CN109247177A - 一种提高广西美登木出苗率的种植方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于种植技术领域,具体公开一种提高广西美登木出苗率的种植方法,具体步骤如下:第一步,培养基质的准备;第二步,种子准备;第三步,萌发处理;第四步,出苗圃培养。该发明具有的优点是:通过本申请的栽培方法,能够提高种子的发芽率,并且提高出圃率,且广西美登木中含有的有效成分的活性相比组织培养得到的广西美登木中含有的有效成分的活性更高。
Description
【技术领域】
本发明属于种植技术领域,具体涉及一种提高广西美登木出苗率的种植方法。
【背景技术】
广西美登木(MaytenusguangxiensisC.Y.ChengetW.L.Sha),为卫矛科美登木属常绿灌木,是广西岩溶特有药用植物,分布于广西大新、崇左、凭祥、宁明等地的石灰岩山地灌丛中。广西美登木的根、茎、叶中含有抗癌活性成分美登木素(Maytansine)和美登布林(Maytanprrine),对乳腺癌、消化道癌、淋巴肉癌、骨髓癌、慢性粒细胞白血病等恶性肿瘤有显著疗效。
广西美登木的生产主要靠野生资源,由于生存环境恶化及多年来产区群众乱采滥伐,野生资源蕴藏量越来越少,处于濒危状态,已被《中国南部和西南部石灰岩珍稀濒危植物名录》列为稀有濒危植物。
现有技术中多数以广西美登木的部分组织进行组织培养,但是经过多次的组织培养后生长成树后,其组织中的活性成分,大大降低,例如同样是一个配方的中草药进行泡药酒,大批规模化生产的中药药效效果就是没有野生的那么好,因此,需要对广西美登木进行种子繁殖,但是种子繁殖的广西美登木出苗率与出圃率低,因此急需找到一种能够有效的提高广西美登木种子繁殖提高出苗率与出圃率的方法。
【发明内容】
本发明的目的是提供一种提高广西美登木出苗率的种植方法,通过本申请的栽培方法,能够提高种子的发芽率,并且提高出圃率,且广西美登木中含有的有效成分的活性相比组织培养得到的广西美登木中含有的有效成分的活性更高。
为了实现上述目的,本发明采用的技术方案如下:
一种提高广西美登木出苗率的种植方法,具体步骤如下:
第一步,培养基质的准备:培养基质按照重量份数计,由以下原料制备得到:泥炭土10-15份、玉米芯5-10份、膨润土8-12份、木薯渣10-15份、甘蔗叶10-15份、饭麦石5-8份、甘蔗叶5-10份、碳化稻壳5-8份、牡蛎壳粉5-8份、椰糠7-10份、EM菌1.0-3.0份、蓖麻粉3.2-4.6份、薄荷叶粉1.8-2.3份、石蒜粉1.8-3.2份;
第二步,种子准备:将粒饱满的广西美登木种子用清水洗干净,然后浸泡在浸泡液中10-15分钟,然后捞出,放置在常温下晾干,接着使用功率为250-300W、频率为200-300赫兹的超声波处理0.5-1.5分钟,处理的方式为超声波处理30S、停止5S、超声波处理30S,如此循环,接着使用紫外光强度为2000-2500lx照射12-15S,照射的操作方式为:照射3S-停止照射10S,接着将种子放置在32℃下保温保藏;
所述浸泡液是由以下原料混合得到:水100ml、复硝酚钠5-10mg、油菜素甾醇3.2-5.5g、香蕉汁20-25ml、豆芽汁15-20ml、番茄汁10-20ml、胶粉1.5-3.5g;
第三步,萌发处理:将培养基质进行高温灭菌后,立即将培养基质平铺在育苗床上,培养基质平铺的厚度是15厘米,将培养基质按照行距为10厘米进行开行,行的深度为3-5厘米,检测培养基质中心的温度达到30℃,立即将种子播种在开设的行内,且每粒种子间隔10-15厘米,然后回填培养基质,在温度为25℃下、光照强度为2000-2500lx,光照时间为12小时每天,播种3天后,开始浇水保持培养基质的湿度为30-40%,在播种10-12天后水开始改成浇促根液以保持培养基质湿度为30-40%,直至种子破土发芽;
所述促根液是由以下原料混合得到:α-萘乙酸钠20-25mg、ABT生根粉15-25mg、细胞***素5-8ml、赤霉素3-5ml、生长素8-13ml、灯盏花提取液10-15ml、茉莉酸2.5-5.5ml、糖蜜3-5g/ml,水50-70ml;第四步,出苗圃培养:当种子发芽后幼苗长至5-10厘米后,开始对幼苗喷施液肥,10-20Kg/亩,其他的田间管理正常进行,除草、防虫,直至出苗圃。
进一步的,所述培养基质是按照以下方法制备得到的:
(1)将甘蔗叶粉碎加入羧甲基纤维素钠混合,堆积处理36-58小时,羧甲基纤维素钠的加入量是甘蔗叶重量的5-8%;
(2)将玉米芯、木薯渣采用紫外光照射灭菌,照射强度为2500-3000lx,照射10分钟后翻一次玉米芯、木薯渣继续照射10分钟,反复3-5次;
(3)将泥炭土、碳化稻壳、膨润土、饭麦石、处理后的甘蔗叶、处理后的玉米芯、木薯渣牡蛎壳粉、椰糠、EM菌按照重量份称取后混合建堆发酵,发酵20-30天后,对发酵料进行翻料后继续建堆发酵处理5-20天,且保持建堆的发酵料相对湿度在30-40%,即可得到预混培养基质;
(4)将蓖麻采摘后将及时加入高温蒸汽锅中蒸煮10-20分,然后取出趁热进行研磨成浆,加入乙醇溶液进行水浴回流提取30-50分钟,取滤液,滤渣继续循环回流提取3-5次,合并滤液,然后进行喷雾干燥得到蓖麻粉;
(5)将薄荷叶洗净后烘干,研磨后过10目筛,得到薄荷叶粉;
(6)将商陆采摘后取其根,进行切片,自然晒干,然后打磨成粉,即可得到石蒜粉;
(7)将预混培养基质与蓖麻粉、薄荷叶粉、石蒜粉混合均匀后即可得到培养基质。
进一步的,在步骤(4)中,乙醇溶液与研磨成浆的蓖麻的体积比为5-8:1;乙醇溶液的质量浓度为75%;水浴的温度为40℃。
进一步的,在步骤(3)中,EM菌还先经过活化处理。
进一步的,所述活化处理的温度为30-32℃。
进一步的,所述活化处理的具体操作步骤是:将香蕉泥5g、红薯泥3g与EM菌混合搅拌均匀得到混合泥,放置1分钟后,取锥形瓶加适量水再加入蛋白胨3g、牛肉膏5g水浴加热恒温至40℃后不断搅拌待蛋白胨、牛肉膏完全溶解,待自然凉冷至35℃后加入香蕉多糖2g、竹叶多糖1.5g、氯化钠3.5g和水定容至500ml,然后在转数为30-40rpm/min摇瓶活化8-10小时,即可。
进一步说明,香蕉泥是取香蕉去皮后切片加入同体积水搅拌成泥即可。
进一步说明,红薯泥是取红薯去皮后切片后加入同体积水搅拌成泥即可。
进一步说明,所述香蕉多糖是由以下方案制备得到:将香蕉去皮后切片,晒干,粉碎,将马铃薯粉加入锥形瓶的同时从锥形瓶入口喷淋水入锥形瓶内,香蕉粉与水按照重量比为1:5,然后进行沸水浴蒸煮20-30分,接着三层纱布过滤取滤液,然后将滤液采用离心机进行离心,3000-3500rpm离心20-30S,取上清液,接着进行浓缩至婆美度30°的浓缩液,然后将质量分数为75%的乙醇溶液倒入边倒边搅拌,然后产生大量的絮状沉淀,然后在温度为-2℃至-3℃冷冻5-8小时,然后降低压力为140-155帕,温度在28℃下干燥5-6小时,即可得到香蕉多糖。采用同时加入马铃薯粉和水能够提高提取的效率和提取率,提取率提高0.5-0.8%。
进一步说明,所述竹叶多糖是由以下方案制备得到:将竹叶洗净干燥、粉碎、然后将竹叶粉加入5倍体积的蒸馏水,竹叶粉加入锥形瓶的同时从锥形瓶入口喷淋蒸馏水水入锥形瓶内,并在功率为250W微波下处理3-5分钟,然后开始蒸煮25-35分钟,过滤取滤液,减压浓缩至原体积的1.11倍,接着在温度为-2℃至-3℃冷冻3-4小时,然后离心机3000-3500rpm离心5-8分钟,取上清液,然后加入无水乙醇进行沉淀2-3次,均通过超滤膜过滤取沉淀,将沉淀真空冻干后,得到竹叶多糖。采用同时加入竹叶粉和水能够提高提取的效率和提取率,提取率提高0.3-0.6%。
综上所述,由于采用了上述技术方案,本发明的有益效果是:
本申请种子经过浸泡液浸泡,能够提高种植的发芽率。其中香蕉汁是将香蕉加入2倍体积的水后进行打汁过滤渣,复硝酚钠具有很好的促进吸收的动力,油菜素甾醇能够促进组织分化,香蕉汁中含有蛋白质、糖、钾、维生素A和C;豆芽汁是将黄豆芽加入2倍体积的水后进行打汁过滤渣,豆芽汁中含有蛋白质、维生素C、糖类、同工酶等;番茄汁将番茄加入2倍体积的水后进行打汁过滤渣,番茄汁中含有番茄素、糖、维生素A、B.C、D以及有机酸和酶等,将香蕉汁、豆芽汁、番茄汁、复硝酚钠、油菜素甾醇复配后具有多种微量元素、大量元素和酶具有促进种子发芽提供动力的功效,经过胶粉混合后能够浸泡后粘结在种子表皮上,经过紫外光照射,能够促进种子吸收浸泡液的营养物质,且紫外光的照射能够使激发种胚的活性,促进发芽因子,提高种植发芽率,缩短发芽时间,能快速判断是否不发芽及时进行补苗,发现通过照射紫外光强度为2000-2500lx 3S-停止照射10S这样的循环操作更有效的促进种子发芽,另外超声波如本申请处理方式,能快速的将种皮和种胚分离,但是不能连续处理使得它们完全脱离,将会破坏种子完整性,本申请人研究发现采用本申请的方法能够使得种皮与种胚微离能够促进种子吸收浸泡液的营养,也能提高种子的萌发成功率;播种后,种子需要适应周围环境与自身环境得到感应,采用温度与种子温度相近的培养基质进行初栽培,种子适应性更强,并保持培养基质***的环境温度与培养基温度差一个差度,使得种子在培养基质的温度降低后慢慢适应温度降低从而能够保证了种子不会初始感应到环境大差异,保证种子内部不会产生激素反应造成休眠自我保护现象,从而能够保证种子的发芽率,并且要控制不要播种后立即浇水,降低种子原有的温度,使得种子开始就拥有发芽的温度,在后期由于培养基质的包埋种子将会在一个相对恒温的温度下生长;当种子的根长出,将支撑种子冲破泥土长出幼苗,种子的出芽率低,也是因为它自身的种胚动力不足,因此,我们额外的在此时施加促根液,灯盏花提取液是将灯盏花经过常规醇提后得到提取液,含有盏花已素、外加细胞***素、α-萘乙酸钠、ABT生根粉、赤霉素、生长素、糖蜜和茉莉酸共同作用促进根的生长,促根液中糖蜜提供动力素还具有一定的粘性使得原料混合均匀并紧密结合,施加后能大大提高种子的发芽率。
另外本申请的培养基质以满足广西美登木发芽过程中所需的PH、碳氮比、磷、钾以及中微量元素的需要,EM菌经过本申请的技术手段可以促使EM菌能大量快速富集并且活性更强,从而能够提高各个原料发酵过程分解更加彻底,释放出更易吸收的有机物质、微量元素等,蓖麻粉、薄荷叶粉、石蒜粉共同作用有效的提高了杀菌的效果。
【具体实施方式】
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂,下面结合本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施,本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进,因此本发明不受下面公开的具体实施的限制。
实施例1:
1、原料准备:
培养基质是按照以下方法制备得到的:
(1)EM菌活化处理:取香蕉去皮后切片加入同体积水搅拌成泥;取红薯去皮后切片后加入同体积水搅拌成泥;将香蕉去皮后切片,晒干,粉碎,将马铃薯粉加入锥形瓶的同时从锥形瓶入口喷淋水入锥形瓶内,香蕉粉与水按照重量比为1:5,然后进行沸水浴蒸煮20分,接着三层纱布过滤取滤液,然后将滤液采用离心机进行离心,3000rpm离心20S,取上清液,接着进行浓缩至婆美度30°的浓缩液,然后将质量分数为75%的乙醇溶液倒入边倒边搅拌,然后产生大量的絮状沉淀,然后在温度为-2℃冷冻5小时,然后降低压力为140帕,温度在28℃下干燥5小时,即可得到香蕉多糖。采用同时加入马铃薯粉和水能够提高提取的效率和提取率,提取率提高0.5%;将竹叶洗净干燥、粉碎、然后将竹叶粉加入5倍体积的蒸馏水,竹叶粉加入锥形瓶的同时从锥形瓶入口喷淋蒸馏水水入锥形瓶内,并在功率为250W微波下处理3分钟,然后开始蒸煮25分钟,过滤取滤液,减压浓缩至原体积的1.11倍,接着在温度为-2℃冷冻3小时,然后离心机3000rpm离心5分钟,取上清液,然后加入无水乙醇进行沉淀2次,均通过超滤膜过滤取沉淀,将沉淀真空冻干后,得到竹叶多糖。采用同时加入竹叶粉和水能够提高提取的效率和提取率,提取率提高0.3%;将香蕉泥5g、红薯泥3g与EM菌混合搅拌均匀得到混合泥,放置1分钟后,取锥形瓶加适量水再加入蛋白胨3g、牛肉膏5g水浴加热恒温至40℃后不断搅拌待蛋白胨、牛肉膏完全溶解,待自然凉冷至35℃后加入香蕉多糖2g、竹叶多糖1.5g、氯化钠3.5g和水定容至500ml,然后30℃、在转数为30rpm/min摇瓶活化8小时,即可;
(2)将甘蔗叶粉碎加入羧甲基纤维素钠混合,堆积处理36小时,羧甲基纤维素钠的加入量是甘蔗叶重量的5%;
(3)将玉米芯、木薯渣采用紫外光照射灭菌,照射强度为2500lx,照射10分钟后翻一次玉米芯、木薯渣继续照射10分钟,反复3次;
(4)将泥炭土、碳化稻壳、膨润土、饭麦石、处理后的甘蔗叶、处理后的玉米芯、木薯渣牡蛎壳粉、椰糠、EM菌按照重量份称取后混合建堆发酵,发酵20天后,对发酵料进行翻料后继续建堆发酵处理5天,且保持建堆的发酵料相对湿度在30%,即可得到预混培养基质;
(5)将蓖麻采摘后将及时加入高温蒸汽锅中蒸煮10分,然后取出趁热进行研磨成浆,加入乙醇溶液进行水浴回流提取30分钟,取滤液,滤渣继续循环回流提取3次,合并滤液,然后进行喷雾干燥得到蓖麻粉;乙醇溶液与研磨成浆的蓖麻的体积比为5:1;乙醇溶液的质量浓度为75%;水浴的温度为40℃;
(6)将薄荷叶洗净后烘干,研磨后过10目筛,得到薄荷叶粉;
(7)将商陆采摘后取其根,进行切片,自然晒干,然后打磨成粉,即可得到石蒜粉;
(8)将预混培养基质与蓖麻粉、薄荷叶粉、石蒜粉混合均匀后即可得到培养基质。
2.将上述制备得到的原料应用在下述栽培方法中:
一种提高广西美登木出苗率的种植方法,具体步骤如下:
第一步,培养基质的准备:培养基质按照重量份数计,由以下原料制备得到:泥炭土10份、玉米芯5份、膨润土8份、木薯渣10份、甘蔗叶10份、饭麦石5份、甘蔗叶5份、碳化稻壳5份、牡蛎壳粉5份、椰糠7份、EM菌1.0份、蓖麻粉3.2份、薄荷叶粉1.8份、石蒜粉1.8份;
第二步,种子准备:将粒饱满的广西美登木种子用清水洗干净,然后浸泡在浸泡液中10分钟,然后捞出,放置在常温下晾干,接着使用功率为250W、频率为200赫兹的超声波处理0.5分钟,处理的方式为超声波处理30S、停止5S、超声波处理30S,如此循环,接着使用紫外光强度为2000lx照射12S,照射的操作方式为:照射3S-停止照射10S,接着将种子放置在32℃下保温保藏;
所述浸泡液是由以下原料混合得到:水100ml、复硝酚钠5mg、油菜素甾醇3.2g、香蕉汁20ml、豆芽汁15ml、番茄汁10ml、胶粉1.5g;
第三步,萌发处理:将培养基质进行高温灭菌后,立即将培养基质平铺在育苗床上,培养基质平铺的厚度是15厘米,将培养基质按照行距为10厘米进行开行,行的深度为3厘米,检测培养基质中心的温度达到30℃,立即将种子播种在开设的行内,且每粒种子间隔10厘米,然后回填培养基质,在温度为25℃下、光照强度为2000lx,光照时间为12小时每天,播种3天后,开始浇水保持培养基质的湿度为30%,在播种10天后水开始改成浇促根液以保持培养基质湿度为30%,直至种子破土发芽;
所述促根液是由以下原料混合得到:α-萘乙酸钠20mg、ABT生根粉15mg、细胞***素5ml、赤霉素3ml、生长素8ml、灯盏花提取液10ml、茉莉酸2.5ml、糖蜜3g/ml,水50ml;第四步,出苗圃培养:当种子发芽后幼苗长至5厘米后,开始对幼苗喷施液肥,10Kg/亩,其他的田间管理正常进行,除草、防虫,直至出苗圃。
实施例2:
1、原料准备:
培养基质是按照以下方法制备得到的:
(1)EM菌活化处理:取香蕉去皮后切片加入同体积水搅拌成泥;取红薯去皮后切片后加入同体积水搅拌成泥;将香蕉去皮后切片,晒干,粉碎,将马铃薯粉加入锥形瓶的同时从锥形瓶入口喷淋水入锥形瓶内,香蕉粉与水按照重量比为1:5,然后进行沸水浴蒸煮30分,接着三层纱布过滤取滤液,然后将滤液采用离心机进行离心,3500rpm离心30S,取上清液,接着进行浓缩至婆美度30°的浓缩液,然后将质量分数为75%的乙醇溶液倒入边倒边搅拌,然后产生大量的絮状沉淀,然后在温度为-3℃冷冻8小时,然后降低压力为155帕,温度在28℃下干燥6小时,即可得到香蕉多糖。采用同时加入马铃薯粉和水能够提高提取的效率和提取率,提取率提高0.8%;将竹叶洗净干燥、粉碎、然后将竹叶粉加入5倍体积的蒸馏水,竹叶粉加入锥形瓶的同时从锥形瓶入口喷淋蒸馏水水入锥形瓶内,并在功率为250W微波下处理5分钟,然后开始蒸煮35分钟,过滤取滤液,减压浓缩至原体积的1.11倍,接着在温度为-3℃冷冻4小时,然后离心机3500rpm离心8分钟,取上清液,然后加入无水乙醇进行沉淀3次,均通过超滤膜过滤取沉淀,将沉淀真空冻干后,得到竹叶多糖。采用同时加入竹叶粉和水能够提高提取的效率和提取率,提取率提高0.6%;将香蕉泥5g、红薯泥3g与EM菌混合搅拌均匀得到混合泥,放置1分钟后,取锥形瓶加适量水再加入蛋白胨3g、牛肉膏5g水浴加热恒温至40℃后不断搅拌待蛋白胨、牛肉膏完全溶解,待自然凉冷至35℃后加入香蕉多糖2g、竹叶多糖1.5g、氯化钠3.5g和水定容至500ml,然后32℃、在转数为40rpm/min摇瓶活化10小时,即可;
(2)将甘蔗叶粉碎加入羧甲基纤维素钠混合,堆积处理58小时,羧甲基纤维素钠的加入量是甘蔗叶重量的8%;
(3)将玉米芯、木薯渣采用紫外光照射灭菌,照射强度为3000lx,照射10分钟后翻一次玉米芯、木薯渣继续照射10分钟,反复5次;
(4)将泥炭土、碳化稻壳、膨润土、饭麦石、处理后的甘蔗叶、处理后的玉米芯、木薯渣牡蛎壳粉、椰糠、EM菌按照重量份称取后混合建堆发酵,发酵30天后,对发酵料进行翻料后继续建堆发酵处理20天,且保持建堆的发酵料相对湿度在40%,即可得到预混培养基质;
(5)将蓖麻采摘后将及时加入高温蒸汽锅中蒸煮20分,然后取出趁热进行研磨成浆,加入乙醇溶液进行水浴回流提取50分钟,取滤液,滤渣继续循环回流提取5次,合并滤液,然后进行喷雾干燥得到蓖麻粉;乙醇溶液与研磨成浆的蓖麻的体积比为8:1;乙醇溶液的质量浓度为75%;水浴的温度为40℃;
(6)将薄荷叶洗净后烘干,研磨后过10目筛,得到薄荷叶粉;
(7)将商陆采摘后取其根,进行切片,自然晒干,然后打磨成粉,即可得到石蒜粉;
(8)将预混培养基质与蓖麻粉、薄荷叶粉、石蒜粉混合均匀后即可得到培养基质。
2.将上述制备得到的原料应用在下述栽培方法中:
一种提高广西美登木出苗率的种植方法,具体步骤如下:
第一步,培养基质的准备:培养基质按照重量份数计,由以下原料制备得到:泥炭土15份、玉米芯10份、膨润土12份、木薯渣15份、甘蔗叶15份、饭麦石8份、甘蔗叶10份、碳化稻壳8份、牡蛎壳粉8份、椰糠10份、EM菌3.0份、蓖麻粉4.6份、薄荷叶粉2.3份、石蒜粉3.2份;
第二步,种子准备:将粒饱满的广西美登木种子用清水洗干净,然后浸泡在浸泡液中15分钟,然后捞出,放置在常温下晾干,接着使用功率为300W、频率为300赫兹的超声波处理1.5分钟,处理的方式为超声波处理30S、停止5S、超声波处理30S,如此循环,接着使用紫外光强度为2500lx照射15S,照射的操作方式为:照射3S-停止照射10S,接着将种子放置在32℃下保温保藏;
所述浸泡液是由以下原料混合得到:水100ml、复硝酚钠8mg、油菜素甾醇4.3g、香蕉汁25ml、豆芽汁20ml、番茄汁20ml、胶粉3.5g;
第三步,萌发处理:将培养基质进行高温灭菌后,立即将培养基质平铺在育苗床上,培养基质平铺的厚度是15厘米,将培养基质按照行距为10厘米进行开行,行的深度为5厘米,检测培养基质中心的温度达到30℃,立即将种子播种在开设的行内,且每粒种子间隔15厘米,然后回填培养基质,在温度为25℃下、光照强度为2500lx,光照时间为12小时每天,播种3天后,开始浇水保持培养基质的湿度为40%,在播种12天后水开始改成浇促根液以保持培养基质湿度为40%,直至种子破土发芽;
所述促根液是由以下原料混合得到:α-萘乙酸钠25mg、ABT生根粉25mg、细胞***素8ml、赤霉素5ml、生长素13ml、灯盏花提取液15ml、茉莉酸5.5ml、糖蜜5g/ml,水70ml;第四步,出苗圃培养:当种子发芽后幼苗长至10厘米后,开始对幼苗喷施液肥,20Kg/亩,其他的田间管理正常进行,除草、防虫,直至出苗圃。
实施例3:
1、原料准备:
培养基质是按照以下方法制备得到的:
(1)EM菌活化处理:取香蕉去皮后切片加入同体积水搅拌成泥;取红薯去皮后切片后加入同体积水搅拌成泥;将香蕉去皮后切片,晒干,粉碎,将马铃薯粉加入锥形瓶的同时从锥形瓶入口喷淋水入锥形瓶内,香蕉粉与水按照重量比为1:5,然后进行沸水浴蒸煮24分,接着三层纱布过滤取滤液,然后将滤液采用离心机进行离心,3450rpm离心25S,取上清液,接着进行浓缩至婆美度30°的浓缩液,然后将质量分数为75%的乙醇溶液倒入边倒边搅拌,然后产生大量的絮状沉淀,然后在温度为-2℃冷冻6小时,然后降低压力为150帕,温度在28℃下干燥5.3小时,即可得到香蕉多糖。采用同时加入马铃薯粉和水能够提高提取的效率和提取率,提取率提高0.7%;将竹叶洗净干燥、粉碎、然后将竹叶粉加入5倍体积的蒸馏水,竹叶粉加入锥形瓶的同时从锥形瓶入口喷淋蒸馏水水入锥形瓶内,并在功率为250W微波下处理4分钟,然后开始蒸煮30分钟,过滤取滤液,减压浓缩至原体积的1.11倍,接着在温度为-3℃冷冻3.5小时,然后离心机3250rpm离心7分钟,取上清液,然后加入无水乙醇进行沉淀3次,均通过超滤膜过滤取沉淀,将沉淀真空冻干后,得到竹叶多糖。采用同时加入竹叶粉和水能够提高提取的效率和提取率,提取率提高0.55%;将香蕉泥5g、红薯泥3g与EM菌混合搅拌均匀得到混合泥,放置1分钟后,取锥形瓶加适量水再加入蛋白胨3g、牛肉膏5g水浴加热恒温至40℃后不断搅拌待蛋白胨、牛肉膏完全溶解,待自然凉冷至35℃后加入香蕉多糖2g、竹叶多糖1.5g、氯化钠3.5g和水定容至500ml,然后31℃、在转数为35rpm/min摇瓶活化9小时,即可;
(2)将甘蔗叶粉碎加入羧甲基纤维素钠混合,堆积处理42小时,羧甲基纤维素钠的加入量是甘蔗叶重量的6%;
(3)将玉米芯、木薯渣采用紫外光照射灭菌,照射强度为2600lx,照射10分钟后翻一次玉米芯、木薯渣继续照射10分钟,反复4次;
(4)将泥炭土、碳化稻壳、膨润土、饭麦石、处理后的甘蔗叶、处理后的玉米芯、木薯渣牡蛎壳粉、椰糠、EM菌按照重量份称取后混合建堆发酵,发酵26天后,对发酵料进行翻料后继续建堆发酵处理12天,且保持建堆的发酵料相对湿度在36%,即可得到预混培养基质;
(5)将蓖麻采摘后将及时加入高温蒸汽锅中蒸煮17分,然后取出趁热进行研磨成浆,加入乙醇溶液进行水浴回流提取39分钟,取滤液,滤渣继续循环回流提取4次,合并滤液,然后进行喷雾干燥得到蓖麻粉;乙醇溶液与研磨成浆的蓖麻的体积比为6:1;乙醇溶液的质量浓度为75%;水浴的温度为40℃;
(6)将薄荷叶洗净后烘干,研磨后过10目筛,得到薄荷叶粉;
(7)将商陆采摘后取其根,进行切片,自然晒干,然后打磨成粉,即可得到石蒜粉;
(8)将预混培养基质与蓖麻粉、薄荷叶粉、石蒜粉混合均匀后即可得到培养基质。
2.将上述制备得到的原料应用在下述栽培方法中:
一种提高广西美登木出苗率的种植方法,具体步骤如下:
第一步,培养基质的准备:培养基质按照重量份数计,由以下原料制备得到:泥炭土13份、玉米芯7份、膨润土10份、木薯渣14份、甘蔗叶13份、饭麦石7份、甘蔗叶6份、碳化稻壳6份、牡蛎壳粉6份、椰糠8份、EM菌2.0份、蓖麻粉3.8份、薄荷叶粉2.1份、石蒜粉2.6份;
第二步,种子准备:将粒饱满的广西美登木种子用清水洗干净,然后浸泡在浸泡液中13分钟,然后捞出,放置在常温下晾干,接着使用功率为280W、频率为250赫兹的超声波处理1分钟,处理的方式为超声波处理30S、停止5S、超声波处理30S,如此循环,接着使用紫外光强度为2700lx照射14S,照射的操作方式为:照射3S-停止照射10S,接着将种子放置在32℃下保温保藏;
所述浸泡液是由以下原料混合得到:水100ml、复硝酚钠10mg、油菜素甾醇5.5g、香蕉汁23ml、豆芽汁18ml、番茄汁16ml、胶粉2.5g;
第三步,萌发处理:将培养基质进行高温灭菌后,立即将培养基质平铺在育苗床上,培养基质平铺的厚度是15厘米,将培养基质按照行距为10厘米进行开行,行的深度为4厘米,检测培养基质中心的温度达到30℃,立即将种子播种在开设的行内,且每粒种子间隔13厘米,然后回填培养基质,在温度为25℃下、光照强度为2200lx,光照时间为12小时每天,播种3天后,开始浇水保持培养基质的湿度为37%,在播种11天后水开始改成浇促根液以保持培养基质湿度为35%,直至种子破土发芽;
所述促根液是由以下原料混合得到:α-萘乙酸钠22mg、ABT生根粉20mg、细胞***素7ml、赤霉素4ml、生长素10ml、灯盏花提取液13ml、茉莉酸3.5ml、糖蜜4g/ml,水60ml;第四步,出苗圃培养:当种子发芽后幼苗长至7厘米后,开始对幼苗喷施液肥,14Kg/亩,其他的田间管理正常进行,除草、防虫,直至出苗圃。
试验证明1:
对比例1:
与实施例3的方法基本一致,不同点是培养基质的原料中不含蓖麻粉2份、薄荷叶粉3份、石蒜粉2份。
对比例2:
与实施例3的方法基本一致,不同点是培养基质的原料中不含蓖麻粉2份、石蒜粉2份。
对比例3:
与实施例3的方法基本一致,不同点是培养基质的原料中不含石薄荷叶粉3份、石蒜粉2份。
将实施例1-3与对比例1-3的方案在百色德宝某农场中进行试验对比并收集试验数据,将分为6个试验小区,每个小区成一育苗床,育苗床中各播种100颗种子,播种时间为2017年的4月10日。在2017年5月1日、2017年5月16日、2017年6月1日对广西美登木种子的发芽情况进行记录。结果见下表:
表1
由上表可知,采用了本申请的技术方案蓖麻粉、薄荷叶粉、石蒜粉,中含有酮类、酚类、有机酸类等具有抑菌的作用,三者相互作用能够促进抑菌防范范围和抑菌的宽度,促使种子萌发后能够健康的继续生长。
试验证明2:
对照组1:
与实施例1的方法基本一致,不同点是EM菌活化处理:将将香蕉泥5g、红薯泥3g与EM菌混合取锥形瓶加适量水再加入蛋白胨3g、牛肉膏5g水浴加热恒温至40℃后不断搅拌待蛋白胨、牛肉膏完全溶解,待自然凉冷至35℃后加入香蕉多糖2g、竹叶多糖1.5g、氯化钠3.5g和水定容至500ml,然后30℃、在转数为30rpm/min摇瓶活化8小时,即可。
对照组2:
与实施例1的方法基本一致,不同点是EM菌未经过活化处理。
对照组3:
与实施例1的方法基本一致,不同点是培养基质不含甘蔗叶10份、泥炭土15份、玉米芯10份、膨润土12份、木薯渣15份。
对照组4:
与实施例1的方法基本一致,不同点是培养基质不含饭麦石8份、甘蔗叶10份、碳化稻壳8份、牡蛎壳粉8份、椰糠10份。
对照组5:
与实施例1的方法基本一致,不同点是培养基质是泥炭土+园土1:1比例组成。
将实施例1-3与对照组1-5制备得到的培养基进行理化性能检测,pH值采用pH酸度计法测定、有机质含量采用重铬酸氧化外加热法测定、全氮含量采用半微量凯氏定氮法测定、全磷含量和全钾含量采用等离子发射光谱法测定、速效氮含量采用碱解-扩散法测定、速效磷含量采用双酸浸提-等离子发射光谱法测定、速效钾含量采用乙酸铵浸提-等离子发射光谱法测定。
表2
全氮g/kg | 全磷g/kg | 全钾g/kg | 速效氮mg/kg | |
实施例1 | 7.96 | 0.91 | 1.98 | 30.21 |
实施例2 | 8.12 | 0.96 | 2.03 | 35.26 |
实施例3 | 8.32 | 0.98 | 2.08 | 34.05 |
对照组1 | 7.24 | 0.71 | 1.65 | 23.25 |
对照组2 | 7.01 | 0.62 | 1.48 | 20.30 |
对照组3 | 7.54 | 0.76 | 1.57 | 25.27 |
对照组4 | 7.61 | 0.73 | 1.60 | 24.86 |
对照组5 | 5.56 | 0.51 | 1.40 | 19.41 |
速效磷mg/kg | 速效钾mg/kg | pH值 | 有机质含量g/kg | |
实施例1 | 45.23 | 278.68 | 5.64 | 415.36 |
实施例2 | 46.34 | 295.45 | 5.71 | 431.21 |
实施例3 | 47.21 | 301.25 | 5.78 | 446.36 |
对照组1 | 36.25 | 238.69 | 5.12 | 374.25 |
对照组2 | 30.25 | 210.05 | 4.99 | 351.02 |
对照组3 | 36.56 | 245.36 | 5.35 | 365.36 |
对照组4 | 35.20 | 240.01 | 5.21 | 354.89 |
对照组5 | 21.68 | 213.52 | 4.54 | 247.26 |
试验证明3:
将本申请实施例1-3得到的幼苗与野生采摘到的广西美登木与经过芽组织培养后种植得到的广西美登木,分别采摘广西美登木的茎,采用常规的提取工艺提取美登木素,并对小白鼠200±10g,体型相近、产后1胎后的日龄相同、处理同样患有乳腺癌100只,各分为5组,每组20只,使用美登木素口服剂喂养(实施例1-3、野生广西美登木、组织培养生长的广西美登木提取得到的美登木素),每天3次,每次1g,14天为一个疗程,治疗一个疗程后检查乳腺癌治疗效果;结果见下表:
表3
美登木素含量(mg/g) | 乳腺癌治疗有效率/% | |
实施例1 | 14.35 | 86 |
实施例2 | 14.98 | 87 |
实施例3 | 15.27 | 92 |
野生广西美登木 | 13.25 | 95 |
组织培养生长的广西美登木 | 16.05 | 60 |
由上表可知,采用本申请种子栽培出来的广西美登木含有美登木素量排名第二,治疗效果与野生的相近,比组织培养的有效率提高至少25%。
以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式,其描述较为具体和详细,但并不能因此而理解为对本发明范围的限制。应当指出的是,对于本领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干变形和改进,这些都属于本发明的保护范围。因此,本发明的保护范围应以所附权利要求为准。
Claims (5)
1.一种提高广西美登木出苗率的种植方法,其特征在于,具体步骤如下:
第一步,培养基质的准备:培养基质按照重量份数计,由以下原料制备得到:木薯渣10-15份、碳化稻壳5-8份、玉米芯5-10份、椰糠7-10份、膨润土8-12份、甘蔗叶10-15份、饭麦石5-8份、泥炭土10-15份、甘蔗叶5-10份、牡蛎壳粉5-8份、EM菌1.0-3.0份、蓖麻粉3.2-4.6份、薄荷叶粉1.8-2.3份、石蒜粉1.8-3.2份;
第二步,种子准备:将粒饱满的广西美登木种子用清水洗干净,然后浸泡在浸泡液中10-15分钟,然后捞出,放置在常温下晾干,接着使用功率为250-300W、频率为200-300赫兹的超声波处理0.5-1.5分钟,处理的方式为超声波处理30S、停止5S、超声波处理30S,如此循环,接着使用紫外光强度为2000-2500lx照射12-15S,照射的操作方式为:照射3S-停止照射10S,接着将种子放置在32℃下保温保藏;
所述浸泡液是由以下原料混合得到:水100ml、复硝酚钠5-10mg、油菜素甾醇3.2-5.5g、香蕉汁20-25ml、豆芽汁15-20ml、番茄汁10-20ml、胶粉1.5-3.5g;
第三步,萌发处理:将培养基质进行高温灭菌后,立即将培养基质平铺在育苗床上,培养基质平铺的厚度是15厘米,将培养基质按照行距为10厘米进行开行,行的深度为3-5厘米,检测培养基质中心的温度达到30℃,立即将种子播种在开设的行内,且每粒种子间隔10-15厘米,然后回填培养基质,在温度为25℃下、光照强度为2000-2500lx,光照时间为12小时每天,播种3天后,开始浇水保持培养基质的湿度为30-40%,在播种10-12天后水开始改成浇促根液以保持培养基质湿度为30-40%,直至种子破土发芽;
所述促根液是由以下原料混合得到:α-萘乙酸钠20-25mg、ABT生根粉15-25mg、细胞***素5-8ml、赤霉素3-5ml、生长素8-13ml、灯盏花提取液10-15ml、茉莉酸2.5-5.5ml、糖蜜3-5g/ml,水50-70ml;
第四步,出苗圃培养:当种子发芽后幼苗长至5-10厘米后,开始对幼苗喷施液肥,10-20Kg/亩,其他的田间管理正常进行,除草、防虫,直至出苗圃。
2.根据权利要求1所述的一种提高广西美登木出苗率的种植方法,其特征在于:所述培养基质是按照以下方法制备得到的:
(1)将甘蔗叶粉碎加入羧甲基纤维素钠混合,堆积处理36-58小时,羧甲基纤维素钠的加入量是甘蔗叶重量的5-8%;
(2)将玉米芯、木薯渣采用紫外光照射灭菌,照射强度为2500-3000lx,照射10分钟后翻一次玉米芯、木薯渣继续照射10分钟,反复3-5次;
(3)将泥炭土、碳化稻壳、膨润土、饭麦石、处理后的甘蔗叶、处理后的玉米芯、木薯渣牡蛎壳粉、椰糠、EM菌按照重量份称取后混合建堆发酵,发酵20-30天后,对发酵料进行翻料后继续建堆发酵处理5-20天,且保持建堆的发酵料相对湿度在30-40%,即可得到预混培养基质;
(4)将蓖麻采摘后将及时加入高温蒸汽锅中蒸煮10-20分,然后取出趁热进行研磨成浆,加入乙醇溶液进行水浴回流提取30-50分钟,取滤液,滤渣继续循环回流提取3-5次,合并滤液,然后进行喷雾干燥得到蓖麻粉;
(5)将薄荷叶洗净后烘干,研磨后过10目筛,得到薄荷叶粉;
(6)将商陆采摘后取其根,进行切片,自然晒干,然后打磨成粉,即可得到石蒜粉;
(7)将预混培养基质与蓖麻粉、薄荷叶粉、石蒜粉混合均匀后即可得到培养基质。
3.根据权利要求2所述的一种提高广西美登木出苗率的种植方法,其特征在于:在步骤(4)中,乙醇溶液与研磨成浆的蓖麻的体积比为5-8:1;乙醇溶液的质量浓度为75%;水浴的温度为40℃。
4.根据权利要求2所述的一种提高广西美登木出苗率的种植方法,其特征在于:在步骤(3)中,EM菌还先经过活化处理。
5.根据权利要求4所述的一种提高广西美登木出苗率的种植方法,其特征在于:所述活化处理的温度为30-32℃。
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