CN108567733A - 一种含有石斛干细胞提取物美白抗衰老组合物及其用途 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种含有石斛干细胞提取物美白抗衰老组合物及其用途，美白抗衰老组合物包括以下重量份的成分：石斛干细胞提取物1～3份、蛹虫草提取物10～20份、木瓜提取物5～15份、丹参花/叶/根提取物5～15份。本发明的蛹虫草提取物、木瓜提取物、丹参花/叶/根提取物，与石斛干细胞提取物复配，起到美白祛皱的增效协同作用，在多种提取物协同作用下，产品可以明显改善肤质，提高皮肤弹性，提高皮肤的增生能力降低皮肤的衰老化进程，效果明显高于单独添加其中一种或两种提取物，并且安全无刺激。

Description

一种含有石斛干细胞提取物美白抗衰老组合物及其用途
技术领域
本发明涉及化妆品技术领域，特别涉及一种含有石斛干细胞提取物美白抗衰老组合物及其用途。
背景技术
美白肌肤、去斑养颜、永葆青春、延缓衰老是人们的美好愿望，人们总在想各种办法来解决这个问题。随着年龄的增长，人体天然抗自由基的能力，亦即抗氧化的能力不断下降，人的细胞会衰老，人的外表上也会产生皮肤粗糙、色素沉着等问题，人体组织器官也会迅速衰老。随着我国经济的发展及人们生活水平的提高，人们对生活质量有了更高的要求，美白肌肤、去斑养颜、永葆青春、延缓衰老这一世界性课题在我国也日益受到关注。
目前市面上美白或祛皱的产品很多，大部分是经过化学合成制得的，虽然在短时间内能够带来效果，但是并没有根本解决问题，且过多的化学产品会导致皮肤过敏等现象，使得皮肤问题更严重。
石斛是我国名贵中药材，被列入世界濒危保护植物，我国已知76个品种，全世界约有1500个品种。《神农本草经》等记载，石斛具有除痹、下气，补五脏虚劳，逐皮肤邪热，强阴等功效，经研究发现石斛能显著提高超氧化物歧化酶(SOD)水平，降低过氧化脂质(LPO)，调节脑单胺类神经介质水平，抑制类似单胺氧化酶(MAO)，起到延缓衰老的作用。近些年备受关注的石斛兰多糖也具有显著的免疫增强活性和抗衰老、抗辐射等多种功效，如铁皮枫斗晶、石斛散、清咽宁、益肠汤、石斛露、石斛精、养阴口服液及石斛片等。以铁皮石斛加工的“枫斗”或“耳环石斛”，被称为"“金耳石斛兰”、“石斛兰环”、“金枫斗”，畅销于东南亚及欧美。
植物干细胞(plant stem cell)是未分化的细胞，具有很强的自我更新和持续***能力。研究表明，含有干细胞的护肤品可以刺激细胞更新，促进胶原蛋白分泌，使用干细胞的效果比一般的护肤品更快速有效。中国专利CN 102670438B公开了一种抗衰老美容护肤品，含有植物干细胞活性物0.001～3wt％，Dragosine肌肽0.01～3wt％，所述的植物干细胞活性物为PhytocelltecTMMalusDomestica苹果干细胞、PhytocelltecTMSolarVitis葡萄干细胞、Phytocell tecTMAlp Rose玫瑰叶干细胞、PhytocelltecTM Argan坚果干细胞、RegenistemRiceAp红米干细胞中的至少一种。该美容护肤品具有改善肤质，提高皮肤弹性的作用。
目前，关于石斛干细胞用于护肤品中，未见有相关报道，因此，本发明选用石斛干细胞与其他提取物复配，研究出既抗衰老又同时能够美白的组合物。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种含有石斛干细胞提取物的美白抗衰老组合物及其用途，该抗衰老组合物较好的抗衰老去皱功能，同时又具备美白作用。
