CN108184817A - 一种脐带血造血干细胞冻存液及冻存方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种脐带血造血干细胞冻存液，所述冻存液为每50ml冻存液包含以下组分：二甲基亚砜、聚乙烯吡咯烷酮、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、羧基壳聚糖、粘多糖、氯化钙、氯化镁、趋化因子LTD4、透明质酸、聚丙烯醇、海藻糖。本发明还提供一种脐带血造血干细胞冻存方法，该方法为脐带血造血干细胞与冻存液等体积混合，混合均匀后得到细胞悬液，将细胞悬液装入冻存袋中，再将冻存袋装入冻存袋盒中，按照1℃/min的速率进行程序降温至‑80℃，12‑16h后转至‑80℃冰箱长期存储。
Description
技术领域
本发明涉及细胞生物学技术领域，具体涉及一种造血干细胞冻存液及造血干细胞冻存方法。
背景技术
1988年10月，Gluckman等完成第1例人类白细胞抗原(HLA)相合的同胞脐血移植(CBT)，拉开了CBT临床应用的序幕。随着对造血干细胞归巢的机制和移植后免疫重建等基础研究的不断深入和探究，脐血造血干细胞已经被越来越广泛地应用于儿童及成人的恶性和非恶性血液病的治疗。目前全球已有35 000例以上的儿童和成人患者接受了同胞或非血缘脐血造血干细胞移植(UCBT)。
脐带血来源丰富，全球的130多家公共脐血库已冻存了900 000份以上的脐血备用，2001年，我国第一家脐带血造血干细胞库在天津市成立，目前我国正式批准建立的7家脐带血库中冻存公共脐血超过10万份。脐带血中造血干细胞含量高，免疫原性很弱，且脐血中T淋巴细胞数较少且较原始，炎症细胞因子产生减少且免疫抑制因子增多，因此，UCBT后GVHD尤其是慢性GVHD发生率低且程度轻，恶性血液病患者UCBT后的复发率较低。脐带血造血干细胞在临床上的应用愈加广泛，而脐带血造血干细胞的冷冻保存是保证造血干细胞移植成功的关键技术之一，所以一个合适的冻存方式非常重要。目前已知的造血干细胞的冷冻保存包括-196℃液氮程控降温存储和-80℃非程控降温保存，-196℃液氮冻存能长期保存细胞，可保存20年以上，但液氮存储的操作复杂、费用高。-80℃非程控降温的方法对脐带血造血干细胞的保存操作相对简便并且费用低，但保存细胞时间及相应的细胞活性受限。通常造血干细胞的保存液中均含有种类不同的蛋白成分，而蛋白成分有引入外源病毒及产生人体自身免疫等风险，这在一定程度上也限制了造血干细胞在临床上的应用。
探索一种操作便捷、成本低并且能长时间保存脐带血造血干细胞的方法，对于临床上脐带血造血干细胞的储存、应用及造血干细胞移植成功具有重要意义。脐带血造血干细胞的冷冻存储中，使用的冷冻保护剂一般分为渗透型的保护剂和非渗透型的保护剂，渗透型的保护剂以二甲基亚砜居多，非渗透性的保护剂则包括一些大分子物质，包括右旋糖酐、羟乙基淀粉、聚乙烯吡咯烷酮、人血清白蛋白、聚蔗糖等。不同脐带血造血干细胞保护剂的配方及使用方法差别较大，对干细胞的保存效果也良莠不齐，大多数保护剂对脐带血造血干细胞的保存活率在80％左右，同时操作较为复杂，成分具有一定的风险性，复苏后的脐带血造血干细胞的干性维持及诱导增殖能力明显下降。
发明内容
为了克服脐带血造血干细胞传统冻存方法中存在的缺点和不足，本发明的目的在于提供一种脐带血造血干细胞冻存液，该脐带血造血干细胞冻存液不含有蛋白成分，配方简单，原料便宜易得，无需程序降温且能在-80℃较长时间存储，有效保护脐带血造血干细胞免受低温冷冻损伤，安全性高，脐带血造血干细胞的复苏成活率高，可以达到95％以上。复苏后细胞活率高，细胞增殖速度快，数量大，很好的保证了复苏后的脐带血造血干细胞的生理功能和生物学特性，复苏后的免疫细胞均没有可见异物、细菌、真菌、细菌内毒素、支原体的污染，微生物检测指标符合要求，大大延长了脐带血造血干细胞的保存时间。
