CN108883154A

CN108883154A - 施用铁调素的方法

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Publication number: CN108883154A
Application number: CN201780015868.0A
Authority: CN
Inventors: G·蒂德玛什; L·恰娃
Original assignee: La Jolla Pharmaceutical Co
Current assignee: La Jolla Pharmaceutical Co
Priority date: 2016-01-08
Filing date: 2017-01-06
Publication date: 2018-11-23
Also published as: EP3399996A1; JP2019505517A; US20170246256A1; MX2018008299A; SG11201805755SA; WO2017120419A1; PH12018501443A1; AU2017205633A1; CA3010708A1; BR112018013833A2; KR20180109917A; EP3399996A4; US20190240292A1

Abstract

本公开涉及铁调素在用于治疗各种病况的治疗方法中的用途，其中减小血清铁浓度可以是有益的。

Description

施用铁调素的方法

相关申请

本申请要求于2016年1月8日提交的美国临时专利申请序列号62/276,727、于2016年1月10日提交的美国临时专利申请序列号62/276,922、于2016年1月26日提交的美国临时专利申请序列号62/287,285、和于2016年9月28日提交的美国临时专利申请序列号62/400,795、以及于2016年12月19日提交的美国临时专利申请序列号62/436,070的优先权的权益，其中的每个通过引用被整体并入本文。

背景

铁是几乎每个生物体生长和存活所需要的必需元素。在哺乳动物中，主要在膳食铁的十二指肠吸收的水平上调控铁平衡。在吸收后，将三价铁装载到循环中的脱铁运铁蛋白内并且转运至组织(包含红细胞前体)，在组织中，其被转铁蛋白受体介导的胞吞作用吸收。网状内皮巨噬细胞在从衰老红细胞的血红蛋白的降解中铁的再循环中发挥主要作用，而肝细胞在铁蛋白聚合物中含有生物体的大部分铁储备。

在铁缺乏的情况下，经鉴别的基因缺陷的病理生理学后果是很好理解的，因为它们通常造成直接参与铁吸收途径的蛋白质的功能的丧失。蛋白质包含铁转运体DMT1(也称为Nramp2或DCT1)、膜铁转运蛋白(也称为IREG1或MTP1)，以及与膜铁转运蛋白偶联的铜氧化酶(即血浆铜蓝蛋白和膜铁转运辅助蛋白)。此外，与遗传性铁过剩相关的若干异常已经导致其他蛋白质的鉴别，但是这些蛋白质的功能作用依然知之甚少。在人类中，遗传性血色素沉着症(HH)是常见的常染色体隐性遗传疾病，其由膳食铁的吸收过多引起，导致血浆和器官(包含胰腺、肝脏和皮肤)中的铁过剩，造成由铁沉积引起的损伤。

血色素沉着症通常由位于6p染色体上的HLA-连锁血色素沉着症基因(被命名为HFE)中的突变引起，并且大多数有症状的患者对于C282Y突变是纯合子的。此外，在遗传性血色素沉着症中，其他基因座已经被牵连：7q上转铁蛋白受体2基因(TFR2)的无义突变已经在两个HH非HLA连锁家族中被报道，并且最近已经将青少年血色素沉着症的基因座安置在染色体臂lq(HFE2)上。最后，尽管很久以前已经知道铁吸收响应于体内铁储备的水平和红细胞生成所需的铁的量而被调控，但是为肠细胞提供生物程序以调节铁吸收的信号的分子性质依然未知。

概述

本公开涉及铁调素或微型铁调素在用于治疗各种病况的治疗方法中的用途，其中减小血清铁浓度可以是有益的。在一些方面，本发明涉及用于在受试者中治疗病况的方法，所述方法包括向受试者施用包括铁调素或微型铁调素的组合物。在一些方面，本发明涉及用于在受试者中减小膳食铁的吸收的方法，所述方法包括向受试者施用包括铁调素或微型铁调素的组合物。在一些方面，本发明涉及用于降低受试者的血清铁浓度的方法，所述方法包括向受试者施用包括铁调素或微型铁调素的组合物。

附图简要说明

图1图示说明在两个患有镰状细胞病且具有高铁蛋白血清基线的患者中，在基线处和在铁调素施用后8天血清铁蛋白水平的变化。

图2示出在患有镰状细胞病或遗传性血色素沉着症且具有正常铁蛋白血清基线的患者中，在基线处和在铁调素施用后8天血清铁蛋白水平的变化。

图3示出在5个患有镰状细胞病或遗传性血色素沉着症的患者中，在基线处和铁调素后8天血清铁蛋白水平的百分比变化。

图4示出在5个患有镰状细胞病或遗传性血色素沉着症的患者中，在基线处的血清转铁蛋白饱和度(TSAT)水平的百分比和在铁调素施用后8天TSAT的百分比。

图5示出在5个患有镰状细胞病或遗传性血色素沉着症的患者中，在基线和铁调素施用后8天之间TSAT水平的百分比变化。

图6示出在铁调素施用后8天时间段内在数个时间点处在5个患有镰状细胞病或遗传性血色素沉着症的患者中的个体血清铁水平。图6还示出给予1mg的铁调素的患者的群组中与给予5mg铁调素的患者的另外的群组中的平均血清铁水平的比较。

图7示出在铁调素施用后8天时间段内在数个时间点处在5个患有镰状细胞病或遗传性血色素沉着症的患者中的个体血清铁水平的百分比变化。

详细说明

在一些方面，本发明涉及用于在受试者中治疗病况的方法，所述方法包括向受试者施用包括铁调素或微型铁调素的组合物。在一些方面，本发明涉及用于在受试者中降低血清铁浓度的方法，所述方法包括向受试者施用包括铁调素或微型铁调素的组合物。方法可以包括每周1、2或3次施用包括铁调素或微型铁调素的组合物。施用铁调素或微型铁调素的操作可以包括皮下施用，如皮下注射。可替代地，施用铁调素或微型铁调素的操作可以包括静脉内施用。受试者可以患有血色素沉着症、α-珠蛋白生成障碍性贫血、中间型珠蛋白生成障碍性贫血、β-珠蛋白生成障碍性贫血、镰状细胞病、顽固性贫血或溶血性贫血。I.剂量给药

方法可以包括向受试者施用约10μg至约1克的铁调素或微型铁调素，如约100μg至约100mg、约200μg至约50mg、或约500μg至约10mg、约500μg至约5mg、或约500μg至约2mg的铁调素或微型铁调素。方法可以包括施用约100μg、约150μg、约200μg、约250μg、约300μg、约333μg、约400μg、约500μg、约600μg、约667μg、约700μg、约750μg、约800μg、约850μg、约900μg、约950μg、约1000μg、约1200μg、约1250μg、约1300μg、约1333μg、约1350μg、约1400μg、约1500μg、约1667μg、约1750μg、约1800μg、约2000μg、约2200μg、约2250μg、约2300μg、约2333μg、约2350μg、约2400μg、约2500μg、约2667μg、约2750μg、约2800μg、约3mg、约3.3mg、约3.5mg、约3.7mg、约4mg、约4.5mg、约5mg、约6mg、约7mg、约8mg、约9mg或约10mg的铁调素或微型铁调素。

向受试者施用包括铁调素或微型铁调素的组合物的操作包括施用单次给药剂量的组合物。

方法可以包括每月至少一次(如每周至少一次)向受试者施用组合物。方法可以包括每周1、2、3、4、5、6或7次向受试者施用组合物。在优选的实施方案中，方法包括每周1、2或3次向受试者施用组合物。

方法可以包括每次施用组合物时向受试者施用约10μg至约1克的铁调素或微型铁调素，如约100μg至约100mg、约200μg至约50mg、约500μg至约10mg、约500μg至约5mg、或约500μg至约2mg的铁调素或微型铁调素。方法可以包括每次施用组合物时向受试者施用约100μg、约150μg、约200μg、约250μg、约300μg、约333μg、约400μg、约500μg、约600μg、约667μg、约700μg、约750μg、约800μg、约850μg、约900μg、约950μg、约1000μg、约1200μg、约1250μg、约1300μg、约1333μg、约1350μg、约1400μg、约1500μg、约1667μg、约1750μg、约1800μg、约2000μg、约2200μg、约2250μg、约2300μg、约2333μg、约2350μg、约2400μg、约2500μg、约2667μg、约2750μg、约2800μg、约3mg、约3.3mg、约3.5mg、约3.7mg、约4mg、约4.5mg、约5mg、约6mg、约7mg、约8mg、约9mg、或约10mg的铁调素或微型铁调素。

根据动物数据，约200mg的剂量的铁调素可以在人类中引起有害作用。因此，在优选的实施方案中，每次施用组合物时，向人受试者施用小于约200mg的铁调素或微型铁调素。在一些实施方案中，每次施用组合物时，向人受试者施用小于约150mg的铁调素或微型铁调素，如小于约100mg、小于约90mg、小于约80mg、小于约70mg、小于约60mg、或小于约50mg。

出人意外地，在1mg铁调素和5mg铁调素的剂量下，铁调素的剂量在人受试者中展现出功效。基于在小鼠、大鼠和狗中的动物研究，并未预期该剂量给药下的功效。因此，在一些实施方案中，每次施用组合物时，向人受试者施用小于10mg的铁调素或微型铁调素，如小于约9mg、小于约8mg、小于约7mg、小于约6mg、小于约5mg、小于约4mg、小于约3mg、小于约2mg、或小于约1mg。在一些实施方案中，每次施用组合物时，向人受试者施用约100μg至约10mg的铁调素或微型铁调素，如约100μg至约9mg、约100μg至约8mg、约100μg至约7mg、约100μg至约6mg、约100μg至约5mg、约100μg至约4mg、约100μg至约3mg、约100μg至约2mg、或约100μg至约1mg。

II.适应症

病况可以是α-珠蛋白生成障碍性贫血、中间型珠蛋白生成障碍性贫血、β-珠蛋白生成障碍性贫血、血色素沉着症、镰状细胞病、顽固性贫血或溶血性贫血。病况可以是血色素沉着症，并且血色素沉着症可以是遗传性血色素沉着症。病况可以是血色素沉着症，并且血色素沉着症可以与肝细胞癌、心肌病或糖尿病相关。病况可以是贫血。贫血可以是，例如，血红蛋白病、铁粒幼细胞性贫血、与骨髓增生异常综合征(MDS)相关的贫血、或先天性贫血。病况可以是骨髓增生异常综合征(MDS)。病况可以是血红蛋白病、铁粒幼细胞性贫血或先天性贫血。在一些实施方案中，病况可以是肝细胞癌、心肌病或糖尿病。

病况可以是病毒感染、细菌感染、真菌感染或原生生物感染。在一些实施方案中，病况是细菌感染，并且细菌是大肠杆菌、分枝杆菌属(如非洲分枝杆菌、鸟分枝杆菌、结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、坎纳分枝杆菌、堪萨斯分枝杆菌、麻风分枝杆菌、弥散性麻风分枝杆菌或田鼠分枝杆菌)、灰色奈瑟菌、淋病奈瑟菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌或无乳链球菌。在一些实施方案中，病况是真菌感染，并且真菌是白念珠菌。在一些实施方案中，病况是原生生物感染，并且原生生物是克氏锥虫、疟原虫属(如恶性疟原虫、间日疟原虫、卵形疟原虫或三日疟原虫)、布氏锥虫(如布氏冈比亚锥虫或布氏罗德西亚锥虫)、或利什曼原虫属。病况可以是病毒感染、细菌感染、真菌感染或原生生物感染，并且病毒感染、细菌感染、真菌感染或原生生物感染对用于治疗病毒感染、细菌感染、真菌感染或原生生物感染的一种或更多种药剂可以是耐药性的。病况可以是细菌感染，并且细菌感染可以是结核病。病况可以是恰加斯病、疟疾、非洲昏睡病或利什曼病。在一些实施方案中，病况是病毒感染，并且病毒是乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒或登革热病毒。

方法可以包括向受试者联合施用4-氨基水杨酸、阿地砜钠(aldesulfone)、阿米卡星、缩氨硫脲(amithiozone)、贝达喹啉(bedaquiline)、卷曲霉素、氯苯吩嗪、环丝氨酸、氨苯砜、迪拉马尼(delamanid)、乙胺丁醇、氟喹诺酮(fluoroquinolone)、异烟肼、卡那霉素、经修饰的安卡拉牛痘85A(modified vaccinia Ankara 85A)(MVA85A)、吗啉米特、氧氟沙星(ofloxacin)、吡嗪酰胺(pyrazinamide)、重组卡介苗30(recombinant BacillusCalmette-Guérin 30)(rBCG30)、利福平、卫非特(rifater)、链霉素、特立齐酮、和/或氨硫脲(thioacetazone)。方法可以包括向受试者联合施用巴洛沙星、西诺沙星、环丙沙星、克林沙星、达氟沙星、德拉沙星(delafloxacin)、二氟沙星(difloxacin)、依诺沙星(enoxacin)、恩诺沙星、氟罗沙星、***、加替沙星、吉米沙星(gemifloxacin)、格雷沙星(grepafloxacin)、依巴沙星(ibafloxacin)、JNJ-Q2、左氧氟沙星、洛美沙星(lomefloxacin)、马波沙星(marbofloxacin)、莫西沙星、那氟沙星(nadifloxacin)、萘啶酸、奈诺沙星(nemonoxacin)、诺氟沙星、氧氟沙星、奥比沙星(orbifloxacin)、奥索利酸、帕珠沙星(pazufloxacin)、培氟沙星、吡哌酸、吡咯米酸、普卢利沙星(prulifloxacin)、罗索沙星、芦氟沙星、沙氟沙星、西他沙星(sitafloxacin)、司氟沙星、替马沙星(temafloxacin)、托氟沙星(tosufloxacin)、和/或曲氟沙星(trovafloxacin)。在某些这样的实施方案中，病况可以是结核病和/或分枝杆菌感染。病况可以是结核病，并且结核病可以是耐药结核病。病况可以是结核病，并且结核病可以是多重耐药结核病(MDR-TB)、广泛耐药结核病(XDR-TB)、或完全耐药结核病(TDR-TB)。病况可以是结核病，并且结核病可以不是耐药的、多重耐药的、广泛耐药的、或完全耐药的。病况可以是结核病和/或分枝杆菌感染，并且病况对异烟肼、乙胺丁醇、利福平、吡嗪酰胺、氧氟沙星、一种或更多种氟喹诺酮、阿米卡星、卡那霉素、和/或卷曲霉素可以是耐药性的。

方法可以包括向受试者联合施用氟康唑、酮康唑、咪康唑、和/或伊曲康唑。在某些这样的实施方案中，病况可以是恰加斯病和/或克氏锥虫感染，并且病况对氟康唑、酮康唑、咪康唑、和/或伊曲康唑中的一种或更多种可以是耐药性的。方法可以包括向受试者联合施用氟康唑、苄硝唑、和/或两性霉素B。

病况可以是非洲昏睡病，并且方法可以包括向受试者联合施用砷剂和/或联脒。病况可以是非洲昏睡病和/或布氏锥虫感染，并且病况对砷剂和/或联脒可以是耐药性的。

病况可以是利什曼病，并且方法可以包括向受试者联合施用五价锑剂。病况可以是利什曼病，并且病况对五价锑剂可以是耐药性的。方法可以包括向受试者联合施用两性霉素、两性霉素B、五价锑剂、米替福新(miltefosine)、巴龙霉素、和/或氟康唑。

病况可以是疟疾。病况可以是疟疾，并且疟疾对用于治疗疟疾的一种或更多种药剂可以是耐药性的。病况可以是疟疾，并且方法可以包括向受试者联合施用氯喹、奎宁、磺胺多辛-乙胺嘧啶、卤泛群、阿托伐醌、和/或甲氟喹。病况可以是疟疾，并且疟疾对氯喹、奎宁、磺胺多辛-乙胺嘧啶、卤泛群、阿托伐醌、和/或甲氟喹中的一种或更多种可以是耐药性的。病况可以是多重耐药恶性疟疾感染。本文提供的的方法可以包含用包括铁调素或微型铁调素的组合物与抗疟药结合在受试者中治疗疟疾。方法可以包括向受试者联合施用一种或更多种抗疟药(例如，四环素类抗生素、鸟嘌呤样药物、以及青蒿素衍生物)。示例性的抗疟药包含四环素类抗生素(例如，四环素或四环素衍生物)、氯胍、氯丙胍、咯萘啶、本芴醇(lumefantrinel)、甲氟喹、氨苯砜、阿托伐醌、和/或青蒿琥酯(artesunate)。方法可以包括向受试者联合施用青蒿素或青蒿素衍生物。方法可以包括向受试者联合施用青蒿琥酯、青蒿素、二氢青蒿素(dihydro-artemisinin)、双氢青蒿素苯甲酸醚(artelinate)、蒿***、和/或蒿甲醚。

在一些方面，疟疾是疟疾的耐药系。在一些方面，本文提供的方法是通过向受试者联合施用在受试者中诱导铁变质的组合物(例如，包括铁调素或微型铁调素的组合物)和抗疟药(例如，本文公开的抗疟药)来在受试者中预防抗疟药耐药性的方法。方法可以包括向受试者联合施用青蒿素或青蒿素衍生物。在一些方面，本文提供的方法是通过向受试者联合施用包括铁调素或微型铁调素的组合物与青蒿素或青蒿素衍生物来在受试者中预防青蒿素或青蒿素衍生物耐药性的方法。在一些实施方案中，本文提供通过向受试者联合施用包括铁调素或微型铁调素的组合物和抗疟药来在受试者中预防或治疗抗疟药耐药性的方法。

在一些方面，本文提供通过向受试者施用包括铁调素或微型铁调素的组合物来在受试者中治疗疟疾的方法。在一些实施方案中，在施用包括铁调素或微型铁调素的组合物之前，已经用抗疟药(例如，本文公开的抗疟药)治疗受试者的疟疾。在一些实施方案中，受试者具有响应于抗疟药治疗不利副作用。在一些方面，受试者对抗疟药是难治愈的。在一些实施方案中，受试者对抗疟药是禁忌的。受试者可以患有葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)缺乏症。G6PD缺乏症是X染色体传播疾病，其影响红细胞，所述红细胞将氧气从肺输送到遍及身体的组织。在受影响的个体中，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的缺陷引起红细胞过早分解。该红细胞的破坏被称为溶血。与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症相关的最常见的医学问题是溶血性贫血，当红细胞被破坏比身体可以替换它们更快时，溶血性贫血发生。在患有葡萄糖-6-脱氢酶缺乏症的人中，溶血性贫血最常由细菌感染或病毒感染或由某些药物(如用于治疗疟疾的药品)触发。在一些方面，本文提供通过确定受试者是否患有G6PD缺乏症，以及如果受试者患有G6PD缺乏症，则向受试者施用本文公开的包括铁调素或微型铁调素的组合物，来在受试者中治疗疟疾的方法。组合物可以与抗疟药联合施用。可以通过半定量分析或定量分析针对G6PD缺乏症筛选受试者。半定量分析包含检测由于G6PD活性产生的辅酶产物的生成(如从烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADP)生成烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH))的测试。该测试的一个实例是荧光斑点测试。该测试测量从NADP生成NADPH。如果血斑点在紫外光下不能显示荧光，则测试是阳性的。斑点测试的变体包含可以通过用肉眼检查的简单的颜色变化解释的测试。可以采用其他半定量方法，包含通过例如高铁血红蛋白还原测试(MRT)间接地确定NADPH浓度。该测试测量在NADPH氧化之后产生的高铁血红蛋白水平。可以采用的另一测试是细胞化学分型测定，其提供在个体红细胞水平上的典型高铁血红蛋白还原测试的荧光示值读数。定量测试包含分光光度测定，其中在特定波长下采用分光光度法测量NADPH生成的速率。用于G6PD缺乏症的其他测试包含基于DNA的基因分型和测序。病况可以是镰状细胞病。在一些实施方案中，受试者被诊断患有镰状细胞病或镰状细胞贫血。可以以在受试者中不诱导全身性铁缺乏或使存在的铁缺乏恶化的剂量向受试者施用铁调素或微型铁调素。铁缺乏可以是无效的红细胞生成、血清铁的低水平、或铁结合能力下降的结果。具有本领域普通技术的医师或兽医可以容易地确定和开出所需的组合物(例如，包括铁调素或微型铁调素的组合物)的有效量。例如，医生或兽医可以以比为了实现期望的治疗效果所需的水平更低的水平开出和/或施用组合物中所采用的化合物的剂量，并且逐渐增加剂量直至实现期望的效果。

III.受试者

受试者可以是哺乳动物。受试者可以是啮齿动物、兔形目动物、猫科动物、犬科动物、猪、羊、牛科动物、马科动物或灵长类动物。在优选的实施方案中，受试者是人。受试者可以是雌性或雄性。受试者可以是婴儿、儿童或成人。

在一些实施方案中，在施用组合物之前，受试者的血清铁浓度为至少约50μg/dL，如至少约55μg/dL、至少约60μg/dL、至少约65μg/dL、至少约70μg/dL、至少约75μg/dL、至少约80μg/dL、至少约85μg/dL、至少约90μg/dL、至少约95μg/dL、至少约100μg/dL、至少约110μg/dL、至少约120μg/dL、至少约130μg/dL、至少约140μg/dL、至少约150μg/dL、至少约160μg/dL、至少约170μg/dL、至少约175μg/dL、至少约176μg/dL、至少约177μg/dL、至少约180μg/dL、至少约190μg/dL、至少约200μg/dL、至少约210μg/dL、至少约220μg/dL、至少约230μg/dL、至少约240μg/dL、至少约250μg/dL、至少约260μg/dL、至少约270μg/dL、至少约280μg/dL、至少约290μg/dL、或至少约300μg/dL。在施用组合物之前，受试者的血清铁浓度可以为约50μg/dL至约500μg/dL，如约55μg/dL至约500μg/dL、约60μg/dL至约500μg/dL、约65μg/dL至约500μg/dL、约70μg/dL至约500μg/dL、约75μg/dL至约500μg/dL、约80μg/dL至约500μg/dL、约85μg/dL至约500μg/dL、约90μg/dL至约500μg/dL、约95μg/dL至约500μg/dL、约100μg/dL至约500μg/dL、约110μg/dL至约500μg/dL、约120μg/dL至约500μg/dL、约130μg/dL至约500μg/dL、约140μg/dL至约500μg/dL、约150μg/dL至约500μg/dL、约160μg/dL至约500μg/dL、约170μg/dL至约500μg/dL、约175μg/dL至约500μg/dL、约176μg/dL至约500μg/dL、约177μg/dL至约500μg/dL、约180μg/dL至约500μg/dL、约190μg/dL至约500μg/dL、约200μg/dL至约500μg/dL、约210μg/dL至约500μg/dL、约220μg/dL至约500μg/dL、约230μg/dL至约500μg/dL、约240μg/dL至约500μg/dL、约250μg/dL至约500μg/dL、约260μg/dL至约500μg/dL、约270μg/dL至约500μg/dL、约280μg/dL至约500μg/dL、约290μg/dL至约500μg/dL、或约300μg/dL至约500μg/dL.

在优选的实施方案中，向受试者施用组合物的操作减小受试者的血清铁浓度。例如，施用组合物的操作可以使受试者的血清铁浓度减小至少约5μg/dL、至少约10μg/dL、至少约5μg/dL、至少约20μg/dL、至少约30μg/dL、至少约40μg/dL、至少约50μg/dL、至少约60μg/dL、至少约70μg/dL、至少约80μg/dL、至少约90μg/dL、或至少约100μg/dL。施用组合物的操作可以使受试者的血清铁浓度减小至少24小时。例如，施用组合物的操作可以使受试者的血清铁浓度减小至少约5μg/dL至少24小时的时间段。施用组合物的操作可以使受试者的血清铁浓度减小至少约5μg/dL至少4小时、至少6小时、或至少12小时。施用组合物的操作可以使受试者的血清铁浓度减小至少约5μg/dL至少1天、至少2天、至少3天、至少4天、至少5天、至少6天、至少7天、或至少8天。施用组合物的操作可以使受试者的血清铁浓度减小至少约5％，如至少约10％、至少约15％、至少约20％、至少约25％、或甚至至少约30％。施用组合物的操作可以使受试者的血清铁浓度减小至少约5％至少4小时、至少6小时、或至少12小时内。施用组合物的操作可以使受试者的血清铁浓度减小至少约5％至少1天、至少2天、至少3天、至少4天、至少5天、至少6天、至少7天、或至少8天。

在一些实施方案中，在施用组合物之前，受试者具有小于约1000ng/mL的血清铁调素浓度，如小于约900ng/mL、小于约800ng/mL、小于约700ng/mL、小于约600ng/mL、小于约500ng/mL、小于约400ng/mL、小于约300ng/mL、小于约200ng/mL、小于约100ng/mL、小于约90ng/mL、小于约80ng/mL、小于约70ng/mL、小于约60ng/mL、小于约50ng/mL、小于约40ng/mL、小于约30ng/mL、小于约20ng/mL、或小于约10ng/mL。在施用组合物之前，受试者可以具有约1ng/mL至约1000ng/mL的血清铁调素浓度，如约1ng/mL至约900ng/mL、约1ng/mL至约800ng/mL、约1ng/mL至约700ng/mL、约1ng/mL至约600ng/mL、约1ng/mL至约500ng/mL、约1ng/mL至约400ng/mL、约1ng/mL至约300ng/mL、约1ng/mL至约200ng/mL、约1ng/mL至约100ng/mL、约1ng/mL至约90ng/mL、约1ng/mL至约80ng/mL、约1ng/mL至约70ng/mL、约1ng/mL至约60ng/mL、约1ng/mL至约50ng/mL、约1ng/mL至约40ng/mL、约1ng/mL至约30ng/mL、约1ng/mL至约20ng/mL、或约1ng/mL至约10ng/mL。

在一些实施方案中，在施用组合物之前，受试者具有大于约10ng/mL的血清铁蛋白浓度，如大于约20ng/mL、大于约30ng/mL、大于约40ng/mL、大于约50ng/mL、大于约60ng/mL、大于约70ng/mL、大于约80ng/mL、大于约90ng/mL、大于约100ng/mL、大于约200ng/mL、大于约300ng/mL、大于约400ng/mL、大于约500ng/mL、大于约600ng/mL、大于约700ng/mL、大于约800ng/mL、大于约900ng/mL、大于约1000ng/mL、大于约2000ng/mL、大于约3000ng/mL、大于约4000ng/mL、大于约5000ng/mL、大于约6000ng/mL、大于约7000ng/mL、大于约8000ng/mL、大于约9000ng/mL、或甚至大于约10μg/mL。在施用组合物之前，受试者可以具有约10ng/mL至约100μg/mL的血清铁蛋白浓度，如约20ng/mL至约100μg/mL、约30ng/mL至约100μg/mL、约40ng/mL至约100μg/mL、约50ng/mL至约100μg/mL、约60ng/mL至约100μg/mL、约70ng/mL至约100μg/mL、约80ng/mL至约100μg/mL、约90ng/mL至约100μg/mL、约100ng/mL至约100μg/mL、约200ng/mL至约100μg/mL、约300ng/mL至约100μg/mL、约400ng/mL至约100μg/mL、约500ng/mL至约100μg/mL、约600ng/mL至约100μg/mL、约700ng/mL至约100μg/mL、约800ng/mL至约100μg/mL、约900ng/mL至约100μg/mL、或约1000ng/mL至约100μg/mL。在施用组合物之前，受试者可以具有约10ng/mL至约20μg/mL的血清铁蛋白浓度，如约20ng/mL至约20μg/mL、约30ng/mL至约20μg/mL、约40ng/mL至约20μg/mL、约50ng/mL至约20μg/mL、约60ng/mL至约20μg/mL、约70ng/mL至约20μg/mL、约80ng/mL至约20μg/mL、约90ng/mL至约20μg/mL、约100ng/mL至约20μg/mL、约200ng/mL至约20μg/mL、约300ng/mL至约20μg/mL、约400ng/mL至约20μg/mL、约500ng/mL至约20μg/mL、约600ng/mL至约20μg/mL、约700ng/mL至约20μg/mL、约800ng/mL至约20μg/mL、约900ng/mL至约20μg/mL、或约1000ng/mL至约20μg/mL。

在一些实施方案中，在施用组合物之前，受试者具有小于约10μg/mL的血清铁蛋白浓度，如小于约1000ng/mL、小于约900ng/mL、小于约800ng/mL、小于约700ng/mL、小于约600ng/mL、小于约500ng/mL、小于约400ng/mL、小于约300ng/mL、小于约200ng/mL、小于约100ng/mL、小于约90ng/mL、小于约80ng/mL、小于约70ng/mL、小于约60ng/mL、小于约50ng/mL、小于约40ng/mL、小于约30ng/mL、小于约20ng/mL、或小于约10ng/mL。在施用组合物之前，受试者可以具有约1ng/mL至约1000ng/mL的血清铁蛋白浓度，如约1ng/mL至约900ng/mL、约1ng/mL至约800ng/mL、约1ng/mL至约700ng/mL、约1ng/mL至约600ng/mL、约1ng/mL至约500ng/mL、约1ng/mL至约400ng/mL、约1ng/mL至约300ng/mL、约1ng/mL至约200ng/mL、约1ng/mL至约100ng/mL、约1ng/mL至约90ng/mL、约1ng/mL至约80ng/mL、约1ng/mL至约70ng/mL、约1ng/mL至约60ng/mL、约1ng/mL至约50ng/mL、约1ng/mL至约40ng/mL、约1ng/mL至约30ng/mL、约1ng/mL至约20ng/mL、或约1ng/mL至约10ng/mL。

在一些实施方案中，施用组合物的操作减小受试者的血清铁蛋白浓度。例如，施用组合物的操作可以使受试者的血清铁蛋白浓度减小至少约10ng/mL、至少约20ng/mL、至少约30ng/mL、至少约40ng/mL、至少约50ng/mL、至少约60ng/mL、至少约70ng/mL、至少约80ng/mL、至少约90ng/mL、或至少约100ng/mL。

在一些实施方案中，在施用组合物之前，受试者具有约40至约50mg/kg的总体内铁含量。在施用组合物之前，受试者可以具有大于约50mg/kg的总体内铁含量，如大于约55mg/kg、大于约60mg/kg、大于约65mg/kg、或大于约70mg/kg。

在一些实施方案中，在施用组合物之前，受试者具有大于约10％的转铁蛋白饱和度百分率，如大于约15％、大于约20％、大于约25％、大于约30％、大于约35％、大于约40％、大于约45％、大于约50％、大于约55％、大于约60％、大于约65％、大于约70％、大于约75％、大于约80％、大于约85％、或甚至大于约90％。在施用组合物之前，受试者可以具有约10％至约99％的转铁蛋白饱和度百分率，如约15％至约99％、约20％至约99％、约25％至约99％、约30％至约99％、约35％至约99％、约40％至约99％、约45％至约99％、约50％至约99％、约55％至约99％、约60％至约99％、约65％至约99％、约70％至约99％、约75％至约99％、约80％至约99％、或约85％至约99％。在施用组合物之前，受试者可以具有约10％至约95％的转铁蛋白饱和度百分率，如约15％至约95％、约20％至约95％、约25％至约95％、约30％至约95％、约35％至约95％、约40％至约95％、约45％至约95％、约50％至约95％、约55％至约95％、约60％至约95％、约65％至约95％、约70％至约95％、约75％至约95％、约80％至约95％、或约85％至约95％。

在一些实施方案中，施用组合物的操作减小受试者的转铁蛋白饱和度百分率。例如，向受试者施用组合物的操作可以使受试者的转铁蛋白饱和度百分率减小至少约1％的转铁蛋白饱和度，如至少约2％的转铁蛋白饱和度、至少约3％的转铁蛋白饱和度、至少约4％的转铁蛋白饱和度、至少约5％的转铁蛋白饱和度、至少约6％的转铁蛋白饱和度、至少约7％的转铁蛋白饱和度、至少约8％的转铁蛋白饱和度、至少约9％的转铁蛋白饱和度、至少约10％的转铁蛋白饱和度、至少约11％的转铁蛋白饱和度、至少约12％的转铁蛋白饱和度、至少约13％的转铁蛋白饱和度、至少约14％的转铁蛋白饱和度、至少约15％的转铁蛋白饱和度、至少约16％的转铁蛋白饱和度、至少约17％的转铁蛋白饱和度、至少约18％的转铁蛋白饱和度、至少约19％的转铁蛋白饱和度、至少约20％的转铁蛋白饱和度、至少约25％的转铁蛋白饱和度、至少约30％的转铁蛋白饱和度、至少约35％的转铁蛋白饱和度、至少约40％的转铁蛋白饱和度、至少约45％的转铁蛋白饱和度、或至少约50％的转铁蛋白饱和度。

IV.活性剂

铁调素肽是具有SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的25-氨基酸的肽。铁调素肽是较大蛋白质的裂解产物，并且细胞膜蛋白弗林蛋白酶可以将细胞外铁调素前体蛋白质转化成铁调素肽。因此，如本文所使用的，术语“铁调素”可以指包括SEQ ID NO:1中所示的序列的肽，其包含长于25个氨基酸的肽，如由26至100个氨基酸组成的肽。可以对SEQ ID NO:1进行保守氨基酸置换、添加和缺失，而不显著地影响铁调素的功能。因此，术语“铁调素”可以指包括与SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％或96％的序列同源性的氨基酸序列的肽。序列同源性可以使用任何适合的序列比对程序(如蛋白质Blast(blastp)或Clustal(例如，ClustalV、ClustalW、ClustalX或Clustal Omega))被确定，例如，使用默认参数(如空位开放和空位延伸的默认权重)。序列同源性可以指序列一致性。术语“铁调素”可以指包括除了用不同的氨基酸置换SEQ ID NO:1的1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸外，与SEQ ID NO:1中所示的序列一致的氨基酸序列的肽。在优选的实施方案中，铁调素在SEQ ID NO:1中存在半胱氨酸的位置中的每个处包括半胱氨酸。

SEQ ID NO:1

DTHFPICIFCCGCCHRSKCGMCCKT

可以从铁调素肽中缺失N末端残基和C末端残基，而不显著地影响其功能。因此，在一些实施方案中，铁调素指包括SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3或SEQ ID NO:4中所示的序列的肽，或包括与SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5中所示的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％或96％的序列同源性氨基酸序列的肽。术语铁调素可以指包括除了用不同的氨基酸置换SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4或SEQID NO:5的1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个氨基酸外，与SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5中所示的序列一致的氨基酸序列的肽。在优选的实施方案中，铁调素在SEQID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5中存在半胱氨酸的位置中的每个处包括半胱氨酸。

SEQ ID NO:2

PICIFCCGCCHRSKCGMCCKT

SEQ ID NO:3

PICIFCCGCCHRSKCGMCC

SEQ ID NO:4

ICIFCCGCCHRSKCGMCCKT

SEQ ID NO:5

CIFCCGCCHRSKCGMCC

在一些实施方案中，术语“铁调素”指包括与SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ IDNO:8、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:10中所示的序列一致的氨基酸序列的肽。在SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:10中，标记为“X”的氨基酸可以是任何氨基酸，包含天然存在的氨基酸和非天然存在的氨基酸。在一些实施方案中，标记为“X”的氨基酸中的每个是天然存在的氨基酸。

SEQ ID NO:6

XXHXPXCXXCCGCCHRSKCGMCCXX

SEQ ID NO:7

PXCXXCCGCCHRSKCGMCCKX

SEQ ID NO:8

PXCXXCCGCCHRSKCGMCC

SEQ ID NO:9

XCXXCCGCCHRXXCGXCCKX

SEQ ID NO:10

CXXCCGCCHRXXCGXCC

在优选的实施方案中，铁调素是与膜铁转运蛋白和/或铁(例如，铁阳离子)特异性结合的分子。铁调素可以包括1、2、3或4个二硫键。在优选的实施方案中，铁调素包括四个二硫键。在优选的实施方案中，四个二硫键中的每个是分子内的二硫键。在优选的实施方案中，SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:10的八个半胱氨酸中的每个与八个半胱氨酸中的另一个参与四个分子内的二硫键中的一个。

在优选的实施方案中，铁调素具有包括SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的25个氨基酸长肽的活性的约10％至1000％，即其中25个氨基酸长肽包括在天然人铁调素中发现的四个分子内的二硫键。例如，铁调素可以具有包括SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的25个氨基酸长肽的活性的约50％至约200％(即，其中25个氨基酸长肽包括在天然人铁调素中发现的四个分子内的二硫键)，如活性的约75％至约150％、活性的约80％至约120％、活性的约90％至约110％、或活性的约95％至约105％。术语“活性”可以指铁调素与膜铁转运蛋白特异性结合的能力，例如，从而抑制细胞内的铁转运到细胞外间隙内，抑制膳食铁的吸收，和/或降低血清铁浓度。活性可以指铁调素抑制细胞内的铁转运到细胞外间隙内的能力。活性可以指铁调素抑制膳食铁的吸收的能力。活性可以指铁调素降低体内血清铁浓度的能力。

在一些实施方案中，微型铁调素可以指微型铁调素、经修饰的铁调素或铁调素模拟肽。为了本申请的目的，术语微型铁调素、修饰的铁调素或铁调素模拟肽可以被可互换地使用。微型铁调素、经修饰的铁调素和铁调素模拟肽在美国专利号9,315,545、9,328,140和8,435,941中被公开，其中的每个特此通过引用被并入，特别是对于它们的与铁调素共同具有一种或更多种活性的化合物的公开内容。

微型铁调素可以具有式I的结构、或其药学上可接受的盐：

其中R₁是—S—Z₁；—Z₂、—SH、—C(═O)—Z₃或—S—C(═O)—Z₃，

Z₁是被取代的或未被取代的C₁-C₁₈烷基或C₁-C₁₈烯基，其中C₁-C₁₈烷基或C₁-C₁₈烯基是支链的或无支链的，或Z₁是吸电子基团或供电子基团；

Z₂是被取代的或未被取代的C₁-C₁₈烷基或C₁-C₁₈烯基，其中C₁-C₁₈烷基或C₁-C₁₈烯基是支链的或无支链的，或Z₂是吸电子基团或供电子基团；

Z₃是被取代的或未被取代的C₁-C₁₈烷基或C₁-C₁₈烯基，其中C₁-C₁₈烷基或C₁-C₁₈烯基是支链的或无支链的，或Z₃是吸电子基团或供电子基团。

微型铁调素可以具有式II-IV中的任意一个的结构、或其药学上可接受的盐：

微型铁调素可以具有式V的结构、或其药学上可接受的盐：

其中：

R₁是H、或

R₂和R₃各自独立地是可选地被取代的C₄-C₇烷基、

D-Arg、D-Ile、Leu、D-Leu、Thr、D-Thr、Lys、D-Lys、Val、D-Val、D-Nω,ω-二甲基-精氨酸、L-Nω,ω-二甲基-精氨酸、D-高精氨酸、L-高精氨酸、D-去甲精氨酸、L-去甲精氨酸、瓜氨酸、其中胍基被修饰或被取代的经修饰的Arg、正亮氨酸、正缬氨酸、β高-Ile、1-氨基环己烷-1-羧酸、N-Me-Arg、N-Me-Ile；

R₄是Ida、Asp、乙酰基-Asp、(甲氨基)戊二酸、乙酰基-Gly-Ida、或乙酰基-Gly-Asp、或其衍生物，以去除其高于pH4的负电荷；

R₅是CR₆R₇、芳基或杂芳基；

B不存在或形成5-7元环；并且

q是0-6，其中当R₅是芳基或杂芳基时，q是1，并且B不存在；

Z₁是被取代的或未被取代的C₁-C₁₈烷基，其中C₁-C₁₈烷基是支链的或无支链的；

Z₂是被取代的或未被取代的C₁-C₁₈烷基，其中C₁-C₁₈烷基是支链的或无支链的；

Z₃是被取代的或未被取代的C₁-C₁₈烷基，其中C₁-C₁₈烷基是支链的或无支链的；

R₆和R₇各自独立地是H、卤素、可选地被取代的C₁-C₃烷基、或卤代烷基，

条件是当R₁是H时，化合物不具有式XVI的结构。

微型铁调素可以具有式VI-VIII中的任意一个的结构、或其药学上可接受的盐：

或

其中变量如式V所定义。

微型铁调素可以具有式IX的结构、或其药学上可接受的盐：

其中R₁是或

R₂和R₃各自独立地是可选地被取代的C₄-C₇烷基、

R₄是Ida、Asp、乙酰基-Asp、(甲氨基)戊二酸、乙酰基-Gly-Ida、或乙酰基-Gly-Asp或其衍生物，以去除其高于pH4的负电荷；

B不存在或形成5-7元环；

Z₂是被取代的或未被取代的C₁-C₁₈烷基，其中C₁-C₁₈烷基是支链的或无支链的；并且

条件是当R₁是H时，化合物不具有式XVI的结构。

微型铁调素可以具有式X的结构、或其药学上可接受的盐：

其中变量如式IX所定义。

微型铁调素可以具有式XI的结构、或其药学上可接受的盐：

其中羰基在C_a、C_b或C_c处与6元环形成键，并且具有如式IX所定义的变量。

微型铁调素可以具有式XII的结构、或其药学上可接受的盐：

其中羰基在C_d或C_e处与5元环形成键，并且具有如式IX所定义的变量。

微型铁调素可以具有式XIII的结构、或其药学上可接受的盐：

其中来自羰基的键在C_f、C_g、C_h或C_i处与7元环形成键，并且具有如式IX所定义的变量。

微型铁调素可以具有式XIV的结构、或其药学上可接受的盐：

微型铁调素可以具有式XV的结构、或其药学上可接受的盐：

微型铁调素可以具有式P₁-P₂-P₃-P₄-P₅-P₆-P₇-P₈-P₉-P₁₀或P₁₀-P₉-P₈-P₇-P₆-P₅-P₄-P₃-P₂-P₁的结构，或其药学上可接受的盐，其中P₁至P₁₀如表1中所定义；X₃是氨基己酸-Ida(NH-PAL)-NH₂，Ida是亚氨基二乙酸；Dpa是3,3-二苯基-L-丙氨酸；bhPro是β-高脯氨酸；Npc是L-3-哌啶甲酸；isoNpc是4-哌啶甲酸；并且bAla是β-丙氨酸。

表1

P₁

P₂

P₃

P₄

P₅

P₆

P₇

P₈

P₉

P₁₀

Ida

Thr

His

Dpa

bhPro

Arg

Cys-S—CH₃

Arg

Trp

X₃

Ida

Thr

His

Dpa

bhPro

Arg

Cys-C(═O)CH₃

Arg

Trp

X₃

Ida

Thr

His

Dpa

bhPro

Arg

Cys-CH₂—CH₃

Arg

Trp

X₃

Ida

Thr

His

Dpa

Npc

Arg

Cys-S—CH₃

Arg

Trp

X₃

Ida

Thr

His

Dpa

Npc

Arg

Cys

Arg

Trp

X₃

Ida

Thr

His

Dpa

D-Npc

Arg

Cys-S—CH₃

Arg

Trp

X₃

Ida

Thr

His

Dpa

isoNpc

Arg

Cys-S—CH₃

Arg

Trp

X₃

乙酰基-Gly-Ida

Thr

His

Dpa

bhPro

Arg

Cys-S—CH₃

Arg

Trp

X₃

Ida

Thr

His

Dpa

bAla

Arg

Cys-S—CH₃

Arg

Trp

X₃

微型铁调素可以具有式XVI的结构、或其药学上可接受的盐：

微型铁调素可以具有式A1-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-A10、A10-A9-A8-A7-A6-A5-A4-A3-A2-A1的结构，或其药学上可接受的盐，其中：

A1是L-Asp、L-Glu、焦谷氨酸、L-Gln、L-Asn、D-Asp、D-Glu、D-焦谷氨酸、D-Gln、D-Asn、3-氨基戊二酸、2,2’-亚氨基二乙酸、(甲氨基)戊二酸、L-Ala、D-Ala、L-Cys、D-Cys、L-Phe、D-Phe、L-Asp、D-Asp、3,3-二苯基-L-丙氨酸、3,3-二苯基-D-丙氨酸；并且如果A1是L-Asp或D-Asp，则A2是L-Cys或D-Cys；如果A1是L-Phe或D-Phe，则N末端可选地附连到与鹅脱氧胆酸酯(chenodeoxvcholate)、熊脱氧胆酸酯(ursodeoxvcholate)或棕榈酰基连接的PEG分子；或如果A1是3,3-二苯基-L-丙氨酸或3,3-二苯基-D-丙氨酸，则N末端与棕榈酰基附连；

A2是L-Thr、L-Ser、L-Val、L-Ala、D-Thr、D-Ser、D-Val、L-叔亮氨酸、4-哌啶甲酸、L-α-环己基甘氨酸、bhThr、(2S)-3-羟基-2-(甲氨基)丁酸、D-Ala、L-Cys、D-Cys、L-Pro、D-Pro、或Gly；

A3是L-His、D-His、3,3-二苯基-L-丙氨酸、3,3-二苯基-D-丙氨酸、或2-氨基茚满；

A4是L-Phe、D-Phe、(S)-2-氨基-4-苯基丁酸、3,3-二苯基-L-丙氨酸、L-联苯基丙氨酸、(1-萘基)-L-丙氨酸、(S)-3-氨基-4,4-二苯基丁酸、4-(氨基甲基)环己烷羧酸、(S)-2-氨基-3-(全氟苯基)丙酸、(S)-2-氨基-4-苯基丁酸、(S)-2-氨基-2-(2,3-二氢-1H-茚-2-基)乙酸、或环己基丙氨酸；

A5是L-Pro、D-Pro、八氢吲哚-2-羧酸、L-β-高脯氨酸、(2S,4S)-4-苯基吡咯烷-2-羧酸、(2S,5R)-5-苯基吡咯烷-2-羧酸、或(R)-2-甲基吲哚啉；

A6是L-Ile、D-Ile、L-苯基甘氨酸、L-α-环己基甘氨酸、4-(氨基甲基)环己烷羧酸、(3R)-3-氨基-4-甲基己酸、1-氨基环己烷-1-羧酸、或(3R)-4-甲基-3-(甲氨基)己酸；

A7是L-Cys、D-Cys、S-叔丁基硫代-L-半胱氨酸、L-高半胱氨酸、L-青霉胺、或D-青霉胺；

A8是L-Ile、D-Ile、L-α-环己基甘氨酸、3,3-二苯基-L-丙氨酸、(3R)-3-氨基-4-甲基己酸、1-氨基环己烷-1-羧酸、或(3R)-4-甲基-3-(甲氨基)己酸；

A9是L-Phe、L-Leu、L-Ile、L-Tyr、D-Phe、D-Leu、D-Ile、(S)-2-氨基-3-(全氟苯基)丙酸、N-甲基-苯基丙氨酸、苄基酰胺、(S)-2-氨基-4-苯基丁酸、3,3-二苯基-L-丙氨酸、L-联苯基丙氨酸、(1-萘基)-L-丙氨酸、(S)-3-氨基-4,4-二苯基丁酸、环己基丙氨酸、L-Asp、D-Asp或琉基乙胺，其中L-Phe或D-Phe可选地在N末端与RA连接，其中RA是-CONH-CH₂-CH₂-S-、或与Pro-Lys或Pro-Arg连接的D-Pro、或与L-Pro(其与Pro-Lys或Pro-Arg连接)连接的L-β-高脯氨酸、或与L-β-高脯氨酸-Lys或L-β-高脯氨酸-Arg连接的D-Pro；L-Asp或D-Asp可选地在n末端与RB连接，其中RB是-(PEG11)-GYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFL或-(PEG11)-(Gly-Pro-羟基Pro)₁₀，(S)-2-氨基-4-苯基丁酸与RC连接，其中RC是与ProLys或ProArg连接的D-Pro，或与L-β-高脯氨酸-Lys或L-β-高脯氨酸-L-Arg连接的D-Pro；

A10是L-Cys、L-Ser、L-Ala、D-Cys、D-Ser或D-Ala；

羧基末端氨基酸为酰胺形式或羧基形式；

至少一个含巯基的氨基酸作为序列中的氨基酸中的一个存在；并且

可选地不存在A1、A2、A9、A10或其组合。

式A1-A2-A3-A4-A5-A6-A7-A8-A9-A10或A10-A9-A8-A7-A6-A5-A4-A3-A2-A1的微型铁调素可以是环状肽或线性肽。

例如，A1可以是L-Asp；A2可以是L-Th；A3可以是L-His；A4可以是L-Phe；A5可以是L-Pro；A6可以是L-Ile；A7可以是L-Cys、D-Cys、S-叔丁基硫代-L-半胱氨酸、L-高半胱氨酸、L-青霉胺、或D-青霉胺；A8可以是L-Ile；A9可以是L-Phe；A10可以不存在；并且C末端可以被酰胺化。可替代地，A3可以是L-His；A4可以是L-Phe；A5可以是L-Pro；A6可以是L-Ile；A7可以是L-Cys、D-Cys、S-叔丁基硫代-L-半胱氨酸、L-高半胱氨酸、L-青霉胺、或D-青霉胺；A8可以是L-Ile；A1、A2、A9和A10可以不存在，并且C末端可以被酰胺化。可替代地，A3可以是L-His；A4可以是L-Phe；A5可以是L-Pro；A6可以是L-Ile；A7可以是L-Cys、D-Cys、S-叔丁基硫代-L-半胱氨酸、L-高半胱氨酸、L-青霉胺、或D-青霉胺；A1、A2、A8、A9和A10可以不存在；并且C末端可以被酰胺化。

微型铁调素可以包括氨基酸序列HFPICI(SEQ ID NO:11)、HFPICIF(SEQ ID NO:12)、DTHFPICIDTHFPICIF(SEQ ID NO:13)、DTHFPIAIFC(SEQ ID NO:14)、DTHAPICIF(SEQ IDNO:15)、DTHFPICIF(SEQ ID NO:16)、或CDTHFPICIF(SEQ ID NO:17)。微型铁调素可以包括SEQ ID NO:15中所示的序列，例如，其中半胱氨酸与S-叔丁基形成二硫键。

微型铁调素可以包括氨基酸序列D-T-H-F-P-I-(L-高半胱氨酸)-I-F；D-T-H-F-P-I-(L-青霉胺)-I-F；D-T-H-F-P-I-(D-青霉胺)-I-F；D-(L-叔亮氨酸)-H-(L-苯基甘氨酸)-(八氢吲哚-2-羧酸)-(L-α-环己基甘氨酸)-C-(L-α-环己基甘氨酸)-F；或D-(L-叔亮氨酸)-H-P-(八氢吲哚-2-羧酸)-(L-α-环己基甘氨酸)-C-(L-α-环己基甘氨酸)-F。

微型铁调素可以包括氨基酸序列FICIPFHTD(SEQ ID NO:18)、FICIPFH(SEQ IDNO:19)、R2-FICIPFHTD(SEQ ID NO:20)、R3-FICIPFHTD(SEQ ID NO:21)、FICIPFHTD-R6(SEQID NO:22)、R4-FICIPFHTD(SEQ ID NO:23)、或R5-FICIPFHTD(SEQ ID NO:24)，其中每个氨基酸是D氨基酸；R1是-CONH₂-CH₂-CH₂-S；R2是鹅脱氧胆酸酯-(PEG 11)-；R3是熊脱氧胆酸酯-(PEG11)-；R4是棕榈酰基-(PEG11)-；R5是2(棕榈酰基)-二氨基丙酸-(PEG 11)-；并且R6是(PEG 11)-GYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFL，其中R6的每个氨基酸是L氨基酸。

微型铁调素可以包括氨基酸序列D-T-H-((S)-2-氨基-4-苯基丁酸)-P-I-C-I-F；D-T-H-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)-P-I-C-I-F；D-T-H-(L-联苯基丙氨酸)-P-I-C-I-F；D-T-H-((1-萘基)-L-丙氨酸)-P-I-C-I-F；D-T-H-((S)-3-氨基-4,4-二苯基丁酸)-P-I-C-I-F；D-T-H-F-P-I-C-I-((S)-2-氨基-4-苯基丁酸)；D-T-H-F-P-I-C-I-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)；D-T-H-F-P-I-C-I-(L-联苯基丙氨酸)；D-T-H-F-P-I-C-I-((1-萘基)-L-丙氨酸)；D-T-H-F-P-I-C-I-((S)-3-氨基-4,4-二苯基丁酸)；D-T-H-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)-P-I-C-I-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)；D-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)-P-I-C-I-F；D-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)-P-I-C-I-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)；D-T-H-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)-P-R-C-R-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)；D-T-H-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)-(八氢吲哚-2-羧酸)-I-C-I-F；D-T-H-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)-(八氢吲哚-2-羧酸)-I-C-I-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)；或D-T-H-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)-P-C-C-C-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)。

微型铁调素可以包括氨基酸序列D-T-H-F-P-I-C-I-F-R8；D-T-H-F-P-I-C-I-F-R9；D-T-H-F-P-I-C-I-F-R10；D-T-H-F-P-I-C-I-F-R11；D-T-H-F-P-I-C-I-F-R12；D-T-H-F-P-I-C-I-F-R13；D-T-H-F-P-I-C-I-((S)-2-氨基-4-苯基丁酸)-R8；D-T-H-F-P-I-C-I-((S)-2-氨基-4-苯基丁酸)-R9；D-T-H-F-P-I-C-I-((S)-2-氨基-4-苯基丁酸)-R12；或D-T-H-F-P-I-C-I-((S)-2-氨基-4-苯基丁酸)-R13，其中R8是D-Pro-L-Pro-L-Lys；R9是D-Pro-L-Pro-L-Arg；R10是(L-β-高脯氨酸)-L-Pro-L-Lys；R11是(L-β-高脯氨酸)-L-Pro-L-Arg；R12是D-Pro-(L-β-高脯氨酸)-L-Lys；并且R13是D-Pro-(L-β-高脯氨酸)-L-Arg。

微型铁调素可以包括氨基酸序列D-T-H-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)-P-(D)R-C-(D)R-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)。

微型铁调素可以包括氨基酸序列C-(4-哌啶甲酸)-(3,3-二苯基-D-丙氨酸)-(4-(氨基甲基)环己烷羧酸)-R-(4-(氨基甲基)环己烷羧酸)-(4-哌啶甲酸)-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)-巯基乙胺。微型铁调素可以包括氨基酸序列C-P-(3,3-二苯基-D-丙氨酸)-(4-(氨基甲基)环己烷羧酸)-R-(4-(氨基甲基)环己烷羧酸)-(4-哌啶甲酸)-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)-巯基乙胺。微型铁调素可以包括氨基酸序列C-(D)P-(3,3-二苯基-D-丙氨酸)-(4-(氨基甲基)环己烷羧酸)-R-(4-(氨基甲基)环己烷羧酸)-(4-哌啶甲酸)-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)-巯基乙胺。微型铁调素可以包括氨基酸序列C-G-(3,3-二苯基-D-丙氨酸)-(4-(氨基甲基)环己烷羧酸)-R-(4-(氨基甲基)环己烷羧酸)-(4-哌啶甲酸)-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)-巯基乙胺。

微型铁调素可以包括氨基酸序列(2,2’-亚氨基二乙酸)-Thr-His-(3,3-二苯基-L-丙氨酸)-(L-β-高脯氨酸)-Arg-Cys-Arg-((S)-2-氨基-4-苯基丁酸)-(氨基己酸)-(在侧链上具有棕榈胺酰胺的2,2’-亚氨基二乙酸)，其在美国专利号9,328,140中被描述(例如，‘140专利的SEQ ID NO:94；其通过引用特此被并入)。

在一些实施方案中，微型铁调素具有包括SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的25个氨基酸长肽的活性的约10％至1000％。例如，微型铁调素可以具有包括SEQ ID NO:1中所示的氨基酸序列的25个氨基酸长肽的活性的约50％至约200％，如活性的约75％至约150％、活性的约80％至约120％、活性的约90％至约110％、或活性的约95％至约105％。术语“活性”可以指微型铁调素与膜铁转运蛋白特异性结合的能力，例如，从而抑制细胞内的铁转运到细胞外间隙内，抑制膳食铁的吸收，和/或降低血清铁浓度。活性可以指微型铁调素抑制细胞内的铁转运到细胞外间隙内的能力。活性可以指微型铁调素抑制膳食铁的吸收的能力。活性可以指微型铁调素降低体内血清铁浓度的能力。

V.施用途径

本发明的组合物可以以多种常规方式被施用。在一些方面，本发明的组合物适用于肠胃外施用。这些组合物可以，例如腹膜内施用、静脉内施用、肾内或鞘内施用。在一些方面，本发明的组合物被静脉注射。本领域技术人员将会理解，本发明的治疗有效物质制剂或组合物的施用方法将取决于多种因素，如正在治疗的患者的年龄、体重和身体状况、以及正在治疗的疾病或病况。因此，技术人员能够根据具体情况选择对患者最佳的施用方法。

组合物可以被局部施用、肠内施用或肠胃外施用。组合物可以被皮下施用、静脉内施用、肌内施用、鼻内施用、通过吸入施用、口服施用、舌下施用、通过颊施用、局部施用、经皮施用或经粘膜施用。组合物可以通过注射被施用。在优选的实施方案中，组合物通过皮下注射施用、口服施用、鼻内施用、通过吸入施用、或静脉内施用。在某些优选的实施方案中，组合物通过皮下注射被施用。

贯穿此说明书，词语“包括(comprise)”或变形(如“包括(comprises)”或“包括(comprising)”)应当被理解为暗示包含所述的整体(或组分)或整体组(或组分组)，但是不排除任何其他整体(或组分)或整体组(或组分组)。除非上下文另外明确指出，单数形式“一(a)”、“一(an)”和“所述(the)”包含复数形式。术语“包含(including)”被用于意指“包含但不限于”。“包含”和“包含但不限于”被可互换地使用。术语“患者”和“个体”被可互换地使用，并且指人或非人动物。这些术语包含哺乳动物，如人、灵长类动物、家畜动物(例如，牛、猪)、伴生动物(例如，犬、猫)和啮齿动物(例如，小鼠、兔和大鼠)。

“约”和“大约”将通常意为考虑到测量的性质或精度，所测量的量的可接受误差度。典型地，示例性的误差度在给定的值或值的范围的20％以内，优选10％以内，并且更优选5％以内。可替代地，并且特别是在生物***中，术语“约”和“大约”可以意为在给定值的数量级内，优选在5倍以内，并且更优选在2倍以内的值。除非另有说明，本文中给出的数值量是近似的，这意味着在没有明确说明时，术语“约”或“大约”可以被推断。

如本文所使用的，术语“施用”意为向受试者提供药物药剂或药物组合物，并且包含，但不限于，通过医学专业施用和自我施用来施用。这样的药剂，例如，可以是铁调素或铁调素类似物。

如本文所使用的，短语“药学上可接受的”指在合理的医学判断范围内适用于与人和动物的组织接触，而没有过度毒性、刺激、过敏反应或其他问题或并发症，与合理的利益/风险比相称的那些药剂、化合物、材料、组合物和/或剂量。

如在本文使用的，短语“药学上可接受的载体”意为药学上可接受的材料、组合物或运载体(vehicle)(如液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或包封材料)。每种载体在与制剂的其他成分相容并且对患者无害的意义上必须是“可接受的”。可以用作药学上可接受的载体的材料的一些实例包含：(1)糖(如乳糖、葡萄糖和蔗糖)；(2)淀粉(如玉米淀粉和马铃薯淀粉)；(3)纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素)；(4)粉状黄芪胶；(5)麦芽；(6)明胶；(7)滑石；(8)赋形剂(如可可脂和栓剂蜡)；(9)油类(如花生油、棉籽油、红花子油、麻油、橄榄油、玉米油和大豆油)；(10)二醇类(如丙二醇)；(11)多元醇(如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇和聚乙二醇)；(12)酯类(如油酸乙酯和十二烷酸乙酯)；(13)琼脂；(14)缓冲剂(如氢氧化镁和氢氧化铝)；(15)藻酸；(16)无热原水；(17)等渗盐水；(18)林格溶液；(19)乙醇；(20)pH缓冲溶液；(21)聚酯、聚碳酸酯和/或聚酸酐；以及(22)药物制剂中采用的其他无毒相容物质。

如本文所使用的，“预防”病况(例如，铁过剩)的治疗剂指化合物，当在紊乱或病况的发作之前被施用至统计样品时，相对于未经处理的对照样品，所述化合物降低经处理的样品中的紊乱或病况的发生，或相对于未经处理的对照样品，所述化合物延迟紊乱或病况的一种或更多种症状的发作或降低紊乱或病况的一种或更多种症状的严重性。

在某些实施方案中，本发明的药剂可以单独使用或与另一类型的治疗剂联合施用。如本文所使用的，短语“联合施用”指两种或更多种不同治疗药剂的任何形式的施用，使得当先前施用的治疗药剂在体内仍然有效时，第二药剂被施用(例如，两种药剂在受试者中是同时有效的，其可以包含两种药剂的协同效应)。例如，不同的治疗药剂可以以相同剂型或以不同剂型附随地或顺序地被施用。在某些实施方案中，不同的治疗药剂可以在约1小时、约12小时、约24小时、约36小时、约48小时、约72小时或约一周内相互施用。因此，接受这样的治疗的受试者可以得益于不同的治疗药剂的组合效果。

如本文所使用的，短语“治疗有效量”和“有效量”意为以适用于任何医学治疗的合理的利益/风险比在受试者中的至少一个细胞亚群中对于产生期望的治疗效果有效的药剂的量。

在受试者中“治疗”疾病或“治疗”患有疾病的受试者指使受试者经受药物治疗(例如，施用药物)，使得疾病的至少一种症状被减轻或防止恶化。

现在一般性地描述本发明，通过参考以下实施例将更容易理解，所述实施例被包含仅用于说明本发明的某些方面和实施方案的目的，并不意图限制本发明。

范例

实施例1

设计研究以在小鼠(n＝6-7/组)中评估铁调素的皮下剂量对血清铁水平的影响。当皮下注射时，50μg剂量的铁调素在剂量给药后4小时(相比于运载体，平均减小40％，p＜0.05)和在剂量给药后24小时(相比于运载体，平均减小15％，p＜0.05)显示血清铁水平的显著减小。

实施例2

设计研究以在小鼠(n＝7/组)中评估皮下递送的铁调素的50、100和200μg的剂量及其对血清铁水平的影响。相比于运载体，全部三种剂量在剂量给药后4小时时显示血清铁水平的显著减小(p＜0.01)。相反地，相比于运载体，50μg和100μg剂量在剂量给药后24小时时升高(p＜0.01)。血清铁的升高的水平可以归因于***对铁调素的清除的反应。一个小鼠在4小时血液收集之后死亡。死亡率可能与血液收集的压力有关。血清铁水平在剂量给药后72小时正常化。

实施例3

设计研究以在正常大鼠(n＝7/组)中评估皮下递送的铁调素的1、5、10和50mg的剂量及其对血清铁水平的影响。在全部剂量水平下都观察到血清铁水平的显著减小，并且以50mg剂量给药的动物在72小时时仍然展现出影响。对于全部剂量组，在剂量给药后1小时和2小时之间达到T_max和C_max，但是在这些时间点处，高剂量和中剂量之间的摄取非常相似。在该研究中在任何剂量水平下没有观察到嗜睡。对于全部三种剂量，在剂量给药后4小时时观察到最低的血清铁浓度。在5mg剂量中，血清铁水平在剂量给药后48小时时恢复到剂量给药前水平。在10mg和50mg剂量组中，血清铁水平持续增加，但是在剂量给药后72小时没有恢复到剂量给药前水平。

实施例4

在大鼠和狗中在两个扩展的急性研究中评价铁调素。实施这些研究以确定无可见有害作用水平(NOAEL)。由于各种临床观察和组织病理学观察，在狗中确定NOAEL为5mg/kg/天。

设计研究以评估被皮下注射地(SC)递送至Sprague Dawley大鼠(n＝9/性别/组)的铁调素的5、25和50mg/kg的剂量(人等效剂量分别是0.8、4、8mg/kg)。当相比于运载体及其剂量给药前水平时，全部剂量显示显著减小的平均血清铁水平。对于全部三种剂量，在剂量给药后4小时时观察到最低的血清铁水平。在该研究中没有观察到不可预期的有害作用。铁调素有关的变化限于非不利的、剂量依赖性的食物消耗和体重增加的降低、以及注射部位的硬结。如对铁调素的施用所预料的，观察到的生物效应包含网织红细胞和铁浓度的剂量依赖性可逆的减小，以及增加的不饱和铁结合力。平均来说，观察到雌性大鼠血清铁水平较高，但是铁调素的毒代动力学(TK)效应对于两种性别是可以相比的。结果表明，铁调素能够在Sprague Dawley大鼠中显著减小血清铁水平，而不伴随着对任何主要器官的不可预期的生理变化。临床病理学和铁有关的变化与铁调素的预期药物学一致。基于这些结果，NOAEL被确定为50mg/kg/天。

设计研究以评估以单次皮下剂量递送至狗(n＝6/性别/组)的铁调素的5、25和50mg/kg的剂量(人等效剂量分别是0.8、4和8mg/kg)。观察到施用部位的厚度增加(在第4天为50mg/kg并且在第15天为≥25mg/kg)。第4天的镜检结果包括，雄性和雌性中的施用部位中的混合细胞浸润≥25mg/kg，而在第15天，施用部位处的镜检结果包含，雄性和雌性中的混合细胞浸润≥5mg/kg，雄性中的纤维化≥25mg/kg并且雌性中的纤维化≥5mg/kg，以及雄性中的囊性空腔为50mg/kg并且雌性中的囊性空腔≥25mg/kg。基于这些结果，NOAEL被认为是5mg/kg/天。测试显示，在≥25mg/kg/天的剂量组中，直到第4天，中性粒细胞和纤维蛋白原水平的暂时增加。尽管这些血液化学分析物暂时增加，但是它们不被认为是严重的，并且在该研究结束时NOAEL剂量被确定为5mg/kg/天。其他不利反应如下：弯腰驼背的姿势、软粪便、“厚”的大体病理学结果、以及皮下纤维化、混合细胞浸润、以及恢复期间出现的囊肿。

实施例5

铁调素施用减低具有高基线铁蛋白的镰状细胞患者中的铁蛋白血液水平。向两个患有镰状细胞病的雄性患者(患者1001和1002)皮下施用1毫克单次给药剂量的铁调素。在基线以及施用铁调素后8天时测量血清铁蛋白浓度。在两个患者中，铁调素施用后8天，铁蛋白血液水平都较低(图1)。患者1001和1002的铁蛋白血液水平的百分比变化分别为-45％和-61％(图3)。

表2.患者人口统计特征和施用的铁调素的剂量。

向三个具有正常基线血清铁蛋白浓度的遗传性血色素沉着症患者施用铁调素。遗传性血色素沉着症患者1003被施用1mg的铁调素，而其他两个患者(2001和2002)被施用5mg的铁调素。在铁调素施用后8天测量全部患者中的铁蛋白血液水平(图2)。患者1003、2001和2002中的铁蛋白血液水平的百分比变化分别为25％、-19％和18％(图3)。

实施例6

在实施例1中所描述的患者中测量转铁蛋白饱和度(TSAT)。TSAT表示被铁占据的转铁蛋白的铁结合位点的百分比，使得TSAT成为诊断和监测血液紊乱和疾病的重要工具。向镰状细胞病患者1001和1002以及遗传性血色素沉着症患者1003施用1毫克单次给药剂量的铁调素，而患者2001和2002各自被施用5mg的铁调素。在铁调素施用后8天测量TSAT水平。全部患者在第8天显示TSAT百分比减小(图4和图5)。

表3.转铁蛋白饱和度-从基线的百分比变化。

患者#	％变化
		1001	-19％
1002	-62％
		1003	-27％
2001	-26％
		2002	-40％
2004	待定

实施例7

施用铁调素后，在6个患者(镰状细胞病患者和遗传性血色素沉着症患者)中测量血清铁水平。在铁调素施用之前(基线)以及在铁调素施用后2小时、4小时、8小时、24小时、48小时和168小时(8天)时测量血清铁水平。将患者分成两个群组，群组1被施用1mg的铁调素，并且群组2被施用5mg的铁调素。群组1包括镰状细胞患者1001和1002以及遗传性血色素沉着症患者1003，而群组2包括遗传性血色素沉着症患者2001、2002和2004。个体患者的血清铁浓度百分比变化和两个群组的平均百分比变化在图6和图7中示出。平均来说，在两个群组中，铁调素施用使血清铁浓度在8天的时间段内均减小35-40％。

表4.最大观察到的从基线的血清铁浓度百分率变化。

患者#	从基线的％变化
		1001	-6％
1002	-69％
		1003	-37％
2001	-53％
		2002	-24％
2004	-35％

表5.施用铁调素后8天从基线的血清铁浓度百分率变化。

患者#	从基线的％变化
		1001	-4％
1002	-69％
		1003	-37％
2001	-40％
		2002	-24％
2004	待定

通过引用并入

本文中提及的全部出版物和专利特此通过引用被全部并入，如同具体地且单独地表明每个单独的出版物或专利通过引用被并入。在发生冲突的情况下，以本说明书(包含其具体定义)为准。虽然已经讨论了患者事项的具体方面，但上述说明书是说明性的而不是限制性的。在阅读本说明书和下述权利要求之后，许多变形对于本领域技术人员来说将变得显而易见。发明的完整范围应当通过参照权利要求，连同它们的等同物的完整范围，以及说明书，连同这样的变形来确定。

Claims

1.一种用于在受试者中治疗病况的方法，所述方法包括向所述受试者施用包括铁调素或微型铁调素的组合物。

2.如权利要求1所述的方法，其中向所述受试者施用组合物的操作包括施用约10μg至约1克的铁调素或微型铁调素。

3.如权利要求2所述的方法，其中向所述受试者施用组合物的操作包括施用约100μg至约100mg的铁调素或微型铁调素。

4.如权利要求3所述的方法，其中向所述受试者施用组合物的操作包括施用约200μg至约50mg的铁调素或微型铁调素。

5.如权利要求4所述的方法，其中向所述受试者施用组合物的操作包括施用约500μg至约10mg的铁调素或微型铁调素。

6.如权利要求5所述的方法，其中向所述受试者施用包括铁调素或微型铁调素的组合物的操作包括施用约500μg、约600μg、约667μg、约700μg、约750μg、约800μg、约850μg、约900μg、约950μg、约1000μg、约1200μg、约1250μg、约1300μg、约1333μg、约1350μg、约1400μg、约1500μg、约1667μg、约1750μg、约1800μg、约2000μg、约2200μg、约2250μg、约2300μg、约2333μg、约2350μg、约2400μg、约2500μg、约2667μg、约2750μg、约2800μg、约3mg、约3.3mg、约3.5mg、约3.7mg、约4mg、约4.5mg、约5mg、约6mg、约7mg、约8mg、约9mg、或约10mg的铁调素或微型铁调素。

7.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中向所述受试者施用组合物的操作包括施用单次给药剂量的所述组合物。

8.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中施用所述组合物的操作包括每月至少一次施用所述组合物。

9.如权利要求8所述的方法，其中施用所述组合物的操作包括每周至少一次施用所述组合物。

10.如权利要求9所述的方法，其中施用所述组合物的操作包括每周1、2、3、4、5、6或7次施用所述组合物。

11.如权利要求10所述的方法，其中施用所述组合物的操作包括每周1、2或3次地施用所述组合物。

12.如权利要求8至11中任一项所述的方法，其中每次施用所述组合物时，施用约10μg至约1克的铁调素或微型铁调素。

13.如权利要求12所述的方法，其中每次施用所述组合物时，施用约100μg至约100mg的铁调素或微型铁调素。

14.如权利要求13所述的方法，其中每次施用所述组合物时，施用约200μg至约50mg的铁调素或微型铁调素。

15.如权利要求14所述的方法，其中每次施用所述组合物时，施用约500μg至约10mg的铁调素或微型铁调素。

16.如权利要求15所述的方法，其中每次施用所述组合物时，施用约500μg、约600μg、约667μg、约700μg、约750μg、约800μg、约850μg、约900μg、约950μg、约1000μg、约1200μg、约1250μg、约1300μg、约1333μg、约1350μg、约1400μg、约1500μg、约1667μg、约1750μg、约1800μg、约2000μg、约2200μg、约2250μg、约2300μg、约2333μg、约2350μg、约2400μg、约2500μg、约2667μg、约2750μg、约2800μg、约3mg、约3.3mg、约3.5mg、约3.7mg、约4mg、约4.5mg、约5mg、约6mg、约7mg、约8mg、约9mg、或约10mg的铁调素或微型铁调素。

17.如权利要求1至16中任一项所述的方法，其中所述组合物被皮下施用、静脉内施用、肌内施用、鼻内施用、通过吸入施用、口服施用、舌下施用、通过颊施用、局部施用、经皮施用或透粘膜施用。

18.如权利要求1至17中任一项所述的方法，其中所述组合物通过注射被施用。

19.如权利要求17所述的方法，其中所述组合物被静脉内施用。

20.如权利要求1至19中任一项所述的方法，其中所述病况是α-珠蛋白生成障碍性贫血、中间型珠蛋白生成障碍性贫血、β-珠蛋白生成障碍性贫血、血色素沉着症、镰状细胞病、顽固性贫血、或溶血性贫血。

21.如权利要求20所述的方法，其中所述病况是贫血，并且所述贫血是血红蛋白病、铁粒幼细胞性贫血、与骨髓增生异常综合征(MDS)相关的贫血、或先天性贫血。

22.如权利要求1至19中任一项所述的方法，其中所述病况是肝细胞癌、心肌病或糖尿病。

23.如权利要求1至19中任一项所述的方法，其中所述病况是病毒感染、细菌感染、真菌感染或原生生物感染。

24.如权利要求23所述的方法，其中所述病况是细菌感染，并且所述细菌是大肠杆菌、灰色奈瑟菌、淋病奈瑟菌、表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球菌或无乳链球菌。

25.如权利要求23所述的方法，其中所述病况是真菌感染，并且所述真菌是白念珠菌。

26.如权利要求23所述的方法，其中所述病况是原生生物感染，并且所述原生生物是克氏锥虫、疟原虫属(如恶性疟原虫、间日疟原虫、卵形疟原虫或三日疟原虫)、布氏锥虫(如布氏冈比亚锥虫或布氏罗德西亚锥虫)、或利什曼原虫属。

27.如权利要求1至19、23和26中任一项所述的方法，其中所述病况是恰加斯病、疟疾、非洲昏睡病或利什曼病。

28.如权利要求23所述的方法，其中所述病况是病毒感染，并且所述病毒是乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒或登革热病毒。

29.如权利要求23所述的方法，其中所述病况是细菌感染，并且所述细菌感染是结核病。

30.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述受试者是哺乳动物。

31.如权利要求30所述的方法，其中所述受试者是啮齿动物、兔形目动物、猫科动物、犬科动物、猪、羊、牛科动物、马科动物或灵长类动物。

32.如权利要求31所述的方法，其中所述受试者是人。

33.如权利要求32所述的方法，其中在施用所述组合物之前，所述受试者具有小于约100ng/mL的血清铁调素浓度。

34.如权利要求33所述的方法，其中在施用所述组合物之前，所述受试者具有小于50ng/mL的血清铁调素浓度。

35.如权利要求32至34中任一项所述的方法，其中在施用所述组合物之前，所述受试者具有大于100ng/mL的血清铁蛋白浓度。

36.如权利要求35所述的方法，其中在施用所述组合物之前，所述受试者具有大于1000ng/mL的血清铁蛋白浓度。

37.如权利要求32至36中任一项所述的方法，其中在施用所述组合物之前，所述受试者具有约40至约50mg/kg的总体内铁含量。

38.如权利要求32至36中任一项所述的方法，其中在施用所述组合物之前，所述受试者具有大于50mg/kg的总体内铁含量。

39.如权利要求38所述的方法，其中在施用所述组合物之前，所述受试者具有大于60mg/kg的总体内铁含量。

40.如权利要求32至39中任一项所述的方法，其中在施用所述组合物之前，所述受试者的血清铁浓度为至少约100μg/dL。

41.如权利要求40所述的方法，其中在施用所述组合物之前，所述受试者的所述血清铁浓度为至少约200μg/dL。

42.如权利要求32至41中任一项所述的方法，其中在向所述受试者施用所述组合物之前，所述受试者的转铁蛋白饱和度大于约20％。

43.如权利要求42所述的方法，其中在向所述受试者施用所述组合物之前，所述受试者的所述转铁蛋白饱和度大于约50％。

44.如权利要求1至43中任一项所述的方法，其中所述组合物包括铁调素，并且所述铁调素包括SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5中所示的氨基酸序列。

45.如权利要求1至43中任一项所述的方法，其中所述组合物包括铁调素，并且所述铁调素包括与SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5中所示的氨基酸序列具有至少90％的序列同源性的氨基酸序列。

46.如权利要求45所述的方法，其中所述铁调素包括SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQID NO:3、SEQ ID NO:4或SEQ ID NO:5中的8个半胱氨酸中的每个。

47.如权利要求44或46所述的方法，其中SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3、SEQID NO:4或SEQ ID NO:5中的所述8个半胱氨酸在所述铁调素中形成4个二硫键。

48.如权利要求44至47中任一项所述的方法，其中所述铁调素包括SEQ ID NO:1中所示的所述氨基酸序列。

49.如权利要求1至43中任一项所述的方法，其中所述组合物包括铁调素，并且所述铁调素包括SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:10中所示的序列。

50.如权利要求49所述的方法，其中SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ IDNO:9或SEQ ID NO:10中的8个半胱氨酸在所述铁调素中形成4个二硫键。

51.如权利要求1至43中任一项所述的方法，其中所述组合物包括微型铁调素。

52.如权利要求1至19中任一项所述的方法，其中所述病况是疟疾。

53.如权利要求52所述的方法，其中所述疟疾是疟疾的耐药系。

54.如权利要求52所述的方法，其中包括微型铁调素或铁调素的所述组合物与抗疟药联合施用。

55.如权利要求54所述的方法，其中所述抗疟药选自四环素、氯胍、氯丙胍、咯萘啶、本芴醇、甲氟喹、氨苯砜、阿托伐醌、青蒿琥酯和青蒿素。

56.如权利要求52所述的方法，其中所述受试者患有G6PD缺乏症。

57.一种预防患有疟疾的受试者中的耐药性的方法，所述方法包括向所述受试者施用抗疟药和包括铁调素或微型铁调素的组合物。

58.如权利要求57所述的方法，其中所述抗疟药选自四环素、氯胍、氯丙胍、咯萘啶、本芴醇、甲氟喹、氨苯砜、阿托伐醌、青蒿琥酯和青蒿素。