CN109069510A

CN109069510A - 药物

Info

Publication number: CN109069510A
Application number: CN201780020200.5A
Authority: CN
Inventors: 加藤珠兰; 山川弘子; 村木畅; G·马哈南代什瓦尔; O·萨蒂亚克什米
Original assignee: Takeda Chemical Industries Ltd
Current assignee: Takeda Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2016-03-28
Filing date: 2017-03-27
Publication date: 2018-12-21
Also published as: JPWO2017170354A1; EP3437644B1; US20200306249A1; EP3437644A4; JP7002444B2; CA3019091A1; ES2882175T3; US11033550B2; JP2022001585A; CA3019091C; EP3437644A1; WO2017170354A1

Abstract

本发明提供用于预防或治疗肺高血压的药物。用于预防或治疗肺高血压的药物，其含有选自以下的化合物：(5R)‑N‑[1‑乙基‑1‑(4‑乙基苯基)丙基]‑2,7,7‑三甲基‑5‑苯基‑4,5,6,7‑四氢吡唑并[1,5‑a]嘧啶‑3‑羧酰胺、(5R)‑N‑[1‑乙基‑1‑(4‑甲氧基苯基)丙基]‑2,7,7‑三甲基‑5‑苯基‑4,5,6,7‑四氢吡唑并[1,5‑a]嘧啶‑3‑羧酰胺、(5R)‑N‑[1‑乙基‑1‑(4‑乙基苯基)丙基]‑5‑(2‑氟苯基)‑2,7,7‑三甲基‑4,5,6,7‑四氢吡唑并[1,5‑a]嘧啶‑3‑羧酰胺、及它们的盐。

Description

药物

技术领域

本发明涉及用于预防或治疗肺高血压的药物。

背景技术

肺高血压是由心肌、肺血管组织的异常增殖、重塑(Remodeling)、收缩等而导致肺动脉压升高，在疾病发展的同时并发右心力衰竭而致死，为预后非常不良的疾病。目前使用的主要治疗药有：内皮素受体拮抗剂、磷酸二酯酶5抑制剂、***素类似物、可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)刺激剂等，虽然可见到一部分症状的改善，但预后仍较差。近年来，已经清楚有多个分子参与了疾病的病情，另外，现在使用的治疗药的利用单方的效果也受限制，因此期望着新型治疗药的开发。

已知钙敏感性受体(CaSR)是感知细胞外的钙浓度的变化的G蛋白偶联受体(GPCR)，与各种疾病相关。最近有报告在从肺高血压患者分离的肺动脉平滑肌细胞(PASMC)中，CaSR过量表达、功能亢进，从而引起肺血管组织的异常增殖等。另外，有报告在野百合碱(Monocrotaline,(MCT))诱导性肺高血压大鼠及低氧诱导性肺高血压(HPH)小鼠中，具有作为CaSR拮抗剂的作用的化合物NPS-2143对心脏肥大、右室收缩压的升高、心肌组织的纤维化及肺血管重塑等存在抑制(非专利文献1～5)。另外，也有报告NPS-2143及Calhex231(负变构调节剂，negative allosteric modulator)增强现有的肺动脉性肺高血压(PAH)治疗药(PDE5抑制剂/西地那非)的效果(非专利文献7)，使用CaSR敲除小鼠，对CaSR对于血管紧张、心血管血压、肺高血压的作用(非专利文献8～9)。但是，对肺高血压的治疗药的医学必要性仍然较高，期望开发用于肺高血压的预防或治疗的药物，其在药效、特异性、低毒性方面具有优异性质。

已知(5R)-N-[1-乙基-1-(4-乙基苯基)丙基]-2,7,7-三甲基-5-苯基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺(以下也称为“化合物A”)、(5R)-N-[1-乙基-1-(4-甲氧基苯基)丙基]-2,7,7-三甲基-5-苯基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺(以下也称为“化合物B”)、及(5R)-N-[1-乙基-1-(4-乙基苯基)丙基]-5-(2-氟苯基)-2,7,7-三甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺(以下也称为“化合物C”)参与钙敏感性受体(CaSR)的活性调节，及参与甲状旁腺激素(PTH)的调节(专利文献1及专利文献2)。另外，在非专利文献6中公开了化合物A的甲苯磺酸盐为CaSR的拮抗剂。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：WO2004/017908

