CN110075146A - 一种口腔溃疡喷雾剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种口腔溃疡喷雾剂及其制备方法，属于治疗口腔溃疡技术领域，包括以下体积份数的组分：占芭花醇提取物75～85份、干细胞提取物5～15份、去离子水3～8份、防腐剂2～6份和维生素B20.1～0.5份；所述干细胞提取物中外泌体蛋白质的浓度为25～35mg/mL；所述口腔溃疡喷雾剂的pH值为6.6～7.11。本发明提供的口腔溃疡喷雾剂治疗效果好，使用时感觉温和舒适，治愈后无瘢痕，对口腔溃疡患者的总有效率为97.22％。

Description

一种口腔溃疡喷雾剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及治疗口腔溃疡技术领域，尤其涉及一种口腔溃疡喷雾剂及其制备方法。
背景技术
溃疡部位多见于舌面、***、牙龈等。口腔溃疡发作时疼痛剧烈，局部灼痛明显，严重者还会影响饮食、说话，还可并发口臭、慢性咽炎等，如果不及时治疗，对日常生活造成极大不便。其诱发因素有许多，诸如局部创伤、刺激物、细菌感染物、内分泌失衡、郁闷、精神紧张等都会引起溃疡。
复发性口腔溃疡大致分为三种：小口疮(minor aphthous ulcers)、大口疮(majoraphthous ulcers)、疱疹样溃疡(andherpetiform ulcers)，又以小口疮溃疡最为常见，复发率高。临床上小口疮性口腔溃疡的治疗可分为：(1)对症支持治疗；(2)特殊处理治疗；(3)预防性治疗。标准的局部治疗方案通常使用一些药物进行疼痛等症状缓解，包括镇痛剂、抗微生物剂、消炎剂、类固醇、维生素B2等。目前临床上尚无完全根治复发性口腔溃疡，而且一般来说，比较大而且比较深的口腔溃疡(major aphthous ulcers)愈合以后会在局部形成瘢痕，随着时间的延长，这种溃疡愈合后形成的瘢痕也会逐渐***、吸收、变小，但局部黏膜很难恢复如初。
发明内容
针对现有技术中存在的问题，本发明提供了一种口腔溃疡喷雾剂及其制备方法，本发明提供的口腔溃疡喷雾剂治疗效果好，使用时感觉温和舒适，治愈后无瘢痕。
本发明提供了一种口腔溃疡喷雾剂，包括以下体积份数的组分：
占芭花醇提取物75～85份、干细胞提取物5～15份、去离子水3～8份、防腐剂2～6份和维生素B2 0.1～0.5份；
所述干细胞提取物中外泌体蛋白质的浓度为25～35mg/mL；
所述口腔溃疡喷雾剂的pH值为6.6～7.11。
优选的，包括以下体积份数的组分：
占芭花醇提取物80份、干细胞提取物10份、去离子水5份、防腐剂4份和维生素B20.3份；
所述干细胞提取物中外泌体蛋白质的浓度为30mg/mL。
优选的，所述占芭花醇提取物的制备方法，包括以下步骤：
1)将占芭花与第一乙醇溶液混合后提取1～2h，过滤后得到第一滤液和第一滤渣；所述第一乙醇溶液的体积百分含量为60～70％；
2)将所述步骤1)得到的第一滤渣与第二乙醇溶液混合后提取1～2h，过滤后得到第二滤液和第二滤渣；所述第二乙醇溶液的体积百分含量为55～65％；
3)将所述步骤2)得到的第二滤渣与第三乙醇溶液混合后提取1～2h，过滤后得到第三滤液和第三滤渣；所述第三乙醇溶液的体积百分含量为55～65％；
4)将所述步骤1)得到的第一滤液、步骤2)得到的第二滤液和步骤3)得到的第三滤液混合，得到滤液，将所述滤液减压浓缩，得到占芭花醇提取物；所述占芭花醇提取物的体积与占芭花的重量比为(1～5):1。
优选的，所述步骤1)占芭花与第一乙醇溶液的质量比为1:(15～20)。
优选的，所述步骤2)第一滤渣与第二乙醇溶液的质量比为1:(8～12)。
