CN109053771A - 一种托法替布的有关物质及其制备方法和应用 - Google Patents

一种托法替布的有关物质及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN109053771A
CN109053771A CN201810961994.1A CN201810961994A CN109053771A CN 109053771 A CN109053771 A CN 109053771A CN 201810961994 A CN201810961994 A CN 201810961994A CN 109053771 A CN109053771 A CN 109053771A
Authority
CN
China
Prior art keywords
preparation
acid
cloth
added
support method
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201810961994.1A
Other languages
English (en)
Other versions
CN109053771B (zh
Inventor
付长安
左斌海
文梦葵
柯兴斌
熊渊
黄丽萍
方佳喆
赵红升
王伟华
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhuhai Excellent Pharmaceutical Technology Co Ltd
Original Assignee
Zhuhai Excellent Pharmaceutical Technology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhuhai Excellent Pharmaceutical Technology Co Ltd filed Critical Zhuhai Excellent Pharmaceutical Technology Co Ltd
Priority to CN201810961994.1A priority Critical patent/CN109053771B/zh
Publication of CN109053771A publication Critical patent/CN109053771A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN109053771B publication Critical patent/CN109053771B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)

Abstract

本发明公开了一种托法替布的有关物质及其制备方法和应用，该物质的***命名为：N,N’‑二乙酰{(3R,4R)‑4‑甲基‑3‑[甲基(7H‑吡咯并[2,3‑d]嘧啶‑4‑基)氨基]哌啶‑1‑基}亚胺。该杂质在缩合反应过程中生成水平较低，但由于该杂质与托法替布的主要官能基团一致，在后续成盐、精制过程中的清除效果有限，对托法替布原料药及制剂成品的质量影响较大。通过检测该杂质的存在，可以有效确定托法替布原料及制剂的质量。

Description

一种托法替布的有关物质及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于药物化学技术领域，具体涉及一种托法替布(化学名称：3-{(3R,4R)-4-甲基-3-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]哌啶-1-基}-3-氧代丙腈)的有关物质及其制备方法和应用。
背景技术
托法替布(Tofacitinib，药用其枸橼酸盐，商品名：Xeljanz)是由美国辉瑞制药开发的新型口服JAK3抑制剂，于2012年11月获得FDA批准上市，该药物可用于对氨甲喋呤治疗应答不充分或不耐受的中重度活动性类风湿关节炎成人患者。
在托法替布的合成过程中，哌啶环上的N-腈乙酰化反应是必不可少的步骤。考虑到实际生产中的效率和成本控制，目前多采用先制得其中间体TF-M7(化学名称：(3R,4R)-4-甲基-3-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]哌啶)再进行哌啶环上N-腈乙酰化反应的策略。现有托法替布合成工艺的公开报道主要如下：
方法一(US6627754，CN1409712C)
该路线以苄基保护的4-甲基-哌啶-3-酮为起始原料，先经酮的还原氨化反应上甲胺基，然后经N-烷基化、氢解脱苄基、哌啶N-腈乙酰化后进行拆分得到托法替布。
方法二(WO2007012953，CN101233138A)
该路线以3-胺基-4-甲基吡啶为原料，经4步反应+1次拆分得到苄基保护的取代哌啶片段，然后经N-烷基化、氢解脱苄基、哌啶N-腈乙酰化后得到托法替布。
另有多篇公开报道(CN1195755C、CN106146517A、CN105440039A、CN101233138A、Chem Med Chem,2014:9(11),2516-2527、Tetrahedron Letters,2013:54(37),5096-5098、Journal of Medicinal Chemistry,2010:53(24),8468-8484)亦采用该合成策略以托法替布中间体TF-M7为起始原料或关键中间体与腈乙酸经过缩合反应制得托法替布。
综合上述公开报道可知，中间体TF-M7和腈乙酸或腈乙酰氯(生产上主要以腈乙酸为原料经氯化后制得)是构成托法替布生产工艺的重要原料，因此中间体TF-M7和腈乙酸的质量将极大地影响着托法替布原料及制剂的质量。
药学研究工作者对托法替布的杂质情况进行了***研究，如：
Wu X,Zeng X F,Wang L,et al.Identification of related substances intofacitinib citrate by LC-MS techniques for synthetic process optimization[J].Journal of pharmaceutical and biomedical analysis,2017,143:17-25.采用特定的LC-MS方法，对托法替布的工艺杂质及降解杂质(采用酸碱水解、氧化、强光照、高温高湿等破坏条件)进行分离、鉴别和表征，并通过TOF-MS鉴定出5种工艺杂质和6种降解杂质，其中的3种通过进一步定向合成手段进行了验证。
Iqbal J.B.Alassadi et al.Stability indicating HPLC method for thequantification of tofacitinib citrate and its related substances[J].DerPharma Chemica,2014,6(2):11-19.开发了托法替布的反相液相色谱分析方法，该分析方法被证明可在托法替布原料药的常规质量控制中用于工艺杂质及降解杂质的检测，但仅对药典中公布的部分杂质进行了验证。
上述两组研究仍有明显不足，如对工艺杂质部分的研究尚不充分，部分含量较低的杂质未能很好地进行分离鉴定，因此托法替布的现有质量研究工作仍存在一定改进空间。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种托法替布的有关物质及其制备方法和应用。
本发明所采取的技术方案是：
一种托法替布有关物质，其结构式如式I所示：
的制备方法，其合成路线如下：
式中，R为羧基保护基，PG为氨基保护基；
包括如下步骤：
1)2,2’-PG亚氨基-二乙酸酯的制备：将亚氨基二乙酸、羧基保护剂混合，催化反应对羧基进行保护，接着加入氨基保护剂，催化剂作用下得到2,2’-PG亚氨基-二乙酸酯(合成路线图中Int 01)；
2)2,2’-PG亚氨基-二乙酸的制备：脱除Int 01的羧基保护基，得到2,2’-PG亚氨基-二乙酸(合成路线图中Int 02)；
3)式I所示化合物的制备：将Int 02和TF-M7溶解，在碱催化剂和缩合剂的作用下缩合反应完全，脱去氨基保护基，后处理得到式I所示化合物。
作为上述制备方法的进一步改进，R选自C1～C3的烷基；PG选自Cbz、Boc、Fmoc、Pmb、Bzl。
作为上述制备方法的进一步改进，步骤3)中，碱催化剂选自吡啶、4-二甲氨基吡啶、4-吡咯烷基吡啶中的至少一种。
作为上述制备方法的进一步改进，步骤3)中，缩合剂选自二环己基碳二亚胺、二异丙基碳二亚胺中的至少一种。
作为上述制备方法的进一步改进，步骤3)中，缩合反应的温度为0～40℃。
作为上述制备方法的进一步改进，步骤3)中，脱去氨基保护基后，加酸中和后分液，取有机相，降温至-10±5℃后过滤，滤液滴加酸的醇溶液，至不再有固体析出；分离固体并悬浮于二氯甲烷中，加碱中和后取有机相，干燥、过滤后浓缩至干，得式I所示化合物。
作为上述制备方法的进一步改进，酸的醇溶液中，酸选自盐酸、硫酸、磷酸、甲磺酸中的一种。
作为上述制备方法的进一步改进，酸的醇溶液中，醇选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇中的一种。
在托法替布原料药及制剂检测分析中的应用。
本发明的有益效果是：
在托法替布原料药及制剂的工艺开发过程中，发明人发现中间体TF-M7与腈乙酸的缩合反应过程中可检测到一个未见报道的杂质(m/z(M+H+)＝588.6)。经进一步研究，确认该杂质具有式I所示结构。
虽然该杂质在缩合反应过程中生成水平较低，但由于该杂质与托法替布的主要官能基团一致，在后续成盐、精制过程中的清除效果有限，对托法替布原料药及制剂成品的质量影响较大。通过检测该杂质的存在，可以有效确定托法替布原料及制剂的质量，从而有利于对托法替布原料药及制剂进行更为深入的质量研究工作。
本发明提供的新杂质制备方法，具有合成工艺简单，所得产物纯度高(纯度>98.0％)、稳定性好可长期保存待用等优点，可作为托法替布原料药及制剂的杂质对照品使用。
附图说明
图1为根据本发明所得托法替布杂质I的质谱图(ESI-MS)；
图2为根据本发明所得托法替布杂质I的核磁共振氢谱图；
图3为根据本发明所得托法替布杂质I的核磁共振氢谱局部放大图
图4为根据本发明所得托法替布杂质I的核磁共振碳谱图；
图5为根据本发明所得托法替布杂质I的高效液相色谱图。
具体实施方式
发明人在托法替布原料药及制剂的工艺开发过程中，发明人发现中间体TF-M7与腈乙酸的缩合反应过程中可检测到一个未见报道的杂质(m/z(M+H+)＝588.6)。经进一步研究，确认该杂质具有式I所示结构。
发明人分析其产生原因如下：
1)腈乙酸的工业制法一般为以氯乙酸、***为原料经缩合、酸化等步骤制得；
2)***的工业制法主要有丙烯腈副产法(由丙烯氨氧化法制备丙烯腈过程中的副产物氢氰酸经碱化得到)、安氏法(以天然气为碳源、氨为氮源)和轻油裂解法(以轻油为碳源、氨为氮源)，三种生产方法均不可避免地导致在***中残留有氨(氰化氨)；
3)***中残留的氨在腈乙酸的制备过程中与氯乙酸发生N-烷基化反应生成亚氨基二乙酸并残留于腈乙酸中；
4)腈乙酸中残留的亚氨基二乙酸在TF-M7的N-腈乙酰化反应中与TF-M7经缩合反应后生成该杂质，命名为N,N’-二乙酰{(3R,4R)-4-甲基-3-[甲基(7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)氨基]哌啶-1-基}亚胺。
可能的生成路线如下：
发明人在检索了CAS(Scifinder)、Reaxy、TLC(Pharmaceutical Standards)等数据库及对托法替布进行***质量研究的文献(J.Pharm.Biomed.Anal.,143(2017):17-25；Der Pharma Chemica,2014,6(2):11-19)后均未发现对该化合物的研究报道，因此确认其为新化合物。
虽然该杂质在缩合反应过程中生成水平较低，但由于该杂质与托法替布的主要官能基团一致，在后续成盐、精制过程中的清除效果有限，对托法替布原料药及制剂成品的质量影响较大。因此，开发一种能够简单有效地合成该杂质的方法，从而提供可用作托法替布原料药及制剂质量研究的对照品，有利于对托法替布原料药及制剂进行更为深入的质量研究工作。
一种托法替布有关物质，其结构式如式I所示：
的制备方法，其合成路线如下：
式中，R为羧基保护基，PG为氨基保护基；
包括如下步骤：
1)2,2’-PG亚氨基-二乙酸酯的制备：将亚氨基二乙酸、羧基保护剂混合，催化反应对羧基进行保护，接着加入氨基保护剂，催化剂作用下得到2,2’-PG亚氨基-二乙酸酯(合成路线图中Int 01)；
2)2,2’-PG亚氨基-二乙酸的制备：脱除Int 01的羧基保护基，得到2,2’-PG亚氨基-二乙酸(合成路线图中Int 02)；
3)式I所示化合物的制备：将Int 02和TF-M7溶解，在碱催化剂和缩合剂的作用下缩合反应完全，脱去氨基保护基，后处理得到式I所示化合物。
羧基保护基和氨基保护基可以是教科书中记载的或本领域技术人员所熟知的保护基。从保护剂的来源、成本等综合考虑，作为上述制备方法的进一步改进，R选自C1～C3的烷基；PG选自Cbz、Boc、Fmoc、Pmb、Bzl。
作为上述制备方法的进一步改进，步骤3)中，碱催化剂选自吡啶、4-二甲氨基吡啶、4-吡咯烷基吡啶中的至少一种。当然，也可以使用其他的催化剂。
作为上述制备方法的进一步改进，步骤3)中，缩合剂选自二环己基碳二亚胺、二异丙基碳二亚胺中的至少一种。
作为上述制备方法的进一步改进，步骤3)中，缩合反应的温度为0～40℃。本领域技术人员可以根据实际反应的具体情况而确定最佳的反应温度。
作为上述制备方法的进一步改进，步骤3)中，脱去氨基保护基后，加酸中和后分液，取有机相，降温至-10±5℃后过滤，滤液滴加酸的醇溶液，至不再有固体析出；分离固体并悬浮于二氯甲烷中，加碱中和后取有机相，干燥、过滤后浓缩至干，得式I所示化合物。
脱去氨基保护基的方法可以按教科书中记载的方法进行。或示例性的，按如下操作：
①PG＝Boc(叔丁氧羰基)时，加入酸的水溶液至pH＝2～4搅拌反应2～3小时，加碱中和后分液，取有机相，降温至-10±5℃后快速过滤；
②PG＝Cbz/Pmb/Bzl(苄氧羰基/4-甲氧基苄基/苄基)时，加入Pd/C催化剂于0.5～2.0MPa氢压下反应8～10小时，降温至-10±5℃后快速过滤；
③PG＝Fmoc(笏甲氧羰基)时，加入哌啶或二乙胺搅拌反应6～8小时，加酸中和后分液，取有机相，降温至-10±5℃后快速过滤。
作为上述制备方法的进一步改进，酸的醇溶液中，酸选自盐酸、硫酸、磷酸、甲磺酸中的一种。
作为上述制备方法的进一步改进，酸的醇溶液中，醇选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇中的一种。
在托法替布原料药及制剂检测分析中的应用。
下面结合具体实施例，对本发明的作进一步的说明。
实施例1
(1)2,2’-叔丁氧羰亚氨基-二乙酸甲酯的制备
将亚氨基二乙酸(1.33g)、甲醇(30ml)和甲磺酸(0.3g)加入反应瓶中，加热至回流搅拌反应7～8小时，减压浓缩脱除溶剂；加入碳酸钠溶液中和至pH 6～7并以二氯甲烷(2*20ml)萃取、分液，取有机相，干燥后降温至0～5℃，加入三乙胺(0.5g)，缓慢滴加二碳酸二叔丁酯(3.3g，1.5eq)，然后于25～35℃继续搅拌反应3～5小时，减压浓缩脱除溶剂，得油状物。
(2)2,2’-叔丁氧羰亚氨基-二乙酸的制备
取步骤(1)所得油状物，加入四氢呋喃(30ml)搅拌混匀，降温至-10℃后慢慢加入氢氧化锂水溶液(14ml，5％)，搅拌反应1～2小时，加入氯化钠(2.0g)继续搅拌至溶解完全，分液，取有机相，干燥、过滤。
(3)式I所示化合物(简称:杂质I)的制备
取步骤(2)所得滤液，加入托法替布中间体TF-M7(5.4g，2.2eq)和4-二甲氨基吡啶(0.3g)，搅拌溶解后控温5～10℃分批加入二环己基碳二亚胺(5.0g)，加完升温至20～30℃继续搅拌过夜至反应不再继续，降温至-10℃后过滤。取滤液，加入稀盐酸(0.1M)至pH 3～4，搅拌反应2～3小时，加碱中和后取上层有机相，降温至-15℃后快速过滤。
取滤液，边搅拌边滴加磷酸/甲醇(10％)溶液，至不再有固体析出，降至室温后过滤、干燥，悬浮于二氯甲烷(30ml)中，加碱中和后取有机相，干燥、过滤后浓缩至干，得白色粉末(3.0g，杂质I，收率43.7％，纯度99.4％)。
实施例2
(1)2,2’-苄氧羰亚氨基-二乙酸乙酯的制备
将亚氨基二乙酸(0.66g)、乙醇(30ml)和对甲苯磺酸(0.2g)加入反应瓶中，加热至回流搅拌反应5～6小时，减压浓缩脱除溶剂；加入碳酸钠溶液中和至pH 6～7并以二氯甲烷(2*20ml)萃取、分液，取有机相，干燥后降温至0～5℃，加入N,N-二异丙基乙胺(1.0g)，缓慢滴加氯甲酸苄酯(1.1g，1.3eq)，然后于30～40℃继续搅拌反应3～4小时，减压浓缩脱除溶剂，得油状物。
(2)2,2’-苄氧羰亚氨基-二乙酸的制备
取步骤(1)所得油状物，加入1,4-二氧六环(30ml)搅拌混匀，降温至-5℃后慢慢加入氢氧化钾水溶液(20ml，5％)，搅拌反应1～2小时，加入氯化钠(3.1g)继续搅拌至溶解完全，分液，取有机相，干燥、过滤。
(3)式I所示化合物(简称:杂质I)的制备
取步骤(2)所得滤液，加入托法替布中间体TF-M7(2.2g，1.8eq)和吡啶(0.1g)，搅拌溶解后控温0～5℃分批加入二异丙基碳二亚胺(1.8g)，加完升温至25～35℃继续搅拌过夜至反应不再继续，降温至-5℃后过滤。取滤液，加入Pd/C催化剂(0.2g)，于0.5MPa氢压下反应8小时，降温至-5℃后快速过滤。
取滤液，边搅拌边滴加硫酸/正丙醇(10％)溶液，至不再有固体析出，降至室温后过滤、干燥，悬浮于二氯甲烷(20ml)中，加碱中和后取有机相，干燥、过滤后浓缩至干，得白色粉末(0.5g，杂质I，收率14.5％，纯度99.0％)。
实施例3
(1)2,2’-笏甲氧羰亚氨基-二乙酸丙酯的制备
将亚氨基二乙酸(0.66g)、正丙醇(30ml)和硫酸(0.2g)加入反应瓶中，加热至回流搅拌反应4～5小时，减压浓缩脱除溶剂；加入碳酸钠溶液中和至pH 6～7并以二氯甲烷(2*20ml)萃取、分液，取有机相，干燥后降温至0～5℃，加入三乙胺(0.8g)，缓慢滴加笏甲氧羰酰氯(1.6g，1.2eq)，然后于20～30℃继续搅拌反应3～4小时，减压浓缩脱除溶剂，得油状物。
(2)2,2’-笏甲氧羰亚氨基-二乙酸的制备
取步骤(1)所得油状物，加入甲基四氢呋喃(30ml)搅拌混匀，降温至-15℃后慢慢加入氢氧化钠水溶液(12ml，5％)，搅拌反应2～3小时，加入氯化钠(2.0g)继续搅拌至溶解完全，分液，取有机相，干燥、过滤。
(3)式I所示化合物(简称:杂质I)的制备
取步骤(2)所得滤液，加入托法替布中间体TF-M7(2.5g，2.0eq)和4-吡咯烷基吡啶(0.3g)，搅拌溶解后控温5～10℃分批加入二环己基碳二亚胺(2.1g)，加完升温至30～40℃继续搅拌过夜至反应不再继续，降温至-15℃后过滤。取滤液，加入哌啶(0.5g)搅拌反应6小时，加酸中和后分液，取有机相，降温至-15℃后快速过滤。
取滤液，边搅拌边滴加甲磺酸/异丙醇(10％)溶液，至不再有固体析出，降至室温后过滤、干燥，悬浮于二氯甲烷(20ml)中，加碱中和后取有机相，干燥、过滤后浓缩至干，得白色粉末(1.2g，托法替布杂质I，收率35.0％，纯度98.0％)。
实施例4
(1)2,2’-(4-甲氧基苄基)亚氨基-二乙酸异丙酯的制备
将亚氨基二乙酸(0.66g)、异丙醇(30ml)和甲磺酸(0.3g)加入反应瓶中，加热至回流搅拌反应5～6小时，减压浓缩脱除溶剂；加入碳酸钠溶液中和至pH 6～7并以二氯甲烷(2*20ml)萃取、分液，取有机相，干燥后降温至0～5℃，加入N,N-二异丙基乙胺(1.0g)，缓慢滴加4-甲氧基氯苄(1.2g，1.5eq)，然后于25～30℃继续搅拌反应3～4小时，减压浓缩脱除溶剂，得油状物。
(2)2,2’-(4-甲氧基苄基)亚氨基-二乙酸的制备
取步骤(1)所得油状物，加入甲基四氢呋喃(30ml)搅拌混匀，降温至-10℃后慢慢加入氢氧化锂水溶液(8ml，5％)，搅拌反应2～3小时，加入氯化钠(1.2g)继续搅拌至溶解完全，分液、取有机相，干燥、过滤。
(3)式I所示化合物(简称:杂质I)的制备
取步骤(2)所得滤液，加入托法替布中间体TF-M7(2.5g，2.0eq)和4-二甲氨基吡啶(0.2g)，搅拌溶解后控温10～20℃分批加入二环己基碳二亚胺(2.1g)，加完升温至25～35℃继续搅拌过夜至反应不再继续，降温至-10℃后过滤。取滤液，加入Pd/C催化剂(0.3g)，于1.5MPa氢压下反应10小时，降温至-10℃后快速过滤。
