CN109106983B - 一种脂肪移植材料及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种脂肪移植材料及其制备方法和应用,该制备方法包括如下步骤:(a)选取脂肪颗粒、离心收集中层脂肪组织;(b)采用搅拌棒对脂肪组织进行搅拌,并收集缠绕在搅拌棒上的纤维组织,重复上述搅拌和收集操作,直至搅拌棒搅拌后无缠绕的纤维组织为止;(c)将收集的纤维组织与生理盐水混合搅拌,收集沉淀物;(d)将收集的沉淀物去除水分、破碎成浆糊状即得脂肪移植材料;该制备方法操作简单、快速高效,而且无需使用外源性试剂,避免交叉感染,并且提高了脂肪移植材料的产率。
Description
技术领域
本发明涉及整容填充材料技术领域,具体涉及一种脂肪移植材料及其制备方法和应用。
背景技术
近年来随着求美者越来越多,隆鼻、隆颏的手术也逐年增加。临床上应用于隆鼻隆颏术的填充材料很多,人工合成材料中,固体的有硅橡胶、膨体聚四氟乙烯等,这些材料容易发生排斥反应、术后感染等并发症;软体填充物有胶原蛋白、透明质酸等,这些材料为可吸收材料,需要反复填充,增加费用。自体组织有真皮瓣、自体耳软骨、肋软骨等,自体组织瓣或软骨移植带来供区的继发创伤和畸形。
自体脂肪颗粒作为一种软组织填充物,由于其来源丰富、取材容易、操作简单、充盈外形好、无排斥反应等优点,越来越受到国内外整形美容医师的重视。因效果明显、损伤较小、费用较低,进行颗粒脂肪填充面部的求美者逐年增加,但是脂肪移植后存在一定的吸收率,使得部分求美者需要多次填充,尤其是在鼻背、颏部等部位,因局部组织量少,血管网不丰富,皮肤张力大等因素,导致移植后的脂肪成活率较低,很难达到理想的效果。
目前,现有技术中公开有一种脂肪组织干细胞凝胶,该脂肪组织干细胞凝胶在制备过程中,需要将脂肪颗粒乳化再离心,然而乳化过程中脂肪干细胞被大量破坏,导致脂肪组织干细胞凝胶产率和移植后的成活率较低;而且,脂肪组织干细胞凝胶中含有大量细胞碎片,这些细胞碎片易被自身吸收,致使脂肪组织干细胞凝胶用于隆鼻隆颏时吸收率较高;此外,脂肪细胞被破坏后释放出的油性细胞内容物,没有价值而被扔掉,造成了资源浪费。
发明内容
本发明的第一目的在于提供一种脂肪移植材料的制备方法,该制备方法操作简单、快速高效,而且无需使用外源性试剂,避免交叉感染,并且提高了脂肪移植材料的产率。
本发明的第二目的在于提供一种脂肪移植材料,该脂肪移植材料由上述方法制备得到,该脂肪移植材料移植后的成活率较高,并且具有较低的吸收率。
本发明第三目的在于提供一种脂肪移植材料的应用,尤其是将脂肪移植材料在隆鼻、隆颏等部位的应用,并达到了较高的成活率。
为实现本发明上述目的,特采用以下技术方案:
本发明第一方面提供一种脂肪移植材料的制备方法,该制备方法包括如下步骤:
(a)选取脂肪颗粒、离心收集中层脂肪组织;
(b)采用搅拌棒对脂肪组织进行搅拌,并收集缠绕在搅拌棒上的纤维组织,重复上述搅拌和收集操作,直至搅拌棒搅拌后无缠绕的纤维组织为止;
(c)将收集的纤维组织与生理盐水混合搅拌,收集沉淀物;
(d)将收集的沉淀物去除水分、破碎成浆糊状即得脂肪移植材料。
优选地,本发明脂肪移植材料制备过程中在无菌条件下进行,并且所采用的试剂、仪器均提前进行杀菌处理。
通过上述制备方法能够将脂肪颗粒中的纤维组织充分分离开来,并避免了脂肪干细胞的破坏,提高了脂肪移植材料的产率;该制备方法无需使用外源性试剂,避免交叉感染,而且操作简单、快速高效,易于生产。
进一步地,所述制备方法还包括将得到的脂肪移植材料置入采用纳米脂肪转化器连接的两个注射器中,推拉2-3次,去除油分、剪碎得到纯化的脂肪移植材料。通过对脂肪移植材料进行纯化处理,进一步提高了胶原含量,提高隆鼻隆颏后的塑性能力以及支撑强度。
在本发明中能够实现对脂肪的充分利用,将得到的脂肪移植材料用于鼻背、颏部等特殊部位填充,而提取脂胶原后剩余的颗粒脂肪可以用于面部其它部位或胸部等处的填充。
在本发明中对脂肪颗粒的来源部位不做严格限制,优选地,本申请技术方案中脂肪颗粒选自腹部脂肪;通过选择特定的腹部脂肪,能够提高制备得到的脂肪移植材料中胶原纤维的含量,利于提高脂肪移植材料的塑性能力,使其不易变形。
进一步地,所述步骤(a)中,离心转速为900-1100r/min;离心时间为2-4min。通过离心的设置能够促进纤维组织的分离,然而,离心转速较低不易使纤维组织分离,较高导致纤维组织的断裂,不利于后续纤维组织的提取,直接影响脂肪移植材料的产率;本发明通过对离心条件的具体限定,能够提高纤维组织的充分分离,利于提高制备的脂肪移植材料的产率。
进一步地,所述步骤(b)中,搅拌棒的类型不做严格限制,例如,可以为本领域的常规搅拌棒,也可以为注脂管或止血钳;优选为18G注脂管。
进一步地,所述步骤(c)中,生理盐水与脂肪颗粒的体积比为1∶(2-4)。通过生理盐水的添加及添加量的限定,能够去除纤维组织中的脂肪,避免脂肪的残留,待移植后脂肪被自身组织吸收,造成脂肪移植材料的吸收率较高。
进一步地,所述步骤(d)中,去除水分为采用纱布吸去沉淀物上的水分;破碎为采用剪刀剪碎。
本发明第二方面提供一种脂肪移植材料,该脂肪移植材料由上述制备方法制备得到。该脂肪移植材料移植后的成活率较高,并且具有较低的吸收率。
进一步地,所述脂肪移植材料包括基质血管片段细胞、脂肪干细胞和胶原。研究表明,通过基质血管片段细胞与脂肪干细胞的共同作用能够更好的提高移植后脂肪移植材料的成活率;此外,脂肪移植材料中含有的大量胶原纤维,密度大,粘性高,具有较强的支撑力,具有较强的塑型能力,不易变形和臃肿。
优选地,所述所述基质血管片段细胞含量为(6.2-9.5)×106个/ml;所述脂肪干细胞含量为(1.4-3.1)×106个/ml;胶原含量为74%-98%。本发明通过对脂肪移植材料中各成分含量的限定,能够更好的提高移植后脂肪移植材料的成活率。
优选地,所述胶原为Ⅰ型胶原。
本发明第三方面提供一种脂肪移植材料在隆鼻、隆颏、隆鼻唇沟、隆泪沟、隆凹陷性瘢痕或面部年轻化中的应用。
进一步地,所述脂肪移植材料在隆鼻或隆颏中的应用。将本发明脂肪移植材料应用在组织量少、血管网不丰富、皮肤张力大的鼻背或颏部等部位,并达到了移植后脂肪移植材料具有较高的成活率。
与现有技术相比,本发明有益效果至少包括:
(1)本发明脂肪移植材料的制备方法操作简单、快速高效,而且无需使用外源性试剂,避免交叉感染,并且提高了脂肪移植材料的产率。
(2)本发明脂肪移植材料通过特定含量的基质血管片段细胞和脂肪干细胞的共同作用能够更好的提高移植后脂肪移植材料的成活率。
(3)本发明脂肪移植材料含有大量胶原纤维,其密度大,粘性高,具有较强的支撑力,使得脂肪移植材料具有较强的塑型能力,且不易变形和臃肿。
(4)本发明采用的脂肪颗粒选自自身腹部脂肪,能够提高制备得到的脂肪移植材料中胶原纤维的含量,利于提高脂肪移植材料的塑性能力,使其不易变形。
(5)本发明脂肪移植材料能够应用在隆鼻、隆颏等部位,并达到了移植后脂肪移植材料具有较高的成活率。
(6)本申请制备方法不破坏脂肪颗粒,提取纤维组织后,剩余的脂肪颗粒可以用于面部或胸部填充,实现资源的充分利用。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述,但是本领域技术人员将会理解,下列实施例仅用于说明本发明,而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市购买获得的常规产品。
实施例1
本实施例为一种脂肪移植材料的制备方法,该制备方法包括如下步骤:
(a)选取腹部脂肪颗粒100ml,并在1000r/min转速下离心2min,随后,收集中层脂肪组织至无菌放药碗中;
(b)采用18G注脂管对脂肪组织进行搅拌,并收集缠绕在18G注脂管上的纤维组织至无菌弯盘中,重复上述搅拌和收集操作,直至18G注脂管搅拌后无缠绕的纤维组织为止;
(c)将50ml无菌生理盐水添加至无菌弯盘中并搅拌,收集沉淀物;
(d)将收集的沉淀物置于无菌纱布上吸去水分,再置于无菌小药杯中,用剪刀将纤维组织剪成浆糊状;
(e)将浆糊状沉淀物置于采用纳米脂肪转换器连接的两个10ml注射器中,推拉2次,再将处理后沉淀物置在纱布上吸去油,将纤维组织用镊子取下剪碎即得脂肪移植材料。
称取上述方法制备得到的脂肪移植材料,并计算脂肪移植材料的产率为11.8%;并采用脱脂、胶原酶消化、离心、细胞计数和流式细胞分析对上述制备得到的脂肪移植材料进行检测,其中基质血管片段细胞含量为9.5×106个/ml;脂肪干细胞含量为2.1×106个/ml;胶原含量为91%。
实施例2
本实施例为一种脂肪移植材料的制备方法,该制备方法包括如下步骤:
(a)选取腹部脂肪颗粒200ml,并在1000g/min转速下离心4min,随后,收集中层脂肪组织至无菌放药碗中;
(b)采用止血钳对脂肪组织进行搅拌,并收集缠绕在止血钳上的纤维组织至无菌弯盘中,重复上述搅拌和收集操作,直至止血钳搅拌后无缠绕的纤维组织为止;
(c)将50ml无菌生理盐水添加至无菌弯盘中并搅拌,收集沉淀物;
(d)将收集的沉淀物置于无菌纱布上吸去水分,再置于无菌小药杯中,用剪刀将纤维组织剪成浆糊状;
(e)将浆糊状沉淀物置于采用纳米脂肪转换器连接的两个10ml注射器中,推拉3次,再将处理后沉淀物置在纱布上吸去油,将纤维组织用镊子取下剪碎即得脂肪移植材料。
称取上述方法制备得到的脂肪移植材料,并计算脂肪移植材料的产率为11.5%;并采用实施例1的检测方法对上述制备得到的脂肪移植材料进行检测,其中基质血管片段细胞含量为6.2×106个/ml;脂肪干细胞含量为1.4×106个/ml;胶原含量为92%。
实施例3
本实施例为一种脂肪移植材料的制备方法,该制备方法包括如下步骤:
(a)选取腹部脂肪颗粒150ml,并在1000g/min转速下离心3min,随后,收集中层脂肪组织至无菌放药碗中;
(b)采用18G注脂管对脂肪组织进行搅拌,并收集缠绕在18G注脂管上的纤维组织至无菌弯盘中,重复上述搅拌和收集操作,直至18G注脂管搅拌后无缠绕的纤维组织为止;
(c)将50ml无菌生理盐水添加至无菌弯盘中并搅拌,收集沉淀物;
(d)将收集的沉淀物置于无菌纱布上吸去水分,再置于无菌小药杯中,用剪刀将纤维组织剪成浆糊状;
(e)将浆糊状沉淀物置于采用纳米脂肪转换器连接的两个10ml注射器中,推拉2次,再将处理后沉淀物置在纱布上吸去油,将纤维组织用镊子取下剪碎即得脂肪移植材料。
称取上述方法制备得到的脂肪移植材料,并计算脂肪移植材料的产率为12.3%;并采用实施例1的检测方法对上述制备得到的脂肪移植材料进行检测,其中基质血管片段细胞含量为7.7×106个/ml;脂肪干细胞含量为1.5×106个/ml;胶原含量为95%。
实施例4
本实施例为一种脂肪移植材料的制备方法,该制备方法与实施例3的制备方法基本相同,区别仅在于将步骤(a)中腹部脂肪颗粒替换为腿部脂肪颗粒。
称取上述方法制备得到的脂肪移植材料,并计算脂肪移植材料的产率为9.4%;并采用实施例1的检测方法对上述制备得到的脂肪移植材料进行检测,其中基质血管片段细胞含量为6.4×106个/ml;脂肪干细胞含量为3.1×106个/ml;胶原含量为94%。
对照例1
本对照例为一种含高度浓缩的脂肪来源干细胞和细胞外基质的脂肪移植材料,该脂肪移植材料由按照公开号为CN 106178134A的中国专利申请文件中实施例1的制备方法制备得到,并且脂肪颗粒选自腹部脂肪。
称取上述方法制备得到的脂肪移植材料,并计算脂肪移植材料的产率为10.3%;并采用实施例1的检测方法对上述制备得到的脂肪移植材料进行检测,其中基质血管片段细胞含量为3.4×106个/ml;脂肪干细胞含量为1.5×106个/ml;胶原含量为51%。
实验例
实验材料:
选取12只体重20-25g,5-7周龄的健康裸鼠;
选取同一患者的腹部和腿部脂肪组织,按照上述实施例2、3、4和对照例1的制备方法,分别制备得到脂肪移植材料;
实验方法:
实验分为4组:A组为实施例2制备得到的脂肪移植材料;B组为实施例3制备得到的脂肪移植材料;C组为实施例4制备得到的脂肪移植材料;D组为对照例1制备得到的脂肪移植材料。
将上述4组成分按照随机化原则分别注射于实验裸鼠腰背部皮下的四个受区,各组成分注射量均为300mg;然后,将实验裸鼠在相同条件下进行饲养3个月。
对饲养3个月后的裸鼠取出移植脂肪移植材料,立即采用电子天平测量湿重,并根据成活率=平均湿重/注射量×100%计算得到4组注射成分的平均成活率,具体结果参见表1;然后观察脂肪移植材料的体积大小、质地、色泽和血管分布情况,观察情况参见表1;
表1
由表1可知:
采用本申请实施例2制备方法制备的到的脂肪移植材料具有最高的成活率,而且通过实验例数据可知,基质血管片段细胞、脂肪干细胞和胶原含量对脂肪移植材料的成活率具有协同作用,并通过观察体积大小可确定本申请实施例2制备的脂肪移植材料的吸收率最低,且显著优于对照例1制备得到的脂肪移植材料。
虽然,上文中已经用一般性说明及具体实施例对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之作一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本发明要求保护的范围。
Claims (9)
1.一种脂肪移植材料的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
(a)选取脂肪颗粒、离心收集中层脂肪组织;
(b)采用搅拌棒对脂肪组织进行搅拌,并收集缠绕在搅拌棒上的纤维组织,重复上述搅拌和收集操作,直至搅拌棒搅拌后无缠绕的纤维组织为止;
(c)将收集的纤维组织与生理盐水混合搅拌,收集沉淀物;
(d)将收集的沉淀物去除水分、破碎成浆糊状即得脂肪移植材料。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括将得到的脂肪移植材料置入采用纳米脂肪转化器连接的两个注射器中,推拉2-3次,去除油分、剪碎得到纯化的脂肪移植材料。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(a)中,脂肪颗粒选自腹部脂肪;离心转速为900-1100r/min;离心时间为2-4min。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,生理盐水与脂肪颗粒的体积比为1∶(2-4)。
5.一种脂肪移植材料,其特征在于,由权利要求1-4任一所述的制备方法制备得到。
6.根据权利要求5所述的脂肪移植材料,其特征在于,所述脂肪移植材料包括基质血管片段细胞、脂肪干细胞和胶原。
7.根据权利要求6所述的脂肪移植材料,其特征在于,所述基质血管片段细胞含量为(6.2-9.5)×106个/ml;所述脂肪干细胞含量为(1.4-3.1)×106个/ml;胶原含量为74%-98%。
8.根据权利要求6所述的脂肪移植材料,其特征在于,所述胶原为Ⅰ型胶原。
9.根据权利要求5-8任意一项所述的脂肪移植材料,其特征在于,用于隆鼻、隆颏、隆鼻唇沟、隆泪沟、隆凹陷性瘢痕或面部年轻化。
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