CN108558964B - 一种α-熊果苷的纯化方法 - Google Patents
一种α-熊果苷的纯化方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN108558964B CN108558964B CN201810350597.0A CN201810350597A CN108558964B CN 108558964 B CN108558964 B CN 108558964B CN 201810350597 A CN201810350597 A CN 201810350597A CN 108558964 B CN108558964 B CN 108558964B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- arbutin
- hydroquinone
- purification method
- volume
- ethanol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/203—Monocyclic carbocyclic rings other than cyclohexane rings; Bicyclic carbocyclic ring systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/06—Separation; Purification
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
本发明公开了一种α‑熊果苷的纯化方法,采用纯化水溶解,乙醇改变体系极性,乙酸乙酯或乙酸甲酯萃取残留对苯二酚,乙醇逼晶,降温结晶等方法,高收率的得到对苯二酚残留为零的α‑熊果苷,操作与设备简单,成本较低。
Description
技术领域
本发明涉及α-熊果苷的生产技术领域,特别是涉及一种α-熊果苷的纯化方法,该纯化方法使得α-熊果苷中对苯二酚残留为零。
背景技术
α-熊果苷即4-羟基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷,是目前市场广泛使用的一种酪氨酸酶抑制剂,能有效抑制人体皮肤黑色素细胞中酪氨酸酶的活性,从而减少黑色素的产生,达到美白效果。
目前市场对α-熊果苷中对苯二酚残留要求极高,小于10ppm或者未检出,但是由于现有工艺上极难彻底去除对苯二酚,导致市场上对苯二酚残留为零的α-熊果苷生产厂家极少。
如何连续稳定的将高对苯二酚残留的α-熊果苷纯化为对苯二酚为零的α-熊果苷产品,是本发明要解决的技术问题。
发明内容
本发明提供一种α-熊果苷的纯化方法。本发明采用连续萃取结晶法彻底去除α-熊果苷中对苯二酚残留,本发明连续使用纯化水溶解,乙醇改变体系极性,乙酸乙酯或乙酸甲酯萃取残留对苯二酚,乙醇逼晶,降温结晶等方法,高收率的得到对苯二酚残留为零的α-熊果苷,操作与设备简单,成本较低。
本发明的一种α-熊果苷的纯化方法技术方案为,包括以下步骤:
(1)取α-熊果苷粗品,溶解于纯化水中;
(2)向步骤(1)得到的体系中加入95%乙醇,体系保温70-90℃,冷凝回流搅拌0.5-5h;
(3)向步骤(2)得到的体系中加入乙酸乙酯或乙酸甲酯,体系保温70-90℃,冷凝回流搅拌1-10h,然后体系降温至10-40℃;
(4)停止搅拌,待步骤(3)得到的体系彻底分层后,将水相转移至结晶罐中,降温至5-10℃,继续加入95%乙醇,搅拌结晶6-36h;
(5)将结晶混悬液离心,干燥,粉碎,得到对苯二酚残留为0的α-熊果苷产品。
步骤(1)中,α-熊果苷粗品中对苯二酚残留100-1000ppm,纯化水温度为70-90℃。
步骤(1)中,原料质量与纯化水体积比为1:0.8-1:2.0。
步骤(2)中,加入95%乙醇体积为步骤(1)中纯化水体积的0.1-0.55倍。
步骤(3)中,加入乙酸乙酯或乙酸甲酯体积为步骤(1)中纯化水体积的0.30-1.25倍。
优选的,步骤(3)中,体系降温至30℃。
步骤(4)中,加入95%乙醇体积为步骤(1)中纯化水体积的0.75-1.25倍。
本发明的有益效果为:本发明连续使用纯化水溶解,乙醇改变体系极性,乙酸乙酯或乙酸甲酯萃取残留对苯二酚,乙醇逼晶,降温结晶等方法,高收率的得到对苯二酚残留为零的α-熊果苷,操作与设备简单,成本较低。
附图说明:
图1所示为实施例3中本发明产品高效液相图谱;
图2所示为实施例3中市售A样品高效液相图谱;
图3所示为实施例3中市售B样品高效液相图谱;
图4所示为实施例3中市售C样品高效液相图谱;
图5所示为实施例3中市售D样品高效液相图谱;
图6所示为实施例3中市售E样品高效液相图谱;
图7所示为实施例3中市售F样品高效液相图谱;
图8所示为实施例3中市售G样品高效液相图谱。
具体实施方式:
为了更好地理解本发明,下面用具体实例来详细说明本发明的技术方案,但是本发明并不局限于此。
实施例1
称取原料α-熊果苷1kg(对苯二酚残留498ppm),加入80℃纯化水1.8L,维持80℃搅拌溶解,加入400ml95%乙醇,开启冷凝回流,继续搅拌0.5h,向体系中加入乙酸甲酯1.5L,继续80℃搅拌冷凝回流5h,然后体系降温至30℃,停止搅拌,静置分层,将体系分液,水相降温至5℃,边搅拌边加入1.5L95%乙醇,维持5℃继续结晶36h,将混悬液离心干燥,粉碎得α-熊果苷733g,hplc外标法检测对苯二酚残留为零,其他指标亦均满足国际最高标准,收率73.3%。有机相收集后集中减压蒸馏回收,循环利用。
对苯二酚检测方法
仪器:分析天平,高效液相色谱仪
试剂
磷酸(优级纯),甲醇(色谱纯)
色谱条件
色谱柱:ZORBAX SB-C18,4.6mm×250mm
流动相:0.1%磷酸水溶液(v/v)(T152):甲醇=90:10
柱温:25℃ 流速:1.0ml/min 进样量:5μl 波长:280nm
进样量:20μl,其他色谱条件同“含量”色谱条件
对苯二酚对照溶液
对苯二酚对照贮备溶液:称取对苯二酚0.20g,精密称量,加水溶解并定容到100ml的量瓶中,取1ml加水稀释至1000ml的量瓶中。
对苯二酚对照溶液:取对苯二酚对照贮备液1ml用水稀释至10ml的量瓶中。
供试品溶液:取供试品0.1g,精密称定,用水溶解并稀释至10ml的量瓶中。
***适用性试验
计算6次对照品溶液对苯二酚峰面积的RSD,应不大于6.0%,以对苯二酚峰计算色谱柱的理论板数N,对苯二酚峰的信噪比应大于10。
测试:取对苯二酚对照溶液进样6次,供试品溶液进样2次。以外标法计算对苯二酚含量。
计算公式
注:Ws:对苯二酚对照品的称重,g;Wi:供试品的称量,g;Ai:供试溶液色图谱中对苯二酚的峰面积;As:对照溶液色谱图中对苯二酚的峰面积平均值。
本分析方法重复性好,灵敏度高,最低检出限为0.3ppm。
本批检测报告如表1所示:
表1
实施例2
称取称取原料α-熊果苷200kg(对苯二酚残留564ppm)投入到保温回流罐中,加入75℃纯化水350L,维持75℃搅拌溶解,加入42L95%乙醇,开启冷凝回流,继续搅拌1h,向体系中加入乙酸乙酯400L,继续75℃搅拌冷凝回流4.5h,然后体系降温至20℃,停止搅拌,静置分层,将水相分液至结晶罐中,水相降温至5℃,边搅拌边加入300L95%乙醇,维持5℃继续结晶30h,将混悬液离心干燥,粉碎得α-熊果苷149.8kg,hplc外标法检测对苯二酚残留为零,其他指标亦均满足国际最高标准,收率74.9%。有机相收集后集中减压蒸馏回收,循环利用。
对苯二酚检测方法同实施例1。
本批检测报告如表2所示:
表2
实施例3
将本发明产品与市售样品进行对比报告如下:
市售样品:A、B、C、D、E、F、G、本发明产品
对苯二酚测定方法
采用高效液相色谱法,具体条件如下:
色谱柱:ODS-AP,5μm,4.6mm×250mm
检测波长:280nm
流动相:V甲醇:V水=80:920,含有0.1%的冰醋酸
流速:1.0ml/min
柱温:25℃
进样量:20μl
对苯二酚对照溶液:精密称取对苯二酚0.05g(m0),加水溶解并定容至100ml,混匀。取适量精密稀释,最后对苯二酚对照溶液的浓度为0.05ug/ml。
样品溶液:精密称取样品0.45g(m),加水溶解并定容到100ml,混匀即得。
分别取样品溶液,对苯二酚对照溶液进样分析,外标法定量样品中的对苯二酚含量。
试验结果如表3所示:
表3
Claims (7)
1.一种α-熊果苷的纯化方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)取α-熊果苷粗品,溶解于纯化水中;
(2)向步骤(1)得到的体系中加入95%乙醇,体系保温70-90℃,冷凝回流搅拌0.5-5h;
(3)向步骤(2)得到的体系中加入乙酸乙酯或乙酸甲酯,体系保温70-90℃,冷凝回流搅拌1-10h,然后体系降温至10-40℃;
(4)停止搅拌,待步骤(3)得到的体系彻底分层后,将水相转移至结晶罐中,降温至5-10℃,继续加入95%乙醇,搅拌结晶6-36h;
(5)将结晶混悬液离心,干燥,粉碎,得到对苯二酚残留为0的α-熊果苷产品。
2.根据权利要求1所述的一种α-熊果苷的纯化方法,其特征在于,步骤(1)中,α-熊果苷粗品中对苯二酚残留100-1000ppm,纯化水温度为70-90℃。
3.根据权利要求1所述的一种α-熊果苷的纯化方法,其特征在于,步骤(1)中,原料质量与纯化水体积比为1:0.8-1:2.0。
4.根据权利要求1所述的一种α-熊果苷的纯化方法,其特征在于,步骤(2)中,加入乙醇体积为步骤(1)中纯化水体积的0.1-0.55倍。
5.根据权利要求1所述的一种α-熊果苷的纯化方法,其特征在于,步骤(3)中,加入乙酸乙酯或乙酸甲酯体积为步骤(1)中纯化水体积的0.30-1.25倍。
6.根据权利要求1所述的一种α-熊果苷的纯化方法,其特征在于,步骤(3)中,体系降温至30℃。
7.根据权利要求1所述的一种α-熊果苷的纯化方法,其特征在于,步骤(4)中,加入乙醇体积为步骤(1)中纯化水体积的0.75-1.25倍。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201810350597.0A CN108558964B (zh) | 2018-04-18 | 2018-04-18 | 一种α-熊果苷的纯化方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201810350597.0A CN108558964B (zh) | 2018-04-18 | 2018-04-18 | 一种α-熊果苷的纯化方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN108558964A CN108558964A (zh) | 2018-09-21 |
CN108558964B true CN108558964B (zh) | 2020-06-16 |
Family
ID=63535442
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201810350597.0A Active CN108558964B (zh) | 2018-04-18 | 2018-04-18 | 一种α-熊果苷的纯化方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN108558964B (zh) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN114044797A (zh) * | 2021-09-30 | 2022-02-15 | 安徽华恒生物科技股份有限公司 | 一种α-熊果苷的提取方法和应用 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2292900C1 (ru) * | 2005-09-20 | 2007-02-10 | Курский государственный медицинский университет Федерального Агентства по здравоохранению и социальному развитию (ГОУ ВПО Росздрава) | Способ получения арбутина |
CN103408610B (zh) * | 2013-07-26 | 2016-06-01 | 西安理工大学 | 从梨树叶中提取熊果苷的方法 |
CN106317136B (zh) * | 2015-06-19 | 2018-12-25 | 中国科学院微生物研究所 | 一种从ɑ-熊果苷发酵液中分离ɑ-熊果苷的方法 |
CN107722080A (zh) * | 2017-11-08 | 2018-02-23 | 长沙爱扬医药科技有限公司 | 一种从岩白菜叶中提取熊果苷的方法 |
-
2018
- 2018-04-18 CN CN201810350597.0A patent/CN108558964B/zh active Active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN108558964A (zh) | 2018-09-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Liang et al. | Rapid determination of eight bioactive alkaloids in Portulaca oleracea L. by the optimal microwave extraction combined with positive–negative conversion multiple reaction monitor (+/− MRM) technology | |
CN101762647B (zh) | 一种采用高效液相色谱测定啤酒中2-糠醛的方法 | |
CN102207495A (zh) | 一种高效液相色谱法对土壤中草甘膦含量的测定方法 | |
CN108558964B (zh) | 一种α-熊果苷的纯化方法 | |
CN101974007A (zh) | 一种从中药材鬼灯檠中提取岩白菜素的方法 | |
CN107290444A (zh) | 检测人体尿液中新蝶呤和生物蝶呤的方法 | |
CN105061169B (zh) | 一种巨大戟醇及其制备方法 | |
WO2021128665A1 (zh) | 一种生物素中间体双氨基物的hplc检测方法 | |
CN113533559A (zh) | 一种oled材料生产用的8-羟基喹啉质量控制方法 | |
CN106338559B (zh) | 一种氯消毒副产物二氯乙酰胺的气相色谱检测方法 | |
CN102539592A (zh) | 检测体液中极长链脂肪酸含量的方法 | |
WO2020199568A1 (zh) | 一种银杏根皮中分离得到的化合物及其用途 | |
CN102435679B (zh) | 一种新的硫酸依替米星有关物质的检测方法 | |
CN107991408B (zh) | 四味珍层冰硼滴眼液中指标成分含量测定方法 | |
CN114384179B (zh) | 一种利用高效液相紫外法同时定量检测月桂酰基甲基牛磺酸钠中牛磺酸和甲基牛磺酸的方法 | |
CN115141112A (zh) | 一种乙酰左旋肉碱杂质、其制备及检测方法和用途 | |
Zhong et al. | Multi-channel purge and trap system coupled with ion chromatography for the determination of alkylamines in cosmetics | |
AU2020102705A4 (en) | Detection method of polyamine content in goose follicular granulosa cells by high performance liquid chromatography and its application | |
CN111579675B (zh) | 饲料中脂溶性维生素的检测方法 | |
CN105503979A (zh) | 一种化合物及其制备方法和应用 | |
CN101962376A (zh) | 一种斑鸠菊醇的制备方法 | |
CN112666282A (zh) | 一种葡萄糖酸钙锌口服溶液杂质的高效液相检测方法 | |
CN111830185A (zh) | 二氯喹啉酸的超高效液相色谱串联质谱检测方法 | |
CN112557572B (zh) | 一种检测Cbz-Glu中异构体含量的方法 | |
CN114740105B (zh) | 一种脯氨酸和n-甲基脯氨酸的液相色谱分离检测方法及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant |