CN108295382A - 氦氖激光在皮肤创伤治疗中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了氦氖激光在皮肤创伤治疗中的应用。所述氦氖激光的波长为620～650nm；光纤输出功率为20～30mW。本发明通过采用特定波长和剂量的氦氖激光处理兔子的创伤，结果与对照组相比，经过氦氖激光处理组的死亡率明显下降，创伤可快速恢复，恢复速度明显优于京万红软膏药物，且不会导致兔子产生抗药性；同时采用氦氖激光进行处理的方法简单、成本低，其具有很好的临床应用及推广前景。

Description

氦氖激光在皮肤创伤治疗中的应用

技术领域

本发明涉及皮肤创伤治疗领域，具体地涉及氦氖激光在皮肤创伤治疗中的应用。

背景技术

皮肤主要由表皮、真皮、皮下组织组成，是人体面积最大且容易受到创伤的器官。在生活中，动物发生皮肤损伤的病例较为常见，如果治疗不及时或方法不科学，可引起浅表皮肤组织感染、脓疱创、蜂窝组织炎以及单纯性脓肿，严重的可引起全身多种症状，甚至危及生命。

现有皮肤损伤的治疗常用消炎、止痛和抗生素等药来促进皮肤愈合和控制感染。但抗生素的大量使用容易导致耐药性的产生，出现很多损伤后创口恢复得慢的病例，伤口持久未见愈合，甚至有些创口出现红肿、渗出、感染等情况。

氦氖激光在临床上的应用极为广泛，具有多种作用。目前尚未见有其在皮肤机械创伤治疗方面的应用。

发明内容

本发明为了克服现有技术的上述不足，提供氦氖激光在皮肤创伤治疗中的应用。

为了实现上述目的，本发明是通过以下方案予以实现的：

氦氖激光在皮肤创伤治疗中的应用，所述氦氖激光的波长为620～650nm；光纤输出功率为20～30mW。

氦氖激光是一种低功率的激光，低功率氦氖激光照射引起的生物效应很复杂，主要是靠激光的生物刺激来实现。其主要作用为：①可扩张血管，改善皮肤微循环；②促进组织新陈代谢；③增加巨噬细胞的吞噬作用，促进炎症吸收；④有明显的抗菌作用；⑤增加淋巴细胞转化率，增加血中免疫球蛋白和补体。基于氦氖激光的功效，通过选择特定波长和剂量的氦氖激光，对皮肤创伤进行处理，发现经过氦氖激光处理的皮肤创伤的恢复速度明显快于一般的药物，例如京万红软膏。

优选地，所述氦氖激光的波长为632.8nm；光纤输出功率为25mW。

优选地，所述氦氖激光的光纤与皮肤创面的距离为10～25cm；处理时间为20～30min。

更优选地，所述氦氖激光的光纤与皮肤创面的距离为20cm；处理时间为30min，每天一次。

优选地，所述皮肤创伤为皮肤机械创伤。更优选地，所述皮肤创伤为全层切伤、深到筋膜层的皮肤机械创伤。

优选地，在进行氦氖激光处理前，先用生理盐水清洗皮肤创面，并去除坏死组织和异物。

优选地，氦氖激光处理后采用不包扎的开放治疗。

与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

本发明通过采用特定波长和剂量的氦氖激光处理皮肤的机械创伤，结果与对照组相比，经过氦氖激光处理组的死亡率明显下降，创伤可快速恢复，恢复速度明显优于京万红软膏药物，且不会导致兔子产生抗药性；同时采用氦氖激光进行处理的方法简单、成本低，具有很好的临床应用及推广前景。

附图说明

图1为3组兔子皮肤创伤实验背部创面愈合情况。其中，1组为模型对照组，2组为京万红组，3组为氦氖激光组。

图2为3组兔子皮肤创伤皮肤组织愈合情况。

图3为3组兔子皮肤创伤后不同时间点白细胞总数差异分析。

图4为3组兔子皮肤创伤后不同时间点血小板差异分析。

图5为3组兔子皮肤创伤后不同时间点NGF差异分析。

图6为3组兔子皮肤创伤后后不同时间点VEGF差异分析。

图7为3组兔子皮肤创伤后不同时间点PDGF差异分析。

图8为3组兔子皮肤创伤后不同时间点TGF-B1差异分析。

具体实施方式

下面结合说明书附图及具体实施例对本发明作出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。

实施例1

以下实验过程中用到的仪器为：氦氖激光仪（型号ES-521，购自上海寰熙医疗器械有限公司），酶标仪（型号MK3，购自赛默飞世尔科技（上海）有限公司），全自动血细胞分析仪（型号BX-2800Vet，自深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司）。

实验氦氖激光对兔子皮肤创伤的治疗效果：

1、试验方法

（1）选择健康成年兔子18只，体重为（2000±500）g，雌雄各半，雌性未产无怀孕，购自南方医科大学实验中心，合格证号SCXK(粤）2016-0041。适应性饲养1周后，随机分成3组，每组6只（雌雄各半）。先将各组实验兔标记后称重，用剃刀剃去背部兔毛，在兔子背部无毛皮肤上画一个直径5cm的圆圈，将兔子放入自制的密闭小纸箱中，留一个小洞口通麻醉管，将呼吸麻醉管放入洞口，氧气浓度控制在1～1.5之间，***浓度控制在3～4之间，维持2～5min兔子便可进入深度麻状态。将兔子俯卧，用组织剪制备皮肤全层切伤模型，深到筋膜层，创伤面积见图1。压迫止血后，将兔子套上6号伊丽莎白圈放回笼子。

（2）第1组模型对照组，第2组为京万红组，第3组为氦氖激光组。京万红软膏是一种可治疗烧伤、溃疡、外伤等症的复方油膏制剂，临床上常用的药物，其治疗范围从烧烫伤延伸到多种皮肤损伤病症，包括皮肤创伤治疗，具有活血解毒、消肿止痛、去腐生肌的功效。

造模后1天开始治疗，分组治疗处理见表1。其中，第1组每天用0.9%生理盐水清洗创面，然后去除坏死组织和异物，戴上头套放回笼子；第2组每天用0.9%生理盐水清洗创面，然后去除坏死组织和异物，京万红均匀涂抹于创面后戴上头套放回笼子；第3组每天用0.9%生理盐水清洗创面，再去除坏死组织和异物，然后用氦氖激光照射治疗，激光波长：632.8nm，光纤输出：25mW，光纤距创面20cm，定时30min。

各组每天治疗一次，均采用不包扎开放治疗。试验期内兔子自由饮水、采食。

表13组实验图的分组处理

（3）每天观察并记录各组兔子的饮食状况、精神状态、行为活动及其他临床症状。在兔子创伤后的第1、3、7、14、21、28天，用7号采血针通过兔耳缘静脉采血1mL，用2mL规格的含有EDTAK2的负压采血管收集血样1mL血液，用5mL规格的普通负压采血管采集2mL血液，含有EDTAK2的血液马上用血常规仪器分析，普通采血管的血液室温静置30min，待血样完全凝固，3000转/min,离心5min。血清分装于1.5mL的无菌离心管中，标记后置于-20℃保存，全程无菌操作。

检测指标为：①生理指标：包括白细胞（WBC)、单核细胞(MONO)、嗜中性粒细胞(NEUT)、血小板(PLT)；

②生化指标：TP (总蛋白)、ALB(白蛋白)和AST(天门冬氨酸氨基转移酶)；

③生长因子指标：包括转化生长因子（TGF-B1）、血管内皮生长因子（VEGF）、血小板源性生长因子（PDGF）、神经生长因子（NGF），均为上海酶联生物科技有限公司生产；

