CN109576169A - 一种微生物除臭剂及其制备方法 - Google Patents

一种微生物除臭剂及其制备方法 Download PDF

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Abstract

一种微生物除臭剂及其制备方法，涉及环保及生物技术领域。含枯草芽孢杆菌的菌液：10～40份含产朊假丝酵母的菌液：10～40份含硝化菌的菌液：5～15份含乳酸菌的菌液：15～30份酶制剂：1～2份；上述四种菌液中分别对应所含的枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、硝化菌、乳酸菌的含量菌数至少达到2×108个/mL数量级。能够高效去除垃圾处理厂、养殖场、厕所、化工厂、河道等场所的恶臭气体。

Description

一种微生物除臭剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及环保及生物技术领域，尤其涉及一种微生物除臭剂及其制备方法。
背景技术
随我国工业快速发展、居民生活水平的提高，固废、废水、废气的排放量不断增大，这些废弃物中的恶臭气体排放量也不断增加，造成对环境的污染和对人类健康的极大威胁，臭气污染问题越来越引起人们的关注，因此，除臭剂的研究和开发得到了快速发展。
恶臭属于一种环境污染物，是一种通过刺激嗅觉器官而使人们产生不愉快的气体物质，它可助使致病菌繁衍生长，同时通过嗅觉***对人体呼吸***、消化***、内分泌***等产生刺激作用，进而影响人类健康。恶臭产生源多种多样，按产生源可分为生活源和工业源，生活源包括：污水处理厂、公厕、垃圾转运站以及受污染的水沟等；工业源包括：养殖场、化工厂、食品加工厂等。按组成可分为含硫化合物、含氮化合物、卤素及其衍生物、烃类及含氧有机物共5类。
目前，除臭剂主要分为植物除臭剂、化学型除臭剂、微生物型除臭剂。化学型除臭剂成本高、易造成二次污染；植物型除臭剂提取复杂，成本高；微生物型除臭剂因为其具有制备工艺简单、成本低、无毒、无病原性、可生物降解性等优点得到了广泛应用。微生物型除臭剂从源头治理恶臭，微生物通过对恶臭气体的溶解转化，即气体转化成液体的转化过程；有害物质作为营养物被微生物吸收、分解机转化，使得污染物质被去除；微生物除臭时通过多种复合微生物协同作用的结果。
微生物型除臭剂种类较多，但存在处理效果不佳及处理恶臭气体类型单一的缺陷，如福建大用生态农业综合发展有限公司的除臭菌剂(申请公布号：CN 103060231A)只针对养殖场产生的臭气；山东苏柯汉生物技术股份有限公司的除臭菌剂(申请公布号：CN104388363A)只针对垃圾产生的臭气，本发明生物型菌剂扩宽适用领域，可适用于垃圾臭气及养殖场臭气等恶臭气体治理。
发明内容
本发明提供一种复合微生物型除臭剂，该除臭剂具有无毒、无腐蚀、无致病性、对环境友好等特性，能够高效去除垃圾处理场、养殖场、厕所、化工厂、河道等场所的恶臭气体，拓宽了其适用范围，从而消除了目前技术缺陷。本发明的技术方案是：
一种复合微生物除臭剂包括以下重量份数的原料混合制备而得：
枯草芽孢杆菌菌液：10～40份
产朊假丝酵母菌液：10～40份
硝化菌菌液：5～15份
乳酸菌菌液：15～30份
酶制剂：1～2份
上述每种菌液中菌数至少达到2×108个/mL数量级。所述酶制剂优选为蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶其中的一种或多种组合。
一种复合微生物除臭剂的制备方法包括以下步骤：
分别对枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、硝化菌、乳酸菌进行高密度培养，首先将枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、硝化菌、乳酸菌分别接种于500mL的摇瓶中进行活化培养作为一级单种菌培养，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，得一级单种菌种子液；将活化好一级单种菌种子菌液分别接种于25L的发酵罐中进行扩大培养作为二级单种菌培养，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，得二级单种菌发酵液；将二级单种菌发酵液分别接种于100L的发酵罐中进行培养，至菌数至少达到2×108个/mL数量级；最后将4种单种菌菌液分别按枯草芽孢杆菌菌液10～40份、产朊假丝酵母菌液10～40份、硝化菌菌液5～15份、乳酸菌菌液15～30份、酶制剂1～2份的比例混合得混合发酵液，即微生物除臭剂。
