CN107669524A - 一种栅列藻护肤面膜 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种栅列藻护肤面膜，添加有栅列藻提取液，配合有聚乙烯醇、海藻酸钠、羧甲基纤维素、丙二醇、甘油、硅乳、乙醇、苯甲酸钠、香精溶解于去离子水中而成，将护肤面膜液加入到铝箔袋的无纺布中封口，得到栅列藻护肤面膜，其中栅列藻提取物是通过栅列藻发酵、高压破壁、发酵破壁、有效物分解发酵、后处理以及提取液浓缩等步骤制备而成，制得的面膜含有栅列藻蛋白、多糖、天然β胡萝卜素及微藻油等多种发酵活性物质，对面部肌肤的养护及抗菌效果明显。

Description

一种栅列藻护肤面膜

技术领域

本发明属于生物提取领域，具体涉及一种栅列藻护肤面膜。

背景技术

面膜，是护肤品中的一个类别。其最基本也是最重要的目的是弥补卸妆与洗脸仍然不足的清洁工作，在此基础上配合其它精华成分实现其它的保养功能，例如补水保湿、美白、抗衰老、平衡油脂等等。面膜的原理，就是利用覆盖在脸部的短暂时间，暂时隔离外界的空气与污染，提高肌肤温度，皮肤的毛孔扩张，促进汗腺分泌与新陈代谢，使肌肤的含氧量上升，有利于肌肤排除表皮细胞新陈代谢的产物和累积的油脂类物质，面膜中的水分渗入表皮的角质层，皮肤变得柔软，肌肤自然光亮有弹性。

栅列藻（Scenedesmus obliquus），绿藻纲，栅列藻科。生长于温带和热带的淡水中，广泛分布于湖泊、池塘、沟渠、水坑等各种水体中，尤其在一些静止小水体中更为常见。栅列藻，单细胞，椭圆形或纺锤形，常由4-8个细胞连接成单列或双列的群体。细胞壁光滑或有短刺。悬浮于水中。生长于热带及温带的淡水中，繁殖迅速，适应性强。富含养分，可大量培养。可食用和作饵料。栅列藻，单细胞，椭圆形或纺锤形，常由4-8个细胞连接成单列或双列的群体。细胞壁光滑或有短刺。

栅列藻是一种常见的湖泊单细胞绿藻 ,细胞内蛋白质含量高达42%.正常情况下,其细胞以2、4、8或16形成结集体,在实验室条件下培养则可分散为单个细胞.栅列藻提取液中存在某种类同激素蛋白或多肽生长因子的分子,它可明显地促进 HeLa细胞的生长.从进化角度看,低等单细胞生物有可能保留编码类似高等生物激素的基因,在某些种类的单细胞生物或在某种特殊情况下得以正常表达,以维持其群体生长或其它特殊的生存需要.生物进化使得高等生物进一步分化形成各种特殊的激素分泌结构和功能***.栅列藻提取液中存在某种刺激动物细胞生长的活性物质,其分子量在3500～8000D之间,而且对胰蛋白酶和温度敏感 ,很可能是一种类似高等哺乳动物激素的蛋白质或多肽分子。但微藻细胞壁的阻碍作用以及微藻内蛋白和多糖的大分子结构，不利于人体表皮的吸收，故找到更高效彻底的微藻细胞壁破壁，微藻细胞营养物提取、分离以及分解的好办法，并将其与洗发水相结合，成为现阶段亟待突破的课题。

发明内容

本发明为了解决现阶段面膜功能性单一且对面部皮肤养护和保健作用较差，且栅列藻细胞壁破碎不彻底，胞内大分子物质不利于人体吸收的缺点而提出的，将两者进行结合，提出了一种栅列藻护肤面膜。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种栅列藻护肤面膜，按照重量百分比由以下步骤制备而成，

