CN107751067A - 一种全雄罗氏沼虾的繁育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及水产养殖技术领域，尤其涉及一种全雄罗氏沼虾的繁育方法。本发明繁育方法根据罗氏沼虾不同繁殖阶段的生长需求投放不同的饲料，促进了罗氏沼虾亲本假雌虾的成熟，有效缩短了繁殖周期；同时提高了全雄罗氏沼虾幼苗的存活率，实现了全雄虾幼苗的大量获得；此外还提高了虾肉中硒的含量，提升了罗氏沼虾的营养品质。
Description
技术领域
本发明涉及水产养殖技术领域，尤其涉及一种全雄罗氏沼虾的繁育方法。
背景技术
罗氏沼虾(Macrobrachium rosenbergii)，又名淡水长臂大虾、马来西亚大虾，原产于印度洋—太平洋的热带、亚热带水域，是世界上体型最大的淡水虾之一，具有生长快、个体大、食性广、易驯养、适应性强、生产周期短等优点。国内传统养殖罗氏沼虾的方法是把公母虾苗一起混养，一般在投苗2～3个月后，母虾就开始性成熟抱卵，此时一般就不再长肉了，所吃的营养要分配到卵上。雄性罗氏沼虾虽然不会抱卵，个体会比母虾要大，但公母混养时，雄虾进行交配会消耗掉营养，在生长速度和个体规格上受到一定限制。而全雄性罗氏沼虾不存在交配和营养流失的问题，保持了单性的优势，吃多少料就能长多少肉，因此在性成熟后能充分体现出生长快、个体大的优势。
罗氏沼虾的性别，完全可以通过显微外科手术，控制早期雄性虾苗的雄性激素得到转变，这种转移手术的成功，产生了完全的性别功能的转换，使得公虾变成新母虾(表型为雌虾但带雄性基因)并有雌性的性腺。由于雄性的罗氏沼虾带两个相同的同源染色体(ZZ)，跟其它有所研究的龙虾和虾类一样，转性后的公虾，能产出100％为雄性的后代。但是，利用显微外手术往往很难一次性将性腺移植干净，从而造成获得假雌虾数量低。
中国专利申请(CN105647973A)提供一种调控罗氏沼虾雌雄性别的方法，是在罗氏沼虾胚胎发育期至胚后发育的后期幼体期之前，降低或沉默罗氏沼虾体内序列为SEQIDNO:1的性别蛋白或其衍生蛋白的表达量来完成的。通过RNA干扰技术和基因表达调控技术，进行定向性别控制，可以诱导虾类动物性别逆转，但是存在诱导率低的问题。
发明内容
为解决上述问题，本发明提供了一种全雄罗氏沼虾的繁育方法。本发明繁育方法根据罗氏沼虾不同繁殖阶段的生长需求投放不同的饲料，促进了罗氏沼虾亲本假雌虾的成熟，有效缩短了繁殖周期；同时提高了全雄罗氏沼虾幼苗的存活率，实现了全雄虾幼苗的大量获得；此外还提高了虾肉中硒的含量，提升了罗氏沼虾的营养品质。
本发明通过以下方案实现：
一种全雄罗氏沼虾的繁育方法，包括以下步骤：
S1.将选育获得的假雌虾置于温度为26～28℃的条件下饲养并投喂饲料I，饲养14-20天至性腺发育成熟，与体质健壮、附肢完整、性腺发育成熟的雄虾进行交配受精；
S2.待上述步骤S1雌雄虾交配受精完成后，将抱卵雌虾置于温度为28～30℃的条件下，投放饲料II饲养16～20天至抱卵雌虾腹部胚胎的颜色由淡黄色转为浅灰色或灰色时，胚胎发育至溞状幼体时，注入海水，盐度控制在7～9‰，水温控制在29～32℃；
S3.待上述步骤S2中全雄罗氏沼虾溞状无节幼体养殖7～11天后移至到幼体培育槽内，所述幼体培育槽内水盐度控制在1.2～1.6％，水温控制在28～32℃，三天后投放饲料III；
S4.待上述步骤S3中罗氏沼虾幼体培育20～22天后，进行淡化处理，并移至育苗池内，水温控制在26～28℃，投放饲料IV。
