CN110231296B - 一种快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法及其检测方法 - Google Patents
一种快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法及其检测方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN110231296B CN110231296B CN201910640279.2A CN201910640279A CN110231296B CN 110231296 B CN110231296 B CN 110231296B CN 201910640279 A CN201910640279 A CN 201910640279A CN 110231296 B CN110231296 B CN 110231296B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- extraction
- flavone
- silkworm excrement
- flash
- steps
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 title claims abstract description 62
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 title claims abstract description 62
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 title claims abstract description 59
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 title claims abstract description 59
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 59
- 241000255789 Bombyx mori Species 0.000 title claims abstract description 49
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 46
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title abstract description 6
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 62
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 claims abstract description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 claims abstract description 4
- 238000002137 ultrasound extraction Methods 0.000 claims description 26
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 claims description 12
- JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N Bioquercetin Natural products CC1OC(OCC(O)C2OC(OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N eriodictyol 7-O-rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C=C3C(C(C(O)=C(O3)C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=O)=C(O)C=2)O1 IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 8
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 8
- FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N quercetin rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N rutin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OC[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N 0.000 claims description 8
- ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N rutin Natural products CC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5 ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 235000005493 rutin Nutrition 0.000 claims description 8
- 229960004555 rutoside Drugs 0.000 claims description 8
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 5
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 claims description 4
- 238000007873 sieving Methods 0.000 claims description 3
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 6
- 238000003912 environmental pollution Methods 0.000 abstract description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 abstract description 3
- 239000002699 waste material Substances 0.000 abstract description 3
- 229940126680 traditional chinese medicines Drugs 0.000 abstract description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 11
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 11
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 4
- LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M sodium nitrite Chemical compound [Na+].[O-]N=O LPXPTNMVRIOKMN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 150000002213 flavones Chemical class 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- BNGXYYYYKUGPPF-UHFFFAOYSA-M (3-methylphenyl)methyl-triphenylphosphanium;chloride Chemical compound [Cl-].CC1=CC=CC(C[P+](C=2C=CC=CC=2)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)=C1 BNGXYYYYKUGPPF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 229930182486 flavonoid glycoside Natural products 0.000 description 2
- 150000007955 flavonoid glycosides Chemical class 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 2
- 235000010288 sodium nitrite Nutrition 0.000 description 2
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 2
- 239000012086 standard solution Substances 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 241000255783 Bombycidae Species 0.000 description 1
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 208000002193 Pain Diseases 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- -1 flavonoid compound Chemical class 0.000 description 1
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 1
- 241000411851 herbal medicine Species 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 231100000862 numbness Toxicity 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000004064 recycling Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000010008 shearing Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 description 1
- 229910021642 ultra pure water Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012498 ultrapure water Substances 0.000 description 1
- 239000000341 volatile oil Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/286—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q involving mechanical work, e.g. chopping, disintegrating, compacting, homogenising
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/30—Staining; Impregnating ; Fixation; Dehydration; Multistep processes for preparing samples of tissue, cell or nucleic acid material and the like for analysis
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/34—Purifying; Cleaning
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
- G01N21/31—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
- G01N21/31—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
- G01N21/33—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry using ultraviolet light
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
- G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
- G01N21/31—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
- G01N2021/3196—Correlating located peaks in spectrum with reference data, e.g. fingerprint data
Landscapes
- Physics & Mathematics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及中药有效成分的提取，特别是指一种快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法及其检测方法。包括如下步骤：蚕沙的收集除杂，干燥、粉碎后，得到蚕沙粉末；采用超声辅助和闪式提取相结合的方法，水溶液浸提蚕沙粉末，提取液浓缩干燥，测定黄酮含量。本发明利用超声提取和闪式提取的相结合的方法，与常规提取方法相比，不但避免了不耐热成分的破坏，且收率高、绿色环保，显著提高了有效成分的转移率。该方法与优化后的超声波提取黄酮物质方法相比，黄酮含量提高了19.2%，提取条件温和，省去所用有机溶剂量的使用，提取剂对环境友好、提取成本低等特点，并且将废弃的蚕沙重新利用，不但可以使其变废为宝，还能极大的解决环境污染问题。
Description
技术领域
本发明涉及中药有效成分的提取，特别是指一种快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法及其检测方法。
背景技术
蚕沙又名蚕屎，是蚕蛾科昆虫家蚕蛾幼虫排出的粪便，是临床常用的中药材。性甘、温，能祛风除湿，活血镇痛、杀菌，常用于治疗风湿痹痛、麻木、皮肤湿疹瘙痒、霍乱及腹痛等症。研究表明，蚕沙中含有黄酮、挥发油、甾体、酚类和萜类等成分。我国蚕沙资源十分丰富，但大部分未能得到有效的利用，充分开发利用蚕沙资源，不但可以使其变废为宝，还能极大的解决环境污染问题，具有广阔的经济和社会效益。研究显示黄酮类物质具有抗压力、抗氧化、抗发炎、抗血管新生以及杀菌作用,可改善或防治癌症、糖尿病、高血脂、高血压、神经退化、肥胖、骨质疏松等慢性病，具有相当大的食用和药用价值。
黄酮类化合物是一大类天然化合物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分。它在植物体内大部分与糖结合成黄酮苷，一部分以游离状态存在，黄酮苷易溶于热水。目前，对于黄酮的提取方法一般采用有机溶剂提取法虽然黄酮提取率高，但安全性低，且步骤繁琐，不适合大生产要求。闪式提取法被视为最有效，最便利、最环保的提取方法。其提取过程是由破壁和提取组合而成的，原理是高速电机带动内刀高速旋转，内外刀之间产生强大的剪切作用，同时外刀腔内产生强大负压，形成真空直流，连续的对组织进行破碎，使一次提取只需数秒至数十秒间即可将有效成分快速转移到溶剂内，提取效率是传统方法的百倍以上。与常规提取方法相比，不但避免了不耐热成分的破坏，且收率高、操作简便、绿色环保，显著提高了有效成分的转移率。而超声波提取法具有简单、快速、高效等特点，利用超声波技术提取天然产物中的有效成分已得到充分重视。将超声辅助和闪式提取相结合用热水浸提黄酮的方法具有简单、快速、高效、环保和成本低等优点。超声波提取结合闪式提取方法这两种方法的有机结合可以使超声波提取发挥到最优状态，同时也能发挥闪式提取的优点，使提取效果更强。
发明内容
本发明提出一种快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法及其检测方法，通过建立超声提取和闪式提取相结合的工艺，控制料液比、超声提取时间、闪式提取时间、闪式提取电压以提高蚕沙黄酮的提取率。
本发明的技术方案是这样实现的：
一种快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法，包括如下步骤：
（1）收集蚕沙、经干燥、粉碎后过筛，得蚕沙粉末；
（2）将步骤（1）的蚕沙粉末按一定的料液比溶于水中，浸泡30-50min，经超声提取后，将滤渣和滤液同时加入闪式提取器中；
（3）设置步骤（2）中的闪式提取器参数，进行闪提，收集提取液；
（4）步骤（3）中的提取液经真空过滤后，滤液即蚕沙黄酮。
所述步骤（1）中过筛的目数为40-60目。
所述步骤（2）中料液比为1:（20-40）。
所述步骤（2）中超声提取的时间为40-80min。
所述步骤（3）中闪式提取的参数为：电压为110-150 V，闪式提取时间为30-70 s。
所述的方法提取蚕沙黄酮的检测方法，采用分光光度法测定黄酮，步骤为：先用对照芦丁标准品绘制标准曲线，计算出回归方程，再将测得的吸光度值代入回归方程计算总黄酮浓度；具体操作为：取芦丁标准品 10mg，用70%乙醇定容于 10.0m L 的容量瓶，配成标准溶液，进行比色测定并绘制标准曲线。移取 1.0mL 黄酮提取液于 10.0mL 容量瓶中，加5%亚硝酸钠溶液0.4m L，静置 5min，10%硝酸铝溶液0.4mL，静置5min，4.2% 氢氧化钠溶液4.0m L，加蒸馏水标定至刻度，摇匀，放置 15min。以不加黄酮的混合溶液作为参比，依次加入样品液，在波长 510nm 下测其吸光度，带入标准曲线方程，计算出总黄酮的浓度，测定标准品芦丁浓度 C(g/L)与吸光度A所得标准曲线方程如下：Y=4.4286x +0.0505，R2=0.9907。将测得的每个样品吸光度值代入回归方程计算总黄酮浓度，总黄酮含量=总黄酮的质量/蚕沙粉末的质量。
所述的方法提取的蚕沙黄酮的含量可达3.38mg/g-5.46mg/g。
本发明具有以下有益效果：
（1）闪式提取法被视为最有效，最便利、最环保的提取方法，但它也存在一定的缺点，如对于质地比较坚硬的物料仅利用闪式提取法，将会造成物料粉碎不均匀或者卡住刀头等问题，并且水提取液可能因黏稠、混悬、乳化等现象而过滤困难。超声波提取法也具有简单、快速、高效等特点，但它也存在缺点，如受超声波衰减因素的制约，超声有效作用区域为一环形，如果提取罐的直径太大，在罐的周壁就会形成超声空白区。将这两种方法有机的结合可以避免闪式提取法的物料粉碎不均匀的问题，并且使闪式提取后的水提取液过滤难度大大降低，同时也弥补了超声提取时造成的超声空白区，使物料粉碎更均匀提取更充分。本发明的方法，超声提取和闪式提取相结合的提取法可作为提取蚕沙黄酮的有效方法，总黄酮的含量可达3.64mg/g，较单独采用超声提取法或闪式提取法分别提高22.1%和40%。本发明的方法不仅可有效提高蚕沙黄酮含量，同时可有效避免传统有机溶剂提取方法造成的环境污染及食品安全问题，对于促进蚕沙黄酮提取物在食品工业及功能食品领域的应用具有重要意义。
（2）本发明工艺简单易操作，并且所选原料为废弃物蚕沙，不仅解决了环境污染问题，而且开发了蚕沙的利用价值。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为料液比对蚕沙总黄酮含量的影响示意图。
图2为超声时间对蚕沙黄酮含量的影响示意图。
图3为闪式提取时间对蚕沙总黄酮含量的影响示意图。
图4为闪式提取电压对蚕沙总黄酮含量的影响示意图。
图5为芦丁吸光度标准曲线。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有付出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法，包括如下步骤：
（1）将干燥后的蚕沙粉碎，过50目筛；
（2）取干燥粉碎后的蚕沙粉末120g，加入水温为45℃的超纯水2400mL（料液比为1g：20mL），浸泡三十分钟。放入超声中提取70min，将滤渣和滤液同时倒入闪式提取器中备用；
（3）设置闪式提取器，打开开关，将刀头升起将步骤（2）溶液放置在操作台上，降下刀头，刀头降至液面内距离烧杯底1cm（刀头不能与烧杯底接触）；
（4）进行闪提前需注意不能猛然调节档位，需缓慢调节档位待刀头旋转后再调节至需要的档位，闪式提取器的电压为130V，提取时间为50s；
（5）将经步骤（3）处理的提取液在真空过滤器中过滤，滤液即为本发明提供的蚕沙黄酮；
（6）按上述黄酮物质检测方法用紫外分光光度法进行检测，计算出黄酮类物质的提取量为4.48mg/g。
采用分光光度法测定黄酮类物质的步骤为：先用对照芦丁标准品绘制标准曲线，计算出回归方程，再将测得的吸光度值代入回归方程计算总黄酮浓度；具体操作为：取芦丁标准品 10mg，用70%乙醇定容于 10.0m L 的容量瓶，配成标准溶液，进行比色测定并绘制标准曲线。移取 1.0mL 黄酮提取液于 10.0mL 容量瓶中，加 5%亚硝酸钠溶液0.4m L，静置5min，10%硝酸铝溶液0.4mL，静置5min，4.2% 氢氧化钠溶液 4.0m L，加蒸馏水标定至刻度，摇匀，放置 15min。以不加黄酮的混合溶液作为参比，依次加入样品液，在波长 510nm 下测其吸光度，带入标准曲线方程，计算出总黄酮的浓度，测定标准品芦丁浓度 C(g/L)与吸光度A所得标准曲线方程如下：Y=4.4286x +0.0505，R2= 0.9907。将测得的每个样品吸光度值代入回归方程计算总黄酮浓度，总黄酮含量=总黄酮的质量/蚕沙粉末的质量。
实施例2
一种快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法，包括如下步骤：
按照实施例1的步骤，仅将步骤（2）中由步骤（1）所得粉碎后的蚕沙与水温为45℃的水溶液的用量比由1g:20mL替换为1g:25mL、1g:30mL、1g:35mL、1g:40mL，所得蚕沙黄酮的含量如图1所示，依次为3.54mg/g、4.48mg/g、4.08mg/g、4.34mg/g。
实施例3
一种快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法，包括如下步骤：
按照实施例1的步骤，仅将步骤（2）中的超声提取时间由70min替换为40min、50min、60min和80min，所得蚕沙黄酮的含量如图2所示，依次为4.00mg/g、4.08mg/g、4.28mg/g、3.38mg/g。
实施例4
一种快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法，包括如下步骤：
按照实施例1的步骤，仅将步骤（4）中的闪式提取时间由50s替换为30s、40s、60s和70s，所得蚕沙黄酮的含量如图3所示，依次为4.26mg/g、3.71mg/g、3.4mg/g、3.59mg/g。
实施例5
一种快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法，包括如下步骤：
按照实施例1的步骤，仅将步骤（4）中的闪式提取电压由130V替换为110V、120V、140V和150V，所得蚕沙黄酮的含量如图4所示，依次为4.34mg/g、4.45mg/g、4.58mg/g、3.59mg/g。
实施效果例
将闪式提取蚕沙黄酮、超声提取蚕沙黄酮与超声提取和闪式提取相结合方法进行比较，见表1。
表1闪式提取、超声提取、超声提取和闪式提取相结合方法提取的条件及结果
| 方法 | 料液比 | 超声提取时间 | 闪式提取时间 | 闪式提取电压 | 黄酮含量（mg/g） |
| 超声提取 | 1g:30mL | 70min | 无 | 无 | 4.58 |
| 闪式提取 | 1g:30mL | 无 | 50s | 150V | 3.87 |
| 超声与闪式相结合提取 | 1g:30mL | 70min | 50s | 150V | 5.46 |
由表1可知，通过三种提取方法对蚕沙黄酮提取的比较可见，超声波提取与闪式提取相结合方式提取黄酮含量最高，其次是超声波提取黄酮含量高，最后是闪式提取黄酮含量最低。虽然超声波提取与闪式提取相结合方式提取黄酮与超声提取黄酮的需要的提取时间仅差50S，但超声波提取与闪式提取相结合方式提取黄酮比超声提取黄酮含量提高了19.2%，所以，超声波提取与闪式提取相结合方式提取黄酮显现出快速，高效的优势。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）收集蚕沙、经干燥、粉碎后过筛，得蚕沙粉末；
（2）将步骤（1）的蚕沙粉末按一定的料液比溶于水中，浸泡30-50min，经超声提取后，将滤渣和滤液同时加入闪式提取器中；
（3）设置步骤（2）中的闪式提取器参数，进行闪提，收集提取液；其中闪式提取的参数为：电压为110-150 V，闪式提取时间为30-70 s；
（4）步骤（3）中的提取液经真空过滤后，滤液即蚕沙黄酮。
2.根据权利要求1所述的快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法，其特征在于：所述步骤（1）中过筛的目数为40-60目。
3.根据权利要求1所述的快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法，其特征在于：所述步骤（2）中料液比为1:（20-40）。
4.根据权利要求1所述的快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法，其特征在于：所述步骤（2）中超声提取的时间为40-80min。
5.权利要求1-4任一项所述的方法提取蚕沙黄酮的检测方法，其特征在于，采用分光光度法测定黄酮，步骤为：先用对照芦丁标准品绘制标准曲线，计算出回归方程，再将测得的吸光度值代入回归方程计算总黄酮浓度。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910640279.2A CN110231296B (zh) | 2019-07-16 | 2019-07-16 | 一种快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法及其检测方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201910640279.2A CN110231296B (zh) | 2019-07-16 | 2019-07-16 | 一种快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法及其检测方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN110231296A CN110231296A (zh) | 2019-09-13 |
| CN110231296B true CN110231296B (zh) | 2021-09-17 |
Family
ID=67855616
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201910640279.2A Active CN110231296B (zh) | 2019-07-16 | 2019-07-16 | 一种快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法及其检测方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN110231296B (zh) |
Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999047148A1 (fr) * | 1998-03-19 | 1999-09-23 | Shanghai Institute Of Chinese Materia Medica (Sicmm) | Compositions a base de feuilles de ginkgo biloba, leurs procedes de preparation et leurs applications |
| CN101190281A (zh) * | 2006-11-27 | 2008-06-04 | 杭州尤美特科技有限公司 | 梅树提取物及其制备方法和用途 |
| CN101865834A (zh) * | 2010-05-04 | 2010-10-20 | 严希海 | 一种构树根中黄酮含量的测定方法 |
| CN102397183A (zh) * | 2011-08-24 | 2012-04-04 | 珲春华瑞参业生物工程有限公司 | 人参、无患子发酵提取物及其在化妆品方面的应用 |
| CN103432562A (zh) * | 2013-09-12 | 2013-12-11 | 南京泽朗农业发展有限公司 | 一种从生姜中提取生姜多酚的方法 |
| CN107714903A (zh) * | 2017-11-24 | 2018-02-23 | 杭州更蓝生物科技有限公司 | 一种大蒜中黄酮类化合物的破壁提取工艺 |
-
2019
- 2019-07-16 CN CN201910640279.2A patent/CN110231296B/zh active Active
Patent Citations (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999047148A1 (fr) * | 1998-03-19 | 1999-09-23 | Shanghai Institute Of Chinese Materia Medica (Sicmm) | Compositions a base de feuilles de ginkgo biloba, leurs procedes de preparation et leurs applications |
| CN101190281A (zh) * | 2006-11-27 | 2008-06-04 | 杭州尤美特科技有限公司 | 梅树提取物及其制备方法和用途 |
| CN101865834A (zh) * | 2010-05-04 | 2010-10-20 | 严希海 | 一种构树根中黄酮含量的测定方法 |
| CN102397183A (zh) * | 2011-08-24 | 2012-04-04 | 珲春华瑞参业生物工程有限公司 | 人参、无患子发酵提取物及其在化妆品方面的应用 |
| CN103432562A (zh) * | 2013-09-12 | 2013-12-11 | 南京泽朗农业发展有限公司 | 一种从生姜中提取生姜多酚的方法 |
| CN107714903A (zh) * | 2017-11-24 | 2018-02-23 | 杭州更蓝生物科技有限公司 | 一种大蒜中黄酮类化合物的破壁提取工艺 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 《蚕沙总黄酮的提取工艺研究》;张红俊;《中国优秀硕士学位论文全文数据库》;20101115;第13-16页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN110231296A (zh) | 2019-09-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103263514B (zh) | 一种柑橘皮黄酮、低分子果胶和纤维素的联合提取方法 | |
| CN101961371B (zh) | 从甜味绞股蓝中提取分离人参皂苷、黄酮、多糖的方法 | |
| CN101362983A (zh) | 一种柑橘果皮精油的提取方法 | |
| CN102697849B (zh) | 一种山核桃蒲壳总多酚的提取方法 | |
| CN104673497A (zh) | 一种植物精油、多糖和黄酮的提取工艺 | |
| CN102532244A (zh) | 一种制备高纯度积雪草苷的方法 | |
| CN105963328A (zh) | 一种从香榧假种皮中连续提取香榧黄酮和精油的方法 | |
| CN107753666A (zh) | 一种防治婴幼儿湿疹的舒护液 | |
| CN104844584B (zh) | 一种葛渣中提取葛根素的方法 | |
| CN1958555A (zh) | 一种丹参酚酸a的制备方法 | |
| CN102335224A (zh) | 纤维素酶协同超声辅助提取花生壳黄酮类化合物的方法 | |
| CN110231296B (zh) | 一种快速绿色高效提取蚕沙黄酮的方法及其检测方法 | |
| CN102432691B (zh) | 一种从芦根中提取多糖的方法 | |
| CN103169750B (zh) | 从瞿麦中提取黄酮的超声提取方法 | |
| CN104825523A (zh) | 一种野菊花总黄酮提取工艺 | |
| CN103463160A (zh) | 一种高含量菊花总黄酮的制备方法 | |
| CN102836194A (zh) | 一种鼠曲草总黄酮的提取方法 | |
| CN105943568A (zh) | 一种橡子多酚提取及纯化的方法 | |
| CN109966327A (zh) | 一种超声波、微波双辅助提取西番莲种籽油粕总黄酮的方法 | |
| CN101401843B (zh) | 一种中药丹参有效成分的提取方法 | |
| CN103524637A (zh) | 一种苦豆子多糖的超声波提取方法 | |
| CN102091107B (zh) | 一种酶法提取积雪草总苷的方法 | |
| CN103992300B (zh) | 一种从苦荞麸皮中提取原花青素的方法 | |
| CN1778211A (zh) | 一种添加到卷烟中的天然植物提取物及提取方法及在卷烟中的应用 | |
| CN106977613B (zh) | 一种从沙蒿籽中提取沙蒿多糖的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |