CN109069473B - 用于亮肤和减少色素沉着过度的组合物和方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种组合物。该组合物包含具有式(I)结构的化合物。该组合物通过抑制酪氨酸酶和相关蛋白质的活性和表达水平来减少黑色素的合成，从而防止和限制哺乳动物皮肤中黑色素的含量和分布。它还诱导黑素体的自噬，从而限制黑色素从黑素细胞到角质细胞的合成、储存和转移。双重作用模式使得组合物在低剂量下有效，而不会引起毒性以使皮肤亮白并治疗与色素沉着过度相关的病症

Description

用于亮肤和减少色素沉着过度的组合物和方法

发明领域

所公开的发明大致属于皮肤护理领域，特别是亮白皮肤肤和去除色素的领域。

背景技术

用于亮白皮肤和/或减少色素沉着过度的制剂提供了治疗和/或美学的益处。通常需要消除或抑制不规则色素沉着(包括黄褐斑(黄褐斑或局部变色)、老年斑(老年斑痣)或褐黄斑(与晒伤或老化有关，有时表现为凸起斑点或脂溢性角化病)和雀斑(夏令雀斑))的形成。黑色素的过量积累导致色素沉着过度，其与许多疾病或病症相关，包括日光性痣、黄褐斑、雀斑和炎症后色素沉着过度。在大多数东亚文化中，传统美学更喜欢浅色调的肤色。

皮肤色素沉着与表皮黑色素细胞合成黑色素的量和类型及其向邻近角质细胞的转移有关。酪氨酸酶(TYR)是黑色素合成中的关键酶，其催化L-酪氨酸羟基化生成3,4-二羟基苯丙氨酸，并随后氧化生成成多巴醌(Slominski A，等，生理学综述(PhysiologicalReviews)，84(4)：1155-1228(2004))。通过自动氧化将多巴醌通过多巴色素转化为吲哚衍生物，并且多巴醌与该吲哚衍生物的偶合产生黑色素。一旦在表皮黑色素细胞的细胞体中合成，带色的黑色素体沿着树突向下移位，并通过各种细胞骨架元素在树突尖端捕获。当被整合到角质细胞时，黑色素体被单独地分布或者成簇，向细胞核的顶极聚集。紫外线照射(UVR)可以调节黑色素体从黑色素细胞向角质细胞转移的过程。(Boissy RE，实验皮肤病学(Experimental Dermatology)，12(s2)：5-12(2003))。

皮肤亮白的一种方法是通过抑制酪氨酸酶或其他黑色素生成相关酶的活性、表达和/或转录来抑制黑色素合成。然而，目前的色素去除剂具有一个或多个缺点，包括具有毒性、稳定性差、效果差和副作用如过敏和皮肤刺激。例如，对苯二酚及其衍生物广泛用于治疗色素沉着过度，但由于其细胞毒性和副作用如永久性黑(色)素过少症和黑色素缺失症，其浓度受到严格监管(Smith CJ，等，色素细胞研究(Pigment Cell Res)，1(6))：386-9(1988))。在美国，对苯二酚作为非处方(OTC)药物的浓度高达2％，而更高的浓度仅可通过处方获得(Engasser P，等，美国皮肤病学会杂志(Journal of the American Academy ofDermatology)，5(2)：143-7(1981))。抗坏血酸及其衍生物可以抑制黑色素的合成，但它们在空气和高温下不稳定，不适合常规储存。特别是，L-抗坏血酸在水溶液中快速氧化和分解，因此通常不用作色素去除剂(Kameyama K，等，美国皮肤病学会杂志(J.Am.Aca.Dermatol).，17：381-386(1996))。曲酸和熊果苷用于皮肤美白产品(MajmudarG，等人，化妆品科学杂志(J.Cosmet.Sci)，49：361-367(1998)；Maeda K等人，药理学与实验治疗学杂志(J.Pharmacol Exp Ther)，276(2))：765-9(1996))，但它们需要高浓度才能表现出抑制活性。此外，曲酸还可能诱发过敏。壬二酸和α-羟基酸可能有助于均匀肤色，但通常会引起皮肤刺激。其他植物提取物或多酚也已经基于蘑菇酪氨酸酶***进行了测试，但是它们在基于细胞的***中的测定很少(Solano F.等，色素细胞研究(Pigment CellRes)，19(6)：550-71(2006))。

通过其他机制降低黑色素水平的药剂可能具有高毒性。黑色素体是在动物细胞中发现的细胞器，是黑色素合成、储存和运输的场所。维拉帕米和雷帕霉素是两种自噬诱导剂，通过促进角质细胞中黑色素体的自噬降解而具有自噬作用(Murase D，等，皮肤病学研究杂志(Journal of Investigative Dermatology)，133：2416-24(2013))。类似地，白藜芦醇可增加黑色素细胞的自噬性，但所需浓度非常高(Kim ES，等人，实验皮肤学(Experimental Dermatology)，23：204-6)。

因此，本发明的一个目的是提供一种安全有效地亮白肤色、减少色素沉着过度或两者兼有的组合物和方法。

本发明的另一个目的是通过抑制黑色素的合成和诱导黑色素体的自噬来提供亮白皮肤、去除色素或者兼有的方法。

本发明的另一个目的是提供抑制黑色素生成和加速合成黑色素法减少的组合物和方法。

发明内容

本发明提供了一种组合物及其在哺乳动物体体表上亮白皮肤、减少色素沉着过度或两者兼有的用途。所述组合物包括一种或多种具有式1结构的化合物

其中R₁-R₁₀各自独立地为氢、卤素或取代或未取代的烷基、杂烷基、烯基、杂烯基、炔基、杂炔基、环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、烷芳基、烷基杂芳基、芳烷基或杂芳烷基，其中R₈和R₁₀中的至少一个为杂烷基、环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、烷芳基、烷基杂芳基、芳烷基或杂芳烷基取代的烯基；X是O、S、NH、CR₁₁R₁₂或NR₁₃，其中R₁₁-R₁₃各自独立地为氢或取代或未取代的烷基、杂烷基、烯基、杂烯基、炔基、杂炔基、环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、烷芳基、烷基杂芳基、芳烷基或杂芳烷基；且Y为O、S或N。在一个实施方案中，一种或多种具有式1结构的化合物以有效量使用。

所述组合物还可包括式1化合物的立体异构或互变异构形式(以任何组合和任何比例的任何立体异构形式和互变异构的形式)、其药学上可接受的盐、其药学上可接受的溶剂化物、其药学上可接受的多晶型、或其前药。

在某些方式中，X和Y是O；R₈和R₁₀中至少一个的烯基被芳基或杂芳基取代，优选C₂-C₁₀烯基，更优选在R₈取代。在优选的方式中，该化合物具有式2或式3的结构，

在一些方式中，式1的化合物可以为多酚的衍生物或具有至少三个羟基的多酚，优选在选自R₁-R₇和R₉中的位置。在一些方式中，式1化合物可以在稠环的碳2和碳3之间具有双键。在一些方式中，式1的化合物可以在稠环的碳2和碳3之间具有单键。在一些方式中，式1化合物可具有双键作为---键。在一些方式中，式1化合物可具有单键作为---键。

所述组合物可以通过例如局部给药、注射到皮肤组织、皮下植入或口服给药的方式给予人或动物，以减少黑色素的合成并诱导黑色素体的自噬而不引起细胞毒性，从而减少受试者中黑色素的量和分布并亮白皮肤，或治疗与色素沉着过度相关的疾病。

通常，所述组合物可以抑制或降低酪氨酸酶、酪氨酸酶相关蛋白1(TRP-1)、酪氨酸酶相关蛋白2(TRP-2)或其组合的活性、表达或活性和表达，从而防止体表变暗。所述组合物还可以诱导受试者中黑色素体的自噬，从而减少存在的黑色素和亮白色素沉着过度的体表区域。

在一些方式中，所述化合物可以包含在番茄提取物、柑橘提取物、石斛提取物、苯丙氨酸或其混合物中或从其衍生而来。在一些方式中，所述组合物可进一步含有番茄提取物、柑橘提取物、石斛提取物、苯丙氨酸或其混合物。在一些方式中，所述化合物可以包含在番茄提取物、柑橘提取物、石斛提取物或其混合物或从其衍生而来，并与苯丙氨酸组合。在一些方式中，所述组合物可进一步含有番茄提取物、柑橘提取物、石斛提取物或其混合物，并与苯丙氨酸组合。

在一些方式中，所述组合物通常没有细胞毒性，并且有效地减轻、预防、治疗或其组合，一种或多种皮肤病症，例如日光性痣、黄褐斑、雀斑、变色、炎症后色素沉着过度及其组合。

在一个实施方案中，本发明提供了在受试者体表中亮白皮肤，减少色素沉着过度或两者兼有的方法，包括向受试者施用如本发明所述的组合物。优选地，其中组合物的施用减少受试者黑色素的合成，减少受试者黑色素的量，限制受试者中黑色素的分布，或其组合；或

其中组合物的施用抑制或降低酪氨酸酶、酪氨酸酶相关蛋白1、酪氨酸酶相关蛋白2或其组合的活性、表达或活性和表达；或

其中组合物的施用诱导受试者中黑色素体的自噬；或

其中组合物的施用不会在受试者中引起细胞毒性；或

其中组合物施用如下：局部施用于体表、注射至真皮组织、皮下植入，或其组合；或

其中组合物还包含番茄提取物、柑橘提取物、石斛提取物、苯丙氨酸或其混合物；或

其中组合物的施用对一种或多种选自下组的皮肤病症进行有效减轻、预防、治疗或其组合：日光性痣、黄褐斑、雀斑、变色、炎症后色素沉着过度及其组合。

在一个实施方案中，本发明提供如本发明所述的化合物或组合物在制备药物或药物组合物(1)中的用途，以安全有效地亮白肤色，减少色素沉着过度，或两者兼有，(2)抑制黑色素生成并加速减少合成的黑色素，(3)通过抑制黑色素的合成和诱导黑色素体的自噬来用于皮肤亮白，去除色素或两者兼有，或(4)用于如本发明的方法中。

附图的简要说明

图1A、1B和1C的线图显示了细胞存活率或每个细胞的黑色素含量(占不同浓度测试剂下对照细胞的百分比)。图1A显示在α-黑色素细胞刺激素(α-MSH)存在下，用0.0,10.0和20.0μM的6-C-(E-苯基乙烯基)-柚皮素(6-CEPN)处理黑色素A细胞72小时后的结果。图1B显示在α-MSH存在下用0.0,2.5和5.0μM的8-C-(E-苯基乙烯基)-槲皮素(8-CEPQ)处理黑色素a细胞72小时后的结果。图1C显示在α-MSH存在下用0.0,10.0和20.0μM的曲酸处理黑色素a细胞72小时后的结果。每个值表示为平均值±S.D，来自三次独立实验。对照细胞为仅用α-MSH处理72小时的细胞。

图2A的柱状图显示了在用不同量的6-CEPN处理的黑色素-a细胞中酪氨酸酶活性(为对照细胞的百分比，％)。图2B的柱状图显示了在用不同量的8-CEPQ处理的黑色素-a细胞中酪氨酸酶的活性(为对照细胞的百分比，％)。用α-MSH(载体)处理对照细胞72小时，和用α-MSH与10μM或20μM 6-CEPN或2.5μM或5μM的组合处理的测试细胞。每个值表示为平均值±S.D，来自三次独立实验。*显著性表示，与对照相比p<0.05。**显著性表示与对照相比p<0.01。

图3A-3C为不同测定中6-CEPN，8-CEPQ和雷帕霉素的图表特征。图3A的点图显示了用载体(无测试剂)、含雷帕霉素(2.5μM)的载体、含6-CEPN(10μM)的载体，或含8-CEPQ(5μM)的载体处理的MelanoDerm^TM(MEL-300-A，含有源自亚洲的正常人源性黑色素细胞)皮肤模型的L*的变化(表示为ΔL)。皮肤颜色越浅，L*值越大，因此ΔL为正。图3B的柱状图显示了用载体(无测试剂)，雷帕霉素(2.5μM)，6-CEPN(10μM)或8-CEPQ(5μM)处理的MelanoDerm^TM的组织存活率(％)。载体处理的MelanoDerm^TM的存活组织的量被认为是100％。图3C显示用载体(无测试剂)，雷帕霉素(2.5μM)，6-CEPN(10μM)或8-CEPQ(5μM)处理的MelanoDerm^TM的黑色素总含量(％)的点图。载体处理的MelanoDerm^TM的黑色素总含量被认为是100％。

