2H),6.13(s,1H),4.43(t,J＝5.5Hz,2H),3.64(q,J＝5.5Hz,2H),2.03(s,3H),1.85(d,J＝2.5Hz,6H),1.76–1.67(m,6H),1.35(s,9H)；
HRMS(ESI)calcd C24H33NO3[M+H]+383.2553,found 383.2524。
实施例12 化合物Il(R＝4-正戊基苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(14.6mL)以及缚酸剂三乙胺(3.0mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加4-正戊基苯甲酰氯(1.5mmol)的四氢呋喃溶液(7.5mL)。滴加完毕后，室温反应3h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到黄色固体(洗脱剂为体积比1:6的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为4-正戊基苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为49.9％。m.p.:122～124℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.91(d,J＝8.5Hz,2H),7.20(d,J＝8.5Hz,2H),6.30(s,1H),4.37(t,J＝5.5Hz,2H),3.60(q,J＝5.5Hz,2H),2.62–2.58(m,2H),1.97(s,3H),1.81(d,J＝2.5Hz,6H),1.69–1.60(m,6H),1.60–1.56(m,2H),1.30–1.24(m,4H),0.85(t,J＝7.0Hz,3H)；
HRMS(ESI)calcd C25H35NO3[M+H]+397.2556,found 397.2544。
实施例13 化合物Im(R＝4-甲氧基苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃12mL)以及缚酸剂三乙胺(2.2mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加4-甲氧基苯甲酰氯(1.5mmol)的四氢呋喃溶液(6mL)。滴加完毕后，室温反应3h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到淡黄色固体(洗脱剂为体积比1:8的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为4-甲氧基苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为61.6％。m.p.:124～126℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.02–7.99(m,2H),6.96–6.93(m,2H),6.10(s,1H),4.41(t,J＝5.0Hz,2H),3.88(s,3H),3.64(q,J＝5.5Hz,2H),2.04(s,3H),1.84(d,J＝2.5Hz,6H),1.76–1.67(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C21H27NO4[M+H]+357.1945,found 357.1946。
实施例14 化合物In(R＝2,3-二氯苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(14.6mL)以及缚酸剂三乙胺(3.0mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加2,3-二氯苯甲酰氯(2.0mmol)的四氢呋喃溶液(7.5mL)。滴加完毕后，室温反应4h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到白色固体(洗脱剂为体积比1:4的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为2,3-二氯苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为50.5％。m.p.:102～105℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.63–7.58(m,1H),7.58–7.52(m,1H),7.23(t,J＝7.5Hz,1H),6.19(s,1H),4.38(t,J＝5.0Hz,2H),3.58(q,J＝5.5Hz,2H),1.96(s,3H),1.78(d,J＝2.0Hz,6H),1.69–1.58(m,6H)；；
HRMS(ESI)calcd C20H23Cl2NO3[M+H]+395.1113,found 395.1233。
实施例15 化合物Io(R＝2,4-二氯苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(14.6mL)以及缚酸剂三乙胺(3.0mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加2,4-二氯苯甲酰氯(2.0mmol)的四氢呋喃溶液(7.5mL)。滴加完毕后，室温反应3h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到淡黄色固体(洗脱剂为体积比1:5的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为2,4-二氯苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为56.1％。m.p.:108～110℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.82(d,J＝8.5Hz,1H),7.49(d,J＝2.0Hz,1H),7.36–7.32(m,1H),6.09(s,1H),4.44(t,J＝5.0Hz,2H),3.66(q,J＝5.5Hz,2H),2.04(s,3H),1.85(d,J＝2.5Hz,6H),1.76–1.66(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C20H23Cl2NO3[M+H]+395.1131,found 396.0213。
