CN109329207A - 一种抗肿瘤实验动物模型及其构建方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于养殖脊椎动物技术领域，公开了一种抗肿瘤实验动物模型及其构建方法，取实验用小鼠或大鼠于其右腋按无菌操作皮下接种小鼠或大鼠肿瘤无菌稀释液，24小时后称重分组；24小时后称重，随机分组，每组10只，CTX每日20mg/kgi.p，其余各组每日灌胃；模型对照组给等容积蒸馏水，另设正常动物即未接种肿瘤动物，接种等量生理盐水作为假接种组10只，每日灌服等容积蒸馏水作为正常对照组，每日一次，连续7天。本发明的动物实验模型通过在无菌条件下直接向实验动物体内注射肿瘤无菌稀释液，使肿瘤在动物体内进行生长，验证过程较短，通过称量瘤重而计算抑制率，验证效果具有说服力。
Description
技术领域
本发明属于养殖脊椎动物技术领域，尤其涉及一种抗肿瘤实验动物模型及其构建方法。
背景技术
目前，业内常用的现有技术是这样的：癌症是目前人类中的常见病与多发病，由于死亡率高，而成为死亡的代名词。癌症严重地威胁人类的健康与生命，世界各国均投入大量人力、物力全方位地向癌症展开了进攻。经研究表明，中医中药对癌症的治疗不仅有较好疗效，而且能减少副作用和疾病复发率，能够有效的延长病人的生存期和改善病人的生存质量，并在一定程度上稳定或缩小肿瘤，故中医及中西医结合治疗癌症已成为临床上普遍采用的方法之一。肿瘤的发生是一个多因素、多步骤的复杂生物学过程。祖国传统医学认为肿瘤之所以生成，是因为正气不足，邪气盘踞，致“积之成也”。“邪”是肿癌发展过程中的最主要的病理表现和病理因素，具体多表现为气滞、血瘀、热毒、痰湿等。所以在治疗上亦应重视采用活血化瘀、扶正祛邪、解毒散结等“祛邪”的治疗手段并辅以“扶正”之法，多奏良效。传统的抗肿瘤动物模型需要对多种肿瘤细胞进行培养，然后移植到动物体内，使其进行扩散，然后通过注射抗肿瘤药物进行分组验证，整个过程耗时较长，在验证过程中实验动物会因各种原因而死去，造成了验证效果不具有说服力。
综上所述，现有技术存在的问题是：传统的抗肿瘤动物模型需要对多种肿瘤细胞进行培养，然后移植到动物体内，使其进行扩散；通过注射抗肿瘤药物进行分组验证，过程耗时较长，在验证过程中实验动物会因各种原因而死去，造成了验证效果不具有说服力。
解决上述技术问题的难度和意义：
肿瘤细胞抗原性不强或关键抗原隐蔽，针对肿瘤表面的或肿瘤的产物的，对肿瘤本身的生存并不起关键作用；肿瘤的出现对机体的免疫功能产生抑制或封闭，肿瘤逃避了机体的免疫监视功能，使机体对肿瘤的免疫应答弱或无；肿瘤发病的多样性、复杂性，即使同一肿瘤不同的阶段、不同分化程度、基因突变的复杂性、抗原性千差万别。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种抗肿瘤实验动物模型及其构建方法。
本发明是这样实现的，一种抗肿瘤实验动物模型，所述抗肿瘤实验动物模型为取实验用小鼠或大鼠于其右腋按无菌操作皮下接种小鼠或大鼠肿瘤无菌稀释液，24小时后称重分组；24小时后称重，随机分组，每组10只，CTX每日20mg/kgi.p，其余各组每日灌胃；模型对照组给等容积蒸馏水，另设正常动物即未接种肿瘤动物，接种等量生理盐水作为假接种组10只，每日灌服等容积蒸馏水作为正常对照组，每日一次，连续7天。
本发明的另一目的在于提供一种所述抗肿瘤实验动物模型的构建方法，所述抗肿瘤实验动物模型的构建方法包括以下步骤：
步骤一，取不同种类的小鼠和大鼠若干只进行培养，体重17g～110g，雌雄兼用；
步骤二，在无菌条件下抽取瘤液，以生理盐水按一定比例进行稀释，取实验用小鼠或大鼠于其右腋按无菌操作皮下接种小鼠或大鼠肿瘤无菌稀释液，24小时后称重分组；
步骤三，24小时后称重，随机分组，每组10只，CTX每日20mg/kgi.p，其余各组每日灌胃；
步骤四，模型对照组给等容积蒸馏水，另设正常动物即未接种肿瘤动物，接种等量生理盐水作为假接种组10只，每日灌服等容积蒸馏水作为正常对照组，每日一次，连续7天；
步骤五，停药次日处死小鼠，称重并剥离皮下瘤块，称瘤重，统计死亡率、体重、瘤重并计算抑瘤率，结果作组间t检验，ATK与KL中剂量组比较。
综上所述，本发明的优点及积极效果为：本发明的动物实验模型通过在无菌条件下直接向实验动物体内注射肿瘤无菌稀释液，使肿瘤在动物体内进行生长，验证过程较短，通过称量瘤重而计算抑制率，验证效果具有说服力。
附图说明
图1是本发明实施例提供的抗肿瘤实验动物模型的构建方法流程图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
针对传统的抗肿瘤动物模型需要对多种肿瘤细胞进行培养过程耗时较长，验证效果不具有说服力的问题；本发明的动物实验模型通过在无菌条件下直接向实验动物体内注射肿瘤无菌稀释液，使肿瘤在动物体内进行生长，验证过程较短，通过称量瘤重而计算抑制率，验证效果具有说服力。
下面结合附图对本发明的应用原理作详细的描述。
本发明实施例提供的抗肿瘤实验动物模型为取实验用小鼠或大鼠于其右腋按无菌操作皮下接种小鼠或大鼠肿瘤无菌稀释液，24小时后称重分组；24小时后称重，随机分组，每组10只，CTX每日20mg/kgi.p，其余各组每日灌胃；模型对照组给等容积蒸馏水，另设正常动物即未接种肿瘤动物，接种等量生理盐水作为假接种组10只，每日灌服等容积蒸馏水作为正常对照组，每日一次，连续7天。
如图1所示，本发明实施例提供的抗肿瘤实验动物模型的构建方法包括以下步骤：
S101：取不同种类的小鼠和大鼠若干只进行培养，体重17g～110g，雌雄兼用；
S102：在无菌条件下抽取瘤液，以生理盐水按一定比例进行稀释，取实验用小鼠或大鼠于其右腋按无菌操作皮下接种小鼠或大鼠肿瘤无菌稀释液，24小时后称重分组；
S103：24小时后称重，随机分组，每组10只，CTX每日20mg/kgi.p，其余各组每日灌胃；
S104：模型对照组给等容积蒸馏水，另设正常动物即未接种肿瘤动物，接种等量生理盐水作为假接种组10只，每日灌服等容积蒸馏水作为正常对照组，每日一次，连续7天；
S105：停药次日处死小鼠，称重并剥离皮下瘤块，称瘤重，统计死亡率、体重、瘤重并计算抑瘤率，结果作组间t检验，ATK与KL中剂量组比较。
本发明实施例提供的实验小鼠分为荷瘤对照组，受试药物大、中、小剂量组，安替可组，环磷酰胺组，其中荷瘤对照组中动物20只。
下面结合实验对本发明的应用效果做详细的描述。
1、对小鼠肝癌H22实体瘤的抑制实验
在无菌条件下抽取H22瘤液，以生理盐水1:3稀释，取BALB/c小鼠，于右腋按无菌操作皮下接种小鼠肿瘤无菌稀释液0.2ml/只，24小时后称重分组，随机分组为荷瘤对照组(动物数多一倍)，受试药物大、中、小剂量组，安替可(ATK)组，环磷酰胺组(CTX)，每组10只。CTX每日20mg/kgi.p，其余各组每日灌胃，模型对照组给等容积蒸馏水。给药剂量见前述表。另设正常动物(未接种肿瘤，接种等量生理盐水作为假接种组)10只，每日灌服等容积蒸馏水作为正常对照组。每日一次，连续7天，停药次日处死小鼠，称重并剥离皮下瘤块，称瘤重，统计死亡率、体重、瘤重并计算抑瘤率。结果作组间t检验，ATK与KL中剂量组比较。结果表明康龙胶囊对小鼠肝癌H22实体瘤有显著的抑制作用，见表1。
表1康龙胶囊对小鼠肝癌H22实体瘤抑制作用
注：与荷瘤模型组比较，**:P<0.01；与相当倍数ATK比较，P>0.05。
2、对小鼠Lewis肺癌的抑瘤实验
取带生长良好的实体瘤的肺癌种鼠，无菌条件下剥离瘤块，生理盐水1:4制成匀浆，取C57/6J小黑鼠，雌雄兼用，体重17-22g，按无菌操作于右腋皮下接种小鼠肿瘤无菌稀释液0.2ml/只后，24小时后称重分组，分组及给药及结果处理均同肝癌H22实验。结果表明康龙胶囊对小鼠Lewis肺癌有显著的抑制作用，见表2。
表2康龙胶囊对小鼠Lewis肺癌的抑制作用
注：与荷瘤模型组比较，**:P<0.01；与相当倍数ATK比较，△:P<0.05。
3、对大鼠肉瘤W256的抵制实验
无菌条件下抽取生长良好的W256瘤液，以生理盐水1:3稀释，取SD大鼠，于右腋按无菌操作皮下接种鼠肿瘤无菌稀释液0.2ml/只后，24小时后称重分组，分组同前，给药课量见下表。CTX每日15mg/kgi.p，其余各组每日灌胃给药，每日一次，连续7天，停药次日处死小鼠，称重并剥离皮下瘤块，称瘤重，并计算抑瘤率。各批结果进行组间t检验。结果表明康龙胶囊对大鼠肉瘤W256有显著的抑制作用，见表3。
表3康龙胶囊对大鼠肉瘤W256的抑制作用
本发明对康龙胶囊对小鼠肝癌H22、小鼠Lewis肺癌及大鼠艾氏腹水瘤的抑制作用进行研究。结果示正常空白组动物均未见假性肿块形成，体重及死亡率均符合要求，表明肿瘤生长良好。与正常空白对照组比较，荷瘤动物体重有一定下降趋势；荷瘤动物有少量在中途死亡，死亡数、体重各组间比较无统计学意义(P>0.05)。康龙胶囊对实体瘤的抑制作用呈一定的剂量依赖性，临床等倍剂量表现出较好的活性。在试验中康龙滕亦显示出了具有一定的提高机体免疫力的作用，充分体现了中药复方多途径抑瘤的特点。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (2)
1.一种抗肿瘤实验动物模型，其特征在于，所述抗肿瘤实验动物模型为取实验用小鼠或大鼠于其右腋按无菌操作皮下接种小鼠或大鼠肿瘤无菌稀释液，24小时后称重分组；24小时后称重，随机分组，每组10只，CTX每日20mg/kgi.p，其余各组每日灌胃；模型对照组给等容积蒸馏水，另设正常动物即未接种肿瘤动物，接种等量生理盐水作为假接种组10只，每日灌服等容积蒸馏水作为正常对照组，每日一次，连续7天。
2.一种如权利要求1所述抗肿瘤实验动物模型的构建方法，其特征在于，所述抗肿瘤实验动物模型的构建方法包括以下步骤：
步骤一，取不同种类的小鼠和大鼠若干只进行培养，体重17g～110g，雌雄兼用；
步骤二，在无菌条件下抽取瘤液，以生理盐水按一定比例进行稀释，取实验用小鼠或大鼠于其右腋按无菌操作皮下接种小鼠或大鼠肿瘤无菌稀释液，24小时后称重分组；
步骤三，24小时后称重，随机分组，每组10只，CTX每日20mg/kgi.p，其余各组每日灌胃；
步骤四，模型对照组给等容积蒸馏水，另设正常动物即未接种肿瘤动物，接种等量生理盐水作为假接种组10只，每日灌服等容积蒸馏水作为正常对照组，每日一次，连续7天；
步骤五，停药次日处死小鼠，称重并剥离皮下瘤块，称瘤重，统计死亡率、体重、瘤重并计算抑瘤率，结果作组间t检验，ATK与KL中剂量组比较。
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