CN110114467A - 使用erf转录因子序列增加植物生长和产量 - Google Patents

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Abstract

本文提供了用于改善植物生长的组合物和方法。也提供了用于表达感兴趣基因的表达构建体、包括ERF转录因子蛋白的多肽和编码ERF转录因子蛋白的多核苷酸,包含该表达构建体、多核苷酸和多肽的植物,和产生转基因植物的方法,该感兴趣基因的表达可改善农业性质,包括但不限于作物产量、生物和非生物胁迫耐受性和早期活力。

Description

使用ERF转录因子序列增加植物生长和产量
技术领域
本发明涉及通过在植物中表达ERF转录因子基因来增加植物生长和产量的组合物和方法。
背景技术
持续增加的世界人口和日渐减少的农业可耕种土地供应推动开发具有增加的生物质和产量的植物。常规农作物和园艺改进手段采用选择性育种技术来鉴定具有所需特性的植物。然而,这种选择性育种技术具有几个缺陷,即,这些技术一般是费力的并且产生通常含有异源遗传组件的植物,这可能并不总是导致所需的性状从亲本植物传递下去。分子生物学的进展提供了精确改良植物种质的手段。植物遗传改造要求分离和操作遗传物质(一般是DNA或RNA的形式)并且随后在植物中导入该遗传物质。这种技术具有向作物或植物递送各种改善的经济、农业或园艺性状的能力。
感兴趣的性状包括植物生物质和产量。产量通常定义为可测量的来自作物的有经济价值的产物。这可以量和/或质来定义。产量直接取决于几个因素,例如,器官的数量和尺寸、植物结构(例如,分枝数量)、种子产生、叶衰老等。根发育、营养摄入、胁迫耐受性、光合作用碳同化作用速率和早期活力也可能是决定产量的重要因素。因此,优化上述因素可有助于增加作物产量。
种子产量的增加是特别重要的性状,因为许多植物的种子对于人和动物消耗而言是重要的。作物例如玉米、水稻、小麦、油菜和大豆占人类总热量摄入的超过一半,无论是通过直接消耗它们的种子还是通过消耗在经加工的种子上产生的肉制品。它们也是工业过程中使用的糖、油和许多种代谢物的来源。种子含有胚(新芽和根的来源)和胚乳(在萌发期间和幼苗的早期生长期间供胚生长的营养源)。种子的发育涉及许多基因,并且需要将代谢物从根、叶和茎转移到生长的种子中。尤其是胚乳,其吸收了糖、油和蛋白质的代谢前体并将它们合成为储存大分子以填充谷粒。植物生物质的增加对于饲料作物如苜蓿、青贮玉米和干草而言重要。许多基因参与有助于植物生长和发育的代谢途径。调节植物中一种或多种此类基因的表达可产生相对于对照植物具有改善的生长和发育的植物,但通常可产生相对于对照植物具有受损的生长和发育的植物。因此,需要改善植物生长和发育的方法。
转录因子是其表达调节其他基因表达的基因。这通常通过转录因子蛋白与基因组DNA在特定的一个或多个位置处结合予以实现。这样的结合可以招募其他蛋白质,所述其他蛋白质上调或下调转录因子结合位点附近的一个或多个基因表达。或者,转录因子与DNA的结合可以通过用蛋白质(如与转录相关的RNA聚合酶)干扰来物理上地减缓或防止附近的一个或多个基因的转录。因为单独的转录因子可以影响感兴趣的多个的基因的表达,调节转录因子表达有可能同时调节感兴趣生物体内多个基因的表达,诸如涉及参与植物生长和发育的代谢途径的基因。对参与调整影响植物生长和发育的基因表达的一个或多个转录因子的表达进行调节可以改善植物生长和发育,但是常常可能产生相对于对照植物生长和发育受损的植物。因此,需要调节可以导致植物生长和发育改善的转录因子表达的方法。
发明概述
提供了用于改良植物中至少一种ERF转录因子基因表达的组合物和方法。所述方法增加植物生长,导致较高作物产量。此类方法包括增加感兴趣植物中至少一种ERF转录因子基因的表达。本发明还包括含有启动子的构建体,所述启动子驱动植物细胞中与ERF转录因子编码序列操作性连接的表达。组合物还包含具有增加的ERF转录因子序列表达的植物,植物种子,植物器官,植物细胞和其他植物部分。本发明包括可用于增加植物中ERF转录因子基因表达的方法。这种ERF转录因子基因可以是天然序列,或者可以是对感兴趣植物异源的序列。
本发明的实施方式包括:
1.一种增加作物产量的方法,包括用至少一种ERF转录因子蛋白编码序列转化植物。
2.如实施方式1所述的方法,其中所述ERF转录因子蛋白编码序列包含选自SEQ IDNO:1、56、58、60、62和64的序列,或编码选自SEQ ID NO:2、22-53、57、59、61、63和65的蛋白质。
3.如实施方式1所述的方法,其中所述ERF转录因子蛋白编码序列编码与选自SEQID NO:2、22-53、57、59、61、63和65的序列具有至少80%,90%,95%,96%,97%,98%或99%序列相同性并且具有转录因子功能的蛋白质。
4.如实施方式1所述的方法,其中所述ERF转录因子蛋白编码序列编码相对于选自SEQ ID NO:2、22-53、57、59、61、63和65的序列具有至少80%,85%、90%,95%,96%,97%,98%或99%序列阳性并且具有转录因子功能的蛋白质。
5.一种植物,该植物基因组中稳定地纳入有驱动植物细胞中表达的启动子,该启动子与ERF转录因子蛋白编码序列可操作地连接,其中所述启动子相对于所述ERF转录因子蛋白编码序列是异源的。
6.如实施方式5所述的植物,其中所述ERF转录因子蛋白编码序列包含选自SEQ IDNO:1、56、58、60、62和64的序列,或编码选自SEQ ID NO:2、22-53、57、59、61、63和65的蛋白质。
7.如实施方式5所述的植物,其中所述ERF转录因子蛋白编码序列编码与选自SEQID NO:2、22-53、57、59、61、63和65的序列具有至少80%,85%、90%,95%,96%,97%,98%或99%序列相同性并且具有转录因子功能的蛋白质。
8.如实施方式5所述的植物,其中所述ERF转录因子蛋白编码序列编码相对于选自SEQ ID NO:2、22-53、57、59、61、63和65的序列具有至少80%,85%、90%,95%,96%,97%,98%或99%序列阳性并且具有转录因子功能的蛋白质。
9.如实施方式5-8中任一项所述的植物,其中所述植物基因组中稳定地纳入至少一种其他编码序列,并且其中所述至少一种其他编码序列选自SEQ ID NO:14、16、18、20和54或编码选自SEQ ID NO:15、17、19、21和55的蛋白质。
10.实施方式5-9中任一项所述植物的经转化的种子。
11.如实施方式5-9中任一项所述的植物,其中所述植物是单子叶植物。
12.如实施方式11所述的植物,其中所述植物来自玉米属(Zea),稻属(Oryza),小麦属(Triticum),高粱属(Sorghum),黑麦属(Secale),椮属(Eleusine),粟属(Setaria),甘蔗属(Saccharum),芒属(Miscanthus),黍属(Panicum),狼尾草属(Pennisetum),大锥属(Megathyrsus),椰子属(Cocos),凤梨属(Ananas),芭蕉属(Musa),油棕属(Elaeis),燕麦属(Avena)或大麦属(Hordeum)。
13.如实施方式5-9中任一项所述的植物,其中所述植物是双子叶植物。
14.如实施方式13所述的植物,其中所述植物来自大豆属(Glycine),芸苔属(Brassica),苜蓿属(Medicago),向日葵属(Helianthus),红花属(Carthamus),烟草属(Nicotiana),茄属(Solanum),棉属(Gossypium),番薯属(Ipomoea),木薯属(Manihot),咖啡属(Coffea),柑橘属(Citrus),可可属(Theobroma),山茶属(Camellia),鳄梨属(Persea),榕属(Ficus),番石榴属(Psidium),芒果属(Mangifera),油橄榄属(Olea),番木瓜属(Carica),腰果属(Anacardium),澳洲坚果属(Macadamia),李属(Prunus),甜菜属(Beta),杨属(Populus)或桉属(Eucalyptus)。
15.如实施方式5-9中任一项所述的植物,其中所述植物相对于对照植物表现出增加的生长。
16.如实施方式5-9中任一项所述的植物,其中所述植物相对于对照植物表现出增加的生物量产量。
17.如实施方式5-9中任一项所述的植物,其中所述植物相对于对照植物表现出增加的种子产量。
18.如实施方式1-4中任一项所述的方法,其中所述ERF转录因子蛋白编码序列由组成型启动子表达。
19.如实施方式18所述的方法,其中所述组成型启动子包含SEQ ID NO:8。
20.如实施方式1-4中任一项所述的方法,其中所述ERF转录因子蛋白编码序列由胁迫应答(stress-responsive)启动子表达。
21.如实施方式20所述的方法,其中所述胁迫应答启动子包含SEQ ID NO:5。
22.如实施方式1-4中任一项所述的方法,所述方法进一步包括用至少一种其他编码序列转化植物。
23.如实施方式22所述的方法,其中所述至少一种其他编码序列选自SEQ ID NO:14、16、18、20和54或编码选自SEQ ID NO:15、17、19、21和55的蛋白质。
24.如实施方式5-9中任一项所述的植物,其中所述驱动植物细胞中表达的启动子是组成型启动子。
25.如实施方式24所述的植物,其中所述组成型启动子包含SEQ ID NO:8。
26.如实施方式5-9中任一项所述的植物,其中所述驱动植物细胞中表达的启动子是胁迫应答启动子。
27.如实施方式26所述的植物,其中所述胁迫应答启动子包含SEQ ID NO:5。
28.一种DNA构建体,所述DNA构建体包含操作性连接的,
a.在植物细胞中有功能的启动子,和
b.编码ERF转录因子蛋白的核酸序列。
29.如实施方式28所述的DNA构建体,其中所述编码ERF转录因子蛋白的核酸序列包含选自SEQ ID NO:1、56、58、60、62和64的序列,或编码选自SEQ ID NO:2、22-53、57、59、61、63和65的蛋白质。
30.如实施方式28所述的DNA构建体,其中所述编码ERF转录因子蛋白的核酸序列编码与选自SEQ ID NO:2、22-53、57、59、61、63和65的序列具有至少80%,85%、90%,95%,96%,97%,98%或99%序列相同性并且具有转录因子功能的蛋白质。
31.如实施方式28所述的DNA构建体,其中所述编码ERF转录因子蛋白的核酸序列编码相对于选自SEQ ID NO:2、22-53、57、59、61、63和65的序列具有至少80%,85%、90%,95%,96%,97%,98%或99%序列阳性并且具有转录因子功能的蛋白质。
32.如实施方式28-31中任一项所述的DNA构建体,其中所述在植物细胞中有功能的启动子选自SEQ ID NO:3、5、7和8。
33.如实施方式28-31中任一项所述的DNA构建体,其中所述在植物细胞中有功能的启动子相对于所述编码ERF转录因子蛋白的核酸序列是异源的。
34.一种增加作物产量的方法,包括调节植物中至少一种ERF转录因子蛋白编码序列的表达。
35.如实施方式34所述的方法,其中所述调节表达包括增加植物中至少一种ERF转录因子蛋白编码序列的表达。
36.如实施方式35所述的方法,其中所述增加表达包括增加所述植物中天然ERF转录因子序列的活性或增加所述植物中天然ERF转录因子蛋白编码序列的活性。
37.如实施方式28-33中任一项所述的DNA构建体,其还包含在植物细胞中有功能的至少一种其他启动子,该至少一种其他启动子操作性连接至少一种其他蛋白编码核酸序列。
38.如实施方式37所述的DNA构建体,其中所述其他蛋白核酸编码序列选自SEQ IDNO:14、16、18、20和54,或编码选自SEQ ID NO:15、17、19、21和55的蛋白质。
39.如实施方式37所述的DNA构建体,其中所述其他蛋白编码核酸序列与选自SEQID NO:14、16、18、20和54的核酸序列具有至少70%的相同性,或编码与选自SEQ ID NO:15、17、19、21和55的蛋白质具有至少80%相同性的蛋白质。
发明详述
提供用于增加作物生物质和产量的组合物和方法。该方法包括增加感兴趣植物中至少一种ERF转录因子基因的表达。作物产量是极其复杂的性状,其来自作物植物在其发育的所有阶段的生长以及植物资源向植物的可收获部分的分配。在包括但不限于玉米和大豆的一些作物中,主要可收获部分可包括种子,次要应用来自生物质的剩余物(例如,叶和茎)。在包括但不限于甘蔗和苜蓿的其他作物中,植物的主要可收获部分由植物的茎或整个地上部分组成。在包括但不限于马铃薯和胡萝卜其他作物中,植物的主要可收获部分位于地下。无论作物植物的收获部分如何,可收获的生物质的积累都是由植物生长和光合固定碳分配到植物的收获部分的结果。可以通过调节一种或多种植物基因的表达来操纵植物生长。该调节可以改变一种或多种代谢途径的功能,所述代谢途径有助于植物生长和可收获生物质的积累。
本发明的方法包括通过调节编码ERF转录因子蛋白质的一种或多种基因的表达来操纵植物生长以增加产量。在一个优选的实施方式中,ERF转录因子编码基因的表达相对于对照植物中的ERF转录因子表达水平上调,导致具有增加的ERF转录因子表达的植物相对于对照植物的可收获的生物质增加。用于增加植物中ERF转录因子蛋白编码序列的活性或表达的任何方法都涵盖在本发明中。
本发明的组合物包括构建体,其包含SEQ ID NO:1、56、58、60、62和64所示的编码序列或包含编码选自SEQ ID NO:2、22-53、57、59、61、63和65或其变体的蛋白质的编码序列,所述编码序列操作性地连接于植物细胞中有功能的启动子。“启动子”意指DNA的调节区,其能够驱动植物或植物细胞中序列的表达。已经认识到,鉴定了本文公开的ERF转录因子蛋白序列后,分离和鉴定其他ERF转录因子蛋白序列以及编码ERF转录因子蛋白序列的核苷酸序列(例如通过BLAST搜索,PCR测定等)在本领域的技术范围内。
当在DNA构建体中组装本发明的编码序列从而启动子操作性地连接感兴趣的编码序列时,本发明的编码序列使得在用该DNA构建体稳定转化的植物细胞中表达并积累ERF转录因子蛋白质。“操作性地连接”是指2个或更多个元件之间的功能性连接。例如,本发明的启动子和感兴趣的异源性核苷酸之间的操作性连接是功能性连接,其允许表达该感兴趣的异源性核苷酸序列。操作性地连接的元件可以是连续的或非连续的。当用于两个蛋白质编码区域之间的接合时,述及操作性地连接意在表示这些编码区域处于同一阅读框中。盒还可含有待共转化到植物中的至少一种其它基因。或者,可在多个表达盒或DNA构建体上提供其它基因。表达盒还可含有可选择的标志物基因。
由此,编码本发明的ERF转录因子蛋白的核苷酸序列在表达盒或表达构建体中伴随感兴趣的启动子序列(通常是异源性启动子序列)一起提供,用于在感兴趣的植物中表达。"异源性启动子序列"意在表示与ERF转录因子蛋白编码核苷酸序列非天然地操作性连接的序列。虽然ERF转录因子蛋白编码核苷酸序列和启动子序列彼此是异源的,但ERF转录因子蛋白编码核苷酸序列或异源启动子序列对植物宿主可以是同源的,或天然的,或异源的,或外源的。公认地,启动子还可驱动其同源的或天然的核苷酸序列的表达。在该情况中,转化的植物将具有表型变化。
本发明的多核苷酸和氨基酸序列的片段和变体也可以由可在植物细胞中操作的启动子表达。“片段”是指多核苷酸的部分或氨基酸序列的部分。“变体”是指基本相似的序列。对于多核苷酸,变体包括具有以下的多核苷酸:在5'和/或3'端处的缺失(即,截短);在天然多核苷酸中一个或多个内部位点处一个或多个核苷酸的缺失和/或添加;和/或在天然多核苷酸中一个或多个位点处一个或多个核苷酸的取代。本文所用的“天然”多核苷酸或多肽分别包含天然产生的核苷酸序列或氨基酸序列。一般而言,本发明的特定多核苷酸的变体将与特定核苷酸有至少约75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更大的序列相同性,如由本文他处所述的序列比对程序和参数所确定。本文公开的多核苷酸的片段和变体可以编码保留转录功能的蛋白质。
“变体”氨基酸或蛋白是指通过下述过程衍生自天然氨基酸或蛋白质的氨基酸或蛋白质:在天然蛋白质的N-末端和/或C-末端处缺失(也称为截短)一个或多个氨基酸,在天然蛋白质的一个或多个内部位点处缺失和/或添加一个或多个氨基酸,或在天然蛋白质的一个或多个位点处取代一个或多个氨基酸。本发明包括的变体蛋白质有生物活性,即它们继续具有所需的天然蛋白质生物活性,如与基因组DNA结合和调节DNA结合位点附近一个或多个基因表达的能力。天然多肽的生物活性变体将与由本文所述的序列比对程序和参数确定的原始序列的氨基酸序列具有至少约80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更大的序列相同性。在一些实施方式中,变体多肽序列将包含保守氨基酸取代。可以使用此类保守氨基酸取代的数目与氨基酸相同性数目的加和来计算序列阳性,用该加和除以感兴趣序列中的氨基酸总数。序列阳性计算在NCBI BLAST服务器上进行,该服务器可在万维网上以blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi访问。本发明的蛋白质的生物活性变体与该蛋白质可相差少至1-15个氨基酸残基,少至1-10个,如6-10个,少至5个,少至4、3、2或甚至1个氨基酸残基。
氨基酸通常可以分类为脂族的,含羟基或硫/硒的,环形的,芳族的,碱性的或酸性的及其酰胺。不受理论限制,保守氨基酸取代在某些情况下可能比非保守氨基酸取代优选用于产生变体蛋白质序列,因为保守取代可能比非保守取代更可能允许变体蛋白质保留其生物活性。编码序列中具有一个或多个氨基酸取代的多肽的多核苷酸涵盖在本发明的范围内。下表1提供属于各类别的氨基酸的示例。
表1:氨基酸类型
也可通过分析经测序的基因组的现有数据库来鉴定变体序列。在这种方式中,可鉴定相应序列并用于本发明的方法中。
比对序列用于比较的方法是本领域熟知的。因此,可采用数学算法确定任意两个序列的序列相同性百分数。该数学算法的非限制性示例是Myers和Miller(1988)CABIOS 4:11-17的算法;Smith等.(1981)Adv.Appl.Math.2:482的局部比对算法;Needleman和Wunsch(1970)J.Mol.Biol.48:443-453的全局比对算法;Pearson和Lipman(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.85:2444-2448的搜索局部比对方法;Karlin和Altschul(1990)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 87:2264-2268的算法,由Karlin和Altschul(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90:5873-5877改良。
这些数学算法的计算机实施手段可用于比较序列来确定序列相同性。这类实施手段包括但不限于:PC/Gene程序中的CLUSTAL(购自美国加利福尼亚州芒廷维尤的智慧遗传公司(Intelligenetics,Mountain View,California);ALIGN程序(2.0版)和GCGWisconsin遗传软件包中的GAP,BESTFIT、BLAST、FASTA和TFASTA,第10版(购自阿克赛勒里公司(Accelrys Inc.),美国加利福尼亚州圣地亚哥Scranton路9685号)。可用默认参数来进行使用这些程序的比对。CLUSTAL程序由以下详细描述:Higgins等,(1988)Gene 73:237-244(1988);Higgins等,(1989)CABIOS 5:151-153;Corpet等,(1988)Nucleic AcidsRes.16:10881-90;Huang等,(1992)CABIOS 8:155-65;和Pearson等,(1994)Meth.Mol.Biol.24:307-331。ALIGN程序基于Myers和Miller(1988)(同上)的算法。比较氨基酸序列时,PAM120权重残基表、缺口长度罚分12、和缺口罚分4可与ALIGN程序联用。Altschul等,(1990)J.Mol.Biol.215:403的BLAST程序基于Karlin和Altschul(1990)(同上)的算法。可利用BLASTN程序进行BLAST核苷酸搜索(评分=100,字长=12),以获得与编码本发明蛋白质的核苷酸序列同源的核苷酸序列。可利用BLASTX程序进行BLAST蛋白质搜索(评分=50,字长=3),以获得与本发明蛋白质或多肽同源的氨基酸序列。为了获得缺口比对(出于比较目的),可如Altschul等,(1997)Nucleic Acids Res.,25:3389所述利用缺口BLAST(在BLAST 2.0中)。或者,可利用PSI-BLAST(在BLAST 2.0中)进行迭代搜索,其用来检测分子之间的远近关系。参见Altschul等,(1997)同上。利用BLAST、缺口BLAST和PSI-BLAST程序时,可使用各程序(例如针对蛋白质的BLASTX,针对核苷酸的BLASTN)的默认参数。参见Seewww.ncbi.nlm.nih.gov。也可通过检查来人工进行比对。
可以对这些基因和编码区进行密码子优化以在感兴趣的植物中表达。"密码子优化的基因"是这样的基因,其密码子使用频率经设计以模拟宿主细胞的偏好密码子使用频率。核酸分子可以是完全或部分优化的密码子。因为任一氨基酸(除了甲硫氨酸和色氨酸)均由多种密码子编码,所述核酸分子的序列可变化但不改变编码的氨基酸。密码子优化是在核酸水平上改变一种或多种密码子时,致使氨基酸不变,但在具体的宿主生物体中的表达增加。本领域普通技术人员将知晓密码子表格,并且,提供关于广泛生物体的偏好信息的其它参考文献是本领域中可得的(参见例如,Zhang等.(1991)Gene 105:61-72;Murray等.(1989)Nucl.Acids Res.17:477-508)。优化用于在植物中表达的核苷酸序列的方法学提供于,例如,美国专利号6,015,891和其中引用的参考文献,以及WO2012/142371和其中引用的参考文献。
本发明的核苷酸序列可用于重组多核苷酸。“重组多核苷酸”包含两个或更多个化学连接的核酸区段的组合,这些区段未被发现在自然中直接接合。“直接接合”指2个核酸区段紧邻并且通过化学键互相接合。在具体实施方式中,重组多核苷酸包含感兴趣多核苷酸或其活性变体或片段,使得其他化学连接的核酸区段位于感兴趣多核苷酸的5’、3’或内部。或者,可通过删除序列来形成重组多核苷酸的化学连接的核酸区段。其他化学连接的核酸区段或被删除以接合所述连接的核酸区段的序列可以是任意长度,包括,例如,1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20或更多核苷酸。本文公开了用于制备这种重组多核苷酸的各种方法,例如,通过化学合成或通过遗传工程技术对多核苷酸的分离区段进行操作。在具体实施方式中,重组多核苷酸可包含重组DNA序列或重组RNA序列。“重组多核苷酸的片段”包含两个或更多个化学连接的氨基酸区段的组合中的至少一个,这些区段未被发现在自然中直接接合。
“改变”或“调节”基因的表达水平是指上调或下调所述基因的表达。公认地,在一些情况中,通过增加编码ERF转录因子蛋白的一种或多种基因的表达水平(即,上调表达)来增加植物生长和产量。类似地,在一些情况中,可通过降低编码ERF转录因子蛋白的一种或多种基因的表达水平(即,下调表达)来增加植物生长和产量。因此,本发明包括上调或下调编码ERF转录因子蛋白的一种或多种基因。此外,所述方法包括在感兴趣的植物中上调编码ERF转录因子蛋白的至少一种基因,和下调编码第二ERF转录因子蛋白的至少一种基因。调节转基因植物中编码ERF转录因子蛋白的至少一种基因的浓度和/或活性表示所述浓度和/或活性相对于不导入本发明的序列的天然对照植物、植物部分或细胞来说增大或减小至少约1%、约5%、约10%、约20%、约30%、约40%、约50%、约60%、约70%、约80%,或约90%,或更多。
一般认为,编码本发明ERF转录因子蛋白的基因的表达水平可通过采用在植物细胞中有功能的一种或多种启动子来控制。感兴趣的ERF转录因子蛋白编码基因的表达水平可直接检测,例如,通过测定植物中的ERF转录因子基因转录本的水平或编码的蛋白质的水平。所述测定的方法是本领域熟知的。例如,Northern印迹或定量逆转录酶-PCR(qRT-PCR)可用于评估转录本水平,而western印迹、ELISA测定或酶测定可用于评估蛋白质水平。可以通过测量受所述ERF转录因子调节的一个或多个基因的表达水平来评估ERF转录因子功能。
“对象植物或植物细胞”是已经实现感兴趣的ERF转录因子蛋白编码基因的遗传改变(如转化)的植物或植物细胞,或者是源自如此改变的植物或细胞并包含该改变的植物或植物细胞。“对照”或“对照植物”或“对照植物细胞”提供了测量对象植物或植物细胞的表型变化的参照点。因此,根据本发明的方法,感兴趣的ERF转录因子蛋白编码基因的表达水平高于或低于对照植物中的表达水平。
一种对照植物或植物细胞可包含,例如:(a)野生型植物或细胞,即具有与用于产生对象植物或细胞的遗传改变的起始材料相同的基因型;(b)与起始材料有相同基因型但已经用无效构建体(即,用对感兴趣性状没有已知影响的构建体,如包含标记基因的构建体)转化的植物或植物细胞;(c)植物或植物细胞,其是对象植物或植物细胞的后代中的非转化分离体;(d)与对象植物或植物细胞在遗传上相同但没有接触会诱导感兴趣基因表达的条件或刺激的植物或植物细胞;或(e)在不表达感兴趣基因的条件下的对象植物或植物细胞本身。
虽然本发明以转化的植物描述,应认识到本发明的转化的生物体可包括植物细胞、植物原生质体、可再生出植物的植物组织培养物、植物愈伤组织、植物块、和在植物或植物部分中完整的植物细胞如胚胎、花粉、胚珠、种子、叶、花、枝条、果实、仁、谷穗、穗轴、外壳、柄、根、根尖、花粉囊等。谷粒是指由商业种植者出于生长或繁殖物种以外的目的产生的成熟种子。再生植物的后代、变体和突变体也包括在本发明的范围内,只要这些部分包含导入的多核苷酸。
为了下调感兴趣的ERF转录因子蛋白编码基因的表达,可构建与感兴趣基因(特别是编码感兴趣的ERF转录因子蛋白的基因)序列的信使RNA(mRNA)的至少一部分互补的反义构建体。构建反义核苷酸以与相应mRNA杂交。可进行反义序列的修饰,只要该序列杂交并干扰相应mRNA的表达。由此,可使用与待沉默的相应序列有70%,较佳80%,更佳85%、90%、95%或更大的序列相同性的反义构建形式。此外,可使用反义核苷酸的部分来破坏靶基因的表达。
可使用本发明的多核苷酸来从其他植物中分离相应序列。由此,PCR、杂交等方法可用于根据此类序列与本文所示序列的序列同源性或相同性来鉴定该此类序列。根据该序列与本文所示完整序列的或与其变体和片段的序列相同性而分离的序列涵盖在本发明中。此类序列包括公开序列的直向同源物序列。“直向同源物”是指源自共同祖先基因且由于物种形成而在不同物种中发现的基因。在不同物种中发现的基因当它们的核苷酸序列和/或它们的编码蛋白质序列具有至少75%、80%、85%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或更大的序列相同性时被认为是直向同源物。直向同源物的功能通常在物种之间高度保守。因此,本发明涵盖分离的多核苷酸,该分离的多核苷酸具有转录因子活性,并且与本文公开的序列或与其变体或片段具有至少75%的序列相同性。
可通过PCR分离变体序列。设计PCR引物和PCR克隆的方法是本领域熟知的并且公开于Sambrook等,(1989)《分子克隆:实验室手册》(Molecular Cloning:A LaboratoryManual)(第2版,纽约州普莱恩维尤的冷泉港出版社)。还参见Innis等编,(1990)《PCR方案:方法和应用指南》(PCR Protocols:A Guide to Methods and Applications)(纽约学术出版社);Innis和Gelfand编,(1995)《PCR策略》(PCR Strategies)(纽约学术出版社);以及Innis和Gelfand编,(1999)《PCR方法手册》(PCR Methods Manual)(纽约学术出版社)。
也可通过分析经测序的基因组的现有数据库来鉴定变体序列。在这种方式中,可鉴定编码ERF转录因子蛋白的相应序列并用于本发明的方法中。该变体序列将保留ERF转录因子蛋白的生物活性(即结合DNA的能力,从而调整DNA结合位点附近的一个或多个基因的表达)。出人意料地,本发明显示了ERF转录因子过表达的某些新型表达策略可以导致生物质和种子产量的增加。
表达盒将包括5'-3'方向的转录,转录和翻译起始区,编码本发明ERF转录因子蛋白的多核苷酸,和在植物中有功能的转录和翻译终止区(即,终止区)。
本发明的实践中可使用多种启动子。编码本发明ERF转录因子蛋白的多核苷酸可以由具有组成型表达概况的启动子表达。组成型启动子包括CaMV 35S启动子(Odell等,(1985)Nature 313:810-812);水稻肌动蛋白(McElroy等,(1990)Plant Cell 2:163-171);泛素(Christensen等,(1989)Plant Mol.Biol.12:619-632和Christensen等,(1992)PlantMol.Biol.18:675-689);pEMU(Last等,(1991)Theor.Appl.Genet.81:581-588);MAS(Velten等,(1984)EMBO J.3:2723-2730);ALS启动子(美国专利号5,659,026)等。