实施例16 化合物Ip(R＝2-三氟甲基苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(9mL)以及缚酸剂三乙胺(2.7mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加2-三氟甲基苯甲酰氯(1.5mmol)的四氢呋喃溶液(4.5mL)。滴加完毕后，室温反应3h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到白色固体(洗脱剂为体积比1:3的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为2-三氟甲基苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为65.6％。m.p.:127～129℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.76–7.72(m,1H),7.69–7.66(m,1H),7.58–7.53(m,2H),6.21(s,1H),4.35(t,J＝5.5Hz,2H),3.56(q,J＝5.5Hz,2H),1.94(s,3H),1.78(d,J＝2.5Hz,6H),1.67–1.58(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C21H24F3NO3[M+H]+395.1742,found 396.0242。
实施例17 化合物Iq(R＝2,4,5-三氟苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(14mL)以及缚酸剂三乙胺(2.8mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加2,4,5-三氟苯甲酰氯(1.5mmol)的四氢呋喃溶液(7mL)。滴加完毕后，室温反应4h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到淡黄色固体(洗脱剂为体积比1:3的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为2,4,5-三氟苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为73.3％。m.p.:143～145℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.85–7.77(m,1H),7.08–6.99(m,1H),6.05(s,1H),4.43(t,J＝5.0Hz,2H),3.64(q,J＝5.5Hz,2H),2.04(s,3H),1.85(d,J＝2.5Hz,6H),1.76–1.67(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C20H22F3NO3[M+H]+381.1640,found 381.1599。
实施例18 化合物Ir(R＝3-硝基-4-甲基苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(14.6mL)以及缚酸剂三乙胺(3.0mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加3-硝基-4-甲基苯甲酰氯(1.5mmol)的四氢呋喃溶液(7.5mL)。滴加完毕后，室温反应4h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到黄色固体(洗脱剂为体积比1:4的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为3-硝基-4甲基苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为58.7％。m.p.:89～92℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.42(d,J＝1.5Hz,1H),8.05–8.00(m,1H),7.35(d,J＝8.0Hz,1H),6.36(s,1H),4.35(t,J＝5.5Hz,2H),3.57(q,J＝5.5Hz,2H),2.53(s,3H),1.91(s,3H),1.75(d,J＝2.5Hz,6H),1.66–1.57(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C21H26N2O5[M+H]+386.1845,found 386.0845。
实施例19 化合物Is(R＝2,6-二氟苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(12mL)以及缚酸剂三乙胺(2.7mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加2,6-二氟苯甲酰氯(1.5mmol)的四氢呋喃溶液(6mL)。滴加完毕后，室温反应4h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到白色固体(洗脱剂为体积比1:3的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为2,6-二氟苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为65.6％。m.p.:127～129℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.49–7.42(m,1H),6.99(t,J＝8.0Hz,2H),6.07(s,1H),4.45(t,J＝5.5Hz,2H),3.64(q,J＝5.5Hz,2H),2.05(s,3H),1.86(d,J＝2.5Hz,6H),1.77–1.68(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C20H23F2NO3[M+H]+363.1640,found 363.1545。