本发明的目的在于提供一种与冻存液相应的脐带血造血干细胞的冻存方法，根据本发明的冻存液与冻存方法，脐带血造血干细胞的冻存复苏效果达到最优化，同时操作简便，为临床外周血造血干细胞的储存应用及造血干细胞移植提供可靠保证。
本发明提供一种脐带血造血干细胞冻存液，所述冻存液为每50ml冻存液包含以下组分：
优选的本发明冻存液为每50ml冻存液包含以下组分：
优选的本发明冻存液为每50ml冻存液包含以下组分：
优选的本发明冻存液为每50ml冻存液包含以下组分：
优选的本发明冻存液为每50ml冻存液包含以下组分：
优选的本发明冻存液为每50ml冻存液包含以下组分：
本发明还提供一种脐带血造血干细胞冻存方法，该冻存方法为将脐带血造血干细胞加入到权利要求1-6任一项所述的冻存液中，脐带血造血干细胞与冻存液等体积混合，混合均匀后得到细胞悬液，将细胞悬液装入冻存袋中，再将冻存袋装入冻存袋盒中，按照1℃/min的速率进行程序降温至-80℃，12-16h后转至-80℃冰箱长期存储。
本发明优选的脐带血造血干细胞冻存方法为脐带血造血干细胞与冻存液等体积混合前，脐带血造血干细胞与冻存液分别在2-8℃进行预冷，以降低二甲基亚砜的毒性，提高复苏后细胞的活性。
二甲基亚砜是应用最广泛且高效的渗透性保护剂，二甲基亚砜能提高细胞膜对水的通透性，降低溶液的冰点，慢速程序降温可以将细胞内的水分充分渗出细胞外，减少细胞内冰晶的形成，从而减少冰晶形成造成的细胞损伤。
聚乙烯吡咯烷酮是一种大分子的非渗透性细胞保护剂，可使细胞脱水，减少细胞内冰晶形成，对细胞膜具有保护作用，同时维持细胞内外电解质平衡，减少溶质损伤，其中以聚乙烯吡咯烷酮K30效果最佳。
磷酸氢二钠与磷酸二氢钾联合配制得到磷酸盐缓冲液，首次被用作冻存液的缓冲体系，保证冻存液的稳定性。钠离子与钾离子作为常见的细胞外信号分子，与细胞膜上特异性受体结合，出发胞内外信号转导的级联反应，自身跨膜转运，参与维持细胞活性与增殖能力。磷酸根提供细胞生命活动的重要营养元素，与细胞代谢、能量供应息息相关，也是维持细胞膜完整性必不可少的元素之一，作为辅酶因子参与细胞能量存储与转移。
壳聚糖是一种天然高分子化合物，无毒无污染，具有良好的生物活性与安全性，其分子链上的游离氨基酸在弱酸溶液中结合一个质子，生成阳离子聚合体，与细胞膜表面的负电荷产生吸附作用，保护细胞膜的完整性。壳聚糖与细胞的生长和骨重建相关，同时具有一定的抑菌性。
本发明的脐血造血干细胞的冻存液采用壳聚糖与磷酸盐缓冲液联合使用的方法，磷酸盐缓冲液提供一个弱酸的溶液环境，促进壳聚糖阳离子聚合体的生成，参与保护细胞膜的完整性。
本发明所述壳聚糖为本领域技术人员熟知的壳聚糖即可，并无特殊的限制，本发明壳聚糖购自sigma公司。
本发明的脐带血造血干细胞冻存液通过采用上述原料，并严格控制各原料的配比，得到的冻存液能有效保护脐带血造血干细胞，减少细胞冰晶损伤，安全性高，显著提高了造血干细胞的复苏活率，达到95％以上，同时复苏后的细胞增殖数量大、增殖能力强，并且维持了造血干细胞复苏后的生理功能和生物学特性，延长了脐带血造血干细胞的保存时间。
本发明所述的脐带血造血干细胞冻存液还添加了粘多糖，大量的细胞浆和生长因子的移动都与粘多糖相关。粘多糖由于分子内静电排斥，使分子富于弹性，形成螺旋状或者无规则线团，是膜蛋白的被覆物质，对细胞膜的稳定性具有促进作用。
本发明的脐血造血干细胞的冻存液采用粘多糖与壳聚糖联合使用的方法，壳聚糖与粘多糖发生静电作用，形成的支架有助于细胞骨架的维持，促进细胞的增殖与生长因子的分泌。
本发明所述的脐带血造血干细胞冻存液还添加了CaCl2，钙离子是细胞内重要的第二信使分子，通过质膜上的钙通道调节胞内外细胞信号转导，减少细胞能量代谢与物质代谢的障碍，对维持细胞膜的完整性与通透性具有重要作用。
本发明所述的脐带血造血干细胞冻存液还添加了MgCl2，Mg2+是一种重要的辅酶因子，参与机体能量代谢、生物合成、信息传递，对维持细胞活性具有重要作用，Mg2+可以维持NR2B mRNA表达水平，具有抑制细胞凋亡的作用。
本发明的脐血造血干细胞的冻存液采用粘多糖与Ca2+、Mg2+、K+、Na+联合使用的方法，粘多糖与Ca2+、Mg2+、K+、Na+有特异性亲和作用，参与调解电解质的移动与细胞代谢作用。
本发明的脐带血造血干细胞冻存液还添加LTD4趋化因子，LTD4能够通过不同的G蛋白(Gi和Gq等)介导活化造血干细胞的MAPK信号分子和Pyk2信号分子，诱导细胞增殖等效应。Pyk2分子是参与调节细胞运动的重要信号分子之一，同时也与多种信号途径相关联，LTD4能够活化MAPK信号分子和Pyk2信号分子，诱导MAPK信号分子和Pyk2信号分子磷酸化，显著增加造血干细胞的生物学活性，提高造血干细胞冻存复苏后的增殖能力。
本发明的脐带血造血干细胞冻存液还添加透明质酸，透明质酸广泛存在于细胞外基质、细胞表面和细胞内部,其独特的理化特性使其具有多种生物学功能。透明质酸对细胞具有多种作用,可以调控细胞生长因子和细胞因子的分泌,抑制蛋白酶的分解,影响细胞的生长、增殖和分化。我们通过添加0.01％-0.09％浓度的透明质酸于冻存液中，复苏后的造血干细胞的活率、活性、增殖能力有显著的提高
本发明在脐带血造血干细胞冻存液中添加聚丙烯醇，可以替代现有的二甲基亚砜作为保护剂，减少二甲基亚砜的使用量，有效降低二甲基亚砜的细胞毒性，维持细胞复苏活性。
本发明的脐带血造血干细胞冻存液添加了海藻糖，减少细胞在接近冰点时胞内的冰晶形成，可以减少二甲基亚砜的使用，维持细胞膜的稳定性，有效的保护细胞，并有效降低细胞毒性。
本发明的冻存液的有益技术效果为：
1、配方简单，原料便宜，能有效保护造血干细胞免受冷冻损伤，安全性高，对细胞的损伤小，可以提高脐带血造血干细胞的复苏活率，复苏后的活率可以达到95％以上，且复苏后细胞增殖数量大、速度快，维持了细胞复苏后的生理功能和生物学特性，延长了脐带血造血干细胞的保存时间；
2、本发明的脐带血造血干细胞冻存液中不含有蛋白成分，因此不会有引入外源病毒及自身免疫的风险，降低了动物病原污染的可能性。
3、本发明的脐带血造血干细胞冻存液将脐带血造血干细胞在-80℃条件下保存5年后，细胞活率维持在85％以上，说明脐带血造血干细胞在本发明冻存液中-80℃存储稳定性较好。
4、本发明的脐带血造血干细胞冻存方法可以有效解决脐带血造血干细胞存储、运输和临床应用的相关技术瓶颈，大大提高细胞-80℃冻存时间，做到无蛋白添加成分，大大降低了存储运输的成本和风险，为脐带血造血干细胞的临床应用提供可靠保证。
具体实施方式
为了便于本领域技术人员的理解，下面结合实施例对本发明作进一步的说明，实施方式提及的内容并非对本发明的限定。
实施例1、脐带血造血干细胞冻存液，包括如下重量/体积的原料
脐带血造血干细胞冻存方法：将脐带血造血干细胞、上述冻存液分别在2-8℃进行预冷，预冷后的脐带血造血干细胞与预冷后的冻存液等体积混合，混合均匀得到细胞悬液，将细胞悬液装入冻存袋中，再将冻存袋装入冻存袋盒中，按照1℃/min的速率进行程序降温至-80℃,12-16h后转至-80℃冰箱长期存储。
实施例2、脐带血造血干细胞冻存液，包括如下重量/体积的原料
脐带血造血干细胞冻存方法：将脐带血造血干细胞、上述冻存液分别在2-8℃进行预冷，预冷后的脐带血造血干细胞与预冷后的冻存液等体积混合，混合均匀得到细胞悬液，将细胞悬液装入冻存袋中，再将冻存袋装入冻存袋盒中，按照1℃/min的速率进行程序降温至-80℃,12-16h后转至-80℃冰箱长期存储。
实施例3、脐带血造血干细胞冻存液，包括如下重量/体积的原料
脐带血造血干细胞冻存方法：将脐带血造血干细胞、上述冻存液分别在2-8℃进行预冷，预冷后的脐带血造血干细胞与预冷后的冻存液等体积混合，混合均匀得到细胞悬液，将细胞悬液装入冻存袋中，再将冻存袋装入冻存袋盒中，按照1℃/min的速率进行程序降温至-80℃,12-16h后转至-80℃冰箱长期存储。
实施例4、脐带血造血干细胞冻存液，包括如下重量/体积的原料
脐带血造血干细胞冻存方法：将脐带血造血干细胞、上述冻存液分别在2-8℃进行预冷，预冷后的脐带血造血干细胞与预冷后的冻存液等体积混合，混合均匀得到细胞悬液，将细胞悬液装入冻存袋中，再将冻存袋装入冻存袋盒中，按照1℃/min的速率进行程序降温至-80℃,12-16h后转至-80℃冰箱长期存储。
实施例5、脐带血造血干细胞冻存液，包括如下重量/体积的原料
脐带血造血干细胞冻存方法：将脐带血造血干细胞、上述冻存液分别在2-8℃进行预冷，预冷后的脐带血造血干细胞与预冷后的冻存液等体积混合，混合均匀得到细胞悬液，将细胞悬液装入冻存袋中，再将冻存袋装入冻存袋盒中，按照1℃/min的速率进行程序降温至-80℃,12-16h后转至-80℃冰箱长期存储。
试验例：利用台盼蓝染色法，对于制备的实施例1-5测定不同时间段的细胞存活率，具体结果见下表：
| 细胞存活率 | 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 实施例4 | 实施例5 |
| 12个月(％) | 79.38 | 85.91 | 91.33 | 95.31 | 92.26 |
| 24个月(％) | 76.12 | 82.02 | 89.16 | 92.01 | 90.98 |
| 36个月(％) | 73.52 | 80.08 | 86.63 | 90.19 | 87.95 |
| 48个月(％) | 72.11 | 79.14 | 85.12 | 88.12 | 86.06 |
| 60个月(％) | 70.19 | 77.32 | 83.35 | 85.28 | 83.22 |
从上表可以看出，本发明的脐带血造血干细胞冻存液能有效保护脐带血造血干细胞减少冷冻损伤，安全性高，提高造血干细胞的复苏成活率，1年冻存时间复苏后的成活率可以达到79％-95％以上，且复苏后细胞细胞增殖数量大、速度快，并维持了造血干细胞复苏后的生理功能和生物学特性，5年冻存时间复苏后的成活率可以达到70％-85％以上，延长了造血干细胞的保存时间,复苏后的免疫细胞均没有可见异物、细菌、真菌、细菌内毒素、支原体的污染，微生物检测指标符合要求。
上述实施例为本发明较佳的实现方案，除此之外，本发明还可以其它方式实现，在不脱离本发明构思的前提下任何显而易见的替换均在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种脐带血造血干细胞冻存液，其特征在于，所述冻存液为每50ml冻存液包含以下组分：
2.根据权利要求1所述的冻存液，其特征在于，所述冻存液为每50ml冻存液包含以下组分：
3.根据权利要求1所述的冻存液，其特征在于，所述冻存液为每50ml冻存液包含以下组分：
4.根据权利要求1所述的冻存液，其特征在于，所述冻存液为每50ml冻存液包含以下组分：
5.根据权利要求1所述的冻存液，其特征在于，所述冻存液为每50ml冻存液包含以下组分：
6.根据权利要求1所述的冻存液，其特征在于，所述冻存液为每50ml冻存液包含以下组分：
7.一种脐带血造血干细胞冻存方法，其特征在于，该冻存方法为将脐带血造血干细胞加入到权利要求1-6任一项所述的冻存液中，脐带血造血干细胞与冻存液等体积混合，混合均匀后得到细胞悬液，将细胞悬液装入冻存袋中，再将冻存袋装入冻存袋盒中，按照1℃/min的速率进行程序降温至-80℃，12-16h后转至-80℃冰箱长期存储。
8.根据权利要求7所述的脐带血造血干细胞冻存方法，其特征在于，所述脐带血造血干细胞与冻存液等体积混合前，脐带血造血干细胞与冻存液分别在2-8℃进行预冷。
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|---|---|
| CN (1) | CN108184817A (zh) |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN110250165A (zh) * | 2019-07-24 | 2019-09-20 | 安徽科门生物科技有限公司 | 一种脐带间充质干细胞冻存液及冻存方法 |
| CN110583625A (zh) * | 2019-09-17 | 2019-12-20 | 深圳大学 | 一种脐带储存液 |
| CN110755452A (zh) * | 2019-11-23 | 2020-02-07 | 博雅干细胞科技有限公司 | 干细胞治疗骨关节炎的用途 |
| CN110755451A (zh) * | 2019-11-23 | 2020-02-07 | 博雅干细胞科技有限公司 | 用于治疗骨关节炎的间充质干细胞组合物及其用途 |
| CN110840914A (zh) * | 2019-11-23 | 2020-02-28 | 博雅干细胞科技有限公司 | 细胞治疗剂用于缓解或改善血管病变的方法 |
| CN110839612A (zh) * | 2019-10-10 | 2020-02-28 | 湖南源品细胞生物科技有限公司 | 脐血造血干细胞保存液及其制备方法 |
| CN110882276A (zh) * | 2019-11-23 | 2020-03-17 | 博雅干细胞科技有限公司 | 细胞治疗组合物及治疗血管病变的方法 |
| CN111406736A (zh) * | 2019-01-05 | 2020-07-14 | 杭州可典生物科技有限公司 | 一种细胞冻存液 |
| CN113564121A (zh) * | 2021-08-10 | 2021-10-29 | 合肥滴碧云生物科技有限公司 | 一种造血干细胞冻存方法 |
| CN114766471A (zh) * | 2022-05-31 | 2022-07-22 | 宁波建顺生物科技有限公司 | 用于干细胞及其制品长期保存的冻存液及冻存方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1177905A (zh) * | 1995-03-08 | 1998-04-01 | 切洛克斯实验室股份有限公司 | 冷冻保存溶液 |
| CN105230610A (zh) * | 2015-11-13 | 2016-01-13 | 中国科学院化学研究所 | 一种冷冻保存液及其制备方法和应用 |
| CN107094753A (zh) * | 2017-05-31 | 2017-08-29 | 东莞市保莱生物科技有限公司 | 一种造血干细胞冻存液及造血干细胞冻存方法 |
| WO2017194954A1 (en) * | 2016-05-12 | 2017-11-16 | University Of Leeds | Formulation |
-
2018
- 2018-01-11 CN CN201810027364.7A patent/CN108184817A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1177905A (zh) * | 1995-03-08 | 1998-04-01 | 切洛克斯实验室股份有限公司 | 冷冻保存溶液 |
| CN105230610A (zh) * | 2015-11-13 | 2016-01-13 | 中国科学院化学研究所 | 一种冷冻保存液及其制备方法和应用 |
| WO2017194954A1 (en) * | 2016-05-12 | 2017-11-16 | University Of Leeds | Formulation |
| CN107094753A (zh) * | 2017-05-31 | 2017-08-29 | 东莞市保莱生物科技有限公司 | 一种造血干细胞冻存液及造血干细胞冻存方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| KATAYAMA Y等: "The effects of a simplified method for cryopreservation and thawing procedures on peripheral blood stem cells", 《BONE MARROW TRANSPLANTATION》 * |
| 杨晓顺等: "血细胞低温保存研究进展", 《临床输血与检验》 * |
| 梅钧: "《医学免疫学》", 31 March 2014, 中国医药科技出版社 * |
Cited By (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN111406736A (zh) * | 2019-01-05 | 2020-07-14 | 杭州可典生物科技有限公司 | 一种细胞冻存液 |
| CN110250165A (zh) * | 2019-07-24 | 2019-09-20 | 安徽科门生物科技有限公司 | 一种脐带间充质干细胞冻存液及冻存方法 |
| CN110583625A (zh) * | 2019-09-17 | 2019-12-20 | 深圳大学 | 一种脐带储存液 |
| CN110839612A (zh) * | 2019-10-10 | 2020-02-28 | 湖南源品细胞生物科技有限公司 | 脐血造血干细胞保存液及其制备方法 |
| CN110839612B (zh) * | 2019-10-10 | 2021-02-02 | 湖南源品细胞生物科技有限公司 | 脐血造血干细胞保存液及其制备方法 |
| CN110882276A (zh) * | 2019-11-23 | 2020-03-17 | 博雅干细胞科技有限公司 | 细胞治疗组合物及治疗血管病变的方法 |
| CN110840914A (zh) * | 2019-11-23 | 2020-02-28 | 博雅干细胞科技有限公司 | 细胞治疗剂用于缓解或改善血管病变的方法 |
| CN110755451A (zh) * | 2019-11-23 | 2020-02-07 | 博雅干细胞科技有限公司 | 用于治疗骨关节炎的间充质干细胞组合物及其用途 |
| CN110755452A (zh) * | 2019-11-23 | 2020-02-07 | 博雅干细胞科技有限公司 | 干细胞治疗骨关节炎的用途 |
| CN110882276B (zh) * | 2019-11-23 | 2021-07-06 | 博雅干细胞科技有限公司 | 细胞治疗组合物及治疗血管病变的方法 |
| CN110840914B (zh) * | 2019-11-23 | 2021-07-06 | 博雅干细胞科技有限公司 | 细胞治疗剂用于缓解或改善血管病变的方法 |
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