本发明详述

通过参考以下具体实施方案的详细描述和其中包括的实施例以及附图及其之前和之后的描述，可以更容易地理解所公开的方法和组合物。

应理解，除非另有说明，否则所公开的方法和组合物不限于特定的合成方法，特定的分析技术或特定的试剂，因此是可变化的。还应理解，本文使用的术语仅用于描述特定实施方案的目的，而不是限制性的。

I.术语

如本文所用，“有效量”是指足以诱导一种或多种生物效应的量。生物效应的非限制性实例包括肤色的改变、黑色素合成的改变(体外或体内)，例如黑色素合成的减少、黑素体活力的改变。

如本文所用，“提取物”是指源自植物材料的物质，是指可通过以下步骤获得的物质：将干燥植物材料的指定部分(茎、树皮、叶子等)放入锥形玻璃渗滤器中。以w/w比(如1份植物材料加入2份提取溶剂)加入指定百分比的萃取溶剂。当指定的提取溶剂的百分比小于100％时，剩余的溶剂为水(例如、95％乙醇和5％水、50％乙醇和50％水等)。萃取进行约16-24小时。收集渗滤液，并重复上述过程，直到得到的渗滤液基本上不含植物的其它提取物。将渗滤液合并，减压蒸发至干燥，并将所得提取物在氮气下储存在低于4℃的温度中。

如本文所用，“色素沉着过度”是指色素沉着高于相邻皮肤区域的色素沉着的皮肤区域(例如，色素斑、老年斑等)。

如本文所用，“改善皮肤症状”或“改善皮肤状况”是指在皮肤外观上产生视觉上可察觉的积极变化或益处。可提供的益处包括但不限于亮白皮肤和减少由色素沉着过度引起的变色。

如本文所用，“盐”包括但不限于特定化学物质的钠、钾、钙、铵、锰、铜和/或镁盐。

“护肤活性物质”是指当施用于皮肤时为皮肤提供益处或改善的化学物质。应理解，护肤活性物质不仅可用于皮肤，还可用于头发、指甲和其它角质组织。如本文所用，“取代的”是指本文所述的化合物或官能团的所有允许的取代基。在最广泛的意义上，允许的取代基包括有机化合物的无环和环状、支链和非支链、碳环和杂环、芳族和非芳族取代基。示例性的取代基包括但不限于卤素、羟基或含有任何数目碳原子(优选1-14个碳原子)的任何其它有机基团，并且任选地包括一个或多个线性、支链或环状结构形式的杂原子，例如氧、硫或氮基团。代表性的取代基包括烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基、苯基、取代的苯基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、卤素、羟基、芳烷基、取代的芳烷基、烷氧基、取代的烷氧基、苯氧基、取代的苯氧基、芳氧基、取代的芳氧基、烷硫基、取代的烷硫基、苯硫基、取代的苯硫基、芳硫基、取代的芳硫基、氰基、异氰基、取代的异氰基、羰基、取代的羰基、羧基、取代的羧基、氨基、取代的氨基、酰氨基、取代的酰氨基、磺酰基、取代的磺酰基、磺酸、磷酰基、取代的磷酰基、膦酰基、取代的膦酰基、聚芳基、取代的聚芳基、C₃-C₂₀环、取代的C₃-C₂₀环、杂环、取代的杂环、氨基酸、聚(乳酸-共-羟基乙酸)、肽和多肽基团。这种烷基、取代的烷基、烯基、取代的烯基、炔基、取代的炔基，苯基、取代的苯基、芳基、取代的芳基、杂芳基、取代的杂芳基、卤素、羟基、芳烷基、取代的芳烷基、烷氧基、取代的烷氧基、苯氧基、取代的苯氧基、芳氧基、取代的芳氧基、烷硫基、取代的烷硫基、苯硫基、取代的苯硫基、芳硫基、取代的芳硫基、氰基、异氰基、取代的异氰基、羰基、取代的羰基、羧基、取代的羧基、氨基、取代的氨基、酰胺基、取代的酰胺基、磺酰基、取代的磺酰基、磺酸、磷酰基、取代的磷酰基、膦酰基、取代的膦酰基、聚芳基、取代的聚芳基、C₃-C₂₀环、取代的C₃-C₂₀环、杂环、取代的杂环、氨基酸、聚(乳酸-共-羟基乙酸)，肽和多肽基团可以进一步被取代。

杂原子，诸如氮，可具有氢取代基和/或本文所述的有机化合物的任何允许的取代基，其满足杂原子的化合价。应理解，“取代”或“取代的”包括隐含的条件，即这种取代符合取代原子和取代基的允许价态，并且取代产生稳定的化合物，即不会自发进行诸如重排、环化、消除等转变的化合物。

如本文所用，“芳基”是指C₅-C₂₆元芳族、稠合芳族、稠合杂环或双芳香环体系。如本文所用，广泛定义的“芳基”包括5-、6-、7-、8-、9-、10-、14-、18-和24-元单环芳族基团，例如，苯基、萘基、蒽基、菲基、

基(chrysene)、芘基、碗烯(corannulene)、晕苯基等等

“芳基”进一步包括具有两个或更多个环的多环体系，其中两个或更多个碳对于两个相邻的环是共同的(即“稠环”)，其中至少一个环是芳族的，例如另一个环或多个环可以是环烷基、环烯基、环炔基、芳基和/或杂环。

术语“取代的芳基”是指一个或多个芳环上的一个或多个氢原子被一个或多个取代基取代的芳基，所述取代基包括但不限于卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、烷氧基、羰基(如酮、醛、羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(如硫代酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸基、膦酸盐、亚膦酸盐、氨基(或季铵化氨基)、酰胺基、脒、亚胺、氰基、硝基、叠氮基、巯基、亚氨基、烷硫基、硫酸盐、磺酸酯、氨磺酰基、亚砜基、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基(例如CF₃、-CH₂-CF₃、-CCl₃)、-CN、芳基、杂芳基及其组合。

“杂环”、“杂环的”和“杂环基”可互换使用，是指通过含有3-10个环原子(优选5-6环原子)的单环或双环的环碳或氮原子连接的环状基团，由碳和1-4个杂原子组成，每个杂原子选自非过氧化物氧、硫和N(Y)，其中Y不存在或者为H、O、C₁-C₁₀烷基、苯基或苄基，和任选的含有1-3个双键和任选被一个或多个取代基取代。根据定义，杂环基与杂芳基不同。杂环的示例包括但不限于哌嗪基、哌啶基、哌啶酮、4-哌啶酮、二氢呋喃并[2、3-b]四氢呋喃、吗啉基、哌嗪基、哌啶基、哌啶酮、4-哌啶酮、胡椒基、吡喃基、2H-吡咯基、4H-喹啉基、奎宁环基、四氢呋喃基、6H-1、2、5-噻二嗪基。杂环基团可任选地被一个或多个如上对烷基和芳基所定义的取代基取代。

术语“杂芳基”是指C₅-C₂₆元芳族、稠合芳族、双芳族环体系或其组合，其中一个或多个芳环结构上的一个或多个碳原子已经被杂原子取代。合适的杂原子包括但不限于氧、硫和氮。如本文所用，广泛定义的“杂芳基”包括5-、6-、7-、8-、9-、10-、14-、18-和24-元单环芳族基团，其可包括一个至四个杂原子，例如，吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、恶唑、噻唑、***、四唑、吡唑、吡啶、吡嗪、哒嗪和嘧啶等。杂芳基也可称为“芳基杂环”或“杂芳族化合物”。“杂芳基”进一步包括具有两个或更多个环的多环体系，其中两个或更多个碳对于两个相邻的环(即“稠环”)是共同的，其中至少一个环是杂芳族的，例如另一个环或或多个环可以是环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂环或其组合。杂芳基环的示例包括但不限于苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并硫代呋喃基、苯并噻吩基、苯并恶唑基、苯并噻唑啉基、苯并噻唑基、苯并***基、苯并四唑基、苯并异恶唑基、苯并异噻唑基、苯并咪唑啉基、咔唑基、4aH-咔唑基、咔啉基、色满基、色烯基、噌啉基、十氢喹啉基、2H、6H-1,5,2-二噻嗪基、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、1H-吲唑基、吲哚烯基、二氢吲哚基、吲嗪基、吲哚基、3H-吲哚基、异烟基(isatinoyl)、异苯并呋喃基、异色满基、异吲基、异二氢吲哚基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异恶唑基、亚甲基二氧苯基、萘啶基、八氢异喹啉基、1,2,3-恶二唑基、1,2,4-恶二唑基、1,2,5-恶二唑基、1,3,4-恶二唑基、恶唑烷基、恶唑基、羟吲哚基、嘧啶基、菲啶基、菲咯啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁噻基(phenoxathinyl)、吩噁嗪基(phenoxazinyl)、酞嗪基、蝶啶基、嘌呤基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并恶唑基、吡啶并咪唑基、吡啶噻唑基、吡啶基、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、四唑基、1,2,3-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、噻蒽基(thianthrenyl)、噻唑基、噻吩基、噻吩并噻唑基、噻吩并恶唑基、噻吩并咪唑基、噻吩基和氧杂蒽基(xanthenyl)。对于“取代的杂芳基”，一个或多个环可以如下所定义被取代。

术语“取代的杂芳基”是指一个或多个杂芳环上的一个或多个氢原子被一个或多个取代基取代的杂芳基，所述取代基包括但不限于卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、烷氧基、羰基(如酮、醛、羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(如硫代酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸基、膦酸盐、亚膦酸盐、氨基(或季铵化氨基)、酰胺基、脒、亚胺、氰基、硝基、叠氮基、巯基、亚氨基、烷硫基、硫酸盐、磺酸酯、氨磺酰基、亚砜基、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基(例如-CF₃、-CH₂-CF₃、-CCl₃)、-CN、芳基、杂芳基及其组合。

如本文所用，“烷基”是指饱和脂族基团，包括直链烷基、烯基或炔基、支链烷基、环烷基(脂环的)、烷基取代的环烷基、和环烷基取代的烷基。在优选的实施方案中，直链或支链烷基在其主链中具有30个或更少的碳原子(例如，对于直链为C₁-C₃₀，对于支链为C₃-C₃₀)，优选为20个或更少，更优选为15个或更少，最优选为10个或更少。同样，优选的环烷基在其环结构中具有3-10个碳原子，更优选在环结构中具有5、6或7个碳。在整个说明书，实施例和权利要求中使用的术语“烷基”(或“低级烷基”)旨在包括“未取代的烷基”和“取代的烷基”，后者是指烃骨架上一个或多个碳的氢经取代基的烷基。这些取代基包括但不限于卤素、羟基、羰基(如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、硫代羰基(如硫代酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、亚膦酸酯、氨基、酰胺基、脒、亚胺、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸盐、磺酸酯、氨磺酰基、亚砜基、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、芳烷基、或芳族或杂芳族基团。

除非碳原子数另外说明，否则本文所用的“低级烷基”是指如上所定义的烷基，但在其骨架结构中具有1-10个碳原子，更优选1-6个碳原子。同样，“低级烯基”和“低级炔基”具有相似的链长。在整个说明书中，优选的烷基是低级烷基。在优选的实施方案中，本文的烷基取代基为低级烷基。

“烷基”包括在烃基以及杂烷基的一个或多个碳原子上的一个或多个取代基。合适的取代基包括但不限于卤素，如氟、氯、溴或碘；羟基；-NRR'，其中R和R'各自独立地为氢、烷基或芳基，并且其中氮原子任选被季铵化；-SR，其中R是氢、烷基或芳基；-CN；-NO₂；-COOH；羧酸盐；-COR、-COOR或-CON(R)₂，其中R是氢、烷基、芳基、叠氮化物、芳烷基、烷氧基、亚氨基、膦酸酯、亚膦酸酯、甲硅烷基、醚、磺酰基、亚磺酰氨基、杂环基、芳族或杂芳族基团、卤代烷基(如-CF₃、-CH₂-CF₃、-CCl₃)、-CN、-NCOCOCH₂CH₂；-NCOCOCHCH、-NCS和其组合。

本领域技术人员应当理解的是，如果合适，在烃链上取代的基团本身可以被取代。例如，经取代的烷基的取代基可包括卤素、羟基、硝基、硫醇、氨基、叠氮基、亚氨基、酰胺基、磷酰基(包括膦酸酯和亚膦酸酯)、磺酰基(包括硫酸盐、磺酰氨基、氨磺酰基、亚砜基和磺酸酯)、甲硅烷基、和醚、烷硫基、羰基(包括酮、醛、羧酸酯和酯)、卤代烷基、-CN等。环烷基可以相同的方式被取代。

术语“烯基”和“炔基”是指长度类似的不饱和脂族基团和可能取代上述烷基的取代基，但分别含有至少一个双键或三键。

术语“取代的烯基”是指具有一个或多个取代基的烯基部分，所述取代基取代烃骨架一个或多个碳上的一个或多个氢原子。这些取代基包括但不限于卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、羰基(如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(例如硫代酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、亚膦酸酯、氨基(或季铵化氨基)、酰胺基、脒基、亚胺基、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸盐、磺酸酯、氨磺酰基、亚砜基、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基、-CN、芳基、杂芳基及其组合。

术语“取代的炔基”是指具有一个或多个取代基的炔基，所述取代基取代烃骨架一个或多个碳上的一个或多个氢原子。这些取代基包括但不限于卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、羰基(如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(例如硫代酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、亚膦酸酯、氨基(或季铵化氨基)、酰胺基、脒基、亚胺基、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸盐、磺酸酯、氨磺酰基、亚砜基、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基、-CN、芳基、杂芳基及其组合。

术语“苯基”是本领域公认的并且是指芳族基团-C₆H₅，即没有一个氢原子的苯环。

术语“取代的苯基”是指如上定义的具有一个或多个取代基的苯基，所述取代基取代苯环一个或多个碳上的一个或多个氢原子。这些取代基包括但不限于卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、羰基(如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(例如硫代酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、亚膦酸酯、氨基(或季铵化氨基)、酰胺基、脒基、亚胺基、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸盐、磺酸酯、氨磺酰基、亚砜基、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基、-CN、芳基、杂芳基及其组合。

如本文所用，“氨基”和“胺”是本领域公认的并且是指取代和未取代的胺，例如可以由通式表示的基团：

或

其中，R，R'和R”各自独立地为氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的羰基，或-(CH₂)m-R”'，或R和R'与它们所连接的N原子一起形成在环结构中具有3-14个原子的杂环；其中R”'代表羟基、取代或未取代的羰基、芳基、环烷基环、环烯基环、杂环或多环；m为0或1到8的整数。在优选的实施方案中，R和R'中只有一个为羰基，例如R、R'与氮不形成酰亚胺。在优选的实施方案中，R和R'(和任选的R”)各自独立地为氢原子、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、或-(CH₂)m-R”'。因此，本文所用的术语“烷基胺”是指如上定义的连接有取代或未取代的烷基的胺基，其上(即、R、R'或R”中的至少一个是烷基)。

如本文所用，“羰基”是本领域公认的并且包括可由以下通式表示的这些基团：

或

其中X为键，或代表氧或硫，R为氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环基、取代或未取代的烷芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、-(CH₂)m-R”，或其药学上可接受的盐；其中R'代表氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环基、取代或未取代的烷芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基，或-(CH₂)m-R”；其中R”为羟基，取代或未取代的羰基、芳基、环烷基环、环烯基环、杂环或多环；m为0或1到8的整数。当X是氧并且R如上所定义时，该基团也称为羧基。当X是氧且R是氢时，该式为'羧酸'。当X是氧且R'是氢时，该式为‘甲酸盐'。当X是氧且R或R'不是氢时，该式为“酯”。通常，当上式的氧原子被硫原子取代时，该式为“硫代羰基”基团。当X为硫且R或R'不是氢时，该式为‘硫酯'。当X为硫且R是氢时，该式为‘硫代羧酸'。当X为硫且R'为氢时，该式为‘硫代甲酸酯'。当X为直键且R不为氢时，上式为‘酮'。当X为直键且R为氢时，上式为‘醛'。

术语“取代的羰基”是指如上定义的羰基，其中R，R'或如下所附的基团中的一个或多个氢原子被各自独立地取代

或

这些取代基包括但不限于卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、羰基(如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(例如硫代酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、亚膦酸酯、氨基(或季铵化氨基)、酰胺基、脒基、亚胺基、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸盐、磺酸盐、氨磺酰基、亚砜基、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基、-CN、芳基、杂芳基及其组合。

或

式中的羧基定义如上

并且更具体地由式-R^ivCOOH所定义，其中R_iv为烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、烷芳基、芳烷基、芳基或杂芳基。在优选的实施方案中，直链或支链烷基、烯基和炔基在其主链中具有30个或更少的碳原子(例如，对于直链烷基为C₁-C₃₀，对于支链烷基为C₃-C₃₀，对于直烯基和炔基为C₂-C₃₀，对于支烯基和炔基为C₃-C₃₀)，优选为20个或更少，更优选为15个或更少，最优选为10个或更少。同样，优选的环烷基，杂环基，芳基和杂芳基在其环结构中具有3-10个碳原子，更优选为在环结构中具有5、6或7个碳原子。

术语“取代的羧基”是指如上定义的羧基，其中R^iv中的一个或多个氢原子被取代。这些取代基包括但不限于卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、羰基(如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(例如硫代酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、亚膦酸酯、氨基(或季铵化氨基)、酰胺基、脒基、亚胺基、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸盐、磺酸盐、氨磺酰基、亚砜基、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基、-CN、芳基、杂芳基及其组合。

如本文所用，“杂烷基”是指含有至少一个杂原子的直链或支链，或含环状碳的基团，或其组合。合适的杂原子包括但不限于O、N、Si、P和S，其中氮、磷和硫原子任选被氧化，和氮杂原子任选被季铵化。

饱和烃基的实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、环己基、(环己基)甲基、环丙基甲基、以及同系物和异构体、例如、正戊基、正己基、正庚基、正辛基。不饱和烷基的实例包括但不限于乙烯基、2-丙烯基、巴豆基、2-异戊烯基、2-(丁二烯基)、2,4-戊二烯基、3-(1,4-戊二烯基)、乙炔基、1-和3-丙炔基和3-丁炔基。

术语“烷氧基”或“烷基氧基”和“芳氧基”或“芳基氧基”通常描述为由式-OR^v表示的化合物，其中R^v包括但不限于取代或未取代的烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基、烷基杂芳基。

本文所用的术语“烷基氧基”或“烷氧基”是指的如上定义的烷基，具有与其连接的氧基。代表性的烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、叔丁氧基等。“醚”是通过氧共价连接的两种烃。因此，烷基的取代基使得烷基与醚相似或类似于烷氧基，例如可以由-O-烷基，-O-烯基和-O-炔基中的一种表示。术语烷氧基还包括环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基和芳烷基，其具有与至少一个碳原子连接的氧基，只要化合价所允许。

术语“取代的烷氧基”是指具有一个或多个取代基的烷氧基，所述取代基取代烷氧基骨架的一个或多个碳上的一个或多个氢原子。这些取代基包括但不限于卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、羰基(如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(例如硫代酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、亚膦酸酯、氨基(或季铵化氨基)、酰胺基、脒基、亚胺基、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸盐、磺酸盐、氨磺酰基、亚砜基、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基、-CN、芳基、杂芳基及其组合。

术语“苯氧基”是本领域公认的，并且是指式-OR^v的化-合物，其中R^v为苯基(即-O-C₆H₅)。本领域技术人员应知苯氧基是一种芳氧基类。

术语“取代的苯氧基”是指具有一个或多个取代基的如上定义的苯氧基，所述取代基取代苯环的一个或多个碳上的一个或多个氢原子。这些取代基包括但不限于卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、羰基(如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(例如硫代酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、亚膦酸酯、氨基(或季铵化氨基)、酰胺基、脒基、亚胺基、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸盐、磺酸盐、氨磺酰基、亚砜基、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基、-CN、芳基、杂芳基及其组合。

术语“芳氧基”和“芳基氧基”在本文中可互换使用，由-O-芳基或-O-杂芳基表示，其中芳基和杂芳基如本文所定义。

术语“取代的芳氧基”和“取代的芳基氧基”在本文中可互换使用，表示为具有一个或多个取代基的-O-芳基或-O-杂芳基，所述的取代基取代如本文所定义的芳基和杂芳基的一个或多个环原子上的一个或多个氢原子。这些取代基包括但不限于卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、羰基(如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(例如硫代酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、亚膦酸酯、氨基(或季铵化氨基)、酰胺基、脒基、亚胺基、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸盐、磺酸盐、氨磺酰基、亚砜基、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基、-CN、芳基、杂芳基及其组合。

术语“烷硫基”是指具有与其连接的硫基团的如上定义的烷基。“烷硫基”基团由-S-烷基表示。代表性的烷硫基包括甲硫基、乙硫基等。术语“烷硫基”还包括具有与其连接的硫基团的环烷基。

术语“取代的烷硫基”是指具有一个或多个取代基的烷硫基，所述取代基取代烷硫基骨架的一个或多个碳原子上的一个或多个氢原子。这些取代基包括但不限于卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、羰基(如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(例如硫代酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、亚膦酸酯、氨基(或季铵化氨基)、酰胺基、脒基、亚胺基、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸盐、磺酸盐、氨磺酰基、亚砜基、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基、-CN、芳基、杂芳基及其组合。

术语“苯硫基”是本领域公认的，并且是指-S-C₆H₅，即与硫原子连接的苯基。

术语“取代的苯硫基”是指具有一个或多个取代基的如上定义的苯硫基，所述取代基取代苯环的一个或多个碳上的氢原子。这些取代基包括但不限于卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、羰基(如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(例如硫代酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、亚膦酸酯、氨基(或季铵化氨基)、酰胺基、脒基、亚胺基、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸盐、磺酸盐、氨磺酰基、亚砜基、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基、-CN、芳基、杂芳基及其组合。

“芳硫基”是指-S-芳基或-S-杂芳基，其中芳基和杂芳基如本文所定义。

术语“取代的芳硫基”表示具有一个或多个取代基的-S-芳基或-S-杂芳基，所述取代基取代如本文所定义的芳基和杂芳基环的一个或多个环原子上的氢原子。这些取代基包括但不限于卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、羰基(如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(例如硫代酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、亚膦酸酯、氨基(或季铵化氨基)、酰胺基、脒基、亚胺基、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸盐、磺酸盐、氨磺酰基、亚砜基、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基、-CN、芳基、杂芳基及其组合。

如本文所用，“芳烷基”是指被取代或未取代的芳基或杂芳基取代的烷基。

如本文所用，“烷芳基”是指被取代或未取代的烷基取代的芳基(例如芳族或杂芳族基团)。

如本文所用，“苯烷基”是指被取代或未取代的苯基或杂苯基取代的烷基。

如本文所用，“烷苯基”是指被取代或未取代的烷基取代的苯基。

术语“酰胺”或“酰氨基”可互换使用,是指“未取代的酰氨基”和“取代的酰氨基”，并且由通式表示：

其中E不存在或为取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的杂环基，其中地E、R和R'各自独立地为氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的羰基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环基、取代或未取代的烷芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基，或-(CH₂)_m-R”'，或R和R'与和它们所连接的N原子一起形成在环结构上具有3-14个原子的杂环；其中R”'为羟基、取代或未取代的羰基、芳基、环烷基环、环烯基环、杂环或多环；m为0或1到8的整数。在优选的实施方案中，R和R'中只有一个可以是羰基，例如R和R'与氮不形成酰亚胺。在优选的实施方案中，R和R'各自独立地为氢原子、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、或-(CH₂)_m-R”'。当E是氧时，形成氨基甲酸酯。如本领域普通技术人员所理解的，氨基甲酸酯不能与另一种化学物质连接，例如形成氧-氧键或其他不稳定的键。

