CN108239071B - 酰胺及硫代酰胺类衍生物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于医药技术领域，涉及酰胺及硫代酰胺类衍生物及其制备方法和应用，具体涉及如通式(I)的衍生物及其几何异构体或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、前药和它们的制备方法。所述的衍生物具有作为蛋白激酶抑制剂，特别是PAK激酶抑制剂的活性。

Description

酰胺及硫代酰胺类衍生物及其制备方法和应用
技术领域
本发明属药物合成领域，涉及一类新型酰胺/硫代酰胺类衍生物，以及所述化合物的药学可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药，它们的制备方法及其作为治疗剂特别是作为PAK抑制剂的用途。
背景技术
肿瘤的治疗已经成为一个世界性的难题，高效低毒的抗肿瘤药物研发迫在眉睫。靶向抗肿瘤药物凭借其特异性好、有效性强、毒副作用低等特点，在肿瘤治疗中取得巨大成功。
蛋白激酶是人类基因编码的蛋白中最大的家族，与肿瘤的发生、侵袭、转移、血管生成及化疗耐药性密切相关。由于部分激酶仅在肿瘤细胞中高度表达，其抑制并不影响正常细胞的生物学功能，使得以蛋白激酶为靶点的抗肿瘤药物具有高选择性、低毒性的优点。所以，蛋白激酶已经成为抗肿瘤药物研发的重要靶点。
2001年Bcr-Abl激酶抑制剂伊马替尼
Figure GDA0001217634770000011
被FDA批准用于治疗慢性粒细胞白血病，成为第一个上市的蛋白激酶抑制剂类抗肿瘤药物。之后短短的十五年中，已有42个蛋白激酶抑制剂上市，仅2013年以来，FDA批准上市的用于肿瘤治疗的小分子激酶抑制剂已有8个。具有抗肿瘤活性的蛋白激酶抑制剂的研究得到了生物制药行业的高度重视。
PAKs(p21活化激酶)是一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，属于STE20家族。PAK4是II类PAKs的代表，可以影响下游多种与细胞周期、迁移、侵袭和凋亡相关的蛋白，从而引起肿瘤细胞分化异常、血管生成、增殖等。因此，PAK4成为潜在的肿瘤治疗靶点。
PAKs包括六个家族成员(PAK1-PAK6)，根据其结构和活化方式的不同分为两类：I类PAKs(PAK1,PAK2,PAK3)，II类PAKs(PAK4,PAK5,PAK6)。其中PAK4是II类PAKs中研究最为深入的。
PAK4(p21活化激酶4)激酶全长包括591个氨基酸残基，主要分为三个结构域：p21结合域(P21-binding Domain,PBD)、自抑制域(Auto-inhibition Domain,AID)和激酶域(Kinase Domain,KD)或催化域(Catalytic Domain)，其中p21结合域和自抑制域位于激酶的N-端，激酶域位于激酶保守的C-端。I类PAKs和II类PAKs存在明显的结构差异性，例如，II类PAK不含富含酸性氨基酸残基的区域及PIX/Cool结合域；两个亚家族激酶域同源性仅约50％，结构差异较大，而相同亚家族内同源性分别高达92-96％和79-86％，结构较为相似。
PAK为Rho家族鸟苷三磷酸酶(Rho-GTPases)Cdc42和Rac1下游的主要靶蛋白，通过参与细胞内的多条信号通路，调节控制多种生物学功能，如细胞骨架重组、细胞迁移运动、细胞凋亡、有丝***、细胞分化等。除了参与调节细胞正常的生理活动外，PAK与多种疾病特别是肿瘤的发生发展密切相关。在细胞内RAS-Cdc42/Rac1-PAK信号通路中，Cdc42/Rac1分别控制细胞丝状伪足和片状伪足的生成，PAK作为其下游的主要效应器，在细胞的恶性转化和肿瘤细胞侵袭转移过程中具有重要作用。
研究表明PAK激酶特别是PAK1和PAK4，在多种肿瘤细胞中存在基因扩增、过度表达、异常活化的现象，从而导致细胞的癌变和不可控制的增殖、侵袭和转移。例如，PAK1在乳腺癌、肾癌、结肠癌等细胞系中高度表达；在鳞状皮肤癌荷瘤鼠模型中，PAK1缺失将通过下调MAPK和PI3K通路显著减弱肿瘤发生发展；PAK1还可以磷酸化BAD蛋白，抑制肿瘤细胞的凋亡；磷酸化DLC1(Dynein light chain 1)，促进细胞存活和恶性表型；介导乳腺上皮细胞cyclinD1表达，促进乳腺癌发生发展。另一方面，超过70％的多种人癌细胞系高表达PAK4，包括乳腺癌、胰腺癌、结肠癌、肺癌和卵巢癌等，PAK4的活化可导致肿瘤细胞锚定非依赖性生长，PAK4失活型突变体能够抑制Ras引起的恶性转化。PAK4上调的机制主要是基因扩增，特别是在胰腺癌、卵巢癌、口腔鳞状细胞癌和乳腺癌中。PAK4在多种实体瘤中表达，最突出的特点是其通过转录增加或者基因扩增而增加mRNA或蛋白质的表达。但研究也报道了PAK4的基因突变(E329K)与结肠癌有关。
研究表明，在大约30％的肿瘤中蛋白Ras突变过表达，这些肿瘤中包括胰腺癌、结肠癌和肺癌等恶性肿瘤。Ras通过PI-3k激活Rho家族小G蛋白Rac1/Cdc42，从而激活PAKs。活化的PAKs进一步影响下游的细胞信号通路转导，促进肿瘤的存活、血管生成、迁移侵袭等。研究表明，PAK4可以通过NF-κB，活化肿瘤细胞的生存信号通路，促进肿瘤细胞的生存；PAK4可以通过LIMK1-Cofilin信号通路促进胃癌细胞的迁移；PAK4还可以通过CREB及Wnt/β-catenin信号通路，促进黑色素生成，导致色素沉着紊乱等疾病；肝癌细胞中存在PAK4/Raf/MEK/ERK信号通路，可以通过PAK4抑制肝癌细胞的增殖。
PAK4与多种肿瘤的发生发展密切相关，抑制PAK4的异常功能，能够有效抑制肿瘤细胞的侵袭转移、过度增殖，促进肿瘤细胞凋亡。因此，PAK4抑制剂的研究具有重要的价值。
因为PAK与肿瘤的密切相关性，所以当前小分子PAK抑制剂的研究正处于一个快速发展阶段。已发现的PAK抑制剂大多为作用于激酶域的ATP竞争性PAK抑制剂，ATP竞争性抑制剂具有亲和性高、作用位点明确的特点，也是目前研究最多的激酶抑制剂类型。但激酶的激酶域催化相同的生物化学反应，具有结构和序列的保守性，抑制剂在激酶间选择性的实现是当前ATP竞争性抑制剂研究遇到的共性问题；同时，PAK的ATP结合腔具有空间较大、柔性较高的个性特点，因此PAK亚型选择性抑制剂的发现是一项具有显著挑战性的研究。但随着相关学科的快速发展，越来越多的高选择性ATP竞争性激酶抑制剂已被发现，是当前激酶抑制剂研究领域的主流趋势。
目前PAKs抑制的研究尚处于起步阶段，仅有辉瑞公司研发的PF-3758309进入了Ⅰ期临床研究。PF-3758309是辉瑞公司2009年报道的具有吡咯并吡唑结构PAKs抑制剂，是唯一进入临床研究的PAKs抑制剂，其PAK4IC50＝19nM，PAK1IC50＝14nM。在体外抑瘤实验和荷瘤鼠在体模型研究中，PF-3758309显著地抑制肿瘤细胞增殖和促进肿瘤细胞凋亡。但是，由于其口服生物利用度差(约1％)、胃肠道不良反应等因素，PF-3758309的I期临床研究被迫终止。随后基因泰克公司2014年报道的具有苯并咪唑类结构的选择性作用于II类PAKs的化合物，可以对PAK4产生选择性抑制作用(PAK1IC50＝5.4μM，PAK4IC50＝7.5nM)。虽然这类化合物仍存在细胞活性弱、成药性差的缺陷，但该研究已初步证明了亚型选择性PAK抑制剂发现的可能性。
综上，以蛋白激酶抑制剂为代表的靶向抗肿瘤药物已经成为国内外抗肿瘤药物研发的主流。PAK4由于其在肿瘤发生发展、迁移和侵袭中的重要作用，成为肿瘤治疗的新靶点。目前，PAK4抑制剂的研究尚处于起步阶段，高活性、高选择性抑制剂的研发具有重要意义。但是目前尚无PAK抑制剂药物上市，仍需要开发结构新颖的具有更好药效的化合物。本发明设计合成了具有通式(I)所示结构的化合物，并发现具有此类结构的化合物表现出较好的PAK4抑制活性，且具有良好的PAK4/1的选择性。
发明内容：
本发明的目的在于提供一种通式(I)所示的新型酰胺/硫代酰胺类衍生物，及其几何异构体或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药；
Figure GDA0001217634770000021
其中，A环部分选自
Figure GDA0001217634770000022
R1选自氢、C1-C6烷基、被卤素取代的C1-C6烷基、C3-C6环烷基、被卤素取代的C3-C6环烷基、C1-C4烷氧基、六元芳基、苄基，其中所述芳基、苄基可进一步被1-6个Rx取代。
B环选自5-6元芳香环、5-6元芳香杂环、5-7元饱和脂肪环、5-7元不饱和脂肪环。B环可进一步被1-4个R2所取代。
R2选自氢、卤素(氟，氯，溴，碘)，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，羟基，卤代的C1-C6烷基。
通式(I)中
Figure GDA0001217634770000031
部分的Z选自O或S。
C环为4-7元杂环基、5-7元不饱和杂环基、4-7元双环杂环基，上述环至少含1个氮(N)原子，且该氮原子与酰基或硫代酰基部分
Figure GDA0001217634770000032
形成酰胺键。该环还包括另外0-2个N,O或S的杂原子。该环可进一步被1-4个Rx取代。Rx取代后形成的手性碳原子可以为R构型、S构型或者消旋形式。
Rx为-H、羟基、卤素、硝基、氨基、氰基、(C1-C6)烷基、(C2-C6)烯基、(C2-C6)炔基、(C1-C6)烷氧基、任选被羟基、氨基或卤代的(C1-C6)烷基或(C1-C6)烷氧基、被单或二(C1-C6烷基)取代的氨基、(C1-C6)烷基酰氨基、游离的、成盐的、酯化的和酰胺化的羧基、(C1-C6)烷基亚磺酰基、(C1-C6)烷基磺酰基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基酰基、氨基甲酰基、被单或二(C1-C6烷基)取代的氨基甲酰基、(C1-C3)亚烷基二氧基。
本发明优选通式(I)所示的新型酰胺/硫代酰胺类衍生物，及其几何异构体或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药，其中
其中，A环部分选自
Figure GDA0001217634770000033
R1选自氢、C1-C6烷基、被卤素取代的C3-C6环烷基、被卤素取代的C3-C6环烷基、C2-C4烷氧基、六元芳基、苄基，其中所述芳基、苄基可进一步被1-6个Rx取代。
B环选自5-6元芳香环、5-6元芳香杂环。B环可进一步被1-4个R2所取代。
R2选自氢、卤素(氟，氯，溴，碘)，C1-C4烷基，C1-C4烷氧基，甲氧基，羟基，卤素取代的C1-C4烷基。
通式(I)中
Figure GDA0001217634770000034
部分的Z选自O，S。
C环为4-7元杂环基，该环至少含1个氮(N)原子，且该氮原子与酰基或硫代酰基部分
Figure GDA0001217634770000035
形成酰胺键。该环还包括另外0-2个N,O,S的杂原子。该环可进一步被1-4个Rx取代。Rx取代后形成的手性碳原子可以为R构型、S构型或者消旋形式。
Rx为-H、羟基、卤素、硝基、氨基、氰基、(C1-C6)烷基、(C2-C6)烯基、(C2-C6)炔基、(C1-C6)烷氧基、任选被羟基、氨基或卤代的(C1-C6)烷基或(C1-C6)烷氧基、被单或二(C1-C6烷基)取代的氨基、(C1-C6)烷基酰氨基、游离的、成盐的、酯化的和酰胺化的羧基、(C1-C6)烷基亚磺酰基、(C1-C6)烷基磺酰基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基酰基、氨基甲酰基、被单或二(C1-C6烷基)取代的氨基甲酰基、(C1-C3)亚烷基二氧基。
本发明优选通式(I)所示的新型酰胺/硫代酰胺类衍生物，及其几何异构体或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药，
其中，A环部分选自
Figure GDA0001217634770000036
R1选自氢、C1-C6烷基、被卤素取代的C1-C6烷基、C3-C6环烷基、被卤素取代的C3-C6环烷基、C2-C4烷氧基、六元芳基、苄基，其中所述芳基、苄基可进一步被1-6个Rx取代。
B环选自5-6元芳香环、5-6元芳香杂环。B环可进一步被1-4个R2所取代。
R2选自氢、卤素(氟，氯，溴，碘)，甲基，甲氧基，羟基，三氟甲基。
通式(I)中
Figure GDA0001217634770000037
部分的Z选自O，S。
C环为6元杂环基，该环至少含1个氮(N)原子，且该氮原子与酰基或硫代酰基部分
Figure GDA0001217634770000041
形成酰胺键。该环还包括0-1个N,O,S的杂原子。该环可进一步被1-4个Rx取代。Rx取代后形成的手性碳原子可以为R构型、S构型或者消旋形式。
Rx为-H、羟基、卤素、硝基、氨基、氰基、(C1-C6)烷基、(C2-C6)烯基、(C2-C6)炔基、(C1-C6)烷氧基、任选被羟基、氨基或卤代的(C1-C6)烷基或(C1-C6)烷氧基、被单或二(C1-C6烷基)取代的氨基、(C1-C6)烷基酰氨基、游离的、成盐的、酯化的和酰胺化的羧基、(C1-C6)烷基亚磺酰基、(C1-C6)烷基磺酰基、(C1-C6)烷氧基、(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基酰基、氨基甲酰基、被单或二(C1-C6烷基)取代的氨基甲酰基、(C1-C3)亚烷基二氧基。
本发明优选通式(I)所示的新型酰胺/硫代酰胺类衍生物，及其几何异构体或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药，其中
其中，A环部分选自
Figure GDA0001217634770000042
R1选自氢、C1-C3烷基、被卤素取代的C1-C3烷基、C3-C5环烷基、被卤素取代的C3-C5环烷基、苯基、苄基，其中所述苯基、苄基可进一步被1-6个Rx取代。
B环为苯环，该苯环与其相邻的嘧啶环组成的苯并嘧啶环进一步被1-4个R2所取代。R2选自氢、卤素(氟，氯，溴，碘)，甲基，甲氧基，羟基，三氟甲基。
通式(I)中
Figure GDA0001217634770000043
部分的Z选自O，S。
C环优选为哌嗪环
Figure GDA0001217634770000044
且环与酰基或硫代酰基部分
Figure GDA0001217634770000045
形成酰胺键。该环可进一步被1-2个Rx取代，Rx选自氢，(C1-C6)烷基，卤代的(C1-C6)烷基，(C3-C6)环烷基，卤代的(C3-C6)环烷基。Rx取代后形成的手性碳原子可以为R构型、S构型或者消旋形式。
本发明优选通式(I)所所示的新型酰胺/硫代酰胺类衍生物，及其几何异构体或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药。
其中，A环部分选自
Figure GDA0001217634770000046
R1选自氢、C1-C3烷基、被卤素取代的C1-C3烷基、C3-C5环烷基、被卤素取代的C3-C5环烷基、苯基，其中所述苯基可进一步被1-2个Rx取代。
B环选自苯环，该苯环与其相邻的嘧啶环组成的苯并嘧啶环6位或7位可进一步被R2所取代。R2选自氢、卤素(氟，氯，溴，碘)，甲基，甲氧基，羟基，三氟甲基等。进一步优选氯原子取代。
Figure GDA0001217634770000047
通式(I)中
Figure GDA0001217634770000048
部分的Z选自O，S。
C环为哌嗪环
Figure GDA0001217634770000049
且环与酰基或硫代酰基部分
Figure GDA00012176347700000410
形成酰胺键。C环最优选的范围如下：
Figure GDA0001217634770000051
而且，按照本发明所属领域的一些通常方法，本发明中通式(I)的部分化合物具有碱性基团，可以与酸生成药学上可接受的盐。可药用加成盐包括无机酸和有机酸加成盐，与下列酸加成的盐是特别优选的：盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、苯磺酸、萘二磺酸、乙酸、丙酸、乳酸、三氟乙酸、马来酸、柠檬酸、富马酸、草酸、酒石酸、苯甲酸等。最优选为盐酸。
此外，本发明还包括本发明衍生物的前药。本发明衍生物的前药是通式(I)的衍生物，它们自身可能具有较弱的活性甚至没有活性，但是在给药后，在生理条件下(例如通过代谢、溶剂分解或另外的方式)被转化成相应的生物活性形式。
通式(I)所示的化合物可以以非溶剂化形式和含有药学上可接受的溶剂(如水、乙醇等)的溶剂化形式。通式(I)所示的化合物可以含有不对称或手性中心，因此可以以不同立体异构形式存在。本发明的所有立体异构形式，包括但不限于非对映异构体、对映异构体和阻转异构体以及它们的混合物(如外消旋混合物)，均包括在本发明的范围内。
通式(I)所示的化合物可以以不同的互变异构体形式存在，所有这些形式均包括在本发明的范围内。术语“互变异构体”或“互变异构形式”是指经由低能垒互相转化的不同能量的结构异构体。
本发明中“卤素”是指氟、氯、溴或碘代；“烷基”是指直链或支链的烷基；“芳基”是指除去芳烃中的一个或不同位置的两个氢原子而得到的有机基团，如苯基、萘基；“杂芳基”是指含有一个或多个选自N、O、S杂原子的单环或多环的环状体系，该环状体系是指具有芳香性的，并且除去环状体系中的一个或不同位置的两个氢原子而得到的有机基团，如噻唑基，咪唑基、吡啶基、吡唑基、(1,2,3)-和(1,2,4)-***基、呋喃基、噻吩基、吡咯基，吲哚基，苯并噻唑基，噁唑基，异噁唑基，萘基，喹啉基，异喹啉基，苯并咪唑基，苯并噁唑基等；杂环基是指含有一个或多个选自N、O、S的杂原子的单环的环状体系，如哌嗪基、四氢吡咯烷基、吗啉基、哌啶基、四氢吡唑烷基、四氢咪唑烷基和四氢噻唑啉基等。
本发明可以含有通式(I)的衍生物，及其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物或前药作为活性成份，与药学上可接受的载体或赋型剂混合制备成组合物，并制备成临床上可接受的剂型，上述药学上可接受的赋型剂是指任何可用于药学领域的稀释剂、辅助剂和/或载体。本发明的衍生物可以与其他活性成份组合使用，只要它们不产生其他不利的作用，例如过敏反应。
本发明的药用组合物可配制成若干种剂型，其中含有药物领域中一些常用的赋形剂。如上所述的若干种剂型可以采用注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂、软膏剂等剂型药物。
用于本发明药物组合物的载体是药物领域中可得到的常见类型，包括：粘合剂、润滑剂、崩解剂、助溶剂、稀释剂、稳定剂、悬浮剂、无色素、矫味剂、防腐剂、加溶剂和基质等。药物制剂可以经口服或胃肠外方式(例如静脉内、皮下、腹膜内或局部)给药，如果某些药物在胃部条件下不稳定的，可将其配制成肠衣片剂。
本发明可以含有通式(I)的衍生物可以通过包括化学领域众所周知的方法来合成，尤其根据本发明的说明来合成。
原料一般可以从商业来源例如阿拉丁、达瑞等试剂公司获得或者使用本领域技术人员所熟知的方法来制备。
本发明中室温指环境温度，为10摄氏度至30摄氏度。
本发明的积极进步效果在于：本发明提供了一种与现有技术完全不同的酰胺/硫代酰胺类衍生物，其制备方法、药物组合物和应用。本发明的酰胺/硫代酰胺类化合物对与PAK4激酶具有良好的选择性抑制效果，可以用于预防、治疗或辅助治疗与PAK4激酶的表达或活性有关的多种疾病。
下文中提供的实施例和制备例进一步阐明和举例说明本发明化合物及其制备方法。应当理解，下述实例和制备例的范围并不以任何方式限制本发明的范围。按照本发明的式I的化合物，可按照合成路线1-3的方法制备得来，这些路线中应用的全部可变因数如权利要求中的定义。
合成路线1
Figure GDA0001217634770000061
如路线1所示，部分化合物的合成主要有几个步骤：
步骤a：原料I-1经酰化反应得到中间体I-2。
步骤b：中间体I-2经草酰氯单乙酯酰化反应得到中间体I-3。
步骤c：中间体I-3经与乙醇钠反应环合得到中间体I-4。
步骤d：中间体I-4经碱水解反应得到中间体I-5。
步骤e：中间体I-5经氯代反应得到中间体I-6。
步骤f：中间体I-6与相应的胺C片段经选择性酰化反应得到中间体I-7。相应的胺可以为带有适当保护基团的胺片段。
步骤g：中间体I-7经芳香亲核取代反应与A环片段反应，再脱除相应保护基得到终产物。
优选条件如下：
在步骤a中，反应物溶于无水四氢呋喃溶剂中，加入三光气，在加热回流条件下反应12小时。降温至室温，加入1N氨水，65摄氏度反应1小时，降温至室温，析出白色固体，抽滤得到中间体I-2。
在步骤b中，反应物溶于无水四氢呋喃溶剂中，0摄氏度下加入三乙胺，搅拌下滴加草酰氯单乙酯。滴加完毕升温至室温反应半小时，析出白色固体。加入少量水，蒸除四氢呋喃，加入乙酸乙酯萃取，有机层干燥得中间体I-3。
在步骤c中，反应物溶于乙醇中，摄氏度下加入乙醇钠，加毕升温至室温反应12小时，2N盐酸调PH为中性，白色固体抽滤得到中间体I-4。
在步骤d中，反应物溶于乙醇-水(1-1)混合溶剂中，加入氢氧化钠加热回流2小时2N盐酸调PH为酸性，白色固体抽滤得到中间体I-5。
在步骤e中，反应物溶于氯仿中，加入氯化亚砜加热回流3小时蒸除溶剂及氯化亚砜得到中间体I-6。
在步骤f中，反应物溶于无水二氯甲烷中，降温至-35摄氏度，加入相应的胺搅拌1小时，加水淬灭反应，二氯甲烷提取，有机层干燥，经硅胶柱层析纯化得中间体I-7。
在步骤g中，反应物溶于DMF中，加入相应A环片段和碘化钾，升温至65摄氏度，搅拌10小时，倾入水中，析出物经硅胶柱层析纯化得化合物终产品。如此时化合物含有保护基，则再在相应常规脱保护反应条件下脱除相应保护基得到终产品。其中，A环片段的定义如上述所述。
保护基团是指在有机合成中，含有2个或多个官能团的分子，为使其中某个官能团免遭反应的破坏，常用某种试剂先将其保护，待反应完成后再脱去保护剂。保护基团包括叔丁氧羰基(Boc)、苄基(Bn)等。
合成路线2
如路线2所示，部分化合物可按以下步骤合成：
Figure GDA0001217634770000071
优选条件如下：
在步骤e中，反应物溶于四氢呋喃或者甲苯中，加入劳森试剂加热回流3小时，蒸除溶剂，经硅胶柱层析纯化得到化合物终产品。
合成路线3
A环片段合成：
A环片段为取代咪唑时，合成可采用方法A，即步骤i，取代的4-硝基咪唑与卤代烷(R1-X)反应在DMF或者乙腈中加热反应生成1-位取代4-硝基咪唑衍生物，经步骤j氢气还原得到咪唑片段。
也可采用方法B，即步骤k取代的4-硝基咪唑经硝酸醋酸酐在零摄氏度硝化反应1小时，萃取干燥得到1-位硝基取代4-硝基咪唑。将1-硝基-4-硝基咪唑经与胺片段(R1-NH2)反应溶于水-乙醇混合物中(1-1)，室温搅拌过夜，萃取干燥，经硅胶柱层析纯化得到1-位R1取代4-硝基咪唑衍生物。经步骤m氢气还原得到1-位R1取代4-氨基咪唑片段。其中，A环片段和R1的定义如上述所述。
Figure GDA0001217634770000072
A环片段为取代吡唑时，可采用如下方法：
Figure GDA0001217634770000073
优选条件如下：
在步骤n中，将氢钠加入无水四氢呋喃中，升温至65摄氏度，滴加R1取代的羧酸酯与乙腈的混合物，加入回流12小时，降温至室温，***萃取3次，水层用2N盐酸调PH为酸性，乙酸乙酯萃取，干燥，经硅胶柱层析纯化得到R1取代的β-羰基腈。
在步骤o中，将R1取代的β-羰基腈溶于乙醇，加入水合肼和甲磺酸，加热回流1小时，降温至室温，蒸除溶剂，经硅胶柱层析纯化得到R1取代的3-氨基吡唑。
具体实施方式：
不需进一步详细说明，认为本领域熟练技术人员借助于前面的描述，可以最大程度地利用本发明。因此下面提供的实施例旨在阐述而不是限制本发明的范围。
原料一般可以从商业来源获得或者使用本领域技术人员所熟知的方法来制备，或根据本发明所述的方法制备。未经特殊说明，所用试剂均为分析纯或化学纯。
化合物结构确证所用质谱用Agilent 1100LC/MSD测定。柱层析纯化产物使用的是青岛海洋化工厂生产的100-200目或者200-300目硅胶。
Figure GDA0001217634770000081
表1实施例1-55的结构式
Figure GDA0001217634770000082
Figure GDA0001217634770000091
Figure GDA0001217634770000101
Figure GDA0001217634770000111
实施例1：6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000112
合成路线为：
Figure GDA0001217634770000113
试剂与条件：a)四氢呋喃，乙腈，氢钠，66摄氏度；b)乙醇，甲磺酸，水合肼，回流；c)1.三光气，四氢呋喃，65摄氏度；2.1N氨水，65摄氏度；d)四氢呋喃，草酰氯单乙酯，0摄氏度至室温；e)乙醇钠，乙醇，0摄氏度至室温；f)氢氧化钠，乙醇，水，室温；g)氯仿，氯化亚砜，回流；h)二氯甲烷，三乙胺，N-Boc-哌嗪，零下35摄氏度；i)5-甲基3-氨基吡唑，DMF，65摄氏度；j)2N氯化氢-乙酸乙酯溶液室温。
a)将8.80g(100mmol)乙酸乙酯(I-1)和12.3g(300mmol)乙腈溶于180mL无水四氢呋喃中，0摄氏度搅拌下分批加入12.5g(300mmol)氢化钠，升温至回流反应1.5h。降至室温，将反应液缓慢倾入200mL冰水中，用2N盐酸调节pH至2-3，乙酸乙酯萃取，合并有机相，饱和食盐水洗涤有机相，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，得浅黄色油状物(I-2)3.68g，收率45.4％。GC-MS m/z:83.1[M]+。
b)将0.83g(10.0mmol)3-氧代丁腈(I-2)和0.70mL(10.0mmol)水合肼溶于50mL无水乙醇中，向混合溶液中加入96.0mg(1.0mmol)甲磺酸，升温至回流反应45min，TLC检测反应完全(碘熏)。减压蒸出溶剂，得黄色油状物，经硅胶色谱柱纯化(石油醚：乙酸乙酯＝3:1)，得浅黄色油状物(I-3)0.82g，收率84.5％。GC-MS m/z:97.1[M]+。
c)将2.00g(11.6mmol)2-氨基-5-氯苯甲酸(I-4)溶于20mL干燥四氢呋喃中，搅拌下加入1.20g(3.90mmol)三光气，升温至60摄氏度反应12h，TLC监测反应完全。降至室温，减压蒸除溶剂，加入1N氨水，升温至60摄氏度反应1h，析出白色固体，TLC监测反应完全。降至室温，抽滤，水(10mL×3)洗，滤饼干燥至恒重，得白色粉末状固体1.68g，收率84.9％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.85(s,1H),7.60(d,J＝2.44Hz,1H),7.18-7.16(m,2H),6.72(d,J＝8.80Hz,1H),6.40(br,2H)。
d)将1.68g(9.85mmol)2-氨基-5-氯苯甲酰胺(I-5)和1.63Ml(11.8mmol)三乙胺溶于34mL干燥四氢呋喃中，0摄氏度搅拌下向反应液中滴加1.15mL(10.8mmol)草酰氯单乙酯，滴加完毕，升至室温反应1h，TLC监测反应完全。减压蒸除溶剂，加入40mL乙酸乙酯溶解，水(10mL×3)洗，饱和食盐水(10mL×3)洗，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经硅胶色谱柱纯化(二氯甲烷：丙酮＝50:1)，得类白色粉末状固体2.50g，收率93.9％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:13.02(s,1H),8.56(d,J＝8.96Hz,1H),8.47(s,1H),7.99(s,1H),7.97(d,J＝2.44Hz,1H),7.66(dd,J＝2.44,8.92Hz,1H),4.30(q,J＝7.12Hz,2H),1.31(t,J＝7.12Hz,3H)。
e)将2.50g(9.24mmol)2-(2-甲酰胺基-4-氯-苯基)氨基乙二酸乙酯(I-6)溶于28mL乙醇中，0摄氏度搅拌下向溶液中缓慢滴加7.60mL(11.1mmol)10％乙醇钠乙醇溶液，继续反应3h，TLC监测反应完全。用1N盐酸调节pH＝3-4，析出白色固体，抽滤，水(10mL×3)洗，滤饼干燥至恒重，经硅胶色谱柱纯化(二氯甲烷：丙酮＝100:1)，得白色粉末状固体2.00g，收率85.8％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:12.83(s,1H),8.10(d,J＝2.36Hz,1H),7.92(dd,J＝2.46,8.68Hz,1H),7.85(d,J＝8.68Hz,1H),4.39(q,J＝7.12Hz,2H),1.35(t,J＝7.12Hz,3H)。
f)将2.00g(7.92mmol)6-氯-4-氧代-3H,4H-喹唑啉-2-羧酸乙酯(I-7)溶于25mL乙醇中，室温搅拌下向溶液中加入25.5mL(63.4mmol)10％氢氧化钠水溶液，继续反应0.5h，TLC监测反应完全。用2N盐酸调节pH＝3，析出白色固体，抽滤，水(10mL×3)洗，滤饼干燥至恒重，得类白色粉末状固体1.70g，收率95.5％。
g)将0.23g(1.00mmol)6-氯-4-氧代-3H,4H-喹唑啉-2-羧酸(I-8)溶于5mL三氯甲烷中，向溶液中加入0.87mL(12.0mmol)氯化亚砜和一滴N,N-二甲基甲酰胺，升温至回流反应0.5h，TLC监测反应完全。降至室温，减压蒸除溶剂，得中间体(I-6),立即进行下一步反应。
h)将中间体(I-9)溶于5mL干燥的二氯甲烷中，-35摄氏度搅拌下，向溶液中依次缓慢滴加0.42mL(3.00mmol)三乙胺和185mg(1.00mmol)N-Boc-哌嗪，继续反应0.5h，TLC监测反应完全。加水淬灭，加入30mL二氯甲烷，水(10mL×3)洗，饱和食盐水(10mL×3)洗，无水硫酸钠干燥，蒸除溶剂，经硅胶色谱柱纯化(二氯甲烷：甲醇＝50:1)，得黄色粉末状固体0.40g，收率48.7％。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.30(d,J＝2.12Hz,1H),8.07(d,J＝8.96Hz,1H),7.96(dd,J＝2.24,8.96Hz,1H),3.85-3.82(m,2H),3.61-3.58(m,2H),3.52-3.49(m,2H),3.43-3.41(m,2H),1.48(s,9H)。
i)将0.20g(0.49mmol)4,6-二氯-2-[1-(4-N-叔丁氧羰基)哌嗪基]甲酰基喹唑啉(I-10)、47.5mg(0.49mmol)5-甲基-3-氨基-1H-吡唑(I-3)和0.096mL(0.59mmol)N,N-二异丙基乙胺溶于4mL1,4-二氧六环中，升温至回流反应3h，析出浅黄色固体，TLC监测反应完全。降至室温，抽滤，滤饼经硅胶色谱柱纯化(二氯甲烷：甲醇＝20:1，0.5％三乙胺)、10倍甲醇热打浆，得白色粉末状固体0.07g，收率30.3％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:12.28(s,1H),10.71(s,1H),8.89(s,1H),7.89(dd,J＝2.00,8.92Hz,1H),7.79(d,J＝8.92Hz,1H),6.56(s,1H),3.64-3.62(m,2H),3.44(s,2H),3.29-3.27(m,4H),2.27(s,3H),1.40(s,9H)。
j)将上述固体(I-11)溶于2mL盐酸/乙酸乙酯中，室温搅拌下反应6h，析出白色固体，抽滤，滤饼干燥至恒重，得白色粉末状固体0.06g，收率96.7％。mp 341.8～342.6摄氏度。ESI-MS m/z:372.1[M+H]+。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:11.47(s,1H),9.59(s,2H),9.01(s,1H),8.01(dd,J＝8.92Hz,1H),7.91(d,J＝2.42,8.84Hz,1H),6.56(s,1H),3.92-3.91(m,2H),3.71(s,2H),3.23(s,2H),3.09(s,2H),2.32(s,2H)。
实施例2：2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000131
按照实施例1的方法，将步骤c)中原料2-氨基-5-氯苯甲酸替换为2-氨基苯甲酸，
经步骤a-j得到实施例2。ESI-MS m/z:338.4[M+H]+。
实施例3：2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000132
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为环丙甲酸乙酯，将步骤c)中原料2-氨基-5-氯苯甲酸替换为2-氨基苯甲酸，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-环丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例3。ESI-MS m/z:364.2[M+H]+。
实施例4：2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-异丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000133
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为异丁酸乙酯，将步骤c)中原料2-氨基-5-氯苯甲酸替换为2-氨基苯甲酸，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-异丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例4。ESI-MS m/z:366.1[M+H]+。
实施例5：2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丁基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000134
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为环丁酸乙酯，将步骤c)中原料2-氨基-5-氯苯甲酸替换为2-氨基苯甲酸，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-环丁基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例5。ESI-MS m/z:377.1[M+H]+。
实施例6：2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-苯基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000135
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为苯甲酸甲酯，将步骤c)中原料2-氨基-5-氯苯甲酸替换为2-氨基苯甲酸，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-苯基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例6。ESI-MS m/z:400.3[M+H]+。
实施例7：2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-苄基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000141
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为苯乙酸甲酯，将步骤c)中原料2-氨基-5-氯苯甲酸替换为2-氨基苯甲酸，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-苄基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例7。ESI-MS m/z:414.4[M+H]+。
实施例8：6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000142
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为环丙甲酸乙酯，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-环丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例8。ESI-MS m/z:398.5[M+H]+。
实施例9：6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-异丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000143
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为异丁酸乙酯，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-异丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例9。ESI-MSm/z:400.6[M+H]+。
实施例10：6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000144
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为苯甲酸乙酯，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-苯基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例10。ESI-MSm/z:434.5[M+H]+。
实施例11：6-氯-2-[4-吗啉基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure GDA0001217634770000145
合成路线如下：
Figure GDA0001217634770000151
试剂与条件：a)1.三光气，四氢呋喃，65摄氏度；2.1N氨水，65摄氏度；b)四氢呋喃，草酰氯单乙酯，0摄氏度至室温；c)乙醇钠，乙醇，0摄氏度至室温；d)氢氧化钠，乙醇，水，室温；e)氯仿，氯化亚砜，回流；f)二氯甲烷，三乙胺，吗啉，零下35摄氏度；g)5-甲基3-氨基吡唑，DMF，65摄氏度；h)2N氯化氢-乙酸乙酯溶液室温。
a)将2.00g(11.6mmol)2-氨基-5-氯苯甲酸(I-1)溶于20mL干燥四氢呋喃中，搅拌下加入1.20g(3.90mmol)三光气，升温至60摄氏度反应12h，TLC监测反应完全。降至室温，减压蒸除溶剂，加入1N氨水，升温至60C反应1h，析出白色固体，TLC监测反应完全。降至室温，抽滤，水(10mL×3)洗，滤饼干燥至恒重，得白色粉末状固体1.68g，收率84.9％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.85(s,1H),7.60(d,J＝2.44Hz,1H),7.18-7.16(m,2H),6.72(d,J＝8.80Hz,1H),6.40(br,2H)。
b)将1.68g(9.85mmol)2-氨基-5-氯苯甲酰胺(I-2)和1.63Ml(11.8mmol)三乙胺溶于34mL干燥四氢呋喃中，0摄氏度搅拌下向反应液中滴加1.15mL(10.8mmol)草酰氯单乙酯，滴加完毕，升至室温反应1h，TLC监测反应完全。减压蒸除溶剂，加入40mL乙酸乙酯溶解，水(10mL×3)洗，饱和食盐水(10mL×3)洗，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经硅胶色谱柱纯化(二氯甲烷：丙酮＝50:1)，得类白色粉末状固体2.50g，收率93.9％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:13.02(s,1H),8.56(d,J＝8.96Hz,1H),8.47(s,1H),7.99(s,1H),7.97(d,J＝2.44Hz,1H),7.66(dd,J＝2.44,8.92Hz,1H),4.30(q,J＝7.12Hz,2H),1.31(t,J＝7.12Hz,3H)。
c)将2.50g(9.24mmol)2-(2-甲酰胺基-4-氯-苯基)氨基乙二酸乙酯(I-3)溶于28mL乙醇中，0摄氏度搅拌下向溶液中缓慢滴加7.60mL(11.1mmol)10％乙醇钠乙醇溶液，继续反应3h，TLC监测反应完全。用1N盐酸调节pH＝3-4，析出白色固体，抽滤，水(10mL×3)洗，滤饼干燥至恒重，经硅胶色谱柱纯化(二氯甲烷：丙酮＝100:1)，得白色粉末状固体2.00g，收率85.8％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:12.83(s,1H),8.10(d,J＝2.36Hz,1H),7.92(dd,J＝2.46,8.68Hz,1H),7.85(d,J＝8.68Hz,1H),4.39(q,J＝7.12Hz,2H),1.35(t,J＝7.12Hz,3H)。
d)将2.00g(7.92mmol)6-氯-4-氧代-3H,4H-喹唑啉-2-羧酸乙酯(I-4)溶于25mL乙醇中，室温搅拌下向溶液中加入25.5mL(63.4mmol)10％氢氧化钠水溶液，继续反应0.5h，TLC监测反应完全。用2N盐酸调节pH＝3，析出白色固体，抽滤，水(10mL×3)洗，滤饼干燥至恒重，得类白色粉末状固体1.70g，收率95.5％。
e)将0.23g(1.00mmol)6-氯-4-氧代-3H,4H-喹唑啉-2-羧酸(I-5)溶于5mL三氯甲烷中，向溶液中加入0.87mL(12.0mmol)氯化亚砜和一滴N,N-二甲基甲酰胺，升温至回流反应0.5h，TLC监测反应完全。降至室温，减压蒸除溶剂，得中间体(I-6),立即进行下一步反应。
f)将中间体(I-6)溶于5mL干燥的二氯甲烷中，-35摄氏度搅拌下，向溶液中依次缓慢滴加0.42mL(3.00mmol)三乙胺和0.087mL(1.00mmol)吗啉，继续反应0.5h，TLC监测反应完全。加水淬灭，加入30mL二氯甲烷，水(10mL×3)洗，饱和食盐水(10mL×3)洗，无水硫酸钠干燥，蒸除溶剂，经硅胶色谱柱纯化(二氯甲烷：甲醇＝50:1)，得黄色粉末状固体0.27g，收率86.5％。
g)将0.15g(0.49mmol)4,6-二氯-2-(4-吗啉基)甲酰基喹唑啉(I-7)、47.5mg(0.49mmol)5-甲基-3-氨基-1H-吡唑(如前述制得)、0.096mL(0.59mmol)N,N-二异丙基乙胺和4mL 1,4-二氧六环投入封管中，升温至130摄氏度反应24h，析出浅黄色固体，TLC监测反应完全。抽滤，滤饼干燥至恒重，30倍甲醇热打浆，得类白色粉末状固体0.09g，收率49.4％。mp 326.9～327.4摄氏度。ESI-MS m/z:373.1[M+H]+。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:12.29(s,1H),10.71(s,1H),8.89(d,J＝1.88Hz,1H),7.88(dd,J＝2.04,8.92Hz,1H),7.80(d,J＝8.92Hz,1H),6.58(s,1H),3.68-3.66(m,4H),3.54-3.52(m,2H),3.31-3.28(m,2H),2.28(s,3H)。
实施例12：6-氯-2-[4-甲基哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure GDA0001217634770000161
按照实施例11的方法，将步骤f)中吗啉替换为4-甲基哌嗪，经步骤a-g得到实施例12。ESI-MS m/z:434.5[M+H]+。
实施例13：6-氯-2-[哌啶基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure GDA0001217634770000162
按照实施例11的方法，将步骤f)中吗啉替换为哌啶，经步骤a-g得到实施例13。ESI-MS m/z:371.6[M+H]+。
实施例14：6-氯-2-[1,1-二氧代硫代吗啉基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure GDA0001217634770000163
按照实施例11的方法，将步骤f)中吗啉替换为1,1-二氧代硫代吗啉，经步骤a-g得到实施例14。ESI-MS m/z:412.7[M+H]+。
实施例15：6-氯-2-[3-氧代哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure GDA0001217634770000164
按照实施例11的方法，将步骤f)中吗啉替换为哌嗪2-酮，经步骤a-g得到实施例15。ESI-MS m/z:386.5[M+H]+。
实施例16：6-氯-2-[4-羟基哌啶基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure GDA0001217634770000165
按照实施例11的方法，将步骤f)中吗啉替换为4-羟基哌啶，经步骤a-g得到实施例16。ESI-MS m/z:387.5[M+H]+。
实施例17：6-氯-2-[4-羟基-4-甲基哌啶基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure GDA0001217634770000166
按照实施例11的方法，将步骤f)中吗啉替换为4-羟基-4-甲基哌啶，经步骤a-g得到实施例17。ESI-MS m/z:401.5[M+H]+。
实施例18：6-氯-2-[4-氨基哌啶基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000171
按照实施例1的方法，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为4-N-Boc-氨基哌啶，经步骤a-g得到实施例18。ESI-MS m/z:386.5[M+H]+。
实施例19：6-氯-2-[4-羟基-4-甲基哌啶基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000172
按照实施例1的方法，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为4-N-Boc-氨基4-甲基哌啶，经步骤a-j得到实施例19。ESI-MS m/z:400.5[M+H]+。
实施例20：6-氯-2-[2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000173
按照实施例1的方法，将步骤i)中N-Boc-哌嗪替换为3-N-Boc-氨基单杂环丁烷，经步骤a-j得到实施例20。ESI-MS m/z:358.5[M+H]+。
实施例21：6-氯-2-[3-氨基单杂环丁基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000174
按照实施例1的方法，将步骤i)中N-Boc-哌嗪替换为2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-甲酸叔丁酯，经步骤a-j得到实施例21。ESI-MS m/z:384.5[M+H]+。
施例22：6-氯-2-[(1R,4R)2,5-二氮双环(2.2.1)庚烷-2-基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000175
按照实施例1的方法，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为(1R,4R)-2-叔丁氧羰基-2,5-二氮双环(2.2.1)庚烷，经步骤a-j得到实施例22。ESI-MS m/z:384.5[M+H]+。
实施例23：6-氯-2-[(六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000176
按照实施例1的方法，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-羧酸叔丁酯，经步骤a-j得到实施例24。ESI-MS m/z:400.5[M+H]+。
实施例24：6-氯-2-[4-氨基哌啶基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000181
按照实施例1的方法，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为4-N-Boc-氨基4-甲基哌啶，经步骤a-j得到实施例24。ESI-MS m/z:400.5[M+H]+。
实施例25(S)-6-氯-2-[2-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000182
按照实施例1的方法，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为(S)-2-甲基-N-Boc-哌嗪，经步骤a-j得到实施例25。ESI-MS m/z:386.6[M+H]+。
实施例26：(R)-6-氯-2-[2-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000183
按照实施例1的方法，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为(R)-2-甲基-N-Boc-哌嗪，经步骤a-j得到实施例26。ESI-MS m/z:386.5[M+H]+。
