CN107259139A

CN107259139A - 嗜酸乳杆菌固态发酵母猪配合饲料的制备方法及其应用

Info

Publication number: CN107259139A
Application number: CN201710383487.XA
Authority: CN
Inventors: 季海峰; 张董燕; 王四新; 刘辉; 王晶; 张伟; 王雅民
Original assignee: Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences
Current assignee: Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences
Priority date: 2017-05-26
Filing date: 2017-05-26
Publication date: 2017-10-20

Abstract

本发明涉及发酵饲料技术领域，具体提供一种利用嗜酸乳杆菌固态发酵母猪配合饲料制备方法及其应用。本发明提供猪源嗜酸乳杆菌固态发酵母猪配合饲料的制备方法，简化了操作，缩短了发酵时间，保持了饲料新鲜度，减少了饲料能值损失。制备的嗜酸乳杆菌固态发酵饲料在添加到母猪配合饲料中后，促进了母猪肠道健康，提高了母猪繁殖性能，增加了乳中免疫球蛋白含量，提高了仔猪成活率，减少了粪中有害细菌排放，优化了养殖环境。

Description

嗜酸乳杆菌固态发酵母猪配合饲料的制备方法及其应用

技术领域

本发明涉及发酵饲料技术领域，具体涉及特别涉及一种嗜酸乳杆菌固态发酵母猪配合饲料的制备方法及其应用。

背景技术

母猪肠道健康和繁殖性能提高，是猪场的重要任务。而母猪配合饲料是母猪繁殖生产的重要投入品，其营养价值、适口性和原料价格等，直接影响猪场生产水平和经济效益。近几年，随着饲用抗生素逐渐被禁用，益生菌发酵饲料备受推崇，希望通过益生菌的作用，平衡肠道菌群，抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等有害细菌生长与繁殖，提高配合饲料的适口性，降解饲料中的抗营养因子和霉菌毒素，将大分子蛋白转化为容易消化吸收的小肽，减少氨、吲哚、生物胺和臭气等有害物质产生，进而改善母猪肠道健康，增强机体免疫力，提高母猪繁殖性能，优化生猪养殖环境。

目前，固态发酵饲料技术，多采用多菌种混合发酵技术，产生了一定效果，但这些固态发酵饲料技术，操作较为繁琐(需要多菌种分别操作)，发酵时间较长(4～10天或更长)，发酵饲料新鲜度往往受到影响(挥发性盐基氮超标)，并且还会因为耗氧产热等造成饲料能量损失，饲喂方式与饲喂效果还需要改进。譬如，公布号CN102429112A的申请专利和公布号CN102422996A的申请专利，使用嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌、酿酒酵母、长柄木霉、黑曲霉和米曲霉，分别发酵妊娠母猪饲料和生长肥育猪料；公布号CN105410410A的申请专利，使用混合嗜酸乳杆菌(嗜酸乳杆菌、短乳杆菌、干酪乳杆菌、粪肠球菌、乳糖乳杆菌)、酵母菌和芽孢杆菌等混合发酵保育猪料、生长育肥猪料和妊娠母猪料；公布号CN104106727A的申请专利，使用植物乳杆菌、纳豆芽孢杆菌、啤酒酵母菌和产朊假丝酵母，混合发酵鸡、猪、牛饲料；公布号CN105595028A的申请专利，使用嗜酸乳杆菌、凝结芽孢杆菌和球拟圆酵母菌，混合发酵母猪饲料；公布号CN103960479A的申请专利，使用单一菌种嗜酸乳杆菌发酵橙渣，在15～30℃温度下密闭发酵7～10天，制备了橙渣发酵产品，应用于牛饲料；刘晓明等(2014)研究指出，采用嗜酸乳杆菌、酵母菌混合菌株发酵猪饲料后，发现发酵后的饲料能量值降低了。谢全喜等(2016)采用鼠李糖乳杆菌和产朊假丝酵母发酵母猪配合饲料，在温度28℃条件下发酵48小时，乳酸杆菌活菌数达到109×10⁸CFU/g，酵母菌活菌数为46×10⁶CFU/g，但目前我国农业部尚没有允许鼠李糖乳杆菌使用在畜禽饲料中。

发明内容

本发明的目的在于提供一种嗜酸乳杆菌用于制备固态发酵母猪配合饲料的方法，其优化固态发酵饲料工艺，简化操作，缩短发酵时间，保持饲料新鲜度，减少耗氧产热等引起的饲料能值损失，利用该方法制备的固态发酵母猪配合饲料饲养母猪后，改善了母猪肠道健康，提高机体免疫力，提高母猪的繁殖性能。

一种嗜酸乳杆菌固态发酵母猪配合饲料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)发酵母猪饲料原料的准备：将按重量份计的下述物料混合均匀：母猪配合饲料90～110、饮用水70～90、葡萄糖1～3和猪源嗜酸乳杆菌冻干制剂0.3～0.5；

(2)将所述步骤(1)准备好的原料，装入干净的不锈钢桶或塑料桶中，压实，加盖密封，作为发酵饲料桶；

(3)将所述发酵饲料桶放入密闭条件下，35～39℃恒温培养，发酵24～36h后，获得嗜酸乳杆菌固态发酵母猪饲料。

优选地，所述猪源嗜酸乳杆菌冻干制剂中其活菌数含量≥10⁹cfu/g。

优选地，所述母猪配合饲料为100份，所述饮用水80份、葡萄糖2份和猪源嗜酸乳杆菌CGMCC No.8491冻干制剂0.4份。

优选地，所述猪源嗜酸乳杆菌为嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilusZLA012，保藏号为：CGMCC No.8491。

该制备方法获得的嗜酸乳杆菌固态发酵母猪配合饲料，其粗蛋白质和酸溶蛋白含量明显提高，嗜酸乳杆菌活菌数大于10⁹cfu/g，pH值小于4.2，乳酸含量大于130mmol/kg，挥发性盐基氮含量小于29mg/100g，新鲜可口，具有酸香味。

如上所述制备方法制备的嗜酸乳杆菌固态发酵母猪饲料在母猪饲料中的应用。

如上所述的应用，优选地，所述嗜酸乳杆菌固态发酵母猪饲料在常规母猪饲料中添加量为重量比5％。

本发明的有益效果为：

本发明提供的嗜酸乳杆菌固态发酵母猪配合饲料的制备方法，其操作简单，并缩短发酵时间，能保持饲料新鲜度，减少耗氧产热等引起的饲料能值损失。获得的嗜酸乳杆菌固态发酵母猪配合饲料，其粗蛋白质和酸溶蛋白含量明显提高，嗜酸乳杆菌活菌数大于10⁹cfu/g，pH值小于4.2，乳酸含量大于130mmol/kg，挥发性盐基氮含量小于29mg/100g，新鲜可口，具有酸香味。用于饲喂妊娠母猪和哺乳母猪后，能改善母猪肠道健康，提高机体免疫力，提高母猪繁殖性能。仔猪断奶时成活率提高，仔猪日增重提高，能显著减少猪粪中有害细菌排放。

附图说明

图1为不同发酵温度对母猪饲料中嗜酸乳杆菌活菌数的影响结果图。

图2为不同发酵时间对母猪饲料中嗜酸乳杆菌活菌数的影响结果图。

图3为不同接种量对母猪饲料中嗜酸乳杆菌活菌数的影响结果图。

图4为不同料水比对母猪饲料中嗜酸乳杆菌活菌数的影响结果图。

图5为发酵前后(鲜基)活菌数、pH及乳酸、挥发性盐基氮含量对比图。

图6为发酵前后(干基)营养成分的变化比较图。

具体实施方式

本发明是对在前申请201510111576.X，所述的嗜酸乳杆菌Lactobacillusacidophilus ZLA012，保藏号为：CGMCC No.8491的进一步研究应用。

下面结合具体的实施例来说明本发明内容，但不应理解为对本发明的限制。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。

若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。

实施例1嗜酸乳杆菌固态发酵母猪饲料工艺优化

一种嗜酸乳杆菌固态发酵母猪饲料的制备方法，包括如下步骤：

(1)发酵母猪饲料原料的准备：将下述物料混合均匀：母猪配合饲料、饮用水、葡萄糖和猪源嗜酸乳杆菌冻干制剂；

(2)将所述步骤(1)准备好的原料装入干净的不锈钢桶或塑料桶中，压实，加盖密封，作为发酵饲料桶；

(3)将所述发酵饲料桶放入密闭的条件下，一定的发酵温度下恒温培养，一定发酵时间后，获得嗜酸乳杆菌固态发酵母猪饲料。

其中，采用猪源嗜酸乳杆菌为(Lactobacillus acidophilus ZLA012，保藏号为：CGMCC No.8491)冻干制剂(活菌数≥10⁹cfu/g)，其制备方法可参见公开号为CN104673726A中所述方法，发酵母猪配合饲料(水分含量11.71％)，以嗜酸乳杆菌活菌数为指标，分别研究发酵温度(25℃、33℃、35℃、37℃和39℃)、发酵时间(12、24、36、48、60和72h)、接种量(按母猪配合饲料的重量百分比分别为0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.8％和1.0％)及料水比(1:0.4、1:0.6、1:0.8、1:1、1:1.2和1:1.4)的影响。结果见图1、2、3、4。

由图1～4可见，随着发酵温度、发酵时间、接种量及料水比的增加，发酵配合饲料中的嗜酸乳杆菌活菌数先增后减，根据结果，温度35～39℃、发酵时间24～36h、接种量0.4％及料水比1:0.8时，发酵效果较好。

具体地，优化后的猪源嗜酸乳杆菌固态发酵母猪配合饲料的制备方法，包括如下步骤：

(1)发酵母猪饲料原料的准备：将按重量份计的下述物料混合均匀：母猪配合饲料100、饮用水80、葡萄糖2和猪源嗜酸乳杆菌CGMCC No.8491冻干制剂0.4；

(3)将所述发酵饲料桶放入密闭的条件下，35～39℃恒温培养，发酵24～36h后，获得嗜酸乳杆菌固态发酵母猪饲料。

其中，母猪配合饲料配方按照母猪妊娠后期基础日粮和哺乳期基础日粮参照《猪饲养标准》(2004)配制。

实施例2饲料发酵前后的指标变化情况

采用实施例1中优化后发酵工艺，采用嗜酸乳杆菌对哺乳母猪配合饲料进行发酵，发酵24h后即为发酵饲料鲜样，测定鲜样中嗜酸乳杆菌活菌数、pH、乳酸含量及挥发性盐基氮含量。将发酵后饲料于60℃烘干，粉碎过60目筛，为发酵饲料干样，测定干样中粗蛋白质、粗灰分、钙、总磷和酸溶蛋白含量。

粗蛋白的测定：采用GB/T 6432-1994测定样品中粗蛋白质含量；

粗灰分的测定：采用GB/T 6438-1992测定样品中粗灰分含量；

钙的测定：采用GB/T 6436-2002测定样品中钙含量；

磷的测定：采用GB/T 6437-2002测定样品中总磷含量；

酸溶蛋白的测定：准确称取样品6g于100ml烧杯中，准确加入15％三氯乙酸溶液50ml，混合均匀，静置5min，以中速定性滤纸过滤，将滤液转移至离心管，4000r/min离心10min，取上清液按半微量法测定其酸溶蛋白含量。将发酵饲料鲜样的发酵前后活菌数、pH及乳酸、挥发性盐基氮含量对比数据例为柱状图，结果见图5所示，由图5可见，发酵后的母猪配合饲料(鲜基)pH值降至4.11，乳酸含量达到133.69mmol/kg，嗜酸乳杆菌活菌数(lgcfu/g值为9.38)，显著高于发酵前(lg cfu/g值为6.64)。另外，发酵后饲料中的挥发性盐基氮含量为28.67mg/100g，发酵饲料新鲜可口，具有酸香味。

发酵饲料干样的发酵前后营养成分的对比数据例为柱状图，结果见图6所示，由图6可见，发酵后的母猪配合饲料(干基)，其粗蛋白质、酸溶蛋白、钙及总磷含量明显提高。这表明使用猪源嗜酸乳杆菌固态发酵饲料，能够提高配合饲料的营养品质，有利于消化吸收。

实施例3发酵饲料对母猪繁殖性能、乳成分、饲料消化率及粪中菌群的影响1试验动物及管理

选用健康、胎次和预产期相近的妊娠母猪40头，随机分成两个组，每组20个重复，每个重复1头母猪。试验期限为母猪妊娠85d至仔猪28d断奶。对照组饲喂基础日粮，试验组母猪在基础日粮中添加5％发酵配合饲料(采用实施例3中优化后的方法制备，其中，发酵温度为37℃恒温培养，发酵24后)。其中，母猪妊娠后期基础日粮和哺乳期基础日粮参照《猪饲养标准》(2004)配制。母猪饲养于同一栋圈舍，饲喂方式、饲喂时间、免疫程序和饲养管理等均按猪场统一要求执行。

2试验结果

2.1母猪繁殖性能

由表1可见，饲喂发酵饲料的试验组，其母猪窝产活仔数提高了1头以上，仔猪断奶时成活率提高了8个百分点，哺乳期仔猪日增重提高了9.1％,仔猪腹泻率降低了3个百分点，哺乳母猪采食量提高了6.8％。这表明发酵饲料能够提高母猪繁殖性能，同时促进仔猪健康和成活率提高。

表1发酵饲料对母猪繁殖性能的影响

2.2母猪初乳成分及乳中免疫指标

见表2可见，试验组母猪初乳中蛋白质、乳总固形物、IgA和IgM含量，分别比对照组分别提高了18.07％、13.06％、4.06％和5.61％，这表明饲喂发酵饲料能够改善母猪初乳成分，增加乳中免疫球蛋白含量，有利于仔猪健康生长。

表2发酵饲料对母猪初乳成分及免疫指标的影响

2.3母猪饲料营养成分消化率

表3可见，试验组母猪对饲料中有机物质、粗蛋白质、钙和总磷的表观消化率均显著高于对照组，这表明发酵饲料能够促进猪群对营养物质的消化吸收，有利于母猪降低生产成本，提高养殖效益。

表3发酵饲料对母猪营养成分表观消化率的影响％

2.4母猪粪中菌群

表4可见，母猪饲喂发酵饲料后，能显著增加粪便中有益的嗜酸乳杆菌菌数，显著降低粪便中有害的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌数量。这表明发酵饲料能够改善母猪肠道菌群，有利于机体健康生长，并减少有害细菌的排放。

表4发酵饲料对母猪粪中菌群的影响

综上，使用猪源嗜酸乳杆菌固态发酵母猪饲料，并按5％比例饲喂妊娠母猪和哺乳母猪，能够促进母猪肠道健康，增加乳中免疫球蛋白含量，母猪窝产活仔数提高1头以上，仔猪日增重提高9％以上，仔猪断奶成活率和养殖效益显著提高，同时还可以减少猪粪中有害细菌排放，有利于养猪环境的改善。

Claims

1.一种嗜酸乳杆菌固态发酵母猪饲料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述猪源嗜酸乳杆菌冻干制剂中的活菌数含量≥10⁹cfu/g。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述母猪配合饲料为100份，所述饮用水80份、葡萄糖2份和猪源嗜酸乳杆菌冻干制剂0.4份。

4.根据权利要求1-3所述的制备方法，其特征在于，所述猪源嗜酸乳杆菌为嗜酸乳杆菌Lactobacillus acidophilus ZLA012，保藏号为：CGMCC No.8491。

5.根据权利要求1-4任一项所述制备方法制备的嗜酸乳杆菌固态发酵母猪饲料在母猪配合饲料中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述嗜酸乳杆菌固态发酵母猪饲料在常规母猪饲料中添加量为重量比5％～8％。