术语“磺酰基”由下式表示

其中E不存在或E为烷基、烯基、炔基、芳烷基、烷芳基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基、其中于E、R为氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的胺、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环基、取代或未取代的烷芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、或-(CH₂)m-R”'、或E和R与它们所连接的S原子一起形成在环结构中具有3-14个原子的杂环；R”'为羟基、取代或未取代的羰基、芳基、环烷基环、环烯基环、杂环或多环；m为0或1到8的整数。在优选的实施方案中，E和R中只有一个为取代或未取代的胺，以形成“磺酰胺”或“磺酰胺基”。取代或未取代的胺如上所定义。

术语“取代的磺酰基”为E，R或两者独立地被取代的磺酰基。这些取代基包括但不限于卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、羰基(如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(例如硫代酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、亚膦酸酯、氨基(或季铵化氨基)、酰胺基、脒基、亚胺基、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸盐、磺酸盐、氨磺酰基、亚砜基、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基、-CN、芳基、杂芳基及其组合。

术语“磺酸”是指如上定义的磺酰基，其中R是羟基，E不存在，或E是取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环基、取代或未取代的烷芳基、取代或未取代的芳烷基、取代的或未取代的芳基、或取代或未取代的杂芳基。

术语“硫酸盐”是指如上定义的磺酰基，其中E为不存在或如上所定义的氧、烷氧基、芳氧基、取代的烷氧基或取代的芳氧基，R独立地为如上所定义的羟基、烷氧基、芳氧基、取代的烷氧基或取代的芳氧基。如本领域普通技术人员所理解的是，当E为氧时，硫酸盐不能与另一种化学物质连接，例如形成氧-氧键或其他不稳定的键。

术语“磺酸盐”是指如上定义的磺酰基，其中E为如上定义的氧，烷氧基，芳氧基，取代的烷氧基或取代的芳氧基，R独立地为氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、取代的或未取代的炔基、取代或未取代的胺、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环基、取代或未取代的烷芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、或-(CH₂)m-R”'；其中R”'为羟基、取代或未取代的羰基、芳基、环烷基环、环烯基环、杂环或多环；m为0或1到8的整数。如本领域普通技术人员所理解的是，当E是氧时，磺酸盐不能与另一种化学物质连接，例如形成氧-氧键或其他不稳定的键。

术语“氨磺酰基”是指由下式表示的磺酰胺或磺酰胺

其中E不存在或E为取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的烷芳基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的杂环基，其E，R和R'各自独立地表示氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的羰基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环基、取代或未取代的烷芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、或-(CH₂)m-R”'、或R和R'与它们所连接的N原子一起形成在环结构中具有3到14个原子的杂环；其中R”'为羟基、取代或未取代的羰基、芳基、环烷基环、环烯基环、杂环或多环；m为0或1到8的整数。在优选的实施方案中，R和R'中只有一个为羰基，例如R和R'与氮一起不形成酰亚胺。

术语“亚砜”由下式表示

其中E不存在或E为烷基、烯基、炔基、芳烷基、烷芳基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基，其中E、R独立为氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的胺、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环基、取代或未取代的烷芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、或-(CH₂)m-R”'、或E和R与它们所连接的S原子一起形成在环结构中具有3-14个原子的杂环；其中R”'为羟基、取代或未取代的羰基、芳基、环烷基环、环烯基环、杂环或多环；m为0或1到8的整数。

术语“膦酰基”由下式表示

其中E不存在或E为取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的烷芳基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、取代或未取代的杂环基，其中，E，R^vi和R^vii各自独立地为氢、取代或未取代的烷基、取代或未取代的烯基、取代或未取代的炔基、取代或未取代的羰基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的杂环基、取代或未取代的烷芳基、取代或未取代的芳烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂芳基、或-(CH₂)m-R”'、或R^vi和R^vii与它们所连接的P原子一起形成在环结构上具有3-14的杂环；其中R”'为羟基、取代或未取代的羰基、芳基、环烷基环、环烯基环、杂环或多环；m为0或1到8的整数。

术语“取代的膦酰基”为E，R^vi和R^vii独立地被取代的膦酰基。这些取代基包括但不限于卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、羰基(如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(例如硫代酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、亚膦酸酯、氨基(或季铵化氨基)、酰胺基、脒基、亚胺基、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸盐、磺酸盐、氨磺酰基、亚砜基、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基、-CN、芳基、杂芳基及其组合。

术语“磷酰基”定义中，E不存在或为如上所定义的氧、烷氧基、芳氧基、取代的烷氧基或取代的芳氧基，和E，R^vi和R^vii各自独立地为如上定义的羟基、烷氧基、芳氧基、取代的烷氧基或取代的芳氧基。如本领域普通技术人员所理解的是，当E是氧时、磷酰基不能与另一种化学物质连接，例如形成氧-氧键或其他不稳定的键。当E，R^vi和R^vii被取代时，取代基包括但不限于卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、羰基(如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚、酯、硫代羰基(如硫代酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、亚膦酸酯、氨基(或季铵化氨基)、酰氨基、脒、亚胺、氰基、硝基、叠氮基巯基、巯基、烷硫基、硫酸盐、磺酸盐、氨磺酰基、亚砜基、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基、-CN、芳基、杂芳基及其组合。

术语“聚芳基”是指包括两个或更多个芳基、杂芳基和其组合的化学基团。芳基、杂芳基和其组合是通过单键、醚、酯、羰基、酰胺、磺酰基、磺酰胺、烷基、偶氮和其组合稠合或连接。

术语“取代的聚芳基”是指其中一个或多个芳基、杂芳基被一个或多个取代基取代的聚芳基，所述的取代基包括但不限于卤素、叠氮化物、烷基、芳烷基、烯基、炔基、环烷基、羟基、羰基(如羧基、烷氧基羰基、甲酰基或酰基)、甲硅烷基、醚基、酯基、硫代羰基(如硫代酯、硫代乙酸酯或硫代甲酸酯)、烷氧基、磷酰基、磷酸酯、膦酸酯、亚膦酸酯、氨基(或季铵化氨基)、酰胺基、脒基、亚胺基、氰基、硝基、叠氮基、巯基、烷硫基、硫酸盐、磺酸盐、氨磺酰基、亚砜基、磺酰氨基、磺酰基、杂环基、烷芳基、卤代烷基、-CN、芳基、杂芳基和其组合。

术语“C₃-C₂₀环”是指具有3至20个碳原子的取代或未取代的环烷基、取代或未取代的环烯基、取代或未取代的环炔基、取代或未取代的杂环基，如几何形状约束所允许的。环状结构由单环或稠环***形成。取代的环烷基、环烯基、环炔基和杂环基分别如上文对烷基、烯基、炔基和杂环基所定义的那样被取代。

术语“羟基”和“羟基”可互换使用，并由-OH表示。

术语“硫醇”和“巯基”可互换使用，并由-SH表示。

术语“氧代”是指＝O键合到碳原子上。

术语“氰基”和“腈”可互换使用，指-CN。

术语“硝基”是指-NO₂。

术语“磷酸基”是指-O-PO₃。

术语“叠氮化物”或“叠氮基”可互换使用，指-N₃。

术语“取代的Cx-Cy烷基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个碳原子的烷基，其中至少一个碳原子被取代。术语“未取代的Cx-Cy烷基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个未被取代的碳原子的烷基。

术语“取代的Cx-Cy亚烷基”(其中x和y是整数，其中x<y)是指具有x至y个碳原子的亚烷基，其中至少一个碳原子被取代。术语“未取代的C₁-C₁₀亚烷基”(其中x和y是整数，其中x<y)是指具有x至y个未被取代的碳原子的亚烷基。如本文所用，术语“亚烷基”是指具有式-(CH₂)a-的基团，其中“a”是x至y的整数。

术语“取代的Cx-Cy烯基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个碳原子的烯基，其中至少一个碳原子被取代。术语“未取代的Cx-Cy烯基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个未被取代的碳原子的烯基。

术语“取代的Cx-Cy炔基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个碳原子的炔基，其中至少一个碳原子被取代。术语“未取代的Cx-Cy炔基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个未被取代的碳原子的炔基。

术语“取代的Cx-Cy烷氧基”(其中x和y是整数，其中x<y)是指具有x至y个碳原子的烷氧基，其中至少一个碳原子被取代。术语“未取代的Cx-Cy烷氧基”(其中x和y是整数，其中x<y)是指具有x至y个未被取代的碳原子的烷氧基。

术语“取代的C x-C y烷基氨基”(其中x和y是整数，其中x<y)是指具有x至y个碳原子的烷基氨基，其中至少一个碳原子被取代。术语“未取代的Cx-Cy烷基氨基”(其中x和y是整数，其中x<y)是指具有x至y个未被取代的碳原子的烷基。术语“烷基胺”和“烷基氨基”可互换使用。在任何烷基氨基中，其中氮原子被一个、两个或三个取代基取代，氮原子可分别称为仲，叔或季氮原子。

术语“取代的Cx-Cy烷硫基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个碳原子的烷硫基，其中至少一个碳原子被取代。术语“未取代的Cx-Cy烷硫基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个未被取代的碳原子的烷硫基。

术语“取代的Cx-Cy羰基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个碳原子的羰基，其中至少一个碳原子被取代。术语“未取代的Cx-Cy羰基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个未被取代的碳原子的羰基。

术语“取代的Cx-Cy羧基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个碳原子的羧基，其中至少一个碳原子被取代。术语“未取代的Cx-Cy羧基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个未被取代的的碳原子羧基。

术语“取代的Cx-Cy酰胺基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个碳原子的酰胺基，其中至少一个碳原子被取代。术语“未取代的Cx-Cy酰胺基”(其中x和y是其中x<y的整数)是指具有x至y个未被取代的碳原子的酰胺基。

术语“取代的Cx-Cy磺酰基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个碳原子的磺酰基，其中至少一个碳原子被取代。术语“未取代的Cx-Cy磺酰基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个未被取代的碳原子的磺酰基。

术语“取代的Cx-Cy磺酸”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个碳原子的磺酸基团，其中至少一个碳原子被取代。术语“未取代的Cx-Cy磺酸”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个未被取代的碳原子的磺酸基。

术语“取代的Cx-Cy氨磺酰基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个碳原子的氨磺酰基，其中至少一个碳原子被取代。术语“未取代的Cx-Cy氨磺酰基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个未被取代的碳原子的氨磺酰基。

术语“取代的Cx-Cy亚砜”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个碳原子的亚砜基团，其中至少一个碳原子被取代。术语“未取代的Cx-Cy亚砜”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个未被取代的碳原子的亚砜基团。

术语“取代的Cx-Cy磷酰基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个碳原子的磷酰基，其中至少一个碳原子被取代。术语“未取代的Cx-Cy磷酰基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有未被取代的x至y个碳原子的磷酰基。

术语“取代的Cx-Cy膦酰基”(其中x和y是整数，x<y)是指具有x至y个碳原子的膦酰基，其中至少一个碳原子被取代。术语“未取代的Cx-Cy膦酰基”(其中x和y是其中x<y的整数)是指具有未被取代的x至y个碳原子的膦酰基。

术语取代“Cx烷基”、“Cx亚烷基”、“Cx烯基”、“Cx炔基”、“Cx烷氧基”、“Cx烷基氨基”、“Cx烷硫基”、“Cx羰基”、“Cx羧基”、“Cx”酰胺基、“Cx磺酰基”、“Cx磺酸”、“Cx氨磺酰基”，“Cx磷酰基”和“Cx膦酰基”(其中x是整数)是指分别具有x个碳原子的烷基、亚烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷基氨基、烷硫基、羰基、羧基、酰胺基、磺酰基、磺酸基、氨磺酰基、亚砜基、磷酰基和膦酰基，其中至少一个碳原子被取代。术语未取代的“Cx烷基”、“Cx亚烷基”、“Cx烯基”、“Cx炔基”、“Cx烷氧基”、“Cx烷基氨基”、“Cx烷硫基”、“Cx羰基”、“Cx羧基”、“Cx酰胺基、“Cx磺酰基”、“Cx磺酸”、“Cx氨磺酰基”、“Cx磷酰基”和“Cx膦酰基”(其中x是整数)是指分别具有x个未被取代的碳原子的烷基、亚烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷基氨基、烷硫基、羰基、羧基、酰胺基、磺酰基、磺酸基、氨磺酰基、亚砜基、磷酰基和膦酰基。

