CN1086532A - 一种用于美容护肤制剂的抗氧化剂 - Google Patents
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Abstract
本发明的一种用于美容护肤制剂的抗氧化剂,包
含一定配比的余甘果粉、茶多酚,维生素E;其中余甘
果粉和茶多酚都是自由基和活性氧的极好的消除剂,
它们与维生素E复合,相互协同,成为一种全能的自
由基、活性氧的清除剂及脂质过氧化的阻断剂。将本
发明抗氧化剂掺入护肤霜或美容营养液仍能保持其
全能的抗氧化特性,并具有安全、无毒副作用。
Description
本发明涉及一种抗氧剂,尤其涉及一种用于日用化妆品的抗氧化剂。
传统的美容方法多为“涂脂抹粉”,以美化为主,不少化妆品会引起皮炎,甚至使皮肤老化,尤其是把一些人工合成的化学试剂引入化妆品制剂中后,其弊病较多。随着对皮肤疾病的深入研究,发现皮肤的色斑、炎症、干燥老化等病变过程与自由基、活性氧的代谢失调密切相关。正常人体在呼吸代谢过程中,氧会被转化为自由基、活性氧;同时,体内又自发形成包括超氧化物歧化酶(SOD)和硒谷胱甘肽过氧化物酶(SeGSHPx)在内的抗氧化物来清除过量的自由基、活性氧,使自由基、活性氧的产生和清除处于动态平衡中,不致病变。但人体皮肤的裸露部分,由于受到强烈的紫外线照射以及空气污染等环境的毒害,会引发体内产生过多的自由基、活性氧,在辐射损伤、癌变、炎症、心脑血管病变,机体老化等过程中,体内也会产生过量的自由基、活性氧,与此同时,体内的抗氧化物如SOD含量则相对下降,导致自由基、活性氧代谢失衡,从而使体内蛋白质变性,多糖降解,酶失活,DNA链断裂,膜通透性改变,细胞活性下降,于是就出现皮肤的色斑、炎症、皱纹等病变。因此,如何将抗氧化物引入机体,矫正自由基、活性氧代谢的失调,即,清除下列四种活性氧:超氧化阴离子(O
),过氧化氢(H2O2),羟自由基(OH·)和单线态氧(1O2),就成为近代研究美容护肤的一个热门课题。近年来市场上纷纷出现的含有SOD的化妆品,都是这种构思的产物。但是,实践结果表明,将SOD引入化妆品有不少缺陷,主要是:
2.引入化妆品的SOD是从人体及猪、牛、羊动物血液中提取的蛋白质,属大分子物质,其分子量在30,000道尔顿以上,不易透过皮肤,它的活性在进入人体血液中6分钟后就衰减一半,难以长效地发挥清除O
的能力。
3.SOD的耐热性差,制成霜剂时很易失活,久活极易变质。
4.SOD是酶,酶制剂的工艺较复杂,成本高,价格贵。
因此,研究取代SOD的技术,有效也清除体内过量的自由基、活性氧,又成为当前研究美容护肤的一个热点。
当前国际化妆品行业还有一个热点是“回归大自然”,其道理是不言而喻的。
本发明的目的,正是针对上述热点问题,从植物中筛选出高效的天然抗氧化剂和营养剂,并把它们引入化妆品,使化妆品带有药效性。由于自由基、活性氧代谢失衡时产生的过量自由基、活性氧是多种类的,故本发明要求组入化妆品中的抗氧化剂,应是较全能的、带有营养性的、易被皮肤所吸收的,能真正增强皮肤抗自由基、活性氧的能力,从而有效地清除或减少色斑,修复受损皮肤,护肤健美,延缓皮肤的老化进程。
本发明抗氧化剂(Syget)由一种亚热带野生植物-余甘的果实提取物(粉剂或浓缩液)、茶多酚和维生素E按照一定的配比组成的组合物。
余甘(Phyllanthus emblica L.)果实含有富实的营养成分,如维生素C(比橙汁高20倍)、维生素PP、维生素B1、B2、胡罗卜素、多种氨基酸、蛋白质、有机酸及Fe、Zn、Ca、Se等微量元素。最近的研究发现它还含有某种类SOD活性的、能清除超氧化阴离子(O
)的物质。本发明中的余甘果粉由中国材料院资源昆虫研究所提供。
茶多酚是从绿茶中提取的,它是一种非常有效的较全能的抗氧化剂。
维生素E是一种公知的脂质过氧化的抑制剂。
上述三种组分皆为小分子物质,容易透过皮肤,且热稳定性好,长期贮存不会丧失其活性。
CL法是指化学发光测量法。一些氧化还原的化学反应过程,释放的化学能可以使其反应产物或敏化物质处于激发态,激发态不稳定,在其退激时放出光子,此称为化学发光。例如,有氧条件下,黄嘌呤氧化酶催化黄嘌呤的化学反应,产生尿酸和O
,产生O
就是一种激发分子。存在有敏化剂鲁米诺时,O
可将其激发能转交给鲁米诺,该鲁米诺处于激发态。激发的鲁米诺返回基态时释放425nm的光。如果在本发光体系中加入O
自由基的清除剂-余甘果提取物或茶多酚,去与鲁米诺竞争O
的能量,则鲁米诺的化学发光强度下降。藉此可以用化学发光的强度为指标,判断抗氧化剂的效价。
本发明采用化学发光分析法(CL)、顺磁共振自旋捕集技术(ESR)和比色分析法研究了本发明抗氧化剂(Syget)中余甘果粉和茶多酚的抗氧化特性:
本发明供试验用的Wester大鼠购自上海生物制品研究所实验动物中心,体重180克左右,雄性。实验之前每天喂饲1mg/ml余甘液2次,每天1ml,连续喂5-7天,共喂10-14mg。
昆明种小鼠取自华东师大生物系动物房,雄性,体重22-25克,麻醉后,剃去腹部皮肤的毛,取出皮肤作化妆品中Syget的透皮试验。
试验所用药品有:黄嘌呤、鲁米诺购自Sigma公司;黄嘌呤氧化酶、调理的酵母多糖为本实验室自制;NaCl、KH2PO4、K2HPO4、FeSO4、H2O2、CuSO4、NaOCl等药品为国产分析纯试剂;SOD、LPO药盒(测脂质过氧化药盒)购自南京铁道医学院;美容霜剂基质由南源永芳集团公司提供。
二甲基吡啶N-氧化物[DMPO(5,5-dimethyl-1-pyrroline-l-Oxide)]购自南京大学化工厂。
试验用仪器有:发光计有两种:(1)SHG-1型生物化学发光测量仪(与本宝与上海技术监督局工厂联合研制)和(2)FH463A定标器加BH0057光度计探头组成的发光计(北京核仪器厂产).Varian 112EPR谱仪(顺磁共振谱仪),美国产,由中科院原子核所ESR室代测信号,721分光光度计(国产)。
本发明用化学发光分析法测活性氧的化学发光体系有:1.黄嘌呤、黄漂呤氧化酶、鲁米诺产生O
的化学发光体系,测量Syget及其组分对O
的清除作用,以发光的抑制率为纵座标,药物浓度为横座标作图,从图中找出抑制发光50%的浓度(IC50)来衡量药物的清除O
的活性,一般命之为一个活力单位。
2.H2O2-CoCl2-luminol化学发光体系,测量药物清除H2O2的活性。
3.Vit.C.-Cu2+-酵母化学发光体系,测药物清除OH·的活性。
4.NaOCl+H2O2+酵母化学发光体系,测药物清除单线态氧(1O- 2)的活性。
5.全血吞噬细胞化学发光体系,探测药物对活性氧的清除作用,观察其全能性和体内的PMN细胞(多形核白细胞)的活性。
6.取大鼠全脑制备生理盐水匀浆,取样加温至37℃(半小时),测其自发的超微弱发光强度,以对照组的发光强度为1.0,缺血重灌组,缺血重灌加药组发光强度对照发光强度的比率,来表示组织的脂原过氧化的强度。
(一)用化学发光法(CL)、顺磁共振法(ESR)测试了本发明抗氧化剂(Syget)中的A组分(余甘果粉)及B组分(茶多酚)的清除自由基及活性氧的作用,都以IC50来表示:(见表1)
表1.Syget组分A和B清除活性氧的能力(IC50)
活性氧的名称 | CL法 | ESR法 | ||
A | B | A | B | |
O | 0.1μg/ml | 0.45μg/ml | ||
H2O2 | 250μg/ml | - | ||
OH· | 255μg/ml | 28μg/ml | 440μg/ml | 120μg/ml |
1O2 | 139μg/ml | - | ||
PMN-CL | 350μg/ml | 35μg/ml |
由表1可见,A与B组分都是全能的自由基清除剂,CL法与ESR法所测的结果相似,A的抗氧化效果虽然不如B,但它还有营养作用,而B主要是起抗氧化作用,B对A的抗氧化有协同作用。
(二)抑制脂质过氧化,提高细胞内SOD的活性
在大鼠大脑缺血缺氧模型试验中表明,A组分能抑制缺血再灌所致的血浆和大脑的LPO,以丙二醛(MDA)形成的指标,分别降低4.6%和44.3%,红细胞的内源SOD提高23.1%。据刘风书副教授等对老年人红细胞SOD和血浆的LPO的测度表明,服用A前后,血浆LPO降低11%,红细胞SOD升高1.3倍(表2)。
表2.A成份提高老年人红细胞的SOD、降低LPO的作用
以上实验充分说明,余甘果粉和茶多酚均有效地清除多种自由基、活性氧,尤其是余甘果粉,不仅可清除自由基、活性氧,降低LPO,而且能大大提高体内SOD的活力,增强机体的抗病能力。
本发明将抗氧化剂(Syget)引入护肤霜剂时发现,Syget霜剂中Syget温度过高时,虽然其抗氧化和营养效果极佳,但供霜剂颜色变深,影响美观;浓度过低时,则抗氧化和营养效果不够理想。为了兼顾抗氧化、营养和美观的需要,本发明抗氧化剂中各组份按下配比:
余甘果粉(wt%) 50.00-98.00%
茶多酚(wt%) 1.00-25.00%
维生素E(wt%) 1.00-25.00%
最佳配比为:
余甘果粉(wt%) 83.30-96.80%
茶多酚(wt%) 1.60-8.35%
维生素(wt%) 1.60-8.35%
(三)余甘果粉(A组份)加茶多酚(B组份)的耐热和存贮试验:
1.耐热试验-
本发明通过试验发现,在25-90℃温度范围内,A加B两组份清除O
、OH·及抑制PMN-CL活性变化不大(详见表7)。所以在制作健肤霜和营养液过程中,加热不会影其抗氧化的活性,也说明Syget的耐热性良好。
表7温度对A+B组分抗氧化能力的影响
2.Syget霜剂的存贮试验:取1g Syget霜剂(每100克中含Syget 1g),加入2ml黄嘌呤液,用离心法提取霜剂中的Syget,比较新鲜配制的Syget霜剂和在7、8月间在室温下(其中半个月天气在35℃以上)存放30天的Syget霜剂清除O
的能力,以发光抑制%表示,(取2.5μl提取液)。
表8存贮时间对Syget活性的影响
霜剂清除Syget浓度(%) | 新鲜配制的Syget霜剂(1%) | 存放30天的Syget霜剂(1%) |
发光抑制率(%) | 94.6 | 93.1 |
本发明还进一步对Syget中的A组份进行长期贮存,试验贮存时间对A组份清除O
活力的影响,其中将置于A原汁4℃冰箱中密封存贮1年多,A干粉封装于塑料袋,干燥条件下存放半年多,其清除O
的活力下降较小(表9)。干粉受潮时活力下降则较甚,只要保存妥当,A原汁和干粉可以长期贮存,B干粉的情况也类似于A干粉。
(四)Syget营养霜的透皮能力试验:
取二者沟通的φ为1.1cm,长5cm的玻璃管二根,将同一只小鼠,腹部两侧(对称)取下的二块去毛的皮肤分别捆绑在二根玻管的一端,做二种试验:第一种试验是管内注入1ml的生理盐水,管外皮肤(表皮)上涂布0.5%(wt%)的Syget营养霜100mg,对照组则涂无Syget的霜剂,将玻管挂入玻瓶中(保温),每间隔一定时间取50μl生理盐水测定抑制黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶-鲁米诺发光体系的反光;第二种试验是小管中加生理盐水,管外的玻瓶中加0.5%的Syget盐水,对照组不加Syget,同样从小管内取样测其对O
的清除能力,两种试验都发现Syget都能透过皮肤,使小管内的生理盐水具存抑制发光的能力,随着放置时间的延长,透过量越多,抑制发光的能力越强,浸入含Syget溶液中的皮肤,透明Syget的量远比涂布Syget霜的皮肤多(表10)。
表10 Syget的透皮能力
时间(小时) | 0.5 | 1.0 | 1.5 | 2.0 | 2.5 | 3.0 | 3.5 | 4.0 | 4.5 | 5.0 | 5.5 | 6.0 | |
抑制发光率% | 涂霜 | - | 3.54 | - | 18.7 | - | 25.5 | - | 29.0 | - | 52.5 | - | 64.7 |
浸液 | 23.4 | 67.5 | 75.5 | 88.9 | 89.9 | 94.7 | 95.2 | 97.6 | 96.6 | - | - | - |
以上透皮试验表明,Syget易于进入皮肤,而且透皮率极高。
由上述各种试验可见本发明-“Syget”组分中的余甘果粉(A组分)和茶多酚(B组分)都是自由基、活性氧的极好的清除剂,它们与维生素E复合,相互协同,可称为全能的自由基、活性氧的清除剂以及脂质过氧化的阻断剂。将“Syget”掺入护肤霜(外搽)和美容营养液(口服)中以后,仍能保持其全能的抗氧化特性。这些抗氧化剂主要是小分子物质,容易透过皮肤,高效地清除皮肤中产生的过量自由基和活性氧。主剂余甘果粉和茶多酚都是天然植物提取物,安全,无毒副作用,并具有热稳定性,长期贮存不丧失其活性的特点。“Syget”的这些优点,是目前市场热销的SOD化妆品所无法比拟的。
实施例1
在霜剂基质中掺入0.1%的Syget干粉(其中余甘果粉含量83.3%,茶多酚8.35%,维生素8.35%),制成Syget霜剂100g,取出1克作下列试验:
在测定O
的化学发光体系中,加入2ml黄嘌呤液提取Syget,在测定OH·化学发光体系中则用KH2PO4-K2HPO4缓冲液2ml提取Syget,2500转/min离心10min,取底部清液测CL及其抑制率,分别代表对O
和OH·的清除作用,结果见表3。
实施例2
在霜剂基质中掺入0.5%的Syget干粉(其中余甘果粉为96.2%,茶多酚1.90%,维生素E1.90%,制成Syget霜剂100克,取出1克作试验,试验方法同实施例1,试验结果见表3。
实施例3
配置1.0%(wt%)的Syget干粉(其中余甘果粉含量为98.0%,茶多酚1.00%,维生素E1.00%),其余同实施例2。
在测定OH·的化学发光体系中取样50μl。
实施例4-12:改变霜剂基质中所掺入的Syget干粉的含量,以及Syget干粉中各组分配比(见表11),按实施例1的方法进行配制及试验。
表11 实施例4-12
实施例NO. | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 |
霜剂中Syget含量wt% | 0.02 | 0.05 | 0.20 | 0.30 | 0.40 | 0.60 | 0.70 | 0.80 | 0.90 |
Syget余甘果粉wt%茶多酚wt%维生素Ewt% | 50.025.025.0 | 71.414.314.3 | 91.04.504.50 | 93.83.103.10 | 95.22.402.40 | 96.81.601.60 | 97.21.401.40 | 97.51.251.25 | 97.81.101.10 |
Claims (3)
1、一种用于美容护肤制剂的抗氧化剂,其特征在于它包含以下组份(wt%):
余甘果粉 50.0-98.0%
茶多酚 1.0-25.0%
维生素E 1.0-25.00%。
2、如权利要求1所述的抗氧化剂,其特征在于它的最佳的配比为(wt%):
余甘果粉 83.3-96.80%
茶多粉 1.60-8.35%
维生素E 1.60-8.35%
3、如权利要求1所述的用于美容护肤制剂的抗氧化剂,其特征在于它除了制成霜剂外用护肤之外还制成美容营养液口服。
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