实施例27：(R)-6-氯-2-[3-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000184
按照实施例1的方法，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为(R)-3-甲基-N-Boc-哌嗪，经步骤a-j得到实施例27。ESI-MS m/z:386.6[M+H]+。
实施例28：(S)-6-氯-2-[3-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000185
按照实施例1的方法，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为(S)-3-甲基-N-Boc-哌嗪，经步骤a-j得到实施例28。ESI-MS m/z:386.4[M+H]+。
实施例29：6-氯-2-[3,5-二甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000186
按照实施例1的方法，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为3,5-二甲基-N-Boc-哌嗪，经步骤a-j得到实施例29。ESI-MS m/z:400.5[M+H]+。
实施例30：6-氯-2-[3,3’-二甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000191
按照实施例1的方法，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为3,3’-二甲基-N-Boc-哌嗪，经步骤a-j得到实施例30。ESI-MS m/z:400.5[M+H]+。
实施例31：6-氯-2-[3,3’-二甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000192
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为环丙甲酸乙酯，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为3,3’-二甲基-N-Boc-哌嗪，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-环丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例31。ESI-MS m/z:426.5[M+H]+。
实施例32：(S)-6-氯-2-[2-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000193
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为环丙甲酸乙酯，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为(S)-2-甲基-N-Boc-哌嗪，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-环丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例32。ESI-MS m/z:412.6[M+H]+。
实施例33：(R)-6-氯-2-[2-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000194
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为环丙甲酸乙酯，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为(R)-2-甲基-N-Boc-哌嗪，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-环丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例33。ESI-MS m/z:412.5[M+H]+。
实施例34：(R)-6-氯-2-[3-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000195
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为环丙甲酸乙酯，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为(R)-3-甲基-N-Boc-哌嗪，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-环丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例34。ESI-MS m/z:412.6[M+H]+。
实施例35：(S)-6-氯-2-[3-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000196
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为环丙甲酸乙酯，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为(S)-3-甲基-N-Boc-哌嗪，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-环丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例35。ESI-MS m/z:412.4[M+H]+。
实施例36：6-氯-2-[3,5-二甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000201
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为环丙甲酸乙酯，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为3,5-二甲基-N-Boc-哌嗪，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-环丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例36。ESI-MS m/z:426.5[M+H]+。
实施例37：(R)-6-氯-2-[3-乙基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000202
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为环丙甲酸乙酯，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为(R)-3-乙基-N-Boc-哌嗪，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-环丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例37。ESI-MS m/z:426.6[M+H]+。
实施例38：(R)-6-氯-2-[3-异丙基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000203
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为环丙甲酸乙酯，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为(R)-3-异丙基-N-Boc-哌嗪，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-环丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例38。ESI-MS m/z:440.6[M+H]+。
实施例39：(R)-6-氯-2-[3-异丙基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-苯基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000204
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为环丙甲酸乙酯，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为(R)-3-苯基-N-Boc-哌嗪，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-环丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例39。ESI-MS m/z:474.5[M+H]+。
实施例40：6-氯-2-[1-哌嗪基]硫代甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉
合成路线为：
Figure GDA0001217634770000205
试剂与条件：a)劳森试剂，甲苯，回流。
a)将124mg(0.33mmol)6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉加入溶于5mL干燥甲苯中，搅拌下加入404mg(1.00mmol)劳森试剂，升温至回流反应12h，TLC监测反应。降至室温，减压蒸除溶剂，硅胶柱层析得白色粉末状固体32mg，收率24.9％。ESI-MS m/z:388.5[M+H]+。
实施例41：6-氯-2-[1-哌嗪基]硫代甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure GDA0001217634770000211
按照实施例43的方法，将步骤g)中6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉替换为6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉，经步骤a得到实施例41。ESI-MS m/z:414.5[M+H]+。
实施例42：(R)-6-氯-2-[3-甲基-1-哌嗪基]硫代甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure GDA0001217634770000212
按照实施例43的方法，将步骤g)中6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉替换为(R)-6-氯-2-[3-甲基基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉，经步骤a得到实施例42。ESI-MS m/z:402.5[M+H]+。
实施例43：(R)-6-氯-2-[3-甲基-1-哌嗪基]硫代甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure GDA0001217634770000213
按照实施例43的方法，将步骤g)中6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉替换为(R)-6-氯-2-[3-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉，经步骤a得到实施例43。ESI-MS m/z:428.5[M+H]+。
实施例44：(R)-2-[3-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000214
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为环丙甲酸乙酯，将步骤c)中原料2-氨基5-氯苯甲酸替换为2-氨基苯甲酸，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为(R)-3-甲基-N-Boc-哌嗪，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-环丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例44。ESI-MS m/z:378.2[M+H]+。
实施例45：(R)-6-氟-2-[3-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000215
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为环丙甲酸乙酯，将步骤c)中原料2-氨基5-氯苯甲酸替换为2-氨基5-氟苯甲酸，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为(R)-3-甲基-N-Boc-哌嗪，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-环丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例45。ESI-MS m/z:396.2[M+H]+。
实施例46：(R)-6-溴-2-[3-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000221
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为环丙甲酸乙酯，将步骤c)中原料2-氨基5-氯苯甲酸替换为2-氨基5-溴苯甲酸，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为(R)-3-甲基-N-Boc-哌嗪，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-环丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例46。ESI-MS m/z:456.2[M+H]+。
实施例47：(R)-6-甲基-2-[3-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000222
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为环丙甲酸乙酯，将步骤c)中原料2-氨基5-氯苯甲酸替换为2-氨基5-甲基苯甲酸，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为(R)-3-甲基-N-Boc-哌嗪，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-环丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例47。ESI-MS m/z:392.2[M+H]+。
实施例48：(R)-6-甲氧基-2-[3-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000223
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为环丙甲酸乙酯，将步骤c)中原料2-氨基5-氯苯甲酸替换为2-氨基5-甲氧基苯甲酸，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为(R)-3-甲基-N-Boc-哌嗪，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-环丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例48。ESI-MS m/z:408.3[M+H]+。
实施例49：(R)-7-氯-2-[3-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000224
按照实施例1的方法，将步骤a)中原料乙酸乙酯替换为环丙甲酸乙酯，将步骤c)中原料2-氨基5-氯苯甲酸替换为2-氨基6-氯苯甲酸，将步骤h)中N-Boc-哌嗪替换为(R)-3-甲基-N-Boc-哌嗪，将步骤i)中5-甲基-3-氨基-1H-吡唑替换为5-环丙基-3-氨基-1H-吡唑，经步骤a-j得到实施例49。ESI-MS m/z:412.5[M+H]+。
实施例50：6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1-甲基-1H-咪唑4-基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000225
合成路线如下：
Figure GDA0001217634770000231
试剂与条件：a)碘甲烷，乙腈，碳酸钾，65摄氏度；b)1).氢气，钯碳，室温搅拌2).氯化氢-乙醇溶液，乙醇，0摄氏度；c)1).三光气，四氢呋喃，65摄氏度；2).1N氨水，65摄氏度；d)四氢呋喃，草酰氯单乙酯，0摄氏度至室温；e)乙醇钠，乙醇，0摄氏度至室温；f)氢氧化钠，乙醇，水，室温；g)氯仿，氯化亚砜，回流；h)二氯甲烷，三乙胺，N-Boc-哌嗪，零下35摄氏度；i)5-甲基3-氨基吡唑，DMF，65摄氏度；j)2N氯化氢-乙酸乙酯溶液室温。
a)将4-硝基咪唑(I-1)11.3g(0.10mol)与25ml DMF混合均匀，加入碳酸钾20.7(0.15mol)，室温搅拌下向溶液中缓慢滴加7.5mL碘甲烷(0.12mol)，维持反应温度65℃反应24小时后，加入二乙胺5ml，室温搅拌半小时，蒸除溶剂，加入100ml水，50ml乙酸乙酯提取5次，合并有机相，干燥，减压浓缩后，柱层析分离得到类白色固体9.2g，收率72.4％。ESI-MS(m/z)：128[M+H]+.
b)将1-甲基-1H-4-4-硝基咪唑(I-2)6.4g(0.05mol)溶于50ml无水乙醇中，加入10％钯碳1.0g，氢气氛室温搅拌下反应6小时，滤除钯碳，蒸除溶剂，加入50ml氯化氢-乙醇溶液，冰浴搅拌，析出固体，过滤得类白色固体5.2g，收率63.5％。ESI-MS(m/z)：98[M+H]+.
c)将2.00g(11.6mmol)2-氨基-5-氯苯甲酸(I-4)溶于20mL干燥四氢呋喃中，搅拌下加入1.20g(3.90mmol)三光气，升温至60摄氏度反应12h，TLC监测反应完全。降至室温，减压蒸除溶剂，加入1N氨水，升温至60C反应1h，析出白色固体，TLC监测反应完全。降至室温，抽滤，水(10mL×3)洗，滤饼干燥至恒重，得白色粉末状固体1.68g，收率84.9％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.85(s,1H),7.60(d,J＝2.44Hz,1H),7.18-7.16(m,2H),6.72(d,J＝8.80Hz,1H),6.40(br,2H)。
d)将1.68g(9.85mmol)2-氨基-5-氯苯甲酰胺(I-5)和1.63Ml(11.8mmol)三乙胺溶于34mL干燥四氢呋喃中，0摄氏度搅拌下向反应液中滴加1.15mL(10.8mmol)草酰氯单乙酯，滴加完毕，升至室温反应1h，TLC监测反应完全。减压蒸除溶剂，加入40mL乙酸乙酯溶解，水(10mL×3)洗，饱和食盐水(10mL×3)洗，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经硅胶色谱柱纯化(二氯甲烷：丙酮＝50:1)，得类白色粉末状固体2.50g，收率93.9％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:13.02(s,1H),8.56(d,J＝8.96Hz,1H),8.47(s,1H),7.99(s,1H),7.97(d,J＝2.44Hz,1H),7.66(dd,J＝2.44,8.92Hz,1H),4.30(q,J＝7.12Hz,2H),1.31(t,J＝7.12Hz,3H)。
e)将2.50g(9.24mmol)2-(2-甲酰胺基-4-氯-苯基)氨基乙二酸乙酯(I-6)溶于28mL乙醇中，0摄氏度搅拌下向溶液中缓慢滴加7.60mL(11.1mmol)10％乙醇钠乙醇溶液，继续反应3h，TLC监测反应完全。用1N盐酸调节pH＝3-4，析出白色固体，抽滤，水(10mL×3)洗，滤饼干燥至恒重，经硅胶色谱柱纯化(二氯甲烷：丙酮＝100:1)，得白色粉末状固体2.00g，收率85.8％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:12.83(s,1H),8.10(d,J＝2.36Hz,1H),7.92(dd,J＝2.46,8.68Hz,1H),7.85(d,J＝8.68Hz,1H),4.39(q,J＝7.12Hz,2H),1.35(t,J＝7.12Hz,3H)。
f)将2.00g(7.92mmol)6-氯-4-氧代-3H,4H-喹唑啉-2-羧酸乙酯(I-7)溶于25mL乙醇中，室温搅拌下向溶液中加入25.5mL(63.4mmol)10％氢氧化钠水溶液，继续反应0.5h，TLC监测反应完全。用2N盐酸调节pH＝3，析出白色固体，抽滤，水(10mL×3)洗，滤饼干燥至恒重，得类白色粉末状固体1.70g，收率95.5％。
g)将0.23g(1.00mmol)6-氯-4-氧代-3H,4H-喹唑啉-2-羧酸(I-8)溶于5mL三氯甲烷中，向溶液中加入0.87mL(12.0mmol)氯化亚砜和一滴N,N-二甲基甲酰胺，升温至回流反应0.5h，TLC监测反应完全。降至室温，减压蒸除溶剂，得中间体(I-6),立即进行下一步反应。
h)将中间体(I-9)溶于5mL干燥的二氯甲烷中，-35摄氏度搅拌下，向溶液中依次缓慢滴加0.42mL(3.00mmol)三乙胺和185mg(1.00mmol)N-Boc-哌嗪，继续反应0.5h，TLC监测反应完全。加水淬灭，加入30mL二氯甲烷，水(10mL×3)洗，饱和食盐水(10mL×3)洗，无水硫酸钠干燥，蒸除溶剂，经硅胶色谱柱纯化(二氯甲烷：甲醇＝50:1)，得黄色粉末状固体0.40g，收率48.7％。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.30(d,J＝2.12Hz,1H),8.07(d,J＝8.96Hz,1H),7.96(dd,J＝2.24,8.96Hz,1H),3.85-3.82(m,2H),3.61-3.58(m,2H),3.52-3.49(m,2H),3.43-3.41(m,2H),1.48(s,9H)。
i)将0.20g(0.49mmol)4,6-二氯-2-[1-(4-N-叔丁氧羰基)哌嗪基]甲酰基喹唑啉(I-10)、65.0mg(0.49mmol)1-甲基-1H-咪唑-4-胺盐酸盐(I-3)和0.18mL(1.08mmol)N,N-二异丙基乙胺溶于4mLDMF中，升温至65摄氏度反应12h。降至室温，倾入水中，抽滤，滤饼经硅胶色谱柱纯化(二氯甲烷：甲醇＝20:1，0.5％三乙胺)、得白色粉末状固体0.023g，收率10.3％。
j)将上述固体(I-11)溶于2mL盐酸/乙酸乙酯中，室温搅拌下反应6h，析出黄色固体，抽滤，滤饼干燥至恒重，得黄色粉末状固体0.017g，收率95.0％。ESI-MS m/z:372.1[M+H]+。
实施例51：6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1-环丙基-1H-咪唑4-基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000241
合成路线如下：
Figure GDA0001217634770000242
试剂与条件：a)硝酸，醋酸酐，醋酸，0摄氏度至室温；b)水，甲醇，环丙胺，室温；c)1).氢气，钯碳，室温搅拌2).氯化氢-乙醇溶液，乙醇，0摄氏度；d)1.三光气，四氢呋喃，65摄氏度；2.1N氨水，65摄氏度；e)四氢呋喃，草酰氯单乙酯，0摄氏度至室温；f)乙醇钠，乙醇，0摄氏度至室温；j)氢氧化钠，乙醇，水，室温；h)氯仿，氯化亚砜，回流；i)二氯甲烷，三乙胺，吗啉，零下35摄氏度；j)1-环丙基-1H-咪唑4-胺盐酸盐，DMF，65摄氏度；k)2N氯化氢-乙酸乙酯溶液，室温。
a)将4-硝基咪唑(I-1)11.3g(0.10mol)分散于醋酸200ml，冰浴搅拌下向溶液中依次缓慢滴加50mL硝酸和139ml醋酸酐，滴毕维持反应温度25℃反应1小时后，倾入1.5L冰水中，100ml乙酸乙酯提取5次，合并有机相，碳酸氢钠溶液洗涤，干燥，减压浓缩后，得到类白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)8.54(d,J＝1.60Hz,1H),8.40(d,J＝1.56Hz,1H).
b)将1，4-二硝基咪唑(I-2)溶于200ml甲醇中，加入200ml水，滴加环丙胺8.6g(0.15mol)，滴毕维持反应温度25℃反应24小时后，蒸除溶剂，加入100ml水，50ml乙酸乙酯提取5次，合并有机相，干燥，减压浓缩后，柱层析分离得到类白色固体7.3g，收率47.4％。ESI-MS(m/z)：154[M+H]+.1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.76(s,1H),7.47(s,1H),3.45-3.40(m,1H),1.12-0.99(m,4H).
c)将1-环丙基4-硝基咪唑(I-3)4.6g(0.03mol)溶于50ml无水乙醇中，加入10％钯碳0.6g，氢气氛室温搅拌下反应6小时，滤除钯碳，蒸除溶剂，加入30ml氯化氢-乙醇溶液，冰浴搅拌，析出固体，过滤得类白色固体2.0g，收率53.8％。ESI-MS(m/z)：124[M+H]+.
d)将2.00g(11.6mmol)2-氨基-5-氯苯甲酸(I-5)溶于20mL干燥四氢呋喃中，搅拌下加入1.20g(3.90mmol)三光气，升温至60摄氏度反应12h，TLC监测反应完全。降至室温，减压蒸除溶剂，加入1N氨水，升温至60C反应1h，析出白色固体，TLC监测反应完全。降至室温，抽滤，水(10mL×3)洗，滤饼干燥至恒重，得白色粉末状固体1.68g，收率84.9％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:7.85(s,1H),7.60(d,J＝2.44Hz,1H),7.18-7.16(m,2H),6.72(d,J＝8.80Hz,1H),6.40(br,2H)。
e)将1.68g(9.85mmol)2-氨基-5-氯苯甲酰胺(I-6)和1.63Ml(11.8mmol)三乙胺溶于34mL干燥四氢呋喃中，0摄氏度搅拌下向反应液中滴加1.15mL(10.8mmol)草酰氯单乙酯，滴加完毕，升至室温反应1h，TLC监测反应完全。减压蒸除溶剂，加入40mL乙酸乙酯溶解，水(10mL×3)洗，饱和食盐水(10mL×3)洗，无水硫酸钠干燥，减压蒸除溶剂，经硅胶色谱柱纯化(二氯甲烷：丙酮＝50:1)，得类白色粉末状固体2.50g，收率93.9％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:13.02(s,1H),8.56(d,J＝8.96Hz,1H),8.47(s,1H),7.99(s,1H),7.97(d,J＝2.44Hz,1H),7.66(dd,J＝2.44,8.92Hz,1H),4.30(q,J＝7.12Hz,2H),1.31(t,J＝7.12Hz,3H)。
f)将2.50g(9.24mmol)2-(2-甲酰胺基-4-氯-苯基)氨基乙二酸乙酯(I-7)溶于28mL乙醇中，0摄氏度搅拌下向溶液中缓慢滴加7.60mL(11.1mmol)10％乙醇钠乙醇溶液，继续反应3h，TLC监测反应完全。用1N盐酸调节pH＝3-4，析出白色固体，抽滤，水(10mL×3)洗，滤饼干燥至恒重，经硅胶色谱柱纯化(二氯甲烷：丙酮＝100:1)，得白色粉末状固体2.00g，收率85.8％。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:12.83(s,1H),8.10(d,J＝2.36Hz,1H),7.92(dd,J＝2.46,8.68Hz,1H),7.85(d,J＝8.68Hz,1H),4.39(q,J＝7.12Hz,2H),1.35(t,J＝7.12Hz,3H)。
g)将2.00g(7.92mmol)6-氯-4-氧代-3H,4H-喹唑啉-2-羧酸乙酯(I-8)溶于25mL乙醇中，室温搅拌下向溶液中加入25.5mL(63.4mmol)10％氢氧化钠水溶液，继续反应0.5h，TLC监测反应完全。用2N盐酸调节pH＝3，析出白色固体，抽滤，水(10mL×3)洗，滤饼干燥至恒重，得类白色粉末状固体1.70g，收率95.5％。
h)将0.23g(1.00mmol)6-氯-4-氧代-3H,4H-喹唑啉-2-羧酸(I-9)溶于5mL三氯甲烷中，向溶液中加入0.87mL(12.0mmol)氯化亚砜和一滴N,N-二甲基甲酰胺，升温至回流反应0.5h，TLC监测反应完全。降至室温，减压蒸除溶剂，得中间体(I-6),立即进行下一步反应。
i)将中间体(I-10)溶于5mL干燥的二氯甲烷中，-35摄氏度搅拌下，向溶液中依次缓慢滴加0.42mL(3.00mmol)三乙胺和185mg(1.00mmol)N-Boc-哌嗪，继续反应0.5h，TLC监测反应完全。加水淬灭，加入30mL二氯甲烷，水(10mL×3)洗，饱和食盐水(10mL×3)洗，无水硫酸钠干燥，蒸除溶剂，经硅胶色谱柱纯化(二氯甲烷：甲醇＝50:1)，得黄色粉末状固体0.40g，收率48.7％。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:8.30(d,J＝2.12Hz,1H),8.07(d,J＝8.96Hz,1H),7.96(dd,J＝2.24,8.96Hz,1H),3.85-3.82(m,2H),3.61-3.58(m,2H),3.52-3.49(m,2H),3.43-3.41(m,2H),1.48(s,9H)。
j)将0.20g(0.49mmol)4,6-二氯-2-[1-(4-N-叔丁氧羰基)哌嗪基]甲酰基喹唑啉(I-11)、79mg(0.49mmol)1-环丙基-1H-咪唑-4-胺盐酸盐(I-4)和0.18mL(1.08mmol)N,N-二异丙基乙胺溶于4mL DMF中，升温至65摄氏度反应12h。降至室温，倾入水中，抽滤，滤饼经硅胶色谱柱纯化(二氯甲烷：甲醇＝20:1，0.5％三乙胺)、得白色粉末状固体0.018g，收率7.2％。
k)将上述固体(I-12)溶于2mL盐酸/乙酸乙酯中，室温搅拌下反应6h，析出黄色固体，抽滤，滤饼干燥至恒重，得黄色粉末状固体0.015g，收率98.0％。ESI-MS m/z:398.5[M+H]+。
实施例52：6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1-三氟乙基-1H-咪唑4-基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000261
按照实施例51的方法，将步骤b)中原料环丙胺替换为三氟乙胺，将步骤j)中1-环丙基-1H-咪唑-4-胺盐酸盐替换为1-三氟乙基-1H-咪唑-4-胺盐酸盐，经步骤a-k得到实施例52。ESI-MS m/z:440.5[M+H]+。
实施例53：6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1-环丙甲基-1H-咪唑4-基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000262
按照实施例50的方法，将步骤1)中原料碘甲烷替换为环丙甲基溴，溶剂换为DMF,将步骤i)中1-甲基-1H-咪唑-4-胺盐酸盐替换为1-环丙甲基-1H-咪唑-4-胺盐酸盐，经步骤a-j得到实施例53。ESI-MS m/z:440.5[M+H]+。
实施例54：6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1-异丙基-1H-咪唑4-基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000263
按照实施例50的方法，将步骤1)中原料碘甲烷替换为异丙基溴，溶剂换为DMF,将步骤i)中1-甲基-1H-咪唑-4-胺盐酸盐替换为1-异丙基-1H-咪唑-4-胺盐酸盐，经步骤a-j得到实施例54。ESI-MS m/z:400.5[M+H]+。
实施例55：6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1-异丙基-1H-咪唑4-基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure GDA0001217634770000264
按照实施例51的方法，将步骤1)中原料环丙胺替换为3-氯苯胺,将步骤j)中1-甲基-1H-咪唑-4-胺盐酸盐替换为1-(3-氯苯基)-1H-咪唑-4-胺盐酸盐，经步骤a-k得到实施例57。ESI-MS m/z:468.5[M+H]+。
实施例56：本发明部分产物的体外酶抑制活性研究
实验材料：
Tecan
Figure GDA0001217634770000273
F500酶标仪。
Figure GDA0001217634770000272
KinEASETM-STK试剂盒(包含生物素化的多肽底物S2，Eu3+标记的只针对特异性磷酸化位点的单抗，Sa-XL665标记的链霉亲和素，KinEASE酶反应缓冲液)，384浅孔板，PAK4全长蛋白。PAK4蛋白浓度0.0256ng/μl，MgCl2，乙二胺四乙酸(EDTA)，二硫苏糖醇(DL-Dithiothreitol，DTT)，DMSO。
实验方法：
第一步：激酶反应。首先将化合物样品用DMSO配成20mM的溶液，之后根据测试需要，再用激酶反应缓冲溶液稀释成100μM、10μM、1μM等浓度。然后将PAK4激酶(浓度为0.0256ng/μl)、ATP(4μM)、生物素标记的多肽底物S2(1μM)和化合物样品(4μl)在)和)加入到10μl激酶反应缓冲溶液(含有MgCl2 5mM和DTT 1mM)中，在室温下孵育40分钟，激酶将底物S2磷酸化。之后加入10μl的含有EDTA的检测试剂，来检测磷酸化产物。
第二步：检测磷酸化产物。稀土元素铕(Eu3+)标记的抗体识别磷酸化底物，XL665标记的链霉亲和素与底物上的生物素结合。Eu3+是荧光供体，XL665是荧光受体，当Eu3+与XL665接近，Eu3+能量转移给XL665，产生HTRF信号。
结果评定方法：荧光信号是由Eu3+的620nm和XL665的665nm荧光吸收信号产生的。所以每一个孔板反应的HTRF信号(665/620)比值被计算。
Figure GDA0001217634770000271
表2部分实施例化合物在1μM、0.1μM浓度下体外PAK4抑制活性百分比
化合物 1μM 0.1μM 化合物 1μM 0.1μM
实施例1 98％ 89％ 实施例29 84％ 52％
实施例8 100％ 99％ 实施例32 99％ 79％
实施例11 69％ 26％ 实施例33 99％ 92％
实施例12 46％ 25％ 实施例34 100％ 95％
实施例16 17％ 0％ 实施例35 99％ 75％
实施例17 5％ 0％ 实施例36 97％ 62％
实施例18 78％ 36％ 实施例37 100％ 97％
实施例19 64％ 22％ 实施例44 99％ 92％
实施例24 62％ 24％ 实施例45 99％ 95％
实施例25 96％ 72％ 实施例46 100％ 96％
实施例26 98％ 86％ 实施例48 97％ 92％
实施例27 99％ 93％ 实施例49 100％ 95％
实施例28 97％ 59％
如上表所示，本发明中通式(I)的化合物中部分化合物对PAK4激酶活性具有明显的抑制作用。
实施例57：本发明部分产物针对PAK4/PAK1体外选择性测试
实验材料：EnVision多标记微孔板检测仪，PAK4全长蛋白和PAK1全长蛋白，多肽底物，缓冲溶液Hepes，MgCl2溶液，EGTA，EDTA，Brij-35，DTT等缓冲液成分等。
实验方法：Z′-LYTETM激酶实验(Z′-LYTETM Kinase Assay)，按照试剂盒标准测试条件。该测试方法分为激酶反应步骤，转化反应步骤和检测步骤。
反应步骤具体操作如下：
1.根据enzyme titration和ATP Km实验结果确定Ki测定实验反应条件。其中PAK1Km＝180000nM，PAK4Km＝3000nM。
2.化合物溶液配制：将化合物DMSO溶液从10mM稀释至1mM。使用安捷伦自动移液工作站(Bravo)将溶液依次稀释三倍，共11个浓度。
3.酶反应：PAK1(激酶域)和PAK4(激酶域)蛋白、氧杂茶邻酮(荧光供体)和荧光素(荧光受体)标记的多肽底物(Ser/thr19,Ser/thr20)，ATP(Km)和测试化合物在激酶22℃反应液中孵育。该10μL反应液中含有50mM HEPES(pH 7.5),0.01％Brij-35,10mM MgCl2,1mMEGTA,2μM FRET多肽底物,和PAK酶(20pM PAK1KD；80pM PAK4KD).
4.60分钟后加入5μL of Z’-LYTETM激酶反应转化试剂(Development Reagent)终止反应，进行非线性公式拟合曲线来计算Ki。实验结果如下：
表3部分实施例化合物对PAK4的Ki和对PAK1的Ki
Figure GDA0001217634770000281
如上表所示，本发明中通式(I)的化合物中部分化合物对PAK4的抑制活性与PAK4/PAK1选择性明显优于典型PAK4抑制剂PF3758309及十字孢碱，具有显著的技术进步与优势。
实施例58：本发明部分产物的体外酶抑制活性研究
本发明中通式(I)的化合物可单独施用，但通常是和药用载体混合物给予，所述药用载体的选择要根据所需用药途径和标准药物实践，下面分别用该类化合物的各种药物剂型，例如片剂、胶囊剂、注射剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂和软膏剂的制备方法，说明其在制药领域中的新应用。
实施例59：片剂
用含有权利要求1中的化合物(以实施例34化合物为例)10g，按照药剂学一般压片法加辅料20g混匀后，压制成100片，每片重300mg。
实施例60：胶囊剂
用含有权利要求1中的化合物(以实施例34化合物为例)10g，按照药剂学胶囊剂的要求将辅料20g混匀后，装入空心胶囊，每个胶囊重300mg。
实施例61：注射剂
用含有权利要求1中的化合物(以实施例34化合物为例)10g，按照药剂学常规方法，进行活性炭吸附，经0.65μm微孔滤膜过滤后，填入氮气罐制成水针制剂，每只装2mL，共灌装100瓶。
实施例62：气雾剂
用含有权利要求1中的化合物(以实施例34化合物为例)10g，用适量丙二醇溶解后，加入蒸馏水及其他辐料后，制成500mL的澄清溶液即得。
实施例63：栓剂
用含有权利要求1中化合物的化合物(以实施例34化合物为例)10g，将之研细加入甘油适量，研匀后加入已熔化的甘油明胶，研磨均匀，倾入已涂润滑剂的模型中，制得栓剂50颗。
实施例64：膜剂
用含有权利要求1中的化合物(以实施例34化合物为例)10g，将聚乙烯醇、药用甘油、水等搅拌膨胀后加热溶解，80目筛网过滤，再将实施例18化合物加入到滤液中搅拌溶解，涂膜机制膜100片。
实施例65：滴丸剂
用含有权利要求1中的化合物(以实施例34化合物为例)10g，与明胶等基质50g加热熔化混匀后，滴入低温液体石蜡中，共制得滴丸1000丸。
实施例66：外用搽剂
用含有权利要求1中的化合物(以实施例34化合物为例)10g，按照常规药剂学方法与乳化剂等辅料2.5g混合研磨，再加蒸馏水至200mL制得。
实施例67：软膏剂
用含有权利要求1中的化合物(以实施例34化合物为例)10g，研细后与凡士林等油性基质500g研匀制得。
尽管已经通过特定实施方案描述了本发明，但修改和等价变化对于精通此领域的技术人员而言是显见的，且它们都包含在本发明范围。

Claims (6)

1.一种通式(I)所示的酰胺/硫代酰胺类衍生物，及其几何异构体或其药学上可接受的盐；
Figure FDA0002727364200000011
其中，A环为
Figure FDA0002727364200000012
R1选自氢、C1-C6烷基、被卤素取代的C1-C6烷基、C3-C6环烷基、被卤素取代的C3-C6环烷基、C1-C4烷氧基、六元芳基、苄基，其中所述芳基、苄基可进一步被1-6个Rx取代；
B环为苯环，B环可进一步被1-4个R2所取代；
R2选自氢、卤素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，羟基，卤代的C1-C6烷基；
通式(I)中
Figure FDA0002727364200000013
部分的Z选自O或S；
C环为4-7元单环杂环基、4-7元双环杂环基，上述环至少含1个氮原子，且该氮原子与酰基或硫代酰基部分
Figure FDA0002727364200000014
形成酰胺键，该环还包括另外0-2个N,O,或S的杂原子，且该环可进一步被1-4个Rx取代，Rx取代后形成的手性碳原子为R构型、S构型或者消旋形式；
Rx为-H、羟基、氨基、(C1-C6)烷基、被单或二(C1-C6烷基)取代的氨基。
2.权利要求1的通式(I)所示的酰胺/硫代酰胺类衍生物，及其几何异构体或其药学上可接受的盐，
其中，B环为苯环，所述苯环与相邻环组成的苯并嘧啶环进一步被1-4个R2所取代，R2选自氢、氟，氯，溴，碘，甲基，甲氧基，羟基，三氟甲基。
3.如下的衍生物，及其几何异构体或其药学上可接受的盐：
6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000015
2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000016
2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000021
2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-异丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000022
2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丁基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000023
2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-苯基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000024
2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-苄基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000025
6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000026
6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-异丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000027
6-氯-2-[1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-苯基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000031
6-氯-2-[4-吗啉基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure FDA0002727364200000032
6-氯-2-[4-甲基哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure FDA0002727364200000033
6-氯-2-[哌啶基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure FDA0002727364200000034
6-氯-2-[1,1-二氧代硫代吗啉基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure FDA0002727364200000035
6-氯-2-[3-氧代哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure FDA0002727364200000036
6-氯-2-[4-羟基哌啶基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure FDA0002727364200000041
6-氯-2-[4-羟基-4-甲基哌啶基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure FDA0002727364200000042
6-氯-2-[4-氨基哌啶基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000043
6-氯-2-[4-氨基-4-甲基哌啶基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000044
6-氯-2-[3-氨基氮杂环丁基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000045
6-氯-2-[2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷-2-基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000046
6-氯-2-[(1R,4R)2,5-二氮双环(2.2.1)庚烷-2-基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000051
6-氯-2-[(六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000052
6-氯-2-[4-甲胺基哌啶基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000053
(S)-6-氯-2-[2-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000054
(R)-6-氯-2-[2-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000055
(R)-6-氯-2-[3-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000056
(S)-6-氯-2-[3-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000057
6-氯-2-[3,5-二甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000061
6-氯-2-[3,3’-二甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000062
6-氯-2-[3,3’-二甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000063
(S)-6-氯-2-[2-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000064
(R)-6-氯-2-[2-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000065
(R)-6-氯-2-[3-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000066
(S)-6-氯-2-[3-甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000071
6-氯-2-[3,5-二甲基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000072
(R)-6-氯-2-[3-乙基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000073
(R)-6-氯-2-[3-异丙基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000074
(R)-6-氯-2-[3-苯基-1-哌嗪基]甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000075
6-氯-2-[1-哌嗪基]硫代甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure FDA0002727364200000076
6-氯-2-[1-哌嗪基]硫代甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉
Figure FDA0002727364200000081
(R)-6-氯-2-[3-甲基-1-哌嗪基]硫代甲酰基-4-[1H-3-(5-甲基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000082
(R)-6-氯-2-[3-甲基-1-哌嗪基]硫代甲酰基-4-[1H-3-(5-环丙基)吡唑基]胺基喹唑啉盐酸盐
Figure FDA0002727364200000083
4.一种药用组合物，包含权利要求1至3中任何一项的衍生物及其几何异构体或药学上可接受的盐作为活性成分和药学上可接受的赋形剂。
5.权利要求1-3任何一项所述的衍生物及其药学上可接受的盐或权利要求4所述的药用组合物在制备预防或治疗与PAK4激酶的表达或活性有关的疾病的药物中的应用。
6.权利要求1-3任何一项所述的衍生物及其药学上可接受的盐或权利要求4所述的药用组合物在制备预防或***的药物中的应用。
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