优选的，所述步骤3)第二滤渣与第三乙醇溶液的质量比为1:(6～8)。
优选的，所述干细胞提取物的制备方法包括以下步骤：
a、采用常规培养人脐带间充质干细胞的方法，得到人脐带间充质干细胞和人脐带间充质干细胞培养上清液；所述人脐带间充质干细胞的数量为3×108个；
b、将所述人脐带间充质干细胞与生理盐水混合后进行超声破碎，采用常规方法收集外泌体；
c、采用常规方法收集人脐带间充质干细胞培养上清液中的外泌体；
d、将所述步骤c得到的外泌体、步骤d得到的外泌体和生理盐水混合后，得到干细胞提取物，所述干细胞提取物中外泌体蛋白质的浓度为25～35mg/mL。
优选的，所述步骤c得到的外泌体进行BCA蛋白浓度测定，外泌体蛋白质的浓度为9.5mg/ml。
优选的，所述步骤d得到的外泌体进行BCA蛋白浓度测定，外泌体蛋白质的浓度为53.6mg/ml。
本发明还提供了上述技术方案所述的口腔溃疡喷雾剂的制备方法，包括：将所述维生素B2经碱溶液溶解后与占芭花醇提取物、去离子水混合后，再依次与防腐剂、干细胞提取物混合，得到口腔溃疡喷雾剂。
本发明提供了一种口腔溃疡喷雾剂，包括以下体积份数的组分：占芭花醇提取物75～85份、干细胞提取物5～15份、去离子水3～8份、防腐剂2～6份和维生素B2 0.1～0.5份；所述干细胞提取物中外泌体蛋白质的浓度为25～35mg/mL；所述口腔溃疡喷雾剂的pH值为6.6～7.11。
在本发明中，所述占芭花醇提取物内含多种芳香醇类化合物如芳香醇和香叶醇，使用占芭花醇提取物具有抗炎、止痒、补水和修复作用；干细胞提取物中的外泌体蛋白质有效改善口腔局部炎症，促进口腔上皮细胞生长从而修复瘢痕部位；维生素B2对口腔溃疡的治疗有促进的效果。采用本发明提供的口腔溃疡喷雾剂治愈口腔溃疡后，无瘢痕。
本发明的有益之处在于：
本发明提供的口腔溃疡喷雾剂治疗效果好，使用时感觉温和舒适，治愈后无瘢痕，对口腔溃疡患者的总有效率为97.22％。而且所用原料均为食品级，不含抗生素和激素，对口腔喉咙温和无刺激、无毒副作用。
附图说明
图1为患者使用口腔溃疡喷雾剂第1天口腔溃疡愈合结果；
图2为患者使用口腔溃疡喷雾剂第4天口腔溃疡愈合结果；
图3为患者使用口腔溃疡喷雾剂第8天口腔溃疡愈合结果；
图4为患者使用口腔溃疡喷雾剂第10天口腔溃疡愈合结果。
具体实施方式
本发明提供了一种口腔溃疡喷雾剂，包括以下体积份数的组分：占芭花醇提取物75～85份、干细胞提取物5～15份、去离子水3～8份、防腐剂2～6份和维生素B2 0.1～0.5份；所述干细胞提取物中外泌体蛋白质的浓度为25～35mg/mL；所述口腔溃疡喷雾剂的pH值为6.6～7.11。
本发明提供的口腔溃疡喷雾剂包括体积份数为75～85份的占芭花醇提取物，优选为78～82份，更优选为80份。
在本发明中，所述占芭花醇提取物的制备方法，优选包括以下步骤：
1)将占芭花与第一乙醇溶液混合后提取1～2h，过滤后得到第一滤液和第一滤渣；所述第一乙醇溶液的体积百分含量为60～70％；
2)将所述步骤1)得到的第一滤渣与第二乙醇溶液混合后提取1～2h，过滤后得到第二滤液和第二滤渣；所述第二乙醇溶液的体积百分含量为55～65％；
3)将所述步骤2)得到的第二滤渣与第三乙醇溶液混合后提取1～2h，过滤后得到第三滤液和第三滤渣；所述第三乙醇溶液的体积百分含量为55～65％；
4)将所述步骤1)得到的第一滤液、步骤2)得到的第二滤液和步骤3)得到的第三滤液混合，得到滤液，将所述滤液减压浓缩，得到占芭花醇提取物；所述占芭花醇提取物的体积与占芭花的重量比为(1～5):1。
本发明优选将占芭花与第一乙醇溶液混合后提取1～2h，过滤后得到第一滤液和第一滤渣。在本发明中，所述提取的时间更优选为1.5h。在本发明中，所述占芭花优选为占芭花鲜花。在本发明中，所述第一乙醇溶液的体积百分含量优选为60～70％，更优选为65％。在本发明中，所述占芭花与第一乙醇溶液的质量比优选为1:(15～20)，更优选为1:18。在本发明中，所述提取优选采用常规中药材常用的回流萃取法进行即可。
本发明优选将得到的第一滤渣与第二乙醇溶液混合后提取1～2h，过滤后得到第二滤液和第二滤渣。在本发明中所述提取的时间更优选为1.5h。在本发明中，所述第二乙醇溶液的体积百分含量优选为55～65％，更优选为60％。在本发明中，所述第一滤渣与第二乙醇溶液的质量比优选为1:(8～12)，更优选为1:10。
本发明优选将得到的第二滤渣与第三乙醇溶液混合后提取1～2h，过滤后得到第三滤液和第三滤渣。在本发明中，所述提取的时间更优选为1.5h。在本发明中，所述第三乙醇溶液的体积百分含量优选为55～65％，更优选为60％。在本发明中，所述第二滤渣与第三乙醇溶液的质量比优选为1:(6～8)。
在本发明中，所述占芭花醇提取物中含有多种芳香醇类化合物(占总成分24.92％)如芳香醇(约占5.97％)和香叶醇(约占10.2％)。在本发明中，所述占芭花醇提取物具有抗炎、止痒、补水和修复的作用。
本发明提供的口腔溃疡喷雾剂包括体积分数为5～15份的干细胞提取物，优选为8～12份，更优选为10份。
在本发明中，所述干细胞提取物的制备方法优选包括以下步骤：
a、采用常规培养人脐带间充质干细胞的方法，得到人脐带间充质干细胞和人脐带间充质干细胞培养上清液；所述人脐带间充质干细胞的数量为3×108个；
b、将所述人脐带间充质干细胞与生理盐水混合后进行超声破碎，采用常规方法收集外泌体；
c、采用常规方法收集人脐带间充质干细胞培养上清液中的外泌体；
d、将所述步骤c得到的外泌体、步骤d得到的外泌体和生理盐水混合后，得到干细胞提取物，所述干细胞提取物中外泌体蛋白质的浓度为25～35mg/mL。
本发明优选采用常规培养人脐带间充质干细胞的方法，得到人脐带间充质干细胞和人脐带间充质干细胞培养上清液。本发明对所述人脐带间充质干细胞的来源没有特殊限定，采用常规即可。在本发明中，所述培养得到的人脐带间充质干细胞的数量优选为3×108个。
本发明优选将所述人脐带间充质干细胞与生理盐水混合后进行超声破碎，采用常规方法收集外泌体。在本发明中，所述人脐带间充质干细胞的数量与生理盐水的体积比优选为3×108个:300mL。
在本发明中，所述超声破碎的参数设置优选为600W；4℃；工作2s间歇2s超声10min。
本发明优选将得到的超声破碎物在300g、4℃下离心10min，去除细胞碎片，收集上清，然后2500g、4℃离心30min，以去除细胞凋亡小体，收集上清，13000g离心1h去除血小板杂质，收集上清，最后100000g、4℃离心70min，得到外泌体。本发明将得到的外泌体进行BCA蛋白浓度测定，外泌体蛋白质的浓度为9.5mg/ml。
本发明优选采用常规方法收集人脐带间充质干细胞培养上清液中的外泌体。本发明优选将人脐带间充质干细胞培养上清液在2000g、4℃下离心10min，去除细胞碎片，收集上清，13000g离心1h去除血小板杂质，收集上清，最后100000g、4℃离心70min，得到外泌体。本发明将得到的外泌体进行BCA蛋白浓度测定，外泌体蛋白质的浓度为53.6mg/ml。
本发明将破碎人脐带间充质干细胞得到的外泌体与人脐带间充质干细胞培养上清液得到的外泌体分别溶于生理盐水后等体积混合后，得到干细胞提取物。
在本发明中，所述干细胞提取物中外泌体蛋白质的浓度为25～35mg/mL，优选为30mg/mL。在本发明中，所述干细胞提取物有效改善口腔局部炎症、促进口腔上皮细胞生长从而修复瘢痕部位。