（1）称取0.1%的苯甲酸钠、1%海藻酸钠以及3%羧甲基纤维素溶解于65%的去离子水中，充分搅拌溶解备用；

海藻酸钠以及羧甲基纤维素在去离子水当中溶解，具有很好的增稠作用，再加入苯甲酸钠防腐剂进行溶解，得到面膜的基础溶液。

（2）将13%的聚乙烯醇中加入9%的乙醇润湿后加入到步骤（1）中的溶液中加热至70℃，不断进行搅拌，使之混合均匀，静置过夜；

乙醇具有使得聚乙烯醇增容的作用，在加热条件下也可使得过夜的面膜基础溶液更加充分的溶解。

（3）将1%丙二醇、3%甘油、1%硅乳、4%栅列藻提取液以及0.1%的香精加入步骤（2）得到的溶液中，充分搅拌溶解既得栅列藻护肤面膜液；

加入面膜表面活性剂硅乳等其他复配物质以及香精，提高面膜液的物理性状，并加入栅列藻提取液充分搅拌溶解后即可得到栅列藻面膜液。

（4）将无纺布折叠后放入铝箔袋中，加入步骤（3）的栅列藻护肤面膜液20-50毫升后封口，得到栅列藻护肤面膜。

采用无纺布将栅列藻面膜液充分吸收，根据面膜大小以及无纺布材质不同选择不同的添加量，封口后得到栅列藻护肤面膜。

步骤（3）中的栅列藻提取液通过以下步骤制备而成，

a）栅列藻发酵：将5%的栅列藻接入栅列藻发酵液培养基中进行发酵，通过对藻体数量的监控，发酵92-100小时后藻体数量达到最大；

栅列藻属于微藻类，通过光照海水培养进行扩增，在光照流动发酵***中扩大培养，每隔2小时进行藻体数量的检测，发酵92-100小时后藻体数量达到最大，采用血球计数板方法作为藻体检测的方法。

b）高压破壁：将步骤a得到的栅列藻发酵液泵入高压匀浆机内进行高压匀浆，控制操作压力70MPa，匀浆处理15分钟后自然冷却；

将发酵后的栅列藻发酵液连同培养基一起利用高压匀浆机进行高压匀浆处理，控制适中的操作压力和匀浆时间，通过镜检，栅列藻破碎比例达到90%以上。控制匀浆温度不超过15分钟，时间过长或导致温度过高，使得大分子微藻蛋白失活，时间过短则破碎率较低。

高压匀浆法比目前其他的破碎方法效果更明显，传统的溶胀法需要在黑暗条件小处理24小时以上，时间过长，而反复冻融法耗能过多，且引入了氯化钙杂质，不利于后期产物的提纯和利用。

c）发酵破壁：将破壁冷却后的栅列藻发酵液泵人发酵罐中，加入质量百分比3%蔗糖、0.3%硝酸钠、0.05%硫酸镁、0.05%氯化钾以及1%磷酸氢二钾搅拌溶解后，接入2%黑曲霉菌液，于28℃下发酵24-30小时后，将发酵罐温度提升至121℃，保温20分钟后放罐，自然冷却；

在破碎后的发酵液中加入其他碳源、氮源以及无机盐，接入黑曲霉进行发酵，黑曲霉发酵能产生大量的纤维素酶和少量的蛋白酶和果胶酶，纤维素酶可以将高压匀浆法为破壁的细胞进行进一步处理，在与蛋白酶和果胶酶的共同作用下还可以将破碎的栅列藻细胞壁分解成小分子多糖，达到的有机物的充分分解和利用。

d）有效物分解发酵：将步骤c中冷却后的液体再次泵入发酵罐中，分别接入1.5%的解淀粉芽孢杆菌和2%的解凝乳类芽孢杆菌，于32℃下发酵18-20小时后，提高发酵罐温度至121℃，保温20分钟后放罐，自然冷却；

在彻底破碎的藻体中再加入可大量产生蛋白酶的解淀粉芽孢杆菌和产生多糖水解酶的解凝乳类芽孢杆菌，产生的蛋白酶和多糖水解酶，可以将藻体中的大分子蛋白和糖类进行水解，产生小分子利于人体吸收的多肽和小分子糖类。

e）后处理：将步骤d冷却后的液体通过4层纱布过滤后，使用低速离心机5000转/分钟离心25分钟后，取上清液备用；

将步骤d中得到的液体通过纱布过滤及离心后，去掉大部分的菌体和少量未破碎的微藻细胞。

f）提取液浓缩：将步骤e中得到的液体在旋转蒸发仪中进行低压旋转蒸发，体积缩小至原体积的5%-10%后停止蒸发，冷却后得到最终的栅列藻提取液。

将步骤e中得到的液体进行低压旋转蒸发，在低压低温下处理浓缩得到最终的栅列藻提取液。

优选的，所述栅列藻提取液制备步骤a中的栅列藻发酵液培养基是由以下重量的物质组成，硝酸钠50毫克、磷酸二氢钾5毫克、硫酸铁0.1毫克、柠檬酸钠10毫克、硅酸钠10毫克、维生素B120.2微克、海水1000克。