II.化合物和组合物

A.活性化合物

多环有机化合物通常以有效量提供，以亮白皮肤、减少色素沉着过度，或两者兼而有之。例如，如本发明的组合物中活性化合物的有效量为组合物的约0.01wt％至约50wt％，优选约0.1wt％至约20wt％，更优选约2wt％至约10wt％，最优选约5wt％至约10wt％。这些化合物具有以任何组合和任何比例的任何立体异构形式和互变异构形式的式1结构

式1，

其药学上可接受的盐，其药学上可接受的溶剂化物，其药学上可接受的多晶型物或其前药；其中，R₁-R₁₀独立地为氢、卤素、或取代或未取代的烷基、杂烷基、烯基、杂烯基、炔基、杂炔基、环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、烷芳基、烷基杂芳基、芳烷基或杂芳烷基；其中R₈和R₁₀中的至少一个是被烷基、杂烷基、烯基、杂烯基、炔基、杂炔基、环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、烷芳基、烷基杂芳基、芳烷基或杂芳烷基取代的烷基或烯基；X是O、S、NH、CR₁₁R₁₂或NR₁₃，其中R₁₁-R₁₃独立地为氢或取代或未取代的烷基，杂烷基、烯基、杂烯基、炔基、杂炔基、环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、烷芳基、烷基杂芳基、芳烷基或杂芳烷基；Y是O、S或N。

在一些方式中，R₈和R₁₀中的至少一个为被杂烷基、环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、烷芳基、烷基杂芳基、芳烷基或杂芳烷基取代的烷基或烯基。在一些方式中，R₈和R₁₀中的至少一个是被杂烷基、环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、烷芳基、烷基杂芳基、芳烷基或杂芳烷基取代的烯基。在一些方式中，为取代烯基的R₈和R₁₀中的至少一个为平面基团(即，芳族和双键限定R₈和R₁₀的原子位于单个平面中)。

在一些方式中，式1的X和Y为O。

在一些方式中，具有式1结构的化合物为多酚衍生物或在选自R₁-R₇和R₉的位置具有至少三个羟基的多酚，最优选在R₃、R₇和R₉位置。在一些方式中，如式1的化合物可以是多酚的衍生物或具有至少四个羟基的多酚，优选在选自R₁-R₇和R₉的位置，最优选在R₃、R₆、R₇和R₉的位置。在一些方式中，如式1的化合物可以是多酚的衍生物或具有至少五个羟基的多酚，优选在选自R₁-R₇和R₉的位置，最优选在R₂、R₃、R₆、R₇和R₉的位置。

在一些方式中，如式1的化合物可以在稠环的碳2和碳3之间具有双键。在一些方式中，如式1的化合物可以在稠环的碳2和碳3之间具有单键。在一些方式中，根据式1的化合物可具有双键，如---键。在一些方式中，根据式1的化合物可以具有单键，如---键。

在一个优选的实施方案中，具有式1结构的化合物在R₈和R₁₀中的至少一个中具有取代的烯基，其中取代基是芳基或杂芳基。在进一步的实施方案中，R₈和R₁₀中的至少一个的烯基为C₂-C₁₀烯基。

在化合物的一些方式中，R₈和R₁₀中至少一个的烯基被芳基，杂芳基，烷芳基，烷基杂芳基，芳烷基或杂芳烷基取代。在一些方式中，R₈和R₁₀中的至少一个烯基被芳基或杂芳基取代。在一些方式中，R₈和R₁₀中至少一个的烯基被芳基取代。在一些方式中，R₈和R₁₀中至少一个的烯基被苯基取代。在一些方式中，R₈和R₁₀中至少一个的烯基为C₂-C₁₀烯基。在一些方式中，R₈和R₁₀中至少一个的烯基是C₂-C₅烯基。在一些方式中，R₈和R₁₀中至少一个的烯基是C₂-C₃烯基。在一些方式中，R₈和R₁₀中至少一个的烯基是C₂烯基。

在某些方式的化合物中，R₈或R₁₀的一个为取代的烯基。在某些方式中，R₈为取代的烯基。在某些方式中，R₁₀为取代的烯基。在某些方式中，R₈和R₁₀为取代的烯基。在某些方式中，R₁₀为氢、C₁-C₁₀烷基或C₁-C₁₀烷氧基。在某些方式中，R₈为氢、C₁-C₁₀烷基或C₁-C₁₀烷氧基。在某些方式中，R₈或R₁₀中的一个为氢、C1-C₁₀烷基或C₁-C₁₀烷氧基。在某些方式中，R₈或R₁₀中的一个为氢、C₁-C₅烷基或C₁-C₅烷氧基。在一些方式中，R₈或R₁₀的一个为氢、C₁-C₃烷基或C₁-C₃烷氧基。在某些方式中，R₈或R₁₀中的一个为氢、C₁烷基或C₁烷氧基。在某些方式中，R₈或R₁₀中的一个为氢。

在某些方式的化合物中，R₈或R₁₀的一个为取代的烷基。在某些方式中，R₈为取代的烷基。在某些方式中，R₁₀是取代的烷基。在某些方式中，R₈和R₁₀是取代的烷基。在一些方式的化合物中，R₈和R₁₀中至少一个的烷基被芳基、杂芳基、烷芳基、烷基杂芳基、芳烷基或杂芳烷基取代。在一些方式中，R₈和R₁₀中的至少一个的烷基被芳基或杂芳基取代。在一些方式中，R₈和R₁₀中至少一个的烷基被芳基取代。在一些方式中，R₈和R₁₀中至少一个的烷基被苯基取代。在一些方式中，R₈和R₁₀中至少一个的烷基是C₂-C₁₀烷基。在一些方式中，R₈和R₁₀中至少一个的烷基是C₂-C₅烷基。在一些方式中，R₈和R₁₀中至少一个的烷基是C₂-C₃烷基。在一些方式中，R₈和R₁₀中至少一个的烷基是C₂烷基。

在某些方式的化合物中，R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇和R₉中的至少一个是-NR₁₄R₁₅、-(CH₂)_mNR₁₆R₁₇、-NO₂、-CF₃、-CN、-C₂R₁₈、-SR₁₉、-N₃(例如、叠氮化物)、-C(＝O)NR₂₀R₂₁、-NR₂₂C(＝O)R₂₃、-C(＝O)R₂₄、-C(＝O)OR₂₅、-OC(＝O)R₂₆、-O(CR₂₇R₂₈)_rC(＝O)R₂₉、-O(CR₃₀R₃₁)_rNR₃₂C(＝O)R₃₃、-O(CR₃₄R₃₅)_rNR₃₆SO₂R₃₇、-OC(＝O)NR₃₈R₃₉、-NR₄₀C(＝O)OR₄₁、-SO₂R₄₂；-SO₂NR₄₃R₄₄、-NR₄₅SO₂R₄₆或-OR₄₇；其中m为0、1或2，其中r为1至6的整数，且其中R₁₄-R₄₇独立地为氢或取代或未取代的烷基、杂烷基、烯基、杂烯基、炔基、杂炔基、环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、烷芳基、烷基杂芳基、芳烷基或杂芳烷基。

在某些方式的化合物中，R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇和R₉独立地为氢、C₁-C₁₀烷基或C₁-C₁₀烷氧基。在一些方式中，R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇和R₉中的六个独立地为C₁-C₁₀烷基或C₁-C₁₀烷氧基且其它为氢。在一些方式中，R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇和R₉中的五个独立地为C₁-C₁₀烷基或C₁-C₁₀烷氧基且其他为氢。在一些方式中，R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇和R₉中的四个独立地为C₁-C₁₀烷基或C₁-C₁₀烷氧基且其它为氢。在一些方式中，R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇和R₉中的三个独立地为C₁-C₁₀烷基或C₁-C₁₀烷氧基且其它为氢。在一些方式中，R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇和R₉中的两个独立地为C₁-C₁₀烷基或C₁-C₁₀烷氧基且其它是氢。在一些方式中，R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇和R₉中的一个独立地为C1-C₁₀烷基或C1-C₁₀烷氧基且其它为氢。在一些方式中，R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇和R₉为氢。在某些方式中，X、Y、R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇和R₉分别不同时为O、O、H、H、H、H、H、H和H.

在某些方式的化合物中，当式1化合物中的X和Y为O时，R₁-R₁₀中的至少两个不为氢。在一些方式的化合物中，当式1化合物中的X和Y为O时，R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇和R₉中的至少一个不是氢。在一些方式的化合物中，当式1化合物中的X和Y为O时，R₁、R₂、R₃、R₄、R₅、R₆、R₇和R₉中的至少一个为卤素，或取代或未取代的烷基、杂烷基、烯基、杂烯基、炔基、杂炔基、环烷基、杂环烷基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、烷芳基、烷基杂芳基、芳烷基或杂芳烷基。

在一些优选的方式中，化合物为具有式2的结构的6-C-(E-苯基乙烯基)-柚皮素(6-CEPN)、8-C-(E-苯基乙烯基)-柚皮素(8-CEPN)、或具有式3的结构的8-C-(E-苯基乙烯基)-槲皮素(8-CEPQ)。

式2。6-C-(E-苯基乙烯基)柚皮素(6-CEPN)的化学结构

式3。8-C-(E-苯基乙烯基)-槲皮素(8-CEPQ)的化学结构。

通常，优选地，R₈或R₁₀中的至少一个为取代的烯基，其中取代基是疏水的，大体积的，不饱和的或其组合。

其他实例包括柑橘、番茄或石斛(Herba Dendrobii)提取物，或其衍生物，更具体地类黄酮或黄酮类衍生物，例如柚皮素(中国专利申请公开号104758191A)。石斛在中国传统医学中被称为石虎(Shi Hu)，存在于金钗石斛(orchid Dendrobium nobile Lindl)的茎中和石斛属的许多其他兰花物种中。作为石斛草提取物来源的优选物种是铁皮石斛(Dendrobium officinalis)。黄酮类的其他亚组包括黄酮、黄酮醇、黄烷醇、黄烷酮、查耳酮、橙酮、异黄酮、花色素苷和原花色素。衍生基团优选包括烯基和取代的烯基，其中取代基为环烷基、杂环基、环烯基、杂环烯基、芳基、杂芳基、芳烷基、杂烷基、烷芳基或烷基杂芳基。

柚皮素通过加合物形成与苯乙醛反应，形成6-CEPN或8-CEPN(Cheng KW，等，毒理学的化学研究(Chem.Res.Toxicol)，21(10)：2026-2034(2008))。与一些能够抑制癌细胞的黄酮或其衍生物不同(Zang R等，生物化学进程(Process Biochemistry)，48(1)：78-88(2013)；Li H，等，癌症研究(Cancer Res)，74(1))：243-252(2014))或用作促进黑素瘤细胞合成的鞣剂(Bouzaiene NN，等，生命科学(Life Sciences)，144：80-85(2016)；Ohguchi K，等，生物科学、生物技术与生物化学(Bioscience,Biotechnology,and Biochemistry)，70(6)：1499-1501(2006))，这里描述的化合物能够使亮白皮肤并减少色素沉着过度。

B.制剂

所公开的含有所公开化合物(例如式1化合物和式1化合物的异构体、类似物或前药，或该化合物的药理活性盐)的组合物可以与例如一种或多种另外的活性剂、一种或多种药学上可接受的辅料，或两者制备成药物组合物。