优选地，所述步骤S1中饲料I由以下成分及其重量份组成：大豆粉20～40份，虾壳粉30～50份，甜菜碱1～1.5份，硫酸镁1～5份，富硒酵母5～10份及添加剂5～10份。
优选地，所述添加剂由黄岑苷、17α─羟孕酮和5-羟色胺按重量比3:2:1组成。
优选地，所述步骤S2中饲料II由以下成分及其重量份组成：鱼粉20～30份，骨粉15～25份，豆粕10～12份，甘露寡糖5～8份和富硒小麦粉10～15份。
优选地，所述步骤S3中饲料III由丰年虫、鸡蛋羹和木瓜蛋白酶按重量比3:2:1组成。
优选地，所述步骤S4育苗池中水经过水产臭氧养殖***处理：先将水通过含有海绵和活性炭的微过滤器进行过滤，然后进行沙滤，沙滤后将1/3体积水通过阀门直接排入混合池，剩余2/3体积水通过臭氧发生器进行臭氧处理，经过臭氧处理的水通过阀门排入混合池与沙滤后直接排入混合池的水进行混合并加入5～8ppm EDTA和10～15ppm Na2S2O3，混合后的水进入曝气池进行曝气6～8h，曝气后的水再经过含有硝化细菌的生物过滤器进行生化过滤，经过生化过滤的水排入育繁育池；投放全雄罗氏沼虾幼体后的前三天不对水进行处理，投放罗氏沼虾幼体的第四天每天将育苗池中1/5～2/5的水进行上述处理。
优选地，步骤S4所述饲料IV由以下成分及其重量份组成：虾粉20～40份，丰年虫10～30份，富硒酵母20～30份，酵素粉1～5份和人参皂苷0.1～0.5份。
优选地，步骤S4所述饲料IV由以下成分及其重量份组成：虾粉35份，丰年虫35份，富硒酵母25份，酵素粉4.5份和人参皂苷0.5份。
本发明罗氏沼虾亲本假雌虾的选育是根据中国专利申请(CN105647973A)罗氏沼虾的雌雄性别调控方法获得。
本发明在饲料I中添加了黄岑苷、17α─羟孕酮和5-羟色胺。黄岑味苦、性寒，具有抑制细菌及增强机体免疫功能的作用，黄岑苷是从唇形科植物黄岑中提取得一种黄酮类化合物，是黄岑的有效成分之一，具有抗菌、消炎等多种药理作用，由于其低度、低污染和不易产生耐药性等优点，已应用于多种水产动物的疾病防治中。研究证明17α─羟孕酮对对虾或其它甲壳动物的卵巢细胞发育和卵黄积累具有明显的促进作用。5-羟色胺，又名血清素，参与甲壳动物色素迁移、生殖活动、蜕皮活动、骨骼肌收缩和血糖浓度等多项生理过程。本发明技术人员发现，本发明饲料I能够促进亲本假雌虾的成熟，缩短繁殖周期。
本发明饲料II中以鱼粉、骨粉、豆粕和富硒小麦粉为主，满足了抱卵雌虾的营养需求；本发明饲料II中还含有甘露寡糖，甘露寡糖能够提高抱卵雌虾对粗蛋白质、粗脂肪、粗纤维的消化能力，从而提高了饲料II的利用率。
本发明饲料III由丰年虫、鸡蛋羹和木瓜蛋白酶按重量比3:2:1组成。
饲料IV中由虾粉，丰年虫，富硒酵母，酵素粉和人参皂苷组成。其不仅能够提高全雄性虾幼苗的成活率，而且意外发现还能提高虾肉中硒的含量，提高了罗氏沼虾的营养品质。
此外，本发明对鱼苗池中用水水产臭氧养殖***处理，有效防止水中微生物、病毒等对幼苗的侵害。
本发明与现有技术相比具有以下技术优势：
(1)本发明繁育方法能够有效促进亲本假雌虾的成熟，缩短了繁殖周期；
(2)本发明繁育方法获得的全雄性虾成活率高，实现了全雄虾幼苗的大量获得，而且还提高了虾肉中硒的含量，提升了罗氏沼虾的营养品质。
具体实施方式
下面将结合实施例进一步的详细说明本发明。需要指出的是，以下说明仅仅是对本发明要求保护的技术方案的举例说明，并非对这些技术方案的任何限制。本发明的保护范围以所附权利要求书记载的内容为准。
5-羟色胺购于上海一研生物科技有限公司；富硒酵母、大豆粉购于郑州华峰食品科技有限公司；虾粉购于广东兴亿海洋生物工程股份有限公司；骨粉购于石家庄宏辉生物科技有限公司；人参皂苷购于湖北鸿运隆生物科技有限公司；17α─羟孕酮购于湖北巨胜科技有限公司；富硒小麦粉购于山东金穗农业发展有限公司。
实施例1 一种全雄罗氏沼虾的繁育方法
一种全雄罗氏沼虾的繁育方法，包括以下步骤：
S1.将选育获得的假雌虾置于温度为28℃的条件下饲养并投喂饲料I，饲养14～20天至性腺发育成熟，与体质健壮、附肢完整、性腺发育成熟的雄虾进行交配受精；所述饲料I由以下成分及其重量份组成：大豆粉25份，虾壳粉40份，甜菜碱1.2份，硫酸镁3.6份，富硒酵母7.5份及添加剂6份；所述饲料I中添加剂由黄岑苷、17α─羟孕酮和5-羟色胺按重量比3:2:1组成；
S2.待上述步骤S1雌雄虾交配受精完成后，将抱卵雌虾置于温度为30℃的条件下，投放饲料II饲养16～20天至抱卵雌虾腹部胚胎的颜色由淡黄色转为浅灰色或灰色时，胚胎发育至溞状幼体时，注入海水，盐度控制在8.5‰，水温控制在30℃；所述饲料II由以下成分及其重量份组成：鱼粉25份，骨粉20份，豆粕10份，甘露寡糖7份和富硒小麦粉13份；
S3.待上述步骤S2中全雄罗氏沼虾溞状无节幼体养殖7～11天后移至到幼体培育槽内，所述幼体培育槽内水盐度控制在1.4％，水温控制在30℃，三天后投放饲料III；所述饲料III由丰年虫、鸡蛋羹和木瓜蛋白酶按重量比3:2:1组成；
S4.待上述步骤S3中罗氏沼虾幼体培育20-22天后，进行淡化处理，并移至育苗池内，水温控制在28℃，投放饲料IV；所述饲料IV由以下成分及其重量份组成：虾粉35份，丰年虫35份，富硒酵母25份，酵素粉4.5份和人参皂苷0.5份。
育苗池中水经过水产臭氧养殖***处理：先将水通过含有海绵和活性炭的微过滤器进行过滤，然后进行沙滤，沙滤后将1/3体积水通过阀门直接排入混合池，剩余2/3体积水通过臭氧发生器进行臭氧处理，经过臭氧处理的水通过阀门排入混合池与沙滤后直接排入混合池的水进行混合并加入7ppm EDTA和12ppm Na2S2O3，混合后的水进入曝气池进行曝气6h，曝气后的水再经过含有硝化细菌的生物过滤器进行生化过滤，经过生化过滤的水排入育繁育池；投放全雄罗氏沼虾幼体后的前三天不对水进行处理，投放罗氏沼虾幼体的第四天每天将育苗池中1/5的水进行上述处理。
实施例2 一种全雄罗氏沼虾的繁育方法
一种全雄罗氏沼虾的繁育方法，包括以下步骤：
S1.将选育获得的假雌虾置于温度为26℃的条件下饲养并投喂饲料I，饲养14～20天至性腺发育成熟，与体质健壮、附肢完整、性腺发育成熟的雄虾进行交配受精；所述饲料I由以下成分及其重量份组成：大豆粉20份，虾壳粉30份，甜菜碱1份，硫酸镁1份，富硒酵母5份及添加剂5份；所述饲料I中添加剂由黄岑苷、17α─羟孕酮和5-羟色胺按重量比3:2:1组成；
S2.待上述步骤S1雌雄虾交配受精完成后，将抱卵雌虾置于温度为30℃的条件下，投放饲料II饲养16～20天至抱卵雌虾腹部胚胎的颜色由淡黄色转为浅灰色或灰色时，胚胎发育至溞状幼体时，注入海水，盐度控制在7‰，水温控制在29℃；所述饲料II由以下成分及其重量份组成：鱼粉20份，骨粉15份，豆粕10份，甘露寡糖5份和富硒小麦粉10份；
S3.待上述步骤S2中全雄罗氏沼虾溞状无节幼体养殖7～11天后移至到幼体培育槽内，所述幼体培育槽内水盐度控制在1.2％，水温控制在28℃，三天后投放饲料III；所述饲料III由丰年虫、鸡蛋羹和木瓜蛋白酶按重量比3:2:1组成；
S4.待上述步骤S3中罗氏沼虾幼体培育20～22天后，进行淡化处理，并移至育苗池内，水温控制在26℃，投放饲料IV；所述饲料IV由以下成分及其重量份组成：虾粉20份，丰年虫10份，富硒酵母20份，酵素粉1份和人参皂苷0.1份。
育苗池中水经过水产臭氧养殖***处理：先将水通过含有海绵和活性炭的微过滤器进行过滤，然后进行沙滤，沙滤后将1/3体积水通过阀门直接排入混合池，剩余2/3体积水通过臭氧发生器进行臭氧处理，经过臭氧处理的水通过阀门排入混合池与沙滤后直接排入混合池的水进行混合并加入5ppm EDTA和10ppm Na2S2O3，混合后的水进入曝气池进行曝气6-8h，曝气后的水再经过含有硝化细菌的生物过滤器进行生化过滤，经过生化过滤的水排入育繁育池；投放全雄罗氏沼虾幼体后的前三天不对水进行处理，投放罗氏沼虾幼体的第四天每天将育苗池中2/5的水进行上述处理。
实施例3 一种全雄罗氏沼虾的繁育方法
一种全雄罗氏沼虾的繁育方法，包括以下步骤：
S1.将选育获得的假雌虾置于温度为28℃的条件下饲养并投放饲料I，饲养14～20天至性腺发育成熟，与体质健壮、附肢完整、性腺发育成熟的雄虾进行交配受精；所述饲料I由以下成分及其重量份组成：大豆粉40份，虾壳粉50份，甜菜碱1.5份，硫酸镁5份，富硒酵母10份及添加剂10份；所述饲料I中添加剂由黄岑苷、17α─羟孕酮和5-羟色胺按重量比3:2:1组成；
S2.待上述步骤S1雌雄虾交配受精完成后，将抱卵雌虾置于温度为28℃的条件下，投放饲料II饲养16～20天至抱卵雌虾腹部胚胎的颜色由淡黄色转为浅灰色或灰色时，胚胎发育至溞状幼体时，注入海水，盐度控制在9‰，水温控制在32℃；所述饲料II由以下成分及其重量份组成：鱼粉30份，骨粉25份，豆粕12份，甘露寡糖8份和富硒小麦粉15份；
S3.待上述步骤S2中全雄罗氏沼虾溞状无节幼体养殖7～11天后移至到幼体培育槽内，所述幼体培育槽内水盐度控制在1.6％，水温控制在32℃，三天后投放饲料III；所述饲料III由丰年虫、鸡蛋羹和木瓜蛋白酶按重量比3:2:1组成；
S4.待上述步骤S3中罗氏沼虾幼体培育20～22天后，进行淡化处理，并移至育苗池内，水温控制在28℃，投放饲料IV；所述饲料IV由以下成分及其重量份组成：虾粉40份，丰年虫30份，富硒酵母30份，酵素粉5份和人参皂苷0.5份。
育苗池中水经过水产臭氧养殖***处理：先将水通过含有海绵和活性炭的微过滤器进行过滤，然后进行沙滤，沙滤后将1/3体积水通过阀门直接排入混合池，剩余2/3体积水通过臭氧发生器进行臭氧处理，经过臭氧处理的水通过阀门排入混合池与沙滤后直接排入混合池的水进行混合并加入8ppm EDTA和15ppm Na2S2O3，混合后的水进入曝气池进行曝气8h，曝气后的水再经过含有硝化细菌的生物过滤器进行生化过滤，经过生化过滤的水排入育繁育池；投放全雄罗氏沼虾幼体后的前三天不对水进行处理，投放罗氏沼虾幼体的第四天每天将育苗池中1/5的水进行上述处理。
对比例1 一种全雄罗氏沼虾的繁育方法
与实施例1的区别在于步骤S1中所投放的饲料I中不含添加剂，其它步骤均与实施例1类似。
对比例2 一种全雄罗氏沼虾的繁育方法
与实施例1的区别在于步骤S2所投放的饲料II中用β-葡聚糖替换甘露寡糖，其它步骤均与实施例1类似。
对比例3 一种全雄罗氏沼虾的繁育方法
与实施例1的区别在于所述步骤S4所投放的饲料IV中用抗菌肽替换人参皂苷，其它步骤均与实施例1类似。
试验例1 罗氏沼虾亲本假雌虾成熟率的测定
将选育得到的卵巢发育一致的罗氏沼虾亲本假雌虾，按实施例1～3及对比例1所述繁育方法进行培育14天后，对假雌虾性腺进行观察，并计算卵巢成熟率，即卵巢发育处于第IV期的亲虾所占的比例，结果如表1所示。
表1不同组别假雌虾成熟率
| 组别 | 转化率(％) |
| 实施例1 | 98.5％ |
| 实施例2 | 96.0％ |
| 实施例3 | 95.3％ |
| 对比例1 | 73.0％ |
由表1可知，实施例1～3中罗氏沼虾亲本假雌虾卵巢成熟率明显高于对比例。其中，与对比例1相比，实施例1成熟率提高了34.9％，说明黄岑苷、17α─羟孕酮和5-羟色胺配合使用能够有效促进亲本假雌虾卵巢成熟，从而有效缩短了繁殖周期。
试验例2 全雄性虾幼苗存活率
将按实施例1～3及对比例2繁育方法得到的全雄性虾幼苗进行培育，并按下面公式进行存活率测定，结果如表2所示。
存活率＝(总幼虾数-死亡幼虾数)/总幼虾数×100％
表2全雄性罗氏沼虾幼苗存活率
| 组别 | 存活率(％) |
| 实施例1 | 93.0％ |
| 实施例2 | 91.2％ |
| 实施例3 | 92.6％ |
| 对比例2 | 83.4％ |
| 对比例3 | 88.4％ |
由表2可知，本发明实施例1～3繁育方法获得的全雄性罗氏沼虾幼苗的存活率均大于90％。与对比例2相比，实施例1存活率提高了11.5％，说明甘露寡糖的添加更利于全雄性罗氏沼虾幼苗对饲料II的利用，从而提高幼苗的存活率。
试验例3 全雄性虾中硒含量测定
分别按实施例1～3及对比例3繁育方法将获得的全雄性虾幼苗培育90天后，检测每组虾硒的含量，具体数据如表3所示。
表3全雄性虾中硒含量的测定
| 组别 | 总硒含量(μg/kg) |
| 实施例2 | 907.8 |
| 实施例3 | 908.2 |
| 对比例3 | 762.9 |
由表3可知，按本发明实施例1～3繁育方法获得的全雄性虾肉中硒的含量较高，与对比例3相比，实施例1雄虾肉中总硒含量提高了19.1％，说明人参皂苷与富硒酵母配合使用能够显著提高全雄性虾肉中硒的含量。
以上所述的仅是本发明的一些实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制。对于本领域的普通技术人员来说，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、代替、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种全雄罗氏沼虾的繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.将选育获得的罗氏沼虾亲本假雌虾置于温度为26～28℃的条件下饲养并投喂饲料I，饲养14～20天至其性腺发育成熟，与体质健壮、附肢完整、性腺发育成熟的雄虾进行交配受精；
S2.待上述步骤S1雌雄虾交配受精完成后，将抱卵雌虾置于温度为28～30℃的条件下，投放饲料II饲养16～20天至抱卵雌虾腹部胚胎的颜色由淡黄色转为浅灰色或灰色时，胚胎发育至溞状幼体时，注入海水，盐度控制在7～9‰，水温控制在29～32℃；
S3.待上述步骤S2中获得的全雄罗氏沼虾溞状无节幼体养殖7～11天后移至到幼体培育槽内，所述幼体培育槽内水盐度控制在1.2～1.6％，水温控制在28～32℃，三天后投放饲料III；
S4.待上述步骤S3中全雄罗氏沼虾幼体培育20～22天后，进行淡化处理，并移至育苗池内，水温控制在26～28℃，投放饲料IV。
2.根据权利要求1所述全雄罗氏沼虾的繁育方法，其特征在于，所述步骤S1中饲料I由以下成分及其重量份组成：大豆粉20～40份，虾壳粉30～50份，甜菜碱1～1.5份，硫酸镁1～5份，富硒酵母5～10份及添加剂5～10份。
3.根据权利要求2所述全雄罗氏沼虾的繁育方法，其特征在于，所述添加剂由黄岑苷、17α─羟孕酮和5-羟色胺按重量比3:2:1组成。
4.根据权利要求1所述全雄罗氏沼虾的繁育方法，其特征在于，所述步骤S2中饲料II由以下成分及其重量份组成：鱼粉20～30份，骨粉15～25份，豆粕10～12份，甘露寡糖5～8份和富硒小麦粉10～15份。
5.根据权利要求1所述全雄罗氏沼虾的繁育方法，其特征在于，所述步骤S3中饲料III由丰年虫、鸡蛋羹和木瓜蛋白酶按重量比3:2:1组成。
6.根据权利1所述全雄罗氏沼虾的繁育方法，其特征在于，所述步骤S4育苗池中水经过水产臭氧养殖***处理：先将水通过含有海绵和活性炭的微过滤器进行过滤，然后进行沙滤，沙滤后将1/3体积水通过阀门直接排入混合池，剩余2/3体积水通过臭氧发生器进行臭氧处理，经过臭氧处理的水通过阀门排入混合池与沙滤后直接排入混合池的水进行混合并加入5～8ppm EDTA和10～15ppm Na2S2O3，混合后的水进入曝气池进行曝气6～8h，曝气后的水再经过含有硝化细菌的生物过滤器进行生化过滤，经过生化过滤的水排入育繁育池；投放全雄罗氏沼虾幼体后的前三天不对水进行处理，投放罗氏沼虾幼体的第四天每天将育苗池中1/5～2/5的水进行上述处理。
7.根据权利要求1所述全雄罗氏沼虾的繁育方法，其特征在于，步骤S4所述饲料IV由以下成分及其重量份组成：虾粉20～40份，丰年虫10～30份，富硒酵母20～30份，酵素粉1～5份和人参皂苷0.1～0.5份。
8.根据权利要求1所述全雄罗氏沼虾的繁育方法，其特征在于，步骤S4所述饲料IV由以下成分及其重量份组成：虾粉35份，丰年虫35份，富硒酵母25份，酵素粉4.5份和人参皂苷0.5份。
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Address after: 510000 No. 55, Zhongshan Avenue, Guangzhou, Guangdong Applicant after: SOUTH CHINA NORMAL University Applicant after: Guangdong Jinyang aquaculture Co.,Ltd. Address before: 510000 No. 55, Zhongshan Avenue, Guangzhou, Guangdong Applicant before: SOUTH CHINA NORMAL University Applicant before: GUANGZHOU JINYANG AQUACULTURE Co.,Ltd. |
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| GR01 | Patent grant | ||
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| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20200821 Termination date: 20201107 |
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