优选的，所述栅列藻提取液制备步骤c中的黑曲霉购自中国工业微生物菌种保藏管理中心，保藏号：CICC40273；所述步骤d中得解淀粉芽孢杆菌和解凝乳类芽孢杆菌均购自中国工业微生物菌种保藏管理中心，保藏号分别为：CICC10160、CICC10358。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：栅列藻面膜中含有栅列藻提取液，栅列藻中含有大量藻体蛋白，栅列藻藻体蛋白含量达到60%以上，还含有大量的微藻油脂和藻多糖，并且含有天然β-胡萝卜素，对身体具有很好的养护和抗菌作用，具有抑制肿瘤、抗辐射和升高白细胞的作用。且栅列藻采用物理加生物法破碎藻体，破碎效果显著，采用多种微生物发酵法分解大分子蛋白和多糖，具有条件温和，反应易控的优点，且用生物法生产的栅列藻提取液，具有环境友好无污染的显著优点，几乎没有废弃物的排放，生态效益显著。

具体实施方式

下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明提供一种技术方案：一种栅列藻护肤面膜，按照重量百分比由以下步骤制备而成:

（1）称取0.1%的苯甲酸钠、1%海藻酸钠以及3%羧甲基纤维素溶解于65%的去离子水中，充分搅拌溶解备用；

（2）将13%的聚乙烯醇中加入9%的乙醇润湿后加入到步骤（1）中的溶液中加热至70℃，不断进行搅拌，使之混合均匀，静置过夜；

（3）将1%丙二醇、3%甘油、1%硅乳、4%栅列藻提取液以及0.1%的香精加入步骤（2）得到的溶液中，充分搅拌溶解既得栅列藻护肤面膜液；

（4）将无纺布折叠后放入铝箔袋中，加入步骤（3）的栅列藻护肤面膜液20-50毫升后封口，得到栅列藻护肤面膜；

其中步骤（3）中的栅列藻提取液通过以下步骤制备而成：

a）栅列藻发酵：将5%的栅列藻接入栅列藻发酵液培养基中进行发酵，通过对藻体数量的监控，发酵92-100小时后藻体数量达到最大；

b）高压破壁：将步骤a得到的栅列藻发酵液泵入高压匀浆机内进行高压匀浆，控制操作压力70MPa，匀浆处理15分钟后自然冷却；

c）发酵破壁：将破壁冷却后的栅列藻发酵液泵人发酵罐中，加入质量百分比3%蔗糖、0.3%硝酸钠、0.05%硫酸镁、0.05%氯化钾以及1%磷酸氢二钾搅拌溶解后，接入2%黑曲霉菌液，于28℃下发酵24-30小时后，将发酵罐温度提升至121℃，保温20分钟后放罐，自然冷却；

d）有效物分解发酵：将步骤c中冷却后的液体再次泵入发酵罐中，分别接入1.5%的解淀粉芽孢杆菌和2%的解凝乳类芽孢杆菌，于32℃下发酵18-20小时后，提高发酵罐温度至121℃，保温20分钟后放罐，自然冷却；

e）后处理：将步骤d冷却后的液体通过4层纱布过滤后，使用低速离心机5000转/分钟离心25分钟后，取上清液备用；

f）提取液浓缩：将步骤e中得到的液体在旋转蒸发仪中进行低压旋转蒸发，体积缩小至原体积的5%-10%后停止蒸发，冷却后得到最终的栅列藻提取液。

栅列藻提取液制备步骤a中的栅列藻发酵液培养基是由以下重量的物质组成，硝酸钠50毫克、磷酸二氢钾5毫克、硫酸铁0.1毫克、柠檬酸钠10毫克、硅酸钠10毫克、维生素B120.2微克、海水1000克。

栅列藻提取液制备步骤c中的黑曲霉购自中国工业微生物菌种保藏管理中心，保藏号：CICC40273；所述步骤d中得解淀粉芽孢杆菌和解凝乳类芽孢杆菌均购自中国工业微生物菌种保藏管理中心，保藏号分别为：CICC10160、CICC10358。

实施例1：

将5克硝酸钠、0.5克磷酸二氢钾、10毫克硫酸铁、1克柠檬酸钠、1克硅酸钠、20微克维生素B12溶解于100千克的海水中，接入5千克栅列藻在光照反应器中发酵培养92小时后，藻体数量达到最大；将藻体发酵液泵人高压匀浆机中，控制压力在70MPa条件下匀浆处理15分钟后泵入发酵罐中；加入3千克蔗糖、0.3千克硝酸钠、0.05千克硫酸镁、0.05千克氯化钾以及1千克磷酸氢二钾搅拌溶解，接入2千克黑曲霉菌液，在28℃下发酵24小时后，将温度提升至121℃保温20分钟后放罐自然冷却；将液体再泵入发酵罐中，接入1.5千克的解淀粉芽孢杆菌和2千克的解凝乳类芽孢杆菌，于32℃下发酵18小时后，提高发酵罐温度至121℃，保温20分钟后放罐，自然冷却；液体通过4层纱布过滤后，用低速离心机5000转/分钟离心25分钟，取上清液；液体在旋转蒸发仪中进行低压旋转蒸发，体积缩小至原体积的5%后停止蒸发，冷却后得到最终的栅列藻提取液5千克。

称取0.1千克的苯甲酸钠、1千克的海藻酸钠以及3千克的羧甲基纤维素溶解于65千克的去离子水中，充分搅拌溶解备用；将13千克的聚乙烯醇加入9千克的乙醇中润湿后加入到上述溶液中，加热到70℃，不断搅拌过夜溶解；再向其中加入1千克丙二醇、3千克甘油、1千克硅乳以及4千克栅列藻提取液和0.1千克香精，充分搅拌得到栅列藻护肤面膜液100千克；将无纺布折叠后放入铝箔袋中，每袋加入40毫升栅列藻面膜液后封口，得到栅列藻护肤面膜2500块。

实施例2：

将15克硝酸钠、1.5克磷酸二氢钾、30毫克硫酸铁、3克柠檬酸钠、3克硅酸钠、60微克维生素B12溶解于300千克的海水中，接入15千克栅列藻在光照反应器中发酵培养100小时后，藻体数量达到最大；将藻体发酵液泵人高压匀浆机中，控制压力在70MPa条件下匀浆处理15分钟后泵入发酵罐中；加入9千克蔗糖、0.9千克硝酸钠、0.15千克硫酸镁、0.15千克氯化钾以及3千克磷酸氢二钾搅拌溶解，接入6千克黑曲霉菌液，在28℃下发酵30小时后，将温度提升至121℃保温20分钟后放罐自然冷却；将液体再泵入发酵罐中，接入4.5千克的解淀粉芽孢杆菌和6千克的解凝乳类芽孢杆菌，于32℃下发酵20小时后，提高发酵罐温度至121℃，保温20分钟后放罐，自然冷却；液体通过4层纱布过滤后，用低速离心机5000转/分钟离心25分钟，取上清液；液体在旋转蒸发仪中进行低压旋转蒸发，体积缩小至原体积的10%后停止蒸发，冷却后得到最终的栅列藻提取液32千克。

称取0.8千克的苯甲酸钠、8千克的海藻酸钠以及24千克的羧甲基纤维素溶解于520千克的去离子水中，充分搅拌溶解备用；将104千克的聚乙烯醇加入72千克的乙醇中润湿后加入到上述溶液中，加热到70℃，不断搅拌过夜溶解；再向其中加入8千克丙二醇、24千克甘油、8千克硅乳以及32千克栅列藻提取液和0.8千克香精，充分搅拌得到栅列藻护肤面膜液800千克；将无纺布折叠后放入铝箔袋中，每袋加入50毫升栅列藻面膜液后封口，得到栅列藻护肤面膜16000块。

实验例1：

体外最低抑菌浓度MIC试验：

试验菌种：真菌、白色念球菌、金黄色葡萄球菌、致病性大肠杆菌。

方法：将各测试菌种用生理盐水制成菌悬液，并稀释成浊度为2.0McF以上菌悬液，再用生理盐水稀释后，RPMIi640培养液稀释，试验组（本发明实施例中的面膜液）和对照组（普通面膜液）二倍稀释，96孔培养板中培养80小时，轻微震荡，490nm处进行光电比色。

从试验中可以看出，本发明的面膜液抑菌效果明显，对面部肌肤中的大部分种类菌体均有抑制作用。

实验例2：

取本发明实施例1、实施例2中的面膜进行实验，选定20名的实验对象，使他们依次使用实施例1、2及普通面膜的美容面膜后，进行问卷调查。问卷调查要求使用面膜的每个人，对于使用中的粘附感、柔软性以及使用后的保湿性及作为面膜的总体满意度等不同项目，选择自己更为喜欢的面膜，结果如下表所示，

分类	粘附感/名	柔软性/名	保湿性/名	满意度/名
					实施例1	18	19	18	18
实施例2	17	20	18	18
					普通面膜	5	4	7	6

由上表可见，本发明的栅列藻护肤面膜较普通面膜有更好的满意度。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (3)

1.一种栅列藻护肤面膜，其特征在于：按照重量百分比由以下步骤制备而成，

（1）称取0.1%的苯甲酸钠、1%海藻酸钠以及3%羧甲基纤维素溶解于65%的去离子水中，充分搅拌溶解备用；

（2）将13%的聚乙烯醇中加入9%的乙醇润湿后加入到步骤（1）中的溶液中加热至70℃，不断进行搅拌，使之混合均匀，静置过夜；

（3）将1%丙二醇、3%甘油、1%硅乳、4%栅列藻提取液以及0.1%的香精加入步骤（2）得到的溶液中，充分搅拌溶解既得栅列藻护肤面膜液；

（4）将无纺布折叠后放入铝箔袋中，加入步骤（3）的栅列藻护肤面膜液20-50毫升后封口，得到栅列藻护肤面膜；

所述步骤（3）中的栅列藻提取液通过以下步骤制备而成，

(a)栅列藻发酵：将5%的栅列藻接入栅列藻发酵液培养基中进行发酵，通过对藻体数量的监控，发酵92-100小时后藻体数量达到最大；

(b)高压破壁：将步骤a得到的栅列藻发酵液泵入高压匀浆机内进行高压匀浆，控制操作压力70MPa，匀浆处理15分钟后自然冷却；

(c)发酵破壁：将破壁冷却后的栅列藻发酵液泵人发酵罐中，加入质量百分比3%蔗糖、0.3%硝酸钠、0.05%硫酸镁、0.05%氯化钾以及1%磷酸氢二钾搅拌溶解后，接入2%黑曲霉菌液，于28℃下发酵24-30小时后，将发酵罐温度提升至121℃，保温20分钟后放罐，自然冷却；

(d)有效物分解发酵：将步骤c中冷却后的液体再次泵入发酵罐中，分别接入1.5%的解淀粉芽孢杆菌和2%的解凝乳类芽孢杆菌，于32℃下发酵18-20小时后，提高发酵罐温度至121℃，保温20分钟后放罐，自然冷却；

(e)后处理：将步骤d冷却后的液体通过4层纱布过滤后，使用低速离心机5000转/分钟离心25分钟后，取上清液备用；

(f)提取液浓缩：将步骤e中得到的液体在旋转蒸发仪中进行低压旋转蒸发，体积缩小至原体积的5%-10%后停止蒸发，冷却后得到最终的栅列藻提取液。

2.根据权利要求1所述的一种栅列藻护肤面膜，其特征在于：所述栅列藻提取液制备步骤a中的栅列藻发酵液培养基是由以下重量的物质组成，硝酸钠50毫克、磷酸二氢钾5毫克、硫酸铁0.1毫克、柠檬酸钠10毫克、硅酸钠10毫克、维生素B120.2微克、海水1000克。

3.根据权利要求1所述的一种栅列藻护肤面膜，其特征在于：所述栅列藻提取液制备步骤c中的黑曲霉购自中国工业微生物菌种保藏管理中心，保藏号：CICC40273；所述步骤d中得解淀粉芽孢杆菌和解凝乳类芽孢杆菌均购自中国工业微生物菌种保藏管理中心，保藏号分别为：CICC10160、CICC10358。