在一些方式中，活性化合物与受控递送载体一起制备，用于持续递送至体表的目标区域。

a.控释制剂

控制释放聚合物装置可在施用聚合物装置(棒、圆筒、膜、盘)或注射(微粒)后用于长期释放。该装置可以是微粒(或纳米颗粒)的形式，例如微球(纳米球)，其中，一种或多种式1化合物分散在固体聚合物基质或胶囊内，其中核芯的材料不同于聚合物壳。式1化合物分散或悬浮在核芯中，核芯可以是液体或固体。除非本文特别定义，否则微粒、微球和微胶囊可互换使用。或者，所述聚合物可以制成从纳米到4厘米范围的薄板或薄膜、通过研磨或其他标准技术生产的粉末、或甚至凝胶例如水凝胶。

尽管可生物降解的基质是优选的，但是不可生物降解或可生物降解的基质均可用于递送式1化合物。这些可以是天然或合成聚合物，但是为了更好地表征降解和释放曲线，合成聚合物是优选的。可以基于期望释放的时间来选择聚合物。在某些情况下，可以采用线性释放，但在其他情况下，脉冲释放或“大量释放”可提供更有效的结果。所述聚合物可以是水凝胶的形式(通常吸收高达约90％重量的水)，并且可以任选地与多价离子或聚合物络合。

基质可以通过溶剂蒸发、喷雾干燥、溶剂萃取和本领域技术人员已知的其他方法形成。生物可侵蚀微球可以使用开发用于制备用于药物递送的微球的任何方法来制备，例如，如Mathiowitz和Langer，控制释放杂志(J.Controlled Release)，5,13-22(1987)所述；Mathiowitz等，反应聚合物(Reactive Polymers)，6,275-283(1987)；和Mathiowitz等，应用高分子科学杂志(J.Appl.Polymer Sci)，35,755-774(1988)。

该装置可以配制用于局部释放以治疗所需的身体表面，其通常所提供的剂量将远小于用于治疗整个身体或全身递送的剂量。这些可以局部施用、注射到真皮组织中、皮下植入或注射到肌肉、脂肪或进行吞咽。

b.载体或辅料

用于一种或多种式1化合物的载体或辅料由通常被认为是安全的材料形成。载体适用于皮肤病施用，注射、植入、口服给药和施用于个体的其它合适途径，而不会引起不良的生物学副作用或不必要的相互作用。

代表性的赋形剂包括溶剂、稀释剂、pH调节剂、防腐剂、抗氧化剂、悬浮剂、润湿剂、粘度调节剂、调节剂、稳定剂和其组合。

皮肤病学上可接受的载体适合施用于皮肤，具有良好的美学性质，与活性剂和任何其它组分相容，并且不会引起任何不利的安全性或毒性问题。

安全有效量的载体量为组合物的约50％至约99.99％，优选约99.9％至约80％，更优选约98％至约90％，最优选约95％至约90％。

载体可以有多种形式。例如，可用于本发明的乳液载体，包括但不限于水包油、油包水、水包油包水和硅氧烷包水包油乳液。这些乳液可以覆盖宽范围的粘度，例如约100cps至约200,000cps。这些乳液也可以使用机械泵容器或使用常规推进剂的加压气溶胶容器以喷雾形式输送。这些载体也可以慕斯的形式提供。其它合适的局部载体包括无水液体溶剂，如油、醇和硅氧烷(如矿物油、乙醇异丙醇、聚二甲基硅氧烷、环聚二甲基硅氧烷等)；水基单相液体溶剂(例如，水-醇溶剂***)；以及这些无水和水基单相溶剂的增稠型(例如，通过添加适当的树胶、树脂、蜡、聚合物、盐和溶剂、增加溶剂的粘度以形成固体或半固体)。可用于本发明的局部载体***的实例在以下四篇参考文献中描述，所有这些文献均通过引用整体并入本文：“防晒产品配方“化妆品和洗漱用品”(Sun Products Formulary”Cosmetics&Toiletries)，vol.105,，pp.122-139(1990年12月)；“防晒产品配方“化妆品和洗漱用品”(Sun Products Formulary”Cosmetics&Toiletries)，vol.102，pp.117-136(1987年3月)；1990年10月2日授予Figueroa等人的美国专利No.4,960,764；和1981年3月3日授予Fukuda等人的美国专利4,254,105。

本发明的载体可为本发明组合物约50重量％至约99重量％，优选约75重量％至约99重量％，最优选约85重量％至约95％。

优选的化妆品、药学上或两者兼有的可接受的局部载体包括水-醇体系和水包油乳剂。当载体是水-醇体系时，载体可包含约0％至约99％的乙醇、异丙醇或其混合物，和约1％至约99％的水。更优选的载体包含约5％至约60％的乙醇、异丙醇或其混合物，和约40％至约95％的水。特别优选的载体包含约20％至约50％的乙醇、异丙醇或其混合物，和约50％至约80％的水。当载体是水包油乳液时，载体可包括用于制备这些乳液的任何常用赋形剂成分。合适的载体的更详细讨论可Blank等人的美国专利号5,605,894和Bissett的美国专利号5,681,852，两者均通过引用整体并入本文。

在一些方式中，组合物被配制用于口服给药。口服固体剂型通常描述于雷明顿的制药科学(Remington's Pharmaceutical Sciences)，第18版.1990年(麦克出版公司(MackPubl ishing Co.Easton Pa).18042)，第89章。固体剂型包括片剂、胶囊、丸剂、锭剂或含片、小袋、丸剂、粉剂或颗粒剂或将该物质掺入到聚合化合物如聚乳酸、聚乙醇酸等的颗粒制剂中或脂质体中。此类组合物可影响本发明蛋白质和衍生物的物理状态、稳定性、体内释放速率和体内清除速率。参见，例如，雷明顿的制药科学(Remington's PharmaceuticalSciences)，第18版.1990年(麦克出版公司(Mack Publishing Co.Easton Pa).18042)，第1435-1712页，其通过引用并入本文。组合物可以以液体形式制备，或者可以以干燥粉末(例如冻干)形式。脂质体或类蛋白质包封可以用于制备组合物(例如，美国专利No.4,925,673中报道的蛋白质类微球体)。可以使用脂质体包封，并且脂质体可以用各种聚合物衍生化(例如，美国专利号5,013,556)。另见马歇尔(Marshall)，K.In：由G.S.Banker和C.T.Rhodes编辑的现代药剂学(Modern Pharmaceutics)，第10章，1979年。

其他形式提供用于口服给药的液体剂型，包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液和糖浆，其可含有其它组分，包括惰性稀释剂；佐剂如润湿剂、乳化剂和悬浮剂；和甜味剂、调味剂和芳香剂。

C.其他组分

所述皮肤亮白和去除色素的组合物可任选地包含另外的活性剂。这种皮肤活性物质的非限制性实例包括维生素B3化合物，例如1997年10月30日公布的Oblong等人的PCT申请WO 97/39733中所描述，该专利全文以引用方式并入本文。羟基酸如水杨酸；去角质或脱屑剂如两性离子表面活性剂；防晒剂如2-乙基己基-对甲氧基肉桂酸酯、4,4'-叔丁基甲氧基二苯甲酰基甲烷，十八碳烯、苯基苯并咪唑磺酸；防晒剂如氧化锌和二氧化钛；抗炎药；抗氧化剂/自由基清除剂如生育酚及其酯；金属螯合剂，特别是铁螯合剂；类维生素A如视黄醇、棕榈酸视黄酯、乙酸视黄酯、丙酸视黄酯和视黄醛；N-乙酰基-L-半胱氨酸及其衍生物；羟基酸如乙醇酸；酮酸如丙酮酸；苯并呋喃衍生物；脱毛剂(例如巯基化合物)；其它皮肤亮白剂(例如熊果苷、曲酸、氢醌、抗坏血酸和衍生物，如抗坏血酸磷酸盐，胎盘提取物等)；抗橘皮剂(例如咖啡因、茶碱)；保湿剂；抗微生物剂；抗雄激素；和皮肤保护剂。也可以使用任何上述皮肤活性物质的混合物。这些活性物质的更详细描述可参见Blank等人的美国专利号5,605,894。(先前通过引用并入)。优选的皮肤活性物质包括羟基酸，例如水杨酸、防晒剂、抗氧化剂及其混合物。

其他常规护肤产品添加剂也可包括在本发明的组合物中。例如，可以使用尿素、胍、甘油、凡士林、矿物油、糖酯和聚酯、聚烯烃、异硬脂酸甲酯、异硬脂酸乙酯、蓖麻油酸十六烷酯、异壬酸异壬酯、异十六烷、羊毛脂、羊毛脂酯、胆固醇、吡咯烷酮羧酸/盐(PCA)、三甲基甘氨酸(甜菜碱)、氨甲环酸、氨基酸(如丝氨酸、丙氨酸、苏氨酸、组氨酸)，它们的盐，泛醇及其衍生物、胶原蛋白、透明质酸、弹性蛋白、水解产物、月见草油、霍霍巴油、表皮生长因子、大豆皂苷、粘多糖和其混合物。其它合适的添加剂或皮肤活性物质在1997年10月30日公布的Oblong等人的PCT申请WO 97/39733中进一步详细讨论，该申请通过引用整体并入本文。

III使用方法

A.降低黑色素的生物利用度

表皮中的黑色素决定了肤色的大幅变化。黑色素细胞(负责黑色素生物合成的细胞)含有黑素体(一种来源于内体小室的独特的溶酶体相关细胞器)。黑素体含有一组独特的黑色素合成酶和参与黑素生成的相关结构蛋白，包括酪氨酸酶、多巴色素(DOPAchrome)互变异构酶和Pmel17(GP100)(Murase D等，(皮肤病学研究杂志)Journal ofInvestigative Dermatology，133：2416-2424(2013))。

将有效量的式1、式2或式3化合物给予人、动物或微生物以降低黑色素的活性、转录或表达水平或分布。在一些方式中，该制剂可有效降低黑色素含量而不会对受试者造成细胞毒性。在某些形式中，该制剂通过抑制酪氨酸酶、酪氨酸酶相关蛋白1(TRP-1)、酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP-2)、小眼畸形相关转录因子(MITF)有效抑制黑色素的合成/沉积。多巴色素(DOPAchrome)互变异构酶和Pmel17(重要的黑素体结构蛋白，GP100)或参与黑色素合成的其他蛋白质或分子通过比色测定法如SRB测定，蛋白质印迹分析，ELISA，免疫组织化学或其他测定法测定。用于评估这些和其他活性和效果的一些相关测定的实例可以在实施例中找到。此类分析的结果可用于确定本文所述化合物和组合物的所有或子集的活性和/或效果。参与转化微生物中黑色素合成的分子可以参见1992年1月9日公开的生物遗传学公司(Biosource Genetics Corp)的PCT申请WO 1992000373，该文献通过引用整体并入。

在其他方式中，该制剂用于亮白受影响的体表区域、减小色素沉着过度的体表区域的大小，并降低与受试者的肤色或色素沉着过度相关紊乱或不适的严重性。

B.诱导黑素体自噬

黑色素细胞通过它们的树突将黑素体转移到角质细胞，在那里它们形成黑色素帽，其减少人表皮中UV诱导的DNA损伤(Costin GE等，实验生物学联合会会刊(FASEBJournal)，21(4)：976-994)。皮肤层由表皮，真皮和皮下组织表示，后者由将真皮连接到下面的骨骼成分上的脂肪组织组成。

可以将有效量的式1、式2或式3的化合物给予人或动物以诱导黑素体的自噬，从而减少黑色素的合成、储存、转运或其组合。

C.施用方式

该组合物可用于通过局部施用、皮肤注射、皮下植入、口服施用以及其他相关施用途径，以调节哺乳动物皮肤状态(尤其是人体皮肤，尤其是人体面部皮肤)，包括(但不限于)亮白皮肤和减少色素沉着过度和用于的。调节皮肤状态包括预防性治疗、美容改变、治疗性调节皮肤状态或其组合。如本文所用，预防性调节皮肤状况包括延迟、最小化、防止皮肤变黑，或其组合。如本文所用，美容改变皮肤状态包括提亮肤色。如本文所用，治疗性调节皮肤状态包括改善例如减少或使皮肤色素病症最小化。调节皮肤状态涉及改善皮肤外观、感觉或其组合。