实施例20 化合物It(R＝2,3,5,6-四氟苯基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(14mL)以及缚酸剂三乙胺(2.7mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加2,3,5,6-四氟苯甲酰氯(2.25mmol)的四氢呋喃溶液(7mL)。滴加完毕后，室温反应4h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到白色固体(洗脱剂为体积比1:3的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为2,3,5,6-四氟苯甲酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为65.6％。m.p.:127～129℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.29–7.20(m,1H),6.03(s,1H),4.48(t,J＝10.5,5.0Hz,2H),3.64(q,J＝5.5Hz,2H),2.04(s,3H),1.85(d,J＝2.5Hz,6H),1.76–1.68(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C20H21F4NO3[M+H]+399.1539,found 399.1565。
实施例21 化合物Iu(R＝2-氯吡啶基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(14.6mL)以及缚酸剂三乙胺(2.4mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加2-氯吡啶-3-甲酰氯(2.25mmol)的四氢呋喃溶液(7.5mL)。滴加完毕后，室温反应4h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到得到白色固体(洗脱剂为体积比1:5的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为2-氯烟酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为70.1％。m.p.:99～102℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.44–8.40(m,1H),8.12–8.07(m,1H),7.30–7.26(m,1H),6.21(s,1H),4.35(t,J＝5.5Hz,2H),3.55(q,J＝5.5Hz,2H),1.91(s,3H),1.73(q,J＝12.5Hz,6H),1.64–1.55(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C19H23ClN2O3[M+H]+362.1485,found 362.1439。
实施例22 化合物Iv(R＝5,6-二氯吡啶基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(14.6mL)以及缚酸剂三乙胺(3.0mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加5,6-二氯吡啶-3-甲酰氯(2.25mmol)的四氢呋喃溶液(7.5mL)。滴加完毕后，室温反应4h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到白色固体(洗脱剂为体积比1:5的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为5,6-二氯烟酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为62.8％。m.p.:126～129℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.86(d,J＝2.0Hz,1H),8.35(d,J＝2.0Hz,1H),6.01(s,1H),4.46(t,J＝5.5Hz,2H),3.65(q,J＝5.5Hz,2H),2.03(s,3H),1.83(d,J＝2.0Hz,6H),1.75–1.66(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C19H22Cl2N2O3[M+H]+396.1030,found 396.0038。
实施例23 化合物Iw(R＝2,6-二氯-5-氟吡啶基)的合成：
将中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺(0.335g，1.5mmol)和四氢呋喃(14.6mL)以及缚酸剂三乙胺(2.0mmol)混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加2,6-二氯-5-氟吡啶-3-甲酰氯(2.25mmol)的四氢呋喃溶液(7.5mL)。滴加完毕后，室温反应3h，随后过滤除去反应生成的三乙胺的盐酸盐，将滤液旋蒸除去溶剂四氢呋喃，所得旋蒸残余物经柱层析分离得到白色固体(洗脱剂为体积比1:3的乙酸乙酯与石油醚的混合液)，即为2,6-二氯-5-氟烟酸-2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙酯，计算其收率为58.9％。m.p.:134～136℃；
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.01(d,J＝7.5Hz,1H),6.20(s,1H),4.39(t,J＝5.0Hz,2H),3.59(q,J＝5.5Hz,2H),1.95(s,3H),1.76(d,J＝2.0Hz,6H),1.69–1.58(m,6H)；
HRMS(ESI)calcd C19H21Cl2FN2O3[M+H]+414.0929,found 414.0836。
实施例24 抗肿瘤活性测试：
对实施例1～23中合成的2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物标记为待测化合物。对待测化合物进行了酪氨酰-DNA磷酸二酯酶1(TDP 1)、酪氨酰-DNA磷酸二酯酶2(TDP 2)以及拓扑异构酶I(TOP I)的抑制活性测试。其测试方法如下：
(1)酪氨酰-DNA磷酸二酯酶1(TDP1)抑制活性的测试
反应体系(40μL)：100nM TDP1 Dilution Buffer(200nM TDP1、10mM Tris-HCl、50mM KCl、1mM EDTA、2mM DTT，pH＝7.5)20μL，50μM浓度的待测化合物的DMSO溶液2μL，缓冲溶液：(10mM Tris-HCl、50mM KCl、1mM EDTA，pH＝7.5)补足体积。震荡30s混匀后，于37℃孵育30min，使用酶标仪检测Ex485 nm/Em510 nm处的背景荧光值，加入LinearOligonucleotide 20μL，震荡混匀检测Ex485 nm/Em510 nm处的反应荧光值，即测得Compound组荧光值。
Control组荧光值的测试方法步骤重复上述Compound组荧光值的测试过程，不同之处在于：将50μM浓度的待测化合物的DMSO溶液替换为同等体积量的DMSO溶剂。其他操作条件同Compound组荧光值测试过程，最终测得Control组荧光值。
Blank组荧光值的测试过程如下：反应体系(40μL)，DMSO溶剂2μL，用缓冲溶液(10mM Tris-HCl、50mM KCl、1mM EDTA，pH＝7.5)补足至40μL的体积。震荡30s混匀后，于37℃孵育30min，使用酶标仪检测Ex485nm/Em510 nm处的背景荧光值，加入LinearOligonucleotide 20μL，震荡混匀检测Ex485 nm/Em510 nm处的反应荧光值，即测得Blank组荧光值。
通过对比Control组、Blank组荧光值的不同，计算各化合物的抑制率，其抑制率计算公式为：
抑制率(％)＝(1-(RFU2-RFU3)/(RFU1-RFU3))×100％ (1-1)
其中：RFU1为Control组反应荧光值减去背景荧光值；
RFU2为Compound组反应荧光值减去背景荧光值；
RFU3为Blank组反应荧光值减去背景荧光值。
(2)酪氨酰-DNA磷酸二酯酶2(TDP 2)抑制活性的测试
反应体系(40μL)：先加入缓冲溶液(25mM Hepes、10mM MgCl2、130mM KCl，pH＝8.0)9μL，再加入50μM浓度的待测化合物的DMSO溶液1μL，震荡混匀后使用酶标仪在405nm下测定背景吸收值，加入300nM TDP210μL，混匀后加入20μLNPPP Solution，震荡1min后，放于37℃恒温培养箱中培养90min，然后每孔均加入5μL EDTA Stop Solution终止TDP 2与NPPP的反应。在405nm处测定此时各孔的紫外吸收度A，即测得Compound组的紫外吸收度。
Control组紫外吸收度的测试方法步骤重复上述Compound组紫外吸收度的测试过程，不同之处在于：将50μM浓度的待测化合物的DMSO溶液替换为同等体积量的DMSO溶剂。其他操作条件同Compound组紫外吸收度的测试过程，最终测得Control组的紫外吸收度。
Blank组紫外吸收度的测试过程如下：先加入缓冲溶液(25mM Hepes、10mM MgCl2、130mM KCl，pH＝8.0)19μL，再加入DMSO溶剂1μL，震荡混匀后使用酶标仪在405nm下测定背景吸收值，混匀后加入20μLNPPP Solution，震荡1min后，放于37℃恒温培养箱中培养90min，然后每孔均加入5μL EDTA Stop Solution终止TDP2与NPPP的反应。在405nm处测定此时各孔的紫外吸收度A，最终测得Blank组的紫外吸收度。
计算各化合物的抑制率，其抑制率计算公式为：
抑制率(％)＝(1-(A2-A3)/(A1-A3))×100％ (1-2)
其中：A1为Control组反应紫外吸收减去背景紫外吸收；
A2为Compound组反应紫外吸收减去背景紫外吸收；
A3为Blank组反应紫外吸收减去背景紫外吸收。
(3)拓扑异构酶I(TOP I)抑制活性的测试
采用DNA松散实验测试了待测化合物对TOP I的抑制活性，待测化合物的测试浓度为50μM。
反应***(20μL)：0.2μg/μL负超螺旋型质粒p322 DNA 1μL,0.5μg/μL的Top1 1μL，50μM浓度的待测化合物的DMSO溶液1μL，缓冲溶液：(20mM Tris,pH 7.5,0.1mM EDTA,10mMMgCl2,100mM KCl,50μg/mL acetylated BSA)补足体积。配置好样品后，在37℃下孵育半个小时。孵育完毕后加入4μL6×Loading buffer混合，加入0.8％琼脂糖凝胶的样品孔中，4.6V/cm电泳1.5小时。电泳结束后，将琼脂糖凝胶放入1×gel red的水溶液中染色0.5小时，用Fluor-S multimager凝胶成像***定量分析，测得样品的光密度值，即松散条带的光密度值S1。
超螺旋条带的光密度值S2的测试方法：仅加入0.2μg/μL负超螺旋型质粒p322 DNA1μL,然后用缓冲溶液：(20mM Tris,Ph 7.5,0.1mM EDTA,10mM MgCl2,100mM KCl,50μg/mLacetylated BSA)补足体积。后续操作同上，测得空白对照的光密度值，即超螺旋条带的光密度值S2。
计算各化合物的抑制率。其抑制率计算公式为：
抑制率(％)＝(S1/S2)×100％
式中：S1为松散条带的光密度值；S2为超螺旋条带的光密度值。
测试结果见表1。
表1 化合物Ia～Iw抗肿瘤活性筛选试验结果
Figure BDA0002179708870000221
由表1可知，本发明实施例所示的化合物Ia-Iw中，大部分化合物对酪氨酰DNA磷酸二酯酶1(TDP 1)、拓扑异构酶I(TOP I)具有一定的抑制活性。化合物Ib、Ir、Is对TDP 1表现出中等抑制活性，其抑制率均达50％以上，其中化合物Is对TDP 1的抑制率可达65.9％；化合物Ie、Ii、Is、Iu对TOP I的抑制率均大于35％，其中化合物Ii对TOP I的抑制率可达49.4％。此外，化合物Ic、Iu对酪氨酰-DNA磷酸二酯酶2(TDP 2)也表现出一定抑制活性。
本说明书所述的内容仅仅是对发明构思实现形式的列举，本发明的保护范围不应当被视为仅限于实施例所陈述的具体形式。

Claims (12)

1.一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物，其特征在于其化学结构式如式（I）所示：
Figure DEST_PATH_IMAGE001
式（I）中，所述R为苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、2-氟苯基、3-氟苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、4-叔丁基苯基、4-正戊基苯基、2,3-二氯苯基、3-硝基-4甲基苯基、2,6-二氟苯基、2,3,5,6-四氟苯基、2-氯吡啶基或5,6-二氯吡啶基。
2.如权利要求1所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物的合成方法，其特征在于包括以下步骤：
1）将式（Ⅲ）所示的取代甲酰氯溶解于溶剂A中，配制得到取代甲酰氯溶液，备用；
2）将如式（Ⅱ）所示的中间体N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺、溶剂B和缚酸剂混合，搅拌溶解，于冰浴条件下逐滴缓慢滴加步骤1）配制的取代甲酰氯溶液，滴加完毕后，室温反应，TLC监测至反应结束后，过滤，滤液脱溶除去溶剂，脱溶残余物经柱层析分离制得如式（I）所示的2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物；
Figure DEST_PATH_IMAGE002
式（Ⅲ）中，所述R为苯基、2-氯苯基、3-氯苯基、2-氟苯基、3-氟苯基、3-甲基苯基、4-甲基苯基、4-叔丁基苯基、4-正戊基苯基、2,3-二氯苯基、3-硝基-4甲基苯基、2,6-二氟苯基、2,3,5,6-四氟苯基、2-氯吡啶基或5,6-二氯吡啶基。
3.如权利要求2所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物的合成方法，其特征在于步骤1）中的溶剂A和步骤2）中的溶剂B相同，所述溶剂B为四氢呋喃或乙腈；步骤1）中，配制的取代甲酰氯溶液的浓度为0.25~0.5 mol/L。
4.如权利要求3所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物的合成方法，其特征在于溶剂B为四氢呋喃。
5.如权利要求2所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物的合成方法，其特征在于如式（Ⅱ）所示的N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺与如式（Ⅲ）所示的取代甲酰氯的投料摩尔比为1 : 1～5.0。
6.如权利要求5所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物的合成方法，其特征在于如式（Ⅱ）所示的N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺与如式（Ⅲ）所示的取代甲酰氯的投料摩尔比为1 : 1~1.5。
7.如权利要求2所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物的合成方法，其特征在于步骤2）中，所述缚酸剂为三乙胺或吡啶；如式（Ⅱ）所示的N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺与缚酸剂的摩尔比为1 : 1～5。
8.如权利要求7所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物的合成方法，其特征在于步骤2）中，所述缚酸剂为三乙胺；如式（Ⅱ）所示的N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺与缚酸剂的摩尔比为1 : 1.2～2。
9.如权利要求2所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物的合成方法，其特征在于如式（Ⅱ）所示的N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺与溶剂B的摩尔比为1 : 30～150；步骤2）中，室温下反应的时间为1~5小时。
10.如权利要求9所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物的合成方法，其特征在于如式（Ⅱ）所示的N-2-羟基乙基-1-金刚烷甲酰胺与溶剂B的摩尔比为1 : 70～120；步骤2）中，室温下反应的时间为2~4小时。
11.如权利要求2所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物的合成方法，其特征在于步骤2）中，柱层析分离采用的洗脱剂为体积比1: 3~8的乙酸乙酯与石油醚的混合液。
12.如权利要求1所述的一种2-(1-金刚烷甲酰胺基)乙基甲酸酯类化合物在制备抑制TDP1、TDP2或TOP I的抗肿瘤药物中的应用。
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