CN110003354A - 一种具有抗氧化功能的沙棘多糖闪式制备工艺 - Google Patents

一种具有抗氧化功能的沙棘多糖闪式制备工艺 Download PDF

Info

Publication number
CN110003354A
CN110003354A CN201910379057.XA CN201910379057A CN110003354A CN 110003354 A CN110003354 A CN 110003354A CN 201910379057 A CN201910379057 A CN 201910379057A CN 110003354 A CN110003354 A CN 110003354A
Authority
CN
China
Prior art keywords
polysaccharide
fructus hippophae
hippophae polysaccharide
extraction
hrp
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201910379057.XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN110003354B (zh
Inventor
周鸿立
冉丽梅
于思洋
武美馥
李亚平
胡政宇
彭小玉
王佳琦
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hefei Jiuzhou Longteng Scientific And Technological Achievement Transformation Co ltd
Yanshou Dingxin Bioengineering Co ltd
Original Assignee
Jilin Institute of Chemical Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jilin Institute of Chemical Technology filed Critical Jilin Institute of Chemical Technology
Priority to CN201910379057.XA priority Critical patent/CN110003354B/zh
Publication of CN110003354A publication Critical patent/CN110003354A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110003354B publication Critical patent/CN110003354B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0003—General processes for their isolation or fractionation, e.g. purification or extraction from biomass
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本专利提供了一种沙棘多糖提取物的制备方法，以转速、时间、温度、料液比四个因素探究闪式提取沙棘多糖的工艺，确定最佳工艺为：转速4900~5100r/min，时间10~20s，温度80~90℃，液料比35:1~40:1，其提取率达到15.25±2.5%；由高效液相测得沙棘多糖的单糖组成由Man、Rib、Rha、GluA、GalA、Glu、Gal、Xyl、Arab和Fuc构成、分子量范围47745～380586 Da；沙棘多糖对·OH、DPPH·及ABTS·均有较强的清除能力。本发明设备要求简单，操作容易，成本低廉，适合中小型企业大规模生产，制得的多糖具有较高的抗氧化活性。

Description

一种具有抗氧化功能的沙棘多糖闪式制备工艺
技术领域
本发明涉及植物提取技术领域，具体涉及一种沙棘多糖提取物的制备方法。
背景技术
沙棘(Hippophae rhamnoides Linn.)是胡颓子科（Elaeagnaceae）沙棘属的灌木或乔木，其特性是耐旱、耐寒、抗风沙，可以在盐碱化土地上生存，因此被广泛用于水土保持和沙漠化。早在1977年我国***首次将沙棘正式列入《中国药典》，并公布了沙棘为药食两用的植物。沙棘的果、叶及种子的提取物均具有一定的生物活性，沙棘果实含有丰富的营养物质如维生素、脂肪酸、黄酮、多糖和人体所需各种氨基酸等，主要有利肺、养胃、健脾、活血等多种药理功效。
杨宏志等采用热水提取法（10.24%）、微波辅助法（1.90%）、超声波法（8.81%）、酶法（6.59%）和酶法-超声波协同萃取法（8.15%）对沙棘多糖的提取工艺进行优化。结果热水提取法的提取率最高，但操作时间长且重复过程多。超声波辅助提取破碎原料细胞壁，促进多糖的溶出，简单便捷，提高得率，引起关注。微波辅助提取法利用微波穿透能力强和加热迅速的特点，促进多糖的溶出。酶辅助提取法是利用酶反应的高度专一性将植物细胞壁降解，使得生物活性物质释放。但超声波频接近人的声音频率，对人体有一定的伤害；超声仪器的容积及输出功率有限，难以满足规模化的工业生产。微波可能导致多糖活性降低或丧失、被降解、结构变化等。酶辅助提取法对条件要求高，需要考虑最适温度、pH、作用时间、酶浓度等因素。因此，如何克服上述问题，选择主要活性成分沙棘多糖的提取研究的一个重要课题。
20世纪末，根据组织破碎的概念研究提取法，开发出了仅用30s就能完成提取步骤的组织破碎提取机，想对比与其他提取方法，该装置快速完成提取工作，所以命名为闪式提取法。闪式提取法较其他提取方法有着明显的特点，在提取过程中可以更好地保护植物的有效成分，操作便捷且提高工作效率，明显的升高提取率且节约能源，适合提取具有天然活性成分的物质。闪式提取法用来提取多糖也是近些年来受到关注的一种新型提取方法，赵宏运用闪式提取法通过正交试验设计考察了电压、料液比和提取时间对沙棘多糖提取率的影响。结果发现，当电压为225V，提取时间110s，固液比为1:30g/mL时，对沙棘多糖的提取效果最好，提取率达到0.943%。
程振玉等人运用响应面优化五味子多糖进行闪式提取工艺，并确定了最佳提取条件分别为提取时间127s、电压190V、提取温度78℃、液料比1:20mL/g，提取次数2次，与其他方法相比提取率有大幅度提升，达到20.97%。温剑文等人对牛大力多糖的闪式提取工艺进行优化实验，在料液比1:30mL/g、提取时间8min、温度25℃、电机频率40Hz的条件下，牛大力多糖提取率达到3.13%。李岩等人对白蔹多糖的闪式提取工艺，得到最佳提取工艺条件分别为电压220V、料液比1:25g/mL，提取时间为110s，提取率9.92%。黄越燕等人采用超声波提取法、热水回流提取法和闪式提取法对龙葵总多糖的提取率进行考察，并对闪式提取工艺进行优化，得到最佳闪式提取条件为料液比30:1g/mL，提取2次、提取时间2min、电压80V。三种方法的多糖提取率分别为0.32%、0.38%、0.46%，闪式提取法较其他两种方法的多糖提取率有显著提高。
闪式提取法是近年发展起来的一种新型植物有效成分的提取方法，具有提取时间短、提取率高、无须加热的优点，目前已越来越多地应用于植物多糖提取研究中，本专利以沙棘为研究对象，考察了沙棘多糖闪式提取中提取时间、料液比、提取温度等因素对提取率的影响，并通过响应面法对沙棘多糖闪式提取工艺进行优化研究，同时测定了单糖组成、分子量和抗氧化活性，以期为其进一步的开发利用提供参考依据。
发明内容
本文采用闪式提取法提取沙棘多糖，优化得到最佳提取工艺参数，该提取方法较之前传统的热水提取法更加高效、快捷、提取率高等优点。
为了实现上述目标，本发明采用如下的技术方案，其特征在于，包括以下步骤：
（1）通过进行工艺优化试验找出闪式提取沙棘多糖的最优条件，如转速
4900~5100r/min、提取时间10~20s、温度80~90℃、料液比35:1~40:1mL/g。
（2）依据闪式提取的优化工艺对沙棘提取粗多糖进行醇沉，将沙棘提取液按照1:20的比列浓缩，然后用95%以上的乙醇将浓缩液醇沉至80%，将其放入4℃冰箱中冷藏过夜，其中上清液回收，沉淀物利用8000r/min进行离心，沉淀物冷冻干燥即得沙棘粗多糖粉末。
（3）利用DEAE纤维素对多糖进行脱蛋白脱色，用0.6mol/L的NaCl溶液洗脱，流速控制在1mL/min。
（4）将纯化后的沙棘多糖粉末乙醇对其进行分级分离，分别得到20%、40%、60%和80%的乙醇收集的沉淀部分，取40%和60%的分级沉淀为研究的多糖组分，命名为HRP-1和HRP-2。
（3）HRP-1和HRP-2分别在3368，1743，1621，1440，1050和817 cm-1处具有明显的特征谱带，表明多糖中有氧氢键、糖醛酸、碳氧键、碳氢键、吡喃内酯、羟基和 α-吡喃糖的吸收峰。
（4）分级醇沉多糖过葡聚糖凝胶后，采用高效液相法测定沙棘多糖单糖组成。HRP-1中单糖摩尔比为，mannose: ribose: rhamnose: glucuronic acid: galacturonic acid:glucose: galactose: xylose: arabinose = 4.55:1.0:5.46:1.27:97.64:15.18:10.55:2.36:45.18，HRP-2中单糖摩尔比为mannose: ribose: rhamnose: glucuronic acid:galacturonic acid:glucuronic acid: Grape Sugar: Galactose: Xylose: ArabicSugar: Fucose = 5.80:1.00:10.20:2.20:26.00:15.00:13.00:2.60:31.80:2.20
（5）高效液相法测定沙棘多糖分子量范围为47745～380586 Da。
（6）在清除·OH、ABTS·和DPPH·的能力三个体外抗氧化评级体系中，HRP-1组分的IC50分别是1.01±0.04mg/mL、0.94±0.07mg/mL、0.29±0.05mg/mL，HRP-2组分的IC50分别为0.59±0.03mg/mL、0.99±0.09mg/mL、0.30±0.02mg/mL，2者均有较强的抗氧化能力。
本发明的创新点：本发明运用响应面优化闪式提取沙棘多糖工艺，研究结果表明其提取率提高了近1倍，并测定了单糖组成、分子量和抗氧化活性，全面评价闪式提取沙棘多糖工艺，其更加高效、快捷、生物活性好，值得开发推广。
附图说明
图1是转速对沙棘多糖提取率的影响；图2提取时间对沙棘多糖提取率的影响；图3是温度对沙棘多糖提取率的影响；图4是料液比对沙棘多糖提取率的影响；图5是沙棘多糖清除·OH活性；图6是沙棘多糖清除ABTS·活性；图7是沙棘多糖清除DPPH·活性。
具体实施方式
下面通过具体实施案例对本发明作进一步说明。
实施方案一确定多糖提取率最佳单因素条件
将冷冻的沙棘果去杂后用2:1的石油醚脱脂12~16h，过滤得滤渣备用。
探究闪式提取沙棘多糖的最佳单因素条件，选取转速、提取时间、温度、料液比四个因素为考察因素，以多糖提取率为响应值，找到四个单因素的最佳水平，每组单因素分别做三次平行实验同时取平均值做SD误差线。
（1）转速对沙棘多糖提取率的影响
称取沙棘果5g，液料比40:1，温度80℃，提取时间20s，以水为提取溶剂，考察转速3000~7000r/min对多糖提取率的影响。
（2）提取时间对沙棘多糖提取率的影响
称取沙棘果5g，液料比40:1，温度80℃，转速5000r/min，以水为提取溶剂，考察时间5~25s对多糖提取率的影响。
（3）提取温度对沙棘多糖提取率的影响
称取沙棘果5g，液料比40:1，提取时间20s，转速5000r/min，以水为提取溶剂，考察提取温度60~100℃对多糖提取率的影响。
（4）液料比对沙棘多糖提取率的影响
称取沙棘果5g，提取时间20s，提取温度80℃，转速5000r/min，以水为提取溶剂，考察液料比20:1~60:1mg/L对多糖提取率的影响。
由说明书附图1-4，沙棘多糖闪式提取工艺的最佳单因素最优条件为：转速4977.48r/min，时间15.09s，温度85.01℃，液料比37.89。
实施方案二 Box-Benhnken实验设计探究多糖提取率最佳工艺
在单因素试验的基础上，对转速（A）、时间（B）、温度（C）、料液比（D）进行4因素3水平，利用Design-Expert软件中的Box-Behnken试验设计，优化闪式提取法沙棘多糖的工艺，设计四因素三水平的响应面分析实验，如见表1。
表1响应面实验因素水平表
响应面实验设计及结果，由Design－Expert 8.0.6统计分析软件的实验设计功能可知，以沙棘多糖提取率为响应值，以转速（A）、时间（B）、温度（C）、料液比（D）为变量建立四因素三水平的组合试验设计包括29组实验方案，每个方案进行三组测量取平均值。具体试验设计如表2。
表2 Box-Behnken实验设计及结果
表3响应面模型方差分析
R2＝0.9717，R2Adj.=0.9433，C.V.%=53.45%
注：***表示极显著差异，P＜0.001；**表示显著差异，P＜0.01；*表示较显著差异，P＜0.05。
利用Design－Expert 8.0.6软件分析通过回归分析表2中数据进行拟合回归，得到转速（A）、时间（B）、温度（C）、料液比（D）四个因素对多糖提取率的二次回归方程：提取率：Y=14.77-0.11A-0.50B-1.57C+0.79D+0.46AB+0.41AC-0.56AD-1.28BC-0.67BD+2.49CD-2.39A2-3.76B2-2.12C2-1.08D2
对表2的模型进行方差分析，结果见表3。此模型的P值小于0.001，说明该响应面回归模型达到高度显著水平；失拟项P值为0.4474大于0.05不显著，说明该模型对本实验拟合程度较好，可以充分的解释相应中的变异。模型中的失拟项代表模型的预测值与实际值不拟合的机率。R2为0.9717，具有较高的拟合度，实验误差较小，表明该模型可以解释97.17%的数据都是较为合理的。
通过回归模型的分析，可以确定最佳提取工艺为转速4977.48r/min，时间15.09s，温度 85.01℃，液料比37.89。在此条件下，沙棘多糖的预测最大提取率为15.0775%，最佳条件下进行三次验证性实验，结果表明沙棘多糖的平均提取率为15.47±3.82 %，此结果表明本试验的数据模型和二次项方程是可靠的。
实施方案三 不同方法对沙棘多糖提取率的比较
表4 不同提取方法的提取条件和提取率
由表中数据可知，提取率较高的三种多糖提取方法为闪式提取法、热水回流提取法和超声波提取法，由于热水回流温度高，提取时间长，能够充分溶解细胞中的有效物质，尤其是对水溶性的多糖。但是热水回流提取法成本较高，耗时较长，同等提取率的条件下，热水回流提取法不利于节能减排。从表中最佳工艺提取条件可知，提取多糖用时最短的两种提取法为闪式提取法和超声波提取法，这两种方法用时较短，提取率较高。
实施方案四沙棘多糖纯化与分离
（1）利用棉状DEAE纤维素脱色脱蛋白，棉状DEAE的预处理：称取一定量的DEAE纤维素，用充足的蒸馏水浸泡24h，然后用0.5mol/L的NaOH浸泡3h，抽滤，用蒸馏水洗至中性，再用0.5mol/L HCl浸泡3h，洗至中性，抽干备用。
（2）沙棘多糖脱蛋白脱色
准确量取100mg上述提取的沙棘粗多糖，将多糖溶解于10mL蒸馏水中并放置在干净的烧杯中。用干燥的移液器将溶解好的粗多糖溶液分别缓慢均匀地滴加至DEAE层析柱中，用0.6mol/L的NaCl溶液洗脱，流速1mL/min，5mL每管分别收集，洗脱过程每量取5管后，利用苯酚-硫酸法对多糖含量进行跟踪测量直至多糖全部洗干净为止。将洗脱下来的的多糖溶液全部收集，旋转蒸发出多余的水分。
（3）透析
将透析并浓缩后的多糖溶液放入处理好的的透析袋，在蒸馏水中透析48h，每隔3-4h更换一次蒸馏水。待透析完成后，将透析袋中的多糖浓缩液冷冻干燥，即得初步纯化的沙棘多糖HRP。
（4）将纯化后的沙棘多糖粉末用少量蒸馏水溶解后用95%乙醇对其进行分级分离。第一步先将多糖溶液醇沉至20%，收集沉淀并将上清液醇沉至浓度40%，同样收集沉淀，保留上清液。以此类推分别得到以20%、40%、60%和80%的乙醇浓度依次收集沉淀部分，实验结果显示其中20%和80%部分沉淀很少，不足以开展后续的实验，取40%和60%的分级沉淀的多糖组分，命名为HRP-1和HRP-2。
实施方案五沙棘单糖组分分析
准确称取纯化后的沙棘多糖样品，置于反应釜中，加入3mL 2mol/L的三氟乙酸（TFA）溶液，封口放入110℃烘箱中水解5h，取上清液蒸干，用甲醇重复洗涤3次，蒸干水解产物。
取上述水解产物，加水溶解定容至10mL，准确移取0.2mL于玻璃离心管中，分别加入0.2mL 0.5mol/L的1-苯基-3-甲基-5-吡唑琳酮（PMP）的甲醇溶液和0.2mL 0.3mol/L的氢氧化钠溶液于70℃水浴加热60min，冷却后加入0.2mL 0.3mol/L的盐酸溶液中和，再加入1mL氯仿萃取，离心取上清液，重复3次，用水稀释定容至5mL备用。
HPLC条件：分离柱：ODS2 C18柱（250×4.6mm2，5μm），流动相：乙腈-0.05mol/mL磷酸盐缓冲pH=6.8（18:82），流速：0.8mL/min，柱温：30℃，紫外检测器，检测波长为245nm，进样量为20μL。测得纯化后沙棘多糖中的单糖及其摩尔比如表5所示。
表5 HRP-1和HRP-2的单糖组成及摩尔比
实施方案六沙棘多糖分子量的测定
配制2mg/mL的沙棘多糖溶液，用0.45μm滤膜过滤，备用。数据处理采用N2000 GPC色谱工作站进行记录。分别用T-40、T-70、T-100、T-400等不同分子量大小的葡聚糖作为标准品建立校正曲线。
HPLC条件：分离柱：KS-804葡聚糖凝胶柱（8.0300mm2），流动相：超纯水，流速：0.8mL/min，柱温：50℃，检测器温度：35℃，示差折光检测器。
表6多糖分子量及其面积比
纯化后沙棘多糖分子量范围为47745～380586 Da。
实施方案七沙棘多糖抗氧化活性分析
（1） HRP-1和HRP-2清除羟基自由基能力测定
不同浓度（0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mg/mL）的HRP-1和HRP-2多糖样品溶液0.2mL，依次向其中加入1.0mL浓度为0.012%过氧化氢溶液、2.0mLpH=7.4的PBS溶液、1.0mL的0.75mmol/L硫酸亚铁溶液、1mL的0.75mmol/L邻二氮菲溶液混合。混合溶液在37℃水浴锅中保温下放置40min。在510nm处波长检测，以VC作为阳性对照。空白对照组中用蒸馏水代替多糖溶液，清除率按如下公式计算。
式中：A0为对照品吸光度；A1为含多糖样品吸光度；A2为空白对照吸光度。
由说明书附图5表明随着多糖浓度的增大，HRP-1和HRP-2样品的清除羟基自由基的能力随之提高，即清除率和多糖浓度呈一定量效关系。HRP-1和HRP-2清除羟基自由基的IC50分别为1.01m±0.04g/mL和0.59±0.03mg/mL，从图中可以看出HRP-2清除羟基自由基能力比HRP-1好，且与VC基本一致。HRP抗氧化能力总体趋势显示出多糖的清除羟基自由基能力较好，与阳性对照Vc的趋势基本一致。
（2）对ABTS·清除能力的测定
准确量取5mL 7 mmol/L ABTS溶液和88μL 140mmol/L过硫酸钾（ K2S2O8）溶液，将其混合摇匀，放置在黑暗处12-16小h。使用前稀释ABTS储备溶液直至紫外734nm处吸光度为0.70±0.02。分别取不同浓度（0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mg/mL）的HRP-1和HRP-2多糖样品溶液200µL与稀释好的ABTS溶液2.5mL混合，摇匀30s，在室温下静止放置6min，于紫外734nm处波长检测，以VC作为阳性对照。清除率如下公式计算。
式中：A0为对照品吸光度；Ax为含多糖样品吸光度；Ay为样品空白吸光度。
由说明书附图6表明，随着沙棘多糖浓度提高，HRP-1和HRP-2样品清除ABTS自由基的能力也逐渐增强，即抗氧化活性呈剂量依赖性增加，从图中可以看出HRP-2比HRP-1清除ABTS自由基的能力略强。HRP-1的IC50为0.94±0.07mg/mL，HRP-2的IC50为0.99±0.09mg/mL。
（3）对DPPH·清除能力的测定
制备0.1mmol/L的DPPH溶液：精密称取3.9mg DPPH，用无水乙醇溶解并定容至100mL棕色容量瓶中，避光保存，备用。分别取不同浓度（0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/mL）的HRP-1和HRP-2多糖样品溶液2mL与2mLDPPH溶液，混合均匀后在室温条件下避光放置30min，在紫外517nm处测定吸光度，以VC作为阳性对照。清除率如公式所示。其清除率按如下公式计算。
式中：A0为对照品吸光度；Aa为含多糖样品吸光度；Ab为样品空白吸光度。
由说明书附图7表明随着沙棘多糖浓度提高，HRP-1和HRP-2清除DPPH自由基的能力也逐渐增强，即清除率和多糖浓度呈一定量效关系。从图中可以看出HRP-2比HRP-1清除DPPH自由基能力强。虽然沙棘多糖对DPPH自由基的清除能力稍差于Vc，但是依然表现出较好的清除DPPH自由基的能力，表明沙棘多糖具有良好的抗氧化能力。HRP-1的IC50为0.29±0.05mg/mL，HRP-2的IC50为0.30±0.02mg/mL。
本专利通过闪式提取沙棘多糖的方法，缩短了提取时间，且提取率高，保护植物的有效成分不受热破坏。沙棘多糖经过分离纯化后得到的两个组分HRP-1和HRP-2均具有较好的抗氧化活性，在不同的抗氧化体系中两个组分表现出的抗氧化能力不同，在三个体系中HRP-1组分的IC50分别是1.01±0.04mg/mL、0.94±0.07mg/mL、0.29±0.05mg/mL，HRP-2组分的IC50分别为0.59±0.03mg/mL、0.99±0.09mg/mL、0.30±0.02mg/mL。通过数据结果发现，沙棘多糖的两个组分抗氧化活性良好，说明闪式提取的沙棘多糖具有良好的抗氧化活性。

Claims (8)

1.本发明是一种响应面优化闪式提取沙棘多糖工艺及抗氧化活性的研究。
2.具体实验为：最佳提取工艺，即转速4900~5100r/min，时间10~20s，温度80~90℃，液料比35:1~40:1mL/g；利用DEAE纤维素进行脱蛋白脱色，流速控制在1mL/min；通过红外光谱分析主要官能团；测得沙棘多糖的单糖组成由Man、Rib、Rha、GluA、GalA、Glu、Gal、Xyl、Arab和Fuc构成；测得沙棘多糖的分子量范围为47745～380586，并具有较强的抗氧化活性。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于沙棘多糖的提取时间为10~20s。
4.如权利要求1所述的应用，其特征在于取40%和60%的分级沉淀为研究的多糖组分，命名为HRP-1和HRP-2。
5.如权利要求1所述的应用，其特征在于用红外光谱分析，沙棘多糖具有尖锐的羟基、碳氢键、碳氧键等伸缩振动吸收峰。
6.如权利要求1所述的应用，其特征在于沙棘多糖的单糖组成为Man、Rib、Rha、GluA、GalA、Glu、Gal、Xyl、Arab和Fuc构成。
7.如权利要求1所述的应用，其特征在于由高效液相测得分子量范围为47745～380586Da。
8.如权利要求1所述的应用，其特征在于沙棘多糖清除·OH的IC50为1.0mg/mL，清除ABTS·的IC50为0.18mg/mL，清除DPPH·的IC50为0.4mg/mL，表明沙棘多糖抗氧化活性较强。
CN201910379057.XA 2019-05-08 2019-05-08 一种具有抗氧化功能的沙棘多糖闪式制备工艺 Active CN110003354B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910379057.XA CN110003354B (zh) 2019-05-08 2019-05-08 一种具有抗氧化功能的沙棘多糖闪式制备工艺

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910379057.XA CN110003354B (zh) 2019-05-08 2019-05-08 一种具有抗氧化功能的沙棘多糖闪式制备工艺

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110003354A true CN110003354A (zh) 2019-07-12
CN110003354B CN110003354B (zh) 2022-04-05

Family

ID=67176138

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910379057.XA Active CN110003354B (zh) 2019-05-08 2019-05-08 一种具有抗氧化功能的沙棘多糖闪式制备工艺

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110003354B (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110790848A (zh) * 2019-11-20 2020-02-14 新疆农业大学 沙棘总多糖的制备方法及其应用
CN111296712A (zh) * 2020-03-18 2020-06-19 吉林化工学院 一种沙棘叶水提取物固体饮料及其制备方法
CN115028753A (zh) * 2022-07-30 2022-09-09 哈尔滨商业大学 具有抗肿瘤功效的沙棘均一多糖及其分离纯化方法及应用

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107875201A (zh) * 2017-11-28 2018-04-06 邹玮 一种降尿酸干预肾脏病及***的沙棘复方制剂及制备方法
CN108623700A (zh) * 2017-10-12 2018-10-09 吉林化工学院 一种沙棘多糖的提取工艺及其应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108623700A (zh) * 2017-10-12 2018-10-09 吉林化工学院 一种沙棘多糖的提取工艺及其应用
CN107875201A (zh) * 2017-11-28 2018-04-06 邹玮 一种降尿酸干预肾脏病及***的沙棘复方制剂及制备方法

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
任薇等: ""沙棘多糖清除自由基及抗脂质过氧化作用研究"", 《食品工业科技》 *
李炳奇等主编: "《有机化学》", 31 December 2010, 华东理工大学出版社 *
杜晶晶等: ""沙棘多糖抗氧化活性的研究"", 《黑龙八一农垦大学学报》 *
林永成主编: "《海洋微生物及其代谢产物》", 31 January 2003, 化学工业出版社 *
武美馥: ""响应面优化闪式提取沙棘多糖工艺及其生物活性的研究"", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 工程科技Ⅰ辑》 *
赵宏等: ""沙棘多糖的闪式提取工艺条件的优化"", 《辽宁中医杂志》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110790848A (zh) * 2019-11-20 2020-02-14 新疆农业大学 沙棘总多糖的制备方法及其应用
CN111296712A (zh) * 2020-03-18 2020-06-19 吉林化工学院 一种沙棘叶水提取物固体饮料及其制备方法
CN115028753A (zh) * 2022-07-30 2022-09-09 哈尔滨商业大学 具有抗肿瘤功效的沙棘均一多糖及其分离纯化方法及应用
CN115028753B (zh) * 2022-07-30 2023-03-14 哈尔滨商业大学 具有抗肿瘤功效的沙棘均一多糖及其分离纯化方法及应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN110003354B (zh) 2022-04-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Hu et al. Isolation, purification, characterization and antioxidant activity of polysaccharides from the stem barks of Acanthopanax leucorrhizus
Li et al. Isolation, purification and structure of a new water-soluble polysaccharide from Zizyphus jujuba cv. Jinsixiaozao
Hua et al. Structural characterization and DPPH· radical scavenging activity of a polysaccharide from Guara fruits
Zhu et al. Effects of extraction methods on the yield, chemical structure and anti-tumor activity of polysaccharides from Cordyceps gunnii mycelia
Hua et al. Structural characterization of a 2-O-acetylglucomannan from Dendrobium officinale stem
Gu et al. Preparation, characterization and bioactivity of polysaccharide fractions from Sagittaria sagittifolia L.
Wang et al. Protection of chronic renal failure by a polysaccharide from Cordyceps sinensis
Jahanbin et al. Isolation, purification and structural characterization of a new water-soluble polysaccharide from Eremurus stenophyllus (boiss. & buhse) baker roots
CN110003354A (zh) 一种具有抗氧化功能的沙棘多糖闪式制备工艺
Shang et al. Isolation and structural characterization of the water-extractable polysaccharides from Cassia obtusifolia seeds
Zhao et al. Extraction, characterization and antioxidant activity evaluation of polysaccharides from Smilacina japonica
CN108727509B (zh) 一种毛竹笋壳***半乳聚糖及其制备和用途
CN106674368B (zh) 一种桑黄子实体细胞壁活性粗多糖的制备方法
Roy et al. Structural investigation of a heteropolysaccharide isolated from the pods (fruits) of Moringa oleifera (Sajina)
CN112876577A (zh) 一种知母均一多糖及其制备方法与应用
Karadag et al. Optimisation of green tea polysaccharides by ultrasound-assisted extraction and their in vitro antidiabetic activities
CN110540603B (zh) 知母多糖及其制备方法、鉴定方法和应用
Yang et al. A novel optimization of water‐soluble compound polysaccharides from Chinese herbal medicines by quantitative theory and study on its characterization and antioxidant activities
CN107012184A (zh) 一种酶法提取的川白芷多糖及制备方法和应用
CN108997510A (zh) 一种高良姜多糖的抗氧化应用及其分离纯化方法
CN104817646B (zh) 薄树芝中的多糖及其提取方法和应用
CN108424469B (zh) 一种芡实种仁多糖及其分离提取方法和用途
CN112794928B (zh) 一种黑枣多糖及其应用
CN104861080A (zh) 番石榴中的多糖及其制备方法和用途
CN113603802B (zh) 一种马鞭草多糖的制备方法与应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20230906

Address after: 150000 No. 1, Huanghe Road, industrial park, Yanshou County, Harbin City, Heilongjiang Province

Patentee after: Yanshou Dingxin Bioengineering Co.,Ltd.

Address before: 230000 Room 203, building 2, phase I, e-commerce Park, Jinggang Road, Shushan Economic Development Zone, Hefei City, Anhui Province

Patentee before: Hefei Jiuzhou Longteng scientific and technological achievement transformation Co.,Ltd.

Effective date of registration: 20230906

Address after: 230000 Room 203, building 2, phase I, e-commerce Park, Jinggang Road, Shushan Economic Development Zone, Hefei City, Anhui Province

Patentee after: Hefei Jiuzhou Longteng scientific and technological achievement transformation Co.,Ltd.

Address before: 132022 No. 45 Chengde street, Longtan District, Jilin, Jilin

Patentee before: JILIN INSTITUTE OF CHEMICAL TECHNOLOGY