专利文献2：日本特开2005-239611

非专利文献

非专利文献1：Circ.Res.,111(4):469-481,2012

非专利文献2：Circ.Res.,112(4):640-650,2013

非专利文献3：YAKUGAKU ZASSHI,133(12):1351-1359,2013

非专利文献4：J.Smooth Muscle Res.,50:8-17,2014

非专利文献5：Hypertens Res.37(2):116-124,2014

非专利文献6：Bioorganic&Medicinal Chemistry 19:1881-1894,2011

非专利文献7：Eur.J.Pharmacol.784:15-21,2016

非专利文献8：Am.J.Physiol.Lung Cell Mol.Physiol.310:846-859,2016

非专利文献9：Am.J.Physiol.Cell Physiol.310:193-204,2016

发明内容

发明要解决的问题

本发明提供用于预防或治疗肺高血压的药物。

解决问题的方法

本发明人发现：选自化合物A、化合物B、化合物C及它们的盐的化合物对预防或治疗肺高血压有效。本发明是基于上述见解而完成的发明。

即，根据本发明，提供以下发明。

[1]用于预防或治疗肺高血压的药物，

其含有选自以下的化合物：(5R)-N-[1-乙基-1-(4-乙基苯基)丙基]-2,7,7-三甲基-5-苯基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺、(5R)-N-[1-乙基-1-(4-甲氧基苯基)丙基]-2,7,7-三甲基-5-苯基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺、(5R)-N-[1-乙基-1-(4-乙基苯基)丙基]-5-(2-氟苯基)-2,7,7-三甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺、及它们的盐。

[2]根据上述[1]所述的药物，其中，肺高血压为肺动脉性肺高血压。

[3]在哺乳动物中的肺高血压的预防或治疗方法，该方法包括：对该哺乳动物给药选自以下的化合物：(5R)-N-[1-乙基-1-(4-乙基苯基)丙基]-2,7,7-三甲基-5-苯基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺、(5R)-N-[1-乙基-1-(4-甲氧基苯基)丙基]-2,7,7-三甲基-5-苯基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺、(5R)-N-[1-乙基-1-(4-乙基苯基)丙基]-5-(2-氟苯基)-2,7,7-三甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺、及它们的盐。

[4]根据上述[3]所述的方法，其中，肺高血压为肺动脉性肺高血压。

[5]化合物，其选自(5R)-N-[1-乙基-1-(4-乙基苯基)丙基]-2,7,7-三甲基-5-苯基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺、(5R)-N-[1-乙基-1-(4-甲氧基苯基)丙基]-2,7,7-三甲基-5-苯基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺、(5R)-N-[1-乙基-1-(4-乙基苯基)丙基]-5-(2-氟苯基)-2,7,7-三甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺、及它们的盐，用于预防或治疗肺高血压。

[6]根据上述[5]所述的化合物，其中，肺高血压为肺动脉性肺高血压。

[7]化合物用于制造肺高血压的预防或治疗剂的用途，所述化合物选自(5R)-N-[1-乙基-1-(4-乙基苯基)丙基]-2,7,7-三甲基-5-苯基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺，(5R)-N-[1-乙基-1-(4-甲氧基苯基)丙基]-2,7,7-三甲基-5-苯基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺，(5R)-N-[1-乙基-1-(4-乙基苯基)丙基]-5-(2-氟苯基)-2,7,7-三甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺、及它们的盐。

[8]根据上述[7]所述的用途，其中，肺高血压为肺动脉性肺高血压。

发明的效果

根据本发明可以预防或治疗肺高血压。另外，本发明的药物能够进行口服给药，在口服给药的情况下，本发明的药物与非口服施用用药物相比，副作用(例如：感染)较少，可期待其对于肺高血压的优异的治疗效果及预后改善效果，另外，在与现有药进行组合使用的情况下，本发明的药物也具有患者、医疗工作者、有关人员容易操作的优点。