调节皮肤状态涉及向皮肤局部施用安全有效量的本发明组合物。施用的组合物的量、施用频率和使用时间将根据式1化合物的水平和/或给定组合物的其他组分和所需的调节水平而大幅变化，例如，根据受试者皮肤老化程度和进一步皮肤老化的速度。

在一个优选的实施方案中，将组合物长期施用于皮肤或施用直至由使用者或医学实践者确定为获得了所需的结果。“长期施用”是指在受试者的的生命周期内持续施用组合物，优选至少约一周的时间，更优选至少约一个月的时期，甚至更优选至少约三个月的时间，甚至更优选至少约六个月，更优选至少约一年。尽管在各种最长使用期(例如、五年、十年或二十年)后可获得益处，但优选长期施用持续贯穿受试者一生。通常，在这样长的时间内，大约每天施用一次，但施用率可以是每周一次到每天三次或更多。

D.待治疗的病症或疾病

通过所公开的组合物调节的皮肤病症的实例包括减少炎症后色素沉着过度、调节皮肤褪色、日光性痣、黄褐斑和雀斑。

化妆品制剂的其他相关益处包括调节皮肤的保湿和屏障特性，调节皮肤的表皮分化，调节皮肤的脱落，增厚皮肤以减少皮肤萎缩，调节皮肤弹性，减少油性皮肤，调节皮肤中的橘皮组织，调节皮肤瘙痒，促进皮肤伤口愈合。

E.剂量和有效量

可以使用各种量的本发明组合物来提供皮肤外观有益效果。通常每次施用的本发明组合物的量为约0.1mg/cm²至约10mg/cm²(以mg组合物/cm²皮肤计)。特别有用的施用量为约2mg/cm²。或者，最终组合物中的活性剂可以为约1μM至约10mM，优选为约1μM至约1mM，最优选为约10μM至约200μM。

调节皮肤状态优选通过施用皮肤乳液、乳膏、凝胶、乳剂、喷雾剂、护发素、化妆品、唇膏、粉底，指甲油等形式的组合物来实现，它们旨在留在皮肤用于一些美学、预防、治疗或其他益处(即“免洗”组合物)。在将组合物施用于皮肤后，优选留在皮肤上至少约15分钟，更优选至少约30分钟，甚至更优选至少约1小时，最优选至少数小时，例如，长达约12小时。可以治疗面部、头发和/或指甲外部的任何部分，例如面部、嘴唇、眼下区域、眼睑、头皮、颈部、躯干、手臂、手、腿、指甲、脚趾甲、头皮头发、睫毛、眉毛等。

确保皮肤连续暴露于至少最低水平的亮白皮肤化合物的另一种方法是通过使用例如施用于面部的贴剂来施用化合物。这种方法对于需要更强化治疗的问题皮肤区域特别有用。贴片可以是封闭的，半封闭的或非封闭的。类黄酮化合物组合物可以包含在贴剂内或在贴剂施用之前施用于皮肤。贴剂还可以包括另外的活性物质，例如用于放热反应的化学引发剂，例如Burkett等人的PCT申请WO 9701313中描述的那样。贴剂优选留在皮肤上至少约15分钟，更优选至少约30分钟，甚至更优选至少约1小时，最优选为夜间，作为夜间疗法的一种形式。

在一些治疗皮肤病的方式中，术语“有效量”或“治疗有效量”是指足以治疗、抑制或缓解所治疗疾病的一种或多种症状或以其他方式提供所需药理学和/或生理学的剂量。向受试者施用的一种或多种如式1、式2或式3化合物的量通常是足以防止、降低、减少或抑制色素沉着过度有关疾病的症状。

F.控制

可以将一种或多种如式1、式2或式3化合物的效果与对照或治疗前受试者的既往病情进行比较。例如，在一些方式中，将通过如式1、式2或式3的化合物处理而受影响的一个或多个参数与未处理的对照受试者或治疗前的受试者中的相同参数进行比较。这些参数包括但不限于黑色素的活性、转录或表达水平、黑素体的活力、受影响的体表黑度的测定、色素沉着过度的体表区域的大小，以及与受试者的肤色或色素沉着过度之相关的疾病或不适的严重性。在优选的实施方案中，对照受试者患有与治疗的受试者相同的疾病、不适或病症。

或者，可以将用一种或多种式1、式2或式3化合物或其类似物或前药治疗的受试者与已知用于预防、减轻或减轻心肌梗塞或其他巨噬细胞介导的炎症性疾病的症状的药剂治疗的受试者进行比较。

所治疗的受试者可具有以下一个或多个益处：黑色素的活性、转录或表达水平或分布的减少，黑素体活力的降低或黑素体的易位，亮白体表肤色，更小的色素沉着过度体表区域大小，以及与肤色或色素沉着过度相关的疾病或不适的严重性的降低。

实施例

实施例1：没有明显的与6-CEPN相关细胞毒性和在减少黑色素合成方面的显着功效

材料和方法

细胞培养和处理

小鼠黑色素A(Melan-a)细胞(永生化，非致瘤性小鼠黑色素细胞系)来自香港中文大学。将细胞在RPMI 1640培养基中培养。培养基添加10％FBS和1％青霉素-链霉素，并将细胞在37℃、5％CO₂中孵育。将黑色素A细胞与浓度为200nM的十四烷酰佛波醇乙酸酯(TPA)一起孵育。所测试的化学试剂(例如，6-CEPN和曲酸)以100mM的浓度分别溶解在100％二甲亚砜(DMSO)中作为储备液。在使用前立即使用培养基将储备液稀释至所需的最终浓度。最终的DMSO浓度不超过0.1％。

评估细胞存活率

在使用前将黑色素A细胞(10,000个细胞/孔)接种在100μL96孔多孔板中至少24小时(hrs)。用连续浓度的测试化学物质处理细胞72小时。在指定的孵育时间后，用PBS洗涤细胞三次，然后用CCK-8溶液(0.5mg/mL)处理1.5小时。使用维克多X4多标签板阅读器(珀金埃尔默，MA，USA)(Victor X4Multilabel Plate Reader(PerkinElmer，MA，USA))在测量490nm处吸光度。数值表示为平均细胞存活率，以载体DMSO(0.1％终体积)处理的培养物的百分比表示。

细胞黑色素含量的测量

在使用前将黑色素A(Melan-a)细胞(3×10⁵细胞/孔)接种在2mL 12孔多孔板中至少24小时。用α-黑色素细胞刺激激素(α-MSH)(1μM)单独或用α-MSH(1μM)加不同浓度的化学试剂处理细胞72小时。使用磺基罗丹明B(SRB)组合测定法(sulphorhodamine B(SRB)combined assay)(Lam RY等人，民族药理学杂志(J Ethnopharmacol)，132(1)：274-9(2010)；中国专利申请公开号CN 104758191A)测定黑色素含量以确保任何黑色素含量的减少不是由于黑色素细胞的死亡。由于SRB测定(colorimetric-based SRB assay)基于比色可以准确地估计活细胞的数量，因此通过考虑SRB测定的活细胞结果，黑色素水平表示为相对于每个单细胞的黑色素含量。简而言之，在使用前将黑色素A(Melan-a)和b16细胞(3×10⁵个细胞/孔)接种在2mL 12孔多孔板中至少24小时。用α-MSH(1μM)单独或用α-MSH加连续浓度的试剂处理细胞72小时。孵育72小时后，使用SRB测定对细胞数进行计数。向每个孔中加入250μL冷(4℃)TCA以固定细胞。固定1小时后，用PBS洗涤板5次以除去TCA，培养基和死细胞。在空气中干燥板后，将细胞用500μL/孔的0.4％w/v的SRB 1％乙酸溶液中孵育以将细胞染色30分钟。随后，将板用1％乙酸洗涤十次以彻底除去未结合的SRB染料。然后向每个孔中加入300μL的10mM水性三碱，以溶解细胞结合的染料。在旋转振荡器上15分钟后，将溶解的染料转移到96孔板中。OD值读数为595nM。如先前所确定的，细胞数和吸光度读数之间存在极好的线性。因此，SRB测定染料的OD值表示每个孔中的细胞数。SRB方法的固定步骤能够在SRB测试完成后测定细胞中的黑色素量。然后通过胰蛋白酶消化收集剩余的细胞，并以13500g离心10分钟。除去主要上清液，将剩余的细胞残余物在冷冻干燥器中干燥。此后，向每个微管中加入150μl 1N的NaOH以裂解细胞以释放黑色素。将黑色素溶液转移到96孔板中，使用维克多X4多标签板阅读器(珀金埃尔默，MA，USA)(Victor X4Multilabel PlateReader(PerkinElmer，MA，USA))在测定490nm处吸光度值。

结果

如图1A所示，在用等于或小于20μM浓度的6-CEPN处理后，细胞存活率没有显着降低。这表明6CEPN至少在浓度等于或小于20μm的浓度下应用于细胞是安全的。

在黑色素A(Melan-a)细胞中，6-CEPN显示出比曲酸更强的脱色效应(图1A和1B)。6-CEPN在20μM浓度下造成近80％的脱色。在该细胞系中，抑制作用大于许多已知的黑色素生成抑制剂，例如曲酸和熊果苷。8-CEPQ与6-CEPN呈现相似的结果。基于此，认为6-CEPN和8-CEPQ不仅抑制黑素生成，还减少已经合成的黑色素。

实施例2：通过6-CEPN抑制酪氨酸酶和酪氨酸酶相关蛋白

材料和方法

酪氨酸酶活性测定

通过测定L-3,4-二羟基苯丙氨酸(L-DOPA)对细胞裂解物中多巴色素的氧化作用来测定细胞酪氨酸酶活性。在使用前将黑色素A(Melan-a)细胞(1.5×10⁵个细胞/孔)接种在24孔多孔板的1mL培养基中至少24小时。用α-MSH(1μM)单独或用α-MSH加不同浓度的测试试剂处理细胞72小时。用冷PBS洗涤细胞，并在含有1％Triton X-100的900μLPBS中裂解。在-80℃下冷冻解冻30分钟，然后在25℃下保持30分钟后，然后向每个孔中加入100μL的10mM L-DOPA。在37℃温育1小时后，使用维克多X4多标签板阅读器(珀金埃尔默，MA，USA)(Victor X4Multi label Plate Reader(PerkinElmer，MA，USA))测定490nm处试剂的吸光度。

蛋白质印迹

在使用前将黑色素A(Melan-a)细胞(3×10⁵个细胞/孔)接种在6孔板中的4mL培养基中至少24小时。单独用α-MSH(1μM)，α-MSH加上不同浓度的试剂处理细胞72小时。用冷PBS洗涤细胞，然后在含有1％诺纳德P-40(Nonidet P-40)、0.1％十二烷基硫酸钠、0.5％脱氧胆酸钠和2％蛋白酶抑制剂的100μLRIPA缓冲液中于4℃裂解。将样品在4℃以14,000rpm离心30分钟，分离上清液中的总蛋白质。每个泳道加载10μg变性蛋白质，并用10％SDS-PAGE凝胶分离。然后通过半干式输送将蛋白质转移至固定-P转移膜(密理博公司，福特，MA)(Immobilon-P Transfer Membranes(Millipore Co.，Bed-ford，MA)。将膜与酪氨酸酶、酪氨酸酶相关蛋白-1(TRP1、，酪氨酸酶相关蛋白-2(TRP2)和小眼畸形相关转录因子(MITF)特异性的第一抗体孵育。随后洗涤印迹并与合适的第二抗体一起孵育。用增强化学发光蛋白质印迹检测试剂显示免疫反应性蛋白质条带，并使用奥德赛(ODYSSEY)Fc成像***定量。负载的蛋白质的量相对于对照蛋白质β-肌动蛋白标准化。

