CN109021046B - 一种从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法 - Google Patents

一种从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法 Download PDF

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Abstract

一种从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法，包括以下步骤：（1）将罗汉果新鲜茎叶晒干，破碎，加水，连续逆流闪式提取，离心过滤；（2）超滤，上大孔吸附树脂柱吸附，水洗，水洗液弃掉，有机溶剂洗脱，收集洗脱液，水洗，收集水洗液，浓缩，干燥；（3）加入醇溶液中，加热溶解，冷却，静置，过滤，浓缩，干燥；（4）用流动相溶解，过滤，进制备液相色谱柱，等度洗脱，分别收集目标段洗脱液，浓缩，干燥，分别得槲皮苷和山萘苷。按照本发明方法所得槲皮苷产品的纯度≥98.2%，收率≥90.4%，山奈苷产品的纯度≥98.8%，收率≥91.3%；本发明方法操作工艺简单、稳定，能耗、成本低，可实现连续大规模化生产。

Description

一种从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法
技术领域
本发明涉及一种提取黄酮苷类物质的方法，具体涉及一种从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法。
背景技术
罗汉果为葫芦科多年生植物，主产于广西桂林地区。罗汉果全身都是宝：罗汉果鲜果中含有丰富的甜苷、蛋白质及多糖等成分，尤其罗汉果甜苷作为天然甜味剂，具有巨大市场和经济价值；罗汉果块根中含有大量淀粉和罗汉果果酸，罗汉果淀粉具有很高的营养价值；罗汉果籽中含有丰富油脂，其主要活性成分为角鲨烯，具有抗癌、防癌及保湿养颜的作用；罗汉果茎叶中含有较多的黄酮苷类物质，主要为槲皮苷和山萘酚，黄酮苷类物质具有显著的药理、生理活性，能扩张血管增加血液循环，抑制血栓形成，同时具有抗炎、抗癌、抑菌、降血糖及降血脂等功效。
目前，开发较早较成熟的还是从罗汉果果实中提取罗汉果甜苷，而罗汉果鲜果采摘完后，其茎叶、藤条通常直接被扔掉，不仅污染环境，而且造成巨大的资源浪费。
CN106668234A公开了一种玫瑰花总黄酮的提取纯化工艺，工艺流程为：溶剂提取→大孔树脂纯化→聚酰胺树脂纯化→C18制备纯化。虽然该工艺可获得总黄酮纯度≥90%的产品，但整个工艺过程较复杂，耗费有机溶剂量较多，较难回收，黄酮的回收率低，整个工艺实现大规模工业化生产成本较高。
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CN102399252A公开了一种王不留行黄酮苷单体的制备方法，工艺流程为：原料提取→大孔树脂富集→高效制备液相分离→大孔树脂再富集→洗脱→浓缩→干燥。虽然该工艺所得王不留行黄酮苷单体≥99%，但是，该工艺步骤复杂，2次使用大孔树脂富集，不仅溶剂耗费量大，回收率也低。
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CN104592327A公开了一种啤酒花中芦丁、异槲皮苷的制备方法及对其抗过敏、抗氧化活性的检测，工艺流程为：原料提取→萃取除杂→大孔树脂富集→半制备高效液相分离。虽然该工艺可以获得芦丁和异槲皮苷单体，但是，由于需要依次使用石油醚、乙酸乙酯及正丁醇萃取除杂，工艺过程复杂，溶剂耗费量大，成本较高。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种所得产品纯度高、收率高，操作工艺简单、稳定，能耗、成本低，可实现连续大规模化生产的从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下：一种从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法，包括以下步骤：
（1）破碎、提取：将罗汉果新鲜茎叶晒干，破碎，加水，连续逆流闪式提取，离心过滤，得提取液；
（2）超滤、大孔树脂吸附：将步骤（1）所得提取液进行超滤，上大孔吸附树脂柱吸附，水洗至流出液无色、澄清、透亮，水洗液弃掉，有机溶剂洗脱，收集洗脱液，水洗至无有机溶剂为止，收集水洗液，减压浓缩，真空干燥，得黄酮苷粗品A；
（3）醇溶除杂：将步骤（2）所得黄酮苷粗品A加入醇溶液中，进行加热溶解，冷却，静置，过滤，减压浓缩，真空干燥，得黄酮苷粗品B；
（4）制备液相色谱分离：将步骤（3）所得黄酮苷粗品B用流动相溶解，过滤，进制备液相色谱柱进行分离，再用流动相进行等度洗脱，分别收集目标段洗脱液，减压浓缩，真空干燥，分别得槲皮苷和山萘苷。
优选地，步骤（1）中，所述罗汉果新鲜茎叶中，槲皮苷的质量含量为0.04～0.08%，山萘苷的质量含量为0.5～1.0%。
优选地，步骤（1）中，将罗汉果新鲜茎叶破碎至20～40目。
优选地，步骤（1）中，所述水的用量为罗汉果新鲜茎叶质量的4～20倍（更优选5～15倍）。由于罗汉果黄酮苷极易溶于水，尤其是热水，所以采用水为溶剂不仅成本低，而且环保安全。
优选地，步骤（1）中，所述连续逆流闪式提取的温度为50～90℃，提取的次数≥2次，每次提取的时间为60～200s（更优选100～180s）。由于黄酮类物质易氧化的特殊性质，如果提取温度过高或时间过长，则提取回收率会降低，因此，采用连续逆流闪式提取，既能实现连续化、规模化生产，从而缩短提取时间，同时还能提高回收率。
优选地，步骤（1）中，所述离心的转速为10000～80000r/min（更优选40000～60000r/min）。
优选地，步骤（1）中，所述离心过滤的方式为先卧式螺旋离心过滤，再蝶式离心过滤。
优选地，步骤（2）中，用于超滤的超滤膜为陶瓷膜，所述陶瓷膜的孔径为0.2～2.0μm（更优选0.3～1.0μm）。
优选地，步骤（2）中，上柱的流速为1.0～4.0BV/h。由于黄酮苷为极性较大的物质，易被大孔吸附树脂所吸附，从而达到提纯分离的目的。
优选地，步骤（2）中，所述大孔吸附树脂的型号为D-101型、AB-8型、DM-130型、X-7型或XDA-7型等中的一种或几种。
本发明方法中，大孔吸附树脂在使用前，先用1～3BV，体积分数90～99%的乙醇浸泡20～30h，再用体积分数90～99%的乙醇洗至流出液无色、无异味，水洗至无醇味，再用3～5BV质量浓度4～6%的氢氧化钠溶液碱洗，再水洗至中性，最后用3～5BV质量浓度4～6%的盐酸溶液酸洗，再水洗至中性，备用。
优选地，步骤（2）中，所述大孔吸附树脂与罗汉果新鲜茎叶的体积质量比（L/kg）为1:1～20（更优选1:5～15）。
优选地，步骤（2）中，所述大孔吸附树脂柱的径高比为1:2～8（更优选1:4～6）。
优选地，步骤（2）中，所述水洗的流速为1.0～4.0BV/h。水洗的目的主要是去除水溶性较强的杂质，如单糖、多糖及果胶等。
优选地，步骤（2）中，所述有机溶剂的用量为1～4BV。
优选地，步骤（2）中，所述有机溶剂洗脱的流速为0.25～2.00BV/h（更优选0.5～1.0BV/h）。有机溶剂洗脱的目的是将树脂吸附的黄酮苷洗脱下来。
优选地，步骤（2）中，所述有机溶剂的体积分数为50～90%。
优选地，步骤（2）中，所述有机溶剂为食品级乙醇。
优选地，步骤（2）中，所述减压浓缩的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，浓缩至固含量为30～60%。
优选地，步骤（2）中，所述真空干燥的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，时间为4～12h。
优选地，步骤（3）中，所述黄酮苷粗品A与醇溶液的质量体积比（kg/L）为1:8～20（更优选1:9～15）。醇溶除杂主要去除的是一类水溶性较好，但醇溶性较差的杂质，如蛋白质等。
优选地，步骤（3）中，所述加热的温度为50～80℃。
优选地，步骤（3）中，所述醇溶液为食品级无水甲醇或体积分数为90～99%的食品级乙醇。
优选地，步骤（3）中，所述冷却至室温。优选采用板式冷却。
优选地，步骤（3）中，所述静置的时间为2～4h。静置的目的是使得除杂充分，杂质易分层，便于后续过滤。
优选地，步骤（3）中，所述减压浓缩的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，浓缩至固含量为30～60%。
优选地，步骤（3）中，所述真空干燥的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，时间为4～12h。
优选地，步骤（4）中，所述黄酮苷粗品B与流动相质量体积比（kg/L）为0.08～0.30:1。在所述比例下分离纯化的效果更好。
优选地，步骤（4）中，所述流动相为体积比为15～40:95～60的有机溶剂-水溶液。在所述比例下分离纯化的效果更好，回收率更高。
优选地，步骤（4）中，所述有机溶剂为乙醇、甲醇或乙腈等中的一种或几种。更优选，乙醇。使用所述溶剂分离效果较好，便于回收，且成本更低。
优选地，步骤（4）中，用于过滤的滤膜为有机相滤膜，孔径为0.20～0.45μm。过滤的主要目的是去掉少量悬浮杂质，防止制备液相堵柱，影响分离效果。
优选地，步骤（4）中，进样的流速为0.25～1.00BV/h。
优选地，步骤（4）中，所述制备液相色谱柱为ODS柱，填料为C-18反相键合硅胶。本发明人研究发现，采用所述柱型及填料，分离纯化效果更明显，分离度更高，回收率也更高。
优选地，步骤（4）中，所述洗脱的流速为0.5～2.0BV/h。本发明人研究发现，在所述流速下分离效果较好，目标成分的回收率更高。
优选地，步骤（4）中，流动洗脱后，根据制备液相UV检测器信号显示屏上，出现的两个独立峰的停留时间，分别收集槲皮苷和山萘苷目标产物的洗脱液。
优选地，步骤（4）中，所述减压浓缩的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，浓缩至固含量为30～60%。
优选地，步骤（4）中，所述真空干燥的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，时间为4～12h。
步骤（3）、（4）中，所述过滤优选板框过滤或板框压滤。
本发明方法的有益效果如下：
（1）按照本发明方法所得槲皮苷产品和山萘苷产品均呈黄色，槲皮苷产品中槲皮苷的纯度≥98.2%，收率≥90.4%，山奈苷产品中山奈苷的纯度≥98.8%，收率≥91.3%；
（2）由于本发明方法提取的溶剂为水，相比传统有机溶剂提取，更加环保、安全、成本低；采用连续逆流闪式提取，相比传统回流提取，既能保证连续化、规模化生产，且提取时间短，回收率高；
（3）本发明方法的制备液相采用有机溶剂-水流动相，并等度洗脱，相比其它有机混合溶剂，成本更低，操作简便，流动相能回收再利用，适用于大规模工业化生产；
（4）本发明方法采用大孔树脂吸附纯化→醇溶除杂→制备液相色谱分离相结合的方法，不仅工艺简单、稳定，且保证了产品的高纯度。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
本发明实施例所使用的罗汉果茎叶购于广西桂林，经HPLC检测，槲皮苷的质量含量为0.06%，山萘苷的质量含量为0.73%；本发明实施例所使用的孔径0.3μm、0.5μm的陶瓷膜，均购于江苏久安源环保科技有限公司；本发明实施例所使用D-101型、AB-8型大孔吸附树脂，均购于西安蓝晓科技新材料股份有限公司；本发明实施例所使用的X-5型大孔吸附树脂，购于天津南开和成科技有限公司；本发明实施例所使用的孔径0.22μm、0.45μm的有机相滤膜均购于上海新亚净化器件厂；本发明实施例所使用的ODS柱和C-18反相键合硅胶均购于江苏汉邦科技有限公司；本发明实施例所使用的原料和化学试剂，如无特殊说明，均通过常规商业途径获得。
参考例1
本发明实施例大孔吸附树脂在使用前，先用2BV，体积分数95%的乙醇浸泡24h，再用体积分数95%的乙醇洗至流出液无色、无异味，水洗至无醇味，再用4BV质量浓度5%的氢氧化钠溶液碱洗，再水洗至中性，最后用4BV质量浓度5%的盐酸溶液酸洗，再水洗至中性，备用。
实施例1
（1）破碎、提取：将10t罗汉果新鲜茎叶晒干，破碎至20目，加100t水，在60℃下，连续逆流闪式提取2次，每次150s，再在60000r/min下，先卧式螺旋离心机离心过滤，再用蝶式离心机离心过滤，得提取液95t；
（2）超滤、大孔树脂吸附：将步骤（1）所得95t提取液用0.5μm的陶瓷膜进行超滤，超滤透过液以3BV/h的流速，上AB-8型大孔吸附树脂柱（AB-8型大孔吸附树脂的体积为1000L，径高比1:4）吸附，再以2BV/h的流速，水洗至流出液无色、澄清、透亮，水洗液弃掉，用2BV，体积分数80%的食品级乙醇，以0.5BV/h的流速洗脱，收集洗脱液，水洗至无乙醇为止，收集水洗液，在50℃，-0.1MPa下，将收集的洗脱液和水洗液减压浓缩至固含量为45%，在40℃，-0.1MPa下，真空干燥6h，得黄酮苷粗品A 131.29kg；
（3）醇溶除杂：将步骤（2）所得131.29kg黄酮苷粗品A加入1500L体积分数95%的食品级乙醇溶液中，在60℃下，进行加热溶解，板式冷却至室温，静置2h，板框过滤，滤液在40℃，-0.1MPa下，减压浓缩至固含量为50%，在40℃，-0.1MPa下，真空干燥8h，得黄酮苷粗品B93.23kg；
（4）制备液相色谱分离：将步骤（3）所得93.23kg黄酮苷粗品B用1100L流动相乙醇-水溶液（体积比为30:70）溶解，溶解液用孔径0.22μm的有机相滤膜板框压滤，然后，以0.25BV/h的流速，进制备液相色谱柱（ODS柱，填料为C-18反相键合硅胶）进行分离，再用流动相乙醇-水溶液（体积比为30:70），以1.0BV/h的流速进行等度洗脱，根据制备液相UV检测器信号显示屏上，出现的两个独立峰的停留时间，分别收集10～25BV槲皮苷目标段和30～40BV山萘苷目标段洗脱液，在40℃，-0.1MPa下，减压浓缩至固含量为55%，在40℃，-0.1MPa下，真空干燥6h，分别得槲皮苷5.58kg和山萘苷67.89kg。
本发明实施例所得槲皮苷产品和山萘苷产品均呈黄色，经HPLC检测，所得槲皮苷产品中槲皮苷的纯度为98.2%，收率为91.3%，山萘苷的纯度为99.1%，收率为92.2%。
实施例2
（1）破碎、提取：将10t罗汉果新鲜茎叶晒干，破碎至40目，加150t水，在80℃下，连续逆流闪式提取3次，每次100s，再在40000r/min下，先卧式螺旋离心机离心过滤，再用蝶式离心机离心过滤，得提取液145t；
（2）超滤、大孔树脂吸附：将步骤（1）所得145t提取液用0.3μm的陶瓷膜进行超滤，超滤透过液以4BV/h的流速，上X-5型大孔吸附树脂柱（X-5型大孔吸附树脂的体积为1500L，径高比1:6）吸附，再以4BV/h的流速，水洗至流出液无色、澄清、透亮，水洗液弃掉，用4BV，体积分数60%的食品级乙醇，以1.0BV/h的流速洗脱，收集洗脱液，水洗至无乙醇为止，收集水洗液，在70℃，-0.08MPa下，将收集的洗脱液和水洗液减压浓缩至固含量为50%，在60℃，-0.08MPa下，真空干燥8h，得黄酮苷粗品A 125.6kg；
（3）醇溶除杂：将步骤（2）所得125.6kg黄酮苷粗品A加入1200L食品级无水甲醇溶液中，在80℃下，进行加热溶解，板式冷却至室温，静置4h，板框过滤，滤液在60℃，-0.08MPa下，减压浓缩至固含量为40%，在60℃，-0.08MPa下，真空干燥6h，得黄酮苷粗品B 91.8kg；
（4）制备液相色谱分离：将步骤（3）所得91.8kg黄酮苷粗品B用800L流动相甲醇-水溶液（体积比为20:80）溶解，溶解液用孔径0.45μm的有机相滤膜板框压滤，然后，以0.75BV/h的流速，进制备液相色谱柱（ODS柱，填料为C-18反相键合硅胶）进行分离，再用流动相甲醇-水溶液（体积比为20:80），以2.0BV/h的流速进行等度洗脱，根据制备液相UV检测器信号显示屏上，出现的两个独立峰的停留时间，分别收集10～25BV槲皮苷目标段和30～40BV山萘苷目标段洗脱液，在60℃，-0.08MPa下，减压浓缩至固含量为60%，在60℃，-0.08MPa下，真空干燥10h，分别得槲皮苷5.5kg和山萘苷66.8kg。
本发明实施例所得槲皮苷产品和山萘苷产品均呈黄色，经HPLC检测，所得槲皮苷产品中槲皮苷的纯度为98.6%，收率为90.4%，山萘苷的纯度为99.8%，收率为91.3%。
实施例3
（1）破碎、提取：将10t罗汉果新鲜茎叶晒干，破碎至30目，加120t水，在70℃下，连续逆流闪式提取2次，每次120s，再在50000r/min下，先卧式螺旋离心机离心过滤，再用蝶式离心机离心过滤，得提取液95t；
（2）超滤、大孔树脂吸附：将步骤（1）所得95t提取液用0.5μm的陶瓷膜进行超滤，超滤透过液以2BV/h的流速，上D-101型大孔吸附树脂柱（D-101型大孔吸附树脂的体积为1200L，径高比1:5）吸附，再以3BV/h的流速，水洗至流出液无色、澄清、透亮，水洗液弃掉，用3BV，体积分数70%的食品级乙醇，以0.75BV/h的流速洗脱，收集洗脱液，水洗至无乙醇为止，收集水洗液，在60℃，-0.09MPa下，将收集的洗脱液和水洗液减压浓缩至固含量为48%，在50℃，-0.09MPa下，真空干燥11h，得黄酮苷粗品A 140.3kg；
（3）醇溶除杂：将步骤（2）所得140.3kg黄酮苷粗品A加入1500L体积分数92%的食品级乙醇溶液中，在70℃下，进行加热溶解，板式冷却至室温，静置3h，板框过滤，滤液在50℃，-0.09MPa下，减压浓缩至固含量为47%，在50℃，-0.09MPa下，真空干燥10h，得黄酮苷粗品B 89.5kg；
（4）制备液相色谱分离：将步骤（3）所得89.5kg黄酮苷粗品B用1000L流动相乙腈-水溶液（体积比为26:74）溶解，溶解液用孔径0.22μm的有机相滤膜板框压滤，然后，以0.5BV/h的流速进制备液相色谱柱（ODS柱，填料为C-18反相键合硅胶）进行分离，再用流动相乙腈-水溶液（体积比为26:74），以1.5BV/h的流速进行等度洗脱，根据制备液相UV检测器信号显示屏上，出现的两个独立峰的停留时间，分别收集5～15BV槲皮苷目标段和20～30BV山萘苷目标段洗脱液，在50℃，-0.09MPa下，减压浓缩至固含量为56%，在50℃，-0.09MPa下，真空干燥8h，分别得槲皮苷5.75kg和山萘苷70.5kg。
本发明实施例所得槲皮苷产品和山萘苷产品均呈黄色，经HPLC检测，所得槲皮苷产品中槲皮苷的纯度为98.4%，收率为94.3%，山萘苷的纯度为98.8%，收率为95.4%。

Claims (12)

1.一种从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）破碎、提取：将罗汉果新鲜茎叶晒干，破碎，加水，连续逆流闪式提取，离心过滤，得提取液；
（2）超滤、大孔树脂吸附：将步骤（1）所得提取液进行超滤，上大孔吸附树脂柱吸附，水洗至流出液无色、澄清、透亮，水洗液弃掉，有机溶剂洗脱，收集洗脱液，水洗至无有机溶剂为止，收集水洗液，减压浓缩，真空干燥，得黄酮苷粗品A；
（3）醇溶除杂：将步骤（2）所得黄酮苷粗品A加入醇溶液中，进行加热溶解，冷却，静置，过滤，减压浓缩，真空干燥，得黄酮苷粗品B；
（4）制备液相色谱分离：将步骤（3）所得黄酮苷粗品B用流动相溶解，过滤，进制备液相色谱柱进行分离，再用流动相进行等度洗脱，分别收集目标段洗脱液，减压浓缩，真空干燥，分别得槲皮苷和山萘苷；
步骤（1）中，将罗汉果新鲜茎叶破碎至20～40目；所述水的用量为罗汉果新鲜茎叶质量的4～20倍；所述连续逆流闪式提取的温度为50～90℃，提取的次数≥2次，每次提取的时间为60～200s；
步骤（2）中，用于超滤的超滤膜为陶瓷膜，所述陶瓷膜的孔径为0.2～2.0μm；
步骤（2）中，所述大孔吸附树脂的型号为D-101型、AB-8型、DM-130型、X-7型或XDA-7型中的一种或几种；所述大孔吸附树脂与罗汉果新鲜茎叶的体积质量比为1:1～20；
步骤（2）中，所述水洗的流速为1.0～4.0BV/h；所述有机溶剂的用量为1～4BV；所述有机溶剂洗脱的流速为0.25～2.00BV/h；所述有机溶剂的体积分数为50～90%；所述有机溶剂为食品级乙醇；
步骤（3）中，所述黄酮苷粗品A与醇溶液的质量体积比为1:8～20；所述加热的温度为50～80℃；所述醇溶液为食品级无水甲醇或体积分数为90～99%的食品级乙醇；所述静置的时间为2～4h；
步骤（4）中，所述黄酮苷粗品B与流动相质量体积比为0.08～0.30:1；所述流动相为体积比为15～40:95～60的有机溶剂-水溶液；所述有机溶剂为乙醇、甲醇或乙腈中的一种或几种；用于过滤的滤膜为有机相滤膜，孔径为0.20～0.45μm；进样的流速为0.25～1.00BV/h；所述制备液相色谱柱为ODS柱，填料为C-18反相键合硅胶。
2.根据权利要求1所述从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法，其特征在于：步骤（1）中，所述离心的转速为10000～80000r/min；所述离心过滤的方式为先卧式螺旋离心过滤，再蝶式离心过滤。
3.根据权利要求1或2所述从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法，其特征在于：步骤（2）中，上柱的流速为1.0～4.0BV/h；所述大孔吸附树脂柱的径高比为1:2～8。
4.根据权利要求1或2所述从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法，其特征在于：步骤（2）中，所述减压浓缩的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，浓缩至固含量为30～60%；所述真空干燥的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，时间为4～12h。
5.根据权利要求3所述从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法，其特征在于：步骤（2）中，所述减压浓缩的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，浓缩至固含量为30～60%；所述真空干燥的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，时间为4～12h。
6.根据权利要求1或2所述从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法，其特征在于：步骤（3）中，所述减压浓缩的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，浓缩至固含量为30～60%；所述真空干燥的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，时间为4～12h。
7.根据权利要求3所述从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法，其特征在于：步骤（3）中，所述减压浓缩的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，浓缩至固含量为30～60%；所述真空干燥的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，时间为4～12h。
8.根据权利要求4所述从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法，其特征在于：步骤（3）中，所述减压浓缩的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，浓缩至固含量为30～60%；所述真空干燥的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，时间为4～12h。
9.根据权利要求1或2所述从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法，其特征在于：步骤（4）中，所述洗脱的流速为0.5～2.0BV/h；所述减压浓缩的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，浓缩至固含量为30～60%；所述真空干燥的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，时间为4～12h。
10.根据权利要求3所述从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法，其特征在于：步骤（4）中，所述洗脱的流速为0.5～2.0BV/h；所述减压浓缩的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，浓缩至固含量为30～60%；所述真空干燥的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，时间为4～12h。
11.根据权利要求4所述从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法，其特征在于：步骤（4）中，所述洗脱的流速为0.5～2.0BV/h；所述减压浓缩的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，浓缩至固含量为30～60%；所述真空干燥的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，时间为4～12h。
12.根据权利要求6所述从罗汉果茎叶中同时提取槲皮苷和山萘苷的方法，其特征在于：步骤（4）中，所述洗脱的流速为0.5～2.0BV/h；所述减压浓缩的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，浓缩至固含量为30～60%；所述真空干燥的温度为40～70℃，压力为-0.1～-0.07MPa，时间为4～12h。
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