取滤液，边搅拌边滴加磷酸/乙醇(10％)溶液，至不再有固体析出，降至室温后过滤、干燥，悬浮于二氯甲烷(20ml)中，加碱中和后取有机相，干燥、过滤后浓缩至干，得白色粉末(1.4g，托法替布杂质I，收率40.8％，纯度98.6％)。
实施例5
(1)2,2’-苄基亚氨基-二乙酸甲酯的制备
将亚氨基二乙酸(0.66g)、甲醇(30ml)和甲磺酸(0.3g)加入反应瓶中，加热至回流搅拌反应4～5小时，减压浓缩脱除溶剂；加入碳酸钠溶液中和至pH 6～7并以二氯甲烷(2*20ml)萃取、分液，取有机相，干燥后降温至0～5℃，加入三乙胺(0.8g)，缓慢滴加氯化苄(0.9g，1.4eq)，然后于25～35℃继续搅拌反应3～4小时，减压浓缩脱除溶剂，得油状物。
(2)2,2’-苄基亚氨基-二乙酸的制备
取步骤(1)所得油状物，加入四氢呋喃(30ml)搅拌混匀，降温至-10℃后慢慢加入氢氧化锂水溶液(7ml，5％)，搅拌反应2～3小时，加入氯化钠(1.5g)继续搅拌至溶解完全，分液、取有机相，干燥、过滤。
(3)式I所示化合物(简称:杂质I)的制备
取步骤(2)所得滤液，加入托法替布中间体TF-M7(2.3g，1.9eq)和4-二甲氨基吡啶(0.2g)，搅拌溶解后控温10～20℃分批加入二环己基碳二亚胺(2.2g)，加完升温至25～35℃继续搅拌过夜至反应不再继续，降温至-10℃后过滤。取滤液，加入Pd/C催化剂(0.2g)，于2.0MPa氢压下反应10小时，降温至-15℃后快速过滤。
取滤液，边搅拌边滴加磷酸/甲醇(10％)溶液，至不再有固体析出，降至室温后过滤、干燥，悬浮于二氯甲烷(20ml)中，加碱中和后取有机相，干燥、过滤后浓缩至干，得白色粉末(1.0g，杂质I，收率29.1％，纯度98.5％)。
实施例6
(1)2,2’-苄基亚氨基-二乙酸甲酯的制备
将亚氨基二乙酸(0.66g)、甲醇(30ml)和甲磺酸(0.3g)加入反应瓶中，加热至回流搅拌反应4～5小时，减压浓缩脱除溶剂；加入碳酸钠溶液中和至pH 6～7并以二氯甲烷(2*20ml)萃取、分液，取有机相，干燥后降温至0～5℃，加入N,N-二异丙基乙胺(0.9g)，缓慢滴加溴化苄(1.2g，1.4eq)，然后于25～35℃继续搅拌反应3～4小时，减压浓缩脱除溶剂，得油状物。
(2)2,2’-苄基亚氨基-二乙酸的制备
取步骤(1)所得油状物，加入甲基四氢呋喃(30ml)搅拌混匀，降温至-10℃后慢慢加入氢氧化锂水溶液(7ml，5％)，搅拌反应2～3小时，加入氯化钠(1.5g)继续搅拌至溶解完全，分液、取有机相，干燥、过滤。
(3)式I所示化合物(简称:杂质I)的制备
取步骤(2)所得滤液，加入托法替布中间体TF-M7(2.5g，2.0eq)和4-二甲氨基吡啶(0.2g)，搅拌溶解后控温10～20℃分批加入二环己基碳二亚胺(2.4g)，加完升温至20～30℃继续搅拌过夜至反应不再继续，降温至-15℃后过滤。取滤液，加入Pd/C催化剂(0.3g)，于2.0MPa氢压下反应10小时，降温至-10℃后快速过滤。
取滤液，边搅拌边滴加磷酸/异丙醇(10％)溶液，至不再有固体析出，降至室温后过滤、干燥，悬浮于二氯甲烷(20ml)中，加碱中和后取有机相，干燥、过滤后浓缩至干，得白色粉末(1.1g，杂质I，收率32.0％，纯度98.9％)。
实施例7
(1)2,2’-叔丁氧羰亚氨基-二乙酸甲酯的制备
将亚氨基二乙酸(0.66g)、甲醇(30ml)和甲磺酸(0.1g)加入反应瓶中，加热至回流搅拌反应5～6小时，减压浓缩脱除溶剂；加入碳酸钠溶液中和至pH 6～7并以二氯甲烷(2*20ml)萃取、分液，取有机相，干燥后降温至0～5℃，加入三乙胺(0.5g)，缓慢滴加二碳酸二叔丁酯(1.1g，1.0eq)，然后于30～40℃继续搅拌反应3～4小时，减压浓缩脱除溶剂，得油状物。
(2)2,2’-叔丁氧羰亚氨基-二乙酸的制备
取步骤(1)所得油状物，加入四氢呋喃(30ml)搅拌混匀，降温至-10℃后慢慢加入氢氧化锂水溶液(14ml，5％)，搅拌反应1～2小时，加入氯化钠(2.0g)继续搅拌至溶解完全，分液，取有机相，干燥、过滤。
(3)式I所示化合物(简称:杂质I)的制备
取步骤(2)所得滤液，加入托法替布中间体TF-M7(2.7g，2.2eq)和4-二甲氨基吡啶(0.3g)，搅拌溶解后控温5～10℃分批加入二异丙基碳二亚胺(1.8g)，加完升温至20～30℃继续搅拌过夜至反应不再继续，降温至-10℃后过滤。取滤液，加入稀硫酸(0.1M)至pH 3～4，搅拌反应2～3小时，加碱中和后取上层有机相，降温至-15℃后快速过滤。
取滤液，边搅拌边滴加磷酸/乙醇(10％)溶液，至不再有固体析出，降至室温后过滤、干燥，悬浮于二氯甲烷(30ml)中，加碱中和后取有机相，干燥、过滤后浓缩至干，得白色粉末(1.0g，杂质I，收率29.1％，纯度99.0％)。
实施例8
(1)2,2’-叔丁氧羰亚氨基-二乙酸乙酯的制备
将亚氨基二乙酸(0.66g)、乙醇(30ml)和甲磺酸(0.2g)加入反应瓶中，加热至回流搅拌反应5～6小时，减压浓缩脱除溶剂；加入碳酸钠溶液中和至pH 6～7并以二氯甲烷(2*20ml)萃取、分液，取有机相，干燥后降温至0～5℃，加入三乙胺(0.5g)，缓慢滴加二碳酸二叔丁酯(1.3g，1.2eq)，然后于30～40℃继续搅拌反应3～4小时，减压浓缩脱除溶剂，得油状物。
(2)2,2’-叔丁氧羰亚氨基-二乙酸的制备
