CN107523518A - 一株嗜麦芽寡养单胞菌及其应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于生物工程领域，涉及一种菌株，具体涉及一株嗜麦芽寡养单胞菌及其应用。所述嗜麦芽寡养单胞菌菌株已于2017年3月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No. 13905。该菌作为降解2,7,11‑西柏三烯‑4,6‑二醇及再造烟叶浓缩液发酵中的应用。在烟叶的陈化期间，本申请的嗜麦芽寡养单胞菌可将2,7,11‑西柏三烯‑4,6‑二醇类物质降解成香味物质，从而增加烟叶香味，在再造烟叶浓缩液的应用中，通过转化后提高香气质和香气量、降低刺激，能改善再造烟叶的口感。

Description

一株嗜麦芽寡养单胞菌及其应用
技术领域
本发明属于生物工程领域，涉及一种菌株，具体涉及一株嗜麦芽寡养单胞菌及其应用。
背景技术
西柏烯（cembrene）类化合物也称类黑松烯（thunbergen）或杜法烯（duvatriene）化合物，化学上该类物质结构属于大环双萜类。该类物质不但存在于烟叶中，也存在于烟草种子和烟草花中以及松节油、乳香等天然植物和少数海洋生物中。据相关文献报道，在烟草中存在的西柏烯类化合物超过50种。
西柏烯类化合物是烟草中一类重要的香味前体物质。该类物质在烟草生长过程中经代谢主要存在于烟叶表面腺毛分泌物中，在烟草老化期、主要在调制过程中西柏烯类物质发生降解，此后的陈化期降解缓慢，相关研究表明，烟草中由西柏烯类化合物降解产生的香味化合物数量超过60种，烟草中的茄酮、茄呢呋喃、降茄二酮等许多烟草香味成分都是西柏烯类降解产物。由此可见，该类化合物降解转化对烟草香味的产生具有十分重要作用，因此，在烟草调制、陈化及加工过程中有效利用西柏烯类化合物降解途径产生烟草香味成分，充分挖掘烟草自身潜质，对于提高烟叶品质及使用价值、增加卷烟香气、减少香精在卷烟中的用量、凸现卷烟风格特征和提高卷烟的安全性具有重要价值。
再造烟叶，主要由烟末、碎片、烟梗或低次烟叶加入胶粘剂和其他添加剂等组成。再造烟叶存在杂气重、刺激性大和口感不适等吸味缺陷，影响了再造烟叶在卷烟产品中的使用效果和添加量。国内通常的做法是采用添加剂的办法来进行改善，目前应用较多的添加剂是烟草、天然植物类提取物，这些提取物一般通过水、醇提取或分子蒸馏得到，添加后对卷烟质量的改善程度有限，仍有刺激性大、杂气多等缺陷。
现有技术中，以嗜麦芽寡养单胞菌为发酵菌株，通过转化再造烟叶浓缩液来提高再造烟叶的香气量，尚未见报道。
发明内容
本发明为解决烟草中2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇降解的问题，提供了一株嗜麦芽寡养单胞菌（Stenotrophomonas maltophilia）及其应用。
为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：
一株快速高效降解2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇的嗜麦芽寡养单胞菌，所述嗜麦芽寡养单胞菌菌株已于2017年3月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC NO. 13905；地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编：100101，电话：010-64807355。
所述嗜麦芽寡养单胞菌菌株为革兰氏阴性菌，菌株大小为0.6～0.8 μm×1.5～2.0 μm，呈细杆状，无鞭毛，在平板上为黄色圆斑状。
快速高效降解2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇的嗜麦芽寡养单胞菌的培养方法，其步骤如下：将嗜麦芽寡养单胞菌菌液按1%的接种量，接种到培养基1中，培养条件为pH 7，温度30℃，转速150 rpm，培养24h即可。
所述培养基的配方为：KNO3 1.0 g/L，KH2PO4 0.5g/L，NaCl 0.5 g/L MgSO4•7H2O0.5 g/L，FeSO4•7H2O 0.01 g/L，2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇0.3g/L。
一株嗜麦芽寡养单胞菌作为降解2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇及再造烟叶浓缩液发酵中的应用。
所述嗜麦芽寡养单胞菌降解2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇的降解率为75%。
本发明针对现有技术的不足，提供一种嗜麦芽寡养单胞菌作为产香菌发酵再造烟叶浓缩液的应用，发酵后提高香气质和香气量、降低刺激，能改善再造烟叶的口感。
一种嗜麦芽寡养单胞菌在再造烟叶浓缩液发酵中的应用方法，包括以下步骤：
1）培养基的配方：KNO3 1.0 g/L，KH2PO4 0.5g/L，NaCl 0.5 g/L MgSO4•7H2O 0.5 g/L，FeSO4•7H2O 0.01 g/L，麦芽糖 1 g/L；
2）菌株活化：将嗜麦芽寡养单胞菌H3-1活化培养，得到嗜麦芽寡养单胞菌活化液；菌株活化条件为：25～35℃、pH 5～7条件下，100～150 r/min震荡培养24～72小时；
3）发酵：将步骤2)中所得的活化菌液按体积比5～10％接种到上述步骤1)中的培养基中形成发酵液，接种后的发酵培养条件同活化培养条件，培养时间为2～4天；
4）将步骤3)中所得的发酵液按1：10的体积比和再造烟叶浓缩液混合转化48～72 h后涂布到再造烟叶的基片上。
5）利用GC-MS检测再造烟叶浓缩液中的香气成分后发现，苯甲醇、2-乙酰基吡咯、甲基麦芽酚、苯乙醇、2-乙基-3-甲基马来酰亚胺、甲基环戊酮、茄酮、二氢猕猴桃内酯、4-羟基-β-二氢大马酮、9-羟基-4,7-巨豆三烯酮、4-(3-羟基丁基)-3,5,5-三甲基-2-环己烯-1-酮、叶绿醇以及棕榈酸的含量提高。
所述步骤4）中转化的条件为在温度25～35℃、pH 5～7的条件下，以100～150 r/min的速度振荡。
所述浓缩液转化后，所得的发酵液的香味成分增加的有苯甲醇、2-乙酰基吡咯、甲基麦芽酚、苯乙醇、2-乙基-3-甲基马来酰亚胺、甲基环戊酮、茄酮、二氢猕猴桃内酯、4-羟基-β-二氢大马酮、9-羟基-4,7-巨豆三烯酮、4-(3-羟基丁基)-3,5,5-三甲基-2-环己烯-1-酮、叶绿醇以及棕榈酸。
茄酮是中性致香物质成分类西柏烷类的主要降解产物，其在改善烟草香吃味和醇和烟气方面大有益处。茄酮及其降解产物均可赋予烟气类似胡萝卜的香味、甘草香和茶芳香，在提高卷烟香气质、香气量等方面发挥着十分重要的作用。在卷烟制品中添加茄酮对掩盖杂气、突出烟气细腻感及甜润感、适度降低刺激性效果较好。茄酮作为关键的致香成分，在卷烟中增香提调、醇和烟气等方面作用明显。
二氢称猴桃内酯,是20世纪60年代从猕猴桃属木天寥植物中分离得到的一种天然成分,在茶叶和烟草中也发现其存在,为烟草的主要香气成分之一,属天然等同化合物。在食品工业和卷烟工业中有着重要的应用价值,尤其在卷烟工业中,因其具有独特的香气而影响着卷烟的香气质量,而深受调香师的青睐。
叶醇为无色油状液体。从茶、刺槐、萝卜、草莓、圆柚等植物中发现，具有强烈的新鲜草叶的青香，新茶叶和苹果青香，扩散力强，稀释后具有特殊的药草香和叶子气味，味平和，属清香型名贵香料，可用于香精配方，化妆品及食品香料中及使用于制备系列的叶醇酯中。本发明的有益效果在于：
（1）嗜麦芽寡养单胞菌可以在24h内将75%的2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇降解（含量为 300 mg/L），说明该菌可用于烟叶的发酵；另一个有益效果在于将嗜麦芽寡养单胞菌直接应 用于再造烟叶浓缩液的转化中；发明人对烟叶中是否添加再造烟叶浓缩液带来的效果进行 了产品检测，选取了15个品烟人员进行品鉴，总结品烟人的品鉴评价如下表：
浓缩液嗅香 感官评吸
对照 烤烟烟香较弱，香气较单一 香气不够透发，木质气较明显，余味有残留
处理 烤烟烟香、甘草香、花香、甜香有提升 香气质较好、香气协调且较丰富、甜润感有揭提升、刺激性就小
（2）在烟叶的陈化期间，本申请的嗜麦芽寡养单胞菌可将2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇类物质降解成香味物质，从而增加烟叶香味。
附图说明
图1为嗜麦芽寡养单胞菌的平板图。
图2为嗜麦芽寡养单胞菌的电镜图。
图3为嗜麦芽寡养单胞菌对2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇的降解曲线和该菌的生长曲线。
图4嗜麦芽寡养单胞菌中发酵液的主要成分的GC-MS图。
具体实施方式
一株快速高效降解2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇的嗜麦芽寡养单胞菌，所述嗜麦芽寡养单胞菌菌株已于2017年3月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC NO. 13905；地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，邮编：100101，电话：010-64807355。
所述嗜麦芽寡养单胞菌菌株为革兰氏阴性菌，菌株大小为0.6～0.8 μm×1.5～2.0 μm，呈细杆状，无鞭毛，在平板上为黄色圆斑状。
快速高效降解2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇的嗜麦芽寡养单胞菌的培养方法，其步骤如下：将嗜麦芽寡养单胞菌菌液按1%的接种量，接种到培养基1中，培养条件为pH 7，温度30℃，转速150 rpm，培养24h即可。
所述培养基的配方为：KNO3 1.0 g/L，KH2PO4 0.5g/L，NaCl 0.5 g/L MgSO4•7H2O0.5 g/L，FeSO4•7H2O 0.01 g/L，2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇0.3g/L。
一株嗜麦芽寡养单胞菌作为降解2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇及再造烟叶浓缩液发酵中的应用。
所述嗜麦芽寡养单胞菌降解2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇的降解率为75%。
本发明针对现有技术的不足，提供一种嗜麦芽寡养单胞菌作为产香菌发酵再造烟叶浓缩液的应用，发酵后提高香气质和香气量、降低刺激，能改善再造烟叶的口感。
一种嗜麦芽寡养单胞菌在再造烟叶浓缩液发酵中的应用方法，包括以下步骤：
1）培养基的配方：KNO3 1.0 g/L，KH2PO4 0.5g/L，NaCl 0.5 g/L MgSO4•7H2O 0.5 g/L，FeSO4•7H2O 0.01 g/L，麦芽糖 1 g/L；
2）菌株活化：将嗜麦芽寡养单胞菌H3-1活化培养，得到嗜麦芽寡养单胞菌活化液；菌株活化条件为：25～35℃、pH 5～7条件下，100～150 r/min震荡培养24～72小时；
3）发酵：将步骤2)中所得的活化菌液按体积比5～10％接种到上述步骤1)中的培养基中形成发酵液，接种后的发酵培养条件同活化培养条件，培养时间为2～4天；
4）将步骤3)中所得的发酵液按1：10的体积比和再造烟叶浓缩液混合转化48～72 h后涂布到再造烟叶的基片上。转化条件：温度为25～35℃、pH 5～7条件下，100～150 r/min。
5）利用GC-MS检测再造烟叶浓缩液中的香气成分如图4所示，苯甲醇、2-乙酰基吡咯、甲基麦芽酚、苯乙醇、2-乙基-3-甲基马来酰亚胺、甲基环戊酮、茄酮、二氢猕猴桃内酯、4-羟基-β-二氢大马酮、9-羟基-4,7-巨豆三烯酮、4-(3-羟基丁基)-3,5,5-三甲基-2-环己烯-1-酮、叶绿醇以及棕榈酸的含量提高。
所述步骤4）中转化的条件为在温度25～35℃、pH 5～7的条件下，以100～150 r/min的速度振荡。
所述浓缩液转化后，所得的发酵液的香味成分增加的有苯甲醇、2-乙酰基吡咯、甲基麦芽酚、苯乙醇、2-乙基-3-甲基马来酰亚胺、甲基环戊酮、茄酮、二氢猕猴桃内酯、4-羟基-β-二氢大马酮、9-羟基-4,7-巨豆三烯酮、4-(3-羟基丁基)-3,5,5-三甲基-2-环己烯-1-酮、叶绿醇以及棕榈酸。
为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
一、实验准备
高式1号培养基的公开配方：
KNO3 1.0 g/L，KH2PO4 0.5g/L，NaCl 0.5 g/L MgSO4•7H2O 0.5 g/L，FeSO4•7H2O 0.01g/L，在此培养基基础上加0.3g/L 2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇。
细菌LB培养基的公开配方：
10g 胰蛋白胨，5g 酵母提取物，10g NaCl，蒸馏水1L，pH至7.0。
种子液的制备：
将保存在斜面中的嗜麦芽寡养单胞菌（Stenotrophomonas maltophilia ）接种到30mL的LB培养基中，培养12 h后备用。
二、2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇的细菌降解特性的检测
将嗜麦芽寡养单胞菌种子液按1%的接种量接种到含有0.3 g/L的细菌无机盐培养基中培养，培养时间24 h，温度32℃，摇床转速，150 rpm。同时做空白对照。每6 h取样一次每次取样30 mL，利用GC-MS测定发酵液中2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇的含量。
三、样品的测定
经过24 h培养后，取10 mL发酵液，在12000 r/min 条件下对其进行离心30 min，取上清液与等体积的CH2Cl2，在分液漏斗中进行萃取，缓缓摇晃，使两相混合均匀，静置10 min后，收集下层有机相，重复以上步骤5次，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，静置过夜，过滤，旋转蒸发除去CH2Cl2后，加入1 mL色谱纯CH2Cl2溶解，过0.45 μm有机系滤膜后，上GC-MS分析检测，以上操作均在避光环境中进行。GC-MS的检测方法如下：色谱条件：HP-5 MS 5%Phenyl Methyl Silox（型号为30 m ×0.25 mm ×0.25μm）；进样口温度280 ℃；高纯氦气作载气，流速为1mL/min；程序升温：初始温度为50℃，保持4 min，然后以2 ℃/min的升温速度升至240 ℃结束；不分流；进样量为1 μL；GC-MS采用全扫模式。质谱条件：传输线温度280℃；离子源温度为280 ℃，四极杆温度150 ℃；电离方式为电子轰击（EI），电子能量为70eV；溶剂延迟时间为8 min；扫描质量范围（m/z）：35-550 μ。
检测结果：原200 mg/L的培养基中的2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇的残留浓度为50mg/L，对照为200 mg/L，证明2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇的细菌降解率为75 ％。
实施例2
参照实施例1的方法活化并培养嗜麦芽寡养单胞菌。
一株嗜麦芽寡养单胞菌作为发酵再造烟叶浓缩液的应用。具体步骤如下：
1）培养基的配方：KNO3 1.0 g/L，KH2PO4 0.5g/L，NaCl 0.5 g/L MgSO4•7H2O 0.5 g/L，FeSO4•7H2O 0.01 g/L，麦芽糖 1 g/L。
2）菌株活化：将嗜麦芽寡养单胞菌H3-1活化培养，得到嗜麦芽寡养单胞菌活化液；菌株活化条件为： 35℃、pH 7条件下， 150 r/min震荡培养72小时.
3）发酵：将步骤2)中所得的活化菌液按体积比10％接种到上述步骤1)中的培养基中形成发酵液，接种后的发酵培养条件同活化培养条件，培养时间为4天；
4）将步骤3)中所得的发酵液按1：10的体积比和再造烟叶浓缩液混合转化48～72 h后涂布到再造烟叶的基片上。转化条件：在温度25～35℃、pH 5～7条件下，100～150 r/min。
5）GC-MS检测方法 再造烟叶浓缩液转化完成后，取10 mL，在12000 r/min 条件下对其进行离心30 min，取上清液与等体积的CH2Cl2，在分液漏斗中进行萃取，缓缓摇晃，使两相混合均匀，静置10 min后，收集下层有机相，重复以上步骤5次，合并有机相，加入无水硫酸钠干燥，静置过夜，过滤，旋转蒸发除去CH2Cl2后，加入1 mL色谱纯CH2Cl2溶解，过0.45 μm有机系滤膜后，上GC-MS分析检测，以上操作均在避光环境中进行。GC-MS的检测方法如下：色谱条件：HP-5 MS 5% Phenyl Methyl Silox（型号为30 m ×0.25 mm ×0.25μm）；进样口温度280 ℃；高纯氦气作载气，流速为1mL/min；程序升温：初始温度为50℃，保持4 min，然后以2 ℃/min的升温速度升至240 ℃结束；不分流；进样量为1 μL；GC-MS采用全扫模式，结果如图4所示。质谱条件：传输线温度280 ℃；离子源温度为280 ℃，四极杆温度150 ℃；电离方式为电子轰击（EI），电子能量为70 eV；溶剂延迟时间为8 min；扫描质量范围（m/z）：35-550 μ。检测再造烟叶浓缩液中的香气成分如表1所示，
表1
结果证明：苯甲醇、2-乙酰基吡咯、甲基麦芽酚、苯乙醇、2-乙基-3-甲基马来酰亚胺、甲基环戊酮、茄酮、二氢猕猴桃内酯、4-羟基-β-二氢大马酮、9-羟基-4,7-巨豆三烯酮、4-(3-羟基丁基)-3,5,5-三甲基-2-环己烯-1-酮、叶绿醇以及棕榈酸的含量显著提高。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何属于本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求的保护范围为准。

Claims (9)

1.一株嗜麦芽寡养单胞菌，其特征在于：所述嗜麦芽寡养单胞菌菌株已于2017年3月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为CGMCC No.13905。
2.根据权利要求1所述的嗜麦芽寡养单胞菌的培养方法，其特征在于：所述嗜麦芽寡养单胞菌菌株为革兰氏阴性菌，菌株大小为0.6～0.8 μm×1.5～2.0 μm，呈细杆状，无鞭毛，在平板上为黄色圆斑状。
3.根据权利要求1或2所述的嗜麦芽寡养单胞菌的培养方法，其特征在于其步骤如下：将嗜麦芽寡养单胞菌菌液按1%的接种量，接种到培养基中，培养条件为pH 7.3，温度32 ℃，转速150 rpm，培养24 h即可。
4.根据权利要求3所述的嗜麦芽寡养单胞菌的培养方法，其特征在于，所述培养基的配方为：KNO3 1.0 g/L，KH2PO4 0.5g/L，NaCl 0.5 g/L MgSO4•7H2O 0.5 g/L，FeSO4•7H2O 0.01g/L，2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇0.3g/L。
5.一株嗜麦芽寡养单胞菌作为降解2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇及再造烟叶浓缩液发酵中的应用。
6.根据权利要求5所述的嗜麦芽寡养单胞菌作为2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇的应用，其特征在于：所述嗜麦芽寡养单胞菌降解2,7,11-西柏三烯-4,6-二醇的降解率为75%。
7.根据权利要求5所述的嗜麦芽寡养单胞菌在再造烟叶浓缩液发酵中的应用，其特征在于包括以下步骤：
1）培养基的配方：KNO3 1.0 g/L，KH2PO4 0.5g/L，NaCl 0.5 g/L MgSO4•7H2O 0.5 g/L，FeSO4•7H2O 0.01 g/L，麦芽糖 1 g/L；
2）菌株活化：将嗜麦芽寡养单胞菌活化培养，得到嗜麦芽寡养单胞菌活化液；菌株活化条件为：25～35℃、pH 5～7条件下，100～150 r/min震荡培养24～72小时；
3）发酵：将步骤2）中所得的活化菌液按体积比5～10％接种到上述步骤1）中的培养基中形成发酵液，接种后的发酵培养条件与活化培养条件相同，培养时间为2～4天；
4）将步骤3)中所得的发酵液按1：10的体积比和再造烟叶浓缩液混合后，转化48～72 h后涂布到再造烟叶的基片上。
8.如权利要求7所述的嗜麦芽寡养单胞菌在再造烟叶浓缩液发酵的应用，其特征在于：所述步骤4）中转化的条件为在温度25～35℃、pH 5～7的条件下，以100～150 r/min的速度振荡。
9.如权利要求7所述的嗜麦芽寡养单胞菌在再造烟叶浓缩液发酵的应用，其特征在于：所述浓缩液转化后，所得的发酵液的香味成分增加的有苯甲醇、2-乙酰基吡咯、甲基麦芽酚、苯乙醇、2-乙基-3-甲基马来酰亚胺、甲基环戊酮、茄酮、二氢猕猴桃内酯、4-羟基-β-二氢大马酮、9-羟基-4,7-巨豆三烯酮、4-(3-羟基丁基)-3,5,5-三甲基-2-环己烯-1-酮、叶绿醇以及棕榈酸。
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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111254091A (zh) * 2020-01-20 2020-06-09 浙江工业大学 一种嗜麦芽窄食单胞菌gyh及其在降解氯代烃类污染物中的应用
CN111690559A (zh) * 2020-06-04 2020-09-22 江南大学 可降解聚对苯二甲酸乙二醇酯的嗜麦芽寡养单胞菌
CN112205661A (zh) * 2020-11-19 2021-01-12 河南中烟工业有限责任公司 一种再造烟叶浓缩液处理方法
CN113073062A (zh) * 2021-04-07 2021-07-06 广西中烟工业有限责任公司 一种复合微生物制剂及其制备方法和应用
CN113755385A (zh) * 2021-09-27 2021-12-07 浙江中烟工业有限责任公司 一株嗜麦芽寡养单胞菌及其应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101245325B (zh) * 2007-02-12 2010-12-08 青岛大学 一株产新型碱性蛋白酶的嗜麦芽寡养单胞菌
CN102586160B (zh) * 2012-03-14 2013-07-31 中国地质大学（武汉） 嗜麦芽寡养单胞菌ds4
CN103352011B (zh) * 2013-05-28 2014-10-08 中国水产科学研究院南海水产研究所 一株溶解池塘颤藻的嗜麦芽寡养单胞菌菌株czrst19及其应用
CN106754467A (zh) * 2016-11-15 2017-05-31 江南大学 一株嗜麦芽假单胞菌及其应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101245325B (zh) * 2007-02-12 2010-12-08 青岛大学 一株产新型碱性蛋白酶的嗜麦芽寡养单胞菌
CN102586160B (zh) * 2012-03-14 2013-07-31 中国地质大学（武汉） 嗜麦芽寡养单胞菌ds4
CN103352011B (zh) * 2013-05-28 2014-10-08 中国水产科学研究院南海水产研究所 一株溶解池塘颤藻的嗜麦芽寡养单胞菌菌株czrst19及其应用
CN106754467A (zh) * 2016-11-15 2017-05-31 江南大学 一株嗜麦芽假单胞菌及其应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
KHAN MA 等: "Optimization of culture media for enhanced chitinase production from a novel strain of Streptophomonas maltophilia using response surface methodology.", 《J MICROBIOL BIOTHCHNOL》 *
王东: "烟草西柏三烯二醇积累的遗传及生态响应研究", 《万方学术》 *

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111254091A (zh) * 2020-01-20 2020-06-09 浙江工业大学 一种嗜麦芽窄食单胞菌gyh及其在降解氯代烃类污染物中的应用
CN111254091B (zh) * 2020-01-20 2022-04-19 浙江工业大学 一种嗜麦芽窄食单胞菌gyh及其在降解氯代烃类污染物中的应用
CN111690559A (zh) * 2020-06-04 2020-09-22 江南大学 可降解聚对苯二甲酸乙二醇酯的嗜麦芽寡养单胞菌
CN111690559B (zh) * 2020-06-04 2021-09-24 江南大学 可降解聚对苯二甲酸乙二醇酯的嗜麦芽寡养单胞菌
WO2021244573A1 (zh) * 2020-06-04 2021-12-09 江南大学 可降解聚对苯二甲酸乙二醇酯的嗜麦芽寡养单胞菌
CN112205661A (zh) * 2020-11-19 2021-01-12 河南中烟工业有限责任公司 一种再造烟叶浓缩液处理方法
CN113073062A (zh) * 2021-04-07 2021-07-06 广西中烟工业有限责任公司 一种复合微生物制剂及其制备方法和应用
CN113755385A (zh) * 2021-09-27 2021-12-07 浙江中烟工业有限责任公司 一株嗜麦芽寡养单胞菌及其应用
CN113755385B (zh) * 2021-09-27 2023-09-01 浙江中烟工业有限责任公司 一株嗜麦芽寡养单胞菌及其应用

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