作为一种优选的技术方案，所述枯草芽孢杆菌的制备步骤如下：
一级发酵：将纯化培养的斜面培养基上的枯草芽孢杆菌接种至500mL的摇瓶中培养，培养基的成分为：牛肉膏3～8g/L，蛋白胨9～15g/L，氯化钠3～8g/L，pH调至6.8～7.3，温度28～35℃，摇瓶转速150～220rpm条件下培养1～2d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，制得一级种子液。
二级发酵：将一级种子液接种至25L灭菌后的发酵罐中培养，培养基成分为：葡萄糖15～20g/L，酵母膏5～8g/L，硫酸铵0.8～1.0g/L，磷酸氢二钾0.1～0.5g/L，七水合硫酸镁0.05～0.2g/L，一水合硫酸锰0.02～0.08g/L，pH调至6.8～7.3，温度28～35℃，搅拌速率180～200rpm条件下培养2～4d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，制得二级发酵液。
三级发酵：将二级发酵液接种至100L灭菌后发酵罐中培养，培养基成分为：葡萄糖15～20g/L，酵母膏5～8g/L，硫酸铵0.8～1.0g/L，磷酸氢二钾0.1～0.5g/L，七水合硫酸镁0.05～0.2g/L，一水合硫酸锰0.02～0.08g/L，pH调至6.8～7.3，温度28～35℃，搅拌速率200～220rpm条件下培养2～5d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，最后将其与其他三种菌及酶制剂以10～40份的比例混合得混合发酵液，即微生物除臭剂。
作为一种优选的技术方案，所述产朊假丝酵母的制备步骤如下：
一级发酵：将纯化培养的斜面培养基上的产朊假丝酵母菌接种至500mL的摇瓶中培养，培养基的成分为：牛肉膏3～8g/L，蛋白胨9～15g/L，氯化钠3～8g/L，pH调至6.8～7.3，温度28～35℃，摇瓶转速150～220rpm条件下培养2～3d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，制得一级种子液。
二级发酵：将一级种子液接种至25L灭菌后的发酵罐中培养，培养基成分按：葡萄糖15～20g/L，酵母膏5～8g/L，硫酸铵0.8～1.0g/L，磷酸氢二钾0.1～0.5g/L，七水合硫酸镁0.05～0.2g/L，一水合硫酸锰0.02～0.08g/L，pH调至6.8～7.3，温度28～35℃，搅拌速率180～200rpm条件下培养2～3d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，制得二级发酵液。
三级发酵：将二级发酵液接种至100L灭菌后发酵罐中培养，培养基成分为：葡萄糖15～20g/L，酵母膏5～8g/L，硫酸铵0.8～1.0g/L，磷酸氢二钾0.1～0.5g/L，七水合硫酸镁0.05～0.2g/L，一水合硫酸锰0.02～0.08g/L，pH调至6.8～7.3，温度28～35℃，搅拌速率200～220rpm条件下培养3～5d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，最后将其与其他三种菌及酶制剂以10～40份的比例混合得混合发酵液，即微生物除臭剂。
作为一种优选的技术方案，所述硝化菌的制备步骤如下：
一级发酵：将纯化培养的斜面培养基上的硝化菌接种至500mL的摇瓶中培养，培养基的成分为：亚硝酸钠0.2～0.5g/L，硫酸铵3.0～3.8，七水合硫酸镁0.03～0.05g/L，一水合硫酸锰0.01～0.02g/L，磷酸氢二钾0.75～0.85g/L，磷酸氢二钠0.25～0.3g/L，pH调至7.5～8.0g/L，温度28～35℃，摇瓶转速80～120rpm条件下培养5～7d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，制得一级种子液。
二级发酵：将一级种子液接种至25L灭菌后的发酵罐中培养，培养基成分为：亚硝酸钠0.2～0.5g/L，硫酸铵3.0～3.8g/L，七水合硫酸镁0.03～0.05g/L，一水合硫酸锰0.01～0.02g/L，磷酸氢二钾0.75～0.85g/L，磷酸氢二钠0.25～0.3g/L，pH调至7.5～8.0g/L，温度28～35℃，搅拌速率80～120rpm条件下培养5～7d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，制得二级发酵液。
三级发酵：将二级发酵液接种至100L灭菌后发酵罐中培养，培养基成分为：亚硝酸钠0.2～0.5g/L，硫酸铵3.0～3.8g/L，七水合硫酸镁0.03～0.05g/L，一水合硫酸锰0.01～0.02g/L，磷酸氢二钾0.75～0.85g/L，磷酸氢二钠0.25～0.3g/L，pH调至7.5～8.0g/L，温度28～35℃，搅拌速率80～120rpm条件下培养5～10d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，最后将其与其他三种菌及酶制剂以5～15份的比例混合得混合发酵液，即微生物除臭剂。
作为一种优选的技术方案，所述乳酸菌的制备步骤如下：
一级发酵：将纯化培养的斜面培养基上的乳酸菌接种至500mL的摇瓶中培养，培养基的成分为：蛋白胨1～2g/L，酵母膏0.5～1g/L，乙酸钠0.5～1g/L，七水合硫酸镁0.05～0.1g/L，一水合硫酸锰0.025～0.05g/L，磷酸氢二钾0.2～0.5g/L，pH调至5.5～6.0，静止条件下培养1～3d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，制得一级种子液。
二级发酵：将纯化培养的斜面培养基上的乳酸菌接种至25L灭菌后的发酵罐中培养，培养基的成分为：葡萄糖1.5～3g/L，蛋白胨1～2g/L，酵母膏0.5～1g/L，乙酸钠0.5～1g/L，七水合硫酸镁0.05～0.1g/L，一水合硫酸锰0∶025～0.05g/L，磷酸氢二钾0.2～0.5g/L，pH调至5.5～6.0，静止条件下培养1～3d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，制得二级发酵液。
三级发酵：将纯化培养的斜面培养基上的乳酸菌接种至100L灭菌后的发酵罐中培养，培养基的成分为：葡萄糖1.5～3g/L，蛋白胨1～2g/L，酵母膏0.5～1g/L，乙酸钠0.5～1g/L，七水合硫酸镁0.05～0.1g/L，一水合硫酸锰0.025～0.05g/L，磷酸氢二钾0.2～0.5g/L，pH调至5.5～6.0，静止条件下培养3～5d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，最后将其与其他三种菌及酶制剂以15～30份的比例混合得混合发酵液，即微生物除臭剂。
上述菌剂制备不分先后顺序，可同时制备混合制得所述混合发酵液。
作为一种优选的技术方案，所述酶制剂的制备步骤如下：
所述酶制剂为蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶其中的一种或多种组合，最后将其与其他四种菌液混合，即微生物除臭剂。
本发明为复合微生物除臭菌剂，其产品功效如下：
(1)本发明涉及菌种全部从自然界筛选分离获得，无转基因成分、无毒、无致病性；
(2)本发明复合菌剂中各菌剂相互协同，经过拮抗实验表明，各菌剂之间不存在拮抗性；
(3)本发明中枯草芽孢杆菌可自身合成淀粉酶，蛋白酶多种酶类，可将臭源中的淀粉类，蛋白质类物质彻底分解，达到除臭的目的；
(4)本发明中产朊假丝酵母可分解糖类产生酸性物质，可有效抑制致病菌生长，且可为乳酸菌等益生菌提供生长基质；
(6)本发明中的硝化菌可将臭源中的氨和铵盐转化为硝酸盐，进而减少氨气的产生；
(7)本发明中的乳酸菌为常见的益生菌，可抑制臭源中腐败菌的生长和腐败产物的产生；
(8)本发明中的酶制剂能够有效分解产生臭味的大分子有机物，减少臭味源。
综上，本发明除臭剂能够高效去除垃圾处理厂、养殖场、厕所、化工厂、河道等场所的恶臭气体，拓宽了其适用范围，从而消除了目前技术缺陷。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明进行进一步详细说明，但本发明并不限于以下实施例。酶制剂为蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶其中的一种或多种组合均可。
实施例1：
一种复合微生物除臭剂由以下重量份数的原料混合制备而得：
枯草芽孢杆菌菌液：10份
产朊假丝酵母菌液：10份
硝化菌液：5份
乳酸菌液：15份
酶制剂：1份
分别对枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、硝化菌、乳酸菌进行高密度培养，首先将枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、硝化菌、乳酸菌分别接种于500mL的摇瓶中进行活化培养作为一级单种菌培养，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，得一级单种菌种子液；将活化好一级单种菌种子菌液分别接种于25L的发酵罐中进行扩大培养作为二级单种菌培养，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，得二级单种菌发酵液；将二级单种菌发酵液分别接种于100L的发酵罐中进行培养，至菌数至少达到2×108个/mL数量级；最后将4中单种菌菌液分别按枯草芽孢杆菌10份、产朊假丝酵母10份、硝化菌5份、乳酸菌15份、酶制剂1份的比例混合得混合发酵液，即微生物除臭剂。
将该配置的微生物除臭剂使用在污泥干化脱水间，感官臭气浓烈，脱水间的空间体积为42m(长)×38m(宽)×13m(高)，采用设备喷洒，工作周期为：工作20秒——停顿2分钟——工作20秒——停顿2分；冬季气候干燥，工作周期为：工作15秒——停顿3分钟——工作15秒——停顿3分钟，雾化喷嘴装置每分钟雾化量为：40毫升，96个喷嘴每小时雾化量为23.04升可以到感官臭气大大减少。
实施例2：
一种复合微生物除臭剂由以下重量份数的原料混合制备而得：
枯草芽孢杆菌菌液：25份
产朊假丝酵母菌液：25份
硝化菌菌液：10份
乳酸菌菌液：18份
酶制剂：1份
分别对枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、硝化菌、乳酸菌进行高密度培养，首先将枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、硝化菌、乳酸菌分别接种于500mL的摇瓶中进行活化培养作为一级单种菌培养，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，得一级单种菌种子液；将活化好一级单种菌种子菌液分别接种于25L的发酵罐中进行扩大培养作为二级单种菌培养，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，得二级单种菌发酵液；将二级单种菌发酵液分别接种于100L的发酵罐中进行培养，至菌数至少达到2×108个/mL数量级；最后将4中单种菌菌液分别按枯草芽孢杆菌25份、产朊假丝酵母25份、硝化菌10份、乳酸菌18份、酶制剂1份的比例混合得混合发酵液，即微生物除臭剂。
将该微生物除臭剂使用在某污水处理厂(处理量为1.5万吨/天)粗格栅间(含提升泵)，感官臭气浓烈，格栅间规格为：20m X 21m X 9.7m，采用设备喷洒，工作周期为：工作20秒——停顿2分钟——工作20秒——停顿2分；冬季气候干燥，工作周期为：工作15秒——停顿3分钟——工作15秒——停顿3分钟，雾化喷嘴装置每分钟雾化量为：40毫升，50个喷嘴每小时雾化量为12.00升可以到感官接受程度。
实施例3：
一种复合微生物除臭剂由以下重量份数的原料混合制备而得：
枯草芽孢杆菌菌液：40份
产朊假丝酵母菌液：40份
硝化菌菌液：15份
乳酸菌菌液：30份
酶制剂菌液：2份
分别对枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、硝化菌、乳酸菌进行高密度培养，首先将枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、硝化菌、乳酸菌分别接种于500mL的摇瓶中进行活化培养作为一级单种菌培养，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，得一级单种菌种子液；将活化好一级单种菌种子菌液分别接种于25L的发酵罐中进行扩大培养作为二级单种菌培养，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，得二级单种菌发酵液；将二级单种菌发酵液分别接种于100L的发酵罐中进行培养，至菌数至少达到2×108个/mL数量级；最后将4种单种菌菌液分别按枯草芽孢杆菌40份、产朊假丝酵母40份、硝化菌15份、乳酸菌30份、酶制剂2份的比例混合得混合发酵液，即微生物除臭剂。
将该微生物除臭剂使用在煤制油污水处理场进行生物除臭，气量为：50000m3/h。建议循环水量75m3/h，循环水池高为0.5m一次投加该微生物除臭剂1吨，建议臭气经风气从循环水池底部进入，通过循环水池进行预洗，可有效的吸收酸、碱性气体，降低对填料上的生物的影响，同时增加气体的湿度，循环水泵可进行间歇运行。臭气可以达到排放标准。

Claims (8)

1.一种微生物除臭剂，其特征在于，包括由以下重量份数的原料混合制备而得：
含枯草芽孢杆菌的菌液：10～40份
含产朊假丝酵母的菌液：10～40份
含硝化菌的菌液：5～15份
含乳酸菌的菌液：15～30份
酶制剂：1～2份；
上述四种菌液中分别对应所含的枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、硝化菌、乳酸菌的含量菌数至少达到2×108个/mL数量级。
2.按照权利要求1所述的一种微生物除臭剂，其特征在于，酶制剂为蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶其中的一种或多种组合。
3.按照权利要求1所述的一种微生物除臭剂，其特征在于，四种菌液中所含的菌仅为所对应的菌。
4.制备权利要求1-3任一项所述的微生物除臭剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：一种复合微生物除臭剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：分别对枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、硝化菌、乳酸菌进行高密度培养，首先将枯草芽孢杆菌、产朊假丝酵母、硝化菌、乳酸菌分别接种于500mL的摇瓶中进行活化培养作为一级单种菌培养，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，得一级单种菌种子液；将活化好一级单种菌种子菌液分别接种于25L的发酵罐中进行扩大培养作为二级单种菌培养，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，得二级单种菌发酵液；将二级单种菌发酵液分别接种于100L的发酵罐中进行培养，至菌数至少达到2×108个/mL数量级；最后将4种单种菌菌液分别按枯草芽孢杆菌菌液10～40份、产朊假丝酵母菌液10～40份、硝化菌菌液5～15份、乳酸菌菌液15～30份、酶制剂1～2份的比例混合得混合发酵液，即微生物除臭剂。
5.按照权利要求4的方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌的制备步骤如下：
一级发酵：将纯化培养的斜面培养基上的枯草芽孢杆菌接种至500mL的摇瓶中培养，培养基的成分为：牛肉膏3～8g/L，蛋白胨9～15g/L，氯化钠3～8g/L，pH调至6.8～7.3，温度28～35℃，摇瓶转速150～220rpm条件下培养1～2d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，制得一级种子液；
二级发酵：将一级种子液接种至25L灭菌后的发酵罐中培养，培养基成分为：葡萄糖15～20g/L，酵母膏5～～8g/L，硫酸铵0.8～1.0g/L，磷酸氢二钾0.1～0.5g/L，七水合硫酸镁0.05～0.2g/L，一水合硫酸锰0.02～0.08g/L，pH调至6.8～7.3，温度28～35℃，搅拌速率180～200rpm条件下培养2～4d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，制得二级发酵液；
三级发酵：将二级发酵液接种至100L灭菌后发酵罐中培养，培养基成分为：葡萄糖15～20g/L，酵母膏5～8g/L，硫酸铵0.8～1.0g/L，磷酸氢二钾0.1～0.5g/L，七水合硫酸镁0.05～0.2g/L，一水合硫酸锰0.02～0.08g/L，pH调至6.8～7.3，温度28～35℃，搅拌速率200～220rpm条件下培养2～5d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级。
6.按照权利要求4的方法，其特征在于，所述产朊假丝酵母的制备步骤如下：
一级发酵：将纯化培养的斜面培养基上的产朊假丝酵母菌接种至500mL的摇瓶中培养，培养基的成分为：牛肉膏3～8g/L，蛋白胨9～15g/L，氯化钠3～8g/L，pH调至6.8～7.3，温度28～35℃，摇瓶转速150～220rpm条件下培养2～3d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，制得一级种子液；
