CN108096346A - 芊罗叶樱桃核组合物、其制备方法及在制备促胃肠动力药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种天然药物组合物、其制备方法及其在制备促进胃肠蠕动药物中的应用。该天然药物组合物由芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物、芊罗叶乙醇提取物与樱桃核超临界萃取物按4‑6:2‑3:1‑2的比例组成，该组合物对于正常及胃肠运动受抑制的动物胃肠均有明显的促进运动的功能，可用于制备促进胃肠蠕动药物，治疗胃肠动力障碍，疗效确切，无明显毒副作用，具有良好的应用前景。

Description

芊罗叶樱桃核组合物、其制备方法及在制备促胃肠动力药物 中的应用

技术领域

本发明涉及一种天然药物组合物，更具体地涉及一种由芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物、芊罗叶乙醇提取物与樱桃核超临界萃取物组成的天然药物组合物，该天然药物组合物的制备方法以及该天然药物组合物在用于促进胃肠蠕动药物制备中的应用。

背景技术

胃肠动力障碍性疾病主要指因胃肠动力紊乱引起的各种消化道症状的胃肠道疾病，是消化***最常见的疾病。胃肠动力障碍疾病包括胃肠动力性疾病(GIMD)和功能性胃肠病(FGID)两大类，全消化道几乎均可受累。亚洲国家的发病率约为5％-10％，既影响患者的生活质量和工作效率又消耗大量的公共卫生资源，日益引起重视。

胃肠运动功能的调节机制非常复杂，包括中枢神经***、肠壁神经***的作用及众多神经递质的调节。其中，胃肠道Cajal***(ICC)、胃肠激素和5-羟色胺(5-HT)是胃肠运动重要的调节因素，功能与结构的异常是导致胃肠动力障碍的因素之一，另外微血管病变和微循环障碍、代谢紊乱、幽门螺杆菌感染、***、胃酸分泌异常等也会造成胃肠动力障碍。除改变饮食外，目前临床上多以西医治疗为主，其治疗胃肠动力障碍性疾病的药物包括促进胃肠动力药、抑酸药、抗酸药、保护胃黏膜药、抗幽门螺杆菌(HP)感染药、抗抑郁药与胃肠动力调节剂等。但临床研究发现，西医治疗胃肠动力障碍性疾病的不良反应明显，如抗胆碱药甲氧氯普胺，在起到抑吐作用的同时可能阻断多巴胺受体，使胆碱能受体相对亢进，导致锥体外系反应。尤其儿童用药时，更易出现肌肉震颤、头颈后仰、发音困难及运动协调障碍等锥体外系反应。

中医药治疗胃肠动力障碍性疾病具有丰富的经验，因其疗效确切，副作用少，且不易复发，备受人们关注。有关中医治疗的应用如理气解郁药物有枳实、木香、乌药、大腹皮、槟榔等，健脾和胃药物藿香、厚朴、佩兰、豆蔻、草果等，燥湿清化温化药物黄连、黄柏、苦参、苍术、黄芩、秦皮等，活血祛瘀药物桃仁、红花、三棱、莪术、元胡、郁金等，可兴奋胃肠道，加强收缩力。

芊罗是木犀科女贞属植物，主要分布于山东半岛沿海。芊罗喜光，较耐寒，多生长于沿海海拔600-1000米以上的高崖石缝。芊罗枝、叶、果、根都可入药，其叶营养丰富，可代茶饮。芊罗叶中含有多种氨基酸，并含有丰富的Ca、K、Mg、Na等10种无机元素，并且还含有三萜烯酸、氯原酸、黄酮类化合物等丰富的药用成分，具有清热解毒，抑菌消炎、降压减肥、抑癌防癌、调节机制和抗辐射、抗衰老、降血脂、降血糖，降低胆固醇和甘油三酯、改善血液粘稠度、扩张微血管改善微循环，安神利眠等药理功效和营养保健作用。樱桃核为蔷薇科落叶灌木果树樱桃(Cerasus pseudocerasus)的干燥成熟的种子。中医认为樱桃核具有发表透疹，消瘤去瘢，行气止痛的作用，属解表药下属分类的辛温解表药。研究表明，樱桃核的主要成分是类黄酮，类黄酮具有抗菌、消炎、抗突变、降压、清热解毒、镇静、利尿等功效，还可以作为添加剂应用到食品中。本发明人经过大量的各配方比例的研究和实验，最后获得了本发明的最佳药物比例组合物，并证明了其能促进胃肠蠕动，由此完成了本发明。

发明内容

本发明第一个目的在于提供一种天然药物组合物，该组合物的原料价廉易得、疗效确切、安全可靠，便于应用推广，具有良好的促进胃肠蠕动功能。

本发明第二个目的在于提供上述天然药物组合物的制备方法。

本发明第三个目的在于提供上述天然药物组合物在制备促进胃肠蠕动药物中的应用。

本发明提供的一种天然药物组合物，由芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物、芊罗叶乙醇提取物与樱桃核超临界萃取物按4-6:2-3:1-2的比例组成。

上述天然药物组合物，其中芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物、芊罗叶乙醇提取物与樱桃核超临界萃取物的用量比例是6:3:2。

其中，芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物、芊罗叶乙醇提取物与樱桃核超临界萃取物可通过本领域技术人员公知的常规方法进行提纯获得，也能获得相同的疗效。以下列出的方法仅仅是发明人认为更优选的方法，并不意在对该天然药物组合物中各成分的提取方法做出特别的限制。

优选地，上述天然药物组合物中芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物的制备方法是：

按照配伍比例为1：1或1-5：1其他比例取芊罗叶、樱桃核，10-12倍量蒸馏水于室温下温浸12h，置于电炉上加热煎煮2h，绢布过滤取滤液，药渣再分别加10倍量蒸馏水，各煎煮1.5h，过滤，合并滤液，加热浓缩至小体积，采用真空干燥箱50℃减压干燥48h得棕黄色粉末，即为芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物。

上述天然药物组合物中芊罗叶乙醇提取物的制备方法是：

取干燥芊罗叶，过筛，置于圆底烧瓶中，加入10-12倍量70％乙醇，于电热套中加热回提取3次，每次分别为2h、1.5h、1.5h，过滤合并滤液，用旋转蒸发仪回收乙醇，浓缩，减压干燥成干浸膏，粉碎，过80目筛，即为芊罗叶乙醇提取物。

上述天然药物组合物中樱桃核超临界萃取物的制备方法是：

取樱桃核去其表面杂质，干燥粉碎，过80目筛，于超临界装置中萃取，在萃取压力15MPa，萃取温度55℃，固液比为1.0mL/mg的条件下，萃取2h，将获得的萃取物减压干燥成干浸膏，粉碎，过80目筛，即为樱桃核超临界萃取物；

本发明还提供了该天然药物组合物的优选的制备方法，包括：

(1)芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物的制备

按照配伍比例为1：1或1-5：1其他比例取芊罗叶、樱桃核，10-12倍量蒸馏水于室温下温浸12h，置于电炉上加热煎煮2h，绢布过滤取滤液，药渣再分别加10倍量蒸馏水，各煎煮1.5h，过滤，合并滤液，加热浓缩至小体积，采用真空干燥箱50℃减压干燥48h得棕黄色粉末，即为芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物。

(2)芊罗叶乙醇提取物的制备

取干燥芊罗叶，过筛，置于圆底烧瓶中，加入10-12倍量70％乙醇，于电热套中加热回提取3次，每次分别为2h、1.5h、1.5h，过滤合并滤液，用旋转蒸发仪回收乙醇，浓缩，减压干燥成干浸膏，粉碎，过80目筛，即为芊罗叶乙醇提取物。

(3)樱桃核超临界萃取物的制备

取樱桃核去其表面杂质，干燥粉碎，过80目筛，于超临界装置中萃取，在萃取压力15MPa，萃取温度55℃，固液比为1.0mL/mg的条件下，萃取2h，将获得的萃取物减压干燥成干浸膏，粉碎，过80目筛，即为樱桃核超临界萃取物；

(4)按比例选取芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物、芊罗叶乙醇提取物与樱桃核超临界萃取物均匀混合，即得。

所述用于促进胃肠蠕动药物制备的天然药物组合物，采用常规的制剂技术，制成含有天然药物组合物100mg或500mg规格的制剂，在剂型选择上并没有特别的限制，可制成片剂、胶囊剂、颗粒剂等。

本发明还包括天然药物组合物在制备促进胃肠蠕动药物中的用途。

本发明天然药物组合物在促进胃肠蠕动方面的有益效果如下：

1.本发明天然药物组合物具有良好的促进胃肠蠕动的作用，该组合物的原料价廉易得、疗效确切、安全可靠，便于应用推广。

2.本发明人独创地将芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物、芊罗叶乙醇提取物与樱桃核超临界萃取物进行组合，并通过大量实验确定这些组分之间的用量配比，使该组合物发挥了很好的协同作用，增效明显，获得意外的促进胃肠蠕动效果。

具体实施方式

下面通过实施例和试验例进一步阐述本发明天然药物组合物的制备，以及其在促进胃肠蠕动中的有益效果。

实施例1：本发明芊罗叶樱桃核组合物及其制剂的制备

第一步：各种提取物的制备

(1)芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物的制备

按照配伍比例为1：1或1-5：1其他比例取芊罗叶、樱桃核，10-12倍量蒸馏水于室温下温浸12h，置于电炉上加热煎煮2h，绢布过滤取滤液，药渣再分别加10倍量蒸馏水，各煎煮1.5h，过滤，合并滤液，加热浓缩至小体积，采用真空干燥箱50℃减压干燥48h得棕黄色粉末，即为芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物。

(2)芊罗叶乙醇提取物的制备

取干燥芊罗叶，过筛，置于圆底烧瓶中，加入10-12倍量70％乙醇，于电热套中加热回提取3次，每次分别为2h、1.5h、1.5h，过滤合并滤液，用旋转蒸发仪回收乙醇，浓缩，减压干燥成干浸膏，粉碎，过80目筛，即为芊罗叶乙醇提取物。

(3)樱桃核超临界萃取物的制备

取樱桃核去其表面杂质，干燥粉碎，过80目筛，于超临界装置中萃取，在萃取压力15MPa，萃取温度55℃，固液比为1.0mL/mg的条件下，萃取2h，将获得的萃取物减压干燥成干浸膏，粉碎，过80目筛，即为樱桃核超临界萃取物；

第二步：制剂的制备

(1)本发明天然药物组合物胶囊剂的制备

分别称取上述步骤制备的芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物120mg、芊罗叶乙醇提取物60mg、樱桃核超临界萃取物40mg，同时称取淀粉195mg、糊精85mg，混合均匀，填充胶囊，制成每个纯重500mg的胶囊剂。

(2)本发明天然药物组合物片剂的制备

分别称取上述步骤制备的芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物120mg、芊罗叶乙醇提取物60mg、樱桃核超临界萃取物40mg，同时称取淀粉190mg、糊精85mg，混合均匀，喷入80％乙醇湿法制粒，干燥，整粒后加入5mg硬脂酸镁混合均匀，压片，制成每片纯重500mg的片剂。

(3)本发明天然药物组合物颗粒剂剂的制备

分别称取上述步骤制备的芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物120mg、芊罗叶乙醇提取物60mg、樱桃核超临界萃取物40mg，同时称取淀粉180mg、糊精85mg、糖粉15mg，混合均匀，喷入65％乙醇湿法制粒，干燥，整粒后制得每袋纯重500mg的颗粒剂剂。

试验例1：芊罗叶樱桃核组合物对正常小鼠胃排空和小肠推进的影响

1.试验材料

芊罗叶，采自青岛崂山，洗净，晾干，经鉴定为木犀科植物芊罗的叶；

樱桃核，购自青岛众生大药房，经鉴定为蔷薇科植物的干燥种子；

按上述实施方案制备成芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物与芊罗叶乙醇提取物、芊罗叶乙醇提取物与樱桃核超临界萃取物、芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物与樱桃核超临界萃取物、芊罗叶樱桃核组合物；

胃复安片，北京太洋药业有限公司；

清洁级昆明种小鼠，体质量l8～22g，雌雄各半，由青岛市药检所动物中心提供，适应性喂养一周后用于实验。

2.试验方法

60只小鼠随机分为6组，每组10只，分别为空白对照组、芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物与芊罗叶乙醇提取物组(组合物1)，芊罗叶乙醇提取物与樱桃核超临界萃取物组(组合物2)，芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物与樱桃核超临界萃取物组(组合物3)，芊罗叶樱桃核组合物组(组合物4)(20mg/10g)和胃复安组(0.5mg/10g)。芊罗叶樱桃核各组合物分别灌服相应药物，空白对照组给予等量蒸馏水，每日1次，连续灌服7d。于末次给药前禁食14h，给药后30min，每只小鼠灌胃0.04％酚红溶液(含10％明胶)0.11mL/100g。20min后处死动物，立即取出胃和小肠，将小肠平铺于白纸上，胃置于30ml 0.5mol/L NaOH溶液中，沿胃大弯剪开胃，充分洗下胃内容物，取5ml离心(3000rpm)10min，吸上清液用T6新世纪紫外可见分光度计于560nm波长测其吸光度。计算胃酚残留率，以胃酚红残留率为指标评价胃排空速度。测量肠管长度作为“小肠总长度”。从幽门至酚红前沿的距离作为“酚红在肠内推进距离”。以公式计算小肠推进百分率。

另取10只小鼠，禁食14h后每只小鼠用0.04％的酚红溶液(含10％的明胶)0.1mL/10g灌胃，立刻处死。按上述方法处理，测吸光度，取其均值作为标准值(胃酚红排空为零)，按公式胃排空率(％)＝(1-试验组OD₅₆₀/标准OD₅₆₀)×100％计算胃酚红排空率(％)。

3.试验结果

结果见表1。芊罗叶樱桃核各组合物均能不同程度地促进正常小鼠胃排空和小肠推进，其中组合物4的促胃排空和小肠推进作用明显优于其他各组合物组(分别与组合物1、组合物2、组合物3组比较，P<0.05或P<0.01)，且效果与胃复安相似。提示芊罗叶樱桃核组合物对正常小鼠胃肠蠕动具有促进作用。

表1芊罗叶樱桃核合物对正常小鼠胃排空和小肠推进的影响

注：与空白对照组比较：^△P<0.05，^△△P<0.01；与组合物1比较：^#P<0.05；与组合物2比较：^*P<0.05；与组合物3比较：

试验例2：芊罗叶樱桃核组合物对阿托品所致小鼠胃排空、小肠推进抑制的影响

1.试验材料

芊罗叶，采自青岛崂山，洗净，晾干，经鉴定为木犀科植物芊罗的叶；

樱桃核，购自青岛众生大药房，经鉴定为蔷薇科植物的干燥种子；

按上述实施方案制备成芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物与芊罗叶乙醇提取物、芊罗叶乙醇提取物与樱桃核超临界萃取物、芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物与樱桃核超临界萃取物、芊罗叶樱桃核组合物；

胃复安片，北京太洋药业有限公司；

硫酸阿托品注射液，山东天福制药厂；

清洁级昆明种小鼠，体质量l8～22g，雌雄各半，由青岛市药检所动物中心提供，适应性喂养一周后用于实验。

2.试验方法

70只小鼠随机分为7组，每组10只，分别为空白对照组、阿托品模型组(1.8μg/10g)、芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物与芊罗叶乙醇提取物组(组合物1)，芊罗叶乙醇提取物与樱桃核超临界萃取物组(组合物2)，芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物与樱桃核超临界萃取物组(组合物3)，芊罗叶樱桃核组合物组(组合物4)(20mg/10g)和胃复安组(0.5mg/10g)。芊罗叶樱桃核各组合物分别灌服相应药物，空白对照组给予等量蒸馏水，每日1次，连续灌服7d。于末次给药前禁食14h，给药后30min除空白对照组外，各组小鼠皮下注射阿托品1.8μg/10g，15min后灌胃酚红溶液，20min后处死动物，按上述方法分别测量胃酚红排空率和小肠推进率。

3.试验结果

结果见表2。与空白对照组比较，阿托品模型组小鼠胃排空延缓(P<0.01)，小肠推进减慢(P<0.01)。芊罗叶樱桃核各组合物均能不同程度地改善阿托品所致胃肠蠕动减慢，以组合物4量效果最显著(与阿托品模型组比较，P<0.01；分别与组合物1、组合物2、组合物3组比较，P<0.05或P<0.01)。提示芊罗叶樱桃核组合物对阿托品所致小鼠胃排空、小肠推进抑制具有促进作用。

表2芊罗叶樱桃核组合物对阿托品所致小鼠胃排空、小肠推进抑制的影响

注：与空白对照组比较：^△P<0.05；与阿托品模型组比较：^{^}P<0.01；与组合物1比较：^#P<0.05；与组合物2比较：^*P<0.05，^**P<0.01；与组合物3比较：

试验例3：芊罗叶樱桃核组合物对顺铂所致小鼠胃排空、小肠推进抑制的影响

1.试验材料

芊罗叶，采自青岛崂山，洗净，晾干，经鉴定为木犀科植物芊罗的叶；

樱桃核，购自青岛众生大药房，经鉴定为蔷薇科植物的干燥种子；

按上述实施方案制备成芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物与芊罗叶乙醇提取物、芊罗叶乙醇提取物与樱桃核超临界萃取物、芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物与樱桃核超临界萃取物、芊罗叶樱桃核组合物；

胃复安片，北京太洋药业有限公司；

顺铂注射液，江苏豪森药业股份有限公司；

清洁级昆明种小鼠，体质量l8～22g，雌雄各半，由青岛市药检所动物中心提供，适应性喂养一周后用于实验。

2.试验方法

70只小鼠鼠随机分为7组，每组10只，分别为空白对照组、顺铂组(0.1mg/10g)、芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物与芊罗叶乙醇提取物组(组合物1)，芊罗叶乙醇提取物与樱桃核超临界萃取物组(组合物2)，芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物与樱桃核超临界萃取物组(组合物3)，芊罗叶樱桃核组合物组(组合物4)(20mg/10g)和胃复安组(0.5mg/10g)。分别于第1、3、5、7日给予各组小鼠(除空白组)进行腹腔注射顺铂，0.2mL/只。芊罗叶樱桃核各组合物分别灌服相应药物，空白对照组给予等量蒸馏水，每日1次，连续灌服7d。于末次给药前禁食14h，给药后30min后灌胃酚红溶液，20min后处死动物，并将立即取出胃和小肠，将小肠平铺于白纸上，胃置于30ml 0.5mol/L NaOH溶液中，沿胃大弯剪开胃，充分洗下胃内容物，取5ml离心(3000rpm)10min，吸上清液用T6新世纪紫外可见分光度计于560nm波长测其吸光度。计算胃酚残留率，以胃酚红残留率为指标评价胃排空速度。测量肠管长度作为“小肠总长度”。从幽门至酚红前沿的距离作为“酚红在肠内推进距离”。以公式计算小肠推进百分率。

另取10只小鼠，禁食14h后每只小鼠用0.04％的酚红溶液(含10％的明胶)0.1mL/10g灌胃，立刻处死。按上述方法处理，测吸光度，取其均值作为标准值(胃酚红排空为零)，按公式胃排空率(％)＝(1-试验组OD₅₆₀/标准OD₅₆₀)×100％计算胃酚红排空率(％)。

3.试验结果

结果见表3。与空白对照组比较，顺铂模型组小鼠胃排空延缓(P<0.01)，小肠推进减慢(P<0.01)。芊罗叶樱桃核各组合物能不同程度地改善顺铂所致的胃肠蠕动，其中组合物4改善胃肠运动效果最好(与顺铂模型组比较，P<0.01；分别与组合物1、组合物2、组合物3组比较，P<0.05或P<0.01)。提示芊罗叶樱桃核组合物对顺铂所致小鼠胃排空、小肠推进抑制具有促进作用。

表3芊罗叶樱桃核组合物对顺铂所致大鼠胃排空、小肠推进抑制的影响

注：与空白对照组比较：^△P<0.05，^△△P<0.01；与顺铂模型组比较：^{^}P<0.01；与组合物1比较：^#P<0.05，^##P<0.01；与组合物2比较：^*P<0.05，^**P<0.01；与组合物3比较：

试验例4：本发明芊罗叶樱桃核组合物的急性毒性研究

1.试验动物：

昆明种小鼠，体重20±2g，购自青岛市药检所实验动物中心。

2.试验药物：

本发明的芊罗叶樱桃核组合物。

3.试验方法：

根据中华人民共和国***、中国国家标准化管理委员会2004年5月1日颁布实施的“急性毒性试验”，对本发明的芊罗叶樱桃核组合物进行急性毒性试验。因受药物浓度及体积限制，无法测定LD50，故采用最大耐受剂量法。取昆明种小鼠20只，雌雄各半，灌胃给予50mg/10g体重的芊罗叶樱桃核组合物。用药后观察小鼠活动状态、饮食、粪便、呼吸、体重及死亡情况，连续观察14d。

4.试验结果

各组小鼠灌胃给药后生长良好，体重增加，行为正常，均未见死亡及异常反应。将动物处死后，肉眼及病理观察各主要脏器未见异常改变。

结果表明，本发明的芊罗叶樱桃核组合物最大剂量口服应用，对动物无明显损害，未发现对机体产生毒性反应，是一种安全可靠的新型促进胃肠蠕动的药物组合物。

Claims (2)

1.如权利要求1所述的天然药物组合物，其中芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物、芊罗叶乙醇提取物与樱桃核超临界萃取物的用量比例是4-6:2-3:1-2。

其中芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物的制备方法是：

按照配伍比例为1：1或1-5：1其他比例取芊罗叶、樱桃核，10-12倍量蒸馏水于室温下温浸12h，置于电炉上加热煎煮2次，每次分别为2h、1.5h，绢布过滤，合并滤液，将滤液加热浓缩至小体积，采用真空干燥箱50℃减压干燥48h得棕黄色粉末，即为芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物；

其中芊罗叶乙醇提取物的制备方法是：

取干燥芊罗叶，粉碎过筛，置于圆底烧瓶中，加入10-12倍量70％乙醇，于电热套中加热回流提取3次，每次分别为2h、1.5h、1.5h，过滤合并滤液，用旋转蒸发仪回收乙醇，浓缩，减压干燥成干浸膏，粉碎，过80目筛，即为芊罗叶乙醇提取物；

其中樱桃核超临界萃取物的制备方法是：

取樱桃核去其表面杂质，干燥粉碎，过80目筛，于超临界装置中萃取，在萃取压力15MPa，萃取温度55℃，固液比为1.0mL/mg的条件下，萃取2h，将获得的萃取物减压干燥成干浸膏，粉碎，过80目筛，即为樱桃核超临界萃取物；

按比例选取芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物、芊罗叶乙醇提取物与樱桃核超临界萃取物均匀混合，即得用于促进胃肠蠕动药物制备的天然药物组合物；

所述用于促进胃肠蠕动药物制备的天然药物组合物，采用常规的制剂技术，制成含有天然药物组合物100mg或200mg规格的制剂，在剂型选择上并没有特别的限制，可制成片剂、胶囊剂、颗粒剂等。

2.如权利要求1所述的天然药物组合物，其中芊罗叶樱桃核水煎浓缩提取物、芊罗叶乙醇提取物与樱桃核超临界萃取物的用量比例是6:3:2。