为实现上述目的，本发明所采取的技术方案：一种美白抗衰老组合物，包括以下重量份的成分：石斛干细胞提取物1～3份、蛹虫草提取物10～20份、木瓜提取物5～15份、丹参花/叶/根提取物5～15份。
现有技术中一般是采用单个提取物进行美白抗衰老，然而其效果不尽理想，本申请发明人经过大量研究发现，将石斛干细胞提取物、蛹虫草提取物、木瓜提取物、丹参花/叶/根提取物进行复配，其美白抗衰老效果显著优于单独提取物；且现有技术中未发现使用石斛干细胞提取物应用于抗衰老护肤品中，石斛干细胞具有强大的抗氧化性和抗衰老活性，可以增加人体血浆中的SOD的浓度，增强抵抗氧自由基的能力，而且还可以增强胶原蛋白的浓度，从根本上预防面部衰老的问题。
优选地，美白抗衰老组合物包括以下重量份的成分：石斛干细胞提取物1.5～2.5份、蛹虫草提取物15～20份、木瓜提取物10～15份、丹参花/叶/根提取物8～15份。
本发明组合物中，组分的配比会影响组合物的效果，研究发现，在所述优选的重量份范围内，本发明组合物的美白抗氧化效果更佳。
优选地，美白抗衰老组合物包括以下重量份的成分：石斛干细胞提取物2份、蛹虫草提取物16份、木瓜提取物15份、丹参花/叶/根提取物10份。
申请人在大量实验中意外发现，在该特定的重量份下，本发明组合物的美白抗氧化效果达到最佳。
优选地，所述石斛干细胞提取物与蛹虫草提取物的质量比为1:8。
申请人在大量实验中意外发现，在该特定的重量配比下，本发明组合物的抗氧化效果达到最佳。
优选地，所述石斛干细胞提取物与木瓜提取物的质量比为1:7。
申请人在大量实验中意外发现，在该特定的质量配比下，本发明组合物的美白效果达到最佳。
美白抗衰老组合物在制备护肤品中的应用。
一种含美白抗衰老组合物的护肤品。
优选地，所述美白抗衰老组合物在所述护肤品中的质量百分比为1～6％。
优选地，所述美白抗衰老组合物在所述护肤品中的质量百分比为5％。
优选地，所述护肤品为面霜、乳液、爽肤水、精华露、洗面奶。
本发明所用美白抗衰老组合物主要成分以及功效如下：
石斛：经研究发现石斛能显著提高超氧化物歧化酶(SOD)水平，降低过氧化脂质(LPO)，调节脑单胺类神经介质水平，抑制类似单胺氧化酶(MAO)，起到延缓衰老的作用。近些年备受关注的石斛兰多糖也具有显著的免疫增强活性和抗衰老、抗辐射等多种功效，如铁皮枫斗晶、石斛散、清咽宁、益肠汤、石斛露、石斛精、养阴口服液及石斛片等，以铁皮石斛加工的“枫斗”或“耳环石斛”，被称为“金耳石斛兰”、“石斛兰环”、“金枫斗”，畅销于东南亚及欧美。
本发明选用石斛的干细胞为原料，植物干细胞包含有关于植物发育和生长的所有程式，拥有永恒生命力的细胞，是植物生命力的根源(origin)。植物干细胞存在于被称为分生组织的特殊构造内，具有非常惊人的再生能力。这些使得植物可以在数百年间不断生长，并生成全新的器官。植物干细胞是皮肤干细胞新陈代谢的主要原料和源泉，能快速激活休眠干细胞，促进干细胞自我修复更新，还原表皮干细胞初生活力，使皮肤细胞源源新生，从而达到提升、紧致皮肤、淡化皱纹的抗衰老效果，同时能够更容易被皮肤吸收植物的营养成分；加快人体新陈代谢。
蛹虫草：是麦角菌科真菌冬虫夏草寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体，是一种传统的名贵滋补中药材，有调节免疫***功能、抗肿瘤、抗疲劳，降血脂等多种功效。药理学现代研究结果中，冬虫夏草含有虫草酸约7％，碳水化合物28.9％，脂肪约8.4％，蛋白质约25％，脂肪中82.2％为不饱和脂肪酸，此外，尚含有维生素B12、麦角脂醇、六碳糖醇、生物碱等。冬虫夏草提取物可以提高亚急性衰老小鼠红细胞，肝脏和脑中SOD活性，并提高血中过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性。
木瓜：为蔷薇科植物贴梗海棠的干燥成熟果实，性温，味酸，归肝、脾经。具有平肝、舒经活络、健脾开胃、止痛、祛风除湿之功效。
化学成份：木瓜含木瓜酶、皂甙、黄酮类、齐墩果酸、苹果酸，酒石酸、柠檬酸、熊果酸、鞣酸，维生素C等成分。
抗氧化：木瓜粉有较强的抗氧化作用，能够提高脑梗死患者血中超氧化物岐化酶(Soo)活性，降低脂质过氧化物丙二醛(MDA)含量，提高缺血性脑梗死患者的抗氧化功效。
美白：研究表明，木瓜酶能抑制黑色素的形成，发挥祛斑美白的功效。皮肤晒斑、雀斑、黄褐斑等均是由黑色素沉着引起，而黑色素实质上是蛋白质的衍生物，其形成的与酪氨酸酶的阳光照射作用有关。研究认为，细胞内的酪氨酸在酶的催化作用下会形成黑色素，而木瓜酶能使酪氨酸酶分解，并具有阻断酪氨酸酶的催化过程，从而减少形成黄褐斑的黑色素形成。以达到祛除黄褐斑的作用。
抗炎:木瓜提取物对乙酸致小鼠腹腔毛细血管通透性、二甲苯致小鼠耳廓肿胀和大鼠棉球肉芽肿的形成均有显著的抗炎作用，能明显延长小鼠的疼痛阀值。抑制小鼠腹腔毛细血管通透性、二甲苯小鼠耳廓和大鼠棉球肉芽肿形成。
丹参：丹参(SalviamiltiorrhizaBge)中的酚酸类、叶绿素等具有抗氧化、清除自由机、抗衰老的作用。
本发明的有益效果在于：石斛干细胞具有强大的抗氧化性和抗衰老活性，可以增加人体血浆中的SOD的浓度，增强抵抗氧自由基的能力，而且还可以增强胶原蛋白的浓度，从根本上预防面部衰老的问题，同时添加具有美白、活肤、可以减少氧自由基蛹虫草提取物、木瓜提取物、丹参花/叶/根提取物，与石斛干细胞提取物进行复配，起到美白抗衰老的增效协同作用，在多种提取物协同作用下，产品可以明显改善肤质，提高皮肤弹性，提高皮肤的增生能力降低皮肤的衰老化进程，效果明显高于单独添加其中一种或两种提取物，并且安全无刺激。
具体实施方式
以下实施例所涉及各原料如无特别说明，均为市售通用产品。
本发明所述石斛干细胞提取物的制备方法为：1)选取优质的石斛叶，并进行清洁消毒，并切成末状，制造愈伤组织；2)将愈伤组织接种于固体培养基进行诱导培养，切取愈伤组织的再生部位以进行继代培养，培养后的产物进行转移至液体培养基中进行扩大培养，再转移至生物反应器进行大规模培养，直至获得饱和的石斛干细胞悬浮液；3)将2)中获得石斛干细胞悬液，用1μm过滤器过滤，去掉培养基，收获截留的细胞；并将细胞放入-80℃的超低温冷冻2小时，然后取出解冻30分钟，重复上述操作5次，最后一次室温解冻后，用超声波破碎仪破碎细胞，过滤器过滤后，搜集滤液，于旋转式真空蒸发器内浓缩，即可获得石斛干细胞提取物。
上述的愈伤组织的制作以及培养方法、以及采用的继代培养、扩大培养、大规模培养的方式，以获得饱和的干细胞，均采用本领域公知的方法，在此不做详细描述。
丹参花/叶/根提取物可采用现有方法制备得到或者从市场上购买所得；也可以采用以下方法制得；
丹参花/叶/根提取物的制备：1)选择生长100～150天的丹参叶片或者根、花，用清水洗净；2)将原料混合加入水，自液体煮沸时刻开始计时，煮沸30～180分钟；丹参叶片/根/花与水的质量体积比g/ml为0.5～1:10～20；3)停止加热，冷却至30～50℃，过滤；
4)步骤3)得到的滤液再次过滤后，经真空抽滤，即制备得到活性提取物。
一种含有石斛干细胞提取物的美白抗衰老组合物，包括以下重量份的成分：石斛干细胞提取物1～3份、蛹虫草提取物10～20份、木瓜提取物5～15份、丹参花/叶/根提取物5～15份。
本发明的组合物可通过将石斛干细胞提取物、蛹虫草提取物、木瓜提取物、丹参花/叶/根提取物按所述重量份混合得到。
实施例1
本实施例的美白抗衰老组合物，包括以下重量份的成分：石斛干细胞提取物1.5份、蛹虫草提取物15份、木瓜提取物10份、丹参花/叶/根提取物8份。
上述的美白抗衰老组合物应用于膏霜，膏霜包括以下质量百分比的成分：美白抗衰老组合物5％、霍霍巴油8％、甘油硬脂酸酯3％、鲸蜡硬脂醇3％、PEG-10硬脂酸酯2％、透明质酸钠0.15％、卡波姆0.5％、山梨酸钾0.1％，余量为去离子水。
1)将霍霍巴油、甘油硬脂酸酯、鲸蜡硬脂醇、PEG-100硬脂酸酯混合在一起加热至80℃，保温20分钟；2)将透明质酸钠、卡波姆、去离子水、山梨酸钾混合在一起加热至80℃，保温20分钟；3)将步骤2)中混合物加入步骤1)中，均质搅拌，80℃保温10分钟，降温至55℃，加入美白抗衰老组合物，降温至45℃，降温至35℃，出料，灌装得到膏霜。
实施例2
本实施例的美白抗衰老组合物，包括以下重量份的成分：石斛干细胞提取物1份、蛹虫草提取物15份、木瓜提取物5份、丹参花/叶/根提取物5份。
本实施例的美白抗衰老组合物的应用于膏霜中，其中美白抗衰老组合的质量百分比为6％，其余成分与含量以及膏霜制备方法均与实施例1相同。
实施例3
本实施例的美白抗衰老组合物，包括以下重量份的成分：石斛干细胞提取物2份、蛹虫草提取物16份、木瓜提取物15份、丹参花/叶/根提取物10份。
使用该组合物用于制备保湿乳液，保湿乳液包括以下质量百分比成分:含有上述美白抗衰老组合物5％、甘油硬脂酸酯3％、矿酯2.5％、聚二甲基硅氧烷6％、甘油5％、丙二醇5％、矿油5％，1，3-丁二醇20.0％、卡波姆0.5％、三乙醇胺0.5％、山梨酸钾0.5％、余量为去离子水。
该保湿乳液的制备方法，包括以下步骤，1)先用1，3-丁二醇和部分去离子水溶解石斛干细胞提取物、蛹虫草提取物、木瓜提取物、丹参花/叶/根提取物，过滤待用；2)将矿油、矿酯、甘油硬脂酸酯、丙二醇，聚二甲基硅氧烷75℃-80℃搅拌均匀；3)剩余去离子水、甘油、卡波姆、山梨酸钾75℃-80℃搅拌均匀；4)将步骤2)与3)制得的两种混合物先后抽入乳化锅，均质3分钟，加入三乙醇胺；5)搅拌冷却至40℃，加入过滤好的石斛干细胞提取物、蛹虫草提取物、木瓜提取物、丹参花/叶/根提取物，搅匀，冷却至室温即可。
实施例4
本实施例的美白抗衰老组合物，包括以下重量份的成分，石斛干细胞提取物2.5份、蛹虫草提取物20份、木瓜提取物12份、丹参花/叶/根提取物15份。
本实施例应用于制备保湿乳液中，与实施例3不同之处在于，其中美白抗衰老组合物的质量百分比为1％。
实施例5
本实施例的美白抗衰老组合物，包括以下重量份的成分：石斛干细胞提取物2份、蛹虫草提取物10份、木瓜提取物15份、丹参花/叶/根提取物12份。
本实施例美白抗衰老应用于保湿乳液中，与实施例3不同之处在于，其中，上述的美白抗衰老组合物的质量百分比为5％。
实施例6
本实施例的美白抗衰老组合物，包括以下重量份的成分：石斛干细胞提取物3份、蛹虫草提取物18份、木瓜提取物15份、丹参花/叶/根提取物12份。
本实施例应用于保湿乳液中，与实施例3不同之处在于，其中美白抗衰老组合物的质量百分比为5％。
对比例1
本对比例的美白抗衰老组合物，包括以下重量份的成分：蛹虫草提取物16份、木瓜提取物15份、丹参花/叶/根提取物10份。
对比例2
本对比例的美白抗衰老组合物，包括以下重量份的成分：石斛干细胞提取物2份、木瓜提取物15份、丹参花/叶/根提取物10份。
对比例3
本对比例的美白抗衰老组合物，包括以下重量份的成分：石斛干细胞提取物2份、蛹虫草提取物16份、丹参花/叶/根提取物10份。
对比例4
本对比例的美白抗衰老组合物，包括以下重量份的成分：木瓜提取物15份、丹参花/叶/根提取物10份。
对比例5
本对比例的美白抗衰老组合物，包括以下重量份的成分：蛹虫草提取物16份、丹参花/叶/根提取物10份。
对比例6
本对比例的美白抗衰老组合物，包括以下重量份的成分：石斛干细胞提取物5份、蛹虫草提取物16份、木瓜提取物15份、丹参花/叶/根提取物10份。
对比例7
本对比例的美白抗衰老组合物，包括以下重量份的成分：石斛干细胞提取物2份、蛹虫草提取物8份、木瓜提取物15份、丹参花/叶/根提取物10份。
效果例1
本发明实施例1～6抗衰老功效评价试验
对羟自由基清除作用的测定，实验方法按照如下文献提供的方法进行：林向成、汤泉、罗杨合；千年健中总黄酮的提取及抗氧化活性研究[J].广东农业科学,2012,5:96-98；
参照Fenton反应方法，H2O2与二价铁离子混合后产生·OH，·OH具有很高的反应活性，存活时间短，但在反应体系中加入水杨酸，能够有效的捕捉·OH并产生有色产物，该产物在536nm具有很强的吸收，若加入具有清除·OH功能的提取物，并会与水杨酸竞争·OH，从而使紫色产物的生成量减少，采用固定时间反应法，在536nm处测定含本发明组合物以及对比例的组合物的吸光度，并与空白液进行比较，则能够被测物对·OH的清除能力，计算公式：·OH清除率(％)＝100(A0-Ax)/A0×100％。
实验方法：在25ml比色管中2mmol/L FeSO43ml、1mmol/L H2O23ml，摇匀，接着加入6mmol/L水杨酸3ml，摇匀，于37℃水浴加热15min后取出，测其吸光度A0。然后加入一定浓度的待测液0.6ml，然后再加入蒸馏水0.4ml，摇匀，继续水浴加热15min，取出测其吸光度Ax。为消除后加的共1.0ml待测液和蒸馏水所造成的体系吸光度值的降低，方法同上，恒温15min后测其吸光度值A00，加1ml蒸馏水，摇匀后再测一次其吸光度Axx，A降低＝A00-Axx。
待测液对·OH清除率为：·OH清除率(％)＝100(A0-Ax-A降低)/A0
上述待测液为实施例1～6以及对比例1～7的组合物。得到表1；
表1
从表1中可看出，石斛干细胞提取物、蛹虫草提取物、木瓜提取物、丹参花/叶/根提取物均具有抗衰老功效。四者均具有抗衰老功效，其中木瓜提取物、丹参花/叶/根提取物两者复配比蛹虫草提取物、丹参花/叶/根提取物复配效果好，而四者复配其抗衰老功效最好。
对比例6、7中石斛干细胞提取物、蛹虫草提取物、木瓜提取物、丹参花/叶/根提取物组合物的重量份不全在本发明范围之内，可看出，其效果不如本发明，可见石斛干细胞提取物、蛹虫草提取物、木瓜提取物、丹参花/叶/根提取物四种提取物按本发明所述重量份组合在一起，使本发明护肤品的抗氧化效果更好，并且，由表1可知，当石斛干细胞提取物2份、蛹虫草提取物16份、木瓜提取物15份、丹参花/叶/根提取物10份时，本发明护肤品的抗氧化效果最好，这是申请人意外发现的。
效果例2
本发明的美白抗衰老组合物不仅具有抗衰老的效果。同时还具有美白功效，本效果例考察了石斛干细胞提取物和木瓜提取物的质量比对本发明美白抗衰老组合物美白效果的影响。为了考察该影响，我们按照实施例1的方法制备了不同的组合物。各实验组组合物均由下述重量份的组分组成，石斛干细胞提取物1～3份、蛹虫草提取物10～20份、木瓜提取物5～15份、丹参花/叶/根提取物5～15份；其中石斛干细胞提取物与木瓜提取物的质量比如下表2所示。
表2
试验方法：
酪氨酸酶抑制率
酪氨酸酶是一种多酚氧化酶，是皮肤黑色素形成过程中的关键酶、限速酶，酪氨酸酶的活性与黑色素合成量呈正相关，其活性改变可引起色素障碍性皮肤病。酪氨酸酶抑制剂通过抑制酪氨酸酶活性，阻止黑色素形成，可用来预防和治疗色素沉着等疾病。
实验材料：L-酪氨酸溶液(0.5mg/ml)，酪氨酸酶(100U/ml)方法参考现有技术(任清,于晓艳等，微生物酵素美白抗衰老功效研究，香料香精化妆品，2008年3期)测定上述实验组1～4的酪氨酸酶抑制率，得到表3。
2.2.2实验结果
表3
实验组 酪氨酸酶抑制率(％)
实验组1 85.6％
实验组2 83.4％
实验组3 82.7％
实验组4 73.4％
由表3可见，实验组1的护肤品酪氨酸酶抑制率最高，可见，石斛干细胞提取物与木瓜提取物的重量比的重量比为1:7时，本发明护肤品美白的效果达到最佳。
豚鼠皮肤刺激实验
各取0.5g实施例1～6美白抗衰老组合物，采用去离子水稀释至100g配置成受试样品。受试样品采用皮肤刺激性试验方法(《化妆品卫生规范》2007版毒理学试验方法)进行测试。
实验动物：豚鼠体重250g～300g。
实验结果：经14天皮肤刺激试验，未见刺激反应。
最后所应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (10)

1.一种美白抗衰老组合物，其特征在于，包括以下重量份的成分：石斛干细胞提取物1～3份、蛹虫草提取物10～20份、木瓜提取物5～15份、丹参花/叶/根提取物5～15份。
2.根据权利要求1所述的美白抗衰老组合物，其特征在于，包括以下重量份的成分：石斛干细胞提取物1.5～2.5份、蛹虫草提取物15～20份、木瓜提取物10～15份、丹参花/叶/根提取物8～15份。
3.根据权利要求1所述的美白抗衰老组合物，其特征在于，包括以下重量份的成分：石斛干细胞提取物2份、蛹虫草提取物16份、木瓜提取物15份、丹参花/叶/根提取物10份。
4.根据权利要求1所述的美白抗衰老组合物，其特征在于，所述石斛干细胞提取物与蛹虫草提取物的质量比为1:8。
5.根据权利要求1所述的美白抗衰老组合物，其特征在于，所述石斛干细胞提取物与木瓜提取物的质量比为1:7。
6.根据权利要求1～5任一项所述美白抗衰老组合物在制备护肤品中的应用。
7.一种含有如权利要求1～5任一项所述美白抗衰老组合物的护肤品。
8.根据权利要求7所述的护肤品，其特征在于，所述美白抗衰老组合物在所述护肤品中的质量百分比为1～6％。
9.根据权利要求7所述的护肤品，其特征在于，所述美白抗衰老组合物在所述护肤品中的质量百分比为5％。
10.根据权利要求6所述的美白抗衰老组合物在制备护肤品中的应用，其特征在于，所述护肤品为面霜、乳液、爽肤水、精华露、洗面奶。
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