编码本发明ERF转录因子蛋白的本发明多核苷酸可以由组织偏好启动子表达。组织偏好启动子包括Yamamoto等,(1997)Plant J.12(2):255-265;Kawamata等,(1997)PlantCell Physiol.38(7):792-803;Hansen等,(1997)Mol.Gen Genet.254(3):337-343;Russell等,(1997)Transgenic Res.6(2):157-168;Rinehart等,(1996)PlantPhysiol.112(3):1331-1341;Van Camp等,(1996)Plant Physiol.112(2):525-535;Canevascini等,(1996)Plant Physiol.112(2):513-524;Yamamoto等,(1994)Plant CellPhysiol.35(5):773-778;Lam(1994)Results Probl.Cell Differ.20:181-196;Orozco等,(1993)Plant Mol Biol.23(6):1129-1138;Matsuoka等,(1993)Proc Natl.Acad.Sci.USA90(20):9586-9590;和Guevara-Garcia等,(1993)Plant J.4(3):495-505。叶偏好启动子也是本领域已知的。参见,例如,Yamamoto等,(1997)Plant J.12(2):255-265;Kwon等,(1994)Plant Physiol.105:357-67;Yamamoto等,(1994)Plant Cell Physiol.35(5):773-778;Gotor等,(1993)Plant J.3:509-18;Orozco等,(1993)Plant Mol.Biol.23(6):1129-1138;和Matsuoka等,(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.USA90(20):9586-9590。
发育调节的启动子可能是表达编码ERF转录因子蛋白的多核苷酸所需的。此类启动子可在特定发育阶段显示表达峰。此类启动子已在本领域中描述,例如US 62/029,068;Gan和Amasino(1995)Science 270:1986-1988;Rinehart等(1996)Plant Physiol 112:1331-1341;Gray-Mitsumune等(1999)Plant Mol Biol39:657-669;Beaudoin和Rothstein(1997)Plant Mol Biol 33:835-846;Genschik等(1994)Gene 148:195-202等。
施用特定生物胁迫和/或非生物胁迫后诱导的启动子可能是表达编码ERF转录因子蛋白的多核苷酸所需的。此类启动子已在本领域中描述,例如,Yi等(2010)Planta 232:743-754;Yamaguchi-Shinozaki和Shinozaki(1993)Mol Gen Genet 236:331-340;美国专利号7,674,952;Rerksiri等(2013)Sci World J 2013:文章号397401;Khurana等(2013)PLoS One 8:e54418;Tao等(2015)Plant Mol Biol Rep 33:200-208等。
细胞偏好启动子可能是表达编码ERF转录因子蛋白的多核苷酸所需的。这些启动子可以优先驱动特定细胞类型(例如叶肉细胞或维管束鞘细胞)中下游基因的表达。这种细胞偏好启动子已在本领域中描述,例如Viret等(1994)Proc Natl Acad USA 91:8577-8581;美国专利号8,455,718;美国专利号7,642,347;Sattarzadeh等(2010)PlantBiotechnol J 8:112-125;Engelmann等(2008)Plant Physiol 146:1773-1785;Matsuoka等(1994)Plant J 6:311-319等。
认识到特异性非组成型表达概况可相对于一种或多种感兴趣基因的组成型表达提供改善的植物表型。例如,通过光条件、施加特定应力、昼夜循环、或植物发育阶段来调节许多植物基因。这些表达概况对于植物中基因或基因产物的功能而言是非常重要的。可用于提供所需的表达概况的一个策略是使用含有在植物中所需的时间和位置处驱动所需的表达水平的顺式调节元件的合成启动子。已经在科学文献中描述了可用于在植物中改变基因表达的顺式调节元件(Vandepoele等,(2009)Plant Physiol 150:535-546;Rushton等,(2002)Plant Cell 14:749-762)。顺式调节元件也可用于改变启动子表达概况,如Venter(2007)Trends Plant Sci 12:118-124所述。
认识到新型启动子可以通过大规模生物数据分析鉴定(Wang等(2016)FrontPlant Sci 7:766;Alexandrov等(2009)Plant Mol Biol 69:179-194;Rai等(2013)PlantBiotechnol J 11:953-963;Batut和Gingeras(2013)Curr Protoc Mol Biol 104:Unit-25B.11;Yin等(2014)Gene 546:177-186)。适合启动子鉴定的大规模生物数据可以包括微阵列数据,RNA-Seq数据或其他大规模数据集,包括转录组数据。具有所需表达概况的启动子(例如,驱动细胞特异性、胁迫应答、组织特异性或其他所需表达概况的启动子)可以通过对表达符合所需表达概况的基因或基因组进行鉴定而产生;启动子位于这些转录本的上游并且可以使用标准分子生物学方法分离。
本领域已知植物终止子并且包括来自根癌土壤杆菌(A.tumefaciens)的Ti-质粒的那些,如真蛸碱合酶和胆脂碱合酶终止区。还参见Guerineau等,(1991)Mol.Gen.Genet.262:141-144;Proudfoot(1991)Cell 64:671-674;Sanfacon等(1991)Genes Dev.5:141-149;Mogen等,(1990)Plant Cell 2:1261-1272;Munroe等,(1990)Gene91:151-158;Ballas等,(1989)Nucleic Acids Res.17:7891-7903;和Joshi等,(1987)Nucleic Acids Res.15:9627-9639。
如上所述,本发明的ERF转录因子蛋白的核苷酸可用于表达盒中,以转化感兴趣的植物。转化方案以及向植物中导入多肽或多核苷酸序列的方案可根据转化靶向的植物或植物细胞的类型(即,单子叶或双子叶)而变化。术语“转化”或“转化法”是指用于将多肽或多核苷酸引入植物细胞的任何方法。向植物细胞中导入多肽和多核苷酸的合适方法包括微注射(Crossway等,(1986)Biotechniques 4:320-334)、电穿孔(Riggs等,(1986)Proc.Natl.Acad.Sci.USA83:5602-5606),农杆菌-介导的转化(美国专利号5,563,055和美国专利号5,981,840),直接基因转化(Paszkowski等,(1984)EMBO J.3:2717-2722),和弹道颗粒加速(参见例如,美国专利号4,945,050;美国专利号5,879,918;美国专利号5,886,244;和5,932,782;Tomes等,(1995)《植物细胞、组织和器官培养中的基础方法》(PlantCell,Tissue,and Organ Culture:Fundamental Methods),Gamborg和Phillips编(Springer-Verlag,Berlin);McCabe等,(1988)Biotechnology 6:923-926);和Lec1转化(WO 00/28058)。还参见Weissinger等,(1988)Ann.Rev.Genet.22:421-477;Sanford等,(1987)Particulate Science and Technology 5:27-37(洋葱);Christou等,(1988)PlantPhysiol.87:671-674(大豆);McCabe等,(1988)Bio/Technology 6:923-926(大豆);Finer和McMullen(1991)In Vitro Cell Dev.Biol.27P:175-182(大豆);Singh等,(1998)Theor.Appl.Genet.96:319-324(大豆);Datta等,(1990)Biotechnology 8:736(水稻);Klein等,(1988)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85:4305-4309(玉米);Klein等,(1988)Biotechnology 6:559-563(玉米);美国专利号5,240,855;5,322,783;和5,324,646;Klein等,(1988)Plant Physiol.91:440-444(玉米);Fromm等,(1990)Biotechnology 8:833-839(玉米);Hooykaas-Van Slogteren等,(1984)Nature(伦敦)311:763-764;美国专利号5,736,369(谷类);Bytebier等,(1987)Proc.Natl.Acad.Sci.USA 84:5345-5349(百合科(Liliaceae));De Wet等,(1985)《胚珠组织实验操作》(The Experimental Manipulationof Ovule Tissues),Chapman等编,(纽约朗文出版社(Longman,New York),第197-209页(花粉);Kaeppler等,(1990)Plant Cell Reports 9:415-418和Kaeppler等,(1992)Theor.Appl.Genet.84:560-566(须-介导的转化);D'Halluin等,(1992)Plant Cell4:1495-1505(电穿孔);Li等,(1993)Plant Cell Reports 12:250-255以及Christou和Ford(1995)Annals of Botany 75:407-413(水稻);Osjoda等,(1996)Nature Biotechnology14:745-750(玉米,通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens));其全部通过引用纳入本文。“稳定转化”是指导入植物的核苷酸构建体整合到植物的基因组中并且能够被其后代遗传。
按照常规方式,已经转化的细胞可长成植物。参见,例如,McCormick等,(1986)Plant Cell Reports 5:81-84。由此,本发明提供了转化的种子(也称为“转基因种子”),所述种子具有稳定纳入其基因组中的本发明的多核苷酸,例如,本发明的表达盒。
本发明可用于任何植物物种(包括但不限于单子叶和双子叶)的转化。感兴趣植物物种的示例包括但不限于,玉米(Zea mays),油菜种(例如,甘蓝型油菜(B.napus)、白菜型油菜(B.rapa)、芥菜型油菜(B.juncea)),尤其是用作菜籽油来源的那些油菜物种,苜蓿(Medicago sativa),水稻(Oryza sativa),黑麦(Secale cereale),高粱(Sorghumbicolor,Sorghum vulgare),粟(例如,珍珠粟(Pennisetum glaucum),黍(Panicummiliaceum),小米(Setaria italica),穇子(Eleusine coracana)),向日葵(Helianthusannuus),红花(Carthamus tinctorius),小麦(Triticum aestivum),大豆(Glycine max),烟草(Nicotiana tabacum),马铃薯(Solanum tuberosum),花生(Arachis hypogaea),棉花(Gossypium barbadense,Gossypium hirsutum),甘薯(Ipomoea batatas),木薯(Manihotesculenta),咖啡(Coffea spp.),椰子(Cocos nucifera),菠萝(Ananas comosus),柠檬树(Citrus spp.),可可(Theobroma cacao),茶(Camellia sinensis),香蕉(Musa spp.),鳄梨(Persea americana),无花果(Ficus casica),番石榴(Psidium guajava),芒果(Mangifera indica),橄榄(Olea europaea),番木瓜(Carica papaya),腰果(Anacardiumoccidentale),澳洲坚果(Macadamia integrifolia),杏(Prunus amygdalus)、甜菜(Betavulgaris)、甘蔗(Saccharum spp.)、油棕榈(Elaeis guineensis)、白杨(杨树属(Populusspp.))、桉树(Eucalyptus spp.)、燕麦(Avena sativa)、大麦(Hordeum vulgare)、蔬菜、观赏植物和针叶树。
在一实施方式中,使用构建体转化一个或多个植物细胞,所述构建体含有在植物细胞中可操作的启动子,该启动子与编码本发明ERF转录因子蛋白的编码序列操作性连接。将一个或多个转化的植物细胞再生以产生转化的植物。用包含驱动本发明ERF转录因子蛋白编码多核苷酸表达的功能性启动子的构建体转化的这些植物表现出增加的植物产量,即相对于对照植物增加的地上生物质和/或增加的种子产量。
在一实施方式中,使用构建体转化一个或多个植物细胞,所述构建体含有在植物细胞中可操作的启动子,该启动子与编码本发明ERF转录因子蛋白的编码序列操作性连接,并且还含有在植物细胞中可操作的至少一个其他启动子,该至少一个其他启动子与至少一个其他编码序列操作性连接。例如,其他编码序列可以编码这样的蛋白质,所述蛋白质参与光合作用,细胞壁生物合成,调节导水率,淀粉生物合成,淀粉降解,蔗糖生物合成,蔗糖转运,固氮或其他感兴趣的代谢途径。编码ERF转录因子的编码序列以及一个或更多个其他编码序列均存在于一个或多个转化的植物细胞的基因组中。将一个或多个转化的植物细胞再生以产生转化的植物。用下述构建体转化的这些植物表现出植物产量增加,即相对于对照植物增加的地上生物质和/或增加的种子产量,所述构建体含有驱动本发明ERF转录因子蛋白编码多核苷酸表达的功能性启动子,并还含有在植物细胞中可操作的启动子,其与至少一个其他编码序列操作性连接。
目前,已证明上调ERF转录因子基因能增加植物产量,可采用增加感兴趣植物中内源性ERF转录因子序列表达的其它方法。植物基因组中存在的ERF转录因子基因表达可通过在所述植物的基因组中存在的ERF转录因子基因的上游***转录增强子来改变。该策略将允许ERF转录因子基因的表达,以维持其正常发育概况,同时显示升高的转录本水平。该策略将采用针对感兴趣的基因组序列指定的大范围核酸酶,通过在感兴趣的ERF转录因子基因基因上游***增强子元件来实现。或者,与针对感兴趣基因组序列设计的引导RNA(gRNA)偶联的Cas9核酸内切酶,或与针对感兴趣基因组序列设计的gRNA偶联的Cpf1核酸内切酶,用于实现在感兴趣的ERF转录因子基因的上游***增强子元件。或者,将与转录增强子元件融合的失活的Cas9核酸内切酶或失活的Cpf1核酸内切酶、C2c1核酸内切酶、C2c2核酸内切酶或C2c3核酸内切酶靶向感兴趣的ERF转录因子基因的转录起始位点附近的基因组位置,从而调节所述感兴趣的ERF转录因子基因的表达(Piatek等(2015)Plant Biotechnol J13:578-589)。
调节ERF转录因子蛋白编码基因的表达可通过采用精确基因组编辑技术以调节该内源性序列的表达来实现。由此,通过使用本领域已知的方法将核酸序列***编码ERF转录因子的天然植物序列附近。这类方法包括但不限于针对感兴趣植物基因组序列设计的大范围核酸酶(D’Halluin等,(2013)Plant Biotechnol J 11:933-941);CRISPR-Cas9,CRISPR-Cpf1,TALEN,和其他精确编辑基因组的技术(Feng等,(2013)Cell Research 23:1229-1232,Podevin等,(2013)Trends Biotechnology 31:375-383,Wei等,(2013)J GenGenomics 40:281-289,Zhang等,(2013)WO 2013/026740,Zetsche等(2015)Cell 163:759-771,美国临时专利申请号62/295,325);格里嗜盐碱杆菌属(N.gregoryi)亚尔古(Argonaute)-介导的DNA***(Gao等(2016)Nat Biotechnoldoi:10.1038/nbt.3547);Cre-lox位点-特异性重组(Dale等,(1995)Plant J7:649-659;Lyznik等,(2007)TransgenicPlant J 1:1-9;FLP-FRT重组(Li等,(2009)Plant Physiol 151:1087-1095);Bxb1-介导的整合(Yau等,Plant J(2011)701:147-166);锌指介导的整合(Wright等,(2005)Plant J44:693-705);Cai等,(2009)Plant Mol Biol 69:699-709);和同源重组(Lieberman-Lazarovich和Levy(2011)Methods Mol Biol 701:51-65);Puchta,H.(2002)Plant MolBiol48:173-182)。将利用所述核酸序列的***来实现ERF转录因子基因的过表达、表达降低和/或表达概况改变的所需结果。
增强子包括能够在***植物的基因组时增强基因表达的任何分子。因此,可将增强子***位于感兴趣的ERF转录因子序列的上游或下游的基因组区中以增强表达。相对于表达将被增强的基因,增强子可以起顺式作用,并且可位于基因组内的任何位置。例如,增强子可位于其所增强表达的编码序列的约1Mbp以内、约100kbp以内、约50kbp、约30kbp、约20kbp、约10kbp、约5kbp、约3kbp、或约1kbp以内。增强子也可位于其所增强表达的基因的约1500bp以内,或者可紧邻或位于其所增强表达的基因的内含子以内。本发明的用于调节编码ERF转录因子蛋白或同源物的内源性基因表达的增强子包括经典增强子元件,如CaMV35S增强子元件、巨细胞病毒(CMV)早期启动子增强子元件、和SV40增强子元件,还包括增强基因表达的内含子-介导的增强子元件如玉米shrunken-1增强子元件(Clancy和Hannah(2002)Plant Physiol.130(2):918-29)。可导入植物基因组以调节表达的增强子的其他示例包括PetE增强子(Chua等,(2003)Plant Cell 15:11468-1479),或水稻α-淀粉酶增强子(Chen等,(2002)J.Biol.Chem.277:13641-13649),或本领域已知的任何增强子(Chudalayandi(2011)Methods Mol.Biol.701:285-300)。在一些实施方式中,本发明包括亚结构域、片段、或重复增强子元件(Benfrey等,(1990)EMBO J9:1677-1684)。
ERF转录因子基因表达的改变还可通过以不改变该DNA序列的方式来调节该DNA来实现。此类改变可包括修饰感兴趣的ERF转录因子蛋白基因的染色质含量或结构和/或ERF转录因子基因周围的DNA的染色质含量或结构。众所周知,染色质含量或结构中的此类变化能够影响基因转录(Hirschhorn等(1992)Genes and Dev 6:2288-2298;Narlikar等(2002)Cell 108:475-487)。此类变化还可包括改变感兴趣的ERF转录因子基因的甲基化状态和/或感兴趣的ERF转录因子基因周围的DNA的甲基化状态。众所周知的是,DNA甲基化中的此类变化能够改变转录(Hsieh(1994)Mol Cell Biol 14:5487-5494)。经靶向的表观基因组编辑已被证明以可预测的方式影响基因的转录(Hilton等(2015)33:510-517)。本领域技术人员显见的是,可施用对DNA做出的调节感兴趣的ERF转录因子基因的转录其它类似改变(统称为“表观遗传学改变”),以获得改变的ERF转录因子基因表达概况的所需结果。
ERF转录因子基因表达的改变还可通过采用转座元件技术以改变基因表达来实现。众所周知,转座元件能够改变附近DNA的表达(McGinnis等(1983)Cell 34:75-84)。可通过在感兴趣的ERF转录因子基因的上游***转座元件,造成所述基因的表达改变,来实现编码ERF转录因子的基因的表达的改变。
ERF转录因子基因的改变还可通过在该感兴趣的植物物种中编码天然ERF转录因子的开放阅读框的上游***启动子来实现。这将通过采用针对感兴趣的基因组序列设计的大范围核酸酶,在编码ERF转录因子蛋白的开放阅读框的上游***感兴趣的启动子来实现。该策略已知并且已经在先证实在预定位置处将转基因***棉花基因组(D’Halluin等,(2013)Plant Biotechnol J 11:933-941)。对于本领域技术人员显而易见的是,通过在预定基因组基因座处引起双链断裂并提供适当的DNA模板用于***,可以使用其他技术来实现在所述预定基因组基因座处***遗传元件的类似结果(例如,CRISPR-Cas9,CRISPR-Cpf1,TALEN和用于精确编辑基因组的其他技术)。
通过说明的方式,而非限制性方式提供以下实施例。本说明书中涉及的所有专利申请和出版物指示本发明涉及领域技术人员的水平。所有发表物和专利申请通过引用纳入本文,就好像将各篇单独的发表物或专利申请具体和单独地通过引用纳入本文那样。
虽然出于方便理解的目的,通过阐述和举例的方式详细描述了上述发明,但可明显看出,某些改变和修改应属于所附权利要求书的范围。
实验部分
实施例1–ERF转录因子植物转化载体的构建
合成编码ERF转录因子的开放阅读框BRADI3G31600.1(SEQ ID NO:1,编码SEQ IDNO:2的蛋白序列)、BRADI5G18850.1(SEQ ID NO:56,编码SEQ ID NO:57的蛋白序列)、BRADI3G51610.1(SEQ ID NO:58,编码SEQ ID NO:59的蛋白序列)、BRADI3G08790.1(SEQ IDNO:60,编码SEQ ID NO:61的蛋白序列)、BRADI4G21265.1(SEQ ID NO:62,编码SEQ ID NO:63的蛋白序列)和BRADI3G45997.1(SEQ ID NO:64,编码SEQ ID NO:65的蛋白序列)。在编码序列的5'和3'末端包括适当的限制性位点,以允许将该DNA克隆到含有适于控制基因表达的遗传元件的植物转化载体中。在每个植物转化构建体中,ERF转录因子开放阅读框位于植物启动子和5'非翻译区(5'UTR)的下游和3'UTR的上游。表2总结了含有ERF转录因子开放阅读框的植物转化构建体。
表2:ERF转录因子植物转化构建体
除了表2中列出的单基因ERF转录因子植物转化构建体外,还构建了含有ERF转录因子基因盒和第二连接盒的多基因植物转化构建体。表3总结了多基因ERF转录因子植物转化构建体。
表3:ERF转录因子多基因植物转化构建体
使用3种不同的启动子驱动表2和3中所列构建体中的ERF转录因子基因的表达。ZmUbi启动子(SEQ ID NO:3和7)和2X35S启动子(SEQ ID NO:8)是成熟表征的组成型启动子时候,而BRADI1G37410启动子(SEQ ID NO:5)是源自施用各种胁迫(riest等(2014)PLoSOne 9:e87499)后分析二穗短柄草(B.distachyon)基因表达所得到的新型启动子。发现BRADI1G37410基因在干旱和盐胁迫下被上调。
除了表2和3中描述的基因盒外,表2和3中列出的每种植物转化构建体还含有适于在引入植物转化载体后选择转化的植物细胞和植物再生的选择标记盒,如下所述。每个转化载体构建在质粒中,该质粒含有适于在大肠杆菌(E.coli)和根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)中维持质粒的序列。在证实表2和3中列出的植物转化构建体含有所需序列后,将它们转化到根癌农杆菌(A.tumefaciens)细胞中用于植物转化。
实施例2-狗尾草(Setaria viridis)的转化
根据先前描述的方法(PCT/US2015/43989,通过引用并入本文),使用携带ERF转录因子植物转化载体的根癌农杆菌(A.tumefaciens)细胞转化狗尾草(S.viridis)细胞。在用相关的植物转化载体转化狗尾草细胞并再生狗尾草植物后,进行PCR分析以证实狗尾草基因组中存在一个或多个感兴趣的基因。表4总结了用于转化狗尾草的转化构建体,以及用每种构建体转化产生的经PCR验证的转基因植物的数量。
表4:用ERF转录因子植物转化载体进行的狗尾草转化的总结
<u>构建体</u> <u>土壤中的植物数量</u> <u>可选择标志物PCR(数量)</u>
130299 11 7
130794 20 18
130871 21 19
130872 3 3
130929 19 18
130931 3 3
131049 18 18
130930 2 0
131048 17 17
130932 2 1
131050 29 27
131051 6 6
131052 9 9
实施例3-玉米(Zea mays)的转化
将携带ERF转录因子植物转化载体的根癌农杆菌(A.tumefaciens)细胞用于转化适于在组织培养基上再生的玉米(Zea mays cv.B104)细胞。在用相关植物转化载体转化玉米细胞并再生玉米植物后,进行PCR分析以确认玉米基因组中存在一个或多个感兴趣的基因。表5总结了用于转化玉米的转化构建体,以及用每种构建体转化产生的经PCR验证的转基因植物的数量。
表5:用ERF转录因子植物转化载体进行的玉米转化的总结
<u>构建体</u> <u>土壤中的植物数量</u> <u>可选择标志物PCR+</u>
130234 68 26
130299 51 42
130889 2 1
实施例4–水稻(Oryza sativa)的转化
将携带ERF转录因子植物转化载体的根癌农杆菌(A.tumefaciens)细胞用于转化适于在组织培养基上再生的水稻(Oryza sativa cv.Kitaake)细胞。在用相关植物转化载体转化水稻细胞并再生水稻植物后,进行PCR分析以确认水稻基因组中存在一个或多个感兴趣的基因。
实施例5-转基因狗尾草(S.viridis)的表征
在用ERF转录因子植物转化载体转化的狗尾草植物的转化和再生之后,将T0-代植物培养至成熟以产生T1-代种子。携带感兴趣的ERF转录因子基因盒的T1代狗尾草植物在温室环境中生长,以评估ERF转录因子基因表达对植物生长和最终地上生物质和种子产量的影响。随机化区组设计与野生型狗尾草边界行一起使用以消除分析中的边缘效应。空分离植物(Null segregant plant)在相同环境条件下在转基因狗尾草旁生长。表6总结了由于转化而携带ERF转录因子基因盒的T1代狗尾草植物的实验的生物质和种子产量测定的结果。下表表示如表2和3中所述的用于转化的构建体,接着是从中收获T1种子的T0事件编号。
表6:用T1代植物进行的狗尾草温室观察的总结
在表6中,干重(DW)和种子产量(通过干重测量)以相对于空分离植物的百分比示出,所述空分离植物源自与用于生成携带ERF转录因子基因盒和其他感兴趣基因盒的转基因狗尾草(S.viridis)植物的相同的转化构建体。如该表格所示,4个131048事件中的1个在T1代中显示出相对于空对照的干重累积增加和种子产量增加。T1代中,相对于空对照,4个131049事件中的2个显示出干重累积增加,而4个131049事件中的1个显示出种子产量增加。所有4个130929事件在T1代中显示出相对于空对照的生物质累积和种子产量增加,而5个130871事件均显示出相对于空对照的生物质累积增加。
实施例6-转基因玉米的表征
用感兴趣的ERF转录因子植物转化载体转化并经确认含有一个或多个感兴趣基因的T0代玉米植物在温室中生长至成熟。当T0植物达到生殖阶段时,它们由适当的近交玉米品系授粉以产生杂交玉米种子。或者,或除了T0转基因玉米植物的授粉之外,来自T0的花粉用于授粉一个或多个近交玉米品系以产生杂交玉米种子。将由这些授粉产生的F1代杂交种子种植在两行或四行的田间环境中,并使用标准农艺实践进行培养。对植物进行基因分型以确定哪些植物含有以及哪些植物不含有ERF转录因子基因盒和ERF转录因子植物转化载体中包含的任何其他相关基因盒(例如,一种或多种感兴趣基因的表达盒或可选择标记基因盒)。在玉米植物成熟后,收获种子。合并来自含有ERF转录因子基因盒的植物的种子,以及合并来自缺乏ERF转录因子基因盒的空分离植物的种子。称重种子,计算含有ERF转录因子基因盒的植物的种子产量以及缺乏ERF转录因子基因盒的空分离植物的种子产量。进行适当的统计分析以确定含有ERF转录因子基因盒的植物是否比缺乏ERF转录因子基因盒的植物产生更高的产量。
或者,用感兴趣的ERF转录因子植物转化载体转化的并经确认含有一个或多个感兴趣基因的T0代玉米植物在温室中生长至成熟,然后自花授粉。将得到的T1种子种植在温室中,并培养T1植物。对T1植物进行基因分型以鉴定纯合的、杂合的和空的分离植物。来自纯合T1植物的花粉用于授粉一个或多个近交玉米品系以产生杂交玉米种子。来自空分离植物的花粉也用于授粉一个或多个近交玉米品系以产生杂交玉米种子。将得到的杂交种子种植在两行或四行的田间环境,并使用标准农艺实践进行栽培。在玉米植物成熟后,收获种子。合并来自含有ERF转录因子基因盒的植物的种子,以及合并来自缺乏ERF转录因子基因盒的空分离植物的种子。称重种子,计算含有ERF转录因子基因盒的植物的种子产量以及缺乏ERF转录因子基因盒的空分离植物的种子产量。进行适当的统计分析以确定含有ERF转录因子基因盒的植物是否比缺乏ERF转录因子基因盒的植物产生更高的产量。
实施例7-转基因水稻的表征
用感兴趣的ERF转录因子植物转化载体转化的并经确认含有一个或多个感兴趣基因的T0代水稻植物在温室中生长至成熟,然后自花授粉。将得到的T1种子种植在温室中,并培养T1植物。对T1植物进行基因分型以鉴定纯合的、杂合的和空的分离植物。来自每组的植物生长至成熟并允许自花授粉以产生T2种子。收获由这种自花授粉产生的T2种子并称重,并计算纯合、杂合和空分离植物的种子产量。进行适当的统计分析以确定含有ERF转录因子基因盒的植物是否比缺乏ERF转录因子基因盒的植物产生更高的产量。
将T0代植物的自花授粉产生的种子所生长的T1代植物,或纯合T1代植物的自花授粉产生的种子所生长的T2代植物,在田间环境中生长。在T2代植物的情况下,空分离T1代植物也经自花授粉以产生T2代空植物作为阴性对照。使用标准农艺实践培育植物并使其成熟。成熟后,允许植物自花授粉。收获由这种自花授粉产生的种子并称重,计算纯合、杂合和空分离植物的种子产量。进行适当的统计分析以确定含有ERF转录因子基因盒的植物是否比缺乏ERF转录因子基因盒的植物产生更高的产量。
序列表
<110> 本森希尔生物***股份有限公司(Benson Hill Biosystems, Inc.)
<120> 使用ERF转录因子序列增加植物生长和产量
<130> BHP011P2
<150> 62/414,936
<151> 2016-10-31
<160> 65
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 609
<212> DNA
<213> 二穗短柄草(Brachypodium distachyon)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(609)
<400> 1
atggagcagc agggcaggga gatttctggc atgatgtctc tctgcggcag gagggctagg 60
gctgagacaa ggcatcctgt gtacaggggc gtgaggctca gggctggcaa gtgggtgtct 120
gagattaggg agctcaggaa gcctaatagg atttggctcg gcacataccc tacacctgag 180
atggctgctg ctgcttacga tgctgctgct ctcgctctca ggggcgctgg cacagctctc 240
aatttccctg atgctgctag gtctaggcct gctcctaggt ctgtgtctgc tgatgatgtg 300
agggctgctg ctgctgaggc tgctgcttct ttcgctgctg tggctacatc tgcttggaca 360
acaacaacag agaggtcttc tgatgatcag taccataggc ctcattgcaa tcagctcagg 420
ggcggcggcg atgtgatggg cgtggtggat gaggatgatg tgttcgagat gcctaggctc 480
atggcttcta tggctgaggg cctcatgatt tctcctcctg atggcggcgc tgtggctcct 540
tactacgatg tgctccaggt ggaggatgag ggcgatgctg ctgctgtgtc tctctgggat 600
catgcttga 609
<210> 2
<211> 202
<212> PRT
<213> 二穗短柄草(Brachypodium distachyon)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(202)
<400> 2
Met Glu Gln Gln Gly Arg Glu Ile Ser Gly Met Met Ser Leu Cys Gly
1 5 10 15
Arg Arg Ala Arg Ala Glu Thr Arg His Pro Val Tyr Arg Gly Val Arg
20 25 30
Leu Arg Ala Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Leu Arg Lys Pro
35 40 45
Asn Arg Ile Trp Leu Gly Thr Tyr Pro Thr Pro Glu Met Ala Ala Ala
50 55 60
Ala Tyr Asp Ala Ala Ala Leu Ala Leu Arg Gly Ala Gly Thr Ala Leu
65 70 75 80
Asn Phe Pro Asp Ala Ala Arg Ser Arg Pro Ala Pro Arg Ser Val Ser
85 90 95
Ala Asp Asp Val Arg Ala Ala Ala Ala Glu Ala Ala Ala Ser Phe Ala
100 105 110
Ala Val Ala Thr Ser Ala Trp Thr Thr Thr Thr Glu Arg Ser Ser Asp
115 120 125
Asp Gln Tyr His Arg Pro His Cys Asn Gln Leu Arg Gly Gly Gly Asp
130 135 140
Val Met Gly Val Val Asp Glu Asp Asp Val Phe Glu Met Pro Arg Leu
145 150 155 160
Met Ala Ser Met Ala Glu Gly Leu Met Ile Ser Pro Pro Asp Gly Gly
165 170 175
Ala Val Ala Pro Tyr Tyr Asp Val Leu Gln Val Glu Asp Glu Gly Asp
180 185 190
Ala Ala Ala Val Ser Leu Trp Asp His Ala
195 200
<210> 3
<211> 2161
<212> DNA
<213> 玉米(Zea mays)
<220>
<221> ZmUbi_启动子1
<222> (1)..(2161)
<400> 3
actatgaaga agcacaaaga atacgaggga tggtgcagag ccgaagctat gcgcaaaaga 60
gcttcggcgt gataacagaa aaggaaaccg acttaaaggg gaaaagacta tttagacccc 120
gatgggttac tatagagtta ttagcaaatg taaagggcat aggtgtaatt ttacatgggc 180
tgcgtctcgt gcctataaat agatgaacag tgctcccgta ctgttcacac ggactggaca 240
tttgcttttg cgtcacgctt gtacttttgg cttttttcaa gccgaaggta catttgtaat 300
ttgttatcat ttctattttt ccataataat aaaatagaaa tgagttaacg ataatatttg 360
aggatttatg ttattcatac tttgcatgaa tcctttttca ttatttgtgg tattgatgaa 420
ggtatgccct tcataacctt tgtccaagac tcattatatc ccgagggaga taatgtttca 480
aaggacgaaa gactttaacg tttaacaatt tctgtgttgc cttgttctta attcatagca 540
tttaaggaca agttcccaac acatataaca tggtgaatag acgcatgcca caactctggt 600
tttgcaagaa cattaaaaca atggttttag agaggatggt ataccatagt actcaatgat 660
aaaggttttt tagttagttg agctccagaa ttcatagtta acagttaaca cttaacaata 720
atactacgcc tgtaccactt gttcatcatc agaattcaga aggaaaggtg agcggggaac 780
ccttttgtga cttctttttg tgatcagcta gccggtgatg gtggtaccat cagtggccag 840
cttttgttct agttcaacgg tcccggcctt ccggccacct aatgcaccaa ctattagtat 900
tgcagctagc cttcaaaaga aatgcatttg cagccgcctg tccctgtccc cgaccaatct 960
gctagcagac tcgcattatc gatggaggac actaataaat tcagccttcg atgtggatgc 1020
aacagcttca caggattcca ttaaatcgta gccgttgtgt caaagtttgc tttgccaacg 1080
ttatttattt atttatttag aaaaccagct ttgaccagcc gccctcttta cgtttggcac 1140
aatttagctg aatccggcgg catggcaagg tagactgcag tgcagcgtga cccggtcgtg 1200
cccctctcta gagataatga gcattgcatg tctaagttat aaaaaattac cacatatttt 1260
ttttgtcaca cttgtttgaa gtgcagttta tctatcttta tacatatatt taaactttac 1320
tctacgaata atataatcta tagtactaca ataatatcag tgttttagag aatcatataa 1380
atgaacagtt agacatggtc taaaggacaa ttgagtattt tgacaacagg actctacagt 1440
tttatctttt tagtgtgcat gtgttctcct ttttttttgc aaatagcttc acctatataa 1500
tacttcatcc attttattag tacatccatt tagggtttag ggttaatggt ttttatagac 1560
taattttttt agtacatcta ttttattcta ttttagcctc taaattaaga aaactaaaac 1620
tctattttag tttttttatt taataattta gatataaaat agaataaaat aaagtgacta 1680
aaaattaaac aaataccctt taagaaatta aaaaaactaa ggaaacattt ttcttgtttc 1740
gagtagataa tgccagcctg ttaaacgccg tcgacgagtc taacggacac caaccagcga 1800
accagcagcg tcgcgtcggg ccaagcgaag cagacggcac ggcatctctg tcgctgcctc 1860
tggacccctc tcgagagttc cgctccaccg ttggacttgc tccgctgtcg gcatccagaa 1920
attgcgtggc ggagcggcag acgtgagccg gcacggcagg cggcctcctc ctcctctcac 1980
ggcaccggca gctacggggg gacaattcct ttcccaccgc tccttcgctt tcccttcctc 2040
gcccgccgta ataaatagac accccctcca caccctcttt ccccaacctc gtgttgttcg 2100
gagcgcacac acacacaacc agatctcccc caaatccacc cgtcggcacc tccgcttcaa 2160
g 2161
<210> 4
<211> 623
<212> DNA
<213> 玉米(Zea mays)
<220>
<221> ZmUbi_3_UTR
<222> (1)..(623)
<400> 4
gtcatgggtc gtttaagctg ccgatgtgcc tgcgtcgtct ggtgccctct ctccatatgg 60
aggttgtcaa agtatctgct gttcgtgtca tgagtcgtgt cagtgttggt ttaataatgg 120
accggttgtg ttgtgtgtgc gtactaccca gaactatgac aaatcatgaa taagtttgat 180
gtttgaaatt aaagcctgtg ctcattatgt tctgtctttc agttgtctcc taatatttgc 240
ctgcaggtac tggctatcta ccgtttctta cttaggaggt gtttgaatgc actaaaacta 300
atagttagtg gctaaaatta gttaaaacat ccaaacacca tagctaatag ttgaactatt 360
agctattttt ggaaaattag ttaatagtga ggtagttatt tgttagctag ctaattcaac 420
taacaatttt tagccaacta acaattagtt tcagtgcatt caaacacccc cttaatgtta 480
acgtggttct atctaccgtc tcctaatata tggttgattg ttcggtttgt tgctatgcta 540
ttgggttctg attgctgcta gttcttgctg aatccagaag ttctcgtagt atagctcaga 600
ttcatattat ttatttgagt gat 623
<210> 5
<211> 1054
<212> DNA
<213> 二穗短柄草(Brachypodium distachyon)
<220>
<221> BRADI1G37410_启动子
<222> (1)..(1054)
<400> 5
gcgacctgcc aatctgggat tgacagatgt tccttttttt taggggaggg ccttttcctt 60
cttcgagaaa cgagggttgg gggtaggatg gatagttacc tgctttaggt cgcagacgaa 120
ttgcacaggg ccacaggccc gcccggccca cgtgatccgg tggaacaagc cgatttgcac 180
gcgcggtgcc ggagtcccga tttgccgccc aagcggaccc gatttgcccc agtgactcaa 240
tttctgggct gtggcccgtc agaactgctt tctgggctgg tctagtaggc tttactccgt 300
tcaacggggt gatatttctt atgatttact ctcccgtacc atgttcgaaa tattacatgt 360
acctagagat attttaatat ataaatacgt ctatatttaa tcatgagtca cttaatacga 420
gatggatgga gtatgatttt tgagtaaata gtttttcaaa aaaataaaat aaagttttta 480
gcgcaaacga agtacctcat ggccgatcta accccatttc ctttgttcac ccaccttcat 540
gtcgtatcgt accatggaac ttgacaactc ttatgcgatc tattgaacaa actcaatttt 600
aatttctttt tttcttttcc tgtttcaaat gggaattcag atgtcgtggg ccattttcca 660
ttttgcgagc gaacgatagt tgtcatcctc cccaaatgtg tcatcgagca tgtttccaga 720
ataagctgag acgtggcgac tccgacgcgt ctagtgcctg cacacgtctg gctagtcacc 780
agttcctgcc tgccggccca ctcctgtgac cacacgtagc tgcctaccgt ggcgctcgaa 840
tccctatccc ctccgcctcg aactgcttat aaatcggggc cccggcttca cttccctcca 900
ccagtccaca gacacagcca cgaatttgca gtgtacgcag ttctagtaaa caagaaccac 960
atttcctgag ggtgtacgat cagtgaagcg tttgtgcaag gacacaagaa ccacatttcc 1020
tgagggtgta cgatcagtga agcgtttgtg caag 1054
<210> 6
<211> 258
<212> DNA
<213> 二穗短柄草(Brachypodium distachyon)
<220>
<221> BRADI1G37410_3_UTR
<222> (1)..(258)
<400> 6
gcgcctcgca gtcgcaggtt gcctagctcg acttgtgaga gttgagctac gtatagtacc 60
agctggccac cctctgagaa taatatactg taataagatg aagaagaata aaattcccac 120
gatcacatgt actgttatac tgagagtaga gtctgtaccg tgggatttat accggacgtc 180
gttgtgtaaa tttcctttta atttgtttga atcgtgaatc gtatatgtat gttcacatgt 240
acactgtgtt cttctgtt 258
<210> 7
<211> 1992
<212> DNA
<213> 玉米(Zea mays)
<220>
<221> ZmUbi_启动子2
<222> (1)..(1992)
<400> 7
ctgcagtgca gcgtgacccg gtcgtgcccc tctctagaga taatgagcat tgcatgtcta 60
agttataaaa aattaccaca tatttttttt gtcacacttg tttgaagtgc agtttatcta 120
tctttataca tatatttaaa ctttactcta cgaataatat aatctatact actacaataa 180
tatcagtgtt ttagagaatc atataaatga acagttagac atggtctaaa ggacaattga 240
gtattttgac aacaggactc tacagtttta tctttttagt gtgcatgtgt tctccttttt 300
ttttgcaaat agcttcacct atataatact tcatccattt tattagtaca tccatttagg 360
gtttagggtt aatggttttt atagactaat ttttttagta catctatttt attctatttt 420
agcctctaaa ttaagaaaac taaaactcta ttttagtttt tttatttaat aatttagata 480
taaaatagaa taaaataaag tgactaaaaa ttaaacaaat accctttaag aaattaaaaa 540
aactaaggaa acatttttct tgtttcgagt agataatgcc agcctgttaa acgccgtcga 600
cgagtctaac ggacaccaac cagcgaacca gcagcgtcgc gtcgggccaa gcgaagcaga 660
cggcacggca tctctgtcgc tgcctctgga cccctctcga gagttccgct ccaccgttgg 720
acttgctccg ctgtcggcat ccagaaattg cgtggcggag cggcagacgt gagccggcac 780
ggcaggcggc ctcctcctcc tctcacggca cggcagctac gggggattcc tttcccaccg 840
ctccttcgct ttcccttcct cgcccgccgt aataaataga caccccctcc acaccctctt 900
tccccaacct cgtgttgttc ggagcgcaca cacacacaac cagatctccc ccaaatccac 960
ccgtcggcac ctccgcttca aggtacgccg ctcgtcctcc cccccccccc ctctctacct 1020
tctctagatc ggcgttccgg tccatggtta gggcccggta gttctacttc tgttcatgtt 1080
tgtgttagat ccgtgtttgt gttagatccg tgctgctagc gttcgtacac ggatgcgacc 1140
tgtacgtcag acacgttctg attgctaact tgccagtgtt tctctttggg gaatcctggg 1200
atggctctag ccgttccgca gacgggatcg atttcatgat tttttttgtt tcgttgcata 1260
gggtttggtt tgcccttttc ctttatttca atatatgccg tgcacttgtt tgtcgggtca 1320
tcttttcatg cttttttttg tcttggttgt gatgatgtgg tctggttggg cggtcgttct 1380
agatcggagt agaattctgt ttcaaactac ctggtggatt tattaatttt ggatctgtat 1440
gtgtgtgcca tacatattca tagttacgaa ttgaagatga tggatggaaa tatcgatcta 1500
ggataggtat acatgttgat gcgggtttta ctgatgcata tacagagatg ctttttgttc 1560
gcttggttgt gatgatgtgg tgtggttggg cggtcgttca ttcgttctag atcggagtag 1620
aatactgttt caaactacct ggtgtattta ttaattttgg aactgtatgt gtgtgtcata 1680
catcttcata gttacgagtt taagatggat ggaaatatcg atctaggata ggtatacatg 1740
ttgatgtggg ttttactgat gcatatacat gatggcatat gcagcatcta ttcatatgct 1800
ctaaccttga gtacctatct attataataa acaagtatgt tttataatta ttttgatctt 1860
gatatacttg gatgatggca tatgcagcag ctatatgtgg atttttttag ccctgccttc 1920
atacgctatt tatttgcttg gtactgtttc ttttgtcgat gctcaccctg ttgtttggtg 1980
ttacttctgc ag 1992
<210> 8
<211> 807
<212> DNA
<213> 花椰菜花叶病毒(Cauliflower Mosaic Virus)
<220>
<221> 2X35S_启动子
<222> (1)..(807)
<400> 8
gcgtattggc tagagcagct tgccaacatg gtggagcacg acactctcgt ctactccaag 60
aatatcaaag atacagtctc agaagaccaa agggctattg agacttttca acaaagggta 120
atatcgggaa acctcctcgg attccattgc ccagctatct gtcacttcat caaaaggaca 180
gtagaaaagg aaggtggcac ctacaaatgc catcattgcg ataaaggaaa ggctatcgtt 240
caagatgcct ctgccgacag tggtcccaaa gatggacccc cacccacgag gagcatcgtg 300
gaaaaagaag acgttccaac cacgtcttca aagcaagtgg attgatgtga acatggtgga 360
gcacgacact ctcgtctact ccaagaatat caaagataca gtctcagaag accaaagggc 420
tattgagact tttcaacaaa gggtaatatc gggaaacctc ctcggattcc attgcccagc 480
tatctgtcac ttcatcaaaa ggacagtaga aaaggaaggt ggcacctaca aatgccatca 540
ttgcgataaa ggaaaggcta tcgttcaaga tgcctctgcc gacagtggtc ccaaagatgg 600
acccccaccc acgaggagca tcgtggaaaa agaagacgtt ccaaccacgt cttcaaagca 660
agtggattga tgtgatatct ccactgacgt aagggatgac gcacaatccc actatccttc 720
gcaagaccct tcctctatat aaggaagttc atttcatttg gagaggacac gctgaaatca 780
ccagtctctc tctacaaatc tatctct 807
<210> 9
<211> 209
<212> DNA
<213> 花椰菜花叶病毒(Cauliflower Mosaic Virus)
<220>
<221> 35S_多聚A
<222> (1)..(209)
<400> 9
gatctgtcga tcgacaagct cgagtttctc cataataatg tgtgagtagt tcccagataa 60
gggaattagg gttcctatag ggtttcgctc atgtgttgag catataagaa acccttagta 120
tgtatttgta tttgtaaaat acttctatca ataaaatttc taattcctaa aaccaaaatc 180
cagtactaaa atccagatcc cccgaatta 209
<210> 10
<211> 912
<212> DNA
<213> 玉米(Zea mays)
<220>
<221> ZmRbcS_启动子1
<222> (1)..(912)
<400> 10
gagctccctt taatctggcg ctagatctgc atccgcggct tgcaaagata aatggcacat 60
ttagtgtgtt attttgcaat acctttcata gtagatatcc ttaaatgcag ttttaggcat 120
gtttgggtaa ttaaataaca tttttaggag gagttttaga tttacctttc tttcgtgatg 180
actgatgaca gacgtgggga attcaaatgc aactctagcg aaagttcata tatttttcat 240
aaatagctga ggctggggta attatttttt ttgtagaaaa atagaatagg tggaatggtt 300
ggggaaggcg taggcgctcg tggacgacgc ccgataaaag acaagaggcg gaattgccat 360
gaattcgagg tagctaagta aggcgcatat atatgccaaa aaattctact gtcactttcc 420
aatttcaatg cgctgccaaa caagccatcc tggaaactga cttgaattca gcccaattct 480
gtagatccaa acagggccgg cgtcagtgcc tcaggtgaga gagcagcaga cgatgcaaag 540
agccaaaact gcaagcagac gcagccgaag ccgaagccga agcccaagcc caaaactgtt 600
ttgtctttgc ccagaaccgc gacgagccta aactgcgctt cctcctatct acaagtccct 660
ggcacatcac gcatagtcca accatggcgc gcaggcgata aggcgcgcca cggggacgcg 720
acatgtggtg gcggacgcga tcaggatagg gccaggctgg ccgggcgcgg ccacgggaga 780
acggtggcca ctcgtcccac atccgcttcg tcctgtcctg tactgcgtcc tgcccccaac 840
gagagccgga gccggccatc ccgtcgcaca ctctccccct ctatatatgc cgtcggtgtg 900
ggggagccta ct 912
<210> 11
<211> 435
<212> DNA
<213> 玉米(Zea mays)
<220>
<221> ZmRbcS_3_UTR
<222> (1)..(435)
<400> 11
cgcccgccgg ccgccccccg ccggctagct agctagctag ctcctgcgtg agctagtagc 60
tagtgccatg cgtcgtctct gtcgttcggt tttgcttcgg gtcaccgtgt accctttgct 120
tgcttggttt cttctttcct tttttccttt ttttttcttc ttttccccgg ccatggttcc 180
tttgctttcc agcagttctc tgctggatgt gatgtatcca ttgttgcaat catggccttg 240
cattggctac ctctatacct gctacaaaac tactgcaacg cctatatata cttggggtga 300
ggaacatgtg aatgcaagct ccggctatca tatacatgta atatggatac aaactatata 360
tataaatccg ccgaggcgcc gacaatacta tacgacaccg tgttaagtta atatataact 420
ggtgcttttt attta 435
<210> 12
<211> 2300
<212> DNA
<213> 水稻(Oryza sativa)
<220>
<221> OsGluB-2_启动子
<222> (1)..(2300)
<400> 12
agaaggagag gaataaataa ggagaggaat agagataagg ttgaggagag gagttaaagg 60
agagaggaga taaggttgag gagaggagga gatggcctcg atccgatcgc gcacgcctct 120
ccgatctccg cgtcgatctt ttttcccggt tggtaacacc aaccggtact aaagattgaa 180
aagtaccctg gagcttttaa accgggacaa gatgttaata caactgggac tattgtgaaa 240
tctggtcgac cgatcaaaga tggtttctcc accagtgtat gtattttact cattggatta 300
acattttaca agagaccaat acttttagga tgggataaga caaagtattt catgataatc 360
tagccggtca tattttagaa tgatggacat ataccatagt ttcaggtctt ttgctctatc 420
attcgatgac aatgctgcta gttattaata ctaaacattt atattactac atatatgtta 480
tttttttact caaaagaaaa actattaatc attcatggaa gcagcagcaa aaaccacaag 540
ggtagtattg tccatctctc tctctctccc cccccccctc tcccctctat cctctctttc 600
aggatttcgg cagccggcaa aactagccaa acacttttag ggccactttc aactcctact 660
agagttagag tttagagcta ggattcgaga gttagagctc tacctaatag gcctgaaata 720
tggatatcca atttcacatg tagtatctat ttcaaaattg gattggatta tgttatacca 780
aaaaagggat atggatattt agtggacagg agaagacatg tatggcccca caagttgtat 840
aaagtttccc ttctatataa taaatcatct caagccaaat ttggtaactt tttataaagc 900
gaatgtgaat ttataaatat tagatatgga ttttgcttat atcgaatggg tatggatgaa 960
aagaatatta ccatccccat accagaaact caaataacta ttttatgagt gaaatgcata 1020
ggtacttgtg cggatgtgtc atgtaggtta ctaaactctt aaaatgcatt ttttacatcc 1080
caaactctca aaatataggc tccaactcac tccatgcgct gatatgacat gccatggtgg 1140
cgccttcatg tgagtgggac ctacgtgtta gtcactagaa aaaaaataaa attaatacac 1200
attttttctc ctctctacat taatactatt ttttttattt ttttatcttt tctcctctct 1260
tcctaagagg ggaaaagacg ttttattttt tttctatgtg gctaacatgt gggttacatt 1320
gaaaatacat tttaagaatt tagggatcta gatgacacac ccgcataagt tgtgagtgtg 1380
tacttcactc ataatctatc tttaccatat cctaccacaa tagtctaagt atgtataata 1440
gtccgagtat gagtaatgga tacctagtag caagctagct taaacaaatc taaattttta 1500
atatacccaa tgtcatgata attgacttat gacaatgtga ttatttcatc aagtctttaa 1560
atcattaatt ctagttgaag gtttatgttt tcttatgcta aagggttatg tttatataag 1620
aatattaaag agcaaattgc aatagatcaa cacaacaaat ttgaatgttt ccagatgtgt 1680
aaaatatcca aattaattgt tttaaaatag ttttaagaag gatctgatat gcaagtttga 1740
tagttagtaa actgcaaaag ggcttattac atggaaaatt ccttattgaa tatgtttcat 1800
tgactggttt attttacatg acaacaaagt tactagtatg tcaataaaaa aatacaaggt 1860
tacttgtcaa ttgtattgtg ccaagtaaag atgacaacaa acatacaaat ttatttgttc 1920
ttttatagaa acacctaact tatcaaggat agttggccac gcaaaaatga caacatactt 1980
tacaattgta tcatcataaa gatcttatca agtataagaa ctttatggtg acataaaaaa 2040
taatcacaag ggcaagacac atactaaaag tatggacaga aatttcttaa caaactccat 2100
ttgttttgta tccaaaagca taagaaatga gtcatggctg agtcatgata tgtagttcaa 2160
tcttgcaaaa ttgccttttt gttaagtatt gttttaacac tacaagtcac atattgtcta 2220
tacttgcaac aaacactatt accgtgtatc ccaagtggcc ttttcattgc tatataaact 2280
agcttgatcg gtctttcaac 2300
<210> 13
<211> 974
<212> DNA
<213> 玉米(Zea mays)
<220>
<221> ZmRbcS_启动子2
<222> (1)..(974)
<400> 13
gagctccctt taatctggcg ctagatctgc atccgcggct tgcaaagata aatggcacat 60
ttagtgtgtt attttgcaat acctttcata gtagatatcc ttaaatgcag ttttaggcat 120
gtttgggtaa ttaaataaca tttttaggag gagttttaga tttacctttc tttcgtgatg 180
actgatgaca gacgtgggga attcaaatgc aactctagcg aaagttcata tatttttcat 240
aaatagctga ggctggggta attatttttt ttgtagaaaa atagaatagg tggaatggtt 300
ggggaaggcg taggcgctcg tggacgacgc ccgataaaag acaagaggcg gaattgccat 360
gaattcgagg tagctaagta aggcgcatat atatgccaaa aaattctact gtcactttcc 420
aatttcaatg cgctgccaaa caagccatcc tggaaactga cttgaattca gcccaattct 480
gtagatccaa acagggccgg cgtcagtgcc tcaggtgaga gagcagcaga cgatgcaaag 540
agccaaaact gcaagcagac gcagccgaag ccgaagccga agcccaagcc caaaactgtt 600
ttgtctttgc ccagaaccgc gacgagccta aactgcgctt cctcctatct acaagtccct 660
ggcacatcac gcatagtcca accatggcgc gcaggcgata aggcgcgcca cggggacgcg 720
acatgtggtg gcggacgcga tcaggatagg gccaggctgg ccgggcgcgg ccacgggaga 780
acggtggcca ctcgtcccac atccgcttcg tcctgtcctg tactgcgtcc tgcccccaac 840
gagagccgga gccggccatc ccgtcgcaca ctctccccct ctatatatgc cgtcggtgtg 900
ggggagccta ctacaggacg acccaagcaa gcaagcaagc agcgagtaca tacatactag 960
gcagccaggc agcc 974
<210> 14
<211> 1692
<212> DNA
<213> 细长聚球藻(Synechococcus elongatus)
<220>
<221> RbcS-ictB
<222> (1)..(1692)
<220>
<221> RbcS_信号肽
<222> (1)..(288)
<220>
<221> ictB
<222> (289)..(1692)
<400> 14
atgccgtcgg tgtgggggag cctactgttt aaacatgagc agctgatggc ttctatgatt 60
tcttcttctg ctgtgacaac agtgtctagg gcttctaggg gccagtctgc tgctgtggct 120
cctttcggcg gcctcaagtc tatgacaggc ttccctgtga agaaggtgaa tacagatatt 180
acatctatta catctaatgg cggcagggtg aagtgcatgc aggtgtggcc tcctattggc 240
aagaagaagt tcgagacact ctcttacctc cctcctctca caagggatat gacagtgtgg 300
cagacactca cattcgctca ttaccagcct cagcagtggg gccattcttc tttcctccat 360
aggctcttcg gctctctcag ggcttggagg gcttcttctc agctcctcgt gtggtctgag 420
gctctcggcg gcttcctcct cgctgtggtg tacggctctg ctcctttcgt gccttcttct 480
gctctcggcc tcggcctcgc tgctattgct gcttactggg ctctcctctc tctcacagat 540
attgatctca ggcaggctac acctattcat tggctcgtgc tcctctactg gggcgtggat 600
gctctcgcta caggcctctc tcctgtgagg gctgctgctc tcgtgggcct cgctaagctc 660
acactctacc tcctcgtgtt cgctctcgct gctagggtgc tcaggaatcc taggctcagg 720
tctctcctct tctctgtggt ggtgattaca tctctcttcg tgtctgtgta cggcctcaat 780
cagtggattt acggcgtgga ggagctcgct acatgggtgg ataggaattc tgtggctgat 840
ttcacatcta gggtgtactc ttacctcggc aatcctaatc tcctcgctgc ttacctcgtg 900
cctacaacag ctttctctgc tgctgctatt ggcgtgtgga ggggctggct ccctaagctc 960
ctcgctattg ctgctacagg cgcttcttct ctctgcctca ttctcacata ctctaggggc 1020
ggctggctcg gcttcgtggc tatgattttc gtgtgggctc tcctcggcct ctactggttc 1080
cagcctaggc tccctgctcc ttggaggagg tggctcttcc ctgtggtgct cggcggcctc 1140
gtggctgtgc tcctcgtggc tgtgctcggc ctcgagcctc tcagggtgag ggtgctctct 1200
attttcgtgg gcagggagga ttcttctaat aatttcagga ttaatgtgtg gctcgctgtg 1260
ctccagatga ttcaggatag gccttggctc ggcattggcc ctggcaatac agctttcaat 1320
ctcgtgtacc ctctctacca gcaggctagg ttcacagctc tctctgctta ctctgtgcct 1380
ctcgaggtgg ctgtggaggg cggcctcctc ggcctcacag ctttcgcttg gctcctcctc 1440
gtgacagctg tgacagctgt gcgccaggtg tctaggctca ggagggatag gaatcctcag 1500
gctttctggc tcatggcttc tctcgctggc ctcgctggca tgctcggcca tggcctcttc 1560
gatacagtgc tctacaggcc tgaggcttct acactctggt ggctctgcat tggcgctatt 1620
gcttctttct ggcagcctca gccttctaag cagctccctc ctgaggctga gcattctgat 1680
gagaagatgt ga 1692
<210> 15
<211> 563
<212> PRT
<213> 细长聚球藻(Synechococcus elongatus)
<220>
<221> RbcS-ictB
<222> (1)..(563)
<220>
<221> RbcS_信号肽
<222> (1)..(96)
<220>
<221> ictB
<222> (97)..(563)
<400> 15
Met Pro Ser Val Trp Gly Ser Leu Leu Phe Lys His Glu Gln Leu Met
1 5 10 15
Ala Ser Met Ile Ser Ser Ser Ala Val Thr Thr Val Ser Arg Ala Ser
20 25 30
Arg Gly Gln Ser Ala Ala Val Ala Pro Phe Gly Gly Leu Lys Ser Met
35 40 45
Thr Gly Phe Pro Val Lys Lys Val Asn Thr Asp Ile Thr Ser Ile Thr
50 55 60
Ser Asn Gly Gly Arg Val Lys Cys Met Gln Val Trp Pro Pro Ile Gly
65 70 75 80
Lys Lys Lys Phe Glu Thr Leu Ser Tyr Leu Pro Pro Leu Thr Arg Asp
85 90 95
Met Thr Val Trp Gln Thr Leu Thr Phe Ala His Tyr Gln Pro Gln Gln
100 105 110
Trp Gly His Ser Ser Phe Leu His Arg Leu Phe Gly Ser Leu Arg Ala
115 120 125
Trp Arg Ala Ser Ser Gln Leu Leu Val Trp Ser Glu Ala Leu Gly Gly
130 135 140
Phe Leu Leu Ala Val Val Tyr Gly Ser Ala Pro Phe Val Pro Ser Ser
145 150 155 160
Ala Leu Gly Leu Gly Leu Ala Ala Ile Ala Ala Tyr Trp Ala Leu Leu
165 170 175
Ser Leu Thr Asp Ile Asp Leu Arg Gln Ala Thr Pro Ile His Trp Leu
180 185 190
Val Leu Leu Tyr Trp Gly Val Asp Ala Leu Ala Thr Gly Leu Ser Pro
195 200 205
Val Arg Ala Ala Ala Leu Val Gly Leu Ala Lys Leu Thr Leu Tyr Leu
210 215 220
Leu Val Phe Ala Leu Ala Ala Arg Val Leu Arg Asn Pro Arg Leu Arg
225 230 235 240
Ser Leu Leu Phe Ser Val Val Val Ile Thr Ser Leu Phe Val Ser Val
245 250 255
Tyr Gly Leu Asn Gln Trp Ile Tyr Gly Val Glu Glu Leu Ala Thr Trp
260 265 270
Val Asp Arg Asn Ser Val Ala Asp Phe Thr Ser Arg Val Tyr Ser Tyr
275 280 285
Leu Gly Asn Pro Asn Leu Leu Ala Ala Tyr Leu Val Pro Thr Thr Ala
290 295 300
Phe Ser Ala Ala Ala Ile Gly Val Trp Arg Gly Trp Leu Pro Lys Leu
305 310 315 320
Leu Ala Ile Ala Ala Thr Gly Ala Ser Ser Leu Cys Leu Ile Leu Thr
325 330 335
Tyr Ser Arg Gly Gly Trp Leu Gly Phe Val Ala Met Ile Phe Val Trp
340 345 350
Ala Leu Leu Gly Leu Tyr Trp Phe Gln Pro Arg Leu Pro Ala Pro Trp
355 360 365
Arg Arg Trp Leu Phe Pro Val Val Leu Gly Gly Leu Val Ala Val Leu
370 375 380
Leu Val Ala Val Leu Gly Leu Glu Pro Leu Arg Val Arg Val Leu Ser
385 390 395 400
Ile Phe Val Gly Arg Glu Asp Ser Ser Asn Asn Phe Arg Ile Asn Val
405 410 415
Trp Leu Ala Val Leu Gln Met Ile Gln Asp Arg Pro Trp Leu Gly Ile
420 425 430
Gly Pro Gly Asn Thr Ala Phe Asn Leu Val Tyr Pro Leu Tyr Gln Gln
435 440 445
Ala Arg Phe Thr Ala Leu Ser Ala Tyr Ser Val Pro Leu Glu Val Ala
450 455 460
Val Glu Gly Gly Leu Leu Gly Leu Thr Ala Phe Ala Trp Leu Leu Leu
465 470 475 480
Val Thr Ala Val Thr Ala Val Arg Gln Val Ser Arg Leu Arg Arg Asp
485 490 495
Arg Asn Pro Gln Ala Phe Trp Leu Met Ala Ser Leu Ala Gly Leu Ala
500 505 510
Gly Met Leu Gly His Gly Leu Phe Asp Thr Val Leu Tyr Arg Pro Glu
515 520 525
Ala Ser Thr Leu Trp Trp Leu Cys Ile Gly Ala Ile Ala Ser Phe Trp
530 535 540
Gln Pro Gln Pro Ser Lys Gln Leu Pro Pro Glu Ala Glu His Ser Asp
545 550 555 560
Glu Lys Met
<210> 16
<211> 1551
<212> DNA
<213> 玉米(Zea mays)
<220>
<221> ism2
<222> (1)..(1551)
<400> 16
atgcagttcg ctctcgctct cgatacaaat tctggccctc atcagattag gtcttgcgag 60
ggcgatggca ttgataggct cgagaagctc tctattggcg gcaggaagca ggagaaggct 120
ctcaggaata ggtgcttcgg cggcagggtg gctgctacaa cacagtgcat tctcacatct 180
gatgcttgcc ctgagacact ccattctcag acacagtctt ctaggaagaa ttacgctgat 240
gctaataggg tgtctgctat tattctcggc ggcggcacag gctctggcct cttccctctc 300
acatctacaa gggctacacc tgctgtgcct gtgggcggct gctacaggct cattgatatt 360
cctatgtcta attgcttcaa ttctggcatt aataagattt tcgtgatgtc tcagttcaat 420
tctacatctc tcaataggca tattcatagg acatacctcg agggcggcat taatttcgct 480
ggcggctctg tgcaggtgct cgctgctaca cagatgcctg aggagcctgc tggctggttc 540
cagggcacag ctgattctat taggaagttc atttgggtgc tcgaggatta ctactctcat 600
aagtctattg ataatattgt gattctctct ggcgatcagc tctacaggat gaattacatg 660
gagctcgtgc agaagcatgt ggaggatgat gctgatatta caatttcttg cgctcctgtg 720
gatgagtcta gggcttctaa gaatggcctc gtgaagattg atcatacagg cagggtgctc 780
cagttcttcg agaagcctaa gggcgctgat ctcaattcta tgagggtgga gacaaatttc 840
ctctcttacg ctattgatga tgctcagaag tacccttacc tcgcttctat gggcatttac 900
gtgttcaaga aggatgctct cctcgatctc ctcaagtcta agtacacaca gctccatgat 960
ttcggctctg agattctccc tagggctgtg ctcgatcatt ctgtgcaggc ttgcattttc 1020
acaggctact gggaggatgt gggcacaatt aagtctttct tcgatgctaa tctcgctctc 1080
acagagcagc cttctaagtt cgatttctac gatcctaaga cacctttctt cacagctcct 1140
aggtgcctcc ctcctacaca gctcgataag tgcaagatga agtacgcttt catttctgat 1200
ggctgcctcc tcagggagtg caatattgag cattctgtga ttggcgtgtg ctctagggtg 1260
tcttctggct gcgagctcaa ggattctgtg atgatgggcg ctgatacata cgagacagag 1320
gaggagaggt ctaagctcct cctcgctggc aaggtgcctg tgggcattgg caggaataca 1380
aagattagga attgcattat tgatatgaat gctaggattg gcaagaatgt ggtgattaca 1440
aattctaagg gcattcagga ggctgatcat cctgaggagg gctactacat taggtctggc 1500
attgtggtga ttctcaagaa tgctacaatt aatgatggct ctgtgatttg a 1551
<210> 17
<211> 516
<212> PRT
<213> 玉米(Zea mays)
<220>
<221> ism2
<222> (1)..(516)
<400> 17
Met Gln Phe Ala Leu Ala Leu Asp Thr Asn Ser Gly Pro His Gln Ile
1 5 10 15
Arg Ser Cys Glu Gly Asp Gly Ile Asp Arg Leu Glu Lys Leu Ser Ile
20 25 30
Gly Gly Arg Lys Gln Glu Lys Ala Leu Arg Asn Arg Cys Phe Gly Gly
35 40 45
Arg Val Ala Ala Thr Thr Gln Cys Ile Leu Thr Ser Asp Ala Cys Pro
50 55 60
Glu Thr Leu His Ser Gln Thr Gln Ser Ser Arg Lys Asn Tyr Ala Asp
65 70 75 80
Ala Asn Arg Val Ser Ala Ile Ile Leu Gly Gly Gly Thr Gly Ser Gly
85 90 95
Leu Phe Pro Leu Thr Ser Thr Arg Ala Thr Pro Ala Val Pro Val Gly
100 105 110
Gly Cys Tyr Arg Leu Ile Asp Ile Pro Met Ser Asn Cys Phe Asn Ser
115 120 125
Gly Ile Asn Lys Ile Phe Val Met Ser Gln Phe Asn Ser Thr Ser Leu
130 135 140
Asn Arg His Ile His Arg Thr Tyr Leu Glu Gly Gly Ile Asn Phe Ala
145 150 155 160
Gly Gly Ser Val Gln Val Leu Ala Ala Thr Gln Met Pro Glu Glu Pro
165 170 175
Ala Gly Trp Phe Gln Gly Thr Ala Asp Ser Ile Arg Lys Phe Ile Trp
180 185 190
Val Leu Glu Asp Tyr Tyr Ser His Lys Ser Ile Asp Asn Ile Val Ile
195 200 205
Leu Ser Gly Asp Gln Leu Tyr Arg Met Asn Tyr Met Glu Leu Val Gln
210 215 220
Lys His Val Glu Asp Asp Ala Asp Ile Thr Ile Ser Cys Ala Pro Val
225 230 235 240
Asp Glu Ser Arg Ala Ser Lys Asn Gly Leu Val Lys Ile Asp His Thr
245 250 255
Gly Arg Val Leu Gln Phe Phe Glu Lys Pro Lys Gly Ala Asp Leu Asn
260 265 270
Ser Met Arg Val Glu Thr Asn Phe Leu Ser Tyr Ala Ile Asp Asp Ala
275 280 285
Gln Lys Tyr Pro Tyr Leu Ala Ser Met Gly Ile Tyr Val Phe Lys Lys
290 295 300
Asp Ala Leu Leu Asp Leu Leu Lys Ser Lys Tyr Thr Gln Leu His Asp
305 310 315 320
Phe Gly Ser Glu Ile Leu Pro Arg Ala Val Leu Asp His Ser Val Gln
325 330 335
Ala Cys Ile Phe Thr Gly Tyr Trp Glu Asp Val Gly Thr Ile Lys Ser
340 345 350
Phe Phe Asp Ala Asn Leu Ala Leu Thr Glu Gln Pro Ser Lys Phe Asp
355 360 365
Phe Tyr Asp Pro Lys Thr Pro Phe Phe Thr Ala Pro Arg Cys Leu Pro
370 375 380
Pro Thr Gln Leu Asp Lys Cys Lys Met Lys Tyr Ala Phe Ile Ser Asp
385 390 395 400
Gly Cys Leu Leu Arg Glu Cys Asn Ile Glu His Ser Val Ile Gly Val
405 410 415
Cys Ser Arg Val Ser Ser Gly Cys Glu Leu Lys Asp Ser Val Met Met
420 425 430
Gly Ala Asp Thr Tyr Glu Thr Glu Glu Glu Arg Ser Lys Leu Leu Leu
435 440 445
Ala Gly Lys Val Pro Val Gly Ile Gly Arg Asn Thr Lys Ile Arg Asn
450 455 460
Cys Ile Ile Asp Met Asn Ala Arg Ile Gly Lys Asn Val Val Ile Thr
465 470 475 480
Asn Ser Lys Gly Ile Gln Glu Ala Asp His Pro Glu Glu Gly Tyr Tyr
485 490 495
Ile Arg Ser Gly Ile Val Val Ile Leu Lys Asn Ala Thr Ile Asn Asp
500 505 510
Gly Ser Val Ile
515
<210> 18
<211> 231
<212> DNA
<213> 美洲山杨(Populus tremuloides)
<220>
<221> hc1
<222> (1)..(231)
<400> 18
atgtctgatt ggggccctgt gttcgtggct gtggtgctct tcattctcct cacacctggc 60
ctcctcattc agattcctgg caggcagagg ctcgtggagt tcggcaattt ccagacatct 120
ggcgtgtcta ttctcgtgca ttctattctc tacttcgctc tcatttgcat tttcctcctc 180
gctgtgggcg tgcatgtgtg ctctctctgc acaccttcta tgctcgattg a 231
<210> 19
<211> 76
<212> PRT
<213> 美洲山杨(Populus tremuloides)
<220>
<221> hc1
<222> (1)..(76)
<400> 19
Met Ser Asp Trp Gly Pro Val Phe Val Ala Val Val Leu Phe Ile Leu
1 5 10 15
Leu Thr Pro Gly Leu Leu Ile Gln Ile Pro Gly Arg Gln Arg Leu Val
20 25 30
Glu Phe Gly Asn Phe Gln Thr Ser Gly Val Ser Ile Leu Val His Ser
35 40 45
Ile Leu Tyr Phe Ala Leu Ile Cys Ile Phe Leu Leu Ala Val Gly Val
50 55 60
His Val Cys Ser Leu Cys Thr Pro Ser Met Leu Asp
65 70 75
<210> 20
<211> 210
<212> DNA
<213> 野高粱(Sorghum bicolor)
<220>
<221> hc1
<222> (1)..(210)
<400> 20
atggctgatt ggggccctgt gctcattggc ctcgtgctct tcattctcct ctctcctggc 60
ctcctcttcc agattcctgg caagggcagg attattgagt tcggcaattt ccagacatct 120
ggcctctcta ttctcattca tgctgtgatt tacttcgctc tcctcgctat tttcctcctc 180
gctgtgggcg tgcatattta cctcggctga 210
<210> 21
<211> 69
<212> PRT
<213> 野高粱(Sorghum bicolor)
<220>
<221> hc1
<222> (1)..(69)
<400> 21
Met Ala Asp Trp Gly Pro Val Leu Ile Gly Leu Val Leu Phe Ile Leu
1 5 10 15
Leu Ser Pro Gly Leu Leu Phe Gln Ile Pro Gly Lys Gly Arg Ile Ile
20 25 30
Glu Phe Gly Asn Phe Gln Thr Ser Gly Leu Ser Ile Leu Ile His Ala
35 40 45
Val Ile Tyr Phe Ala Leu Leu Ala Ile Phe Leu Leu Ala Val Gly Val
50 55 60
His Ile Tyr Leu Gly
65
<210> 22
<211> 179
<212> PRT
<213> 小米(Setaria italica)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(179)
<400> 22
Met Glu Gln Arg Arg Leu Glu Glu Gln Arg Ala Cys Gly Arg Arg Ala
1 5 10 15
Arg Ala Glu Thr Arg His Pro Val Tyr Arg Gly Val Arg Leu Arg Ala
20 25 30
Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Leu Arg Lys Pro Ser Arg Ile
35 40 45
Trp Leu Gly Thr Tyr Pro Thr Pro Glu Met Ala Ala Ala Ala Tyr Asp
50 55 60
Ala Ala Ala Leu Ala Leu Arg Gly Ala Gly Thr Ala Leu Asn Phe Pro
65 70 75 80
Asp Ala Ala Arg Ser Arg Pro Ala Pro Ala Ser Ala Ser Ala Glu Asp
85 90 95
Val Arg Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Met Asp Gly Arg Arg
100 105 110
His His His His Glu Leu Arg Gly Asp Ser Gly Asp Ala Met Ala Ala
115 120 125
Gly Gly Val Val Asp Glu Asp Asp Leu Phe Glu Met Pro Arg Leu Met
130 135 140
Met Ser Met Ala Glu Gly Leu Met Met Ser Pro Pro Ala Leu Gly Pro
145 150 155 160
Ala Ala Ala Pro Met Met Glu Ala Asp Glu Glu Gly Val Ser Leu Trp
165 170 175
Asp His Ser
<210> 23
<211> 184
<212> PRT
<213> 赫氏玫瑰花草(Setaria italica)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(184)
<400> 23
Met Glu Arg Arg Arg Gln Glu Glu Gln Arg Thr Gly Pro Cys Gly Arg
1 5 10 15
Arg Ala Arg Ala Glu Thr Arg His Pro Val Tyr Arg Gly Val Arg Leu
20 25 30
Arg Ala Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Leu Arg Lys Pro Ser
35 40 45
Arg Ile Trp Leu Gly Thr Tyr Pro Thr Pro Glu Met Ala Ala Ala Ala
50 55 60
Tyr Asp Ala Ala Ala Leu Ala Leu Arg Gly Ala Gly Thr Ala Leu Asn
65 70 75 80
Phe Pro Asp Ala Ala Arg Ser His Pro Ala Pro Ala Ser Ala Cys Pro
85 90 95
Glu Asp Val Arg Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Met Met Asp
100 105 110
Ser Cys Arg Gly Ile Gly Arg His His Glu Leu Arg Gly Asp Asp Gly
115 120 125
Gly Gly Ala Asp Ala Met Ala Gly Val Val Asp Glu Asp Asp Leu Phe
130 135 140
Glu Met Pro Arg Leu Met Met Ser Met Ala Glu Gly Leu Met Met Ser
145 150 155 160
Pro Pro Val Leu Gly Pro Ala Ala Ala Ser Leu Glu Ala Glu Glu Glu
165 170 175
Gly Val Ser Leu Trp Asp His Ser
180
<210> 24
<211> 199
<212> PRT
<213> 水稻(Oryza sativa)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(199)
<400> 24
Met Asp Arg Asp Glu Ser Leu Gly Thr Gln Pro Leu Thr Gly Arg Arg
1 5 10 15
Val Arg Ala Asp Thr Arg His Pro Val Tyr Arg Gly Ile Arg Leu Arg
20 25 30
Ser Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Pro Gly Lys Ser Ser Arg
35 40 45
Ile Trp Leu Gly Thr Tyr Pro Thr Pro Glu Met Ala Ala Ala Ala Tyr
50 55 60
Asp Ala Ala Ala Leu Ala Leu Arg Gly Ala Asp Ala Ala Leu Asn Phe
65 70 75 80
Pro Gly Thr Ala Thr Ser Arg Pro Ala Pro Ala Ser Gly Ser Pro Asp
85 90 95
Asp Ile Arg Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Met Ile Gly Ser Gly
100 105 110
His Arg Gly Asn Gln Arg Ala Ala Asp Ala Ser Thr Ser Arg Ala Ala
115 120 125
Pro Ala Pro Glu Val Ala Val Ala Ala Gly Ala Gly Asp Gln Lys Arg
130 135 140
Val Val Asp Glu Asp Asp Val Phe Glu Met Pro Arg Leu Leu Val Ser
145 150 155 160
Met Ala Glu Gly Leu Met Met Asn Pro Pro Arg Leu Ser Pro Ser Thr
165 170 175
Asp Gly Val Gly Gly Val Ser Pro Glu Asp Asp Glu Asp Glu Asp Gly
180 185 190
Met Ser Leu Trp Asn His Ser
195
<210> 25
<211> 200
<212> PRT
<213> 水稻(Oryza sativa)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(200)
<400> 25
Met Asp Arg Asp Glu Ser Leu Gly Thr Gln Pro Leu Thr Gly Arg Arg
1 5 10 15
Val Arg Ala Asp Thr Arg His Pro Val Tyr Arg Gly Ile Arg Leu Arg
20 25 30
Ser Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Pro Gly Lys Ser Ser Arg
35 40 45
Ile Trp Leu Gly Thr Tyr Pro Thr Pro Glu Met Ala Ala Ala Ala Tyr
50 55 60
Asp Ala Ala Ala Leu Ala Leu Arg Gly Ala Asp Ala Ala Leu Asn Phe
65 70 75 80
Pro Gly Thr Ala Thr Ser Arg Pro Ala Pro Ala Ser Gly Ser Pro Asp
85 90 95
Asp Ile Arg Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Met Ile Gly Ser Gly
100 105 110
His Arg Gly Asn Gln Arg Ala Ala Asp Ala Ser Thr Ser Arg Ala Ala
115 120 125
Thr Ala Ala Pro Glu Ala Ala Val Ala Ala Gly Ala Gly Asp Gln Lys
130 135 140
Arg Val Val Asp Glu Asp Asp Val Phe Glu Met Pro Arg Leu Leu Val
145 150 155 160
Ser Met Ala Glu Gly Leu Met Met Ser Pro Pro Arg Leu Ser Pro Ser
165 170 175
Thr Asp Gly Val Gly Gly Val Ser Pro Glu Asp Asp Glu Asp Glu Asp
180 185 190
Gly Met Ser Leu Trp Asn His Ser
195 200
<210> 26
<211> 209
<212> PRT
<213> 玉米(Zea mays)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(209)
<400> 26
Met Glu Gln Arg Gln Gln Glu Arg Arg Thr Val Pro Thr Thr Thr Thr
1 5 10 15
Cys Gly Gly Arg Arg Ala Arg Ala Glu Thr Arg His Pro Val Tyr Arg
20 25 30
Gly Val Arg Leu Arg Ala Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Leu
35 40 45
Arg Lys Pro Ser Arg Ile Trp Leu Gly Thr Tyr Pro Thr Pro Glu Met
50 55 60
Ala Ala Ala Ala Tyr Asp Ala Ala Ala Leu Ala Leu Arg Gly Ala Gly
65 70 75 80
Ala Ala Leu Asn Phe Pro Asp Ala Ala Thr Ala Arg Pro Pro Pro Ala
85 90 95
Ser Ala Ser Ala Glu His Val Arg Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala
100 105 110
Ala Ala Ala Val Gly Leu Gly Asp Ser Arg His Phe His Gly Arg Ser
115 120 125
Asp Arg Arg Glu Val Arg Gly His Ser His Ser Ser Gly Ala Asp Glu
130 135 140
Tyr Glu Arg Cys His Gly Gly Gly Gly Ala Gly Ser Met Glu Gly Val
145 150 155 160
Val Asp Glu Asp Asp Leu Phe Glu Met Pro Arg Leu Met Leu Ser Met
165 170 175
Ala Glu Gly Leu Met Met Thr Pro Pro Val Leu Gly Pro Ala Pro Ala
180 185 190
Ala Ala Ala Leu Asp Gly Asp Glu Glu Gly Val Ser Leu Trp Asp His
195 200 205
Ser
<210> 27
<211> 210
<212> PRT
<213> 野高粱(Sorghum bicolor)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(210)
<400> 27
Met Glu Arg Glu Gln Glu Gln Glu Ala Gly Thr Ala Gln Gln Leu Leu
1 5 10 15
Gly Arg Arg Val Arg Ala Asp Thr Arg His Pro Val Tyr Arg Gly Ile
20 25 30
Arg Tyr Arg Gly Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Pro Arg Lys
35 40 45
Ser Asn Arg Ile Trp Leu Gly Thr Tyr Pro Ala Pro Glu Met Ala Ala
50 55 60
Ala Ala Tyr Asp Ala Ala Ala Leu Ala Leu Arg Gly Ala Glu Ala Ala
65 70 75 80
Leu Asn Phe Pro Gly Ala Ala Met Ser Arg Pro Ala Pro Ala Ser Cys
85 90 95
Ser Pro Asp Asp Ile Arg Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Val
100 105 110
Ile Gly Arg Ser His Ser Pro Gln Val Gly Gly Glu Ala Ala Ala Gly
115 120 125
Gly Gly Cys Gly Ala Ser Thr Trp Ser Ser Gly Ala Gly Ala Gln Gly
130 135 140
Gln Val Pro Glu His Arg Ala Gly Asp Arg Arg Ile Val Asp Glu Asp
145 150 155 160
Asp Val Phe Gln Val Pro Arg Leu Leu Ala Gly Met Ala Glu Gly Leu
165 170 175
Met Met Ser Pro Pro Arg Leu Val Gly Pro Ala Thr Asp Gly Ala Val
180 185 190
Leu Leu Glu Glu Asp Gly Ser Glu Asp Gly Val Val Ser Leu Trp Asp
195 200 205
His Ser
210
<210> 28
<211> 257
<212> PRT
<213> 野高粱(Sorghum bicolor)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(257)
<400> 28
Met Ala Val Ala Val Ala Val Val Ser Gly Thr Gly Ile Ala His Leu
1 5 10 15
His Phe Leu His Val Leu Leu Pro Glu Ile Pro Gly Phe Ser Gly Glu
20 25 30
Glu Gln Arg Gly Ser Val Pro Val Cys Pro Glu Cys Pro Gly Gln Met
35 40 45
Glu Arg Glu Gln Glu Gln Glu Ala Gly Thr Ala Gln Gln Leu Leu Gly
50 55 60
Arg Arg Val Arg Ala Asp Thr Arg His Pro Val Tyr Arg Gly Ile Arg
65 70 75 80
Tyr Arg Gly Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Pro Arg Lys Ser
85 90 95
Asn Arg Ile Trp Leu Gly Thr Tyr Pro Ala Pro Glu Met Ala Ala Ala
100 105 110
Ala Tyr Asp Ala Ala Ala Leu Ala Leu Arg Gly Ala Glu Ala Ala Leu
115 120 125
Asn Phe Pro Gly Ala Ala Met Ser Arg Pro Ala Pro Ala Ser Cys Ser
130 135 140
Pro Asp Asp Ile Arg Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Val Ile
145 150 155 160
Gly Arg Ser His Ser Pro Gln Val Gly Gly Glu Ala Ala Ala Gly Gly
165 170 175
Gly Cys Gly Ala Ser Thr Trp Ser Ser Gly Ala Gly Ala Gln Gly Gln
180 185 190
Val Pro Glu His Arg Ala Gly Asp Arg Arg Ile Val Asp Glu Asp Asp
195 200 205
Val Phe Gln Val Pro Arg Leu Leu Ala Gly Met Ala Glu Gly Leu Met
210 215 220
Met Ser Pro Pro Arg Leu Val Gly Pro Ala Thr Asp Gly Ala Val Leu
225 230 235 240
Leu Glu Glu Asp Gly Ser Glu Asp Gly Val Val Ser Leu Trp Asp His
245 250 255
Ser
<210> 29
<211> 204
<212> PRT
<213> 陆地棉(Gossypium hirsutum)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(204)
<400> 29
Met Val Gln Ser Ser Lys Ser His Glu Ile Ser Ser Ser Ser Ser Gln
1 5 10 15
Ser Glu Ala Gly Ser Thr Ser Leu Gly Gln Ser Gln Lys Arg Arg Ala
20 25 30
Gly Arg Lys Lys Phe Lys Glu Thr Arg His Pro Ile Phe Lys Gly Val
35 40 45
Arg Thr Arg Lys Gly Lys Trp Val Ser Glu Val Arg Glu Pro Asn Lys
50 55 60
Lys Ser Arg Ile Trp Leu Gly Thr Phe Ser Tyr Pro Gly Met Ala Ala
65 70 75 80
Lys Ala Tyr Asp Val Ala Ala Leu Ala Leu Arg Gly Asp Ala Ala Ser
85 90 95
Leu Asn Phe Pro Glu Ser Ala Arg Thr Leu Pro Arg Pro Lys Ser Leu
100 105 110
Ser Val Lys Asp Ile Gln Ile Ala Ala Met Glu Ala Ala Glu Thr Phe
115 120 125
Ile Glu Asp Lys Thr Ser Pro Asp Ser Val Ser Ser Ala Val Pro Ala
130 135 140
Phe Pro Glu Asn Met Val Phe Glu Val Glu Asp Glu Asp Glu Val Phe
145 150 155 160
Asn Met Pro Gly Ile Leu Glu Ser Met Ala Glu Gly Leu Met Ile Thr
165 170 175
Pro Pro Ser Met Gln Lys Gly Tyr Tyr Pro Asp Asp Asp Asp Asp Asp
180 185 190
Gly Asn Asp Tyr Val Glu Val Asn Leu Trp Gly Asp
195 200
<210> 30
<211> 181
<212> PRT
<213> 玉米(Zea mays)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(181)
<400> 30
Met Glu Arg Glu Glu Glu Gln Glu Ala Gly Thr Gly Thr Gly Thr Ala
1 5 10 15
Gln Ala Leu Leu Gly Arg Arg Val Arg Ala Asp Thr Arg His Pro Val
20 25 30
Tyr Arg Gly Ile Arg Tyr Arg Gly Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg
35 40 45
Glu Pro Arg Lys Ser Ser Arg Ile Trp Leu Gly Thr Tyr Pro Ala Pro
50 55 60
Glu Met Ala Ala Ala Ala Tyr Asp Thr Ala Ala Leu Ala Leu Arg Gly
65 70 75 80
Ala Glu Ala Ala Leu Asn Phe Pro Gly Ala Ala Leu Ser Arg Pro Val
85 90 95
Pro Ala Ser Arg Ser Pro Asp Asp Ile Arg Ala Ala Ala Ala Ser Ala
100 105 110
Ala Arg Ser Gln Ser Pro Gln Val Gly Gly Glu Gly Pro Ala Pro Glu
115 120 125
Arg Arg Ala Gly Asp Arg Ser Ile Val Asp Glu Asp Asp Val Phe Gln
130 135 140
Val Pro Arg Leu Leu Ala Gly Met Ala Glu Gly Leu Met Met Ser Pro
145 150 155 160
Pro Arg Leu Ala Gly Ala Ala Leu Leu Glu Glu Asp Val Val Val Ser
165 170 175
Leu Trp Asp His Ser
180
<210> 31
<211> 202
<212> PRT
<213> 雷蒙德氏棉(Gossypium raimondii)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(202)
<400> 31
Met Val Gln Ser Ser Lys Ser His Glu Ile Ser Ser Ser Ser Ser Gln
1 5 10 15
Ser Glu Ala Gly Ser Thr Ser Leu Gly Gln Ser Gln Lys Arg Lys Ala
20 25 30
Gly Arg Lys Lys Phe Lys Glu Thr Arg His Pro Ile Phe Lys Gly Val
35 40 45
Arg Thr Arg Lys Gly Lys Trp Val Ser Glu Val Arg Glu Pro Asn Lys
50 55 60
Lys Ser Arg Ile Trp Leu Gly Thr Phe Ser Cys Pro Gly Met Ala Ala
65 70 75 80
Lys Ala Tyr Asp Val Ala Ala Leu Ala Leu Arg Gly Asp Ala Ala Ser
85 90 95
Leu Asn Phe Pro Glu Ser Ala His Thr Leu Pro His Pro Lys Ser Leu
100 105 110
Ser Val Lys Asp Ile Gln Ile Ala Ala Met Glu Ala Ala Ala Thr Leu
115 120 125
Ile Asp Asp Lys Thr Leu Pro Asp Ser Val Ser Ser Ala Val Pro Ala
130 135 140
Phe Pro Glu Asn Met Val Phe Glu Asp Glu Asp Glu Val Phe Asn Met
145 150 155 160
Pro Gly Ile Leu Glu Ser Met Ala Glu Gly Leu Met Ile Thr Pro Pro
165 170 175
Ser Met Gln Lys Gly Tyr Tyr Pro Asp Asp Asp Asp Asp Asp Gly Asn
180 185 190
Asp Tyr Val Glu Val Asn Leu Trp Asp Asp
195 200
<210> 32
<211> 206
<212> PRT
<213> 木本棉(Gossypium arboreum)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(206)
<400> 32
Met Val Gln Ser Ser Lys Ser His Glu Ile Ser Ser Ser Ser Ser Gln
1 5 10 15
Ser Glu Ala Gly Ser Thr Ser Leu Gly Gln Ser Gln Lys Arg Arg Ala
20 25 30
Gly Arg Lys Lys Phe Lys Glu Thr Arg His Pro Ile Phe Lys Gly Val
35 40 45
Arg Thr Arg Lys Gly Lys Trp Val Ser Glu Val Arg Glu Pro Asn Lys
50 55 60
Lys Ser Arg Ile Trp Leu Gly Thr Phe Ser Cys Pro Gly Met Ala Ala
65 70 75 80
Lys Ala Tyr Asp Val Ala Ala Leu Ala Leu Arg Gly Asp Ala Ala Ser
85 90 95
Leu Asn Phe Pro Glu Ser Ala Arg Thr Leu Pro Arg Pro Lys Ser Leu
100 105 110
Ser Val Lys Asp Ile Gln Ile Ala Ala Met Glu Ala Ala Glu Thr Phe
115 120 125
Ile Asp Asp Lys Thr Ser Pro Asp Ser Val Ser Ser Ala Val Pro Ala
130 135 140
Phe Pro Glu Asn Met Val Phe Glu Asp Glu Asp Glu Val Phe Asn Met
145 150 155 160
Pro Gly Ile Leu Glu Ser Met Ala Glu Gly Leu Met Ile Thr Pro Pro
165 170 175
Ser Met Gln Lys Gly Tyr Tyr Pro Asp Asp Asp Asp Asp Asp Asp Asp
180 185 190
Asp Asp Gly Asn Asp Tyr Val Glu Val Asn Leu Trp Gly Asp
195 200 205
<210> 33
<211> 197
<212> PRT
<213> 马铃薯(Solanum tuberosum)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(197)
<400> 33
Met Asp Gln Leu Asn Lys Asn Ser Ser Leu Ile Leu Ala Ser Asn Asn
1 5 10 15
Pro Lys Lys Pro Ala Gly Arg Lys Lys Phe Arg Glu Thr Arg His Pro
20 25 30
Val Tyr Arg Gly Val Arg Met Arg Asn Ser Gly Lys Trp Val Cys Glu
35 40 45
Val Arg Glu Pro Asn Lys Lys Ser Arg Ile Trp Leu Gly Thr Phe Pro
50 55 60
Thr Ala Glu Met Ala Ala Arg Ala His Asp Val Ala Ala Leu Ala Leu
65 70 75 80
Arg Gly Arg Ser Ala Cys Leu Asn Phe Ala Asp Ser Ala Trp Arg Leu
85 90 95
Pro Ile Pro Ala Ser Ser Asn Ser Lys Asp Ile Gln Lys Ala Ala Ala
100 105 110
Glu Ala Ala Glu Ile Phe Arg Pro Ser Glu Glu Ser Glu Arg Val Ala
115 120 125
Ser Ser Glu Met His Glu Ser Ile Phe Phe Met Asn Asp Glu Gly Arg
130 135 140
Glu Ser Ser Phe Phe Met Asp Glu Glu Ala Leu Phe Asp Met Pro Gly
145 150 155 160
Leu Ile Ala Asn Met Ala Glu Gly Leu Met Leu Pro Pro Pro Gln Cys
165 170 175
Ala Glu Val Glu Asp His Tyr Tyr Met Glu Ala Asp Asp Ala Tyr Met
180 185 190
Pro Leu Trp Asn Tyr
195
<210> 34
<211> 171
<212> PRT
<213> 鹰嘴豆(Cicer arietinum)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(171)
<400> 34
Met Ser Ser Ser Ser Ser Ser Lys Arg His Pro Thr Tyr His Gly Ile
1 5 10 15
Arg Ser Arg Gly Gly Lys Trp Val Thr Glu Ile Arg Glu Pro Arg Lys
20 25 30
Thr Asn Arg Ile Trp Leu Gly Thr Phe Ser Thr Pro Glu Met Ala Ala
35 40 45
Ala Ala Tyr Asp Val Ala Thr Leu Ala Leu Lys Gly Gly Glu Ala Ile
50 55 60
Leu Asn Phe Pro Asp Leu Ala Arg Arg Tyr Pro Val Pro Ala Ser Asn
65 70 75 80
Ser Ala Glu Asp Ile Arg Ser Ala Ala Thr Ser Ala Ala Glu Leu Met
85 90 95
Thr Gly Gly Ser Thr Phe Asn Glu Pro Tyr Asn Asn Ala Phe Tyr Asp
100 105 110
Ala Pro His Ser Tyr Asn Tyr Glu Ser Glu Phe Ile Asp Glu Glu Ala
115 120 125
Ile Phe Ser Met Pro Arg Leu Leu Val Asp Met Ala Glu Gly Met Leu
130 135 140
Leu Ser Pro Pro Arg Met Asn Leu Pro Pro Ser Asp Tyr Ser Thr Glu
145 150 155 160
Tyr Gln Thr Phe Gly Glu Ser Leu Trp Asn Phe
165 170
<210> 35
<211> 220
<212> PRT
<213> 潘那利番茄(Solanum pennellii)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(220)
<400> 35
Met Asn Ile Phe Glu Thr Tyr Asn Ser Asp Ser Leu Ile Ser Thr Glu
1 5 10 15
Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Ser Phe Ser Glu Glu Glu Ile
20 25 30
Ile Leu Ala Ser Asn Asn Pro Lys Arg Pro Ala Gly Arg Lys Lys Phe
35 40 45
Arg Glu Thr Arg His Pro Ile Tyr Arg Gly Ile Arg Lys Arg Asn Ser
50 55 60
Gly Lys Trp Val Cys Glu Val Arg Glu Pro Asn Lys Lys Thr Arg Ile
65 70 75 80
Trp Leu Gly Thr Phe Pro Thr Ala Glu Met Ala Ala Arg Ala His Asp
85 90 95
Val Ala Ala Leu Ala Leu Arg Gly Arg Ser Ala Cys Leu Asn Phe Ser
100 105 110
Asp Ser Ala Trp Arg Leu Pro Ile Pro Ala Ser Ser Asn Ser Lys Asp
115 120 125
Ile Gln Lys Ala Ala Ala Glu Ala Ala Glu Ile Phe Arg Pro Leu Lys
130 135 140
Glu Ser Glu Glu Val Ser Arg Glu Ser Asp Asn Ser Thr Ser Pro Glu
145 150 155 160
Thr Ser Glu Asn Val Gln Glu Ser Ser Asp Phe Val Asp Glu Glu Ala
165 170 175
Leu Phe Phe Met Pro Gly Leu Leu Ala Asn Met Ala Glu Gly Leu Met
180 185 190
Leu Pro Pro Pro Gln Cys Ala Glu Met Ala Asp His Tyr Val Glu Thr
195 200 205
Asp Ala Tyr Met Leu Thr Leu Trp Asn Tyr Ser Ile
210 215 220
<210> 36
<211> 204
<212> PRT
<213> 地三叶(Trifolium subterraneum)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(204)
<400> 36
Met Ser Glu Asn Thr Thr Thr Thr Tyr Ala Ser Ser Ser Ser Ser Gly
1 5 10 15
Lys Val Leu Ser Gly Arg His Pro Val Tyr Arg Gly Val Arg Arg Arg
20 25 30
Asn Asn Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Pro Lys Lys Pro Asn
35 40 45
Arg Ile Trp Leu Gly Thr Tyr Pro Thr Pro Glu Met Ala Ala Ile Ala
50 55 60
Tyr Asp Val Ala Ala Leu Ala Leu Lys Gly Lys Asn Ala Ile Leu Asn
65 70 75 80
Phe Pro Asn Ser Ser Ser Ser Leu Pro Val Pro Glu Ser Ser Ser Ala
85 90 95
Arg Asp Ile Gln Thr Ala Ala Ala Ser Ala Ala Ala Ala Val Gly Ala
100 105 110
Ala Glu Asp Ala Leu Ala Ser Asn Ile Asn Val Gly Asn Asn Asn His
115 120 125
Ala Ala Met Ser Pro His Glu Phe Leu Ala Ser Ala Asn Glu Asn Asn
130 135 140
Asn Val Asn His Glu Phe Val Asp Glu Asp Leu Ile Phe Asp Met Pro
145 150 155 160
Asn Val Leu Ala Asn Met Ala Glu Gly Met Leu Leu Ser Pro Pro Arg
165 170 175
Phe Asp Phe Ala Ser Asn Glu Tyr Asp Ala Gln Glu Asn Asp Met Cys
180 185 190
Asp Asp Ser Asn Leu Trp Ser Tyr Pro Tyr Phe Pro
195 200
<210> 37
<211> 199
<212> PRT
<213> 木薯(Manihot esculenta)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(199)
<400> 37
Met His Tyr Ser Gln Ser Ser Asn Ser Gly Asn Ser Ala Ala Ala Asn
1 5 10 15
Gln Leu Arg Ala Thr Ala Pro Ser Ala Val Ser Gly Arg His Pro Val
20 25 30
Tyr Arg Gly Val Arg Arg Arg Ser Ser Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile
35 40 45
Arg Glu Pro Arg Lys Pro Asn Arg Ile Trp Leu Gly Thr Phe Pro Thr
50 55 60
Pro Glu Met Ala Ala Val Ala Tyr Asp Val Ala Ala Leu Ala Leu Lys
65 70 75 80
Gly Arg Asp Ala Glu Leu Asn Phe Pro Asn Ser Ala Ser Ser Leu Pro
85 90 95
Val Pro Val Ser Thr Ser Pro Arg Asp Ile Gln Ala Ala Ala Ala Ser
100 105 110
Ala Ala Ala Ala Val Gly Ala Ala Arg Asp Ala Leu Gly Ile Gly Ser
115 120 125
Tyr Arg Gln Glu Ser Thr Asn Gln Thr Val Val Gln Glu Arg Pro Met
130 135 140
Phe Asn Glu Phe Val Asp Glu Asp Leu Ile Phe Asp Met Pro Asn Val
145 150 155 160
Leu Met Asn Met Ala Glu Gly Met Leu Leu Ser Pro Pro Arg Leu Asp
165 170 175
Ile Ala Gly Asp Glu Tyr Ala Asp Asp Pro Tyr Ser Gly Leu Met Asp
180 185 190
Gln Asn Leu Trp Arg Phe Pro
195
<210> 38
<211> 179
<212> PRT
<213> 油棕(Elaeis guineensis)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(179)
<400> 38
Met Ala Ala Asn Pro Pro Ala Thr Gly Lys His Gln Ser Tyr Arg Gly
1 5 10 15
Val Arg Ser Arg Tyr Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Pro Gly
20 25 30
Lys Asp Ser Arg Ile Trp Leu Gly Thr Tyr Pro Thr Pro Glu Met Ala
35 40 45
Ala Met Ala Tyr Asp Val Ala Ala Leu Ala Leu Arg Gly Ser Gly Ala
50 55 60
Val Leu Asn Phe Pro Asp Ala Val Gly Arg His Pro Ala Leu Ala Ser
65 70 75 80
Thr Ser Arg Thr Asp Ile Arg Ala Ala Ala Ser Ala Ala Ala Ala Ala
85 90 95
Met Thr Val Pro Ala Thr Gln Arg Pro Gly Thr Ser Ser Asp Ala Thr
100 105 110
Asp Arg Gln Cys Trp Phe Asp Gly Thr Ser Ser Gly Gly Asp Gly Ala
115 120 125
Lys Phe Leu Asp Glu Asp Glu Ile Phe Asp Met Pro Gln Leu Leu Arg
130 135 140
Ser Met Ala Glu Gly Met Leu Met Thr Pro Pro Ser Trp Leu Ser Pro
145 150 155 160
Ser Gln Ser Glu Asp Thr Pro Glu Thr Ser Gly Glu Glu Ser Leu Trp
165 170 175
Ser Tyr Pro
<210> 39
<211> 187
<212> PRT
<213> 欧洲油菜(Brassica napus)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(187)
<400> 39
Met Pro Gly Thr Ser Lys Glu Asn Gly Gly Arg His Pro Leu Tyr Lys
1 5 10 15
Gly Val Arg Gln Arg Lys Asn Ser Asp Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg
20 25 30
Glu Pro Arg Thr Pro Asn Arg Ile Trp Leu Gly Thr Phe Ser Thr Pro
35 40 45
Glu Met Ala Ala Ile Ala Tyr Asp Val Ala Ala Leu Ala Leu Lys Gly
50 55 60
Thr Gln Thr Glu Leu Asn Phe Pro Asn Ser Ala Ser Ser Phe Pro Val
65 70 75 80
Pro Ala Ser Met Ser Pro Gly Asp Ile Gln Ala Ala Ala Ala Ser Ala
85 90 95
Ala Ala Ala Phe Gly Ala Ala Arg Asp Ala Ile Val Met Thr Asn Asn
100 105 110
Asn Ser Ala Thr Ser Ser Val Glu Arg Ser Asn Val Met Met Met Asn
115 120 125
Gly Ser Tyr Glu Asp Thr Tyr Gly Phe Met Asp Glu Asp Phe Ile Phe
130 135 140
Asp Met Pro Asn Met Leu Met Asn Met Ala Glu Gly Met Leu Leu Ser
145 150 155 160
Pro Pro Arg Gln Pro Thr Phe Asp Ala Ala Ser Asp Gly Tyr Gly Tyr
165 170 175
Thr Gly Ala Asp Asp Tyr Leu Trp Ser Phe Pro
180 185
<210> 40
<211> 186
<212> PRT
<213> 蓖麻(Ricinus communis)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(186)
<400> 40
Met His Cys Ser Gln Pro Ser Asn Thr Ser Thr Asn Ser Ser Val Ser
1 5 10 15
Gly Arg His Pro Val Tyr Arg Gly Val Arg Arg Arg Ser Ser Gly Lys
20 25 30
Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Pro Lys Lys Pro Asn Arg Ile Trp Leu
35 40 45
Gly Thr Phe Pro Thr Pro Glu Met Ala Ala Val Ala Tyr Asp Val Ala
50 55 60
Ala Leu Ala Leu Lys Gly Arg Asp Ala Glu Leu Asn Phe Pro Asn Ser
65 70 75 80
Ala Ala Ser Leu Pro Val Pro Ala Ser Ala Ser Pro Arg Asp Ile Gln
85 90 95
Ala Ala Ala Ala Ser Ala Ala Ala Ala Ile Gly Ala Ala Arg Asp Ala
100 105 110
Leu Gly Ile Gly Ser Ser Ser His Gln Thr Val Ile Met Gln Glu Ser
115 120 125
Asn Tyr Arg Pro Met Val His Glu Phe Val Asp Glu Asp Leu Ile Phe
130 135 140
Asp Met Pro Asn Leu Leu Val Asn Met Ala Glu Gly Met Leu Leu Ser
145 150 155 160
Pro Pro Arg Leu Asp Ile Ala Pro Asp Ala Ala Phe Asp Asp Glu Asn
165 170 175
Pro Gly Asp Gln Asn Leu Trp Lys Phe Thr
180 185
<210> 41
<211> 190
<212> PRT
<213> 萨氏山嵛菜(Eutrema salsugineum)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(190)
<400> 41
Met Pro Gly Thr Ser Lys Asp Asn Gly Gly Arg His Pro Leu Tyr Arg
1 5 10 15
Gly Val Arg Gln Arg Arg Asn Ser Asn Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg
20 25 30
Glu Pro Arg Lys Pro Asn Arg Ile Trp Leu Gly Thr Phe Ser Thr Pro
35 40 45
Glu Met Ala Ala Ile Ala Tyr Asp Val Ala Ala Leu Ala Leu Lys Gly
50 55 60
Thr Gln Thr Glu Leu Asn Phe Pro Asn Ser Ala Ser Ser Leu Pro Val
65 70 75 80
Pro Ala Ser Met Ser Pro Gly Asp Ile Gln Ala Ala Ala Ala Ser Ala
85 90 95
Ala Ala Ala Phe Gly Ala Ala Arg Asp Ala Ile Val Leu Ala Asn Asn
100 105 110
Asn Ser Glu Thr Ser Gly Ala Ser His Ser Asn Met Met Met Met Asn
115 120 125
Gly Ser Tyr Asn Glu Asn Thr Asn Met Asn Gly Phe Ile Asp Glu Asp
130 135 140
Leu Ile Phe Asp Met Pro Asn Val Leu Met Asn Met Ala Glu Gly Met
145 150 155 160
Leu Leu Ser Pro Pro Arg Ala Pro Ala Phe Asp Ala Ala Ser Asp Ala
165 170 175
Asp Cys Tyr Thr Gly Ala Asp Asp Tyr Leu Trp Asn Phe Pro
180 185 190
<210> 42
<211> 193
<212> PRT
<213> 绿豆(Vigna radiata)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(193)
<400> 42
Met Arg Ser Thr Asn Ser Thr Thr Cys Ala Ala Ser Ser Thr Gly Ala
1 5 10 15
Ser Asn Gly Asn Thr Gly Arg His Pro Val Tyr Arg Gly Val Arg Arg
20 25 30
Arg Ser Ser Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Pro Arg Lys Pro
35 40 45
Asn Arg Ile Trp Leu Gly Thr Phe Ala Thr Pro Glu Met Ala Ala Ile
50 55 60
Ala Tyr Asp Val Ala Ala Leu Ala Leu Lys Gly Lys Asp Ala Glu Leu
65 70 75 80
Asn Phe Pro Asp Ser Ala Ser Ser Leu Pro Val Pro Ala Ser Ser Ala
85 90 95
Ala Arg Asp Ile Gln Met Ala Ala Ala Ser Ala Ala Ala Ala Val Gly
100 105 110
Ala Ala Asn Asp Ala Leu Ser Glu Gly Ser Arg Gly Gly Asn Val Ser
115 120 125
Val Ser Met Ala Gln Glu Glu Phe Ser Gly Gly Ser Leu Asn His Phe
130 135 140
Val Asp Glu Asp Leu Ile Phe Asp Met Pro Asn Ile Leu Val Asn Met
145 150 155 160
Ala Glu Gly Met Leu Leu Ser Pro Pro Arg Phe Asp Asn Phe Ser Ala
165 170 175
Thr Asp Tyr Asp Tyr Met Asp Glu Asn Pro Asn Leu Trp Gly Phe Pro
180 185 190
Tyr
<210> 43
<211> 184
<212> PRT
<213> 甘蓝(Brassica oleracea)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(184)
<400> 43
Met Asn Ile Pro Gly Thr Ser Lys Glu Asn Ser Gly Arg His Pro Leu
1 5 10 15
Tyr Lys Gly Val Arg Gln Arg Lys Asn Ser Asp Lys Trp Val Ser Glu
20 25 30
Ile Arg Glu Pro Arg Lys Pro Asn Arg Ile Trp Leu Gly Thr Phe Ser
35 40 45
Thr Pro Glu Met Ala Ala Ile Ala Tyr Asp Val Ala Ala Leu Ala Leu
50 55 60
Lys Gly Thr Gln Thr Gly Leu Asn Phe Pro Asn Ser Ala Ser Ser Leu
65 70 75 80
Pro Val Pro Ala Ser Met Ser Pro Gly Asp Ile Gln Ala Ala Ala Ala
85 90 95
Ser Ala Ala Ala Ala Phe Gly Ala Ala Arg Asp Ala Ile Val Val Ala
100 105 110
Asn Asn Ser Ser Val Glu Arg Ser Asn Val Met Met Asn Gly Ser Tyr
115 120 125
Glu Asn Thr Asn Gly Phe Met Asp Glu Asp Leu Ile Phe Asp Met Pro
130 135 140
Asn Val Leu Met Asn Met Ala Glu Gly Met Leu Leu Ser Pro Pro Cys
145 150 155 160
Gln Phe Thr Phe Asp Ala Ala Ser Glu Ala Asp Asp Tyr Ala Gly Glu
165 170 175
Asp Asp Tyr Leu Trp Asn Phe Thr
180
<210> 44
<211> 237
<212> PRT
<213> 酿酒葡萄(Vitis vinifera)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(237)
<400> 44
Met Glu Glu Pro Arg Ala Asn Val Arg Pro Ser Asp Gln Pro Pro Pro
1 5 10 15
Thr Pro Lys Ile Glu Val Pro Asp Ser Ser Leu Ser Ile Val Pro Pro
20 25 30
Gln Asp Leu Ser Ser Pro Pro Ser His Ser Ser Ser Thr Pro Thr Ser
35 40 45
Ala His Pro Ser Pro Lys Asn Leu Pro Ser Pro Thr Pro Phe Ser Gly
50 55 60
Gln Thr Ala Gly Arg His Pro Phe Tyr Arg Gly Ile Arg Cys Arg Gly
65 70 75 80
Asn Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Pro Arg Lys Thr Thr Arg Ile
85 90 95
Trp Leu Gly Thr Tyr Pro Thr Pro Glu Met Ala Ala Thr Ala Tyr Asp
100 105 110
Val Ala Ala Leu Ala Leu Lys Gly Thr Asp Ala Thr Leu Asn Phe Pro
115 120 125
Asn Ser Val Leu Ser Tyr Pro Ile Pro Lys Ser Thr Ser Ala Ser Asp
130 135 140
Ile Arg Ala Ala Ala Ala Arg Ala Ala Glu Ala Gln Gln Ala Lys Pro
145 150 155 160
Glu Ser Ser Glu Ser Pro Asn Thr Thr Gln Pro Lys Lys Glu Glu Thr
165 170 175
Thr Glu Ser Ser Ser Leu Ala Ala Gly Glu Asp Gln Phe Ile Asp Glu
180 185 190
Glu Glu Leu Leu Asn Met Pro Asn Leu Leu Val Asp Met Ala Glu Gly
195 200 205
Met Leu Val Ser Pro Pro Arg Leu Lys Ser Gln Pro Ser Asp Asp Ser
210 215 220
Pro Glu Asn Ser Asp Ser Asp Ser Leu Trp Ser Tyr Thr
225 230 235
<210> 45
<211> 220
<212> PRT
<213> 苹果桉(Eucalyptus gunnii)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(220)
<400> 45
Met Asn Pro Phe Ser Ser His Ser His Pro Asn Ser Cys Arg Phe Asn
1 5 10 15
Phe Ala Glu Pro Pro Ser Asp Ser Arg Ser Ala Thr Ala Leu Gly Asn
20 25 30
Phe Ser His Lys Glu Val Leu Leu Ala Ser His His Pro Lys Lys Arg
35 40 45
Ala Gly Arg Lys Lys Phe Arg Glu Thr Arg His Pro Val Tyr Arg Gly
50 55 60
Val Arg Leu Arg Asp Ser Gly Lys Trp Val Cys Glu Val Arg Glu Pro
65 70 75 80
Ile Lys Lys Ser Arg Ile Trp Leu Gly Thr Phe Pro Thr Val Glu Met
85 90 95
Ala Ala Arg Ala His Asp Val Ala Ala Leu Ala Leu Arg Gly Arg Ser
100 105 110
Ala Cys Leu Asn Phe Ala Asp Ser Ala Trp Arg Leu Pro Val Pro Ala
115 120 125
Ser Ala Asp Thr Lys Glu Ile Gln Lys Ala Ala Ala Arg Ala Ala Glu
130 135 140
Ala Phe Gln Ser Val Glu Ser Glu Asp Val Met Ser Gly Asp Glu Lys
145 150 155 160
Lys Leu Arg Ser Glu Glu Gly Val Phe Tyr Asp Glu Glu Asp Ile Phe
165 170 175
Gly Met Pro Gly Leu Leu Ala Asp Met Ala Glu Gly Met Leu Leu Ser
180 185 190
Pro Pro Lys Trp Gly Gly Asp Ile Tyr Gly Gly Glu Asp Glu Gly Asn
195 200 205
Leu Gly Ala His Thr Ser Leu Trp Ser Tyr Ser Ile
210 215 220
<210> 46
<211> 187
<212> PRT
<213> 芜菁(Brassica rapa)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(187)
<400> 46
Met Pro Gly Thr Ser Lys Glu Asn Gly Gly Arg His Pro Leu Tyr Lys
1 5 10 15
Gly Val Arg Gln Arg Lys Asn Ser Asp Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg
20 25 30
Glu Pro Arg Thr Pro Asn Arg Ile Trp Leu Gly Thr Phe Ser Thr Pro
35 40 45
Glu Met Ala Ala Ile Ala Tyr Asp Val Ala Ala Leu Ala Leu Lys Gly
50 55 60
Thr Gln Thr Glu Leu Asn Phe Pro Asn Ser Ala Ser Ser Phe Pro Val
65 70 75 80
Pro Ala Thr Met Ser Pro Arg Asp Ile Gln Ala Ala Ala Ala Ser Ala
85 90 95
Ala Ala Ala Phe Gly Ala Ala Arg Asp Ala Ile Val Met Thr Asn Asn
100 105 110
Asn Ser Ala Thr Ser Ser Val Glu Arg Ser Asn Val Met Met Met Asn
115 120 125
Gly Ser Tyr Glu Asp Thr Tyr Gly Phe Met Asp Glu Asp Phe Ile Phe
130 135 140
Asp Met Pro Asn Met Leu Met Asn Met Ala Glu Gly Met Leu Leu Ser
145 150 155 160
Pro Pro Arg Gln Pro Thr Phe Asp Ala Ala Ser Asp Gly Tyr Gly Tyr
165 170 175
Thr Gly Ala Asp Asp Tyr Leu Trp Ser Phe Pro
180 185
<210> 47
<211> 293
<212> PRT
<213> 蓖麻(Ricinus communis)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(293)
<400> 47
Met Ala Ser Glu Val Glu Ser Leu Lys Val Ser Lys Leu Lys Arg Tyr
1 5 10 15
Pro Arg Tyr Arg Ile Leu Gly Pro Phe Met Ser Leu Ser Lys Ser Asn
20 25 30
Pro Asp Val Gln Gln Arg Ala Val Leu His Pro Lys Ser Leu Lys Asp
35 40 45
Arg Gln Cys Ser Ser Ser Thr Thr Gly Leu His Phe His Asp Leu Leu
50 55 60
Leu Leu Ile Ser Asp Ser Ser Val Phe Asp Leu His Ile Asn Gly Phe
65 70 75 80
Ser His Leu Ser Ala Ser Leu Gln Thr His His Leu Pro Ala Ile Ser
85 90 95
Leu Asn Ser Leu Ser Tyr His Tyr Gln Asn Thr Met His Cys Ser Gln
100 105 110
Pro Ser Asn Thr Ser Thr Asn Ser Ser Val Ser Gly Arg His Pro Val
115 120 125
Tyr Arg Gly Val Arg Arg Arg Ser Ser Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile
130 135 140
Arg Glu Pro Lys Lys Pro Asn Arg Ile Trp Leu Gly Thr Phe Pro Thr
145 150 155 160
Pro Glu Met Ala Ala Val Ala Tyr Asp Val Ala Ala Leu Ala Leu Lys
165 170 175
Gly Arg Asp Ala Glu Leu Asn Phe Pro Asn Ser Ala Ala Ser Leu Pro
180 185 190
Val Pro Ala Ser Ala Ser Pro Arg Asp Ile Gln Ala Ala Ala Ala Ser
195 200 205
Ala Ala Ala Ala Ile Gly Ala Ala Arg Asp Ala Leu Gly Ile Gly Ser
210 215 220
Ser Ser His Gln Thr Val Ile Met Gln Glu Ser Asn Tyr Arg Pro Met
225 230 235 240
Val His Glu Phe Val Asp Glu Asp Leu Ile Phe Asp Met Pro Asn Leu
245 250 255
Leu Val Asn Met Ala Glu Gly Met Leu Leu Ser Pro Pro Arg Leu Asp
260 265 270
Ile Ala Pro Asp Ala Ala Phe Asp Asp Glu Asn Pro Gly Asp Gln Asn
275 280 285
Leu Trp Lys Phe Thr
290
<210> 48
<211> 224
<212> PRT
<213> 巨桉(Eucalyptus grandis)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(224)
<400> 48
Met Asn Ser Ser Ser Tyr Ile Ser His Pro Asn Ser Phe Ser Phe Asp
1 5 10 15
Phe Ala Glu Pro Pro Phe Ser Leu Leu Leu Ser His Asp Arg Ser Ala
20 25 30
Ala Pro Gly Asn Phe Ser Gly Glu Glu Val Arg Leu Ala Ser Asp His
35 40 45
Pro Lys Lys Pro Ala Gly Arg Lys Lys Phe Arg Glu Thr Arg His Pro
50 55 60
Val Tyr Arg Gly Val Arg Leu Arg Asp Ser Gly Lys Trp Val Cys Glu
65 70 75 80
Val Arg Glu Pro Arg Lys Lys Ser Arg Ile Trp Leu Gly Thr Phe Pro
85 90 95
Thr Ala Asp Met Ala Ala Arg Ala His Asp Val Ala Ala Leu Ala Leu
100 105 110
Arg Gly Gln Ser Ala Cys Leu Asn Phe Ala Asp Ser Ala Trp Arg Leu
115 120 125
Pro Val Pro Ala Ser Pro Asn Thr Lys Asp Ile Gln Lys Ala Ala Ala
130 135 140
Lys Ala Ala Glu Ala Phe Gln Leu Val Glu Ser Glu Asp Val Met Ser
145 150 155 160
Gly Asn Glu Lys Lys Leu His Ser Glu Glu Gly Val Leu Tyr Asp Glu
165 170 175
Glu Asp Ile Phe Gly Met Pro Gly Leu Leu Ala Asn Met Ala Glu Gly
180 185 190
Met Leu Leu Ser Pro Pro Glu Cys Ser Gly Asp Ile Tyr Ala Gly Glu
195 200 205
Asp Asn Gly Asn Leu Asp Ala Tyr Ala Ser Leu Trp Ser Tyr Ser Met
210 215 220
<210> 49
<211> 199
<212> PRT
<213> 苹果(Malus domestica)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(199)
<400> 49
Met His Ala Thr Asn Thr Thr Thr Thr Ser Ser Ser Ser Thr Thr Ser
1 5 10 15
Ile Val Pro Gly Arg His Pro Thr Tyr Arg Gly Val Arg Arg Arg Ser
20 25 30
Ser Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Pro Lys Lys Pro Asn Arg
35 40 45
Ile Trp Leu Gly Thr Phe Pro Thr Pro Glu Met Ala Ala Val Ala Tyr
50 55 60
Asp Val Ala Ala Ile Ala Leu Lys Gly Gln Asp Ala Glu Leu Asn Phe
65 70 75 80
Pro Asn Ser Ala Ser Ser Leu Pro Val Pro Ala Ser Thr Ser Ser Arg
85 90 95
Asp Ile Gln Ala Ala Ala Ser Ser Ala Ala Ala Ala Met Gly Val Ala
100 105 110
Ile Asp Arg Cys Ser Tyr Ser Arg Asp Glu Val Gln Gly Gly His His
115 120 125
Asn Val His Gln Ala His Lys Thr Val Asp Glu Asp Asp Arg Phe Val
130 135 140
Leu Asn His Glu Phe Val Asp Glu Asp Leu Ile Phe Asn Met Pro Asn
145 150 155 160
Val Leu Val Asn Met Ala Glu Gly Met Leu Leu Ser Pro Pro Arg Leu
165 170 175
Asp Ile Ala Gly Asp Asp Ala Ile Asp Ala Asp Gln Glu Gln Gly Asp
180 185 190
Gln Asn Leu Trp Lys Xaa Tyr
195
<210> 50
<211> 211
<212> PRT
<213> 黄化螺旋狸藻(Genlisea aurea)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(211)
<400> 50
Met Glu Pro His His Val Ala Lys Asp Lys Thr Asp Ser Pro Arg Val
1 5 10 15
Glu Ile Pro Asp Ala Asn Arg Leu Ser Pro Pro Ala Val Ala Ser Pro
20 25 30
Pro Ser Gly Arg His Pro Leu Tyr Arg Gly Ile Arg Thr Arg Ser Gly
35 40 45
Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Pro Arg Lys Thr Thr Arg Ile Trp
50 55 60
Leu Gly Thr Tyr Thr Thr Ala Glu Met Ala Ala Ala Ala Tyr Asp Val
65 70 75 80
Ala Thr Leu Ala Leu Lys Gly Pro Asp Ala Pro Leu Asn Phe Pro His
85 90 95
Leu Ala Ser Ser Tyr Pro Val Pro Ala Thr Leu Ser Ala Gly Asp Ile
100 105 110
Arg Ala Ala Ala Ala Ala Ile Ala Thr Ser Gln Gln Pro Lys Asn Pro
115 120 125
Ser Asp Gly Glu Thr Ser Asp Pro Ala Ala Ala Val Pro Leu Thr Asn
130 135 140
Pro Ala Arg Ser Pro Ala Ile Ala Glu Glu Glu Ile Phe Met Asp Glu
145 150 155 160
Glu Asp Ile Phe Glu Met Pro Lys Leu Met Ala Glu Met Ala Glu Gly
165 170 175
Met Leu Leu Ser Pro Pro Arg Ile Asn Leu Pro Ala Asp Glu Asp Glu
180 185 190
Ser Thr Asp Ala Phe Ala Gly Asn Thr Ile Leu Trp Thr Tyr Asn Ser
195 200 205
Asp Cys Lys
210
<210> 51
<211> 178
<212> PRT
<213> 圣女果(Solanum lycopersicum)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(178)
<400> 51
Met Ala Ala Tyr His Phe Asn Asp Asn Ser Pro Ser Leu Glu Asn Leu
1 5 10 15
Ser Pro Thr Gly Gly Gly Ser Ser Thr Arg His Pro Asn Phe Arg Gly
20 25 30
Ile Arg Gln Arg Asn Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Pro Arg
35 40 45
Lys Thr Thr Arg Ile Trp Leu Gly Thr Phe Pro Ile Pro Glu Met Ala
50 55 60
Ala Val Ala Tyr Asp Val Ala Ala Leu Ala Leu Lys Gly Pro Asp Ala
65 70 75 80
Gln Leu Asn Phe Pro Asp Arg Ala Tyr Ser Tyr Pro Val Pro Ala Ser
85 90 95
Leu Ser Ala Ala Asp Ile Arg Thr Ala Ala Ala Asn Ala Ala Ala Ala
100 105 110
Arg Ala Pro Pro Leu Ser Glu Ile Asn Thr Ala Ala Gly Gly Gly Gln
115 120 125
Gly Gln Glu Phe Val Asp Glu Glu Glu Ile Phe Gly Met Pro Lys Leu
130 135 140
Leu Asp Asp Met Ala Glu Ala Met Leu Val Ser Pro Pro Arg Met His
145 150 155 160
Gln Tyr Asp Glu Ser Pro Glu Asn Ser Asp Ala Asp Ser Leu Trp Gly
165 170 175
Tyr Pro
<210> 52
<211> 185
<212> PRT
<213> 亚麻荠(Camelina sativa)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(185)
<400> 52
Met Gln Gly Thr Ser Lys Asp Asn Gly Gly Arg His Pro Met Tyr Arg
1 5 10 15
Gly Val Arg Gln Arg Arg Asn Ser Asp Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg
20 25 30
Glu Pro Arg Lys Pro Asn Arg Ile Trp Leu Gly Thr Phe Ser Thr Pro
35 40 45
Glu Met Ala Ala Ile Ala Tyr Asp Val Ala Ala Leu Ala Leu Lys Gly
50 55 60
Thr Gln Ala Glu Leu Asn Phe Pro Asn Ser Val Ser Ser Leu Pro Val
65 70 75 80
Pro Ala Ser Met Ser Pro Gly Asp Ile Gln Ala Ala Ala Ala Ser Ala
85 90 95
Ala Ala Ala Phe Gly Ala Ala Arg Asp Ala Ile Val Met Ala Asn Asn
100 105 110
Asn Ser Glu Thr Ser Gly Val Val Ser Met Asn Asp Ser Tyr Glu Asn
115 120 125
Thr Asn Met Asn Glu Phe Met Asp Asp Asp Leu Val Phe Asp Met Pro
130 135 140
Asn Val Leu Met Asn Met Ala Glu Gly Met Leu Leu Ser Pro Pro Arg
145 150 155 160
Pro Ser Ala Phe Asp Ala Ala Tyr Tyr Asp Ala Asp Gly Phe Thr Gly
165 170 175
Gly Asp Asp Tyr Leu Trp Asn Phe Pro
180 185
<210> 53
<211> 188
<212> PRT
<213> 大豆(Glycine max)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(188)
<400> 53
Met Arg Ser Ser Asn Gly Ala Ser Ser Ser Arg Ala Ser Asn Ala Asn
1 5 10 15
Thr Gly Arg His Pro Val Tyr Arg Gly Val Arg Arg Arg Ser Ser Gly
20 25 30
Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Pro Lys Lys Pro Asn Arg Ile Trp
35 40 45
Leu Gly Thr Phe Ala Thr Pro Glu Met Ala Ala Ile Ala Tyr Asp Val
50 55 60
Ala Ala Leu Ala Leu Lys Gly Lys Asp Ala Glu Leu Asn Phe Pro Asn
65 70 75 80
Ser Ala Ser Ser Leu Pro Val Pro Thr Ser Ser Ala Ala Arg Asp Ile
85 90 95
Gln Met Ala Ala Ala Ser Ala Ala Ala Ala Val Gly Ala Ala Asn Asp
100 105 110
Ala Leu Glu Gly Ser Arg Gly Gly Asn Ala Ser Val Ser Leu Thr Glu
115 120 125
Glu Phe Ser Gly Gly Asn Leu Asn His Phe Val Asp Glu Asp Leu Ile
130 135 140
Phe Asp Met Pro Asn Ile Leu Val Asn Met Ala Glu Gly Met Leu Leu
145 150 155 160
Ser Pro Pro Arg Phe Asp Asn Phe Ala Ala Thr Asp Tyr Glu Tyr Met
165 170 175
Asp Glu Asp Pro Asn Leu Trp Gly Phe Pro Asn Tyr
180 185
<210> 54
<211> 1404
<212> DNA
<213> 细长聚球藻(Synechococcus elongatus)
<220>
<221> ictB
<222> (1)..(1404)
<400> 54
atgacagtgt ggcagacact cacattcgct cattaccagc ctcagcagtg gggccattct 60
tctttcctcc ataggctctt cggctctctc agggcttgga gggcttcttc tcagctcctc 120
gtgtggtctg aggctctcgg cggcttcctc ctcgctgtgg tgtacggctc tgctcctttc 180
gtgccttctt ctgctctcgg cctcggcctc gctgctattg ctgcttactg ggctctcctc 240
tctctcacag atattgatct caggcaggct acacctattc attggctcgt gctcctctac 300
tggggcgtgg atgctctcgc tacaggcctc tctcctgtga gggctgctgc tctcgtgggc 360
ctcgctaagc tcacactcta cctcctcgtg ttcgctctcg ctgctagggt gctcaggaat 420
cctaggctca ggtctctcct cttctctgtg gtggtgatta catctctctt cgtgtctgtg 480
tacggcctca accaatggat ttacggcgtg gaggagctcg ctacatgggt ggataggaat 540
tctgtggctg atttcacatc tagggtgtac tcttacctcg gcaatcctaa tctcctcgct 600
gcttacctcg tgcctacaac agctttctct gctgctgcta ttggcgtgtg gaggggctgg 660
ctccctaagc tcctcgctat tgctgctaca ggcgcttctt ctctctgcct cattctcaca 720
tactctaggg gcggctggct cggcttcgtg gctatgattt tcgtgtgggc tctcctcggc 780
ctctactggt tccagcctag gctccctgct ccttggagga ggtggctctt ccctgtggtg 840
ctcggcggcc tcgtggctgt gctcctcgtg gctgtgctcg gcctcgagcc tctcagggtg 900
agggtgctct ctattttcgt gggcagggag gattcttcta ataatttcag gattaatgtg 960
tggctcgctg tgctccagat gattcaggat aggccttggc tcggcattgg ccctggcaat 1020
acagctttca atctcgtgta ccctctctac cagcaggcta ggttcacagc tctctctgct 1080
tactctgtgc ctctcgaggt ggctgtggag ggcggcctcc tcggcctcac agctttcgct 1140
tggctcctcc tcgtgacagc tgtgacagct gtgcgccagg tgtctaggct caggagggat 1200
aggaatcctc aggctttctg gctcatggct tctctcgctg gcctcgctgg catgctcggc 1260
catggcctct tcgatacagt gctctacagg cctgaggctt ctacactctg gtggctctgc 1320
attggcgcta ttgcttcttt ctggcagcct cagccttcta agcagctccc tcctgaggct 1380
gagcattctg atgagaagat gtga 1404
<210> 55
<211> 467
<212> PRT
<213> 细长聚球藻(Synechococcus elongatus)
<220>
<221> ictB
<222> (1)..(467)
<400> 55
Met Thr Val Trp Gln Thr Leu Thr Phe Ala His Tyr Gln Pro Gln Gln
1 5 10 15
Trp Gly His Ser Ser Phe Leu His Arg Leu Phe Gly Ser Leu Arg Ala
20 25 30
Trp Arg Ala Ser Ser Gln Leu Leu Val Trp Ser Glu Ala Leu Gly Gly
35 40 45
Phe Leu Leu Ala Val Val Tyr Gly Ser Ala Pro Phe Val Pro Ser Ser
50 55 60
Ala Leu Gly Leu Gly Leu Ala Ala Ile Ala Ala Tyr Trp Ala Leu Leu
65 70 75 80
Ser Leu Thr Asp Ile Asp Leu Arg Gln Ala Thr Pro Ile His Trp Leu
85 90 95
Val Leu Leu Tyr Trp Gly Val Asp Ala Leu Ala Thr Gly Leu Ser Pro
100 105 110
Val Arg Ala Ala Ala Leu Val Gly Leu Ala Lys Leu Thr Leu Tyr Leu
115 120 125
Leu Val Phe Ala Leu Ala Ala Arg Val Leu Arg Asn Pro Arg Leu Arg
130 135 140
Ser Leu Leu Phe Ser Val Val Val Ile Thr Ser Leu Phe Val Ser Val
145 150 155 160
Tyr Gly Leu Asn Gln Trp Ile Tyr Gly Val Glu Glu Leu Ala Thr Trp
165 170 175
Val Asp Arg Asn Ser Val Ala Asp Phe Thr Ser Arg Val Tyr Ser Tyr
180 185 190
Leu Gly Asn Pro Asn Leu Leu Ala Ala Tyr Leu Val Pro Thr Thr Ala
195 200 205
Phe Ser Ala Ala Ala Ile Gly Val Trp Arg Gly Trp Leu Pro Lys Leu
210 215 220
Leu Ala Ile Ala Ala Thr Gly Ala Ser Ser Leu Cys Leu Ile Leu Thr
225 230 235 240
Tyr Ser Arg Gly Gly Trp Leu Gly Phe Val Ala Met Ile Phe Val Trp
245 250 255
Ala Leu Leu Gly Leu Tyr Trp Phe Gln Pro Arg Leu Pro Ala Pro Trp
260 265 270
Arg Arg Trp Leu Phe Pro Val Val Leu Gly Gly Leu Val Ala Val Leu
275 280 285
Leu Val Ala Val Leu Gly Leu Glu Pro Leu Arg Val Arg Val Leu Ser
290 295 300
Ile Phe Val Gly Arg Glu Asp Ser Ser Asn Asn Phe Arg Ile Asn Val
305 310 315 320
Trp Leu Ala Val Leu Gln Met Ile Gln Asp Arg Pro Trp Leu Gly Ile
325 330 335
Gly Pro Gly Asn Thr Ala Phe Asn Leu Val Tyr Pro Leu Tyr Gln Gln
340 345 350
Ala Arg Phe Thr Ala Leu Ser Ala Tyr Ser Val Pro Leu Glu Val Ala
355 360 365
Val Glu Gly Gly Leu Leu Gly Leu Thr Ala Phe Ala Trp Leu Leu Leu
370 375 380
Val Thr Ala Val Thr Ala Val Arg Gln Val Ser Arg Leu Arg Arg Asp
385 390 395 400
Arg Asn Pro Gln Ala Phe Trp Leu Met Ala Ser Leu Ala Gly Leu Ala
405 410 415
Gly Met Leu Gly His Gly Leu Phe Asp Thr Val Leu Tyr Arg Pro Glu
420 425 430
Ala Ser Thr Leu Trp Trp Leu Cys Ile Gly Ala Ile Ala Ser Phe Trp
435 440 445
Gln Pro Gln Pro Ser Lys Gln Leu Pro Pro Glu Ala Glu His Ser Asp
450 455 460
Glu Lys Met
465
<210> 56
<211> 606
<212> DNA
<213> 二穗短柄草(Brachypodium distachyon)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(606)
<400> 56
atgtctgagc atggcggctc ttctggcaag catcctttct acaggggcat taggtctagg 60
tgcggcaagt gggtgtctga gattagggag cctaggaagg ctaggaggat ttggctcggc 120
acattcccta cacctgagat ggctgctgtg gcttacgatg tggctgctag ggctctcagg 180
ggccctgatg ctgctctcaa tttccctgct attgctgctt ctaggcctgc tcctgcttct 240
acatctgctg atgatattag ggctgctgct gctgctgctg ctgcttctct cgctggcggc 300
ggcggcattg ctcctcctgg cggcgctgct ggctctgctg tgcagcagca gcagcagttc 360
ggcggcggct ctggcacagc tgctggctct gaggaggctg cttctattgg cgctaattac 420
tacaatgtga atcagcagca gcagtacttc ctcgatgagg aggctctctt cgagacacct 480
cagttcctca ggtctatggc tgctggcatg atgatgtctc ctcctaggct ctctcctgat 540
tcttctgatg agtctcctga tccttctgag gctggcgagt ctctctggtc ttacagggat 600
ccttga 606
<210> 57
<211> 201
<212> PRT
<213> 二穗短柄草(Brachypodium distachyon)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(201)
<400> 57
Met Ser Glu His Gly Gly Ser Ser Gly Lys His Pro Phe Tyr Arg Gly
1 5 10 15
Ile Arg Ser Arg Cys Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Pro Arg
20 25 30
Lys Ala Arg Arg Ile Trp Leu Gly Thr Phe Pro Thr Pro Glu Met Ala
35 40 45
Ala Val Ala Tyr Asp Val Ala Ala Arg Ala Leu Arg Gly Pro Asp Ala
50 55 60
Ala Leu Asn Phe Pro Ala Ile Ala Ala Ser Arg Pro Ala Pro Ala Ser
65 70 75 80
Thr Ser Ala Asp Asp Ile Arg Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ser
85 90 95
Leu Ala Gly Gly Gly Gly Ile Ala Pro Pro Gly Gly Ala Ala Gly Ser
100 105 110
Ala Val Gln Gln Gln Gln Gln Phe Gly Gly Gly Ser Gly Thr Ala Ala
115 120 125
Gly Ser Glu Glu Ala Ala Ser Ile Gly Ala Asn Tyr Tyr Asn Val Asn
130 135 140
Gln Gln Gln Gln Tyr Phe Leu Asp Glu Glu Ala Leu Phe Glu Thr Pro
145 150 155 160
Gln Phe Leu Arg Ser Met Ala Ala Gly Met Met Met Ser Pro Pro Arg
165 170 175
Leu Ser Pro Asp Ser Ser Asp Glu Ser Pro Asp Pro Ser Glu Ala Gly
180 185 190
Glu Ser Leu Trp Ser Tyr Arg Asp Pro
195 200
<210> 58
<211> 858
<212> DNA
<213> 二穗短柄草(Brachypodium distachyon)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(858)
<400> 58
atggctgagc ctgagcagcc ttctgctcct tcttcttctg ctcctgctcc tcctcagctc 60
caggtggctg ctgataataa tcctacaaca gtggatgagt gctctgatcc tggcggcaat 120
tctgctgctt cttctgctca ttctcctgct cctgctcctc agcagctcgc tagggatgat 180
acagtgggca ttattacaac agctatgggc gctgctgctg ctgctacatc ttcttctggc 240
gagccttctc ctaggtctac aggcaggcat cctttctaca ggggcattag gtgcaggaat 300
ggcaagtggg tgtctgagat tagggagcct aggaaggcta ggaggatttg gctcggcaca 360
taccctacag ctgagatggc tgctgctgct tacgatgtgg ctgctagggc tctcaggggc 420
cctgatgctg tgctcaattt ccctggcgct acagctacaa ggcctgctcc tgcttctgct 480
tctcctgagg atattagggc tgctgctgct gctgctgctg ctgctctcca gcctattatt 540
gataagcctg gcgctagggc tcctgaggct gatgctgctg ctgctgatcc tgctgctgct 600
gctgagcagg tgcagaggca tcatgatcag acaggctctg ctgctgctgg cggcgatgag 660
cctaggcaga aggagattgg caatgagggc gaggagttca tggatgagga ggctattttc 720
gagatgcctc agatgctcag gaatatggct gctggcatga tgatgtctcc tcctaggctc 780
tctcctacag cttctgatga gtggcctgct gatccttctg gcgctggcga gtctctctgg 840
tcttaccatg atccttga 858
<210> 59
<211> 285
<212> PRT
<213> 二穗短柄草(Brachypodium distachyon)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(285)
<400> 59
Met Ala Glu Pro Glu Gln Pro Ser Ala Pro Ser Ser Ser Ala Pro Ala
1 5 10 15
Pro Pro Gln Leu Gln Val Ala Ala Asp Asn Asn Pro Thr Thr Val Asp
20 25 30
Glu Cys Ser Asp Pro Gly Gly Asn Ser Ala Ala Ser Ser Ala His Ser
35 40 45
Pro Ala Pro Ala Pro Gln Gln Leu Ala Arg Asp Asp Thr Val Gly Ile
50 55 60
Ile Thr Thr Ala Met Gly Ala Ala Ala Ala Ala Thr Ser Ser Ser Gly
65 70 75 80
Glu Pro Ser Pro Arg Ser Thr Gly Arg His Pro Phe Tyr Arg Gly Ile
85 90 95
Arg Cys Arg Asn Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu Pro Arg Lys
100 105 110
Ala Arg Arg Ile Trp Leu Gly Thr Tyr Pro Thr Ala Glu Met Ala Ala
115 120 125
Ala Ala Tyr Asp Val Ala Ala Arg Ala Leu Arg Gly Pro Asp Ala Val
130 135 140
Leu Asn Phe Pro Gly Ala Thr Ala Thr Arg Pro Ala Pro Ala Ser Ala
145 150 155 160
Ser Pro Glu Asp Ile Arg Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Ala Leu
165 170 175
Gln Pro Ile Ile Asp Lys Pro Gly Ala Arg Ala Pro Glu Ala Asp Ala
180 185 190
Ala Ala Ala Asp Pro Ala Ala Ala Ala Glu Gln Val Gln Arg His His
195 200 205
Asp Gln Thr Gly Ser Ala Ala Ala Gly Gly Asp Glu Pro Arg Gln Lys
210 215 220
Glu Ile Gly Asn Glu Gly Glu Glu Phe Met Asp Glu Glu Ala Ile Phe
225 230 235 240
Glu Met Pro Gln Met Leu Arg Asn Met Ala Ala Gly Met Met Met Ser
245 250 255
Pro Pro Arg Leu Ser Pro Thr Ala Ser Asp Glu Trp Pro Ala Asp Pro
260 265 270
Ser Gly Ala Gly Glu Ser Leu Trp Ser Tyr His Asp Pro
275 280 285
<210> 60
<211> 750
<212> DNA
<213> 二穗短柄草(Brachypodium distachyon)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(750)
<400> 60
atgcctgagc aggatgtgtg ctctcctgct tcttctggcg gctctggcac aacatcttct 60
tctcctcctg cttctcctgg cttcggctct aataggaggg ctagggatga tggcgtgggc 120
ggcggcaggc atccttctta caggggcgtg aggatgaggg cttggggcaa gtgggtgtct 180
gagattaggg agcctaggaa gaagtctagg atttggctcg gcacattccc tacacctgag 240
atggctgcta gggctcatga tgctgctgct ctcgtggtga agggccctgc tgctgtgctc 300
aatttccctg atctcgcttc taggctccct aggcctgctt cttcttctcc tagggatgtg 360
caggctgctg ctgtgagggc tgctgctatg gatatgggcc atctccatca tcagcagcag 420
cctgctgctg ctgctctctc tccttcttct cctgctcctg ctatgatgct ccagcagcct 480
gtgatttctg ctgctgctga tgtggtggat gatctcgatg ctattttcga gctccctagg 540
ctcgatgatg atgctacagg ccatgtgttc ggcggcctca caatggctga tcatcatcag 600
cagtcttggt gcgatcctgt gtggatggat gatgatggct gctcttacgc tcaggaggat 660
atgttcggct tcggcctcga tgctgctgtg gatcagtacc atggctgggg cgctccttct 720
tctgtgtctg ctctcctctg gaatctctga 750
<210> 61
<211> 249
<212> PRT
<213> 二穗短柄草(Brachypodium distachyon)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(249)
<400> 61
Met Pro Glu Gln Asp Val Cys Ser Pro Ala Ser Ser Gly Gly Ser Gly
1 5 10 15
Thr Thr Ser Ser Ser Pro Pro Ala Ser Pro Gly Phe Gly Ser Asn Arg
20 25 30
Arg Ala Arg Asp Asp Gly Val Gly Gly Gly Arg His Pro Ser Tyr Arg
35 40 45
Gly Val Arg Met Arg Ala Trp Gly Lys Trp Val Ser Glu Ile Arg Glu
50 55 60
Pro Arg Lys Lys Ser Arg Ile Trp Leu Gly Thr Phe Pro Thr Pro Glu
65 70 75 80
Met Ala Ala Arg Ala His Asp Ala Ala Ala Leu Val Val Lys Gly Pro
85 90 95
Ala Ala Val Leu Asn Phe Pro Asp Leu Ala Ser Arg Leu Pro Arg Pro
100 105 110
Ala Ser Ser Ser Pro Arg Asp Val Gln Ala Ala Ala Val Arg Ala Ala
115 120 125
Ala Met Asp Met Gly His Leu His His Gln Gln Gln Pro Ala Ala Ala
130 135 140
Ala Leu Ser Pro Ser Ser Pro Ala Pro Ala Met Met Leu Gln Gln Pro
145 150 155 160
Val Ile Ser Ala Ala Ala Asp Val Val Asp Asp Leu Asp Ala Ile Phe
165 170 175
Glu Leu Pro Arg Leu Asp Asp Asp Ala Thr Gly His Val Phe Gly Gly
180 185 190
Leu Thr Met Ala Asp His His Gln Gln Ser Trp Cys Asp Pro Val Trp
195 200 205
Met Asp Asp Asp Gly Cys Ser Tyr Ala Gln Glu Asp Met Phe Gly Phe
210 215 220
Gly Leu Asp Ala Ala Val Asp Gln Tyr His Gly Trp Gly Ala Pro Ser
225 230 235 240
Ser Val Ser Ala Leu Leu Trp Asn Leu
245
<210> 62
<211> 579
<212> DNA
<213> 二穗短柄草(Brachypodium distachyon)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(579)
<400> 62
atggagatgc atgataatgc tgctggcatt gctgctgctg ctgctgctgc tgctgagcag 60
tacaggggcg tgaggaagag gaagtggggc aagtgggtgt ctgagattag ggagcctggc 120
aagaagacaa ggatttggct cggctctttc gagtctcctg agatggctgc tgtggctcat 180
gatgtggctg ctctcaggct caggggcagg gatgctaggc tcaatttccc tggcctcgct 240
catctcttca ggaggcctgc tacagctgag cctgatgatg tgagggctgc tgctctcgag 300
gctgctgctc aggtgaggtt caggcctgat ctcgtgatgc agctccctgg ctctcatggc 360
aatggcggcg gcgatggcgg ctctcctgag tacaggctcg atgatgtggc ttgggatgtg 420
gtgctcggcg ctgatgatct cgaggctcag tctcctaata tgtgggctga gctcgctgag 480
gctatgctcc tcgctcctcc tgtgtggggc ggcggcgctg tggataatga tgattgggct 540
cagggctctc tctgggagcc ttcttgctgg tcttactga 579
<210> 63
<211> 192
<212> PRT
<213> 二穗短柄草(Brachypodium distachyon)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(192)
<400> 63
Met Glu Met His Asp Asn Ala Ala Gly Ile Ala Ala Ala Ala Ala Ala
1 5 10 15
Ala Ala Glu Gln Tyr Arg Gly Val Arg Lys Arg Lys Trp Gly Lys Trp
20 25 30
Val Ser Glu Ile Arg Glu Pro Gly Lys Lys Thr Arg Ile Trp Leu Gly
35 40 45
Ser Phe Glu Ser Pro Glu Met Ala Ala Val Ala His Asp Val Ala Ala
50 55 60
Leu Arg Leu Arg Gly Arg Asp Ala Arg Leu Asn Phe Pro Gly Leu Ala
65 70 75 80
His Leu Phe Arg Arg Pro Ala Thr Ala Glu Pro Asp Asp Val Arg Ala
85 90 95
Ala Ala Leu Glu Ala Ala Ala Gln Val Arg Phe Arg Pro Asp Leu Val
100 105 110
Met Gln Leu Pro Gly Ser His Gly Asn Gly Gly Gly Asp Gly Gly Ser
115 120 125
Pro Glu Tyr Arg Leu Asp Asp Val Ala Trp Asp Val Val Leu Gly Ala
130 135 140
Asp Asp Leu Glu Ala Gln Ser Pro Asn Met Trp Ala Glu Leu Ala Glu
145 150 155 160
Ala Met Leu Leu Ala Pro Pro Val Trp Gly Gly Gly Ala Val Asp Asn
165 170 175
Asp Asp Trp Ala Gln Gly Ser Leu Trp Glu Pro Ser Cys Trp Ser Tyr
180 185 190
<210> 64
<211> 516
<212> DNA
<213> 二穗短柄草(Brachypodium distachyon)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(516)
<400> 64
atggataata atttcagggc tgctccttct gctcctcagt acaggggcgt gaggaggagg 60
aagtggggca ggtgggtgtc tgagattagg cagcctggca caaagctcag ggtgtggctc 120
ggctctttcg atacagctga gatggctgct gtggctcatg atgtggctgc tctcaggctc 180
aggggcgcta gggatgctca gctcaatttc cctggctctg tgggctggct ccctcagcct 240
cctacaacag atcctacaga tattagggct gctgctgctg aggctgctga gagggtgagg 300
agggagcctg ctctcgtgtc tgctgctgct aatacaacaa ttacaattaa tcctggcgag 360
ttcgatgatg atcagctcga gtctcctaag ctctgggatc agatggctga ggctatgctc 420
ctcgatcctc ctaggtgggg ccaggatggc tctggcggcg atgctgctga gtcttctcat 480
tcttggcctc agggctctct ctgggatggc tgctga 516
<210> 65
<211> 171
<212> PRT
<213> 二穗短柄草(Brachypodium distachyon)
<220>
<221> ERF转录因子
<222> (1)..(171)
<400> 65
Met Asp Asn Asn Phe Arg Ala Ala Pro Ser Ala Pro Gln Tyr Arg Gly
1 5 10 15
Val Arg Arg Arg Lys Trp Gly Arg Trp Val Ser Glu Ile Arg Gln Pro
20 25 30
Gly Thr Lys Leu Arg Val Trp Leu Gly Ser Phe Asp Thr Ala Glu Met
35 40 45
Ala Ala Val Ala His Asp Val Ala Ala Leu Arg Leu Arg Gly Ala Arg
50 55 60
Asp Ala Gln Leu Asn Phe Pro Gly Ser Val Gly Trp Leu Pro Gln Pro
65 70 75 80
Pro Thr Thr Asp Pro Thr Asp Ile Arg Ala Ala Ala Ala Glu Ala Ala
85 90 95
Glu Arg Val Arg Arg Glu Pro Ala Leu Val Ser Ala Ala Ala Asn Thr
100 105 110
Thr Ile Thr Ile Asn Pro Gly Glu Phe Asp Asp Asp Gln Leu Glu Ser
115 120 125
Pro Lys Leu Trp Asp Gln Met Ala Glu Ala Met Leu Leu Asp Pro Pro
130 135 140
Arg Trp Gly Gln Asp Gly Ser Gly Gly Asp Ala Ala Glu Ser Ser His
145 150 155 160
Ser Trp Pro Gln Gly Ser Leu Trp Asp Gly Cys
165 170

Claims (15)

1.一种增加作物产量的方法,包括用至少一种ERF转录因子蛋白编码序列转化植物。
2.如权利要求1所述的方法,其中,所述ERF转录因子蛋白编码序列包含选自SEQ IDNO:1、56、58、60、62和64的序列,或编码选自SEQ ID NO:2、22-53、57、59、61、63和65的蛋白质。
3.一种植物,所述植物基因组中稳定地纳入有驱动植物细胞中表达的启动子,该启动子与ERF转录因子蛋白编码序列操作性连接,其中所述启动子相对于所述ERF转录因子蛋白编码序列是异源的。
4.如权利要求3所述的植物,其中,所述ERF转录因子蛋白编码序列包含选自SEQ IDNO:1、56、58、60、62和64的序列,或编码选自SEQ ID NO:2、22-53、57、59、61、63和65的蛋白质。
5.如权利要求3或4所述的植物,其中,所述植物基因组中稳定地纳入有至少一种其他编码序列,并且其中所述至少一种其他编码序列选自SEQ ID NO:14、16、18、20和54或编码选自SEQ ID NO:15、17、19、21和55的蛋白质。
6.权利要求3-5中任一项所述植物的经转化的种子。
7.如权利要求3-5中任一项所述的植物,其中,所述植物是单子叶植物。
8.如权利要求3-5中任一项所述的植物,其中所述植物是双子叶植物。
9.一种DNA构建体,所述DNA构建体包含操作性连接的,
a.在植物细胞中有功能的启动子,和
b.编码ERF转录因子蛋白的核酸序列。
10.如权利要求9所述的DNA构建体,其中,所述编码ERF转录因子蛋白的核酸序列包含选自SEQ ID NO:1、56、58、60、62和64的序列,或编码选自SEQ ID NO:2、22-53、57、59、61、63和65的蛋白质。
11.如权利要求9-10中任一项所述的DNA构建体,其中所述在植物细胞中有功能的启动子相对于所述编码ERF转录因子蛋白的核酸序列是异源的。
12.如权利要求3-5中任一项所述的植物,其中,所述驱动植物细胞中表达的启动子选自SEQ ID NO:5和8。
13.如权利要求实施方式9所述的DNA构建体,其中,所述在植物细胞中有功能的启动子选自SEQ ID NO:3、5、7和8。
14.如权利要求1所述的方法,所述方法还包括用至少一种其他编码序列转化植物,其中所述至少一种其他编码序列选自SEQ ID NO:14、16、18、20和54或编码选自SEQ ID NO:15、17、19、21和55的蛋白质。
15.如权利要求9所述的DNA构建体,所述DNA构建体还包括在植物细胞中有功能的至少一种其他启动子,所述至少一种其他启动子操作性连接至少一种其他蛋白质编码核酸序列,其中所述其他蛋白质编码核酸序列选自SEQ ID NO:14、16、18、20和54或编码选自SEQID NO:15、17、19、21和55的蛋白质。
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