CN110095614A - 一种快速检测转基因植物中转基因蛋白Bt-Cry1AbAc的方法 - Google Patents

一种快速检测转基因植物中转基因蛋白Bt-Cry1AbAc的方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种快速检测转基因植物中转基因蛋白Bt‑Cry1AbAc的方法,包括如下步骤:将待测植物进行清洗烘干,清洗烘干结束后,将待测植物倒入粉碎装置中进行粉碎,粉碎时间5‑10分钟,将容器和搅拌棒进行消毒,再将经过粉碎的待测植物倒入容器中,缓慢均匀的加入水溶液,并同时用搅拌棒进行搅拌,盖上容器盖子,将容器上下摇晃15‑20S,将溶液静置5‑8分钟,固体物质沉淀分层,取上层溶液于试管中,拆开测试试纸,将测试试纸的样品端垂直向下,***装有溶液的试管中,浸泡1‑2分钟,取出测试试纸,开始计时,5‑10分钟后,读取测试结果。

Description

一种快速检测转基因植物中转基因蛋白Bt-Cry1AbAc的方法
技术领域
本发明涉及基因蛋白检测技术领域,尤其涉及一种快速检测转基因植物中转基因蛋白Bt-Cry1AbAc的方法。
背景技术
转基因植物的成功,极大的提高了植物种植的产量,像玉米、大豆等植物的种植得到推广。转基因植物生产出的产品内含有转基因蛋白,转基因植物需要对产品内含有转基因蛋白进行检测,判断转基因植物的优良。现有的检测方法操作复杂,需要使用较多的器具,检测成本高。
发明内容
本发明提出了一种快速检测转基因植物中转基因蛋白Bt-Cry1AbAc的方法,以解决上述背景技术中提出的问题。
本发明提出了一种快速检测转基因植物中转基因蛋白Bt-Cry1AbAc的方法,包括如下步骤:
S1:将待测植物进行清洗烘干,清洗烘干结束后,将待测植物倒入粉碎装置中进行粉碎,粉碎时间5-10分钟;
S2:将容器和搅拌棒进行消毒,再将经过粉碎的待测植物倒入容器中,缓慢均匀的加入水溶液,并同时用搅拌棒进行搅拌;
S3:盖上容器盖子,将容器上下摇晃15-20S,使得颗粒溶解在水溶液中;
S4:将溶液静置2-4分钟,固体物质沉淀分层;
S5:取上层溶液于试管中,拆开测试试纸,将测试试纸的样品端垂直向下,***装有溶液的试管中,浸泡1-2分钟,测试试纸的***步骤:
A、调整测试试纸的方向,使得测试试纸的样品端向下,移动至试管口1-3cm处;
B、再次缓缓移动测试试纸,使得测试试纸的样品端逐渐侵入试管内的溶液中;
C、手持测试试纸保持不动,使得测试试纸深入溶液中的深度保持某一范围值;
S6:取出测试试纸,开始计时,5-10分钟后,读取测试结果。
优选的,所述S1中,所述粉碎后的颗粒直径小于1毫米。
优选的,所述S1中,所述待测植物的清洗烘干步骤为:
(1)将待测植物导入滚筒中进行旋转清洗,清洗时间为3-8分钟;
(2)清洗后,将待测植物导入烘干箱中进行烘干,烘干箱内的温度为50-60摄氏度,烘干时间为5-10分钟。
优选的,所述S2中,所述水溶液为去离子水溶液。
优选的,所述S2中,所述搅拌棒搅拌过程中,使得容器内的待测植物颗粒不会粘接在一起,待测植物颗粒溶解在水溶液中。
优选的,所述S2中,所述容器和搅拌棒的消毒过程为:
(1)将容器和搅拌棒置入热水中浸泡3-5分钟,热水温度为95-100℃;
(2)取出容器和搅拌棒,将容器和搅拌棒置于紫外线光灯中消毒,消毒时间2-5分钟;
(3)取出容器和搅拌棒,冷却至常温。
优选的,所述S5中,将测试纸条样品端浸没入样本液的深度约为0.3-0.6cm,不要超过箭头上端的黑色标记线。
本发明提出的一种快速检测转基因植物中转基因蛋白Bt-Cry1AbAc的方法,有益效果在于:
1、通过去离子水溶液,离子水溶液中不含离子,减小对基因蛋白检测的影响,并同时用搅拌棒进行搅拌,搅拌棒搅拌过程中,使得容器内的待测植物颗粒不会粘接在一起,待测植物颗粒溶解在水溶液中。
2、通过测试试纸的样品端垂直向下,***装有溶液的试管中,试试纸的样品端逐渐侵入试管内的溶液中,没入样本液的深度为0.3-0.6cm,保证了检测的精确性。
具体实施方式
下面结合具体实施例来对本发明做进一步说明。
实施例1
本发明提出了一种快速检测转基因植物中转基因蛋白Bt-Cry1AbAc的方法,包括如下步骤:
S1:将待测植物进行清洗烘干,清洗烘干结束后,将待测植物倒入粉碎装置中进行粉碎,粉碎时间5分钟,粉碎后的颗粒直径小于1毫米,待测植物的清洗烘干步骤为:
(1)将待测植物导入滚筒中进行旋转清洗,旋转清洗可有效的清除表面的杂物,清洗时间为3分钟;
(2)清洗后,将待测植物导入烘干箱中进行烘干,烘干箱内温度为50摄氏度,低温烘干不会破坏待测植物的成分,烘干时间为5分钟;
S2:将容器和搅拌棒进行消毒,避免细菌微生物影响基因蛋白的检测,再将经过粉碎的待测植物倒入容器中,缓慢均匀的加入水溶液,水溶液为去离子水溶液,离子水溶液中不含离子,减小对基因蛋白检测的影响,并同时用搅拌棒进行搅拌,搅拌棒搅拌过程中,使得容器内的待测植物颗粒不会粘接在一起,待测植物颗粒溶解在水溶液中,容器和搅拌棒的消毒过程为:
(1)将容器和搅拌棒置入热水中浸泡3分钟,热水温度为95℃;
(2)取出容器和搅拌棒,将容器和搅拌棒置于紫外线光灯中消毒,消毒时间2分钟;
(3)取出容器和搅拌棒,冷却至常温;
S3:盖上容器盖子,将容器上下摇晃15S,使得颗粒溶解在水溶液中,上下摇晃均匀摇晃,测植物颗粒溶解,使得生成的沉淀更少;
S4:将溶液静置2分钟,固体物质沉淀分层,固体物质沉淀在容器的底端,在提取清液时,不会存在沉淀,使得沉淀物质不会影响基因蛋白检测;
S5:取上层溶液于试管中,拆开测试试纸,将测试试纸的样品端垂直向下,***装有溶液的试管中,浸泡1分钟,将测试纸条样品端浸没入样本液的深度约为0.3cm,不要超过箭头上端的黑色标记线,测试试纸的***步骤:
A、调整测试试纸的方向,使得测试试纸的样品端向下,移动至试管口1cm处;
B、再次缓缓移动测试试纸,使得测试试纸的样品端逐渐侵入试管内的溶液中,避免测试试纸***过多;
C、手持测试试纸保持不动,使得测试试纸深入溶液中的深度保持某一范围值;
S6:取出测试试纸,开始计时,5分钟后,读取测试结果。
实施例2
本发明提出了一种快速检测转基因植物中转基因蛋白Bt-Cry1AbAc的方法,包括如下步骤:
S1:将待测植物进行清洗烘干,清洗烘干结束后,将待测植物倒入粉碎装置中进行粉碎,粉碎时间10分钟,粉碎后的颗粒直径小于1毫米,待测植物的清洗烘干步骤为:
(1)将待测植物导入滚筒中进行旋转清洗,旋转清洗可有效的清除表面的杂物,清洗时间为8分钟;
(2)清洗后,将待测植物导入烘干箱中进行烘干,烘干箱内温度为60摄氏度,低温烘干不会破坏待测植物的成分,烘干时间为10分钟;
S2:将容器和搅拌棒进行消毒,避免细菌微生物影响基因蛋白的检测,再将经过粉碎的待测植物倒入容器中,缓慢均匀的加入水溶液,水溶液为去离子水溶液,离子水溶液中不含离子,减小对基因蛋白检测的影响,并同时用搅拌棒进行搅拌,搅拌棒搅拌过程中,使得容器内的待测植物颗粒不会粘接在一起,待测植物颗粒溶解在水溶液中,容器和搅拌棒的消毒过程为:
(1)将容器和搅拌棒置入热水中浸泡5分钟,热水温度为100℃;
(2)取出容器和搅拌棒,将容器和搅拌棒置于紫外线光灯中消毒,消毒时间5分钟;
(3)取出容器和搅拌棒,冷却至常温;
S3:盖上容器盖子,将容器上下摇晃20S,使得颗粒溶解在水溶液中,上下摇晃均匀摇晃,测植物颗粒溶解,使得生成的沉淀更少;
S4:将溶液静置4分钟,固体物质沉淀分层,固体物质沉淀在容器的底端,在提取清液时,不会存在沉淀,使得沉淀物质不会影响基因蛋白检测;
S5:取上层溶液于试管中,拆开测试试纸,将测试试纸的样品端垂直向下,***装有溶液的试管中,浸泡2分钟,将测试纸条样品端浸没入样本液的深度约为0.6cm,不要超过箭头上端的黑色标记线,测试试纸的***步骤:
A、调整测试试纸的方向,使得测试试纸的样品端向下,移动至试管口3cm处;
B、再次缓缓移动测试试纸,使得测试试纸的样品端逐渐侵入试管内的溶液中,避免测试试纸***过多;
C、手持测试试纸保持不动,使得测试试纸深入溶液中的深度保持某一范围值;
S6:取出测试试纸,开始计时,10分钟后,读取测试结果。
以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种快速检测转基因植物中转基因蛋白Bt-Cry1AbAc的方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1:将待测植物进行清洗烘干,清洗烘干结束后,将待测植物倒入粉碎装置中进行粉碎,粉碎时间5-10分钟;
S2:将容器和搅拌棒进行消毒,再将经过粉碎的待测植物倒入容器中,缓慢均匀的加入水溶液,并同时用搅拌棒进行搅拌;
S3:盖上容器盖子,将容器上下摇晃15-20S,使得颗粒溶解在水溶液中;
S4:将溶液静置2-4分钟,固体物质沉淀分层;
S5:取上层溶液于试管中,拆开测试试纸,将测试试纸的样品端垂直向下,***装有溶液的试管中,浸泡1-2分钟,测试试纸的***步骤:
A、调整测试试纸的方向,使得测试试纸的样品端向下,移动至试管口1-3cm处;
B、再次缓缓移动测试试纸,使得测试试纸的样品端逐渐侵入试管内的溶液中;
C、手持测试试纸保持不动,使得测试试纸深入溶液中的深度保持某一范围值;
S6:取出测试试纸,开始计时,5-10分钟后,读取测试结果。
2.根据权利要求1所述的一种快速检测转基因植物中转基因蛋白Bt-Cry1AbAc的方法,其特征在于,所述S1中,所述粉碎后的颗粒直径小于1毫米。
3.根据权利要求1所述的一种快速检测转基因植物中转基因蛋白Bt-Cry1AbAc的方法,其特征在于,所述S1中,所述待测植物的清洗烘干步骤为:
(1)将待测植物导入滚筒中进行旋转清洗,清洗时间为3-8分钟;
(2)清洗后,将待测植物导入烘干箱中进行烘干,烘干箱内的温度为50-60摄氏度,烘干时间为5-10分钟。
4.根据权利要求1所述的一种快速检测转基因植物中转基因蛋白Bt-Cry1AbAc的方法,其特征在于,所述S2中,所述水溶液为去离子水溶液。
5.根据权利要求1所述的一种快速检测转基因植物中转基因蛋白Bt-Cry1AbAc的方法,其特征在于,所述S2中,所述搅拌棒搅拌过程中,使得容器内的待测植物颗粒不会粘接在一起,待测植物颗粒溶解在水溶液中。
6.根据权利要求1所述的一种快速检测转基因植物中转基因蛋白Bt-Cry1AbAc的方法,其特征在于,所述S2中,所述容器和搅拌棒的消毒过程为:
(1)将容器和搅拌棒置入热水中浸泡3-5分钟,热水温度为95-100℃;
(2)取出容器和搅拌棒,将容器和搅拌棒置于紫外线光灯中消毒,消毒时间2-5分钟;
(3)取出容器和搅拌棒,冷却至常温。
7.根据权利要求1所述的一种快速检测转基因植物中转基因蛋白Bt-Cry1AbAc的方法,其特征在于,所述S5中,将测试纸条样品端浸没入样本液的深度约为0.3-0.6cm,不要超过箭头上端的黑色标记线。
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