附图说明

[图1]图1示出在野百合碱诱导肺高血压大鼠模型中，各给药组的Kaplan-Meier生存曲线。

具体实施方式

在本说明书中，术语“对象”是指哺乳动物，例如人。在本说明书中，“肺高血压的对象”是指患有肺高血压的对象。在对象为人的情况下，该对象被称为“患者”。在患有肺高血压的对象为人的情况下，该对象被称为“肺高血压患者”。

在本说明书中，术语“药学上可接受的盐”是指在对活体给药的情况下所允许的酸加成盐或碱加成盐。

在本说明书中，术语“治疗有效量”是指对于对象带来治疗效果的量，例如：在被给药了该量的对象中，与未给药该量的对象相比，疾病的症状或状态发生缓和、减轻、或消除，或疾病的症状或状态的发展得到延迟或抑制。治疗有效量可以由医生根据对象的年龄、体重、性别及症状的严重程度等而适宜确定。

在本说明书中，术语“肺高血压”是指肺动脉压升高的状态。一般的“高血压”表示从左心室通过主动脉向体内送出的血液的血管内的压力高的状态，与此相对，“肺高血压”为从右心室向肺相连的肺动脉形成高血压的状态。另外，肺高血压与一般的高血压为独立发病。对肺侧的安静时的肺动脉压的正常值而言，人的收缩压为约20mmHg～约30mmHg、扩张压为约7mmHg～约12mmHg、平均压为约10mmHg～约15mmHg。

对肺高血压的判定基准，例如记载于基于日本循环器学会的肺高血压治疗指南(2012年改订版)。

人的肺高血压的诊断，通常为基于安静时由右心导管检查所实际测量的肺动脉平均压(mean PAP)，在肺动脉平均压为25mmHg以上的情况下，可以诊断为肺高血压。由于近年来的超声心动图的发展，变得可能无创性地推定肺动脉压，也有基于肺动脉压的推定值而进行肺高血压的诊断。

肺高血压根据DANA POINT分类而临床上分类为从第1组至第5组的5组。第1组为肺动脉性肺高血压(PAH)，第2组为伴随左心室性心脏病的肺高血压，第3组为伴随肺病和/或低氧血症的肺高血压，第4组为慢性血栓栓塞性肺高血压，及第5组为细节不清楚的由复合原因导致的肺高血压。另外，作为第1组的亚型，已知第1'组(肺静脉栓塞性疾病和/或肺毛细血管瘤)与第1”组(新生儿持续性肺高血压)。

第1组肺动脉性肺高血压为最典型的肺高血压，大致分为特发性PAH与遗传性PAH、药物或毒物诱发性PAH、伴随各疾病的PAH。

在本发明中，通过将选自化合物A、B及C，以及它们的盐的化合物给药于对象，从而可以例如使对象的肺动脉压降低等、改善肺高血压伴随的各种症状(右心室压力的升高等)。

因此，根据本发明提供用于预防或治疗肺高血压的药物，其包含选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物。

化合物A利用下式示出。

[化学式1]

化合物B利用下式示出。

[化学式2]

化合物C利用下式示出。

[化学式3]

在本发明的特定实施方式中，本发明的药物可以用于对选自以下的肺高血压的预防或治疗：肺动脉性肺高血压；基于肺静脉栓塞性疾病的肺高血压；基于肺毛细血管瘤的肺高血压；新生儿持续性肺高血压；伴随左室收缩不充分、左室扩张不充分、瓣膜疾病，或先天性/后天性的左心脏流入道/流出道阻塞的肺高血压；慢性阻塞性肺病、间质性肺病，伴随限制性与阻塞性的混合障碍的其它肺病，由睡眠呼吸障碍、肺泡换气不足、高海拔的慢性暴露、或发育障碍导致的肺高血压；慢性血栓栓塞性肺高血压；血液病(慢性溶血性贫血、骨髓增生性疾病或脾切除)、全身性疾病(结节病、肺朗格汉斯细胞组织细胞增生症、***平滑肌瘤病(Lymphangioleiomyomatosis)、神经纤维瘤或血管炎)、代谢性疾病(糖原贮积病、戈谢病(Gaucher病)或甲状腺疾病)，或其他伴随肺血管的压迫(肿瘤栓塞、纤维性纵隔炎或慢性肾衰竭)的肺高血压。本发明的药物优选用于肺动脉性肺高血压的预防或治疗。

化合物A、B及C以及它们的盐可以为非溶剂合物，也可以为溶剂合物。溶剂合物可利用乙醇、水等溶剂形成。含有的溶剂为水的溶剂合物为水合物。在水合物中，除了符合化学计量学的水合物，也包括含有各种量的水的水合物。

化合物A、B及C以及它们的盐可以用同位素(例如，³H、¹³C、¹⁴C、¹⁸F、³⁵S、¹²⁵I)等进行标记。

进一步，将¹H转换为²H(D)的氘转换体也包括于化合物A、B及C以及它们的盐中。

作为化合物A、B及C的盐，可列举例如：与无机碱的盐、铵盐、与有机碱的盐、与无机酸的盐、与有机酸的盐、与碱性或酸性氨基酸的盐等。

作为与无机碱的盐的优选例，可列举：钠盐、钾盐等碱金属盐；钙盐、镁盐、钡盐等碱土金属盐；铝盐等。

作为与有机碱的盐的优选例，可列举与：三甲胺、三乙胺、吡啶、甲基吡啶、乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二环己胺、N,N’-二苄基乙二胺等的盐。

作为与无机酸的盐的优选例，可列举与：盐酸、氢溴酸、硝酸、硫酸、磷酸等的盐。

作为与有机酸的盐的优选例，可列举与：甲酸、乙酸、三氟乙酸、富马酸、乙二酸、酒石酸、马来酸、柠檬酸、琥珀酸、苹果酸、甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸等的盐。

作为与碱性氨基酸的盐的优选例，可列举与精氨酸、赖氨酸、鸟氨酸等的盐。

作为与酸性氨基酸的盐的优选例，可列举与天冬氨酸、谷氨酸等的盐。

这些盐中，优选药学上可接受的盐。

在本发明的特定实施方式中，化合物A的盐可以为对甲苯磺酸盐(甲苯磺酸盐)(以下也称为“化合物A'”)。在本发明的特定实施方式中，化合物B的盐可以为盐酸盐(以下也称为“化合物B'”)。在本发明的特定实施方式中，化合物C的盐可以为对甲苯磺酸盐(甲苯磺酸盐)(以下也称为“化合物C'”)。

在本发明的特定实施方式中，可以将选自化合物A、化合物A'、化合物B、化合物B'、化合物C及化合物C'的化合物用于肺高血压的预防或治疗。因此，根据本发明提供用于预防或治疗肺高血压的药物，其包含选自化合物A、化合物A'、化合物B、化合物B'、化合物C及化合物C'的化合物。在该特定实施方式中，肺高血压可以作为肺动脉性肺高血压。

在本发明的特定实施方式中，可以将化合物A或化合物A'用于肺高血压的预防或治疗。因此，根据本发明，提供用于预防或治疗肺高血压的药物，其包含化合物A或化合物A'。在该特定实施方式中，肺高血压可以作为肺动脉性肺高血压。

在本发明的特定实施方式中，可以将化合物A'用于肺高血压的预防或治疗。因此，根据本发明，提供用于预防或治疗肺高血压的药物，其包含化合物A'。在该特定实施方式中，肺高血压可以作为肺动脉性肺高血压。

在本发明的进一步特定实施方式中，提供药物，其用于在肺高血压的对象中改善选自右心室压力、右室收缩压、生存率、及心脏肥大中的1个以上的状态，所述药物包含选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物。

在本发明的特定实施方式中，提供药物，其用于在肺高血压的对象中改善选自右心室压力、右室收缩压、生存率、及心脏肥大中的1个以上的状态，所述药物包含化合物A或化合物A的盐。

在本发明的特定实施方式中，提供药物，其用于在肺高血压的对象中改善选自右心室压力、右室收缩压、生存率、及心脏肥大中的1个以上的状态，所述药物包含化合物A'。

化合物A、B及C以及它们的盐，可以利用本身公知的方法(例如：WO2004/017908及Yoshida M.et al.,Bioorg.Med.Chem.,19:1881-1894,2011中记载的方法)制备。

对给药量而言，根据给药对象、给药途径、疾病、症状等而不同，例如，在对人(体重约50kg)口服给药时，作为化合物A、B或C，可以从约0.1mg～约500mg的范围、优选为约1mg～约100mg的范围，在非口服给药的情况下，可以从约0.01mg～约100mg的范围、优选为约0.1mg～约10mg的范围进行选择。该量可以分成1天1次至多次(例如，1天1次至3次)给药。

本发明的药物可以包含选自化合物A、B及C及它们的盐的化合物和药学可接受的载体。

作为药学可接受的载体，可使用作为制剂原料常用的各种有机或无机载体物质，可以以固态制剂中的赋形剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂；液态制剂中的溶剂、增溶剂、悬浊化剂、等渗化剂、缓冲剂、去痛剂等形式配合。另外，也可以根据需要而使用防腐剂、抗氧化剂、稳定剂、着色剂、甜味剂等制剂添加物。

本发明的药物在某实施方式中，可以作为非口服给药用或口服给药用的药物。本发明的药物还可以作为口服给药用的药物。

本发明的药物可以与其它的肺高血压治疗药等药物组合使用，例如可以与以下药物组合使用。

(1)内皮素受体拮抗药

马西替坦、波生坦、安立生坦等内皮素受体拮抗药

(2)***素制剂

依前列醇、贝前列素、曲前列素、伊洛前列素、赛乐西帕(Selexipag)等***素制剂(或前列环素制剂)

(3)磷酸二酯酶-5抑制剂

西地那非、他达拉非等磷酸二酯酶-5抑制剂

(4)可溶性腺苷酸环化酶刺激剂

利奥西呱(Riociguat)等可溶性腺苷酸环化酶刺激剂

(5)钙通道拮抗剂

硝苯地平、地尔硫、氨氯地平等钙通道拮抗剂

(6)Rho激酶抑制剂

法舒地尔等Rho激酶抑制剂

(7)其他

伊马替尼、索拉非尼等酪氨酸激酶抑制剂，华法林、阿司匹林等抗凝血剂，速尿、安体舒通等利尿剂，多巴胺、地高辛等强心药等

与本发明的药物配合或组合使用的药物包括以下任何：以含有选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物和组合使用的药物的药物的形式，单一制剂化而成的药物，及将选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物和组合使用的药物分别进行制剂化而成的药物。下文将它们统称并简称为本发明的组合使用剂。

本发明的组合使用剂可以将选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物及组合使用药物分别地或同时地，直接地或与可药学上允许的载体等混合地，通过与上述包含选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物的药物同样的方法进行制剂化。对本发明的组合使用剂的一天给药量而言，根据症状的程度；给药对象的年龄、性别、体重、敏感性差异；给药的时期、间隔；药物的性质、配药、种类；有效成分的种类等而不同，没有特别限定。

给药本发明的组合使用剂时，可以将选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物与组合使用药物在同时期进行给药，也可以先给药组合使用药物，之后给药选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物，也可以先给药选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物，之后给药组合使用药物。在有时间差地进行给药时，时间差根据所给药的有效成分、剂型、给药方法而不同，可列举例如：在先给药组合使用药物的情况下，在给药组合使用药物后的1分钟～3天以内、优选为10分钟～1天以内、更优选为15分钟～1小时以内给药选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物的方法。在先给药选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物的情况下，可列举在给药该化合物后的1分钟～1天以内、优选为10分钟～6小时以内、更优选为15分钟至1小时以内给药组合使用药物的方法。

在同时包含选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物与组合使用药物的本发明的组合使用剂中，选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物及组合使用药物的分别的含量，根据制剂的形态而不同，通常相对于制剂整体为约0.01～90重量％、优选为约0.1～50重量％，进一步优选为约0.5～20重量％左右。

该组合使用剂中的载体的含量。通常相对于制剂整体为约0～99.8重量％、优选为约10～99.8重量％、进一步优选为约10～90重量％左右。

另外，在分别包含选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物与组合使用药物的组合使用剂中，包含组合使用药物的组合使用剂，可以与选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物同样操作来制造并使用。

本发明的药物可以为散剂、颗粒剂、片剂或者胶囊剂等固态制剂，或糖浆剂或者乳剂等液体剂中的任一种。

本发明的药物可以根据制剂的形态而通过例如：混合、混炼、造粒、压片、包衣、灭菌处理、乳化等惯用方法来制造。需要说明的是，关于制剂的制造，例如可参考第十六改正版日本药局方制剂总则的各项等。另外，本发明的药物可以成型为包含有效成分和活体内分解性高分子化合物的缓释剂。

在本发明的某个实施方式中，提供用于在有该需要的对象中预防或治疗肺高血压的药物，其包含选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物，且用于与组合使用药物进行组合使用。

在本发明的另外的方面中，提供在有该需要的对象中预防或治疗肺高血压的方法，包括将选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物给药于该对象。在本发明的方法中，作为治疗对象的肺高血压，可以作为对本发明的药物而作为治疗对象所说明的疾病或状态中的任何。在本发明的方法中，可向对象给药治疗有效量的化合物。在本发明的方法中，在给药选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物的情况下，也可以给药包含选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物的药物。

在本发明的另外的方面中，提供选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物的用途，其用于制造在有该需要的对象中预防或治疗肺高血压的药物，或在该药物的制造中使用。作为上述药物的治疗对象的肺高血压，可以作为对本发明的药物的治疗对象所说明的疾病或状态中的任何。

在本发明的另外的方面中，提供选自化合物A、B及C以及它们的盐的化合物，其用于肺高血压的预防或治疗。作为上述化合物的治疗对象的肺高血压，可以作为对本发明的药物的治疗对象所说明的疾病或状态中的任何。

在本发明的某个特定实施方式中，在所给药的化合物或药物中包含的化合物为化合物A的甲苯磺酸盐。

实施例

化合物A'利用WO2004/017908及Yoshida M.et al.,Bioorg.Med.Chem.,19:1881-1894,2011中记载的公知的方法制备。

实施例1：化合物A'对于肺高血压模型动物中的肺高血压的治疗效果(右室压、右室收缩压、右心肥大、肺动脉中膜肥厚，肺动脉阻塞)

(1)实验方法

对体重(250g±10％)的雄性Sprague-Dawley大鼠进行皮下注射野百合碱(MCT)50mg/kg(50％二甲亚砜溶液)，制作了肺高血压大鼠模型。在从给药MCT之后的第14天起的14天中，对化合物A'给药组(给药用量：1mg/kg、3mg/kg或10mg/kg)或作为对照组(相同量的溶剂)接连每天口服给药。该实验以各组9只进行实施(仅溶剂对照组使用了12只)。

(2)对右心室压(RVP)的效果

对在给药MCT之后28天的时间点仍生存的大鼠(阴性对照组(野百合碱非给药组)9只，溶剂对照组8只，化合物A'1mg/kg给药组9只，化合物A'3mg/kg给药组5只，化合物A'10mg/kg给药组9只。总计40只)，通过导管检查而测定了右心室压力(RVP)。将结果示于表1。

[表1]

对野百合碱诱导肺高血压大鼠模型中的右心室压(RVP)的效果

表中的数据示出了平均±标准偏差。

如表1所示，在在给药MCT之后28天，化合物A'明显改善了右心室压力。

(3)对右室收缩压(RVSP)的效果

对在给药MCT之后28天的时间点仍生存的大鼠((阴性对照组(野百合碱非给药组)9只，溶剂对照组8只，化合物A'1mg/kg给药组9只，化合物A'3mg/kg给药组5只，化合物A'10mg/kg给药组9只。总计40只))，通过导管检查而测定了右室收缩压(RVSP)。将结果示于表2。

[表2]

对野百合碱诱导肺高血压大鼠模型中的右室收缩压(RVSP)的效果

	RVSP(mmHg)	SD
			阴性对照组(野百合碱非给药组)	22.2	3.2
溶剂对照组	56.5	4.7
			1mg/kg给药组	48.3	5.3
3mg/kg给药组	39.1	2.9
			10mg/kg给药组	28.0	3.4

表中的数据示出了平均±标准偏差。

如表2所示，在给药MCT之后28天，化合物A'明显改善了右室收缩压(RVSP)。

(4)对右心肥大的效果

对在给药MCT之后28天的时间点仍生存的大鼠(阴性对照组(野百合碱非给药组)9只，溶剂对照组8只，化合物A'1mg/kg给药组9只，化合物A'3mg/kg给药组5只，化合物A'10mg/kg给药组9只。总计40只)，测定了肺高血压模型大鼠的右心室重量(RV)、左心室重量(LV)、及室间隔重量(S)，作为右心肥大的指标求出了RV/(LV+S)。将结果示于表3。

[表3]

对野百合碱诱导肺高血压大鼠模型中的右心肥大的效果

表中的数据示出了平均±标准偏差。

如表3所示，在给药MCT之后28天，化合物A'明显改善了右心肥大。

(5)对肺动脉中膜肥厚的效果

对在给药MCT之后28天的时间点仍生存的大鼠(阴性对照组(野百合碱非给药组)9只，溶剂对照组8只，化合物A'10mg/kg给药组9只)中，对各组中的5只(总计15只)，通过Elastica van Gieson染色法制备了肺高血压模型大鼠的肺组织切片的组织样本，测定了肺动脉的中膜的肥厚。将结果示于表4。

[表4]

对野百合碱诱导肺高血压大鼠模型中的肺动脉中膜的肥大的效果

表中的数据示出了平均±标准误差。

如表4所示，在给药MCT之后28天，化合物A'明显改善了肺动脉中膜的肥大。

(6)对肺动脉阻塞的效果

对在给药MCT之后28天的时间点仍生存的大鼠(阴性对照组(野百合碱非给药组)9只，溶剂对照组8只，化合物A'10mg/kg给药组9只)中，对各组中的5只(总计15只)，通过Elastica van Gieson染色法制备了肺高血压模型大鼠的肺组织切片的组织样本，测定了肺动脉的阻塞。对于阻塞的指标，使用了肺动脉中膜的厚度的2倍除以肺动脉径所得的值。将结果示于表5。

[表5]

对野百合碱诱导肺高血压大鼠模型中的肺动脉的阻塞的效果

表中的数据示出了平均±标准误差。

如表5所示，在给药MCT之后28天，化合物A'明显改善了肺动脉的阻塞。

实施例2：化合物A'对肺高血压模型动物中的肺高血压的治疗效果(生存率)

(1)实验方法

对体重(230g±10g)的雄性Sprague-Dawley大鼠进行皮下注射野百合碱(MCT)50mg/kg(50％二甲亚砜溶液)，制作了肺高血压大鼠模型。在从给药MCT之后的第14天起的14天中，一天一次对化合物A'给药组(给药用量：1mg/kg、3mg/kg或10mg/kg)或作为对照组(相同量的溶剂)接连每天进行口服给药。该实验以各组12只进行了实施。

(2)对生存率的效果

图1示出了从上述实验得到的Kaplan-Meier生存曲线。

如图1所示，给药化合物A'之后，明显改善了动物的生存率。

实施例3：对CHP1-NHE1相互作用的效果

通过对用野百合碱、低氧等诱导的各种肺高血压病情动物进行各种NHE阻碍化合物的给药、使用了NHE的敲除动物的实验等，示出了除了CaSR以外，NHE(Na⁺-H⁺exchange)蛋白为参与肺高血压的病情的重要的分子(Chen et al.,2001；Huetsch et al.,2016；Huetsch and Shimoda,2015；Yu et al.,2008)。在NHE向细胞膜的定位与其功能中，CHP作为辅因子(Cofactor)是必要的(Matsushita et al.,2007；Mishima et al.,2007；Pang etal.,2001)。因此，对化合物A'是否阻碍NHE1-CHP1的相互作用进行了研究。

(1)实验方法

化合物A'对人NHE1与人CHP1的相互作用的抑制活性的评价，利用使用了化学扩增型发光接近均相分析(Luminescence proximity homogeneousassay)(AlphaScreen^TM(PerkinElmer))的蛋白质相互作用的测定体系进行。使源自人胎儿肾细胞的FreeStyle^TM293细胞进行表达而制备了带FLAG标签的全长人NHE1(Accession No.NM_003047)的微粒体级分。另外，使小麦胚芽无细胞翻译***表达并纯化了生物素化的全长的人CHP1(Accession No.NM_007236)。将该NHE1微粒体级分与CHP1用测定缓冲液(25mM Tris-HCl(pH 7.4)、137mM NaCl、2.7mM KCl、0.1％BSA、1mM DTT)稀释，并向其加入了化合物A'。并且，将其按2μL/每孔添加至Alpha Plate-384Shallow well(PerkinElmer)，于室温反应60分钟。向其按各2μL/每孔添加了AlphaScreen FLAG(m2)Detection Kit(PerkinElmer)附带的Acceptor Beads及Donor Beads，于室温反应60分钟。之后，使用EnSpire Multi-labelreader(PerkinElmer)测定了ApphaScreen信号强度。对该试验体系中不同浓度的化合物A'(浓度：50.0nM～0.8nM)进行了评价。

(2)结果

将结果示于表6。

[表6]

对CHP1-NHE1相互作用的效果

化合物	CHP1-NHE1相互作用活性(50％抑制浓度)
		化合物A'	4.7nM

如表6所示，化合物A'显示了明显的CHP1-NHE1抑制活性。

工业实用性

根据本发明可提供用于预防或治疗肺高血压的药物，从而有用。

在本说明书中引用的学术文献、专利、专利申请等参考文献的整体，以与各自具体所记载的相同的程度作为参考援引于本说明书中。

本申请要求日本专利申请2016-063747号(2016年3月28日申请)的优先权，并将该内容以其整体通过参考并入本说明书。

Claims

1.用于预防或治疗肺高血压的药物，

2.根据权利要求1所述的药物，其中，肺高血压为肺动脉性肺高血压。

3.在哺乳动物中的肺高血压的预防或治疗方法，该方法包括：对该哺乳动物给药选自以下的化合物：(5R)-N-[1-乙基-1-(4-乙基苯基)丙基]-2,7,7-三甲基-5-苯基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺、(5R)-N-[1-乙基-1-(4-甲氧基苯基)丙基]-2,7,7-三甲基-5-苯基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺、(5R)-N-[1-乙基-1-(4-乙基苯基)丙基]-5-(2-氟苯基)-2,7,7-三甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺、及它们的盐。

4.根据权利要求3所述的方法，其中，肺高血压为肺动脉性肺高血压。

5.化合物，其选自(5R)-N-[1-乙基-1-(4-乙基苯基)丙基]-2,7,7-三甲基-5-苯基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺，(5R)-N-[1-乙基-1-(4-甲氧基苯基)丙基]-2,7,7-三甲基-5-苯基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺，(5R)-N-[1-乙基-1-(4-乙基苯基)丙基]-5-(2-氟苯基)-2,7,7-三甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺、及它们的盐，用于预防或治疗肺高血压。

6.根据权利要求5所述的化合物，其中，肺高血压为肺动脉性肺高血压。

7.化合物用于制造肺高血压的预防或治疗剂的用途，所述化合物选自(5R)-N-[1-乙基-1-(4-乙基苯基)丙基]-2,7,7-三甲基-5-苯基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺，(5R)-N-[1-乙基-1-(4-甲氧基苯基)丙基]-2,7,7-三甲基-5-苯基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺，(5R)-N-[1-乙基-1-(4-乙基苯基)丙基]-5-(2-氟苯基)-2,7,7-三甲基-4,5,6,7-四氢吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羧酰胺、及它们的盐。

8.根据权利要求7所述的用途，其中，肺高血压为肺动脉性肺高血压。