CN110403898A - 一种冻肽面膜及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供了一种冻肽面膜及其制备方法，涉及生物细胞护肤品技术领域，包括间充质干细胞冻肽溶液、混合植物提取物溶液、甘油溶液以及面膜基底，间充质干细胞冻肽溶液包含提取物冻干粉，提取物冻干粉使得干细胞提取物的活性及功能得到了保存和利用，有效延长其作用效果，并且通过与相应配比的烟积雪草提取物、母菊花提取物、虎杖根提取物以及芩根提取物在适当温度环境进行混合并被面膜基底吸附，然后面膜整体冻干处理，从而使得冻肽面膜达到有效保湿、淡化色斑、去皱等修复皮肤问题的疗效。

Description

一种冻肽面膜及其制备方法

技术领域

本发明涉及生物细胞护肤品技术领域，尤其涉及一种冻肽面膜及其制备方法。

背景技术

面膜是美容保养品的一种载体，目前粉末调和、高岭土、无纺布、蚕丝面膜、天丝面膜、生物纤维面膜、不织布面膜材质的面膜使用十分广泛。超导膜面膜为最新一代创新的技术。

面膜，是护肤品中的一个类别。其最基本的目的是弥补卸妆与洗脸仍然不足的清洁工作，在此基础上配合其它精华成分实现其它的保养功能，例如补水保湿、美白、抗衰老、平衡油脂等等。

目前研究结果表明干细胞对于女性的皮肤至关重要，皮肤保持年轻、完整以及出现问题以后的修复都要靠干细胞，而且很多顽固性的皮肤问题一般的护肤品解决不了，要从根本上解决问题还是要修复皮肤，间充质干细胞的皮肤修复能力就很强，而且近几年在皮肤损伤领域的应用越来越广泛，效果也很显著。

其中间充质干细胞属于多能干细胞，具有多向分化、造血支持和促进干细胞植入、免疫调控等多种功能，主要存在于胎盘、脐带、脂肪和骨髓中；间充质干细胞在生长过程中会分泌几百种细胞因子，这些细胞因子能够促进皮肤组织分化、血管新生以及肉芽组织的生长，从而促进损伤皮肤组织的结构重建与再生修复，减少疤痕组织的产生。用于各种急慢性皮肤损伤、湿疹、过敏及溃疡的修复。而且能够调节局部组织的免疫功能，减少创面组织的细菌感染及炎症反应。

间充质干细胞提取物包括细胞分泌的直径为30～150nm的小囊泡，内含来源于细胞相关的蛋白质与核苷酸等生物分子，在细胞交流间起重要作用。提取物是细胞分泌的小生物膜囊泡，与间充质干细胞相比，提取物体积更小、复杂性更低，易于生产和存储，间充质干细胞提取物富含生物活性分子，如蛋白质和RNA，存在于提取物中的许多蛋白质都属于酶类，具有催化活性。但是目前普遍存在的一个问题是细胞因子和提取物的生物活性难以持续作用，造成其作用效果持久力较低，尽管面膜已经普遍应用于化妆品中，但是鉴于干细胞提取物的特性，仍旧难以有效将器应用到面膜上，因此如何能够延长细胞因子及提取物生物活性的保存并将其与其他成分配合使用，使包含干细胞提取物的面膜达到皮肤修复的作用成为了本领域技术人员亟待解决的问题。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术中存在的不足，提供一种冻肽面膜及其制备方法，该冻肽面膜能够长期保存干细胞提取物的有效活性，并且通过与其他成分配比，使用简单，有效实现保湿、淡化色斑、去皱等修复皮肤的疗效。

本发明是通过以下技术方案予以实现：一种冻肽面膜，按体积份数比，包括5-10份间充质干细胞冻肽溶液、86-94份混合植物提取物溶液、1-4份甘油溶液以及面膜基底，按质量分数比，所述间充质干细胞冻肽溶液包括10-25份提取物冻干粉以及75-90份蒸馏水，按质量份数比，所述混合植物提取物溶液包括1-3份积雪草提取物、0.5-2份母菊花提取物、0.5-2份虎杖根提取物、0.5-2份芩根提取物以及91-97.5份蒸馏水，按质量份数比，甘油溶液包括40-60份甘油及40-60份蒸馏水，所述提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，所述间充质干细胞提取自羊胎盘的间充质干细胞，并按照正常培养的方法进行培养得到。

根据上述技术方案，优选地，按体积份数比，包括6-8份间充质干细胞冻肽溶液、88-91份混合植物提取物溶液、1-3份甘油溶液以及面膜基底，按质量分数比，所述间充质干细胞冻肽溶液包括15-22份提取物冻干粉以及78-85份蒸馏水，按质量份数比，所述混合植物提取物溶液包括1.5-2.5份积雪草提取物、0.8-1.8份母菊花提取物、0.7-1.8份虎杖根提取物、0.7-1.8份芩根提取物以及92.1-96.3份蒸馏水，按质量份数比，甘油溶液包括42-58份甘油及42-58份蒸馏水，所述提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，所述间充质干细胞提取自羊胎盘的间充质干细胞，并按照正常培养的方法进行培养得到。

根据上述技术方案，优选地，所述间充质干细胞饥饿培养的时间为12-24小时。

根据上述技术方案，优选地，所述间充质干细胞的培养时间为48-72小时。

根据上述技术方案，优选地，该冻肽面膜面膜整体经过冻干处理，并且提取物冻干粉置于-20℃保存。

一种冻肽面膜的制备方法，包括以下步骤：

间充质干细胞的培养：从羊胎盘中分离出间充质干细胞，用无酚红DMEM/F12和体积比浓度为8％-12％胎牛血清做完全培养基，放入T75细胞培养瓶在35-38℃、3-6％CO2条件下进行培养，培养时间为48-72小时；

提取物冻干粉的制备：待间充质干细胞生长程度达到70％-80％，使用生理盐水清洗间充质干细胞2-3次，用复方电解质注射液对间充质干细胞进行饥饿培养12-24小时，待细胞生长程度达到90％-95％后，对间质干细胞进行离心处理，离心完成后收取细胞培养上清液获取干细胞因子，并采用提取物提取试剂盒对间充质干细胞提取物进行提取，其中间充质干细胞提取物主要为外泌体，然后将提取的干细胞因子和外泌体混合均匀后放入冻干机中进行冻干，形成提取物冻干粉，该提取物冻干粉可长期保存；

间充质干细胞冻肽溶液的制备：按质量分数比，称取10-25份提取物冻干粉以及75-90份蒸馏水，在常温下搅拌均匀成间充质干细胞冻肽溶液；

混合植物提取物溶液的制备：按质量份数比，量取1-3份积雪草提取物、0.5-2份母菊花提取物、0.5-2份虎杖根提取物、0.5-2份芩根提取物以及91-97.5份蒸馏水搅拌均匀制得；

甘油溶液的制备：按质量分数比，称取40-60份甘油以及40-60份蒸馏水，搅拌时将甘油溶解于蒸馏水内，搅拌均匀制得；

冻肽面膜的制备：按体积份数比，依次选取5-10份间充质干细胞冻肽溶液、86-94份混合植物提取物溶液以及1-4份甘油溶液放入混合装置内，搅拌均匀制得均匀溶液，然后将该均匀溶液喷洒在面膜表面，最终将面膜整体进行冻干，制得冻肽面膜。

本发明的有益效果是：该面膜将间充质干细胞分泌的所有细胞因子多肽以及提取物等有效成分全部高效提取并进行冻干，使得干细胞提取物的活性及功能得到了保存和利用，而且存活的时间可以更长，能够延长其作用效果，并且通过与相应配比的积雪草提取物、母菊花提取物、虎杖根提取物、芩根提取物以及甘油溶液在常温环境进行混合喷洒在面膜基底上，进行冻干处理，从而使得冻肽面膜有效实现保湿、淡化色斑、去皱等修复皮肤的功效。

具体实施方式

为了使本技术领域的技术人员更好地理解本发明的技术方案，下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明。

实施例1：

本发明提供了一种冻肽面膜，按体积份数比，包括5份间充质干细胞冻肽溶液、93份混合植物提取物溶液、2份甘油溶液以及面膜基底，按质量分数比，所述间充质干细胞冻肽溶液包括10份提取物冻干粉以及90份蒸馏水，按质量份数比，所述混合植物提取物溶液包括1份积雪草提取物、0.5份母菊花提取物、0.5份虎杖根提取物、0.5份芩根提取物以及97.5份蒸馏水，按质量份数比，甘油溶液包括40份甘油及60份蒸馏水，所述提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，饥饿培养的时间为16小时，所述间充质干细胞提取自羊胎盘的间充质干细胞，并按照正常培养的方法进行培养得到，培养时间为16小时。

实施例2：

一种冻肽面膜，按体积份数比，包括10份间充质干细胞冻肽溶液、87份混合植物提取物溶液、3份甘油溶液以及面膜基底，按质量分数比，所述间充质干细胞冻肽溶液包括25份提取物冻干粉以及75份蒸馏水，按质量份数比，所述混合植物提取物溶液包括3份积雪草提取物、2份母菊花提取物、2份虎杖根提取物、2份芩根提取物以及91份蒸馏水，按质量份数比，甘油溶液包括60份甘油及40份蒸馏水，所述提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，饥饿培养的时间为16小时，所述间充质干细胞提取自羊胎盘的间充质干细胞，并按照正常培养的方法进行培养得到，培养时间为56小时。

实施例3：

一种冻肽面膜，按体积份数比，包括8份间充质干细胞冻肽溶液、90份混合植物提取物溶液、2份甘油溶液以及面膜基底，按质量分数比，所述间充质干细胞冻肽溶液包括18份提取物冻干粉以及82份蒸馏水，按质量份数比，所述混合植物提取物溶液包括1.8份积雪草提取物、1份母菊花提取物、1份虎杖根提取物、1份芩根提取物以及95.2份蒸馏水，按质量份数比，甘油溶液包括55份甘油及45份蒸馏水，所述提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，饥饿培养的时间为16小时，所述间充质干细胞提取自羊胎盘的间充质干细胞，并按照正常培养的方法进行培养得到，培养时间为56小时。

根据上述实施例，优选地，提取物冻干粉置于-20℃保存，并且该冻肽面膜面膜整体经过冻干处理。

一种冻肽面膜的制备方法，包括以下步骤：

间充质干细胞的培养：从羊胎盘中分离出间充质干细胞，用无酚红DMEM/F12和体积比浓度为10％胎牛血清做完全培养基，放入T75细胞培养瓶在37℃、5％CO2条件下进行培养，培养时间为56小时；

提取物冻干粉的制备：待间充质干细胞生长程度达到70％-80％，使用生理盐水清洗间充质干细胞2次，用复方电解质注射液对间充质干细胞进行饥饿培养16小时，待细胞生长程度达到90％-95％后，对间质干细胞进行离心处理，离心完成后收取细胞培养上清液获取干细胞因子，并采用提取物提取试剂盒对间充质干细胞提取物进行提取，其中间充质干细胞提取物主要为外泌体，然后将提取的干细胞因子和外泌体混合均匀后放入冻干机中进行冻干，形成提取物冻干粉，该提取物冻干粉可长期在-20℃保存；

间充质干细胞冻肽溶液的制备：按质量分数比，称取10-25份提取物冻干粉以及75-90份蒸馏水，在常温下搅拌均匀成间充质干细胞冻肽溶液；

混合植物提取物溶液的制备：按质量份数比，量取1-3份积雪草提取物、0.5-2份母菊花提取物、0.5-2份虎杖根提取物、0.5-2份芩根提取物以及91-97.5份蒸馏水搅拌均匀制得；

甘油溶液的制备：按质量分数比，称取40-60份甘油以及40-60份蒸馏水，搅拌时将甘油溶解于蒸馏水内，搅拌均匀制得；

冻肽面膜的制备：按体积份数比，依次选取5-10份间充质干细胞冻肽溶液、86-94份混合植物提取物溶液以及1-4份甘油溶液放入混合装置内，搅拌均匀制得均匀溶液，然后将该均匀溶液喷洒在面膜表面，最终将面膜整体进行冻干，制得冻肽面膜。

过敏性试验

第一步试验首先在100只小白鼠背面刮毛并贴敷实施例1-3配比生成的冻肽面膜，连续检测三天，检测人员观察到小白鼠背面没有产生红肿、起痘等不良反应；第二步试验，选取60名20-45周岁的成年志愿者进行试验，60名试验人员分为3组每组20人，分别进行上述3组实施例的产品过敏性检测，所有测试人员的左脸不使用面膜，同时右脸使用面膜，检测人员随时检测测试人员的脸部皮肤变化，经测试人员和检测人员鉴定所有测试者的右脸均没有出现红肿或者起痘等不良反应，因此该冻肽精华不会对人体产生不良反应或者刺激反应。

疗效测试

鉴于女性对于化妆品的精细的鉴别能力，因此选取27-35岁、36-40岁以及41-45岁各60名女性进行测试，三组年龄段的女性再分成3组分别使用实施例1-3的20人测试单元，使用时，测试人员的左脸使用涂抹蒸馏水的半片面膜，右脸使用该面膜，每天一次，每次面膜吸收半个小时，持续使用一个月，使用女性并不知晓两组面膜的成分，然后测试人员分别比对左脸分别对使用该面膜的右脸的保湿、淡化色斑、去皱三项进行评分，A-效果非常显著，B-效果明显，C-效果一般，D-无效果，然后工作人员核对每组选项的评分人数，得到如表1的测试结果：

表1

经过对表1的数据分析，该冻肽面膜对于保湿、淡化色斑、去皱有明显疗效，对于保湿性能，各个年龄段的保湿效果接近，但是实施例3的保湿效果明显优于其他两组实施例；对于淡化色斑以及去皱两项，在一定范围内随着年龄的增大，效果越明显，并且实施例3的效果明显优于实施例1和实施例2，结合表1得出实施例3为最佳实施例。

案例分析：

姓名:王小姐 年龄：26岁 肤质：干皮两颊起皮

使用周期：每周2-3次

效果：补水效果好，有效消除干皮和两颊起皮的皮肤问题

姓名:赵小姐 年龄：32岁 肤质：混干并且皮肤暗黄

使用周期：每周3片

效果：面膜质地清爽不黏腻，使用后无需清洗，吸收后皮肤饱满有光泽，有修复和提亮效果

姓名:孙小姐 年龄：29岁 肤质：干皮敏感肌红血丝

使用周期：每周3次，睡前使用

效果：对不稳定的肌肤有舒缓修护的功效，泛红及脱皮情况改善明显

本发明的有益效果是：该面膜将间充质干细胞分泌的所有细胞因子多肽以及提取物等有效成分全部高效提取并进行冻干，使得干细胞提取物的活性及功能得到了保存和利用，而且存活的时间可以更长，能够延长其作用效果，并且通过与相应配比的积雪草提取物、母菊花提取物、虎杖根提取物、芩根提取物以及甘油溶液在常温环境进行混合喷洒在面膜基底上，进行冻干处理，从而使得冻肽面膜有效实现保湿、淡化色斑、去皱等修复皮肤的功效。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (6)

1.一种冻肽面膜，其特征在于，按体积份数比，包括5-10份间充质干细胞冻肽溶液、86-94份混合植物提取物溶液、1-4份甘油溶液以及面膜基底，按质量分数比，所述间充质干细胞冻肽溶液包括10-25份提取物冻干粉以及75-90份蒸馏水，按质量份数比，所述混合植物提取物溶液包括1-3份积雪草提取物、0.5-2份母菊花提取物、0.5-2份虎杖根提取物、0.5-2份芩根提取物以及91-97.5份蒸馏水，按质量份数比，甘油溶液包括40-60份甘油及40-60份蒸馏水，所述提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，所述间充质干细胞提取自羊胎盘的间充质干细胞，并按照正常培养的方法进行培养得到。

2.根据权利要求1所述的一种冻肽面膜，其特征在于，按体积份数比，包括6-8份间充质干细胞冻肽溶液、88-91份混合植物提取物溶液、1-3份甘油溶液以及面膜基底，按质量分数比，所述间充质干细胞冻肽溶液包括15-22份提取物冻干粉以及78-85份蒸馏水，按质量份数比，所述混合植物提取物溶液包括1.5-2.5份积雪草提取物、0.8-1.8份母菊花提取物、0.7-1.8份虎杖根提取物、0.7-1.8份芩根提取物以及92.1-96.3份蒸馏水，按质量份数比，甘油溶液包括42-58份甘油及42-58份蒸馏水，所述提取物冻干粉通过间充质干细胞饥饿培养处理制得，所述间充质干细胞提取自羊胎盘的间充质干细胞，并按照正常培养的方法进行培养得到。

3.根据权利要求2所述的一种冻肽面膜，其特征在于，所述间充质干细胞饥饿培养的时间为12-24小时。

4.根据权利要求3所述的一种冻肽面膜，其特征在于，所述间充质干细胞的培养时间为48-72小时。

5.根据权利要求4所述的一种冻肽面膜，其特征在于，提取物冻干粉置于-20℃保存，并且冻肽面膜整体冻干处理。

6.一种冻肽面膜的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

间充质干细胞的培养：从羊胎盘中分离出间充质干细胞，用无酚红DMEM/F12和体积比浓度为8％-12％胎牛血清做完全培养基，放入T75细胞培养瓶在35-38℃、3-6％CO2条件下进行培养，培养时间为48-72小时；

提取物冻干粉的制备：待间充质干细胞生长程度达到70％-80％，使用生理盐水清洗间充质干细胞2-3次，用复方电解质注射液对间充质干细胞进行饥饿培养12-24小时，待细胞生长程度达到90％-95％后，对间质干细胞进行离心处理，离心完成后收取细胞培养上清液获取干细胞因子，并采用提取物提取试剂盒对间充质干细胞提取物进行提取，其中间充质干细胞提取物主要为外泌体，然后将提取的干细胞因子和外泌体混合均匀后放入冻干机中进行冻干，形成提取物冻干粉，该提取物冻干粉可在-20℃长期保存；

间充质干细胞冻肽溶液的制备：按质量分数比，称取10-25份提取物冻干粉以及75-90份蒸馏水，在常温下搅拌均匀成间充质干细胞冻肽溶液；

混合植物提取物溶液的制备：按质量份数比，量取1-3份积雪草提取物、0.5-2份母菊花提取物、0.5-2份虎杖根提取物、0.5-2份芩根提取物以及91-97.5份蒸馏水搅拌均匀制得混合植物提取物溶液；

甘油溶液的制备：按质量分数比，称取40-60份甘油以及40-60份蒸馏水，搅拌时将甘油溶解于蒸馏水内，搅拌均匀制得；

冻肽面膜的制备：按体积份数比，依次选取5-10份间充质干细胞冻肽溶液、86-94份混合植物提取物溶液以及1-4份甘油溶液放入混合装置内，搅拌均匀制得均匀溶液，然后将该均匀溶液喷洒在面膜表面，最终将面膜整体进行冻干，制得冻肽面膜。