结果

如图2所示，6-CEPN和8-CEPQ在微摩尔水平上以剂量依赖性方式显示出对酪氨酸酶活性的显著抑制。它是一种优异的酪氨酸酶抑制剂。

在20μM浓度下的蛋白质印迹分析显示酪氨酸酶、TRP-1和TRP-2的蛋白质水平被6-CEPN显著抑制。对MITF的表达没有明显的抑制作用。

实施例3：通过6-CEPN和8-CEPQ诱导黑色素体自噬

材料和方法

用于荧光显微镜的细胞处理

将黑色素A(Melan-a)细胞(1.5×10⁵个细胞/孔)接种在6孔板的盖玻片上。细胞用(1)α-MSH(1μM)单独处理24小时，(2)α-MSH(1μM)加雷帕霉素(0.5μM)处理24小时，(3)α-MSH(1μM)加6-CEPN(10μM)，或(3)α-MSH(1μM)加8-CEPQ(5μM)处理72小时。在细胞达到50％-70％的汇合水平后，小心地除去培养基。通过显微镜双检测试剂(自噬检测试剂盒，艾博抗(Abcam))在37℃下将细胞染色30分钟。通过宽视场荧光显微镜(60倍放大)分析染色的细胞。设置标准FITC滤波器和DAPI滤波器分别对自噬信号和核信号进行成像。

siRNA转染和蛋白质印迹分析

将黑色素A(Melan-a)细胞(3×10⁵个细胞/孔)接种在具有4mL RPMI 1640培养基和10％FBS的6孔板中。然后使用慧普太转染试剂(HiPerfect Transfection Reagent)，用10nM siRNA针对自噬相关蛋白7(ATG-7)(siRNA against autophagy-related protein)或用相同浓度的对照siRNA转染Melan-a细胞。孵育72小时后，更换细胞培养基。然后用(1)α-MSH(1μM)和TPA；(2)α-MSH(1μM)，TPA和6-CEPN(10μM)；或(3)α-MSH(1μM)，TPA和6-CEPN(20μM)处理细胞72小时。如实施例2蛋白质印迹中所述，收集细胞总蛋白质。通过蛋白质印迹分析自噬相关蛋白ATG-7和微管相关蛋白轻链3(LC-3)的表达。选择LC-3是因为它被广泛用于监测自噬。LC-3可以从细胞溶质形式(即LC-3I)转变为脂质化形式(即LC-3II)，后者与自噬体膜连接(Mizushima N，等人，自噬(Autophagy)，3(6)：542-545(2007))。ATG-7是其他自噬相关蛋白结合的必需成分(例如，ATG-12和ATG-15之间的结合)，最终导致自噬体的形成(“自噬信号通路”，细胞信号传导技术(“Autophagy Signaling Pathway,”Cell SignalingTechnology)，2012年10月在线修订)。

结果

使用荧光显微镜检测6-CEPN和8-CEPQ诱导的黑素体自噬。雷帕霉素是一种典型的自噬诱导剂(其可降低人体皮肤替代品中的黑色素水平)，用作阳性对照。荧光显微镜分析证实雷帕霉素、6-CEPN和8-CEPQ均诱导黑色素A(Melan-a)细胞中的黑素体自噬。这些结果表明，6-CEPN和8-CEPQ诱导自噬有助于黑素体降解的调节，导致存在的黑色素的减少。

这些结果表明6-CEPN和8-CEPQ具有双重作用模式：减少黑色素的合成并诱导黑素体的自噬。

蛋白质印迹分析显示ATG-7和LC-3II的蛋白质水平降低证实了它们的自噬作用。通过特异性siRNA抑制自噬相关蛋白7(ATG-7)的表达显着降低了LC-3II的量。此外，用6-CEPN处理增加了LC-3I向LC-3II的转化。

该数据与先前使用荧光显微镜的结果一起证实了6-CEPN的自噬效应。

实施例4：人工皮肤模型中的脱色

材料和方法

根据制造商的说明书维持含有黑色素细胞的表皮等同物(Mel-300-A)。将Mel-300-A组织在EPI-100-NMM-113培养基中培养14天。将试剂溶解在组织培养基中并每隔一天更换一次。测试试剂是(1)雷帕霉素(2.5μM)，作为去除色素中的阳性对照，(2)6-CEPN(10μM)或(3)8-CEPQ(5μM)。雷帕霉素的浓度低于6-CEPN和8-CEPQ，因为较高浓度的雷帕霉素对细胞有毒。将这些皮肤等同物的色素沉着与仅用培养基处理的细胞(表示为“载体”)进行比较。如实施例1中所述，在第14天通过CCK-8分析评估组织活力。在第14天，获得单个组织并拍照。L*参数用于评估皮肤亮白或变黑。肤色越浅，L*值越大。通过色度计CR400(柯尼卡美能达)(Chroma Meter CR400(Konica Minolta)测量ΔL*值，用于评估作为时间函数的亮白。将每种处理的三种组织冷冻用于可溶性黑色素测定(Bessou-Touya等人，嵌合人表皮重建研究黑色素细胞和角质细胞在色素沉着和光保护中的作用(“Chimeric humanepidermal reconstructs to research the melanin cell and colratinocytes incolmentation and photoprotection”).皮肤病学杂志(Journal of investigativedermatology)111(6)：1103-1108(1998))。其它的组织用10％***固定。对于石蜡包埋组织中的黑色素染色，如先前详述的丰塔纳-马松(Fontana–Masson)银染色(Barbosa等人，“用于染色黑色素颗粒和肠嗜铬细胞的丰塔纳-马松方法的简单且经济的修饰”(A simpleand economical modification of the Masson-Fontana method for staining melaningranules and enterochromaffin cells)。染色技术(Stain technology)59(4)：193-196(1984))。

结果

通过肉眼检查证实，6-CEPN，8-CEPQ和雷帕霉素都增加了组织的亮度。如图3A和3B所示，6-CEPN、8-CEPQ和雷帕霉素在第14天与阴性对照组相比均增加L*值，在整个治疗期间没有显着的细胞毒性。在第10天和第14天的结果都相似。如图3C所示，6-CEPN、8-CEPQ和雷帕霉素也显着抑制人体皮肤等效物中黑色素的量。第14天标本的丰塔纳-马松(Fontana–Masson)染色证实6-CEPN处理组中黑色素含量和分布明显显着降低，而不会导致组织基底层厚度的减少。相比之下，在雷帕霉素处理组中未观察到黑色素，但组织基底层的厚度比6-CEPN处理或未处理的对照组薄，表明雷帕霉素对细胞生长有负面影响。

应理解，所公开的方法和组合物不限于所描述的特定方法、方案和试剂，因为这些可以变化。还应理解，本文使用的术语仅用于描述特定形式和实施方案的目的，并不意图限制本发明的范围，本发明的范围仅受所附权利要求的限制。

必须注意，如本文和所附权利要求中所使用的，单数形式“一”、“一个”和“该”包括复数指代，除非上下文另有明确说明。因此，例如，提及“一种化合物”包括这种化合物的多个分子，提及“该化合物”是指一种或多种化合物及其本领域技术人员已知的等同物，等等。

在本说明书的整个说明书和权利要求书中，词语“包括”和词语的变体，例如“包括”和“包含”，意指“包括但不限于”，并且不旨在排除，例如，其他添加剂、组分、整数或步骤。

“任选的”或“任选地”是指随后描述的事件，情况或材料可能或可能不发生或不存在，并且该描述包括事件，情况或材料发生或存在的实例以及不会发生或不存在的实例。

范围在本文中可以表示为从“约”一个特定值，和/或到“约”另一个特定值。当表达这样的范围时，除非上下文另有明确说明，否则还特别考虑和考虑公开的是从一个特定值和/或到另一个特定值的范围。类似地，当通过使用先行词“约”将值表示为近似值时，应理解，除非上下文另有明确说明，否则该特定值形成应被视为公开的另一个特别考虑的实施例。将进一步理解，除非上下文另有明确指出，否则每个范围的端点相对于另一个端点都是重要的，并且独立于另一个端点。最后，应当理解，除非上下文另有明确说明，否则还明确考虑了包含在明确公开的范围内的所有单个值和子范围的值，并且应当考虑公开。无论在特定情况下是否明确公开了这些实施例中的一些或全部，前述内容都适用。

除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与所公开的方法和组合物所属领域的技术人员通常理解的含义相同的含义。尽管与本文所述的那些类似或等同的任何方法和材料可用于本发明方法和组合物的实践或测试，但特别有用的方法，装置和材料如上所述。本文此处引用的出版物及其引用的材料特此通过引用并入。本文中的任何内容均不应被解释为承认本发明无权凭借在先发明而先于此类公开内容。不承认任何参考文献构成现有技术。对参考文献的讨论陈述了作者的主张，申请人保留质疑所引用文件的准确性和相关性的权利。将清楚地理解，尽管本文提及了许多出版物，但这样的参考并不构成承认任何这些文献形成本领域公知常识的一部分。

尽管材料、组合物、组件、步骤、技术等的描述可包括许多选项和替代方案，但这不应被解释为并且不认可这些选项和替代方案彼此等同或特别是明显的替代品。因此，例如，不同化合物的列表并不表示列出的化合物彼此明显，也不表示同等或显而易见。

本领域技术人员将认识到，或者能够使用不超过常规实验来确定许多与本文描述的方法和组合物的特定实施例等效的方法。这些等效物意在包含以下权利要求。

Claims (8)

1.一种式1结构化合物、其药学上可接受的盐和/或含有式1结构化合物、其药学上可接受的盐的组合物的用途，其特征在于，用于制备药物组合物或化妆品，所述的药物组合物或化妆品(1)用于安全有效地亮白肤色、减少色素沉着过度，或两者兼而有之，(2)抑制黑素生成并加速合成黑色素的减少(3)通过抑制黑色素的合成和诱导黑素体的自噬来亮白皮肤、去除色素或两者兼有；

其中，

R₇和R₉各自独立地为羟基；

R₁、R₂、R₃、R₄、R₅和R₆选自下组：氢、羟基；

R₈和R₁₀独立地为氢、苯乙烯基；且R₈和R₁₀中的一个是苯乙烯基；

X为O；

Y是O；

“---”为双键或单键；

其中，所述的组合物还包括药学上可接受的辅料。

2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述化合物具有式2结构

3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述化合物具有式3结构

4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述组合物在施用所述组合物的受试者中降低黑色素含量、限制黑素分布、诱导黑素体自噬或其组合；或

其中所述组合物在施用所述组合物的受试者中不引起细胞毒性；或

其中所述组合物还包含番茄提取物、柑橘提取物、石斛提取物、苯丙氨酸或其混合物；或

其中所述组合物在施用所述组合物的受试者中对一种或多种选自下组的皮肤病进行有效减轻、预防、治疗或其组合：日光性痣、黄褐斑、雀斑、变色、炎症后色素沉着过度和其组合。

5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的组合物还包含选自下组的添加剂：尿素、胍、甘油、凡士林、矿物油、糖酯和聚酯、聚烯烃、异硬脂酸甲酯、异硬脂酸乙酯、蓖麻油酸十六烷酯、异壬酸异壬酯、异十六烷、羊毛脂、羊毛脂酯、胆固醇、吡咯烷酮羧酸/盐(PCA)、三甲基甘氨酸(甜菜碱)、氨甲环酸、氨基酸或其盐、泛醇及其衍生物、胶原蛋白、透明质酸、弹性蛋白、水解产物、月见草油、霍霍巴油、表皮生长因子、大豆皂苷、粘多糖，或其混合物。

6.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述的氨基酸选自下组：丝氨酸、丙氨酸、苏氨酸、组氨酸。

7.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述组合物为口服固体剂型。

8.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述组合物的施用减少受试者中黑色素的合成、减少所述受试者中的黑色素的量、限制所述受试者中黑色素的分布，或其组合；或

其中所述组合物的施用抑制或降低酪氨酸酶、酪氨酸酶相关蛋白1、酪氨酸酶相关蛋白2或其组合的活性、表达或活性和表达；或

其中所述组合物的施用诱导受试者中黑素体的自噬；或

其中所述组合物的施用不会在受试者中引起细胞毒性；或

其中所述组合物通过局部施用于体表、注射至真皮组织、植入皮下，或其组合施用；或

其中所述组合物还包含番茄提取物、柑橘提取物、石斛提取物、苯丙氨酸或其混合物；或

其中所述组合物的施用对一种或多种选自下组的皮肤病进行有效减轻、预防、治疗或其组合：日光性痣、黄褐斑、雀斑、变色、炎症后色素沉着过度和其组合。

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