④皮肤创面组织学检测：在兔子创伤后的第7、14、21、28天，每组随机处死一只实验兔，在创面组织与健康组织之间取1cm²皮肤组织置于10%中性***固定，石蜡包埋，HE染色，观察组织愈合情况。

数据均采用SPSS 22.0统计分析软件单因素方差分析各组间的差异显著性，通过Duncan’s检验法进行各组间均数的多重比较，试验数据采用“平均值±标准误”表示。

、实验结果

（1）死亡率统计

在实验过程中，每天统计3组实验图的死亡率。结果为：第1组的死亡率为50%，分别在实验的第5天、第8天和第9天各死亡一只，剖检结果证实死亡原因为伤口感染死亡。第2组的死亡率为16.67%，在第8天死亡一只，剖检结果为伤口感染死亡。第3组的死亡率为16.67%，在第8天死亡一只，剖检结果为伤口感染死亡。由此可知，京万红软膏组和氦氖激光处理能明显降低实验兔由感染引发的死亡率。

（2）临床体征

兔子建模后的第1、3、7、14、21、28天记录其创伤的愈合情况，具体情况见图1。其中，1组为模型对照组，2组为京万红组，3组为氦氖激光组。

从临床体征观察结果可知，氦氖激光照射创伤恢复的速度明显较快，试验证明氦氖激光照射治疗皮肤创面，可促进兔子创面皮肤组织修复速度。

（3）组织学分析

建模后的第7、14、21、28天对兔子创伤进行组织学分析，得到的结果如图2所示。

由图2可知，建模第7天，与第1组对比，第2、3组皮肤创面组织修复细胞数显著增加，对比具有显著性；建模第14天，与第1、2组对比，第3组皮肤创面组织修复细胞数量明显增加且分步均匀；建模第21天，第1组皮肤创面组织修复细胞大量侵润，第2组皮肤创面组织可见血管生成，第3组皮肤创面组织修复细胞分化形成皮肤组织；第28天，第1组皮肤创面组织可见血管生成，第2组皮肤创面组织细胞分化形成皮肤组织，第3组皮肤创面组织可见基质形成和组织重建期。由此可见，采用氦氖激光处理的创伤恢复速度明显优于对照组和京万红软膏组。

（4）生理指标检测结果

利用统计学软件对各组试验兔的血常规部分指标的测定结果进行分析，其中单核细胞总数和嗜中性粒细胞总数三组比较结果差异不显著（P>5）。白细胞总数及血小板总数分析结果见图3和图4。其中，图标上字母不同表示差异显著（P<0.05），字母相同或均无肩标表示差异不显著（P>0.05）；1组为模型对照组，2组为京万红组，3组为氦氖激光组。

由图3可知，与第2组比较，第1、3组在第3天的白细胞数有所增高，差异具有显著性（P<0.05）；第14天，第2组白细胞数明显比第1、3组高；在第21天与第1组对比，第2组、3组白细胞数明显下降，差异具有统计性（P<0.05）。以上数据说明在炎症反应期京万红治疗可降低白细胞数，消炎的作用强，短期的氦氖激光治疗消炎作用较弱。

由图4可知，与第1、2比较，3组在第14天血小板数明显增高，对比具有显著性（P<0.01）；其他时间点与第1组合第2组无显著性差异；由此可知氦氖激光处理可以提高机体的凝血功能。

（5）生化指标检测结果

3组实验兔的生化指标检测结果如表2、表3所示。

表2 3组兔子皮肤创伤后不同时间点AST差异分析

注：同列数据肩标字母不同表示差异显著（P<0.05），字母相同或均无肩标表示差异不显著（P>0.05）。

由表2可知，与第1组对比，第2、3组在第3天AST表达水平略有增高，但差异不明显（P>0.05）。在第28天，与第1、2组对比，第3组AST表达明显下降，差异显著（P>0.05）。血清中AST的升高代表了细胞坏死、肝脏和心肌病变，第3组AST在第28天后明显下降，表明氦氖激光处理皮肤创伤后可以有效控制细胞坏死和相关内科疾病。

表3 3组兔创伤后不同时间点TP差异分析

注：同列数据肩标字母不同表示差异显著（P<0.05），字母相同或均无肩标表示差异不显著（P>0.05）。

由表3可知，与第1组比较，第2、3组在第3天、第7天和第14天TP表达水平均降低；在第28天，与第1组对比，第2、3组TP表达水平均有增加，差异显著（P<0.01）。当TP升高时，反应各种原因失水导致血液浓缩和其他免疫性疾病。由此可见，在创面炎症反应期，氦氖激光处理皮肤创面能明显缓解动物机体的血液浓度。

（6）生长因子检测结果

3组实验兔的生长因子检测结果如图5～图8所示。

其中图5为3组兔子皮肤创伤后不同时间点NGF差异分析。由图可知，与第1组比较，第2、3组在第3天NGF表达水平下降，到第7天略有增高，在21天后第3组NGF表达水平比第1、2组高，但差异不显著。结果说明氦氖激光治疗皮肤创面在在炎症反应后近组织重建时，对NGF的表达有明显的促进作用，促进皮肤重建时神经组织的生成。

图6为3组兔子皮肤创伤后不同时间点VEGF差异分析。由图可知，与第1、2组比较，第3组在第3天VEGF表达水平显著增高，差异性显著（P<0.01）。第14、28天，第3组VEGF表达水平略有增高，但差异不显著（P>0.05）。VEGF表达水平略有增高，表明氦氖激光照射治疗皮肤创面可促进血管内皮生长因子的表达，促进血管形成。

图7为3组兔子皮肤创伤后不同时间点PDGF差异分析。由图可知，与第1组比较，第2、3组在第3天PDGF表达水平下降，在第7天略有增高，在第28天第3组PDGF表达水平比第1、2组高，但差异不显著。创面炎症反应期间，免疫***被激活，血小板凝血末期释放趋化因子，可诱导大量白细胞从血液迁移进入伤口，进行防御与修复。此结果表明氦氖激光治疗可在炎症反应期促进PDGF的表达，加快创面愈合。

图8为3组兔子皮肤创伤后不同时间点TGF-B1差异分析。由图可知，与第1组比较，第2、3组在第3天TGF-B1表达水平减少，差异显著；在第7天第2、3组TGF-B1表达水平略有增高；在第28天第3组TGF-B1表达水平比第1、2组高，但差异不显著。此数据表明氦氖激光在炎症初期处理创面后能促进TGF-B1的表达能力较弱，坚持治疗后，可明显提高TGF-B1表达水平，促进创面的修复。

以上实验结果表明，氦氖激光照射治疗皮肤损伤的效果显著，较于京万红皮肤创面组织愈合速度快，有明显的优势，且不会产生耐药性，值得在临床上加以应用及推广。

Claims (8)

1.氦氖激光在皮肤创伤治疗中的应用，其特征在于，所述氦氖激光的波长为620～650nm；光纤输出功率为20～30mW。

2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述氦氖激光的波长为632.8nm；光纤输出功率为25mW。

3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述氦氖激光的光纤与皮肤创面的距离为10～25cm；处理时间为20～30min。

4.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述氦氖激光的光纤与皮肤创面的距离为20cm；处理时间为30min，每天一次。

5.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述皮肤创伤为皮肤机械创伤。

6.根据权利要求5所述应用，其特征在于，所述皮肤创伤为全层切伤、深到筋膜层的皮肤机械创伤。

7.根据权利要求1所述应用，其特征在于，在进行氦氖激光处理前，先用生理盐水清洗皮肤创面，并去除坏死组织和异物。

8.根据权利要求1所述应用，其特征在于，氦氖激光处理后采用不包扎的开放治疗。