CN108872443A - 一种姜炙厚朴的质量检测方法 - Google Patents

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金俊杰
彭思颖
郑艳萍
李国维
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Abstract

本发明公开了姜炙厚朴的质量检测方法，该方法包括样品溶液的制备、使用UPLC/Q‑TOF‑MS/MS对姜炙厚朴中的成分进行了检测和鉴定。本发明通过大量实验筛选出最佳的流动相组成，梯度洗脱程序、流速，检测波长、色谱柱和柱温，并且通过大量实验筛选出最佳的质谱条件，实验验证表明，本发明提供的的检测方法至少可检测出厚朴酚、和厚朴酚等36种有效成分，因而可以全面、客观、准确的检测和评价姜炙厚朴的质量，为保证临床疗效具有重要意义。

Description

一种姜炙厚朴的质量检测方法
技术领域
本发明涉及一种中药的检测方法，具体涉及姜炙厚朴的质量检测方法。
背景技术
药用厚朴为木兰科植物厚朴或凹叶厚朴的干燥干皮、枝皮或根皮，性温，味辛苦，入脾、胃、肺大肠经，具有燥湿化痰、下气除满的功效。其主要成分是厚朴酚类(厚朴酚)和挥发油类(桉油醇)物质，无机成分主要为钙、钠、钾、镁、铁。厚朴的药理作用有镇痛抗炎、抗溃疡、抗腹泻、保护心肌等，药用范围较广，经常被应用到临床治疗配方当中。
厚朴中主要含有酚类成分、挥发油及生物碱三大类成分，目前对厚朴化学成分的分析方法主要有HPLC、GC/MS、HPLC/MS等。目前关于姜炙厚朴成分的***研究较少。
本发明的创造性的采用超高效液相-飞行时间质谱技术(UPLC/Q-TOF MS)，通过测得的精确分子量及可能的元素组成，结合部分二级质谱信息，对炮制后的姜炙厚朴中的化学成分进行分析鉴定。
发明内容
发明目的：本发明的目的是提供一种可以客观、全面、准确的评价姜炙厚朴的质量，对控制姜炙厚朴的质量和保证临床疗效具有重要意义。
技术方案：为了实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
一种姜炙厚朴的质量检测方法，该方法包括以下步骤：
A、样品溶液的制备：称取姜炙厚朴粉末，用甲醇提取，离心，取上清液，加水，过固相萃取柱，再用甲醇洗脱，收集洗脱液，离心，取上清液，利用甲醇稀释，得到样品溶液；
B、精密吸取步骤A的样品溶液，注入超高效液相色谱仪，并采用飞行时间质谱进行检测；
C、成分鉴定：根据XIC Manager数据处理软件中各种成分的分子式列表，将分子式列表的精确质量数与计算的理论质量数对比，筛选出相匹配的成分；并根据步骤B的飞行时间质谱的二级质谱中的碎片信息分析化合物的裂解方式，鉴别出姜炙厚朴中的化合物。
作为优选方案，以上所述的姜炙厚朴的质量检测方法，所述步骤A样品溶液的制备：称取姜炙厚朴粉末(过6号筛)，用体积浓度50-90％的甲醇，在40℃下超声提取30～40分钟，离心，取上清液，加水，过Waters Oasis HLB SPE固相萃取柱，再用甲醇洗脱，收集洗脱液，离心，取上清液，利用甲醇进行20倍稀释，得到样品溶液。
作为优选方案，以上所述的姜炙厚朴的质量检测方法，所述步B中超高效液相色谱仪的液相柱为Brownlee SPP液相柱，规格为2.7μm，2.1mm×100mm，氮气流速为900L·h-1。
作为优选方案，以上所述的姜炙厚朴的质量检测方法，步骤B的液相色谱条件为：流动相为乙腈和水，梯度洗脱，流速：0.3ml/min，进样量3μL；柱温40℃；
质谱条件为：离子化模式为ESI，正、负离子扫描，毛细管电压为3.5kV，CE电压为45V，除溶剂气体为氮气，除溶剂温度为550℃，离子源温度为120℃，MS/MS MODE-10MS/MS，每秒50-1300m/z 80毫秒，IDA，动态背景扣除开启；循环时间：1秒；数据处理：PeakViewSoftwareTM数据处理软件。
作为优选方案，以上所述的姜炙厚朴的质量检测方法，其特征在于，步骤B的梯度洗脱程序为：0-3min，5％-13％乙腈，95％-87％水；3-6min，13％-21％乙腈，87％-79％水；6-13min，21％-30％乙腈，79％-70％水；13-18min，30％-45％乙腈，70％-55％水；18-23min，45％-55％乙腈，55％-45％水；23-24min，55％-100％乙腈，45％-0％水；24-32min，100％乙腈，32-35min，5％乙腈，95％水。
作为优选方案，以上所述的姜炙厚朴的质量检测方法，所述的姜炙厚朴的炮制方法为：取厚朴丝100份，加姜汁10份拌匀，闷润至姜汁被吸尽，用文火80-120摄氏度炒干。
作为优选方案，以上所述的姜炙厚朴的质量检测方法，步骤C中鉴别的化合物包括厚朴酚、和厚朴酚、和厚朴新酚、厚朴醛、双辣薄荷基厚朴酚、辣薄荷基和厚朴酚、厚朴三酚、荜澄茄醇、愈创萜醇、厚朴木脂素、1，4-桉叶素、丁香烯、9，12-十八碳二烯醛、Lirinidine、罗默碱、番荔枝碱、观音莲明、瑞枯灵、武当木兰碱、丁香酚、甲基丁香酚、乙酸肉桂酯、十四烷酸、油酸、十六烷酸、a-律草烯、蓝桉醇、芥子醇、丁香树脂酚、醋酸龙脑酯、a-沉香呋喃、石竹烯醇、异萨苏林、a-姜黄烯、绿原酸、芦丁。
多成分定量检测条件的优化：
1、质谱条件
对上样量进行了筛选，分别上样1ul、2ul、3ul、5ul、10ul，结果发现进样量在3ul时，正离子源模式下的准分子形式为[M+H]+，响应最佳又不至于太高，并且各离子峰峰分离度较好。
2、色谱条件进行优化方面
对流动相的筛选：试用水-乙腈进行实验发现色谱图基线不平，改用0.1％甲酸-乙腈进行进样结果基线平稳，并且分离度较佳。
扫描波长的选择：对样品进行全梯度全波长扫描，发现280nm左右厚朴主成分厚朴酚和和厚朴酚有最大吸收，所以选定280nm为扫描波长。
色谱条件的优化：B相浓度由5％～95％，每分钟一个梯度进行走样，拉长出峰密集浓度区域时间或进行部分等梯度走样，缩短出峰稀疏浓度区域时间，使峰达到分离，最终得到最佳色谱走样条件。
有益效果：
1、本发明通过大量实验筛选出最佳的流动相组成，梯度洗脱程序、流速，检测波长、色谱柱和柱温，并且通过大量实验筛选出最佳的质谱条件，经多次实验验证表明，本发明提供的的检测方法至少可检测出厚朴酚、和厚朴酚等36种有效成分，因而可以全面、客观、准确的检测和评价姜炙厚朴的质量，为保证临床疗效具有重要意义。
2、本发明提供的姜炙厚朴的质量检测方法，具有方法简便、稳定性好、精密度高、重现性好等优点。
附图说明
图1为姜制厚朴负离子总离子流图。
图2为姜制厚朴正离子总离子流图。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1
一种姜炙厚朴的质量检测方法，该方法包括以下步骤：
A、样品溶液的制备：称取姜炙厚朴粉末(过6号筛)0.5g，用体积浓度80％的甲醇，在40℃下超声提取30分钟，离心，取上清液，加水，过Waters Oasis HLB SPE固相萃取柱，再用甲醇洗脱，收集洗脱液，离心，取上清液，利用甲醇进行20倍稀释，得到样品溶液；
B、精密吸取步骤A的样品溶液，注入超高效液相色谱仪(UPLC/Q-TOF MS)，并采用飞行时间质谱进行检测；
C、成分鉴定：根据XIC Manager数据处理软件中各种成分的分子式列表，将分子式列表的精确质量数与计算的理论质量数对比，筛选出相匹配的成分；并根据步骤B的飞行时间质谱的二级质谱中的碎片信息分析化合物的裂解方式，鉴别出姜炙厚朴中的化合物。
结果如图1和图2。
图1中姜制厚朴负离子总离子流图，图中1是荜澄茄醇，2是绿原酸，3是芥子醛，4是瑞枯灵，5是芦丁，6是厚朴三酚，7是甲基丁香酚，8是厚朴木脂素，9是和厚朴酚，10是和厚朴新酚，11是厚朴酚，12是厚朴醛，13是十四烷酸，14是辣薄荷基厚朴酚，15是双辣薄荷基厚朴酚，16是油酸，17是十六烷酸。
具体解析如下：
负离子总离子流图中，成分1的质谱图给出m/z 355.3602的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C20H20O6，MS2谱中有[C7H10O2]-[C10H7O3]-[C11H11O3]-，[C11H13O4]-的碎片离子，经对比鉴定为荜澄茄醇，结构式为
成分2的质谱图给出m/z 353.3065的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C16H18O9，MS2谱中有[C10H7O4]-[C7H11O6]-[C11H11O3]-，[C16H17O9]-的碎片离子，经与对比鉴定为绿原酸，结构式为
成分3的质谱图给出m/z 206.2105的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C11H12O4，MS2谱中有[C7HO2]-[C8H5O]-[C7H3O2]-，[C8H7O]-的碎片离子，经对比鉴定为芥子醛，结构式为
成分4的质谱图给出m/z 327.3902的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C19H23NO，MS2谱中有[C5H2]-[C9H6NO]-[C7H11O]-，[C10H13NO]-的碎片离子，经对比鉴定为瑞枯灵，结构式为
成分5的质谱图给出m/z 609.5183的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C27H30O16，MS2谱中有[C6H11O4]-[C15H8O7]-[C15H9O7]-，[C27H29O16]-的碎片离子，经对比鉴定为芦丁，结构式为
成分6的质谱图给出m/z 241.2694的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C15H14O3，MS2谱中有[C13H7O2]-[C13H9O2]-[C15H11O2]-，[C15H13O3]-的碎片离子，经对比鉴定为厚朴三酚，结构式为
成分7的质谱图给出m/z 177.2338的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C11H14O2，MS2谱中有[C5H2]-[C5HO]-[C5H]-，[C6H5]-的碎片离子，经对比鉴定为甲基丁香酚，结构式为
成分8的质谱图给出m/z 609.5183的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C18H20O4，MS2谱中有[C7HO3]-[C8H5O2]-[C9H9O]-，[C7H6O3]-的碎片离子，经对比鉴定为厚朴木脂素。
成分9的质谱图给出m/z 265.3344的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C18H18O2，MS2谱中有[C13H9O2]-[C14H13O]-[C14H13O2]-，[C16H17]-的碎片离子，经对比鉴定为和厚朴酚，结构式为
成分10的质谱图给出m/z 281.3498的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C18H18O3，MS2谱中有[C15H11O]-[C16H15O]-[C18H13O]-，[C18H15O]-的碎片离子，经对比鉴定为和厚朴新酚，结构式为
成分11的质谱图给出m/z 265.3344的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C18H18O2，MS2谱中有[C15H11O2]-[C16H150]-[C18H15O]-，[C18H17O2]-的碎片离子，经对比鉴定为厚朴酚，结构式为
成分12的质谱图给出m/z 279.3182的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C18H16O3，MS2谱中有[C11H5]-[C6H12O3]-[C18H15O3]-，的碎片离子，经对比鉴定为厚朴醛，结构式为
成分13的质谱图给出m/z 226.3710的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C14H28O2，MS2谱中有[C3H11O2]-[C8H15O]-[C9H19]-，[C11H19O2]-的碎片离子，经对比鉴定为十四烷酸。
成分14的质谱图给出m/z 401.5680的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C28H34O2，MS2谱中有[C10H11O]-[C17H11O2]-[C18H15O]-，[C22H17O2]-的碎片离子，经对比鉴定为辣薄荷基和厚朴酚，结构式为
成分15的质谱图给出m/z 537.8027的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C38H50O2，MS2谱中有[C21H25O2]-[C33H39O2]-[C33H41O2]-，[C38H49O2]-的碎片离子，经对比鉴定为双辣薄荷基厚朴酚，结构式为
成分16的质谱图给出m/z 255.4240的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C16H32O2，MS2谱中有[C16H31O2]-的碎片离子，经对比鉴定为十六烷酸。
图2是姜制厚朴正离子总离子流图。图中1是武当木兰碱，2是异苏萨林，3是芥子醛，4是瑞枯灵，5是乙酸肉桂酯，6是丁香树脂酚，7是Lirinidine，8是番荔枝碱，9是罗默碱，10是观音莲明，11是厚朴三酚，12是1，4-桉叶醇，13是，14是a-沉香呋喃，15是和厚朴酚，16是醋酸龙脑酯，17是和厚朴新酚，18是丁香酚，19是厚朴酚，20是厚朴醛，21是a-姜黄烯，22是蓝桉醇，23是石竹烯醇，24是愈创萜醇，25是十四烷酸，26是辣薄荷基和厚朴酚，27是a-律草烯，28是双辣薄荷基厚朴酚，29是油酸。
具体解析如下：
成分1的质谱图给出m/z 196.2580的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C11H17NO2，MS2谱中有[C2O2]+[C3H4O]+[C3H6N]+，[C4H8]+的碎片离子，经对比鉴定为武当木兰碱，结构式为
成分2的质谱图给出m/z 194.2420的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C11H15NO2，MS2谱中有[C11H16NO2]+的碎片离子，经对比鉴定为异萨苏林，结构式为
成分3的质谱图给出m/z 209.2105的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C11H12O4，MS2谱中有[C3H3O]+[C4H7]+[C3H5O2]+，[C5H30]+的碎片离子，经对比鉴定为芥子醛，结构式为
成分4的质谱图给出m/z 330.3902的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C19H23NO4，MS2谱中有[C4H5O2]+[C6H3O]+[C6H11O2]+，[C8H12N]+的碎片离子，经对比鉴定为瑞枯灵，结构式为
成分5的质谱图给出m/z 177.2117的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C11H12O2，MS2谱中有[C2H5O2]+[C7H5]+的碎片离子，经对比鉴定为乙酸肉桂酯，结构式为
成分6的质谱图给出m/z 419.4370的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C22H26O8，MS2谱中有[C6H8O2]+[C6H11O2]+[C7H7O3]+，[C7H9O3]+的碎片离子，经对比鉴定为丁香树脂酚，结构式为
成分7的质谱图给出m/z 343.5590的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C18H19NO2，MS2谱中有[C2HO2]+[C3H5O]+[C3H7N]+，[C4H9]+的碎片离子，经对比鉴定为lirinidine。
成分8的质谱图给出m/z 265.3070的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C17H15NO2，MS2谱中有C9H11NO2]+[C10H12NO2]+[C11H11NO2]+，[C12H13O2]+的碎片离子，经对比鉴定为番荔枝碱，结构式为
成分9的质谱图给出m/z 280.3330的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C18H17NO2，MS2谱中有[C5H5]+[C5H6]+[C7H6O2]+，[C9H9O2]+的碎片离子，经对比鉴定为罗默碱，结构式为
成分10的质谱图给出m/z 292.3010的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C18H13NO3，MS2谱中有[C2H2NO+]+[C4H5NO]+[C8H4NO]+，[C15H6NO3]+的碎片离子，经对比鉴定为观音莲明，结构式为
成分11的质谱图给出m/z 243.2691的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C15H14O3，MS2谱中有[C4HO2]+[C5H5O2]+[C4H5O2]+，[C5H5O]+的碎片离子，经对比鉴定为厚朴三酚，结构式为
成分12的质谱图给出m/z 183.3027的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C12H22O，MS2谱中有[C4H5]+[C4H8]+[C3H5O]+，[C4H9]+的碎片离子，经对比鉴定为1，4-桉叶素，结构式为
成分13的质谱图给出m/z 183.3027的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C12H22O，MS2谱中有[C4H5]+[C4H8]+[C3H5O]+，[C4H9]+的碎片离子，经对比鉴定为1，4-桉叶素。
成分14的质谱图给出m/z 221.3528的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C15H24O，MS2谱中有[C4H7]+[C4H8]+[C3H5O]+，[C5H7]+的碎片离子，经对比鉴定为α-沉香呋喃，结构式为
成分15的质谱图给出m/z 283.3438的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C18H18O2，MS2谱中有[C8H3O]+[C9H7]+[C9H7O]+，[C11H9]+的碎片离子，经对比鉴定为和厚朴酚，结构式为
成分16的质谱图给出m/z 283.3438的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C18H18O2，MS2谱中有[C8H3O]+[C9H7]+[C9H7O]+，[C11H9]+的碎片离子，经对比鉴定为和厚朴酚，结构式为
成分17的质谱图给出m/z 283.3438的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C18H18O3，MS2谱中有[C4H7]+[C6H5]+[C5H30]+，[C6H7]+的碎片离子，经对比鉴定为和厚朴新酚，结构式为
成分18的质谱图给出m/z 165.2596的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C10H12O2，MS2谱中有[C6H]+[C5H3O]+[C6H7]+，[C4HO2]+的碎片离子，经对比鉴定为丁香酚，结构式为
成分19的质谱图给出m/z 267.3344的准分子离子峰，使用PickView软件推测其可能的化学组成为C18H18O2，MS2谱中有[C9H7]+[C11H7]+[C12H9O]+，[C8H3O]+的碎片离子，经对比鉴定为厚朴酚，结构式为
成分20的质谱图给出m/z 281.3182的准分子离子峰，使用PickView软件推测可能的化学组成为C18H16O3，MS2谱中有[C4HO]+[C5H5]+[C6H5]+，[C6H3O]+的碎片离子，经对比鉴定为厚朴醛，结构式为
成分21的质谱图给出m/z 203.3350的准分子离子峰，使用PickView软件推测可能的化学组成为C15H22，MS2谱中有[C4H2]+[C4H7]+[C5H5]+，[C5H7]+的碎片离子，经对比鉴定为α-姜黄烯，结构式为
成分22的质谱图给出m/z 223.3742的准分子离子峰，使用PickView软件推测可能的化学组成为C15H24，MS2谱中有[C5H5]+[C6H8]+[C6H9O]+，[C7H13]+的碎片离子，经对比鉴定为蓝桉醇，结构式为
成分23的质谱图给出m/z 223.3663的准分子离子峰，使用PickView软件推测可能的化学组成为C15H26O，MS2谱中有[C4H9]+[C3H5O]+[C3H9O]+，[C8H15]+的碎片离子，经对比鉴定为石竹烯醇。
成分24的质谱图给出m/z 223.3663的准分子离子峰，使用PickView软件推测可能的化学组成为C15H26O，MS2谱中有[C5H5]+[C6H8]+[C7H7]+，[C7H13]+的碎片离子，经对比鉴定为愈创萜醇，结构式为
成分25的质谱图给出m/z 229.3710的准分子离子峰，使用PickView软件推测可能的化学组成为C14H28O2，MS2谱中有[C3H3]+[C2H9]+[C5H5]+，[C7H13]+的碎片离子，经对比鉴定为十四烷酸。
成分26的质谱图给出m/z 403.5688的准分子离子峰，使用PickView软件推测可能的化学组成为C28H34O2，MS2谱中有[C9H5O]+[C15H11O2]+[C16H15O]+，[C17H19]+的碎片离子，经对比鉴定为辣薄荷基和厚朴酚，结构式为
成分27的质谱图给出m/z 205.3510的准分子离子峰，使用PickView软件推测可能的化学组成为C15H24，MS2谱中有[C5H5]+[C6H8]+[C6H9O]+，[C7H13]+的碎片离子，经对比鉴定为α-葎草烯，结构式为
成分28的质谱图给出m/z 539.8022的准分子离子峰，使用PickView软件推测可能的化学组成为C38H50O2，MS2谱中有[C6H9]+[C29H35O2]+[C35H45O2]+，[C35H46O2]+的碎片离子，经对比鉴定为双辣薄荷基厚朴酚，结构式为
成分29的质谱图给出m/z 539.8022的准分子离子峰，使用PickView软件推测可能的化学组成为C18H34O2，MS2谱中有[C4H7]+[C3H5O]+[C4H9]+，[C4H10]+的碎片离子，经对比鉴定为油酸。
实施例2：检测6批次姜炙厚朴样品的标准指纹图谱
取姜制厚朴样品6批次，编号为：HCZY-KL-111201、HCZY-KL-111202、HCZY-KL-111203、HCZY-KL-111204、HCZY-KL-111205、HCZY-KL-111206，均由南京海昌中药集团有限公司提供，规格：100g/袋，按实施例1条件进行检测，得6批次样品的超高效液相-飞行时间质谱技术(UPLC/Q-TOF MS)HPLC指纹图谱。采用“中药色谱指纹图谱相似度评价***2004A版”评价结果得出6批次姜炙厚朴样品指纹图谱与对照共有峰HPLC指纹图谱比较，中位数相关系数在0.806～0.979之间，均值相关系数在0.863～0.984之间，检测得到的6批姜炙厚朴相似度较高。
以上实施例仅为本发明的示例性实施例，不用于限制本发明，本发明的保护范围由权利要求书限定。本领域技术人员可以在本发明的实质和保护范围内，对本发明做出各种修改或等同替换，这种修改或等同替换也应视为落在本发明的保护范围内。

Claims (7)

1.一种姜炙厚朴的质量检测方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
A、样品溶液的制备：称取姜炙厚朴粉末，用甲醇提取，离心，取上清液，加水，过固相萃取柱，再用甲醇洗脱，收集洗脱液，离心，取上清液，利用甲醇稀释，得到样品溶液；
B、精密吸取样品溶液，注入超高效液相色谱仪，并采用飞行时间质谱进行检测；
B、成分鉴定：根据XIC Manager数据处理软件中各种成分的分子式列表，将分子式列表的精确质量数与计算的理论质量数对比，筛选出相匹配的成分；并根据步骤B的飞行时间质谱的二级质谱中的碎片信息分析化合物的裂解方式，鉴别出姜炙厚朴中的化合物。
2.根据权利要求1所述的姜炙厚朴的质量检测方法，其特征在于，所述步骤A样品溶液的制备：称取姜炙厚朴粉末，用体积浓度50-90％的甲醇，在40℃下超声提取，离心，取上清液，加水，过Waters Oasis HLB SPE固相萃取柱，再用甲醇洗脱，收集洗脱液，离心，取上清液，利用甲醇进行20倍稀释，得到样品溶液。
3.根据权利要求1所述的姜炙厚朴的质量检测方法，其特征在于，所述步B中超高效液相色谱仪的液相柱为Brownlee SPP液相柱，规格为2.7μm，2.1mm×100mm，氮气流速为900L·h-1。
4.根据权利要求1所述的姜炙厚朴的质量检测方法，其特征在于，步骤B的液相色谱条件为：流动相为乙腈和水，梯度洗脱，流速：0.3ml/min，进样量3μL；柱温40℃；
质谱条件为：离子化模式为ESI，正、负离子扫描，毛细管电压为3.5kV，CE电压为45V，除溶剂气体为氮气，除溶剂温度为550℃，离子源温度为120℃，MS/MS MODE-10MS/MS，每秒50-1300m/z 80毫秒，IDA，动态背景扣除开启；循环时间：1秒；数据处理：PeakView SoftwareTM数据处理软件。
5.根据权利要求4所述的姜炙厚朴的质量检测方法，其特征在于，步骤B的梯度洗脱程序为：0-3min，5％-13％乙腈，95％-87％水；3-6min，13％-21％乙腈，87％-79％水；6-13min，21％-30％乙腈，79％-70％水；13-18min，30％-45％乙腈，70％-55％水；18-23min，45％-55％乙腈，55％-45％水；23-24min，55％-100％乙腈，45％-0％水；24-32min，100％乙腈，32-35min，5％乙腈，95％水。
6.根据权利要求1所述的姜炙厚朴的质量检测方法，其特征在于，所述的姜炙厚朴的炮制方法为：取厚朴丝100份，加姜汁10份拌匀，闷润至姜汁被吸尽，用文火80-120摄氏度炒干。
7.根据权利要求1所述的姜炙厚朴的质量检测方法，其特征在于，步骤C中鉴别的化合物包括厚朴酚、和厚朴酚、和厚朴新酚、厚朴醛、双辣薄荷基厚朴酚、辣薄荷基和厚朴酚、厚朴三酚、荜澄茄醇、愈创萜醇、厚朴木脂素、1，4-桉叶素、丁香烯、9，12-十八碳二烯醛、罗默碱、番荔枝碱、观音莲明、瑞枯灵、武当木兰碱、丁香酚、甲基丁香酚、乙酸肉桂酯、十四烷酸、油酸、十六烷酸、a-律草烯、蓝桉醇、芥子醇、丁香树脂酚、醋酸龙脑酯、a-沉香呋喃、石竹烯醇、异萨苏林、a-姜黄烯、绿原酸、芦丁。
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