本发明提供的口腔溃疡喷雾剂包括体积份数为3～8份的去离子水，优选为5份。
本发明提供的口腔溃疡喷雾剂包括体积份数为2～6份的防腐剂，优选为4份。
在本发明中，所述防腐剂的制备方法优选包括：将对羟基苯甲酸甲酯与1,3-丁二醇溶液混合、搅拌至澄清，充分溶解，得到防腐剂。在本发明中，所述对羟基苯甲酸甲酯的质量与1,3-丁二醇溶液的体积比优选为15g:250ml。本发明对所述1,3-丁二醇溶液的浓度没有特殊限定，采用常规溶解对羟基苯甲酸甲脂的浓度即可。
本发明提供的口腔喷雾剂包括体积份数为0.1～0.5份的维生素B2，优选为0.3份。在本发明中，所述维生素B2的对口腔溃疡的治疗有促进的效果。
在本发明中，所述口腔喷雾剂的pH值为6.6～7.11。在本发明中，调节口腔溃疡喷雾剂使用的试剂优选为氢氧化钠溶液和柠檬酸。在本发明中，所述氢氧化钠的浓度优选为1mol/L。
本发明还提供了上述技术方案所述的口腔溃疡喷雾剂的制备方法，包括：将所述维生素B2经碱溶液溶解后与占芭花醇提取物、去离子水混合后，再依次与防腐剂、干细胞提取物混合，得到口腔溃疡喷雾剂。
在本发明中，所述碱溶液优选为氢氧化钠溶液。在本发明中，所述氢氧化钠的浓度优选为1mol/L。
在本发明中，所述口腔溃疡喷雾剂略呈淡黄色、透明澄清，味微苦。
在本发明中，所述口腔溃疡喷雾剂的使用方法优选包括：早、中、晚和睡前各1次，5ml/次，共4次，每次给药后30分钟内不得饮酒或进食。
下面结合具体实施例对本发明提供的技术方案做进一步详细的介绍，本发明的技术方案包括但不限于以下实施例。
实施例1
口腔溃疡喷雾剂的制备方法：
步骤一：防腐剂的配制：准确称量15g对羟基苯甲酸甲酯，加入250ml 1,3-丁二醇溶液，搅拌至澄清，充分溶解即可，静置半小时观察有无不溶物析出，得到防腐剂；
步骤二：按实际配制液体量准确称量维生素B2 0.06g，加入少许氢氧化钠溶液，充分溶解后，准确量取占芭花醇提取物16ml，加入去离子水1ml；
步骤三：取防腐剂0.08ml，混合入上述溶液，搅拌，使得混合均匀；
步骤四：取干细胞提取物2ml，搅拌，使得混合均匀，最后用氢氧化钠或柠檬酸钠调节pH值为7.0，即得口腔溃疡喷雾剂20ml。
占芭花醇提取物的制备方法为：取占芭花鲜花，回流提取3次：第1次加18倍量的65％乙醇，提取1.5h；2次加10倍60％乙醇，提取1.5h；第3次加8倍60％乙醇，提取1.5h。每次三层纱布过滤，合并滤液，将滤液减压浓缩至占芭花鲜花重量5倍体积，得占芭花醇提取物；占芭花醇提取物中含有多种芳香醇类化合物(占总成分24.92％)如芳香醇(约占5.97％)和香叶醇(约占10.2％)。
干细胞提取物的制备方法为：人脐带间充干细胞体外规模化培养：选取人脐带间充干细胞种子细胞，按1×105个细胞密度接种至四个T175培养瓶(GMP级)培养，按照常规细胞培养操作待细胞融率达95％以上时，消化后离心后收集细胞，再按4×107个细胞密度传代接种至细胞工厂(GMP级)，加入无酚红完全培养基进行培养，培养过程中进行一次全量换液，待到细胞融合率达95％以上时即可收获得到3×108的脐带间充质干细胞，并收集人脐带间充质干细胞培养上清液；
收集的人脐带间充质干细胞进行超声波破碎：按1×108细胞数量加到100ml生理盐水(0.9％的氯化钠水溶液)，细胞破碎仪参数设置为(600W；4℃；工作2s间歇2s超声10min)，300g、4℃离心10min去除细胞碎片，收集上清，然后2500g、4℃离心30min以去除细胞凋亡小体，收集上清，13000g离心1h去除血小板杂质，收集上清，最后100000g、4℃离心70min，得到外泌体沉淀，进行BCA蛋白浓度测定，外泌体蛋白质的浓度为9.5mg/ml；
收集间充质干细胞培养上清液，2000g、4℃离心10min去除细胞碎片，收集上清，13000g离心1h去除血小板杂质，收集上清，最后100000g、4℃离心70min，得到外泌体沉淀，进行BCA蛋白浓度测定，外泌体蛋白质的浓度为53.6mg/ml；
破碎后间充质干细胞外泌体后与干细胞培养上清液外泌体根据所测蛋白浓度按比例混合再一起加到生理盐水里得到所需终蛋白浓度(30mg/ml)，搅拌至均匀即得干细胞提取物。
实施例2
口腔溃疡喷雾剂的制备方法：
步骤一：防腐剂的配制：准确称量15g对羟基苯甲酸甲酯，加入250ml 1,3-丁二醇溶液，搅拌至澄清，充分溶解即可，静置半小时观察有无不溶物析出，得到防腐剂；
步骤二：按实际配制液体量准确称量维生素B2 0.02g，加入少许氢氧化钠溶液，充分溶解后，准确量取实施例1制备的占芭花醇提取物14ml，加入去离子水4ml；
步骤三：取防腐剂0.08ml，混合入上述溶液，搅拌，使得混合均匀；
步骤四：取实施例1制备的干细胞提取物1ml，搅拌，使得混合均匀，最后用氢氧化钠或柠檬酸钠调节pH值为7.0，即得口腔溃疡喷雾剂20ml。
实施例3
口腔溃疡喷雾剂的制备方法：
步骤一：防腐剂的配制：准确称量15g对羟基苯甲酸甲酯，加入250ml 1,3-丁二醇溶液，搅拌至澄清，充分溶解即可，静置半小时观察有无不溶物析出，得到防腐剂；
步骤二：按实际配制液体量准确称量维生素B2 0.1g，加入少许氢氧化钠溶液，充分溶解后，准确量取实施例1制备的占芭花醇提取物15ml，加入去离子水1.86ml；
步骤三：取防腐剂0.04ml，混合入上述溶液，搅拌，使得混合均匀；
步骤四：取实施例1制备的干细胞提取物3ml，搅拌，使得混合均匀，最后用氢氧化钠或柠檬酸钠调节pH值为7.0，即得口腔溃疡喷雾剂20ml。
实施例1制备的口腔溃疡喷雾剂的理化指标如下：
性状：本品为定量按压式气雾剂，瓶内液体略呈淡黄色、透明澄清，味微苦的口腔溃疡喷雾剂。
质量检测：(1)用pH试纸蘸取少量口腔喷雾液体，测得pH值为6-7。(2)将液体分别封装于透明喷瓶中，于4℃的冰箱冷藏和于37℃的恒温箱内放置一周左右观察无分层现象。静置3个月，亦无分层现象，用后感觉无变化，气味无变化，无变质现象。
刺激性检测：采取动物实验，取豚鼠32只，随机分成4组，多次给药同单次给药方式在同一部位连续给药，给药时间和计量相同，连续使用4d。皮肤测试评分结果显示单次及多次使用喷雾剂和乙醇溶液后，无红斑和水肿(平均反应值<0.5)，表明口腔溃疡喷雾剂较为温和无刺激。评分标准参照《化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则》课题研究组.化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究技术指导原则.国家食品药品监督管理局，2005:2-7。结果如表1所示。
表1口腔喷雾液体对皮肤刺激性平均分值
实施例4
口腔溃疡治疗效果试验
一般性资料：
以2018年1月～2018年12月在使用实施例1制备的口腔溃疡喷雾剂治疗的72例口腔溃疡患者为研究对象，其中男41例，女31例，年龄9～71岁，平均(41.6±3.0)岁。纳入标准：①临床诊断确诊为口腔溃疡；②患者同意本次研究且签署知情同意书。排除标准：排除口腔恶性疾病、免疫***疾病患者。两组患者一般资料具有可比性(P>0.05)。
方法：
受试前给予患者复方硼砂溶液进行含漱，运用消毒棉签吸干表面。患者则使用实施例1制备的口腔溃疡喷雾剂，早、中、晚和睡前各一次，5ml/次，共4次。所有患者用药后，对患者进行30分钟的观察，观察是否有任何可能的急性过敏反应的迹象，并且每次给药后30分钟内不得饮酒或进食。
观察评价疗效指标：
在接受口腔喷雾治疗的第1、4、8和10天对溃疡部位大小、渗出物水平(见表2)进行测量评价。得出患者组内及组间治疗前后疼痛评分，采用VAS疼痛评分对患者疼痛程度进行评分，总分为10分，0分表示无痛，分数越高表示疼痛越严重。
表2渗出物水平分级
分级 渗出物水平(Exudation Level)
0 无
1 少量渗出物
2 中等渗出物
3 大量渗出物，伴有假膜
最后，采用民意调查评分法比较组间患者疗效。显效：患者3d内疼痛和溃疡消失；有效：患者疼痛减轻，溃疡4～7d内愈合；无效：患者疼痛加重，溃疡未愈合。本次治疗数据采集严格按照统计学原则并用软件SPSS17.0分析处理，P<0.05表示差异具有统计学意义。
结果显示，使用口腔喷雾剂后4天内基本痊愈，到第10天观察溃疡部位瘢痕恢复如初，口腔粘膜修复效果良好。治疗后，患者总有效率97.22％，组间数据差异具有统计学意义(P<0.05)。结果见表3～6。
表3两组患者治疗效果[n(％)]
表4溃疡大小减少情况
时间 组别 溃疡大小(mm) P值
第1天 实验组 5.20±0.20 0.207
第4天 实验组 2.70±2.40 0.012
第8天 实验组 0.20±0.71 0.000
第10天 实验组 0.00±0.00 0.000
表5渗出物水平比较
时间 组别 渗出物水平 P值
第1天 实验组 1.40±0.10 0.441
第4天 实验组 0.60±0.20 0.030
第8天 实验组 0.00±0.00 0.000
第10天 实验组 0.00±0.00 0.000
表6溃疡疼痛VAS评分比较
时间 组别 VAS评分 P值
第1天 实验组 7.00±0.40 0.081
第4天 实验组 2.50±1.36 0.010
第8天 实验组 0.00±0.71 0.000
第10天 实验组 0.00±0.00 0.000
对比例1
一般性资料：
以2018年1月～2018年12月在使用本口腔喷雾治疗的72例口腔溃疡患者为研究对象，其中男41例，女31例，年龄9～71岁，平均(41.6±3.0)岁。纳入标准：①临床诊断确诊为复发性口腔溃疡；②口腔溃疡直径少于8cm、1～3个不等、持续时间少于72h。排除标准：排除口腔恶性疾病、免疫***疾病患者。
对照组患者采用生理盐水作为安慰剂进行喷涂，早、中、晚和睡前各一次，5ml/次，共4次。其余同实施例3。
治疗后，对照组的总有效率为66.67％，组间数据差异具有统计学意义(P<0.05)，结果见表7～10。
表7两组患者治疗效果[n(％)]
组别 显著 有效 无效 总有效率
对照组 20(55.56) 4(11.11) 12(33.33) 24(66.67)
χ<sup>2</sup>检验 2.130 2.144 8.881 9.116
P值 0.152 0.108 0.014 0.003
表8溃疡大小减少情况
时间 组别 溃疡大小(mm) P值
第1天 对照组 4.80±1.44 0.207
第4天 对照组 3.70±0.80 0.012
第8天 对照组 2.30±1.45 0.000
第10天 对照组 1.80±1.80 0.000
表9渗出物水平比较
时间 组别 渗出物水平 P值
第1天 对照组 1.80±0.30 0.441
第4天 对照组 1.50±0.70 0.030
第8天 对照组 0.60±0.30 0.000
第10天 对照组 0.50±0.22 0.000
表10溃疡疼痛VAS评分比较
时间 组别 VAS评分 P值
第1天 对照组 6.70±0.70 0.081
第4天 对照组 4.10±1.35 0.010
第8天 对照组 2.30±0.78 0.000
第10天 对照组 0.80±0.80 0.000
由以上实施例可以得出，本发明提供的口腔溃疡喷雾剂治疗效果好，使用时感觉温和舒适，治愈后无瘢痕，对口腔溃疡患者的总有效率为97.22％。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种口腔溃疡喷雾剂，其特征在于，包括以下体积份数的组分：
占芭花醇提取物75～85份、干细胞提取物5～15份、去离子水3～8份、防腐剂2～6份和维生素B2 0.1～0.5份；
所述干细胞提取物中外泌体蛋白质的浓度为25～35mg/mL；
所述口腔溃疡喷雾剂的pH值为6.6～7.11。
2.根据权利要求1所述的口腔溃疡喷雾剂，其特征在于，包括以下体积份数的组分：
占芭花醇提取物80份、干细胞提取物10份、去离子水5份、防腐剂4份和维生素B2 0.3份；
所述干细胞提取物中外泌体蛋白质的浓度为30mg/mL。
3.根据权利要求1或2所述的口腔溃疡喷雾剂，其特征在于，所述占芭花醇提取物的制备方法，包括以下步骤：
1)将占芭花与第一乙醇溶液混合后提取1～2h，过滤后得到第一滤液和第一滤渣；所述第一乙醇溶液的体积百分含量为60～70％；
2)将所述步骤1)得到的第一滤渣与第二乙醇溶液混合后提取1～2h，过滤后得到第二滤液和第二滤渣；所述第二乙醇溶液的体积百分含量为55～65％；
3)将所述步骤2)得到的第二滤渣与第三乙醇溶液混合后提取1～2h，过滤后得到第三滤液和第三滤渣；所述第三乙醇溶液的体积百分含量为55～65％；
4)将所述步骤1)得到的第一滤液、步骤2)得到的第二滤液和步骤3)得到的第三滤液混合，得到滤液，将所述滤液减压浓缩，得到占芭花醇提取物；所述占芭花醇提取物的体积与占芭花的重量比为(1～5):1。
4.根据权利要求3所述的口腔溃疡喷雾剂，其特征在于，所述步骤1)占芭花与第一乙醇溶液的质量比为1:(15～20)。
5.根据权利要求3所述的口腔溃疡喷雾剂，其特征在于，所述步骤2)第一滤渣与第二乙醇溶液的质量比为1:(8～12)。
6.根据权利要求3所述的口腔溃疡喷雾剂，其特征在于，所述步骤3)第二滤渣与第三乙醇溶液的质量比为1:(6～8)。
7.根据权利要求1或2所述的口腔溃疡喷雾剂，其特征在于，所述干细胞提取物的制备方法包括以下步骤：
a、采用常规培养人脐带间充质干细胞的方法，得到人脐带间充质干细胞和人脐带间充质干细胞培养上清液；所述人脐带间充质干细胞的数量为3×108个；
b、将所述人脐带间充质干细胞与生理盐水混合后进行超声破碎，采用常规方法收集外泌体；
c、采用常规方法收集人脐带间充质干细胞培养上清液中的外泌体；
d、将所述步骤c得到的外泌体、步骤d得到的外泌体和生理盐水混合后，得到干细胞提取物，所述干细胞提取物中外泌体蛋白质的浓度为25～35mg/mL。
8.根据权利要求7所述的口腔溃疡喷雾剂，其特征在于，所述步骤c得到的外泌体进行BCA蛋白浓度测定，外泌体蛋白质的浓度为9.5mg/ml。
9.根据权利要求7所述的口腔溃疡喷雾剂，其特征在于，所述步骤d得到的外泌体进行BCA蛋白浓度测定，外泌体蛋白质的浓度为53.6mg/ml。
10.权利要求1～9任一项所述的口腔溃疡喷雾剂的制备方法，包括：将所述维生素B2经碱溶液溶解后与占芭花醇提取物、去离子水混合后，再依次与防腐剂、干细胞提取物混合，得到口腔溃疡喷雾剂。
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