CN108901845B - 一种植物水角的离体繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于新植物或获得新植物的方法；通过组织培养技术的植物再生技术领域，公开了一种植物水角的离体繁殖方法，所述的植物水角的离体繁殖方法包括：种子的采集与消毒；种子萌发和芽诱导培养；芽增殖继代培养；生根壮苗培养。本发明具有极大的优点：1.需要少量的种子；2.增殖系数大，培养30天芽增殖系数达到8.00；3.生根壮苗良好，生根率100％，根数高达6.42条；4.研制的培养基配方简单、成分来源广泛、易于操作和配制；5.种苗的繁育不受时间季节的限制可周年生产。
Description
技术领域
本发明属于新植物或获得新植物的方法；通过组织培养技术的植物再生技术领域，尤其涉及一种植物水角的离体繁殖方法。
背景技术
目前，业内常用的现有技术是这样的：目前，业内常用的现有技术是这样的：水角(Hydrocera triflora(L.)Wight.et Arn.)，是凤仙花科水角属下的多年生水生草本，是单属单种植物。海南目前是水角在中国唯一分布的地方，水角被列为地区性绝灭状态(RE)级别的植物。水角具有巨大的科研价值、园艺价值和生态价值。由于水角现仅有零星分布，处于原始的自生自灭状态，前期也未见有对水角进行保护研究。关于水角的研究极少，特别是水角的离体繁殖技术未见报导。
在凤仙花科花卉资源的栽培中，种子繁殖是其主要的繁殖方式。但是对一些优良的栽培品系，由于其很少产生种子或种子活力低，因此，营养繁殖成为其主要的繁殖方式。当前，对于栽培品种，由于多年的研究和实践，通过扦插均能够获得良好的种苗，但是对于其他凤仙花种类，绝大多数的扦插繁殖尚存在一定的困难。凤仙花科的组培快繁技术目前在生产中较少应用，其中有凤仙花、几内亚凤仙等。同时，这已成为进行凤仙花转基因育种的一种关键技术手段。然而，同样对于其他更多的凤仙花科种类，其组培技术很少被研究和尝试，但是这对利用其他凤仙花资源作为育种材料尤其是作为转基因材料是必需的。本方案以水生花卉凤仙花科水角植物做为试验材料，解决了水角离体的外植体获得、芽诱导培养、芽增殖培养及生根壮苗培养，为旨在建立水角的离体繁殖技术体系，为进一步的开发利用及资源保护提供技术支持。
综上所述，现有技术存在的问题是：
(1)在凤仙花科花卉资源的栽培中，其很少产生种子或种子活力低，因此，营养繁殖成为其主要的繁殖方式；
(2)凤仙花科的组培快繁技术目前在生产中较少应用，其中有凤仙花、几内亚凤仙等。。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种植物水角的离体繁殖方法。
本发明是这样实现的，一种植物水角的离体繁殖方法，所述植物水角的离体繁殖方法包括以下步骤：
步骤一，种子的采集与消毒，采集成熟种子，置于冰箱中贮藏备用，贮藏温度3～4℃。选取健康饱满的水角种子进行消毒；
步骤二，种子萌发和芽诱导培养：培养温度24±2℃，光照时间9h/d，光照强度1500lx，种子接入培养基中5d后萌动，30d诱导率100％，污染率30％，出芽率70％，生长点分化出芽点数5.07个；
步骤三，芽增殖继代培养：培养温度24±2℃，光照时间9h/d，光照强度1500lx。萌发出的新芽用解剖刀切分成长约1.50cm的单个茎节接入培养基中培养，30d增殖系数达到8.00。以后每隔35d转入相同的培养基中继代增殖；
步骤四，生根壮苗培养：培养温度24±2℃，光照时间9h/d，光照强度1500lx，切取高2.50cm的芽苗接入生根培养基中，6d左右开始生根，30d后根系发达，生根率100％，平均每株根数6.42条，株高10.37cm，茎粗0.31cm，植株健壮。
进一步，所述种子的采集与消毒包括：
(1)种子采集：于5～6月份采集成熟种子，置于冰箱中贮藏备用，贮藏温度3～4℃。
(2)种子消毒：选取健康饱满的水角种子，清洗干净后用纱布包好，放置于稀释的洗洁精溶液中摇荡3min，再用自来水冲洗；沥干水后，在超净工作台上先用无菌水冲洗2次，再用75％酒精处理15s，无菌水冲洗1次，然后用0.10％升汞浸泡摇晃8min，无菌水冲洗5次。
进一步，所述种子萌发和芽诱导培养包括：
(1)培养基配方：MS+6BA1.00mg/L+NAA0.10mg/L+蔗糖30g/L+琼脂9g/L，pH值6。
(2)培养条件：培养温度24±2℃，光照时间9h/d，光照强度1500lx。
(3)接种：种子接入培养基中5d后萌动，30d诱导率100％，污染率30％，出芽率70％，生长点分化出芽点数5.07个。
进一步，所述芽增殖继代培养包括：
(1)培养基配方：MS+6-BA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂9g/L，pH值6。
(2)培养条件：培养温度24±2℃，光照时间9h/d，光照强度1500lx。
(3)接种：萌发出的新芽用解剖刀切分成长约1.50cm的单个茎节接入培养基中培养，30d增殖系数达到8.00。以后每隔35d转入相同的培养基中继代增殖。
进一步，所述生根壮苗培养包括：
(1)培养基配方：MS+NAA0.20mg/L+蔗糖30g/L+琼脂9g/L，pH值6。
(2)培养条件：培养温度24±2℃，光照时间9h/d，光照强度1500lx。
(3)接种：切取高2.50cm的芽苗接入生根培养基中，6d左右开始生根。
综上所述，本发明的优点及积极效果为：
本发明提供的植物水角的离体繁殖方法，仅用少量的水角种子作为繁殖材料，经消毒灭菌后接种，诱导发芽、增殖及生根，实现对水角的离体繁殖进而达到保护种质资源的目的。本发明具有极大的优点：1.需要少量的种子；2.增殖系数大，培养30天芽增殖系数达到8.00；3.生根壮苗良好，生根率100％，根数高达6.42条；4.研制的培养基配方简单、成分来源广泛、易于操作和配制；5.种苗的繁育不受时间季节的限制可周年生产。
附图说明
图1是本发明实施例提供的植物水角的离体繁殖方法流程图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
下面结合附图对本发明的应用原理作进一步的描述。
如图1所示，本发明实施例提供的植物水角的离体繁殖方法包括以下步骤：
S101，种子的采集与消毒，采集成熟种子，置于冰箱中贮藏备用，贮藏温度3～4℃。选取健康饱满的水角种子进行消毒；
S102，种子萌发和芽诱导培养：培养温度24±2℃，光照时间9h/d，光照强度1500lx，种子接入培养基中5d后萌动，30d诱导率100％，污染率30％，出芽率70％，生长点分化出芽点数5.07个；
S103，芽增殖继代培养：培养温度24±2℃，光照时间9h/d，光照强度1500lx。萌发出的新芽用解剖刀切分成长约1.50cm的单个茎节接入培养基中培养，30d增殖系数达到8.00。以后每隔35d转入相同的培养基中继代增殖；
S104，生根壮苗培养：培养温度24±2℃，光照时间9h/d，光照强度1500lx，切取高2.50cm的芽苗接入生根培养基中，6d左右开始生根，30d后根系发达，生根率100％，平均每株根数6.42条，株高10.37cm，茎粗0.31cm，植株健壮。
步骤S101中，本发明提供的种子的采集与消毒包括：
(1)种子采集：于5～6月份采集成熟种子，置于冰箱中贮藏备用，贮藏温度3～4℃。
(2)种子消毒：选取健康饱满的水角种子，清洗干净后用纱布包好，放置于稀释的洗洁精溶液中摇荡3min，再用自来水冲洗；沥干水后，在超净工作台上先用无菌水冲洗2次，再用75％酒精处理15s，无菌水冲洗1次，然后用0.10％升汞浸泡摇晃8min，无菌水冲洗5次。
步骤S102中，本发明提供的种子萌发和芽诱导培养包括：
(1)培养基配方：MS+6BA1.00mg/L+NAA0.10mg/L+蔗糖30g/L+琼脂9g/L，pH值6。
(2)培养条件：培养温度24±2℃，光照时间9h/d，光照强度1500lx。
(3)接种：种子接入培养基中5d后萌动，30d诱导率100％，污染率30％，出芽率70％，生长点分化出芽点数5.07个。
步骤S103中，本发明提供的芽增殖继代培养包括：
(1)培养基配方：MS+6-BA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂9g/L，pH值6。
(2)培养条件：培养温度24±2℃，光照时间9h/d，光照强度1500lx。
(3)接种：萌发出的新芽用解剖刀切分成长约1.50cm的单个茎节接入培养基中培养，30d增殖系数达到8.00。以后每隔35d转入相同的培养基中继代增殖。
步骤S104中，本发明提供的生根壮苗培养包括：
(1)培养基配方：MS+NAA0.20mg/L+蔗糖30g/L+琼脂9g/L，pH值6。
(2)培养条件：培养温度24±2℃，光照时间9h/d，光照强度1500lx。
(3)接种：切取高2.50cm的芽苗接入生根培养基中，6d左右开始生根。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (1)
1.一种植物水角的离体繁殖方法，其特征在于，所述植物水角的离体繁殖方法包括以下步骤：
步骤一，种子的采集与消毒，于5～6月份采集成熟种子，置于冰箱中贮藏备用，贮藏温度3～4℃，选取健康饱满的水角种子进行消毒；所述的消毒方法为：
选取健康饱满的水角种子，清洗干净后用纱布包好，放置于稀释的洗洁精溶液中摇荡3min，再用自来水冲洗；沥干水后，在超净工作台上先用无菌水冲洗2次，再用75%酒精处理15s，无菌水冲洗1次，然后用0.10%升汞浸泡摇晃8 min，无菌水冲洗5次；
步骤二，种子萌发和芽诱导培养：培养温度24±2℃，光照时间9 h/d，光照强度1500lx，种子接入培养基中5 d后萌动；培养基配方：MS+6BA1.00 mg/L+NAA0.10 mg/L+蔗糖30g/L+琼脂9 g/L，pH值6；
步骤三，芽增殖继代培养：培养温度24±2℃，光照时间9 h/d，光照强度1500 lx，萌发出的新芽用解剖刀切分成长1.50 cm的单个茎节接入培养基中培养，以后每隔35 d转入相同的培养基中继代增殖；培养基配方： MS+6-BA1.0 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂9 g/L，pH值6；
步骤四，生根壮苗培养：培养温度24±2℃，光照时间9 h/d，光照强度1500 lx，切取高2.50 cm的芽苗接入生根培养基中，6 d开始生根，植株健壮；培养基配方：MS+NAA0.20 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂9 g/L，pH值6。
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| 科学家在海口发现珍稀植物水角;单憬岗;《海南日报》;20141018;第1页 * |
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