取步骤(1)所得油状物，加入甲基四氢呋喃(30ml)搅拌混匀，降温至-10℃后慢慢加入氢氧化锂水溶液(14ml，5％)，搅拌反应2～3小时，加入氯化钠(2.0g)继续搅拌至溶解完全，分液，取有机相，干燥、过滤。
(3)式I所示化合物(简称:杂质I)的制备
取步骤(2)所得滤液，加入托法替布中间体TF-M7(2.5g，2.0eq)和4-二甲氨基吡啶(0.3g)，搅拌溶解后控温10～20℃分批加入二环己基碳二亚胺(2.4g)，加完升温至25～40℃继续搅拌过夜至反应不再继续，降温至-10℃后过滤。取滤液，加入稀磷酸(0.1M)至pH 3～4，搅拌反应2～3小时，加碱中和后取上层有机相，降温至-15℃后快速过滤。
取滤液，边搅拌边滴加磷酸/乙醇(10％)溶液，至不再有固体析出，降至室温后过滤、干燥，悬浮于二氯甲烷(30ml)中，加碱中和后取有机相，干燥、过滤后浓缩至干，得白色粉末(1.2g，杂质I，收率34.9％，纯度99.2％)。
实施例9
(1)2,2’-叔丁氧羰亚氨基-二乙酸乙酯的制备
将亚氨基二乙酸(0.66g)、乙醇(30ml)和甲磺酸(0.2g)加入反应瓶中，加热至回流搅拌反应6～7小时，减压浓缩脱除溶剂；加入碳酸钠溶液中和至pH 6～7并以二氯甲烷(2*20ml)萃取、分液，取有机相，干燥后降温至0～5℃，加入N,N-二异丙基乙胺(0.9g)，缓慢滴加二碳酸二叔丁酯(1.3g，1.2eq)，然后于20～30℃继续搅拌反应3～4小时，减压浓缩脱除溶剂，得油状物。
(2)2,2’-叔丁氧羰亚氨基-二乙酸的制备
取步骤(1)所得油状物，加入甲基四氢呋喃(30ml)搅拌混匀，降温至-10℃后慢慢加入氢氧化钾水溶液(8ml，5％)，搅拌反应1～2小时，加入氯化钠(1.3g)继续搅拌至溶解完全，分液，取有机相，干燥、过滤。
(3)式I所示化合物(简称:杂质I)的制备
取步骤(2)所得滤液，加入托法替布中间体TF-M7(2.3g，1.8eq)和4-二甲氨基吡啶(0.3g)，搅拌溶解后控温10～15℃分批加入二环己基碳二亚胺(2.4g)，加完升温至25～35℃继续搅拌过夜至反应不再继续，降温至-10℃后过滤。取滤液，加入甲磺酸水溶液(0.1M)至pH 3～4，搅拌反应2～3小时，加碱中和后取上层有机相，降温至-15℃后快速过滤。
取滤液，边搅拌边滴加磷酸/乙醇(10％)溶液，至不再有固体析出，降至室温后过滤、干燥，悬浮于二氯甲烷(30ml)中，加碱中和后取有机相，干燥、过滤后浓缩至干，得白色粉末(1.1g，杂质I，收率32.0％，纯度99.1％)。
实施例10
(1)2,2’-笏甲氧羰亚氨基-二乙酸甲酯的制备
将亚氨基二乙酸(0.66g)、甲醇(30ml)和甲磺酸(0.2g)加入反应瓶中，加热至回流搅拌反应4～5小时，减压浓缩脱除溶剂；加入碳酸钠溶液中和至pH 6～7并以二氯甲烷(2*20ml)萃取、分液，取有机相，干燥后降温至0～5℃，加入三乙胺(0.8g)，缓慢滴加笏甲氧羰酰氯(1.6g，1.2eq)，然后于20～30℃继续搅拌反应3～4小时，减压浓缩脱除溶剂，得油状物。
(2)2,2’-笏甲氧羰亚氨基-二乙酸的制备
取步骤(1)所得油状物，加入甲基四氢呋喃(30ml)搅拌混匀，降温至-15℃后慢慢加入氢氧化锂水溶液(14ml，5％)，搅拌反应2～3小时，加入氯化钠(2.0g)继续搅拌至溶解完全，分液，取有机相，干燥、过滤。
(3)式I所示化合物(简称:杂质I)的制备
取步骤(2)所得滤液，加入托法替布中间体TF-M7(2.5g，2.0eq)和4-吡咯烷基吡啶(0.3g)，搅拌溶解后控温20～35℃分批加入二环己基碳二亚胺(2.1g)，加完继续搅拌过夜至反应不再继续，降温至-15℃后过滤。取滤液，加入二乙胺(0.5g)搅拌反应8小时，加酸中和后分液，取有机相，降温至-15℃后快速过滤。
取滤液，边搅拌边滴加磷酸/正丙醇(10％)溶液，至不再有固体析出，降至室温后过滤、干燥，悬浮于二氯甲烷(20ml)中，加碱中和后取有机相，干燥、过滤后浓缩至干，得白色粉末(0.8g，托法替布杂质I，收率23.3％，纯度98.3％)。
实施例1中所得杂质I的检测
(1)质谱检测
如图1所示，实施例1中所得杂质I的ESI-MS：m/z(M+H+)＝588.6。
(2)氢谱检测
如图2和图3所示，实施例1中所得杂质I的1HNMR(500MHz，DMSO-d6)，δ(ppm)：11.66(s,2H)，8.10～8.12(d,2H)，7.14(s,2H)，6.53～6.56(d,2H)，4.82～4.90(d,2H)，3.65～4.00(m,5H)，3.42～3.57(m,6H)，3.33～3.42(m,2H)，3.24～3.26(d,5H)。
(3)碳谱检测
如图4所示，实施例1中所得杂质I的13CNMR(125MHz，DMSO-d6)，δ(ppm)：168.02，156.86，151.67，150.47，120.71，102.17，101.67，54.89(残留DCM)，53.38，52.99，49.19(残留MeOH)，44.26，40.90(DMSO)，37.88，34.22，33.91，30.31，13.65。
(4)液相检测
检测方法：采用反相液相色谱柱(采用C18键合硅胶填充)，紫外检测器(λ＝210nm)，以乙腈和高氯酸水溶液(0.1％)为流动相，梯度洗脱程序进行检测，测试结果如图5所示。
测试条件：色谱柱(InertSustain,C18,5μm×4.6mm×250mm)，柱温40℃，流速1.2ml/min；流动相(A：0.1％高氯酸，B：乙腈)，梯度程序为：
测试结果如图5所示。从图中可以看出，本发明方法制备得到的杂质I纯度高达99.4％。

Claims (10)

1.一种托法替布的有关物质，其结构式如式I所示：
2.权利要求1所述托法替布有关物质的制备方法，其合成路线如下：
式中，R为羧基保护基，PG为氨基保护基；
包括如下步骤：
1)2,2’-PG亚氨基-二乙酸酯的制备：将亚氨基二乙酸、羧基保护剂混合，催化反应对羧基进行保护，接着加入氨基保护剂，催化剂作用下得到2,2’-PG亚氨基-二乙酸酯(合成路线图中Int 01)；
2)2,2’-PG亚氨基-二乙酸的制备：脱除Int 01的羧基保护基，得到2,2’-PG亚氨基-二乙酸(合成路线图中Int 02)；
3)式I所示化合物的制备：将Int 02和TF-M7溶解，在碱催化剂和缩合剂的作用下缩合反应完全，脱去氨基保护基，后处理得到式I所示化合物。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：R选自C1～C3的烷基；PG选自Cbz、Boc、Fmoc、Pmb、Bzl。
4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤3)中，碱催化剂选自吡啶、4-二甲氨基吡啶、4-吡咯烷基吡啶中的至少一种。
5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤3)中，缩合剂选自二环己基碳二亚胺、二异丙基碳二亚胺中的至少一种。
6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤3)中，缩合反应的温度为0～40℃。
7.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于：步骤3)中，脱去氨基保护基后，加酸中和后分液，取有机相，降温至-10±5℃后过滤，滤液滴加酸的醇溶液，至不再有固体析出；分离固体并悬浮于二氯甲烷中，加碱中和后取有机相，干燥、过滤后浓缩至干，得式Ⅰ所示化合物。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：酸的醇溶液中，酸选自盐酸、硫酸、磷酸、甲磺酸中的一种。
9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于：酸的醇溶液中，醇选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇中的一种。
10.权利要求1中所述托法替布有关物质在托法替布原料药及制剂检测分析中的应用。
CN201810961994.1A 2018-08-22 2018-08-22 一种托法替布的有关物质及其制备方法和应用 Active CN109053771B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810961994.1A CN109053771B (zh) 2018-08-22 2018-08-22 一种托法替布的有关物质及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810961994.1A CN109053771B (zh) 2018-08-22 2018-08-22 一种托法替布的有关物质及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN109053771A true CN109053771A (zh) 2018-12-21
CN109053771B CN109053771B (zh) 2020-02-28

Family

ID=64687919

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810961994.1A Active CN109053771B (zh) 2018-08-22 2018-08-22 一种托法替布的有关物质及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN109053771B (zh)

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101243081A (zh) * 2005-07-21 2008-08-13 霍夫曼-拉罗奇有限公司 作为PTP1B抑制剂的吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺化合物
WO2014011540A1 (en) * 2012-07-09 2014-01-16 Emory University Bone morphogenetic protein pathway activation, compositions for ossification, and methods related thereto
CN104447751A (zh) * 2013-09-16 2015-03-25 天津市汉康医药生物技术有限公司 一种托法替尼化合物
CN104788461A (zh) * 2015-04-30 2015-07-22 南京臣功制药股份有限公司 一种适合枸橼酸托法替尼工业化的生产方法
CN106008513A (zh) * 2016-05-20 2016-10-12 江苏正大清江制药有限公司 一种枸橼酸托法替布降解杂质的制备方法

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101243081A (zh) * 2005-07-21 2008-08-13 霍夫曼-拉罗奇有限公司 作为PTP1B抑制剂的吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺化合物
WO2014011540A1 (en) * 2012-07-09 2014-01-16 Emory University Bone morphogenetic protein pathway activation, compositions for ossification, and methods related thereto
CN104447751A (zh) * 2013-09-16 2015-03-25 天津市汉康医药生物技术有限公司 一种托法替尼化合物
CN104788461A (zh) * 2015-04-30 2015-07-22 南京臣功制药股份有限公司 一种适合枸橼酸托法替尼工业化的生产方法
CN106008513A (zh) * 2016-05-20 2016-10-12 江苏正大清江制药有限公司 一种枸橼酸托法替布降解杂质的制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN109053771B (zh) 2020-02-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102094928B1 (ko) 리신-글루탐산 다이펩티드 유도체
CN104761556A (zh) 托法替布中间体杂质、托法替布杂质及其合成方法,以及托法替布的质量监控方法
CN107098849A (zh) 一种盐酸左布比卡因的制备方法
CN103288758A (zh) 一种达克米替尼的制备方法
CN101622000B (zh) 合成glyt-1抑制剂的方法
CN109053771A (zh) 一种托法替布的有关物质及其制备方法和应用
CN111233866B (zh) 托法替尼或其盐的制备方法
CN110914243B (zh) 作为at2r受体拮抗剂的羧酸衍生物
CN102964307A (zh) 一种达比加群酯有关物质及其制备方法
KR20030022270A (ko) 아미노이소퀴놀린기를 함유하는 트롬빈 저해제
EP3074397B1 (en) A process for preparation of (2s, 5r)-7-oxo-n-[(2s)-pyrrolidin-2-yl-methyloxy]-6-(sulfooxy)-1,6-diazabicyclo[3.2.1]octane-2-carboxamide
WO2017136348A1 (en) Processes for synthesis of dipyrrolidine peptide compounds
CN102796106B (zh) 一种培美曲塞质量控制方法及培美曲塞杂质及其盐的制备
EP3658569B1 (en) Process and intermediates for synthesis of peptide compounds
CN107827916B (zh) 一种(r)-(1-氨基-3-甲基)丁基-1-硼酸蒎烷二醇酯的合成方法
KR100933172B1 (ko) 아토르바스타틴 칼슘염의 개선된 제조방법
CN109824546A (zh) Boc-(r)-3-氨基-4-(2,4,5-三氟苯基)丁酸缩合杂质及其制备方法
CN110078657A (zh) 一种手性3-氨基哌啶及其衍生物的合成方法
CN117843525B (zh) (2s,3r,4r)-4,5-二羟基异亮氨酸衍生物及中间体的制备方法
CN107501289B (zh) 硫酸氢氯吡格雷有关物质d的制备方法
CN110835319B (zh) 一种贝那普利中间体和贝那普利盐酸盐的合成方法
Castellucci et al. One-pot synthesis of poly-substituted tetramic acids for the preparation of putative turn mimics
CN103232429B (zh) (e)-n-[3-(甲氨基)丙基]-3-(噻吩-2-基)丙烯酰胺及其盐的制备方法
CN116987020A (zh) 蛋白酶抑制剂及其制备方法和应用
CN116606233A (zh) 一种s-三苯甲基-l-半胱氨酰胺的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant