CN109464317B - 一种含侧柏提取物的组合物及其制备方法和应用 - Google Patents

一种含侧柏提取物的组合物及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN109464317B
CN109464317B CN201811534385.4A CN201811534385A CN109464317B CN 109464317 B CN109464317 B CN 109464317B CN 201811534385 A CN201811534385 A CN 201811534385A CN 109464317 B CN109464317 B CN 109464317B
Authority
CN
China
Prior art keywords
parts
feed liquid
extract
solution
weight
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201811534385.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109464317A (zh
Inventor
骆峰
杨海延
马冬月
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shanghai Huiwen Biotech Corp ltd
Original Assignee
Shanghai Huiwen Biotech Corp ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shanghai Huiwen Biotech Corp ltd filed Critical Shanghai Huiwen Biotech Corp ltd
Priority to CN201811534385.4A priority Critical patent/CN109464317B/zh
Publication of CN109464317A publication Critical patent/CN109464317A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109464317B publication Critical patent/CN109464317B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9755Gymnosperms [Coniferophyta]
    • A61K8/9761Cupressaceae [Cypress family], e.g. juniper or cypress
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06Free radical scavengers or antioxidants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08Anti-ageing preparations
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61QSPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q7/00Preparations for affecting hair growth
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/80Process related aspects concerning the preparation of the cosmetic composition or the storage or application thereof
    • A61K2800/805Corresponding aspects not provided for by any of codes A61K2800/81 - A61K2800/95

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Toxicology (AREA)

Abstract

本发明公开了一种含侧柏提取物的组合物及其制备方法和应用。该组合物包括下述重量份数组分:10~25份提取液A、5~15份料液E和65~85份料液F;各组分的制备方法如下:(1)将侧柏叶经多元醇和/或丙酮提取,得提取液A和滤渣;(2)将步骤(1)中滤渣经醇溶液提取,得提取液B与滤渣;(3)将步骤(2)中滤渣经水提取,得提取液C;(4)将提取液B浓缩至无醇后与提取液C混合,得料液D;(5)将料液D经柱层析,收集水洗脱液,浓缩,得料液E;收集醇洗脱液,浓缩至无醇,得料液F。本发明的组合物中含有侧柏叶脂溶性成分、黄酮、多酚、多糖和氨基酸等多种成分,体系稳定且生发、抗炎和抗氧化功效好。

Description

一种含侧柏提取物的组合物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及一种含侧柏提取物的组合物及其制备方法和应用。
背景技术
侧柏(植物学名:Platycladus orientalis(L.)Franco)属常绿乔木。在中国分布极广,北起内蒙古、吉林,南至广东及广西北部;人工栽培范围几遍全国。侧柏喜光,但幼苗、幼树有一定耐荫能力。较耐寒,耐干旱,喜湿润。耐贫瘠,可在微酸性至微碱性土壤上生长。全年均可采收,不同产地不同季节的侧柏叶化学成分和含量有所不同,以夏、秋季采收为佳。
侧柏叶为侧柏科植物侧柏的干燥枝梢及叶,别名柏叶、从柏叶、扁柏。始载于《神农本草经》,味苦涩,性微寒,归肺、心、肝、大肠经。能凉血止血、清热止咳、祛风利湿、散肿毒、生发乌发。《中华本草》记载,侧柏叶有防治脱发的作用:侧柏叶30g,切碎,浸于100mL的60-75%酒精中,7天后滤去渣,涂擦毛发脱落部位,每日3次,治疗160例,显效33例,有效91例,总有效率77.5%。李时珍《本草纲目》记载,侧柏“乃多寿之木”,能主治“吐血衄血,痢血,崩中,赤白,轻身益气”,令人耐寒暑,去湿痹,生肌。治冷风历节疼痛,止尿血。炙,詈冻疮。烧取汁涂头,黑润鬓发。敷烫火伤,止痛灭瘢。服之,疗蛊痢。作汤常服,杀五脏虫,益人。
现代研究也证明侧柏叶挥发油、多糖、黄酮、多酚等功效成分具有生发、乌发、抗病毒、提高免疫力、抗炎、抗氧化等多种功效。
专利CN201410785394.6提供了一种提取侧柏叶中黄酮类物质的方法,采用冻融与超声波结合技术提高黄酮的提取率,并采用大孔吸附树脂进行纯化得到侧柏叶黄酮提取物。该方法提取率高、无污染、成本低。
专利CN201510449768.1涉及一种具有抗病毒和增强免疫活性的侧柏叶多糖及其制备方法。该发明公开的侧柏叶多糖是由侧柏叶主要经过热水浸提、Savege法除蛋白、乙醇沉淀、离子交换柱层析分离纯化后获得。
专利CN201510449760.5涉及一种具有降尿酸活性的侧柏叶多酚及其制备方法和应用。本发明公开的侧柏叶多酚是经超高压低温浸提、常压高温浸提、过滤浓缩、大孔吸附树脂纯化获得。该发明的制备工艺合理简单、绿色环保,并且易于实现工业化大生产。
专利CN201710172402.3公开了一种侧柏叶中挥发油与黄酮的连续选择性提取方法。该提取方法使用超临界CO2萃取技术,通过控制反应条件来实现。该方法提取率高、无污染、不破坏活性成分,工艺流程短,可连续萃取,成本低。
目前,关于侧柏叶功效成分的研究虽已有大量报道,但是一般涉及的是侧柏叶中某一种或某两种功效物质的提取工艺。此外,现有技术所公开的侧柏提取物的应用中,一般会将侧柏叶提取物和其他中药提取物的组合使用,这可能也与目前制备方法的局限性有关。
因此,如何充分、有效地利用侧柏提取物中各功效成分,实现产值最大化成为本领域亟待解决的技术问题。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于克服现有技术中侧柏叶功效成分利用率低,易造成资源浪费的缺陷,而提供了一种含侧柏提取物的组合物及其制备方法和应用。本发明的组合物中含有侧柏叶脂溶性成分、黄酮、多酚、多糖和氨基酸等多种功效成分,体系稳定且生发、抗炎和抗氧化功效好,产品安全性高。
本发明提供了一种含侧柏提取物的组合物,其包括下述重量份数组分:10~25份提取液A、5~15份料液E和65~85份料液F;
所述提取液A、所述料液E和所述料液F的制备方法包括下述步骤:
(1)将侧柏叶经溶剂A提取,得提取液A和滤渣;所述溶剂A为多元醇和/或丙酮;
(2)将步骤(1)中所述滤渣经溶剂B提取,得提取液B与滤渣,所述溶剂B为醇溶液;
(3)将步骤(2)中所述滤渣经水提取,得提取液C;
(4)将步骤(2)中所述提取液B浓缩至无醇后与步骤(3)中所述提取液C混合,得料液D;
(5)将步骤(4)中所述料液D经柱层析,收集水洗脱液,浓缩,得料液E,所述料液E的体积mL与步骤(1)中所述侧柏叶的重量g之比为(2~5):1;收集溶剂C的洗脱液,浓缩至无醇,得料液F,所述溶剂C为乙醇水溶液和/或甲醇水溶液。
本发明中,所述提取液A的重量份数优选为10~15份,例如10份、15份或25份。
本发明中,所述料液E的重量份数优选为5~10份,例如5份、10份或15份。
本发明中,所述料液F的重量份数优选为70~85份,例如65份、70份或85份。
本发明中,优选地,所述含侧柏提取物的组合物中包括下述重量份数组分:10~15份提取液A、5~10份料液E和70~85份料液F。
本发明中,优选地,所述含侧柏提取物的组合物中包括下述重量份数组分:15份提取液A、15份料液E和70份料液F。
本发明中,优选地,所述含侧柏提取物的组合物中包括下述重量份数组分:10份提取液A、5份料液E和85份料液F。
本发明中,优选地,所述含侧柏提取物的组合物中包括下述重量份数组分:25份提取液A、10份料液E和65份料液F。
步骤(1)中,所述侧柏叶可为本领域常规的取自侧柏(植物学名:Platycladusorientalis(L.)Franco)的干燥枝梢和叶。
步骤(1)中,优选地,将所述侧柏叶粉碎后再经提取。
步骤(1)中,所述溶剂A优选为多元醇。
步骤(1)中,所述多元醇一般是指分子中含有二个或二个以上羟基的醇类,例如1,3-丙二醇和/或1,3-丁二醇。
步骤(1)中,所述溶剂A的用量可为本领域常规的提取溶剂用量,优选地,所述侧柏叶的质量g与所述溶剂A的体积mL之比为1:(10~40),例如1:10、1:25或1:40。
步骤(1)中,所述提取的条件和工艺可为本领域常规的条件和工艺。
其中,所述提取的温度优选为30~50℃,例如30℃、40℃或50℃。
其中,所述提取的时间优选为1~5小时,例如1小时、3小时或5小时。
其中,优选地,在30~50℃的条件下萃取1~5小时,例如50℃条件下低温萃取3小时、40℃条件下低温萃取5小时或30℃条件下低温萃取1小时。
步骤(2)中,所述溶剂B优选为乙醇水溶液和/或甲醇水溶液,更优选为乙醇水溶液。
其中,所述乙醇水溶液可为本领域常规的乙醇水溶液,优选为60~95%的乙醇水溶液,例如60%的乙醇水溶液、80%的乙醇水溶液或95%的乙醇水溶液,百分比是指乙醇的体积百分比。
步骤(2)中,所述溶剂B的用量可为本领域常规的提取溶剂用量,优选地,步骤(2)中所述滤渣的质量g与所述溶剂B的体积mL之比为1:(10~40),例如1:40、1:30或1:10。
步骤(2)中,所述提取的条件和工艺可为本领域常规的条件和工艺。
其中,所述提取的温度优选为40~70℃,例如70℃、60℃或40℃。
其中,所述提取的时间优选为1~3小时,例如1小时、2小时或3小时。
其中,优选地,在40~70℃的条件下保温提取1~3小时,例如70℃条件下保温提取2小时、60℃条件下保温提取3小时或40℃条件下保温提取1小时。
步骤(3),所述水的用量可为本领域常规的提取溶剂用量,优选地,步骤(3)中所述滤渣的质量g与所述水的体积mL之比为1:(10~40),例如1:10、1:30或1:40。
步骤(3)中,所述提取的条件和工艺可为本领域常规的条件和工艺。
其中,所述提取的温度优选为70~90℃,例如70℃、80℃或90℃。
其中,所述提取的时间优选为1~3小时,例如1小时、2小时或3小时。
其中,优选地,在70~90℃的条件下保温提取1~3小时,例如70℃条件下保温提取3小时、90℃条件下保温提取1小时或80℃条件下保温提取2小时。
步骤(4)中,所述浓缩可按本领域常规操作进行浓缩处理,优选地,在减压条件下进行浓缩。
本领域技术人员知晓,步骤(5)中,在所述柱层析之前还应经上样处理。所述上样的流速优选为1~3BV/h,例如1BV/h、2BV/h或3BV/h。
步骤(5)中,所述柱层析可为本领域常规的柱层析,一般为经大孔吸附树脂柱层析。所述大孔吸附树脂可为本领域常规的非极性或弱极性的树脂,例如D101或AB-8。