二级发酵：将一级种子液接种至25L灭菌后的发酵罐中培养，培养基成分按：葡萄糖15～20g/L，酵母膏5～8g/L，硫酸铵0.8～1.0g/L，磷酸氢二钾0.1～0.5g/L，七水合硫酸镁0.05～0.2g/L，一水合硫酸锰0.02～0.08g/L，pH调至6.8～7.3，温度28～35℃，搅拌速率180～200rpm条件下培养2～3d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，制得二级发酵液；
三级发酵：将二级发酵液接种至100L灭菌后发酵罐中培养，培养基成分为：葡萄糖15～20g/L，酵母膏5～8g/L，硫酸铵0.8～1.0g/L，磷酸氢二钾0.1～0.5g/L，七水合硫酸镁0.05～0.2g/L，一水合硫酸锰0.02～0.08g/L，pH调至6.8～73，温度28～35℃，搅拌速率200～220rpm条件下培养3～5d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级。
7.按照权利要求4的方法，其特征在于，所述硝化菌的制备步骤如下：
一级发酵：将纯化培养的斜面培养基上的硝化菌接种至500mL的摇瓶中培养，培养基的成分为：亚硝酸钠0.2～0.5g/L，硫酸铵3.0～3.8，七水合硫酸镁0.03～0.05g/L，一水合硫酸锰0.01～0.02g/L，磷酸氢二钾0.75～0.85g/L，磷酸氢二钠0.25～0.3g/L，pH调至7.5～8.0g/L，温度28～35℃，摇瓶转速80～120rpm条件下培养5～7d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，制得一级种子液；
二级发酵：将一级种子液接种至25L灭菌后的发酵罐中培养，培养基成分为：亚硝酸钠0.2～0.5g/L，硫酸铵3.0～3.8g/L，七水合硫酸镁0.03～0.05g/L，一水合硫酸锰0.01～0.02g/L，磷酸氢二钾0.75～0.85g/L，磷酸氢二钠0.25～0.3g/L，pH调至7.5～8.0g/L，温度28～35℃，搅拌速率80～120rpm条件下培养5～7d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，制得二级发酵液；
三级发酵：将二级发酵液接种至100L灭菌后发酵罐中培养，培养基成分为：亚硝酸钠0.2～0.5g/L，硫酸铵3.0～3.8g/L，七水合硫酸镁0.03～0.05g/L，一水合硫酸锰0.01～0.02g/L，磷酸氢二钾0.75～0.85g/L，磷酸氢二钠0.25～0.3g/L，pH调至7.5～8.0g/L，温度28～35℃，搅拌速率80～120rpm条件下培养5～10d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级。
8.按照权利要求4的方法，其特征在于，所述乳酸菌的制备步骤如下：
一级发酵：将纯化培养的斜面培养基上的乳酸菌接种至500mL的摇瓶中培养，培养基的成分为：蛋白胨1～2g/L，酵母膏0.5～1g/L，乙酸钠0.5～1g/L，七水合硫酸镁0.05～0.1g/L，一水合硫酸锰0.025～0.05g/L，磷酸氢二钾0.2～0.5g/L，pH调至5.5～6.0，静止条件下培养1～3d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，制得一级种子液；
二级发酵：将纯化培养的斜面培养基上的乳酸菌接种至25L灭菌后的发酵罐中培养，培养基的成分为：葡萄糖1.5～3g/L，蛋白胨1～2g/L，酵母膏0.5～1g/L，乙酸钠0.5～1g/L，七水合硫酸镁0.05～0.1g/L，一水合硫酸锰0.025～0.05g/L，磷酸氢二钾0.2～0.5g/L，pH调至5.5～6.0，静止条件下培养1～3d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，制得二级发酵液；
三级发酵：将纯化培养的斜面培养基上的乳酸菌接种至100L灭菌后的发酵罐中培养，培养基的成分为：葡萄糖1.5～3g/L，蛋白胨1～2g/L，酵母膏0.5～1g/L，乙酸钠0.5～1g/L，七水合硫酸镁0.05～0.1g/L，一水合硫酸锰0.025～0.05g/L，磷酸氢二钾0.2～0.5g/L，pH调至5.5～6.0，静止条件下培养3～5d，至菌数至少达到2×108个/mL数量级，最后将其与其他三种菌及酶制剂以15～30份的比例混合得混合发酵液，即微生物除臭剂。
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