步骤(5)中,优选地,所述料液E的体积mL与步骤(1)中所述侧柏叶的重量g之比为(2~4):1,例如2:1、4:1或5:1。
步骤(5)中,所述溶剂C优选为乙醇水溶液。
步骤(5)中,所述乙醇水溶液可为65~80%乙醇水溶液,例如65%乙醇水溶液、75%乙醇水溶液或80%乙醇水溶液,百分比是指乙醇的体积百分比。
本领域技术人员知晓,步骤(5)中,水洗脱液中所含有的成分为极性大的成分,根据侧柏叶中所含有的功效成分,所述收集水洗脱液的终点可为至洗脱液中无多糖阳性反应。
本领域技术人员知晓,步骤(5)中,溶剂C洗脱液中所含有的成分为中等极性的成分,根据侧柏叶中所含有的功效成分,所述收集溶剂C的洗脱液的终点可为至洗脱液中无黄酮阳性反应。
根据侧柏叶中所含有的功效成分,本领域技术人员知晓,所述提取液A中的成分多为侧柏叶中的脂溶性成分。
根据侧柏叶中所含有的功效成分,本领域技术人员知晓,所述料液E中的成分多为侧柏叶中的多糖和氨基酸类成分。
根据侧柏叶中所含有的功效成分,本领域技术人员知晓,所述料液F中的成分多为侧柏叶中的黄酮和多酚类成分。
本发明还提供了一种上述含侧柏提取物的组合物的制备方法,其包括下述步骤,将所述提取液A、所述料液E和所述料液F混合,即可。
本发明还提供了一种上述含侧柏提取物的组合物作为生发活性成分、抗氧化活性成分和抗炎活性成分的应用。
本领域技术人员知晓,所述生发活性成分一般可应用于洗发产品和/或护发产品,所述抗氧化活性成分和/或所述抗炎活性成分一般可以应用于洗发产品、护发产品和护肤产品中的一种或多种。
在符合本领域常识的基础上,上述各优选条件,可任意组合,即得本发明各较佳实例。
本发明所用试剂和原料均市售可得。
本发明的积极进步效果在于:
(1)利用不同极性的提取溶剂将侧柏叶中不同极性的功效物质分别提取出来,进行组合配比,得到侧柏叶的全功效成分提取物,充分、有效地利用侧柏提取物中各功效成分,实现了产值最大化。
(2)本申请中的含侧柏提取物的组合物体系稳定,恒温恒湿条件下(温度40℃±2℃、湿度RH75%±5%)放置12个月后样品体系仍稳定,无沉淀析出;生发、抗炎和抗氧化功效好,产品安全性高,不存在风险物质残留等风险。
具体实施方式
下面通过实施例的方式进一步说明本发明,但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法,按照常规方法和条件,或按照商品说明书选择。
下述实施例中:
胎牛血清FBS购自Gibco;
DMEM培养基购自Hyclone;
CCK-8购自日本同仁化学研究所;
NO试剂盒购自碧云天;
TNF-α购自美国cell biolab;
IL-6试剂盒购自武汉博士德;
SOD试剂盒购自武汉博士德。
实施例1
(1)侧柏叶干草进行粉碎,加入10倍的1,3-丙二醇,50℃条件下低温萃取3小时,过滤,得到多元醇提取液A,即得侧柏叶脂溶性成分;
(2)上述步骤所得滤渣中继续加入40倍的60%乙醇,70℃条件下保温提取2小时,过滤,得到乙醇提取液B;
(3)上述步骤所得滤渣中继续加入40倍的纯水,70℃条件下保温提取3小时,过滤,得到水提取液C;
(4)将步骤(2)所得的乙醇提取液B进行减压浓缩,浓缩至无乙醇,与步骤(3)所得水提取液C进行合并,得到料液D;
(5)将料液D进行柱吸附、脱色(大孔吸附树脂型号D101),吸附流速:1BV/h,吸附结束,用纯水洗涤树脂,洗涤至流出液检测无多糖反应,收集柱流出液及纯水洗涤液,进行减压浓缩,浓缩至原料投料重量体积的5倍,得到料液E,即得侧柏叶多糖和氨基酸类功效成分;
(6)上述步骤(5)吸附后的树脂用75%乙醇进行洗脱,洗脱至无黄酮反应,得到洗脱液,将洗脱液进行减压浓缩,浓缩至无乙醇,得到料液F,即得侧柏叶黄酮和多酚类功效成分。
实施例2
(1)侧柏叶干草进行粉碎,加入40倍的1,3-丁二醇,40℃条件下低温萃取5小时,过滤,得到多元醇提取液A,即得侧柏叶脂溶性成分;
(2)上述步骤所得滤渣中继续加入30倍的80%乙醇,60℃条件下保温提取3小时,过滤,得到乙醇提取液B;
(3)上述步骤所得滤渣中继续加入10倍的纯水,90℃条件下保温提取1小时,过滤,得到水提取液C;
(4)将步骤(2)所得的乙醇提取液B进行减压浓缩,浓缩至无乙醇,与步骤(3)所得水提取液C进行合并,得到料液D;
(5)将料液D进行柱吸附、脱色(大孔吸附树脂型号D101),吸附流速:3BV/h,吸附结束,用纯水洗涤树脂,洗涤至流出液检测无多糖反应,收集柱流出液及纯水洗涤液,进行减压浓缩,浓缩至原料投料重量体积的2倍,得到料液E,即得侧柏叶多糖和氨基酸类功效成分;
(6)上述步骤(5)吸附后的树脂用80%乙醇进行洗脱,洗脱至无黄酮反应,得到洗脱液,将洗脱液进行减压浓缩,浓缩至无乙醇,得到料液F,即得侧柏叶黄酮和多酚类功效成分。
实施例3
(1)侧柏叶干草进行粉碎,加入25倍的1,3-丙二醇,30℃条件下低温萃取1小时,过滤,得到多元醇提取液A,即得侧柏叶脂溶性成分;
(2)上述步骤所得滤渣中继续加入10倍的95%乙醇,40℃条件下保温提取1小时,过滤,得到乙醇提取液B;
(3)上述步骤所得滤渣中继续加入30倍的纯水,80℃条件下保温提取2小时,过滤,得到水提取液C;
(4)将步骤(2)所得的乙醇提取液B进行减压浓缩,浓缩至无乙醇,与步骤(3)所得水提取液C进行合并,得到料液D;
(5)将料液D进行柱吸附、脱色(大孔吸附树脂型号AB-8),吸附流速:2BV/h,吸附结束,用纯水洗涤树脂,洗涤至流出液检测无多糖反应,收集柱流出液及纯水洗涤液,进行减压浓缩,浓缩至原料投料重量体积的4倍,得到料液E,即得侧柏叶多糖和氨基酸类功效成分;
(6)上述步骤(5)吸附后的树脂用65%乙醇进行洗脱,洗脱至无黄酮反应,得到洗脱液,将洗脱液进行减压浓缩,浓缩至无乙醇,得到料液F,即得侧柏叶黄酮和多酚类功效成分。
实施例4
取上述实施例1所得15重量份提取液A、15重量份料液E和70重量份料液F混合,得到澄清透明的溶液,即可。经过稳定性考察,恒温恒湿放置12个月后样品体系仍稳定,无沉淀析出。
稳定性考察条件如下:将样品放置在恒温恒湿箱中(温度40℃±2℃、湿度RH75%±5%)。在试验期间第1、2、3、6、9、12个月末分别取样观察样品体系是否澄清透明。
实施例5
取上述实施例2所得10重量份提取液A、5重量份料液E和85重量份料液F混合,得到澄清透明的溶液,即可。经过稳定性考察,恒温恒湿放置12个月后样品体系仍稳定,无沉淀析出。
稳定性考察条件同实施例4。
实施例6
取上述实施例3所得25重量份提取液A、10重量份料液E和65重量份料液F混合,得到澄清透明的溶液,即可。经过稳定性考察,恒温恒湿放置12个月后样品体系仍稳定,无沉淀析出。
稳定性考察条件同实施例4。
对比例1
取上述实施例1所得30重量份提取液A、25重量份料液E和45重量份料液F混合,得到澄清透明的溶液,即可。经过稳定性考察,恒温恒湿放置3月后样品体系浑浊有沉淀。
稳定性考察条件同实施例4。
对比例2
取上述实施例2所得5重量份提取液A、40重量份料液E和55重量份料液F混合,得到澄清透明的溶液,即可。经过稳定性考察,恒温恒湿放置1月后样品体系浑浊有沉淀。
稳定性考察条件同实施例4。
对比例3
取上述实施例3所得40重量份提取液A、20重量份料液E和40重量份料液F混合,得到澄清透明的溶液,即可。经过稳定性考察,恒温恒湿放置2月后样品体系浑浊有沉淀。
稳定性考察条件同实施例4。
效果实施例1
(1)手术法分离小鼠触须毛囊游离器官,在倒置显微镜下选取结构完整的毛囊进行试验,采用Williams E培养基培养小鼠触须毛囊游离器官,置于37℃的CO2培养箱中培养,每隔3-5天更换培养基;
(2)培养5天后,培养基中加入取自实施例5的质量浓度为0.05%的侧柏叶提取液组合物(Hairlux),以0.1mM(0.002%)米诺地尔(minoxidil)为阳性对照。每日采用倒置显微镜观察各组毛囊毛球部及其内部结构的形态变化,记录其变化特点,并拍照,图像分析毛发生长速度、伸长度、体外维持时间及其形态。连续培养7天。具体结果可见表1。
表1
组别 空白 minoxidil Hairlux
7天伸长度(Mean±SD,mm) 1.4954±1.2911 2.4968±1.6141** 1.8006±1.2063*
与Control组相比,*:P<0.05;**:P<0.01。
结果表明,米诺地尔组和侧柏叶提取液组(Hairlux)的毛囊器官在7天内的伸长度均高于空白组,说明本申请制得的侧柏叶提取液组合物可促进毛囊器官的生长,具有生发功效。
效果实施例2
选取脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞RAW264.7产生炎症模型,RAW264.7培养至对数期后,在培养基中分别加入2μg/mL LPS,给药组分别同时还加入取自实施例5的质量浓度为0.05%、0.005%、0.0005%的侧柏叶提取液组合物(Hairlux),以10μg/mL***(Dexamethason,下称DEX)为阳性对照,造模24h后,收集培养基上清液,测定炎症因子IL-6、TNF-α和NO的量。具体结果可见表2、表3和表4。
表2
组别 IL-6(Mean±SD,pg/ml)
空白 38.76±3.21
LPS 69.07±4.35
DEX+LPS 44.42±2.87**
0.05%Hairlux+LPS 53.45±3.03**
0.005%Hairlux+LPS 56.95±3.20**
0.0005%Hairlux+LPS 62.18±4.21*
与LPS组相比,*:P<0.05;**:P<0.01。
表3
Figure BDA0001906506320000111
Figure BDA0001906506320000121
与LPS组相比,*:P<0.05;**:P<0.01。
表4
组别 NO(Mean±SD,μM)
空白 32.48±2.35
LPS 62.93±3.37
DEX+LPS 37.32±3.10**
0.05%Hairlux+LPS 35.49±2.78**
0.005%Hairlux+LPS 42.67±3.14**
0.0005%Hairlux+LPS 57.89±2.59
与LPS组相比,*:P<0.05;**:P<0.01。
结果表明:
(1)阳性对照***药效明显,说明本申请所构建的模型能够反映侧柏叶提取液组合物的抗炎功效;
(2)本申请中的侧柏叶提取液组合物可以抑制巨噬细胞RAW264.7细胞分泌炎症因子IL-6、TNF-α和NO,且抑制炎症因子TNF-α和NO分泌的效果优于阳性对照组***(10μg/mL(0.001%)DEX+1μg/mL LPS),具有良好抗炎功效。
效果实施例3
体外培养角质形成细胞(HaCaT细胞),采用SDS抑制细胞分泌抗氧化物质SOD。
HaCaT细胞培养至对数期后,在培养基中分别加入200μM SDS,给药组分别加入取自实施例5的质量浓度为0.05%、0.005%、0.0005%的侧柏叶提取液组合物(Hairlux),以50μM芦丁为阳性对照,造模24h后,收集培养基上清液。测定各组细胞分泌SOD的含量。具体结果可见表5。
表5
组别 SOD(Mean±SD,U/mL)
空白 33.48±2.25
SDS模型组 16.3±2.14
SDS+芦丁 31.2±1.08**
0.05%Hairlux+SDS 30.26±2.10**
0.005%Hairlux+SDS 30.38±0.89**
0.0005%Hairlux+SDS 26.89±1.08**
与SDS模型组相比,*:P<0.05;**:P<0.01。
结果表明:
(1)阳性对照“SDS+芦丁”药效明显,说明本申请所构建的模型能够反映侧柏叶提取液组合物的抗氧化功效;
(2)本申请中的侧柏叶提取液组合物可促进角质形成细胞分泌SOD,具有抗氧化功效,且在质量浓度仅为0.0005%的条件下,仍有明显抗氧化作用。

Claims (16)

1.一种含侧柏提取物的组合物,其特征在于,以100份重量份数计,其包括下述重量份数组分:10~25份提取液A、5~15份料液E和65~85份料液F;
所述提取液A、所述料液E和所述料液F的制备方法包括下述步骤:
(1)将侧柏叶经溶剂A提取,得提取液A和滤渣;所述溶剂A为1,3-丁二醇;
(2)将步骤(1)中所述滤渣经溶剂B提取,得提取液B与滤渣,所述溶剂B为乙醇水溶液;
(3)将步骤(2)中所述滤渣经水提取,得提取液C;
(4)将步骤(2)中所述提取液B浓缩至无醇后与步骤(3)中所述提取液C混合,得料液D;
(5)将步骤(4)中所述料液D经柱层析,收集水洗脱液,浓缩,得料液E,所述料液E的体积mL与步骤(1)中所述侧柏叶的重量g之比为(2~5):1;收集溶剂C的洗脱液,浓缩至无醇,得料液F,所述溶剂C为乙醇水溶液;所述柱层析为大孔吸附树脂柱层析。
2.如权利要求1所述的含侧柏提取物的组合物,其特征在于,所述提取液A的重量份数为10~15份;
和/或,所述料液E的重量份数为5~10份;
和/或,所述料液F的重量份数为70~85份。
3.如权利要求1 所述的含侧柏提取物的组合物,其特征在于,所述提取液A的重量份数为10份、15份或25份;
和/或,所述料液E的重量份数为5份、10份或15份;
和/或,所述料液F的重量份数为65份、70份或85份。
4.如权利要求1所述的含侧柏提取物的组合物,其特征在于,所述含侧柏提取物的组合物中包括下述重量份数组分:10~15份提取液A、5~10份料液E和70~85份料液F。
5.如权利要求1 所述的含侧柏提取物的组合物,其特征在于,所述含侧柏提取物的组合物中包括下述重量份数组分:15份提取液A、15份料液E和70份料液F;或者,所述含侧柏提取物的组合物中包括下述重量份数组分:10份提取液A、5份料液E和85份料液F;或者,所述含侧柏提取物的组合物中包括下述重量份数组分:25份提取液A、10份料液E和65份料液F。
6.如权利要求1所述的含侧柏提取物的组合物,其特征在于,步骤(1)中,将所述侧柏叶粉碎后再经提取;
和/或,步骤(1)中,所述侧柏叶的质量g与所述溶剂A的体积mL之比为1:(10~40);
和/或,步骤(1)中,所述提取的温度为30~50℃;
和/或,步骤(1)中,所述提取的时间为1~5小时。
7.如权利要求6所述的含侧柏提取物的组合物,其特征在于,步骤(1)中,所述侧柏叶的质量g与所述溶剂A的体积mL之比为1:10、1:25或1:40;
和/或,步骤(1)中,所述提取的温度为30℃、40℃或50℃;
和/或,步骤(1)中,所述提取的时间为1小时、3小时或5小时。
8.如权利要求1所述的含侧柏提取物的组合物,其特征在于,步骤(2)中,所述乙醇水溶液为60~95%的乙醇水溶液,百分比是指乙醇的体积百分比;
和/或,步骤(2)中所述滤渣的质量g与所述溶剂B的体积mL之比为1:(10~40);
和/或,步骤(2)中,所述提取的温度为40~70℃;
和/或,步骤(2)中,所述提取的时间为1~3小时。
9.如权利要求8所述的含侧柏提取物的组合物,其特征在于,步骤(2)中所述滤渣的质量g与所述溶剂B的体积mL之比为1:40、1:30或1:10;
和/或,步骤(2)中,所述提取的温度为70℃、60℃或40℃;
和/或,步骤(2)中,所述提取的时间为1小时、2小时或3小时。
10.如权利要求1所述的含侧柏提取物的组合物,其特征在于,步骤(3) 中所述滤渣的质量g与所述水的体积mL之比为1:(10~40);
和/或,步骤(3)中,所述提取的温度为70~90℃;
和/或,步骤(3)中,所述提取的时间为1~3小时;
和/或,步骤(4)中,所述浓缩为在减压条件下进行浓缩。
11.如权利要求10所述的含侧柏提取物的组合物,其特征在于,步骤(3)中所述滤渣的质量g与所述水的体积mL之比为1:10、1:30或1:40;
和/或,步骤(3)中,所述提取的温度为70℃、80℃或90℃;
和/或,步骤(3)中,所述提取的时间为1小时、2小时或3小时。
12.如权利要求1所述的含侧柏提取物的组合物,其特征在于,步骤(5)中,在所述柱层析之前还经上样处理;
和/或,步骤(5)中,所述大孔吸附树脂为D101或AB-8;
和/或,步骤(5)中,所述料液E的体积mL与步骤(1)中所述侧柏叶的重量g之比为(2~4):1;
和/或,步骤(5)中,所述乙醇水溶液为65~80%乙醇水溶液,百分比是指乙醇的体积百分比。
13.如权利要求12所述的含侧柏提取物的组合物,其特征在于,步骤(5)中,所述上样的流速为1~3BV/h;
和/或,步骤(5)中,所述料液E的体积mL与步骤(1)中所述侧柏叶的重量g之比为2:1、4:1或5:1。
14.一种如权利要求1~13中任一项所述的含侧柏提取物的组合物的制备方法,其特征在于,其包括下述步骤,将所述提取液A、所述料液E和所述料液F混合,即可。
15.一种如权利要求1~13中任一项所述的含侧柏提取物的组合物用于制备生发活性成分、抗氧化活性成分和抗炎活性成分的用途。
16.如权利要求15所述的用途,其特征在于,所述的含侧柏提取物的组合物用于制备洗发产品或护发产品中生发活性成分的用途;
所述的含侧柏提取物的组合物用于制备洗发产品、护发产品或护肤产品中抗氧化活性成分和抗炎活性成分的用途。
CN201811534385.4A 2018-12-14 2018-12-14 一种含侧柏提取物的组合物及其制备方法和应用 Active CN109464317B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811534385.4A CN109464317B (zh) 2018-12-14 2018-12-14 一种含侧柏提取物的组合物及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201811534385.4A CN109464317B (zh) 2018-12-14 2018-12-14 一种含侧柏提取物的组合物及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109464317A CN109464317A (zh) 2019-03-15
CN109464317B true CN109464317B (zh) 2021-12-03

Family

ID=65675087

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201811534385.4A Active CN109464317B (zh) 2018-12-14 2018-12-14 一种含侧柏提取物的组合物及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109464317B (zh)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114028281A (zh) * 2021-12-10 2022-02-11 东莞波顿香料有限公司 一种侧柏叶提取物的制备方法及洗发香波

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103202786B (zh) * 2012-09-29 2014-12-10 广州环亚化妆品科技有限公司 一种具有去头屑功能的中药组合物提取物及其在化妆品中的应用
CN105779126A (zh) * 2016-03-15 2016-07-20 吉林烟草工业有限责任公司 一种侧柏叶净油及其制备方法和应用
CN105853963A (zh) * 2016-04-26 2016-08-17 林东尼 一种预防和治疗脱发的中药配方
CN107432879A (zh) * 2016-05-24 2017-12-05 吉林农业大学 侧柏叶生发活性成分的提取方法
CN106668816A (zh) * 2017-01-20 2017-05-17 江苏美爱斯化妆品股份有限公司 一种天然防脱育发液及其制备方法
CN107854364A (zh) * 2017-12-15 2018-03-30 福建省为民生物科技有限公司 一种护肤洗发露

Also Published As

Publication number Publication date
CN109464317A (zh) 2019-03-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108619202B (zh) 一种低共熔溶剂提取、大孔吸附树脂分离纯化牛蒡叶总黄酮的方法
CN104844723B (zh) 一种铁皮石斛提取物的制备方法及应用
CN108250315B (zh) 铁皮石斛提取物及其制备方法
CN112569155B (zh) 一种欧蓍草提取物的提取方法及应用
CN110742908A (zh) 一种美洲大蠊提取物的制备工艺
KR101178594B1 (ko) 하수오 추출물, 대추 추출물 및 황촉규 추출물을 함유하는 피부보습용 화장료 조성물
CN109464317B (zh) 一种含侧柏提取物的组合物及其制备方法和应用
CN111202756A (zh) 一种侧柏叶乙醇提取物的制备方法
CN116869895B (zh) 一种促进水通道蛋白表达、增强屏障的组合物及其制备和应用
KR100563329B1 (ko) 알러지 및 염증 치료용 조성물
CN106177082B (zh) 一种复方黄柏液涂剂的制备方法及应用
CN108126000A (zh) 新鲜三七中三七总皂苷提取制备方法
CN114949034A (zh) 东紫苏或其提取物在制备防治急性肺炎药物中的应用
Ene-Obong et al. Contributions to the cytological effects of medicinal plants. I. The mitodepressive effects of water extracts of Boerhaavia diffusa and Vernonia amygdalina on Allium cepa root tip mitosis.
CN112076122A (zh) 一种新型广谱的防腐组合物
CN113081917A (zh) 一种含***叶提取物的女士护理液及其制备方法
EP3990125A1 (en) Cosmetic product enriched with bioactive components of propolis with direct extraction from beeswax sprayed with propolis tincture and method of production thereof
CN112043650A (zh) 一种祛痘修复化妆品制剂及其制备方法
US20190000911A1 (en) Herbal composition for healing of wound, cuts and burns and a method of synthesizing thereof
CN112569148A (zh) 一种具有舒敏防敏功效的中药组合物及其制备方法与应用
TW201932133A (zh) 蟬花萃取液之萃取方法及其用途
CN116731213B (zh) 一种何首乌多糖及其提取方法和在制备保肝药物中的应用
CN107865927A (zh) 一种具有治疗黑眼圈作用的药物组合物的澄清工艺和质量控制方法
CN115192624B (zh) 一种凉山杜鹃的提取工艺及其应用
NL2026582B1 (en) Treatment method for improving saponin from aerial part of panax notoginseng

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant