CN107250119A

CN107250119A - (2r,4r)‑5‑(5′‑氯‑2′‑氟联苯‑4‑基)‑2‑羟基‑4‑[(5‑甲基恶唑‑2‑羰基)氨基]戊酸

Info

Publication number: CN107250119A
Application number: CN201680011254.0A
Authority: CN
Inventors: 梅丽莎·弗勒里; 亚当·D·休斯; 安妮-玛丽·博索莱伊; 埃里克·芬斯特; 文卡特·R·萨兰迪; 米罗斯拉夫·拉普塔
Original assignee: Theravance Biopharma R&D IP LLC
Current assignee: Theravance Biopharma R&D IP LLC
Priority date: 2015-02-19
Filing date: 2016-02-12
Publication date: 2017-10-13
Anticipated expiration: 2036-02-12
Also published as: LT3259255T; ES2857101T3; HRP20210040T1; RU2017132430A3; CO2017008426A2; JP6714009B2; JP2018507207A; TW201638074A; KR102573351B1; EP3259255B1; US11033533B2; KR20170118855A; CA2975269C; HK1245772A1; IL253759B; CY1123728T1; RS61325B1; CN107250119B; US9872855B2; SG11201706662YA

Abstract

在一方面中，本发明涉及一种具有以下结构(1)的化合物：

Description

(2R,4R)-5-(5′-氯-2′-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基恶唑-2-羰基)氨基]戊酸

技术领域

本发明涉及具有肾胰岛素残基溶酶抑制活性的新颖化合物和其结晶型。本发明还涉及包括化合物的医药组合物、制备化合物的工艺和使用化合物治疗诸如高血压、心脏衰竭和肾病等疾病的方法。

背景技术

肾胰岛素残基溶酶(中性内肽酶，EC 3.4.24.11)(NEP)是发现于许多器官和组织(包含脑、肾、肺、胃肠道、心脏和周边血管***)中的内皮膜结合Zn²⁺金属肽酶。NEP降解且不活化化诸多内源性肽(例如脑啡肽、循环缓激肽、血管收缩肽和利钠肽)，最后一者具有若干效应，包含(例如)血管舒张和钠尿增多/利尿以及抑制心脏肥大和心室纤维化。因此，NEP在血压稳态和心血管健康中发挥重要作用。

已研究NEP抑制剂(例如硫甲基氧代苯丙甘氨酸(thiorphan)、坎沙曲(candoxatril)和坎沙曲拉(candoxatrilat))作为潜在治疗剂。还已知抑制NEP和血管收缩肽-I转化酶(ACE)的化合物，并且包含奥马曲拉(omapatrilat)、杰帕曲拉(gempatrilat)和山帕曲拉(sampatrilat)。此后一种类的化合物称为血管肽酶抑制剂，其描述于罗布尔(Robl)等人(1999)治疗学专利中的专家意见(Exp.Opin.Ther.Patents)9(12):1665-1677中。

诸多NEP抑制剂描述于科波拉(Coppola)等人的美国专利第8,263,629号和詹德隆(Gendron)等人的美国专利第8,586,536号中。许多所述化合物具有一或多种所需性质。尽管已拥有所述化合物，然而，仍需要在所测试的所有物种中具有高口服生物利用度和低清除率的强效NEP抑制剂。本发明涉及所述需要。

另外，为有效地使用NEP抑制剂化合物作为治疗剂，需要具有可易于制造且具有可接受的化学和物理稳定性的固态形式。举例来说，高度需要具有在相当高温度下热稳定、由此促进材料的处理和存储的物理形式。对于增强所制造产物的纯度和稳定性来说，结晶固体通常优于非晶型形式。然而，有机化合物的结晶型形成高度不可预测。并不存在预测何种(如果存在)形式的有机化合物为结晶的可靠方法。此外，不存在预测何种(如果存在)结晶型将具有用作医药药剂的所需物理性质的方法。因此，需要具有相当高熔点的稳定结晶型。

发明内容

本发明提供发现拥有肾胰岛素残基溶酶(NEP)酶抑制活性的新颖化合物(1)。因此，预计这种化合物可有利地用作用于治疗诸如高血压、肺高血压、心脏衰竭和肾病等病状的治疗剂。

本发明的一方面涉及(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基-恶唑-2-羰基)氨基]戊酸(1)：

或其药学上可接受的盐。本发明的另一方面涉及化合物1的结晶型。在一实施例中，结晶型(1’)是非溶剂化的。

本发明的另一方面涉及包括一或多种药学上可接受的载剂和化合物1或其结晶型的医药组合物。所述组合物可任选地含有其它治疗剂，包含但不限于AT₁受体拮抗剂、血管收缩肽转化酶抑制剂、磷酸二酯酶(PDE)抑制剂、肾素抑制剂、利尿剂或其组合。

本发明化合物1拥有NEP酶抑制活性，并且由此预计可用作用于治疗患有通过抑制NEP酶或通过增加其肽底物的含量来治疗的疾病或病症的患者的治疗剂。因此，本发明的一方面涉及治疗患有通过抑制NEP酶来治疗的疾病或病症的患者的方法，其包括向患者投与治疗有效量的化合物1。本发明的另一方面涉及治疗高血压、肺高血压、心脏衰竭或肾病的方法，其包括向个体投与治疗有效量的化合物1。本发明的又一方面涉及抑制个体中的NEP酶的方法，其包括向所述个体投与NEP酶抑制量的化合物1。

因本发明化合物1拥有NEP抑制活性，故其还可用作研究工具。因此，本发明的一方面涉及使用本发明化合物1作为研究工具的方法，所述方法包括使用化合物1实施生物分析。化合物1还可用于评估新化学化合物。因此，本发明的另一方面涉及在生物分析中评估测试化合物的方法，其包括：(a)使用测试化合物实施生物分析以提供第一分析值；(b)使用化合物1实施生物分析以提供第二分析值；其中步骤(a)是在步骤(b)之前、之后或与步骤(b)同时实施；和(c)比较步骤(a)的第一分析值与步骤(b)的第二分析值。实例性生物分析包含NEP酶抑制分析。本发明的再一方面涉及研究包括NEP酶的生物***或试样的方法，所述方法包括：(a)使生物***或试样与化合物1接触；和(b)测定由化合物1引起的对生物***或试样的效应。

本发明的又一方面涉及可用于制备化合物1或其结晶型的工艺。

本发明的又一方面涉及化合物1或其结晶型的用途，其用以制造药剂，尤其用以制造可用于治疗高血压、心脏衰竭或肾病的药剂。本发明的另一方面涉及化合物1或其结晶型用于抑制个体中的NEP酶的用途。本文揭示本发明的其它方面和实施例。

附图说明

参照附图来图解说明本发明的各个方面。

图1展示结晶非溶剂化(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基-恶唑-2-羰基)氨基]戊酸(1’)的粉末x射线衍射(PXRD)图案。

图2展示结晶非溶剂化形式(1’)的差示扫描量热法(DSC)热分析图。

图3展示结晶非溶剂化形式(1’)的热重分析谱图。

图4展示结晶非溶剂化形式(1’)的动态水分吸附(DMS)等温线。

图5是结晶非溶剂化形式(1’)的偏振光显微分析(PLM)图像。

具体实施方式

在一方面中，本发明涉及(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基-恶唑-2-羰基)氨基]戊酸(1)或其药学上可接受的盐。

本发明化合物1含有两个对掌性中心且由此具有所述结构的化合物可以各种立体异构体形式存在。具体来说，碳原子可具有特定(R,R)、(S,S)、(S,R)或(R,S)配置或富含具有所述配置的立体异构体形式。化合物1(如展示和命名)是呈(R,R)配置。所属领域技术人员应理解，除非另外指示，否则在本发明组合物中可存在少量其它立体异构体，前提是所述其它异构体的存在不会消除所述组合物作为整体的效用。个别立体异构体可通过业内熟知的诸多方法来获得，包含使用适宜对掌性固定相或载体的对掌性色谱，或通过以化学方式将其转化成非对映异构体，通过常规方式(例如色谱或重结晶)分离非对映异构体，然后再生原始立体异构体。

本发明化合物1拥有肾胰岛素残基溶酶(NEP)抑制活性，也就是所述化合能够抑制酶催化活性。化合物抑制NEP活性的能力的一个量度为抑制常数(pK_i)。pK_i值是解离常数(K_i)的以10为底的负对数，其通常以摩尔单位来报告。本发明化合物针对NEP具有≥9.0的pK_i。可使用所属领域技术人员熟知的活体外和活体内分析(尤其包含描述于美国专利第8,586,536号中的那些)来证实化合物1的其它性质和效用。

化合物1以及用于其合成的那些化合物还可包含同位素标记的化合物，也就是其中一或多个原子富含具有不同于主要在自然界中发现的原子质量的原子质量的原子。可纳入本发明中所描述的化合物中的同位素的实例(例如)包含但不限于²H、³H、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁸O、¹⁷O、³⁵S、³⁶Cl和¹⁸F。尤其关注以下化合物：富含氚或碳-14的化合物1，其可用于(例如)组织分布研究中；尤其在代谢位点富含氘的化合物1，从而产生(例如)具有较大代谢稳定性的化合物；和富含正电子发射同位素(例如¹¹C、¹⁸F、¹⁵O和¹³N)的化合物1，其可用于(例如)正电子发射形貌(PET)研究中。

在本文中根据IUPAC条例来命名化学结构，如在ChemDraw软件(珀金埃尔默公司(Perkin Elmer,Inc.)，剑桥，马萨诸塞州)中所实施。

定义

在描述本发明的化合物、组合物、方法和工艺时，除非另外指示，否则下列术语具有下列含义。另外，除非使用的背景明确指示其它含义，否则本文所用的单数形式“一(a、an)”和“所述(the)”包含相应的复数形式。术语“包括”、“包含”和“具有”打算具有囊括性并且意指除了所列举要素外可能还有其它要素。除非另外指示，否则本文所用的所有表示成分数量、性质(例如分子量)、反应条件等的数字在所有情况下都应理解为受术语“约”修饰。因此，本文所陈述的数字是近似值，其可随本发明打算获得的所需性质而变。至少，并且并非试图将等效物理论的应用限于权利要求书的范围，至少应根据所报告的有效数字且通过应用一般舍入技术来解释每一数字。

在用于化合物1的热行为的背景中时，术语“约”或“大约”定义为±1-3℃。在用于尿液中所分泌的化合物1的剂量％的背景中时，术语“近似”是由通常约两倍于标准偏差的误差界限或95％信赖区间的半宽来定义。在本发明的其它地方，术语“近似”可用于指示一组数据值的标准偏差或变化或分散量。

本文所用的术语“受控释放”与持续释放和延长释放同义且涉及经延长时间段在个体中递送一定量的药物。通常，受控释放的片剂和胶囊经约8小时、12小时、16小时和24小时的时间段将活性物质释放到个体中。另一方面，术语“立即释放”是指在较小时间段、通常小于约30分钟内将活性物质释放于个体中。术语“延迟释放”涉及在设定时间段之后释放医药剂量的片剂和胶囊。通常肠溶包覆所述剂型以防止释放于胃中，而是将其释放于肠道中。

本文所用词组“式”或“具有式”或“具有结构”并非打算具有限制性，并且使用方式与通常使用术语“包括”的方式相同。举例来说，如果绘示一种结构，那么应理解，除非另外陈述，否则涵盖所有立体异构体和互变异构体形式。

一般来说，在描述医药固体时，术语“非溶剂化”暗示“不含溶剂”。因此，在将本发明结晶型描述为“非溶剂化”时，其意指结晶颗粒基本上仅含有(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基恶唑-2-羰基)氨基]戊酸分子；所述形式不含显著量的其它包含晶格的溶剂分子或换句话说，溶剂并不显著纳入中晶格中。在水是溶剂时，术语“非溶剂化”还意指非水合或无水。

本文所用的术语“熔点”意指针对对应于固相到液相变化的热转化，通过差示扫描量热法所观察到最大吸热热流的温度。

术语“药学上可接受的”是指在用于本发明时在生物学上或在其它方面可接受的材料。举例来说，术语“药学上可接受的载剂”是指可纳入组合物中并投与患者而不会造成不可接受的生物效应或以不可接受方式与所述组合物中其它组分相互作用的材料。所述药学上可接受的材料通常符合毒理学和制造测试所要求的标准，并且包含那些由美国食品与药品管理局(U.S.Food and Drug administration)确定为适宜非活性成分的材料。

术语“药学上可接受的盐”意指从可接受用于投与患者(例如哺乳动物)的碱或酸制得的盐(例如具有用于给定剂量方案的可接受哺乳动物安全性的盐)。然而，应理解，本发明所涵盖的盐无需为药学上可接受的盐，例如并不打算投与患者的中间体化合物的盐。药学上可接受的盐可衍生自药学上可接受的无机或有机碱和药学上可接受的无机或有机酸。另外，在化合物含有碱性部分(例如胺、吡啶或咪唑)和酸性部分(例如羧酸或四唑)时，可形成两性离子且包含于本文所用的术语“盐”内。衍生自药学上可接受的无机碱的盐包含铵盐、钙盐、铜盐、铁盐、亚铁盐、锂盐、镁盐、锰盐、二价锰盐、钾盐、钠盐和锌盐等。衍生自药学上可接受的有机碱的盐包含以下的盐：一级、二级和三级胺，包含经取代胺、环胺、天然胺等，例如精氨酸、甜菜碱、咖啡因、胆碱、N,N’-二苄基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基吗啉、N-乙基哌啶、还原葡糖胺、葡萄糖胺、组氨酸、海巴明(hydrabamine)、异丙胺、赖氨酸、甲基还原葡糖胺、吗啉、哌嗪、哌啶、聚胺树脂、普鲁卡因(procaine)、嘌呤、可可碱、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等。衍生自药学上可接受的无机酸的盐包含硼酸、碳酸、氢卤酸(氢溴酸、盐酸、氢氟酸或氢碘酸)、硝酸、磷酸、氨基磺酸和硫酸的盐。衍生自药学上可接受的有机酸的盐包含以下酸的盐：脂肪族羟基酸(例如柠檬酸、葡萄糖酸、乙醇酸、乳酸、乳糖醛酸、苹果酸和酒石酸)、脂肪族单羧酸(例如乙酸、丁酸、甲酸、丙酸和三氟乙酸)、氨基酸(例如天门冬氨酸和谷氨酸)、芳香族羧酸(例如苯甲酸、对氯苯甲酸、二苯基乙酸、龙胆酸、马尿酸和三苯基乙酸)、芳香族羟基酸(例如邻羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸、1-羟基萘-2-甲酸和3-羟基萘-2-甲酸)、抗坏血酸、二羧酸(例如富马酸、马来酸、草酸和琥珀酸)、葡糖醛酸、苦杏仁酸、粘酸、烟碱酸、乳清酸、帕莫酸、泛酸、磺酸(例如苯磺酸、樟脑磺酸、乙二磺酸、乙烷磺酸、羟乙基磺酸、甲烷磺酸、萘磺酸、萘-1,5-二磺酸、萘-2,6-二磺酸和对甲苯磺酸)、羟萘甲酸等。

术语“治疗有效量”意指在向有需要的患者投与时足以进行治疗的量，也就是获得所需治疗效应所需的药物量。举例来说，用于治疗高血压的治疗有效量是(例如)减少、阻抑、消除或预防高血压的症状或者治疗高血压的潜在病因所需化合物的量。在一实施例中，治疗有效量是减小血压所需的药物量或维持正常血压所需的药物量。另一方面，术语“有效量”意指足以获得所需结果的量，所述所需结果可能不一定为治疗结果。举例来说，在研究包括NEP酶的***时，“有效量”可为抑制所述酶所需的量。

本文所用的术语“治疗(treating或treatment)”是指诸如哺乳动物(尤其为人类)等患者的疾病或医学病状(例如高血压)的治疗，其包含下列各项中的一或多者：(a)预防发生所述疾病或医学病状，也就是预防所述疾病或医学病状复发或预防性治疗易患所述疾病或医学病状的患者；(b)改善所述疾病或医学病状，也就是消除患者的所述疾病或医学病状或使其消退；(c)阻抑所述疾病或医学病状，也就是减缓或阻止患者的所述疾病或医学病状的发展；或(d)缓解患者的所述疾病或医学病状的症状。举例来说，术语“治疗高血压”将包含防止高血压发生、改善高血压、阻抑高血压和减轻高血压的症状(例如降低血压)。术语“个体”或“患者”打算包含那些需要治疗或疾病预防或当前为了特定疾病或医学病状的疾病预防或治疗正在进行治疗的哺乳动物(例如人类)，以及在分析中评估或使用结晶化合物的测试个体(例如动物模型)。

本文所用的所有其它术语都打算具有其所属领域技术人员所理解的一般含义。

一般合成程序

本发明化合物1和其结晶非溶剂化形式可从易于获得的起始材料来合成，如下文和实例中所描述。应了解，尽管给出了典型或优选工艺条件(也就是反应温度、时间、反应物的摩尔比、溶剂、压力等)，但除非另外陈述，否则还可使用其它工艺条件。应了解，尽管给出了具体工艺条件(也就是结晶温度、时间、反应物的摩尔比、溶剂、压力等)，但除非另外描述，否则还可使用其它工艺条件。在一些情况下，在室温下实施反应或结晶且不进行实际温度测量。应理解，室温意指在通常与实验室环境中的环境温度有关的范围内的温度，并且通常在约15℃到约30℃范围内(例如约20℃到约25℃)。在其它情况下，在室温下实施反应或结晶且实际测量并记录温度。

在本发明方法中所描述的任何摩尔比可易于通过所属领域技术人员可获知的各种方法来测定。举例来说，可易于通过¹H NMR来测定所述摩尔比。另一选择为，可使用元素分析和HPLC方法来测定摩尔比。

在一实施例中，本发明涉及(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基恶唑-2-羰基)氨基]戊酸(1)或其药学上可接受的盐。

在另一实施例中，可通过使(2R,4R)-4-氨基-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯与2-甲基恶唑-2-甲酸进行偶合以得到化合物1来制备化合物1。

在另一实施例中，可通过以下方式来制备化合物1：(a)在N,N-二甲基甲酰胺(DMF)中组合2-甲基恶唑-2-甲酸和六氟磷酸N,N,N’,N’-四甲基-O-(7-氮杂苯并***-1-基)脲鎓(HATU)并在室温下搅拌；(b)添加(2R,4R)-4-氨基-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯和N,N-二异丙基乙胺并在室温下搅拌；(c)分离且然后将所得固体溶于无水乙醇和无水四氢呋喃中；(d)添加氢氧化锂水溶液；和(e)分离所得固体以得到化合物1。还可通过色谱纯化先前步骤(c)和(e)中的所得固体。

通常在适宜惰性稀释剂中来制备结晶型，惰性稀释剂的实例包含但不限于丙酮、乙腈、乙酸乙酯、甲基乙基酮、甲醇、乙醇、异丙醇、异丁醇、二氯甲烷、甲基叔丁基醚、环戊基甲醚、己烷等和其混合物且任选地含有水。惰性稀释剂混合物(还称为溶剂***)包含丙酮与水、乙腈与水、乙醇与乙酸乙酯、乙酸乙酯与己烷和低碳数醇(C_1-6烷基-OH)与水(例如甲醇与水和异丙醇与水)。尤其适宜的溶剂***包含乙酸乙酯和己烷。在结晶完成后，可通过诸如沉淀、过滤、浓缩、离心、在真空中干燥等任一常规方式从反应混合物分离结晶化合物。

在一实施例中，本发明涉及(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基恶唑-2-羰基)氨基]戊酸的结晶型。在另一实施例中，结晶型是(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基恶唑-2-羰基)氨基]戊酸的非溶剂化晶体形式(1’)。

在另一实施例中，可通过以下方式来制备结晶型(1’)：(a)将(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基恶唑-2-羰基)氨基]戊酸(1)溶于乙酸乙酯和己烷中以完全溶解；和(b)分离所得固体以得到结晶型(1’)。步骤(a)通常是在室温下实施。

在另一实施例中，可通过以下方式来制备结晶型(1’)：(a)使(2R,4R)-4-氨基-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯与5-甲基恶唑-2-甲酸钠进行偶合以得到(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基恶唑-2-羰基)氨基]戊酸；(b)使用乙酸乙酯和己烷处理(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基恶唑-2-羰基)氨基]戊酸以完全溶解；和(c)分离所得固体以得到结晶型(1’)。

结晶性质

如在粉末x射线衍射(PXRD)分析领域中所熟知，PXRD图案的相对峰高度取决于与试样制备和仪器几何形状有关的许多因素，而峰位置对实验细节相对不敏感。如本文中所描述进行PXRD、差示扫描量热法(DSC)、热重分析(TGA)和动态水分吸附(DMS)评价(还称为水分吸附-解吸分析)。

在另一方面中，本发明涉及呈结晶型的(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基-恶唑-2-羰基)氨基]戊酸。在另一实施例中，结晶型是非溶剂化的(1’)且其特征在于峰位置大体上符合展示于图1中的那些的PXRD图案。图1中使用虚线的插图展示y-放大图案以突出显示具有较低强度的峰。

相对强度大于面积1％的峰列示于下表中。所述图案展示在5-35°2θ范围内的尖锐衍射峰。可使用衍射图案中的所述和其它峰来鉴别这种形式。

*2θ值报告为值±0.20。

因此，在一实施例中，结晶型1’的特征在于在8.48±0.20、14.19±0.20、17.03±0.20、21.15±0.20和25.41±0.20的2θ值处包括衍射峰的PXRD图案。

在一实施例中，结晶型1’的特征在于在7.51±0.20、8.48±0.20、14.19±0.20、17.03±0.20、17.62±0.20、17.87±0.20、20.59±0.20、21.15±0.20、21.88±0.20、24.45±0.20、24.78±0.20、25.41±0.20、25.67±0.20、27.67±0.20和28.22±0.20的2θ值处包括衍射峰的PXRD图案。

在另一实施例中，结晶型1’的特征进一步在于在选自16.09±0.20、18.70±0.20、19.21±0.20、19.40±0.20、21.64±0.20、22.25±0.20、26.43±0.20、28.55±0.20、30.73±0.20、31.10±0.20、32.64±0.20、33.14±0.20和34.46±0.20的2θ值处具有一或多个其它衍射峰；且在又一实施例中，结晶化合物的特征进一步在于具有三个或更多个所述其它衍射峰。

在一实施例中，结晶型1’的特征在于大体上符合图2中所展示的DSC热分析图或差示扫描量热法迹线。结晶型1’的特征在于在10℃/分钟的加热速率下记录的差示扫描量热法迹线，其在介于约165℃与169℃之间的温度下展示最大吸热热流。DSC热分析图或差示扫描量热法迹线图解说明熔融吸热，其在约167.1℃具有峰，于165.2℃处开始，并且具有相当于114J/g的吸热曲线下面积。化合物的分解与熔融一致且并未确定114J/g对于熔融焓的贡献。

在一实施例中，结晶型1’的特征在于图3中的TGA特征图。所述特征图展示直到约150℃并无质量损失；结晶化合物在熔融之后分解，如通过在大约159℃处开始出现的显著重量损失所看到。

在一实施例中，结晶型1’的特征在于图4中的DMS等温线。所述形式是非吸湿性固体。在暴露于5-70％相对湿度时，观察到的总水分增加小于0.025重量％。在暴露于5-90％相对湿度时，总水分增加小于0.235重量％。发现在两个连续吸附-解吸循环之间并无显著滞后。在吸附-解吸循环之后所获得的固体展示与起始材料相同的PXRD图案，从而指示在所述实验之后形式并无变化。

结晶型1’的特征可在于图5中的PLM图像，其展示所述形式为结晶、双折射且具有细针到细条型颗粒。

效用

个体中的药物行为的活体外到活体内外推持续改良(例如参见千叶(Chiba)等人，AAPS期刊(AAPS J.),2009年6月；11(2):262-276)。在本发明中，评价活体外人类肾胰岛素残基溶酶抑制剂活性(分析1)以测定化合物1的肾胰岛素残基溶酶抑制活性。符合pK_i≥9.0的阈值。然而，另外进行其它活体内实验以更精确地预测化合物1在个体中的行为。

就活体内行为来说，存在若干可用于评估是否将足够量的药物递送到血浆以实现所需治疗益处的性质，例如所测试所有物种中的低血浆清除率、高口服生物利用度、环单磷酸鸟苷(cGMP)反应的有益强化和用于那些具有受损肾功能的个体的低肾清除率。

对于本发明来说，在大鼠和狗物种中实施口服和静脉内药物代谢动力学研究以测定化合物1与其它肾胰岛素残基溶酶抑制剂相比的口服生物利用度(分析2)。此分析还用于测定所述化合物的血浆清除率；据信，在并未鉴别所涉及的个别消除过程下，低清除率可预测化合物预计保留于循环中的时间(也就是其活体内稳定性和持久性)。另外，对猴物种中的口服生物利用度和血浆清除率实施分析(分析4)。

在大鼠中实施药物代谢动力学/药效学研究以测定使用化合物1获得的肾胰岛素残基溶酶抑制剂与其它肾胰岛素残基溶酶抑制剂相比的含量(分析3)。在所述分析中，测量环单磷酸鸟苷(cGMP)的含量。cGMP是利钠肽受体结合的下游效应分子且由此用作利钠肽活性的有效活体内生物标记。与安慰剂相比，在向动物投与肾胰岛素残基溶酶抑制剂时，cGMP含量有所增加。本发明的一实施例涉及增加患有高血压、心脏衰竭或肾病的个体中的心房利钠肽(ANP)或cGMP基础含量的方法，其包括向个体投与治疗有效量的化合物1或其结晶型。在个体中的尿液或血浆或二者中测量ANP和cGMP的含量。在另一实施例中，在投与治疗有效量的化合物1或其结晶型时，个体中的ANP或cGMP的含量在24小时时段内升高至少≥1.1倍、≥1.2倍、≥1.3倍、≥1.4倍、≥1.5倍、≥2倍、≥3倍、≥4倍或≥5倍。

化合物1抑制NEP酶，并且由此预计可用于治疗和/或预防对NEP抑制具有反应的医学病状。因此，预计可通过投与治疗有效量的化合物1来治疗患有通过抑制NEP酶或通过增加其肽底物的含量来治疗的疾病或病症的患者。举例来说，通过抑制NEP，预计化合物1会强化由NEP代谢的内源性肽(例如利钠肽、铃蟾肽、缓激肽、降钙素、内皮素、脑啡肽、神经降压肽、P物质和血管活性肠肽)的生物效应。因此，预计这种化合物具有其它生理学作用，例如对肾、中枢神经、生殖***和胃肠道***的作用。

通过各种消除过程(其通常分类为分泌和生物转变)将药物从个体身体去除。分泌涉及主要通过肾(renal、kidney)到膀胱到尿液路径去除完整非挥发性药物，而其它分泌路径包含胆汁(肝)、汗液、唾液、乳液(通过哺乳)或其它体液。挥发性药物(例如醇和气态麻醉剂)是通过肺***到呼出气中。另一方面，生物转变或药物代谢涉及以化学方式在身体中转化成代谢物的药物且通常是酶过程。例外是在药物以化学方式发生非酶变化时，例如酯水解。涉及药物生物转变的酶主要位于肝中。其它组织(例如肾、肺、小肠和皮肤)还含有代谢酶。

还可使用药物代谢动力学研究来探究个体中的消除路径，例如通过随时间变化***尿液中的所投与药物来进行肾清除。实施化合物1在大鼠、狗和猴物种中的肾***以评价作为消除路径的肾***(分析5)。所述消除路径对于肾功能受损且需要通过肾***最小程度地清除的疗法的个体较为重要。在一实施例中，在24小时内，化合物1或其结晶型在个体中的肾***大约≤15％、≤10％、≤5％、≤3％、≤2％、≤1％或≤0.5％的所投与剂量。

如下文的分析部分中所描述，在活体外NEP酶分析和多个动物物种中的血浆清除率、口服生物利用度和肾***的活体内测定中，包含化合物1以及具有类似化学结构的对比化合物。令人惊讶的是，观察到结果的显著差异。尽管个别对比化合物在一或多种分析中展现类似于化合物1的那些性质的性质，但仅化合物1同时展现人类肾胰岛素残基溶酶的高抑制活性、高口服生物利用度、低血浆清除率、增加的cGMP强化和低肾***，此预计特别可用于治疗疾病。

心血管疾病

通过强化血管作用肽(例如利钠肽和缓激肽)的效应，预计化合物1可用于治疗和/或预防诸如心血管疾病等医学病状。例如参见罗克斯(Roques)等人(1993)，药理学研究(Pharmacol.Rev.)，45:87-146和邓普西(Dempsey)等人(2009)，美国病理学期刊(Amer.J.of Pathology)，174(3):782-796。尤其关注的心血管疾病包含高血压和心脏衰竭。高血压包含(以说明的方式而非限制)：原发性高血压，其还称为本质性高血压或特发性高血压；继发性高血压；具有伴随肾病的高血压；具有或不具有伴随肾病的严重高血压；肺高血压，包含肺动脉高血压；和顽固性高血压。心脏衰竭包含(以说明的方式而非限制)：郁血性心脏衰竭；急性心脏衰竭；慢性心脏衰竭，例如左心室射血分数减少(还称为收缩性心脏衰竭)或左心室射血分数保留(还称为舒张性心脏衰竭)；以及急性和慢性失代偿性心脏衰竭。因此，本发明的一实施例涉及治疗高血压、尤其原发性高血压或肺动脉高血压的方法，其包括向患者投与治疗有效量的化合物1。

为治疗原发性高血压，治疗有效量通常是足以降低患者血压的量。此将包含轻度到中等高血压和严重高血压。在用于治疗高血压时，化合物1可与其它治疗剂组合投与：例如，醛固酮拮抗剂、醛固酮合酶抑制剂、血管收缩肽转化酶抑制剂和双重作用血管收缩肽转化酶/肾胰岛素残基溶酶抑制剂、血管收缩肽转化酶2(ACE2)活化剂和刺激剂、血管收缩肽-II疫苗、抗糖尿病剂、抗脂质剂、抗血栓剂、AT₁受体拮抗剂和双重作用AT₁受体拮抗剂/肾胰岛素残基溶酶抑制剂、β₁-肾上腺素能受体拮抗剂、双重作用β-肾上腺素能受体拮抗剂/α₁-受体拮抗剂、钙通道阻断剂、利尿剂、内皮素受体拮抗剂、内皮素转化酶抑制剂、肾胰岛素残基溶酶抑制剂、利钠肽和其类似物、利钠肽清除受体拮抗剂、一氧化氮供体、非类固醇抗发炎剂、磷酸二酯酶抑制剂(具体来说是PDE-V抑制剂)、***素受体激动剂、肾素抑制剂、可溶性鸟苷酸环化酶刺激剂和活化剂和其组合。在本发明的一特定实施例中，将本发明化合物与AT₁受体拮抗剂、钙通道阻断剂、利尿剂或其组合进行组合，并且用于治疗原发性高血压。在本发明的另一特定实施例中，将本发明化合物与AT₁受体拮抗剂进行组合，并且用于治疗具有伴随肾病的高血压。在用于治疗顽固性高血压时，化合物可与其它治疗剂(例如醛固酮合酶抑制剂)组合投与。

为治疗肺动脉高血压，治疗有效量通常是足以降低肺血管抗性的量。疗法的其它目标是改良患者的运动能力。举例来说，在临床设置中，治疗有效量可为改良患者自由行走6分钟时段(涵盖大约20-40米的距离)的能力的量。在用于治疗肺动脉高血压时，化合物1可与其它治疗剂组合投与，例如，α-肾上腺素能受体拮抗剂、β₁-肾上腺素能受体拮抗剂、β₂-肾上腺素能受体激动剂、血管收缩肽转化酶抑制剂、抗凝剂、钙通道阻断剂、利尿剂、内皮素受体拮抗剂、PDE-V抑制剂、***素类似物、选择性血清素再摄取抑制剂和其组合。在本发明的一特定实施例中，将化合物1与PDE-V抑制剂或选择性血清素再摄取抑制剂进行组合且用于治疗肺动脉高血压。

本发明的另一实施例涉及治疗心脏衰竭、尤其郁血性心脏衰竭(包含收缩性和舒张性郁血性心脏衰竭)的方法，其包括向患者投与治疗有效量的化合物1。通常，治疗有效量是足以降低血压和/或改良肾功能的量。在临床设置中，治疗有效量可为足以改良心脏血液动力学(例如减小楔压、右心房压、充盈压和血管抗性)的量。在一实施例中，化合物是作为静脉内剂型投与。在用于治疗心脏衰竭时，化合物1可与其它治疗剂组合投与：例如，腺苷受体拮抗剂、晚期糖基化终产物清除剂、醛固酮拮抗剂、AT₁受体拮抗剂、β₁-肾上腺素能受体拮抗剂、双重作用β-肾上腺素能受体拮抗剂/α₁-受体拮抗剂、凝乳酶抑制剂、地高辛(digoxin)、利尿剂、内皮素转化酶(ECE)抑制剂、内皮素受体拮抗剂、利钠肽和其类似物、利钠肽清除受体拮抗剂、一氧化氮供体、***素类似物、PDE-V抑制剂、可溶性鸟苷酸环化酶活化剂和刺激剂和加压素受体拮抗剂。在本发明的一特定实施例中，将化合物1与醛固酮拮抗剂、β₁-肾上腺素能受体拮抗剂、AT₁受体拮抗剂或利尿剂进行组合，并且用于治疗郁血性心脏衰竭。

腹泻

作为NEP抑制剂，预计化合物1会抑制内源性脑啡肽的降解且由此所述化合物还可用于治疗腹泻(包含感染性和分泌性/水样腹泻)。例如参见鲍默(Baumer)等人(1992)肠(Gut)33:753-758；法尔新(Farthing)(2006)消化疾病(Digestive Diseases)24:47-58；和马克斯-科利亚多(-Collado)(1987)欧洲药理学杂志(Eur.J.Pharmacol.)144(2):125-132。在用于治疗腹泻时，化合物1可与一或多种其它抗腹泻剂进行组合。

肾病

通过强化血管作用肽(例如利钠肽和缓激肽)的效应，预计化合物1会增强肾功能(参见陈(Chen)等人(1999)循环(Circulation 100:2443-2448)；利普金(Lipkin)等人(1997)国际肾脏(Kidney Int.)52:792-801；和杜赛奥里(Dussaule)等人(1993)临床科学(Clin.Sci.)84:31-39)且可用于治疗和/或预防肾受损个体的肾病。尤其关注的肾病包含糖尿病性肾病变、慢性肾病、蛋白尿和尤其急性肾损伤(例如由心血管手术、化学疗法或在医学成像中使用对比染料引起)或急性肾衰竭(参见沙可夫斯基(Sharkovska)等人(2011)临床实验(Clin.Lab.)57:507-515和内瓦兹(Newaz)等人(2010)肾衰竭(Renal Failure)Failure 32:384-390)。

患有慢性肾病(CKD)的肾受损个体可根据美国国家肾脏基因会肾病预后质量行动(National Kidney Foundation Kidney Disease Outcomes Quality Initiative，NKFKDOQI)导则进行分类。在确立慢性肾病后(也就是肾损害或肾小球滤过率(GFR)<60mL/min/1.73m²≥3个月)，可根据KDOQI CKD分类来分配疾病阶段。所述阶段包含阶段1(具有正常或增加的GFR的肾损害)：GFR≥90；阶段2(具有轻度降低的GFR的肾损害)：GFR60-89；阶段3(中等降低的GFR)：GFR 30-59；阶段4(严重降低的GFR)：GFR 15-29；和阶段5(肾衰竭):GFR<15(或透析)。GFR是以mL/min/1.73m²的单位来定义。

一实施例包含治疗肾受损个体的方法，其包括投与治疗有效量的化合物1或其结晶型、具体来说结晶型1’。此方法进一步包含治疗患有高血压或心脏衰竭的肾受损个体。在用于治疗肾病时，化合物1或其结晶型、具体来说结晶型1’可与其它治疗剂(例如血管收缩肽转化酶抑制剂、AT₁受体拮抗剂和利尿剂)组合投与。

另一实施例包含治疗患有所估算肾小球滤过率(eGFR)介于60mL/min/1.73m²与15mL/min/1.73m²之间的慢性肾病的肾受损个体的方法，其包括向患者投与治疗有效量的化合物1或其结晶型、具体来说结晶型1’。另一实施例包含治疗患有所估算肾小球滤过率(eGFR)≥90mL/min/1.73m²(阶段1)或eGFR<15mL/min/1.73m²(阶段5)的慢性肾病的肾受损个体的方法，其包括向患者投与治疗有效量的化合物1或其结晶型、具体来说结晶型1’。出于本发明目的，严重肾病可分类为eGFR<30mL/min/1.73m²。在另一实施例中，包含使用化合物1或其结晶型、具体来说结晶型1’治疗患有分类为阶段1、阶段2、阶段3、阶段4、阶段5或eGFR范围涵盖所述阶段中的一或多者的慢性肾病的肾受损个体的方法。

预防性疗法

通过强化利钠肽的效应，因利钠肽的抗肥大和抗纤维变性效应(参见波特(Potter)等人(2009)实验药理学手册(Handbook of Experimental Pharmacology)191:341-366)，预计化合物1还可用于预防性疗法中，例如用于预防心肌梗塞之后的心功能不全的进展、预防血管成形术之后的动脉再狭窄、预防血管操作之后的血管壁增厚、预防动脉粥样硬化和预防糖尿病性血管病。

青光眼

通过强化利钠肽的效应，化合物1预计可用于治疗青光眼。例如参见戴斯特霍斯特(Diestelhorst)等人(1989)国际眼科学(International Ophthalmology)12:99-101。在用于治疗青光眼时，化合物1可与一或多种其它抗青光眼剂进行组合。

疼痛缓解

作为NEP抑制剂，预计化合物1会抑制内源性脑啡肽的降解且由此所述化合物还可用作镇痛剂。例如参见罗克斯等人(1980)自然(Nature)288:286-288和谭纳瓦拉(Thanawala)等人(2008)当今药靶(Current Drug Targets)9:887-894。在用于治疗疼痛时，化合物1可与一或多种其它镇痛药(例如氨基肽酶N或二肽基肽酶III抑制剂、非类固醇抗发炎剂、单胺再摄取抑制剂、肌肉松弛剂、NMDA受体拮抗剂、类***受体激动剂、5-HT_1D血清素受体激动剂和三环抗抑郁剂)进行组合。

其它效用

因NEP抑制性质，预计化合物1还可用作镇咳剂且可用于治疗与肝硬化有关的门静脉高血压(参见桑索(Sansoe)等人(2005)肝病学杂志(J.Hepatol.)43:791-798)、癌症(参见维斯利(Vesely)(2005)研究医学杂志(J.Investigative Med.)53:360-365)、抑郁症(参见诺布尔(Noble)等人(2007)关于治疗靶的专家意见(Exp.Opin.Ther.Targets)11:145-159)、月经病症、早产、子痫前症、子宫内膜异位症、生殖性病症(例如男性和女性不育、多囊性卵巢综合征、植入失败)和男性和女性性功能障碍(包含男性***功能障碍和女性性兴奋障碍)。更特定来说，预计化合物1可用于治疗女性性功能障碍(参见普莱德(Pryde)等人(2006)医药化学杂志(J.Med.Chem.)49:4409-4424)，所述疾病通常定义为女性患者难以或不能在性表现中获得满足。此涵盖各种各样的女性性机能障碍，包含(以说明的方式而非限制)机能减退的性要障碍、性唤起障碍、情要障碍和***疼痛障碍。在用于治疗所述病症、尤其女性性功能障碍时，本发明化合物可与一或多种下列二级药剂进行组合：PDE-V抑制剂、多巴胺激动剂、***受体激动剂和/或拮抗剂、雄激素和***。因NEP抑制性质，预计化合物1还具有抗发炎性质，并且预计具有所述效用，尤其在与他汀类药物组合使用时。

最新研究表明，NEP在调控胰岛素缺陷糖尿病和饮食诱导性肥胖症中的神经功能中发挥一定作用。科比(Coppey)等人(2011)神经药理学(Neuropharmacology)60:259-266。因此，因NEP抑制性质，预计化合物1还可用于防卫由糖尿病或饮食诱导性肥胖症引起的神经缺损。

每一剂量投与的化合物1的量或每天投与的总量可预先确定或可基于个别患者通过考虑多个因素来确定，所述因素包含：患者病状的性质和严重程度、所治疗病状、患者的年龄、体重和总体健康状况、患者对活性剂的耐受性、投与途径、药理学因素(例如所投与化合物和任一二级药剂的活性、效能、药物代谢动力学和毒理学特征)等。对患有疾病或医学病状(例如高血压)的患者的治疗可以预定剂量或治疗医师所确定的剂量开始，并且持续用以预防、改善、阻抑或减轻所述疾病或医学病状的症状所需的时间段。通常定期监测进行所述治疗的患者以测定疗法的有效性。举例来说，在治疗高血压中，可利用血压测量来测定治疗的有效性。本文所描述的其它疾病和病状的类似指标已熟知且治疗医师可容易地得到。由医师连续监测将确保在任一给定时间投与最优选量的化合物1以及促进治疗持续时间的确定。这在还投与二级药剂时特别重要，因为二级药剂的选择、剂量和疗法持续时间可能还需要调整。以这种方式，可在疗程期间调整治疗方案和投药时间表，从而可投与展现所需有效性的最低量的活性剂，并且另外使得投与可仅持续成功治疗疾病或医学病状所需的时间长度。

化合物1还可用作可用于制备化合物1的结晶型(包含(例如)结晶型1’)的中间体。

研究工具

因化合物1拥有NEP酶抑制活性，故其还可用作研究工具来探究或研究具有NEP酶的生物***或试样，例如用以研究NEP酶或其肽底物发挥一定作用的疾病。具有NEP酶的任何适宜生物***或试样都可用于所述可在活体外或活体内实施的研究中。适用于所述研究的代表性生物***或试样包含但不限于细胞、细胞萃取物、质膜、组织试样、分离的器官、哺乳动物(例如小鼠、大鼠、天竺鼠、兔、狗、猪、人类等)等，其中哺乳动物尤其令人感兴趣。在本发明的一特定实施例中，通过投与NEP-抑制量的化合物1来抑制哺乳动物中的NEP酶活性。

在用作研究工具时，通常使包括NEP酶的生物***或试样与NEP酶抑制量的化合物1接触。在将生物***或试样暴露于化合物之后，使用常规程序和设备(例如通过在结合分析中测量受体结合或在功能分析中测量配体介导的变化)测定抑制NEP酶的效应。暴露涵盖使细胞或组织与所述化合物接触、将所述化合物投与哺乳动物(例如通过腹膜腔内、口服、静脉内或经皮下投与)等等。所述测定步骤可涉及测量反应(定量分析)或可涉及进行观察(定性分析)。测量反应涉及(例如)使用常规程序和设备测定所述化合物对生物***或试样的效应(例如酶活性分析)和在功能分析中测量酶底物或产物介导的变化。可使用分析结果来确定活性程度以及实现所需结果所需化合物的量(也就是NEP酶抑制量)。通常，测定步骤涉及测定抑制NEP酶的效应。

另外，化合物1可用作用于评估其它化学化合物的研究工具，并且由此还可用于筛选分析中以寻找(例如)具有NEP抑制活性的新化合物。以这种方式，化合物1在分析中用作标样以比较使用测试化合物和使用化合物1所获得的结果，以鉴别那些具有大致相当或更优良活性的测试化合物(如果存在)。举例来说，比较测试化合物或测试化合物组的pK_i数据与化合物1的pK_i数据以鉴别那些具有所需性质的测试化合物，例如pK_i值等于或优于本发明化合物的测试化合物。本发明的这个方面包含(作为单独实施例)产生比较数据(使用适当分析)和分析测试数据二者以鉴别出令人感兴趣的测试化合物。因此，测试化合物可在生物分析中通过包括下列步骤的方法予以评估：(a)使用测试化合物实施生物分析以提供第一分析值；(b)使用化合物1实施生物分析以提供第二分析值；其中步骤(a)是在步骤(b)之前、之后或与步骤(b)同时实施；和(c)比较步骤(a)的第一分析值与步骤(b)的第二分析值。实例性生物分析包含NEP酶抑制分析。

本发明的再一方面涉及研究包括NEP酶的生物***或试样的方法，所述方法包括：(a)使生物***或试样与化合物1接触；和(b)测定由化合物对生物***或试样引起的效应。

医药组合物和调配物

通常将化合物1以医药组合物或调配物的形式投与患者。所述医药组合物可通过任何可接受的投与途径投与患者，所述投与途径包含但不限于口服、经直肠、经***、经鼻、吸入、局部(包含经皮)、经眼睛和肠胃外投与模式。另外，化合物1可(例如)以每天多次剂量(例如每天两次、三次或四次)、单次日剂量或单次周剂量口服投与。应理解，适用于特定投与模式的任一形式的化合物1(也就是游离碱、游离酸、药学上可接受的盐、溶剂合物等)都可用于本文所论述的医药组合物中。

因此，在一实施例中，本发明涉及包括药学上可接受的载剂和化合物1的医药组合物。如果需要，那么所述组合物可含有其它治疗剂和/或调配剂。在论述组合物时，“化合物1”在本文中还可称为“活性剂”以将其与调配物中的其它组分(例如载剂)区别开。因此，应理解，术语“活性剂”包含化合物1以及其药学上可接受的盐。

本发明的医药组合物通常含有治疗有效量的化合物1。然而，所属领域技术人员将认识到，医药组合物可含有大于治疗有效量(例如在本体组合物中)或小于治疗有效量(也就是经设计用于多次投与以实现治疗有效量的个别单位剂量)的化合物。通常，所述组合物含有约0.01wt％到95wt％的活性剂(包含约0.01wt％到30wt％，例如约0.01wt％到10wt％)，其中实际量视调配物本身、投与途径、投药频率等而定。在一实施例中，适用于口服剂型的组合物可含有(例如)约5-70wt％或约10-60wt％的活性剂。

在本发明的医药组合物中可使用任一常规载剂或赋形剂。特定载剂或赋形剂或载剂或赋形剂组合的选择将取决于用于治疗特定患者的投与模式或医学病状的类型或疾病状态。就此来说，用于特定投与模式的适宜组合物的制备为制药领域技术人员所熟知。另外，用于所述组合物的载剂或赋形剂市面有售。通过进一步阐释，常规调配技术描述于雷明登：药学科学和实践(Remington:The Science and Practice of Pharmacy)，第20版，利平科特威廉姆斯与瓦特(Lippincott Williams&White)，巴尔的摩，马里兰(2000)；和H.C.安塞尔(H.C.Ansel)等人，医药剂型与药物递送***(Pharmaceutical Dosage Forms andDrug Delivery Systems)，第7版，利平科特威廉姆斯与瓦特，巴尔的摩，马里兰(1999)中。

可用作药学上可接受的载剂的材料的代表性实例包含但不限于下列物质：糖，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，例如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素(例如微晶纤维素)和其衍生物，例如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；脂肪酸盐，例如硬脂酸镁；粉状黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石粉；赋形剂，例如可可油和栓剂蜡；油，例如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇，例如丙二醇；多元醇，例如甘油、山梨醇、甘露醇和聚乙二醇；酯，例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，例如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无致热源水；等渗盐水；林格氏溶液(Ringer's solution)；乙醇；磷酸盐缓冲溶液；经压缩的推进剂气体，例如氯氟碳化合物和氢氟碳化合物；和其它用于医药组合物的无毒相容性物质。

在本发明的一实施例中，药学上可接受的载剂是硬脂酸镁。举例来说，医药组合物可包括化合物1或结晶型1’和硬脂酸镁，其中化合物1或结晶型1’对硬脂酸镁的比率为约3:1到约10:1。化合物1或结晶型1’对硬脂酸镁的其它比率包含但不限于1:1、5:1、15:1、20:1、25:1、30:1和50:1。

医药组合物通常是通过将活性剂与药学上可接受的载剂和一或多种可选成分彻底充分混合或掺和来制备。随后可使用常规程序和设备将所得均匀掺和的混合物制成片剂、胶囊、丸剂等或装填到药罐、药筒、分配器等中。

在一实施例中，医药组合物适于口服投与。适用于口服投与的组合物可呈以下形式：胶囊、片剂、丸剂、糖锭、扁囊剂、糖衣片、粉剂、颗粒剂；水性或非水性液体中的溶液或悬浮液；水包油或油包水液体乳液；酏剂或糖浆；等；其各自含有预定量的活性剂。

在打算以固体剂型(胶囊、片剂、丸剂等)口服投与时，所述组合物通常会包括活性剂和一或多种药学上可接受的载剂(例如柠檬酸钠、磷酸二钙或硬脂酸镁)。固体剂型还可包括：填充剂或增量剂，例如淀粉、微晶纤维素、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和/或硅酸；粘合剂，例如羧甲基纤维素、海藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和/或***胶；保湿剂，例如甘油；崩解剂，例如琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和/或碳酸钠；溶液阻滞剂，例如石蜡；促吸收剂，例如四级铵化合物；润湿剂，例如鲸蜡醇和/或甘油单硬脂酸酯；吸收剂，例如高岭土和/或膨润土；润滑剂，例如滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、月桂基硫酸钠和/或其混合物；着色剂；和缓冲剂。出于本发明目的，术语“药学上可接受的载剂”包含诸如以下等上文所描述的所有术语：载剂、填充剂或增量剂、粘合剂、保湿剂、溶液阻滞剂、润湿剂、吸收剂、润滑剂、着色剂和缓冲剂。

医药组合物中还可存在离型剂、润湿剂、包覆剂、甜味剂、矫味剂和芳香剂、防腐剂和抗氧化剂。用于片剂、胶囊、丸剂等的实例性包覆剂包含用于肠溶包衣的那些，例如乙酸邻苯二甲酸纤维素、聚乙酸邻苯二甲酸乙烯酯、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、甲基丙烯酸-甲基丙烯酸酯共聚物、乙酸偏苯三酸纤维素、羧甲基乙基纤维素、乙酸琥珀酸羟丙基甲基纤维素等。药学上可接受的抗氧化剂的实例包含：水溶性抗氧化剂，例如抗坏血酸、半胱氨酸盐酸盐、硫酸氢钠、偏亚硫酸钠、亚硫酸钠等；油溶性抗氧化剂，例如棕榈酸抗坏血酸酯、丁基化羟基苯甲醚、丁基化羟基甲苯、卵磷脂、没食子酸丙酯、α-生育酚等；和金属螯合剂，例如柠檬酸、乙二胺四乙酸、山梨醇、酒石酸、磷酸等。

组合物还可使用(例如)各种比例的羟丙基甲基纤维素或其它聚合物基质、脂质体和/或微球体来调配，以缓慢释放或受控释放活性剂。另外，本发明的医药组合物可含有遮光剂且可经调配以使得可任选地以延迟方式仅(或优先地)在胃肠道中的某一部分释放活性剂。可使用的包埋组合物的实例包含聚合物质和蜡。活性剂还可呈任选地具有一或多种上述赋形剂的微胶囊形式。

本发明的一实施例包含包括化合物1或结晶型1’的口服剂型，其呈胶囊、片剂、液体或悬浮液形式。本发明的另一实施例涉及口服剂型，其中化合物1或结晶型1’在个体中的释放是立即、受控或延迟释放。如果使用胶囊作为口服剂型，那么另一实施例包含包括明胶、多糖或合成聚合物的胶囊。在特定实施例中，胶囊包括羟丙基甲基纤维素。

本发明的适宜胶囊材料是选自明胶、纤维素衍生物、淀粉、淀粉衍生物、几丁聚糖和合成塑料。如果使用明胶作为胶囊材料，那么其可与选自聚乙二醇(PEG)、甘油、山梨醇、聚丙二醇、PEO-PPO嵌段共聚物和其它多元醇和聚醚的其它添加剂混合使用。在使用纤维素衍生物作为胶囊材料时，羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、甲基纤维素、羟甲基纤维素和羟乙基纤维素是优选聚合物。如果使用合成塑料作为胶囊材料，那么聚乙烯、聚碳酸酯、聚酯、聚丙烯和聚对苯二甲酸乙二酯是优选材料。特别优选者是聚乙烯、聚碳酸酯或聚对苯二甲酸乙二酯。

适用于口服投与的液体剂型包含(通过阐释方式)药学上可接受的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。液体剂型通常包括活性剂和惰性稀释剂，例如水或其它溶剂、增溶剂和乳化剂，例如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苄醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油(例如棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃醇、聚乙二醇和山梨醇酐脂肪酸酯和其混合物。悬浮液可含有悬浮剂，例如乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和山梨醇酐酯、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂和黄蓍胶和其混合物。

在打算用于口服投与时，本发明的医药组合物可以单位剂型进行包装。术语“单位剂型”是指适用于给予患者的物理离散单位，也就是，每一单元含有经计算可单独或与一或多种额外单元组合产生所需治疗效应的预定量的活性剂。举例来说，所述单位剂型可为胶囊、片剂、丸剂等。

在另一实施例中，本发明组合物适于吸入投与且通常将呈气溶胶或粉剂形式。所述组合物通常使用诸如雾化器、干粉吸入器或定量吸入器等熟知递送装置来投与。雾化装置产生高速空气流，其使组合物以雾气形式喷雾输送到患者的呼吸道中。实例性雾化调配物所包括活性剂溶于载剂中以形成溶液，或经微粉化并与载剂组合以形成具有可吸入大小的微粉化颗粒悬浮液。干粉吸入器以自由流动性粉剂形式投与活性剂，所述自由流动粉剂在吸气期间分散于患者的气流中。实例性干粉调配物包括与诸如乳糖、淀粉、甘露醇、右旋糖、聚乳酸、聚丙交酯-共-乙交酯和其组合等赋形剂干燥掺和的活性剂。定量吸入器使用压缩推进气体排放经测量量的活性剂。实例性定量调配物包括活性剂于诸如氟氯化碳或氢氟烷等液化推进剂中的溶液或悬浮液。所述调配物的可选组分包含共溶剂(例如乙醇或戊烷)和表面活性剂(例如山梨醇酐三油酸酯、油酸、卵磷脂、甘油和月桂基硫酸钠)。所述组合物通常是通过将冷冻或加压氢氟烷添加到含有活性剂、乙醇(如果存在)和表面活性剂(如果存在)的适宜容器中来制备。将活性剂微粉化并随后与推进剂组合以制备悬浮液。另一选择为，悬浮液调配物可通过在活性剂的微粉化颗粒上喷雾干燥表面活性剂涂层来制备。随后将调配物装载到气溶胶药罐中，所述药罐构成吸入器的一部分。

化合物1和其组合物还可肠胃外投与(例如通过皮下、静脉内、肌内或腹膜腔内注射)。在所述投与中，以无菌溶液、悬浮液或乳液形式提供活性剂。用于制备所述调配物的实例性溶剂包含水、盐水、电解质、低分子量醇(例如丙二醇和聚乙二醇)、油、氨基酸、明胶、糖、脂肪酸酯(例如油酸乙酯)等。肠胃外调配物还可含有一或多种抗氧化剂、增溶剂、稳定剂、防腐剂、润湿剂、乳化剂和分散剂。表面活性剂、额外稳定剂或pH-调节剂(酸、碱或缓冲剂)和抗氧化剂特别可用于稳定所述调配物，例如最小化或避免可存在于化合物中的酯和酰胺链接的水解。可通过使用无菌可注射介质、灭菌剂、过滤、辐照或加热来使这些调配物无菌。

代表性生理学可接受的水性载剂包含(例如)无菌注射用水，USP；右旋糖注射液，USP(例如2.5％、5.0％、10％、20％右旋糖，包含5％右旋糖注射液(D5/W))；右旋糖和氯化钠注射液，USP(例如2.5％到10％右旋糖和0.12％(19mEq钠)到0.9％(154mEq钠)氯化钠)；甘露醇注射液，USP(例如5％、10％、15％、20％和25％甘露醇)；林格氏注射液，USP(例如147mEq钠、4mEq钾、4.5mEq钙和156mEq氯化物/公升)；乳酸化林格氏注射液，USP(例如2.7mEq钙、4mEq钾、130mEq钠和28mEq乳酸盐/公升)；氯化钠注射液，USP(例如0.9％氯化钠)等。

在向患者投与时，通常将化合物1稀释于约0.5mL到约10mL水性载剂/mg化合物1(例如约0.6mL/mg到约8mL/mg)中。

在一特定实施例中，所述肠胃外调配物包括水性环糊精溶液作为药学上可接受的载剂。适宜环糊精包含含有六个或更多个通过链接在1,4位连接的α-D-吡喃葡萄糖单元的环状分子，如在淀粉酶、β-环糊精或环庚直链淀粉中。实例性环糊精包含环糊精衍生物，例如羟丙基和磺丁基醚环糊精，例如羟丙基-β-环糊精和磺丁基醚β-环糊精。用于所述调配物的实例性缓冲剂包含基于羧酸的缓冲剂，例如柠檬酸盐、乳酸盐和马来酸盐缓冲溶液。在本发明的一实施例中，静脉内剂型包括缓冲溶液中的化合物1或结晶型1’。

在一实施例中，化合物1或其医药组合物是冻干粉末。通常，冻干粉末无菌且包装于全密封小瓶或安瓿(ampoule)或类似容器中。

化合物1还可使用已知经皮递送***和赋形剂经皮投与。举例来说，可将化合物1与渗透促进剂(例如丙二醇、聚乙二醇单月桂酸酯、氮杂环烷-2-酮等)混合并纳入到贴剂或类似递送***中。如果需要，那么可在所述经皮组合物中使用包含胶凝剂、乳化剂和缓冲剂在内的额外赋形剂。

二级药剂

化合物1可用作疾病的唯一治疗剂或可与一或多种其它治疗剂进行组合以获得所需治疗效应。因此，在一实施例中，本发明的医药组合物含有与化合物1共投与的其它药物。举例来说，组合物可进一步包括一或多种药物(还称为“二级药剂”)。所述治疗剂在业内已众所周知，并且包含腺苷受体拮抗剂、α-肾上腺素能受体拮抗剂、β₁-肾上腺素能受体拮抗剂、β₂-肾上腺素能受体激动剂、双重作用β-肾上腺素能受体拮抗剂/α₁-受体拮抗剂、晚期糖基化终产物清除剂、醛固酮拮抗剂、醛固酮合酶抑制剂、氨基肽酶N抑制剂、雄激素、血管收缩肽转化酶抑制剂和双重作用血管收缩肽转化酶/肾胰岛素残基溶酶抑制剂、血管收缩肽转化酶2活化剂和刺激剂、血管收缩肽-II疫苗、抗凝剂、抗糖尿病剂、抗腹泻剂、抗青光眼剂、抗脂质剂、镇痛剂、抗血栓剂、AT₁受体拮抗剂和双重作用AT₁受体拮抗剂/肾胰岛素残基溶酶抑制剂和多功能血管收缩肽受体阻断剂、缓激肽受体拮抗剂、钙通道阻断剂、凝乳酶抑制剂、地高辛、利尿剂、多巴胺激动剂、内皮素转化酶抑制剂、内皮素受体拮抗剂、HMG-CoA还原酶抑制剂、***、***受体激动剂和/或拮抗剂、单胺再摄取抑制剂、肌肉松弛剂、利钠肽和其类似物、利钠肽清除受体拮抗剂、肾胰岛素残基溶酶抑制剂、一氧化氮供体、非类固醇抗发炎剂、N-甲基d-天冬氨酸盐受体拮抗剂、类***受体激动剂、磷酸二酯酶抑制剂、***素类似物、***素受体激动剂、肾素抑制剂、选择性血清素再摄取抑制剂、钠通道阻断剂、可溶性鸟苷酸环化酶刺激剂和活化剂、三环抗抑郁剂、加压素受体拮抗剂和其组合。所述药剂的具体实例详述于本文中。

具体实施例包含包括化合物1或其结晶型和AT₁受体拮抗剂、血管收缩肽转化酶抑制剂、磷酸二酯酶(PDE)抑制剂、肾素抑制剂、利尿剂或其组合和任选地一或多种药学上可接受的载剂的医药组合物。

因此，在本发明的又一方面中，医药组合物包括化合物1、第二活性剂和药学上可接受的载剂。第三、第四等活性剂还可纳入所述组合物中。在组合疗法中，所投与化合物1的量以及二级药剂的量可能小于单一疗法中通常投与的量。

化合物1可与第二活性剂物理混合以形成含有两种药剂的组合物；或者各药剂可存在于分开且不同的组合物中，所述组合物同时或在不同的时间投与患者。举例来说，可使用常规程序和设备将化合物1与第二活性剂组合以形成包括化合物1和第二活性剂的活性剂组合。另外，治疗剂可与药学上可接受的载剂组合以形成包括化合物1、第二活性剂和药学上可接受的载剂的医药组合物。在这个实施例中，通常将组合物的各组分混合或掺和以产生物理混合物。然后使用本文所描述的任一途径以治疗有效量投与物理混合物。

另一选择为，活性剂在投与患者之前可保持分开且不同。在这个实施例中，各药剂在投与之前并未以物理方式混合在一起，而是同时或在不同时间作为分开组合物投与。所述组合物可分开包装或可一起包装在试剂盒中。在以分开时间投与时，二级药剂通常会在投与化合物1之后不足24小时时投与(在从投与化合物的同时到在投药后约24小时之间的任意时间)。这还可称为依序投与。因此，可使用两种片剂—一种片剂对应一种活性剂—来同时或依序口服投与化合物1与另一活性剂，其中依序可意指在投与化合物1之后立即或在一定预定时间后(例如1小时后或3小时后)投与。还预计，二级药剂可在投与化合物1之后超过24小时投与。另一选择为，所述组合可通过不同投与途径投与，也就是一种药剂口服投与且另一药剂通过吸入投与。

在一实施例中，试剂盒以足以进行本发明方法的量包括含有化合物1的第一剂型和至少一种含有一或多种本文所陈述二级药剂的额外剂型。第一剂型和第二剂型(或第三剂型等)共同包括治疗有效量的活性剂以供治疗或预防患者的疾病或医学病状。

在包含二级药剂时，其以治疗有效量存在以使得其在与本发明化合物1共投与时通常以产生治疗有益效应的量投与。第二药剂可呈药学上可接受的盐、溶剂合物、光学纯立体异构体等形式。所述二级药剂还可呈前药形式，例如具有经酯化羧酸基团的化合物。因此，下文所列示二级药剂打算包含所有所述形式，并且市面有售，或可使用常规程序和试剂来制备。

在一实施例中，将化合物1与腺苷受体拮抗剂组合投与，腺苷受体拮抗剂的实例包含那昔茶碱(naxifylline)、罗咯茶碱(rolofylline)、SLV-320、茶碱和托那潘菲林(tonapofylline)。

在一实施例中，将化合物1与α-肾上腺素能受体拮抗剂(其实例包含多沙唑嗪(doxazosin)、哌唑嗪(prazosin)、坦洛新(tamsulosin)和特拉唑嗪(terazosin))组合投与。

化合物1还可与β₁肾上腺素能受体拮抗剂(“β₁阻断剂”)组合投与，β₁阻断剂的实例包含醋丁洛尔(acebutolol)、阿普洛尔(alprenolol)、氨磺洛尔(amosulalol)、阿罗洛尔(arotinolol)、阿替洛尔(atenolol)、苯呋洛尔(befunolol)、倍他洛尔(betaxolol)、贝凡洛尔(bevantolol)、比索洛尔(bisoprolol)、波吲洛尔(bopindolol)、布新洛尔(bucindolol)、布库洛尔(bucumolol)、布非洛尔(bufetolol)、丁呋洛尔(bufuralol)、布尼洛尔(bunitrolol)、布拉洛尔(bupranolol)、布利定(bubridine)、丁非洛尔(butofilolol)、卡拉洛尔(carazolol)、卡替洛尔(carteolol)、卡维地洛(carvedilol)、塞利洛尔(celiprolol)、塞他洛尔(cetamolol)、氯拉洛尔(cloranolol)、地来洛尔(dilevalol)、依泮洛尔(epanolol)、艾司洛尔(esmolol)、茚诺洛尔(indenolol)、拉贝洛尔(labetolol)、左布诺洛尔(levobunolol)、甲吲洛尔(mepindolol)、美替洛尔(metipranolol)、美托洛尔(metoprolol)(例如琥珀酸美托洛尔(metoprolol succinate)和酒石酸美托洛尔(metoprolol tartrate))、甲氧苯心安(moprolol)、纳多洛尔(nadolol)、萘肟洛尔(nadoxolol)、奈必洛尔(nebivalol)、尼普地洛(nipradilol)、氧烯洛尔(oxprenolol)、喷布洛尔(penbutolol)、喷布洛尔(penbutolol)、吲哚洛尔(pindolol)、普拉洛尔(practolol)、丙萘洛尔(pronethalol)、***(propranolol)、索他洛尔(sotalol)、硫氧洛尔(sufinalol)、他林洛尔(talinolol)、特他洛尔(tertatolol)、替利洛尔(tilisolol)、噻吗洛尔(timolol)、托利洛尔(toliprolol)、希苯洛尔(xibenolol)和其组合。在一特定实施例中，β₁拮抗剂是选自阿替洛尔、比索洛尔、美托洛尔、***、索他洛尔和其组合。通常，以足以提供约2-900mg/剂量的量投与β₁阻断剂。

在一实施例中，化合物1与β₂-肾上腺素能受体激动剂组合投与，β₂-肾上腺素能受体激动剂的实例包含沙丁胺醇(albuterol)、比托特罗(bitolterol)、非诺特罗(fenoterol)、福莫特罗(formoterol)、茚达特罗(indacaterol)、异他林(isoetharine)、左旋沙丁胺醇(levalbuterol)、奥西那林(metaproterenol)、吡布特罗(pirbuterol)、舒喘灵(salbutamol)、沙甲胺醇(salmefamol)、沙美特罗(salmeterol)、特布他林(terbutaline)、维兰特罗(vilanterol)等。通常，以足以提供约0.05-500μg/剂量的量投与β₂-肾上腺素能受体激动剂。

在一实施例中，化合物1与晚期糖基化终产物(AGE)清除剂(其实例包含阿拉瑞姆(alagebrium)(或ALT-711)和TRC4149)组合投与。

在另一实施例中，化合物1与醛固酮拮抗剂(其实例包含依普利酮(eplerenone)、螺内酯(spironolactone)和其组合)组合投与。通常，以足以提供约5-300mg/天的量投与醛固酮拮抗剂。

在一实施例中，化合物1与氨基肽酶N或二肽基肽酶III抑制剂(其实例包含贝他定(bestatin)和PC18(2-氨基-4-甲基磺酰基丁烷硫醇、甲硫氨酸硫醇))组合投与。

化合物1还可与血管收缩肽转化酶(ACE)抑制剂组合投与，血管收缩肽转化酶(ACE)抑制剂的实例包含喹那普利(accupril)、阿拉普利(alacepril)、贝那普利(benazepril)、贝那普利拉(benazeprilat)、卡托普利(captopril)、西那普利(ceranapril)、西拉普利(cilazapril)、地拉普利(delapril)、依那普利(enalapril)、依那普利拉(enalaprilat)、福辛普利(fosinopril)、福辛普利拉(fosinoprilat)、咪达普利(imidapril)、赖诺普利(lisinopril)、莫昔普利(moexipril)、蒙诺普利(monopril)、莫维普利(moveltipril)、喷托普利(pentopril)、培哚普利(perindopril)、喹那普利(quinapril)、喹普利拉(quinaprilat)、雷米普利(ramipril)、雷米普利拉(ramiprilat)、乙酸沙拉新(saralasin acetate)、螺普利(spirapril)、替莫普利(temocapril)、群多普利(trandolapril)、佐芬普利(zofenopril)和其组合。在一特定实施例中，ACE抑制剂是选自：贝那普利、卡托普利、依那普利、赖诺普利、雷米普利和其组合。通常，以足以提供约1-150mg/天的量投与ACE抑制剂。

在另一实施例中，化合物1与双重作用血管紧张素转化酶/肾胰岛素残基溶酶(ACE/NEP)抑制剂组合投与，双重作用血管紧张素转化酶/肾胰岛素残基溶酶(ACE/NEP)抑制剂的实例包含：AVE-0848((4S,7S,12bR)-7-[3-甲基-2(S)-硫烷基丁酰胺基]-6-氧代基-1,2,3,4,6,7,8,12b-八氢吡啶并[2,1-a][2]苯并氮呯-4-甲酸)；AVE-7688(伊利帕曲(ilepatril))和其母体化合物；BMS-182657(2-[2-氧代基-3(S)-[3-苯基-2(S)-硫烷基丙酰胺基]-2,3,4,5-四氢-1H-1-苯并氮呯-1-基]乙酸)；CGS-35601(N-[1-[4-甲基-2(S)-硫烷基戊酰胺基]环戊基羰基]-L-色氨酸)；法西多曲(fasidotril)；法西多曲拉(fasidotrilate)；依那普利拉；ER-32935((3R,6S,9aR)-6-[3(S)-甲基-2(S)-硫烷基戊酰胺基]-5-氧代基全氢噻唑并[3,2-a]氮呯-3-甲酸)；杰帕曲拉；MDL-101264((4S,7S,12bR)-7-[2(S)-(2-吗啉基乙酰基硫基)-3-苯基丙酰胺基]-6-氧代基-1,2,3,4,6,7,8,12b-八氢吡啶并[2,1-a][2]苯并氮呯-4-甲酸)；MDL-101287([4S-[4α,7α(R*),12bβ]]-7-[2-(羧基甲基)-3-苯基丙酰胺基]-6-氧代基-1,2,3,4,6,7,8,12b-八氢吡啶并[2,1-a][2]苯并氮呯-4-甲酸)；奥马曲拉；RB-105(N-[2(S)-(巯基甲基)-3(R)-苯基丁基]-L-丙氨酸)；山帕曲拉；SA-898((2R,4R)-N-[2-(2-羟基苯基)-3-(3-巯基丙酰基)噻唑烷-4-基羰基]-L-苯丙氨酸)；Sch-50690(N-[1(S)-羧基-2-[N2-(甲烷磺酰基)-L-赖氨酰基氨基]乙基]-L-缬氨酰基-L-酪氨酸)；且还可包含其组合。在一特定实施例中，所述ACE/NEP抑制剂是选自：AVE-7688、依那普利拉、法西多曲、法西多曲拉、奥马曲拉、山帕曲拉和其组合。

在一实施例中，化合物1与血管收缩肽转化酶2(ACE2)活化剂或刺激剂组合投与。

在一实施例中，化合物1与血管收缩肽-II疫苗(其实例包含ATR12181和CYT006-AngQb)组合投与。

在一实施例中，化合物1与抗凝剂组合投与，抗凝剂的实例包含：香豆素，例如杀鼠灵(warfarin)；肝素；和直接凝血酶抑制剂，例如阿加曲班(argatroban)、比伐卢定(bivalirudin)、达比加群(dabigatran)和来匹卢定(lepirudin)。

在另一实施例中，化合物1与抗糖尿病剂(其实例包含可注射药物以及口服有效药物和其组合)组合投与。可注射药物的实例包含胰岛素和胰岛素衍生物。口服有效药物的实例包含：双胍，例如二甲双胍(metformin)；升糖素拮抗剂；α-葡萄糖苷酶抑制剂，例如阿卡波糖(acarbose)和米格列醇(miglitol)；二肽基肽酶IV抑制剂(DPP-IV抑制剂)，例如阿洛利停(alogliptin)、地格列汀(denagliptin)、利拉利汀(linagliptin)、沙格列汀(saxagliptin)、西他列汀(sitagliptin)和维格列汀(vildagliptin)；美格替耐(meglitinide)，例如瑞格列奈(repaglinide)；噁二唑烷二酮；磺酰脲，例如氯磺丙脲(chlorpropamide)、格列美脲(glimepiride)、格列吡嗪(glipizide)、格列本脲(glyburide)和妥拉磺脲(tolazamide)；噻唑烷二酮，例如吡格列酮(pioglitazone)和罗格列酮(rosiglitazone)；和其组合。

在另一实施例中，化合物1与抗腹泻治疗剂组合投与。代表性治疗选择包含口服补水溶液(ORS)、洛哌丁胺(loperamide)、地芬诺酯(diphenoxylate)和次水杨酸铋。

在又一实施例中，化合物1与抗青光眼剂组合投与，抗青光眼剂的实例包含：α-肾上腺素能激动剂，例如溴莫尼定(brimonidine)；β₁-肾上腺素能受体拮抗剂；局部β₁阻断剂，例如倍他洛尔、左布诺洛尔和噻吗洛尔；碳酸酐酶抑制剂，例如乙酰唑胺(acetazolamide)、布林唑胺(brinzolamide)或多佐胺(dorzolamide)；胆碱能激动剂，例如西维美林(cevimeline)和DMXB-假木贼碱(DMXB-anabaseine)；肾上腺素化合物；缩瞳药，例如匹鲁卡品(pilocarpine)；和***素类似物。

在另一实施例中，化合物1与抗脂质剂组合投与，抗脂质剂的实例包含：胆固醇基酯转移蛋白抑制剂(CETP)，例如安塞曲匹(anacetrapib)、达塞曲匹(dalcetrapib)和托塞曲匹(torcetrapib)；他汀类药物，例如阿托伐他汀(atorvastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、洛伐他汀(lovastatin)、普伐他汀(pravastatin)、瑞舒伐他汀(rosuvastatin)和斯伐他汀(simvastatin)；和其组合。

在一实施例中，化合物1与抗血栓剂组合投与，抗血栓剂的实例包含：阿斯匹林(aspirin)；抗血小板剂，例如氯吡格雷(clopidogrel)、普拉格雷(prasugrel)和噻氯匹定(ticlopidine)；肝素和其组合。

在一实施例中，化合物1与AT₁受体拮抗剂(还称为血管紧张素II 1受体阻断剂(ARB))组合投与。代表性ARB包含阿比沙坦(abitesartan)、阿齐沙坦(azilsartan)(例如阿齐沙坦酯(azilsartan medoxomil))、苄基氯沙坦(benzyllosartan)、坎地沙坦(candesartan)、坎地沙坦西酯(candesartan cilexetil)、依利沙坦(elisartan)、恩布沙坦(embusartan)、烯醇他索沙坦(enoltasosartan)、依普罗沙坦(eprosartan)、EXP3174、福沙坦(fonsartan)、福拉沙坦(forasartan)、甘氨酰洛沙坦(glycyllosartan)、厄贝沙坦(irbesartan)、抑特灵(isoteoline)、氯沙坦(losartan)、美得希莫(medoximil)、米法沙坦(milfasartan)、奥美沙坦(olmesartan)(例如奥美沙坦酯(olmesartan medoxomil))、奥普米沙坦(opomisartan)、普拉沙坦(pratosartan)、利匹沙坦(ripisartan)、沙普立沙坦(saprisartan)、沙拉新(saralasin)、萨美辛(sarmesin)、TAK-591、他索沙坦(tasosartan)、替米沙坦(telmisartan)、缬沙坦(valsartan)、佐拉沙坦(zolasartan)和其组合。在一特定实施例中，ARB是选自阿齐沙坦酯、坎地沙坦西酯、依普罗沙坦、厄贝沙坦、氯沙坦、奥美沙坦酯、沙普立沙坦、他索沙坦、替米沙坦、缬沙坦和其组合。实例性盐和/或前药包含坎地沙坦西酯、甲磺酸依普罗沙坦、氯沙坦钾盐和奥美沙坦酯。通常，以足以提供约4-600mg/剂量的量投与ARB，其中实例性日剂量介于20-320mg/天之间。

化合物1还可与双重作用剂(例如AT₁受体拮抗剂/肾胰岛素残基溶酶抑制剂(ARB/NEP)抑制剂，其实例包含描述于颁予阿莱格雷蒂(Allegretti)等人的美国专利第7,879,896号和第8,013,005号中的化合物，例如化合物4'-{2-乙氧基-4-乙基-5-[((S)-2-巯基-4-甲基戊酰基氨基)-甲基]咪唑-1-基甲基}-3'-氟联苯-2-甲酸)组合投与。

化合物1还可与多功能血管收缩肽受体阻断剂组合投与，如库尔兹(Kurtz)与克莱恩(Klein)(2009)高血压研究(Hypertension Research)32:826-834中所描述。

在一实施例中，化合物1与缓激肽受体拮抗剂(例如艾替班特(icatibant)(HOE-140))组合投与。预计所述组合疗法可呈现预防血管性水肿或升高的缓激肽含量的其它不需要的后果的优点。

在一实施例中，化合物1与钙通道阻断剂组合投与，钙通道阻断剂的实例包含氨氯地平(amlodipine)、阿尼帕米(anipamil)、阿雷地平(aranidipine)、巴尼地平(barnidipine)、苄环烷(bencyclane)、贝尼地平(benidipine)、苄普地尔(bepridil)、克仑硫卓(clentiazem)、西尼地平(cilnidipine)、桂利嗪(cinnarizine)、地尔硫卓(diltiazem)、依福地平(efonidipine)、依高地平(elgodipine)、依他苯酮(etafenone)、非洛地平(felodipine)、芬地林(fendiline)、氟桂利嗪(flunarizine)、戈洛帕米(gallopamil)、伊拉地平(isradipine)、拉西地平(lacidipine)、乐卡地平(lercanidipine)、利多氟嗪(lidoflazine)、洛美利嗪(lomerizine)、马尼地平(manidipine)、米贝拉地尔(mibefradil)、尼卡地平(nicardipine)、硝苯地平(nifedipine)、尼古地平(niguldipine)、尼鲁地平(niludipine)、尼伐地平(nilvadipine)、尼莫地平(nimodipine)、尼索地平(nisoldipine)、尼群地平(nitrendipine)、尼伐地平(nivaldipine)、哌克昔林(perhexiline)、普尼拉明(prenylamine)、柳的平(ryosidine)、司莫地尔(semotiadil)、特罗地林(terodiline)、噻帕米(tiapamil)、维拉帕米(verapamil)和其组合。在一特定实施例中，钙通道阻断剂是选自氨氯地平、苄普地尔、地尔硫卓、非洛地平、伊拉地平、拉西地平、尼卡地平、硝苯地平、尼古地平、尼鲁地平、尼莫地平、尼索地平、柳的平、维拉帕米和其组合。通常，以足以提供约2-500mg/剂量的量投与钙通道阻断剂。

在一实施例中，化合物1与凝乳酶抑制剂(例如TPC-806和2-(5-甲酰基氨基-6-氧代基-2-苯基-1,6-二氢嘧啶-1-基)-N-[{3,4-二氧代基-1-苯基-7-(2-吡啶基氧基)}-2-庚基]乙酰胺(NK3201))组合投与。

在一实施例中，化合物1与利尿剂组合投与，利尿剂的实例包含：碳酸酐酶抑制剂，例如乙酰唑胺和双氯非那胺(dichlorphenamide)；袢利尿剂，其包含磺酰胺衍生物，例如乙酰唑胺、安布赛特(ambuside)、阿佐塞米(azosemide)、布美他尼(bumetanide)、布他唑胺(butazolamide)、氯米非那胺(chloraminophenamide)、氯非那胺(clofenamide)、氯帕胺(clopamide)、氯索隆(clorexolone)、二磺法胺(disulfamide)、依索唑胺(ethoxzolamide)、呋塞米(furosemide)、美夫西特(mefruside)、醋甲唑胺(methazolamide)、吡咯他尼(piretanide)、托拉塞米(torsemide)、曲帕胺(tripamide)和希帕胺(xipamide)，以及非磺酰胺利尿剂，例如依他尼酸(ethacrynic acid)和其它苯氧基乙酸化合物，例如替尼酸(tienilic acid)、茚达立酮(indacrinone)和喹卡酯(quincarbate)；渗透压性利尿剂，例如甘露醇；保钾利尿剂，其包含醛固酮拮抗剂，例如螺内酯(spironolactone)和Na⁺通道抑制剂，例如阿米洛利(amiloride)和胺苯蝶啶(triamterene)；噻嗪和噻嗪样利尿剂，例如阿尔噻嗪(althiazide)、苄氟噻嗪(bendroflumethiazide)、苄氢***(benzylhydrochlorothiazide)、苄噻嗪(benzthiazide)、布噻嗪(buthiazide)、氯噻酮(chlorthalidone)、***(chlorthiazide)、环戊噻嗪(cyclopenthiazide)、环噻嗪(cyclothiazide)、依匹噻嗪(epithiazide)、乙噻嗪(ethiazide)、芬喹唑(fenquizone)、氟甲噻嗪(flumethiazide)、氢***(hydrochlorothiazide)、氢氟噻嗪(hydroflumethiazide)、吲达帕胺(indapamide)、甲***(methylclothiazide)、美替克仑(meticrane)、美托拉宗(metolazone)、对氟噻嗪(paraflutizide)、泊利噻嗪(polythiazide)、喹乙宗(quinethazone)、四***(teclothiazide)和三***(trichloromethiazide)；和其组合。在一特定实施例中，利尿剂是选自阿米洛利、布美他尼、***、氯噻酮、双氯非那胺、依他尼酸、呋塞米、氢***、氢氟噻嗪、吲达帕胺、甲***、美托拉宗、托拉塞米、胺苯蝶啶和其组合。以足以提供约5-50mg/天(更为通常地6-25mg/天)的量投与利尿剂，其中常用剂量为6.25mg、12.5mg或25mg/天。

化合物1还可与内皮素转化酶(ECE)抑制剂(其实例包含磷酰二肽(phosphoramidon)、CGS 26303和其组合)组合投与。

在一特定实施例中，化合物1与内皮素受体拮抗剂组合投与，内皮素受体拮抗剂的实例包含：影响内皮素A受体的选择性内皮素受体拮抗剂，例如阿伏生坦(avosentan)、安贝生坦(ambrisentan)、阿曲生坦(atrasentan)、BQ-123、克拉生坦(clazosentan)、达卢生坦(darusentan)、达卢生坦(sitaxentan)和齐泊腾坦(zibotentan)；和影响内皮素A和B受体的双重作用内皮素受体拮抗剂，例如波生坦(bosentan)、马西替坦(macitentan)和替唑生坦(tezosentan)。

在另一实施例中，化合物1与一或多种HMG-CoA还原酶抑制剂(其还称为他汀类药物)组合投与。代表性他汀类药物包含阿托伐他汀(atorvastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、洛伐他汀(lovastatin)、匹伐他汀(pitavastatin)、普伐他汀(pravastatin)、瑞舒伐他汀(rosuvastatin)和斯伐他汀(simvastatin)。

在一实施例中，化合物1与单胺再摄取抑制剂组合投与，单胺再摄取抑制剂的实例包含去甲肾上腺素再摄取抑制剂，例如阿托莫西汀(atomoxetine)、安非他酮(buproprion)和安非他酮代谢物羟基安非他酮(hydroxybuproprion)、马普替林(maprotiline)、瑞波西汀(reboxetine)和维洛沙秦(viloxazine)；选择性血清素再摄取抑制剂(SSRI)，例如西酞普兰(citalopram)和西酞普兰代谢物脱甲基西酞普兰(desmethylcitalopram)、达泊西汀(dapoxetine)、依地普仑(escitalopram)(例如草酸依地普仑(escitalopram oxalate))、氟西汀(fluoxetine)和氟西汀脱甲基代谢物诺氟西汀(norfluoxetine)、氟伏沙明(fluvoxamine)(例如马来酸氟伏沙明(fluvoxamine maleate))、帕罗西汀(paroxetine)、舍曲林(sertraline)和舍曲林代谢物脱甲基舍曲林(demethylsertraline)；双重作用血清素-去甲肾上腺素再摄取抑制剂(SNRI)，例如比西发定(bicifadine)、度洛西汀(duloxetine)、米那普仑(milnacipran)、奈法唑酮(nefazodone)和万拉法辛(venlafaxine)；和其组合。

在另一实施例中，化合物1与肌肉松弛剂组合投与，肌肉松弛剂的实例包含：肌安宁(carisoprodol)、氯唑沙宗(chlorzoxazone)、环苯扎林(cyclobenzaprine)、二氟尼柳(diflunisal)、美他沙酮(metaxalone)、美索巴莫(methocarbamol)和其组合。

在一实施例中，化合物1与利钠肽或类似物(其实例包含：卡培立肽(carperitide)、CD-NP(尼罗治疗剂公司(Nile Therapeutics))、CU-NP、奈西立肽(nesiritide)、PL-3994(帕拉丁技术公司(Palatin Technologies,Inc.))、乌拉立肽(ularitide)、蛇毒肽(cenderitide)和描述于奥佳华(Ogawa)等人(2004)生物化学杂志(J.Biol.Chem.)279:28625-31中的化合物)组合投与。所述化合物还称为利钠肽受体-A(NPR-A)激动剂。在另一实施例中，化合物1与利钠肽清除受体(NPR-C)拮抗剂(例如SC-46542、cANF(4-23)和AP-811)组合投与(维尔(Veale)(2000)生物有机化学与医药化学通讯(Bioorg Med Chem Lett)10:1949-52)。举例来说，AP-811在与NEP抑制剂硫甲基氧代苯丙甘氨酸(thiorphan)进行组合时展示协同作用(韦格纳(Wegner)(1995)临床与实验高血压(Clin.Exper.Hypert.)17:861-876)。

在另一实施例中，化合物1与肾胰岛素残基溶酶(NEP)抑制剂组合投与，肾胰岛素残基溶酶(NEP)抑制剂的实例包含：AHU-377；坎沙曲(candoxatril)；坎沙曲拉(candoxatrilat)；右卡多曲(dexecadotril)((+)-N-[2(R)-(乙酰基硫甲基)-3-苯基丙酰基]甘氨酸苄基酯)；CGS-24128(3-[3-(联苯-4-基)-2-(膦酰基甲基氨基)丙酰胺基]丙酸)；CGS-24592((S)-3-[3-(联苯-4-基)-2-(膦酰基甲基氨基)丙酰胺基]丙酸)；CGS-25155(N-[9(R)-(乙酰基硫甲基)-10-氧代基-1-氮杂环癸-2(S)-基羰基]-4(R)-羟基-L-脯氨酸苄基酯)；3-(1-氨基甲酰基环己基)丙酸衍生物，其描述于颁予赫普沃斯(Hepworth)等人(辉瑞公司(Pfizer Inc.))的WO 2006/027680中；JMV-390-1(2(R)苄基-3-(N-羟基氨基甲酰基)丙酰基-L-异亮氨酰基-L-亮氨酸)；埃卡多曲(ecadotril)；磷酸阿米酮(phosphoramidon)；反-硫甲基氧代苯丙甘氨酸(retrothiorphan)；RU-42827(2-(巯基甲基)-N-(4-吡啶基)苯丙酰胺)；RU-44004(N-(4-吗啉基)-3-苯基-2-(硫烷基甲基)丙酰胺)；SCH-32615((S)-N-[N-(1-羧基-2-苯基乙基)-L-苯基丙胺酰基]-β-丙氨酸)和其前药SCH-34826((S)-N-[N-[1-[[(2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-基)甲氧基]羰基]-2-苯基乙基]-L-苯基丙胺酰基]-β-丙氨酸)；希乐吩(sialorphin)；SCH-42495(N-[2(S)-(乙酰基硫烷基甲基)-3-(2-甲基苯基)丙酰基]-L-甲硫氨酸乙酯)；斯平吩(spinorphin)；SQ-28132(N-[2-(巯基甲基)-1-氧代基-3-苯基丙基]亮氨酸)；SQ-28603(N-[2-(巯基甲基)-1-氧代基-3-苯基丙基]-β-丙氨酸)；SQ-29072(7-[[2-(巯基甲基)-1-氧代基-3-苯基丙基]氨基]庚酸)；硫甲基氧代苯丙甘氨酸和其前药消旋卡多曲(racecadotril)；UK-69578(顺式-4-[[[1-[2-羧基-3-(2-甲氧基乙氧基)丙基]环戊基]羰基]氨基]环己烷甲酸)；UK-447,841(2-{1-[3-(4-氯苯基)丙基氨基甲酰基]-环戊基甲基}-4-甲氧基丁酸)；UK-505,749((R)2-甲基-3-{1-[3-(2-甲基苯并噻唑-6-基)丙基氨基甲酰基]环戊基}丙酸)；5-联苯-4-基-4-(3-羧基丙酰基氨基)-2-甲基戊酸和5-联苯-4-基-4-(3-羧基丙酰基氨基)-2-甲基戊酸乙酯(WO 2007/056546)；达格鲁多曲(daglutril)[(3S,2'R)-3-{1-[2'-(乙氧基羰基)-4'-苯基丁基]-环戊烷-1-羰基氨基}-2,3,4,5-四氢-2-氧代基-1H-1-苯并氮呯-1-乙酸]，其描述于颁予赫德尔(Khder)等人(诺华AG(Novartis AG))的WO 2007/106708中；和其组合。在一特定实施例中，NEP抑制剂是选自AHU-377、坎沙曲、坎沙曲拉、CGS-24128、磷酸阿米酮、SCH-32615、SCH-34826、SQ-28603、硫甲基氧代苯丙甘氨酸和其组合。在一特定实施例中，NEP抑制剂是诸如达格鲁多曲或CGS-26303([N-[2-(联苯-4-基)-1(S)-(1H-四唑-5-基)乙基]氨基]甲基膦酸)等化合物，其具有作为内皮素转化酶(ECE)和NEP的抑制剂的活性。还可使用其它双重作用ECE/NEP化合物。以足以提供约20-800mg/天的量投与NEP抑制剂，其中典型日剂量是在50-700mg/天范围内，更通常地，100-600mg或100-300mg/天。

在一实施例中，化合物1与一氧化氮供体组合投与，一氧化氮供体的实例包含：尼可地尔(nicorandil)；有机硝酸酯，例如(新戊四醇四硝酸酯)；和斯德酮亚胺(sydnonimine)，例如林西多明(linsidomine)和吗多明(molsidomine)。

在又一实施例中，化合物1与非类固醇抗发炎剂(NSAID)组合投与，非类固醇抗发炎剂(NSAID)的实例包含：阿西美辛(acemetacin)、乙酰基水杨酸、阿氯芬酸(alclofenac)、阿明洛芬(alminoprofen)、氨芬酸(amfenac)、氨普立糖(amiprilose)、阿洛普令(aloxiprin)、阿尼罗酸(anirolac)、阿扎丙宗(apazone)、阿扎丙宗(azapropazone)、贝诺酯(benorilate)、苯噁洛芬(benoxaprofen)、苯哌立酮(bezpiperylon)、溴哌莫(broperamole)、布氯酸(bucloxic acid)、卡洛芬(carprofen)、环氯茚酸(clidanac)、双氯芬酸(diclofenac)、二氟尼柳(diflunisal)、地弗他酮(diftalone)、依诺利康(enolicam)、依托度酸(etodolac)、依托考昔(etoricoxib)、芬布芬(fenbufen)、芬氯酸(fenclofenac)、芬克洛酸(fenclozic acid)、非诺洛芬(fenoprofen)、芬替酸(fentiazac)、非普拉宗(feprazone)、氟芬那酸(flufenamic acid)、氟苯柳(flufenisal)、氟洛芬(fluprofen)、氟比洛芬(flurbiprofen)、呋罗芬酸(furofenac)、异丁芬酸(ibufenac)、布洛芬(ibuprofen)、吲哚美辛(indomethacin)、吲哚洛芬(indoprofen)、伊索克酸(isoxepac)、伊索昔康(isoxicam)、酮洛芬(ketoprofen)、酮咯酸(ketorolac)、洛非咪唑(lofemizole)、氯诺昔康(lornoxicam)、甲氯灭酸的结合碱(meclofenamate)、甲氯芬那酸(meclofenamicacid)、甲芬那酸(mefenamic acid)、美洛昔康(meloxicam)、美沙拉秦(mesalamine)、咪洛芬(miroprofen)、莫非布宗(mofebutazone)、萘丁美酮(nabumetone)、萘普生(naproxen)、尼氟酸(niflumic acid)、奥沙普秦(oxaprozin)、欧平纳(oxpinac)、羟布宗(oxyphenbutazone)、保泰松(phenylbutazone)、吡罗昔康(piroxicam)、吡洛芬(pirprofen)、普拉洛芬(pranoprofen)、双水杨酯(salsalate)、舒多昔康(sudoxicam)、柳氮磺吡啶(sulfasalazine)、舒林酸(sulindac)、舒洛芬(suprofen)、替诺昔康(tenoxicam)、硫平酸(tiopinac)、噻洛芬酸(tiaprofenic acid)、硫噁洛芬(tioxaprofen)、托芬那酸(tolfenamic acid)、托美丁(tolmetin)、三氟米酯(triflumidate)、齐多美辛(zidometacin)、佐美酸(zomepirac)和其组合。在一特定实施例中，NSAID是选自依托度酸、氟比洛芬、布洛芬、吲哚美辛、酮洛芬、酮咯酸、美洛昔康、萘普生、奥沙普秦、吡罗昔康和其组合。

在一实施例中，化合物1与N-甲基d-天冬氨酸盐(NMDA)受体拮抗剂组合投与，N-甲基d-天冬氨酸盐(NMDA)受体拮抗剂的实例包含金刚烷胺(amantadine)、右旋美沙芬(dextromethorphan)、右丙氧芬(dextropropoxyphene)、***(ketamine)、凯托米酮(ketobemidone)、美金刚(memantine)、***(methadone)等。

在另一实施例中，化合物1与类***受体激动剂(还称为类***止痛药)组合投与。代表性类***受体激动剂包含：丁丙诺啡(buprenorphine)、布托啡诺(butorphanol)、可待因(codeine)、双氢可待因(dihydrocodeine)、芬太尼(fentanyl)、氢可酮(hydrocodone)、氢***酮(hydromorphone)、左洛啡烷(levallorphan)、左啡诺(levorphanol)、哌替啶(meperidine)、***、***(morphine)、纳布啡(nalbuphine)、纳美芬(nalmefene)、纳洛芬(nalorphine)、纳洛酮(naltrexone)、纳曲酮(naltrexone)、纳洛芬(nalorphine)、羟考酮(oxycodone)、羟***酮(oxymorphone)、喷他佐辛(pentazocine)、丙氧芬(propoxyphene)、曲马朵(tramadol)和其组合。在某些实施例中，类***受体激动剂是选自可待因、双氢可待因、氢可酮、氢***酮、***、羟考酮、羟***酮、曲马朵和其组合。

在一特定实施例中，化合物1与磷酸二酯酶(PDE)抑制剂、尤其PDE-V抑制剂组合投与。代表性PDE-V抑制剂包含阿伐那非(avanafil)、罗地那非(lodenafil)、米罗那非(mirodenafil)、西地那非(sildenafil)他达拉非(tadalafil)伐地那非(vardenafil)和乌地那非(udenafil)。

在另一实施例中，化合物1与***素类似物(还称为类***素或***环素类似物)组合投与。代表性***素类似物包含贝前列素钠(beraprost sodium)、比马前列素(bimatoprost)、依前列醇(epoprostenol)、伊洛前列素(iloprost)、拉坦前列素(latanoprost)、他氟前列素(tafluprost)、曲伏前列素(travoprost)和曲前列环素(treprostinil)，其中尤其关注比马前列素、拉坦前列素和他氟前列素。

在另一实施例中，化合物1与***素受体激动剂组合投与，***素受体激动剂的实例包含比马前列素、拉坦前列素、曲伏前列素等。

化合物1还可与肾素抑制剂组合投与，肾素抑制剂的实例包含阿利吉仑(aliskiren)、依那吉仑(enalkiren)、瑞米吉仑(remikiren)和其组合。

在另一实施例中，化合物1与选择性血清素再摄取抑制剂(SSRI)组合投与，选择性血清素再摄取抑制剂(SSRI)的实例包含：西酞普兰和西酞普兰代谢物脱甲基西酞普兰、达泊西汀、依地普仑(例如草酸依地普仑)、氟西汀和氟西汀脱甲基代谢物诺氟西汀、氟伏沙明(例如马来酸氟伏沙明)、帕罗西汀、舍曲林和舍曲林代谢物脱甲基舍曲林和其组合。

在一实施例中，化合物1与5-HT_1D血清素受体激动剂组合投与，5-HT_1D血清素受体激动剂的实例包含曲坦类，例如阿莫曲普坦(almotriptan)、阿维曲普坦(avitriptan)、依来曲普坦(eletriptan)、夫罗曲普坦(frovatriptan)、那拉曲坦(naratriptan)、利扎曲普坦(rizatriptan)、舒马曲坦(sumatriptan)和佐米曲普坦(zolmitriptan)。

在一实施例中，化合物1与钠通道阻断剂组合投与，钠通道阻断剂的实例包含卡巴马平(carbamazepine)、磷苯妥英(fosphenytoin)、乐命达锭(lamotrigine)、利多卡因(lidocaine)、墨西律定(mexiletine)、奥卡西平(oxcarbazepine)、苯妥英(phenytoin)和其组合。

在一实施例中，化合物1与可溶性鸟苷酸环化酶刺激剂或活化剂(其实例包含阿塔西哌(ataciguat)、利奥西哌(riociguat)和其组合)组合投与。

在一实施例中，化合物1与三环抗抑郁剂(TCA)组合投与，三环抗抑郁剂(TCA)的实例包含阿米替林(amitriptyline)、氧阿米替林(amitriptylinoxide)、布替林(butriptyline)、氯米帕明(clomipramine)、地美替林(demexiptiline)、地昔帕明(desipramine)、二苯西平(dibenzepin)、二甲他林(dimetacrine)、多苏列平(dosulepin)、氧杂环庚三烯(doxepin)、伊米帕明(imipramine)、氧米帕明(imipraminoxide)、洛非帕明(lofepramine)、美利曲辛(melitracen)、美他帕明(metapramine)、硝沙西平(nitroxazepine)、去甲替林(nortriptyline)、诺昔替林(noxiptiline)、哌泊非嗪(pipofezine)、丙吡西平(propizepine)、普罗替林(protriptyline)、奎纽帕明(quinupramine)和其组合。

在一实施例中，化合物1与加压素受体拮抗剂(其实例包含考尼伐坦(conivaptan)和托伐普坦(tolvaptan))组合投与。

组合的二级治疗剂还可有助于本发明化合物的其它组合疗法。举例来说，本发明化合物可与利尿剂和ARB或钙通道阻断剂和ARB或利尿剂和ACE抑制剂或钙通道阻断剂和他汀类药物进行组合。具体实例包含ACE抑制剂依那普利(呈马来酸盐形式)与利尿剂氢***的以商标出售的组合或钙通道阻断剂胺氯地平(呈苯磺酸盐形式)与ARB奥美沙坦(呈奥美沙坦酯前药形式)的组合或钙通道阻断剂与他汀类药物的组合，其都还可与化合物1一起使用。其它治疗剂(例如α₂-肾上腺素能受体激动剂和加压素受体拮抗剂)还可有助于组合疗法。实例性α₂-肾上腺素能受体激动剂包含可乐定(clonidine)、右美托咪定(dexmedetomidine)和胍法辛(guanfacine)。

下列调配物可阐释本发明的代表性医药组合物。

用于口服投与的实例性硬明胶胶囊

将本发明化合物(50g)、440g经喷雾干燥乳糖和10g硬脂酸充分掺和。随后将所得组合物装载到硬明胶胶囊中(500mg组合物/胶囊)。另一选择为，将化合物1(20mg)与淀粉(89mg)、微晶纤维素(89mg)和硬脂酸镁(2mg)充分掺和。随后使混合物通过45号网目美国筛并装载到硬明胶胶囊中(200mg组合物/胶囊)。

流星雨作为，另一选择为，将化合物1(30g)、二级药剂(20g)、440g经喷雾干燥乳糖和10g硬脂酸镁充分掺和，并且如上文所描述进行加工。

用于口服投与的实例性明胶胶囊调配物

将化合物1(100mg)与聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯(50mg)和淀粉粉末(250mg)充分掺和。随后将混合物装载到明胶胶囊中(400mg组合物/胶囊)。另一选择为，将化合物1(70mg)和二级药剂(30mg)与聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯(50mg)和淀粉粉末(250mg)充分掺和，并且将所得混合物装载到明胶胶囊中(400mg组合物/胶囊)。

另一选择为，将化合物1(40mg)与微晶纤维素(艾维素PH 103(Avicel PH 103)；259.2mg)和硬脂酸镁(0.8mg)充分掺和。随后将混合物装载到明胶胶囊(1号大小，白色，不透明)中(300mg组合物/胶囊)。

用于口服投与的实例性羟丙基甲基纤维素(HPMC)胶囊

将化合物1(50mg或100mg)直接装载到HPMC胶囊中。

用于口服投与的实例性片剂调配物

使化合物1(10mg)、淀粉(45mg)和微晶纤维素(35mg)通过20号网目美国筛并充分混合。将由此产生的粒剂在50℃到60℃下干燥且通过16号网目美国筛。将聚乙烯基吡咯烷酮溶液(4mg，呈无菌水中的10％溶液)与羧甲基淀粉钠(4.5mg)、硬脂酸镁(0.5mg)和滑石粉(1mg)混合，并且然后使所述混合物通过16号网目美国筛。然后向粒剂中添加羧甲基淀粉钠、硬脂酸镁和滑石粉。在混合之后，在压片机上压制混合物以提供重100mg的片剂。

另一选择为，将化合物1(250mg)与微晶纤维素(400mg)、发烟二氧化硅(10mg)和硬脂酸(5mg)充分掺和。随后压缩混合物以形成片剂(665mg组合物/片剂)。

另一选择为，将化合物1(400mg)与玉米淀粉(50mg)、交联羧甲基纤维素钠(25mg)、乳糖(120mg)和硬脂酸镁(5mg)充分掺和。然后压缩所述混合物以形成单痕片剂(600mg组合物/片剂)。

另一选择为，将化合物1(100mg)与玉米淀粉(100mg)和明胶水溶液(20mg)充分掺和。干燥混合物且研磨成精细粉末。然后将微晶纤维素(50mg)和硬脂酸镁(5mg)与明胶调配物混合，粒化且压缩所得混合物以形成片剂(100mg本发明化合物/片剂)。

用于口服投与的实例性悬浮液调配物

混合下列成分以形成每10mL悬浮液含有100mg化合物1的悬浮液：

用于口服投与的实例性液体调配物

适宜液体调配物是一种具有基于羧酸的缓冲液(例如柠檬酸、乳酸盐和马来酸盐缓冲溶液)的调配物。举例来说，将化合物1(其可与DMSO预混合)与100mM柠檬酸铵缓冲液掺和且将pH调节到pH 5，或与100mM柠檬酸溶液掺和且将pH调节到pH 2。所述溶液还可包含增溶赋形剂(例如环糊精)，举例来说，溶液可包含10wt％羟丙基-β-环糊精。

其它适宜调配物包含5％NaHCO₃溶液，其含有或不含环糊精。

用于通过注射投与的实例性肠胃外IV调配物

将化合物1(0.2g)与0.4M柠檬酸钠缓冲溶液(2.0mL)掺和。根据需要使用0.5N盐酸水溶液或0.5N氢氧化钠水溶液将所得溶液的pH调节到pH 4，并且然后添加足够注射用水以提供20mL的总体积。然后通过无菌过滤器(0.22微米)过滤混合物以提供适于通过注射投与的无菌溶液。

下列调配物阐释本发明的代表性医药组合物。

调配物实例A

如下所述来制备适于制备可注射溶液的冷冻溶液：

代表性程序：将赋形剂(如果存在)溶于约80％注射用水中且添加活性化合物1或1’并溶解。使用1M氢氧化钠将pH调节到3到4.5且然后使用注射用水将体积调节到最终体积的95％。检查pH且视需要进行调节，并且使用注射用水将体积调节到最终体积。然后通过0.22微米过滤器无菌过滤调配物且在无菌条件下置于无菌小瓶中。封盖小瓶，标记且冷冻存储。

调配物实例B

如下所述来制备适于制备可注射溶液的冻干粉末或结晶固体：

代表性程序：将赋形剂和/或缓冲剂(如果存在)溶于约60％注射用水中。添加活性化合物1或1’并溶解且使用1M氢氧化钠将pH调节到3到4.5，并且使用注射用水将体积调节到最终体积的95％。检查pH且视需要进行调节，并且使用注射用水将体积调节到最终体积。然后通过0.22微米过滤器无菌过滤调配物且在无菌条件下置于无菌小瓶中。然后使用适当冻干循环冻干调配物。封盖小瓶(任选地在部分真空或干燥氮下)，标记且在冷冻下存储。

调配物实例C

如下所述从上述调配物实例B制备用于经静脉内投与患者的可注射溶液：

代表性程序：使用20mL无菌水重构调配物实例B的冻干粉末(例如含有10mg到1000mg活性化合物1或1’)且使用80mL无菌盐水在100mL液袋中进一步稀释所得溶液。然后经30分钟到120分钟将所稀释溶液经静脉内投与患者。

用于通过吸入投与的实例性组合物

将化合物1(0.2mg)微粉化且然后与乳糖(25mg)掺和。然后将所述经掺和混合物装载到明胶吸入药筒中。使用(例如)干粉吸入器投与药筒内容物。

另一选择为，使微粉化化合物1(10g)分散于通过将卵磷脂(0.2g)溶于去矿质水(200mL)中所制得的溶液中。将所得悬浮液喷雾干燥且随后将其微粉化以形成包括平均直径小于约1.5μm的颗粒的微粉化组合物。然后将微粉化组合物装载到含有经加压1,1,1,2-四氟乙烷的定量式吸入器药筒中，在通过所述吸入器投与时装载量足以提供每剂量约10μg到约500μg的本发明化合物。

另一选择为，将化合物1(25mg)溶于柠檬酸盐缓冲(pH 5)等渗盐水(125mL)中。搅拌混合物并实施超声波处理直到化合物溶解为止。检查溶液的pH且视需要通过缓慢添加1N氢氧化钠水溶液调节到pH 5。使用每一剂量提供约10μg到约500μg化合物1的喷雾器装置投与溶液。

实例

提供下列制备和实例来阐释本发明的具体实施例。然而，除非明确指示，否则所述具体实施例并不打算以任何方式限制本发明范围。

除非另外指示，否则下列缩写具有下列含义且本文使用且未定义的任何其它缩写具有其公认的标准含义：

BOC 叔丁氧基羰基(-C(O)OC(CH₃)₃)

DCM 二氯甲烷(dichloromethane或methylene chloride)

DIPEA N,N-二异丙基乙胺

DMF N,N-二甲基甲酰胺

EDTA 乙二胺四乙酸

EtOH 乙醇

Et₂O 二***

EtOAc 乙酸乙酯

HATU 六氟磷酸N,N,N',N'-四甲基-O-(7-氮杂苯并***-1-基)脲鎓

KHMDS 双(三甲基硅烷基)酰胺钾

MeCN 乙腈

NaHMDS 双(三甲基甲硅烷基)胺化钠

Pd(dppf)₂Cl₂ 1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁氯化钯

Pd(PPh₃)₄ 四(三苯基膦)钯(0)

PE 石油醚

PyBOP 六氟磷酸苯并***-1-基氧基三(吡咯烷基)鏻

TFA 三氟乙酸

THF 四氢呋喃

除非另外注明，否则所有诸如试剂、起始材料和溶剂等材料都购自商业供应商(例如西格玛-奥德里奇(Sigma-Alarich)、弗卢卡瑞戴尔-哈恩(Fluka Riedel-dede)等)且未经进一步纯化即使用。

除非另外注明，否则反应都是在氮气氛下进行。通过薄层色谱(TLC)、分析型高效液相色谱(分析型HPLC)和质谱监测反应进程，其细节在具体实例中给出。通常，分析型HPLC中所用溶剂如下：溶剂A是98％H₂O/2％MeCN/1.0mL/L TFA；溶剂B是90％MeCN/10％H₂O/1.0mL/L TFA。

如例如每一制备中具体所描述来处理反应液；通常，通过萃取和其它纯化方法(例如温度依赖性和溶剂依赖性结晶和沉淀)纯化反应混合物。另外，通过制备型HPLC并且通常使用微吸C18(Microsorb C18)和微吸BDS(Microsorb BDS)管柱填充物和常规洗脱剂来常规纯化反应混合物。通常通过液相色谱质谱(LCMS)测量反应进程。通过核奥氏效应光谱(Nuclear Overhauser effect spectroscopy，NOE)来表征异构体。通过质谱和¹H-NMR光谱常规进行反应产物的表征。为进行NMR测量，将试样溶于氘代溶剂(CD₃OD、CDCl₃或DMSO-d₆)中并利用瓦里安杰米尼2000(Varian Gemini 2000)仪器(400MHz)在标准观察条件下获得¹H-NMR光谱。化合物的质谱鉴别通常是使用电喷雾电离法(ESMS)利用美国应用生物***公司(Applied Biosystems)(福斯特城，加利福尼亚州(Foster City,CA))API 150EX型仪器或安捷伦(Agilent)(帕洛阿尔托(Palo Alto)，加利福尼亚州)1200LC/MSD型仪器来实施。

测量技术

粉末X射线衍射

使用布鲁克D8-高级(Bruker D8-Advance)X射线衍射仪进行粉末X射线衍射分析。X射线源是输出电压为40kV且电流为40mA的Cu-Kα辐射。以布拉格-布伦塔诺(Bragg-Brentano)几何模式操作仪器并且使用格贝尔(Goebel)镜以获得平行X射线束。束中的任何发散都由源处的0.2°垂直发散狭缝和源与检测器处的索勒狭缝(Soller slit)(2.5°)限制。为进行测量，将少量粉末(5-25mg)轻压于零背景硅试样座上以形成平滑表面且进行X射线暴露。以耦合θ-2θ模式从2°到35°2θ使用0.02°的步长和0.3秒/步的扫描速度来扫描试样。通过布鲁克衍射套装(Bruker DiffracSuite)软件控制数据获取并且通过杰德(Jade)软件(7.5.1版)进行分析。使用刚玉(corundum)标准物在±0.02°2θ角内校正仪器。

应注意，用于数据收集的布拉格-布伦塔诺几何模式倾向择优定向(preferredorientation)。在这些条件下，衍射峰的相对强度可能并不代表从球形颗粒的理想化分布或从模拟自单晶数据的衍射图案获得的真实相对强度。也可能一些峰在一些衍射图案中由于过度择优定向而无法观察到。。

差示扫描量热法

使用具有热分析仪(Thermal Analyst)控制器的TA仪器(TA Instruments)Q-100型模组进行DSC测量。收集数据并使用TA仪器通用分析(TA Instruments UniversalAnalysis)软件来分析。将试样精确称重到有盖铝盘中。在5℃下经5分钟等温平衡时段之后，使用10℃/min的线性加热斜坡将试样从0℃加热到200℃。

热重分析

使用配备有高分辨率的TA仪器Q-500型模组进行热重分析测量。使用TA仪器热分析仪控制器收集数据且使用TA仪器通用分析软件进行分析。将称重试样置于铂盘上且以10℃/min的加热速率从环境温度到200℃进行扫描。在使用期间使用氮流吹扫平衡室和炉室。

偏光显微术

对于偏振光显微分析(PLM)研究来说，在具有交叉偏振滤光器的光学显微镜(奥林巴斯BX51(Olympus BX51))下检验试样。使用通过PaxIt成像软件(6.4版)控制的PaxCam照像机收集图像。在载玻片上使用轻质矿物油作为浸渍介质来制备试样。根据颗粒大小，使用4×、10×或20×物镜进行放大。

动态水分吸附评价

使用VTI常压微量天平SGA-100***(VTI公司，海厄利亚，佛罗里达州，33016)进行DMS测量。使用称重试样且在分析开始时湿度是最低可能值(接近0％相对湿度)。DMS分析由在5-90％的整个湿度范围内5％相对湿度/步的扫描速率组成。在25℃下等温进行DMS试验。

合成程序和对比实例

合成下列化合物且评估NEP酶抑制活性：

制备1：(2R,4R)-4-氨基-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯(化合物7)

在室温和氮下，向(S)-2-(4-溴苄基)-5-氧代基吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(25g,70.6mmol)于1,4-二噁烷(500mL)中的溶液中添加5-氯-2-氟苯基硼酸(24.6g,141mmol)、Pd(PPh₃)₄(4.1g,3.5mmol)和K₂CO₃于水(90mL)中的溶液(17.8g,141mmol)。将混合物加热到60℃并搅拌过夜。添加水(500mL)并蒸发溶剂。使用EtOAc(200mL×3)萃取混合物。使用NaCl饱和水溶液(300mL)洗涤合并的有机层并过滤。浓缩滤液以得到粗制残余物，通过色谱纯化以得到浅黄色固体化合物2(22.7g)。LC-MS:829.2[2M+Na⁺]。

在0℃和氮下，向化合物2(4.9g,12.1mol)于DCM(100mL)中的溶液中添加TFA(4.5mL,60.7mmol)，并搅拌1小时。将混合物升温到室温保持1.5小时。在蒸发溶剂之后，使用EtOAc(100mL)稀释残余物，然后使用NaHCO₃饱和水溶液(100mL×3)、水(100mL×2)、NaCl饱和水溶液(100mL)洗涤，并且然后通过Na₂SO₄干燥。过滤混合物且浓缩滤液以得到粗制化合物3。LC-MS:304[M+H]⁺。

在0℃和氮下，向NaH(2.4g,695mmol)于THF(200mL)中的溶液中逐滴添加化合物3(8.5g,278mmol)于THF(50mL)中的溶液。将混合物升温到室温并搅拌2小时。在冷却到0℃之后，经30分钟逐滴添加新戊酰氯(5g,41.7mmol)。将混合物升温到室温并搅拌9.5小时。使用NH₄Cl饱和水溶液(250mL)淬灭反应并使用EtOAc(400mL×3)萃取。通过Na₂SO₄干燥合并的有机层并浓缩以得到粗制残余物，通过色谱纯化以得到黄色固体化合物4(18g)。LC-MS:388[M+H⁺]。

在-78℃和氮下，向化合物4(9g,23.2mmol)于THF(200mL)中的溶液中逐滴添加NaHMDS(20.9mL,41.8mmol)。在-78℃下搅拌1小时之后，逐滴添加(+)-(8,8-二氯樟脑酰基磺酰基)氧氮丙啶(10.4g,34.8mmol)于THF(50mL)中的溶液。在-78℃下搅拌1小时之后，使用NH₄Cl饱和水溶液(50mL)淬灭反应并使用EtOAc(400mL×3)萃取。使用1M HCl水溶液(400mL)、NaHCO₃饱和水溶液(400mL)和NaCl饱和水溶液(400mL)洗涤合并的有机层，通过Na₂SO₄干燥，并浓缩以得到粗制残余物，通过色谱纯化以得到白色半固体化合物5(8.8g)。LC-MS:426.1[M+Na⁺]。

将化合物5(8.8g,21.8mmol)于EtOH(12mL)中的溶液添加到浓HCl(200mL)中且在100℃下加热并搅拌过夜。然后浓缩混合物以得到粗制残余物，通过使用Et₂O(100mL)洗涤来纯化以得到固体HCl盐形式的化合物6(7.5g)。LC-MS:338[M+H⁺]。

将化合物6(7.5g,20.1mmol)于1:1EtOH/HCl(100mL)中的溶液在50℃下加热过夜。浓缩混合物且通过使用Et₂O(200mL)洗涤来纯化粗制残余物以得到白色固体HCl盐形式的化合物7(6.5g)。LC-MS:366.1[M+H⁺]。

实例1：(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基恶唑-2-羰基) 氨基]戊酸(化合物1)

将5-甲基恶唑-2-甲酸(182mg,1.4mmol)和HATU(546mg,1.4mmol)与DMF(3mL)合并并在室温下搅拌15分钟。然后添加化合物7(500mg,1.4mmol)和DIPEA(716μL,4.1mmol)。将所得混合物在室温下搅拌15分钟，此时LC/MS展示反应已完成。在真空中去除溶剂且通过正相急骤色谱(己烷:EtOAC 20-95％)纯化粗制残余物以得到固体(590mg,1.2mmol)，将其溶于无水EtOH(5mL)和无水THF(5mL)中。然后添加水中的1N LiOH溶液(9.9mL,9.9mmol)。将所得溶液在室温下搅拌1小时，此时LC/MS展示反应已完成。在真空中去除溶剂且通过反相色谱纯化粗制残余物以得到白色粉末形式的化合物1(490mg)。C₂₂H₂₀ClFN₂O₅的MS m/z[M+H]⁺计算值：447.10；实验值：447.2。

结晶非溶剂化(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基恶唑-2-羰基)氨基]戊酸(化合物1’)

将化合物7(HCl；190.0g,472mmol)溶于DMF(2L)中且将所得混合物冷却到0℃。添加5-甲基恶唑-2-甲酸钠(73.9g,496mmol)，随后一次性添加DIPEA(124mL,708mmol)。经20分钟逐份添加PyBOP(320g,614mmol)，同时维持内部温度低于10℃(最高6.5℃)，并且将所得混合物在0℃下搅拌1小时且然后在20℃下搅拌1小时，同时监测反应。在>99％转化时，然后将混合物在室温下再搅拌30分钟。添加EtOAc(6L)和水(5L)且将所得混合物搅拌20分钟。分离各相且使用0.5M HCl(5L)、5％NaHCO₃水溶液(5L)和5％NaCl饱和水溶液(5L)洗涤有机层。通过Na₂SO₄将有机层在室温下干燥24小时，然后通过旋转蒸发浓缩。添加THF(500mL)且浓缩所得混合物以得到稠油状物形式的化合物8。

将粗制化合物8(224g,472mmol)溶于THF(2L)中。添加溶于水(400mL)中的单水合LiOH(39.6g,944mmol)且在室温下搅拌所得混合物，同时监测反应。在2小时之后观察到完全转化。然后使用1M HCl水溶液(1180mL,1180mmol)淬灭反应。添加EtOAc(2L)和NaCl饱和水溶液(2L)且将所得混合物搅拌15分钟。分离各相且使用10％NaCl水溶液(3L)洗涤有机层并通过Na₂SO₄(500g)干燥过夜，随后去除溶剂。向所得油状物中添加EtOAc(2L)且体积减小到约500mL。将所得浆液在室温下搅拌30分钟，从而得到难以搅拌的稠浆液(在10分钟内出现)。缓慢添加(经10分钟)己烷(500mL)且将所得自由流动的浆液在室温下搅拌20分钟。过滤并干燥以得到固体化合物1’(170g；99.2％纯材料)。通过PXRD、DSC和热重分析(如本文中所描述)分析这种产物，并且都测定为非溶剂化结晶材料。所述数据呈现于图1-3中。

实例2：(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(3-甲氧基异恶唑-5-羰基)氨基]戊酸(对比化合物C2)

将DIPEA(227μL,1.3mmol)添加到3-甲氧基异恶唑-5-甲酸(74.7mg,522μmol)、化合物7(175mg,435μmol)和HATU(248mg,653μmol)于DMF(2mL)中的溶液中。将所得混合物在室温下搅拌10分钟，此时LC/MS展示反应已完成。添加5.0M LiOH水溶液(696μL,3.5mmol)且将混合物在室温下搅拌30分钟。添加浓HCl(约0.4mL)直到反应混合物变成酸性为止，并且通过反相色谱(30-90％MeCN，于水中且含有0.05％TFA)纯化粗制混合物以得到白色固体形式的对比化合物C2(132mg)。C₂₂H₂₀ClFN₂O₆的MS m/z[M+H]⁺计算值：463.10；实验值：463.2。

对比化合物C2描述于颁予詹德隆等人的美国专利第8,586,536号的实例19-9中。

制备2：(2R,4S)-4-氨基-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-甲基戊酸乙酯(化合物 11)

在室温和氮下在二噁烷(900mL)和水(300mL)中合并(S)-2-(4-溴苄基)-5-氧代基吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(90g,254mmol)、5-氯-2-氟苯基硼酸(48.7g,279.4mmol)、Pd(dppf)₂Cl₂(5.6g,7.6mmol)、KF(29.5g,508mmol)。将所得溶液加热到85℃且搅拌4小时。添加水(500mL)，并且使用EtOAc(500mL×2)萃取混合物。使用NaCl饱和水溶液(500mL)洗涤合并的有机层，干燥，浓缩并通过色谱(PE/EtOAc＝6:1到3:1)纯化以得到黄色固体化合物2(96g)。LC-MS:m/z＝348[(M-56)⁺+1]。

在0℃和氮下，向化合物2(20g,49.5mmol)于无水DCM(200mL)中的溶液中添加TFA(30mL)。将混合物升温到室温并在室温下搅拌2小时。在蒸发溶剂之后，使用EtOAc(200mL)稀释残余物，然后使用NaHCO₃饱和水溶液(200mL×3)和NaCl饱和水溶液(200mL×2)洗涤。干燥有机层并浓缩以得到黄色油状物形式的化合物3(14g，粗制物)。LC-MS:m/z＝304[(M⁺+1)],m/z＝607[(2M⁺+1)]。

在-78℃和氮下，向化合物3(14g,46mmol)于无水THF(150mL)中的溶液中逐滴添加正丁基锂于己烷中的2.5M溶液(21mL,52.9mmol)。将所得混合物在-78℃下搅拌1小时。然后在-78℃下逐滴添加新戊酰氯(7.2g,59.8mmol)，并且将混合物在-78℃下再搅拌2小时。使用水(200mL)淬灭反应并使用EtOAc(200mL×2)萃取。使用NaCl饱和水溶液(200mL)洗涤合并的有机层，通过Na₂SO₄干燥，浓缩，并通过管柱色谱(PE/EtOAc＝50:1)纯化以得到浅黄色油状物形式的化合物4(14.6g)。LC-MS:m/z＝388[(M⁺+1)]。

在-78℃和氮下，向化合物4(14.6g,37.4mmol)于甲苯(200mL)中的溶液中逐滴添加KHMDS(82mL,41.1mmol)。在-78℃下搅拌2小时之后，逐滴添加Me₂SO₄(4.3mL,44.9mmol)。在-78℃下搅拌2小时之后，使用NH₄Cl饱和水溶液(100mL)淬灭反应并使用EtOAc(100mL×2)萃取。使用NaCl饱和水溶液(200mL)洗涤合并的有机层，通过Na₂SO₄干燥，过滤，并浓缩以得到粗产物，通过色谱(PE/EtOAc＝100:1)纯化以得到无色油状物形式的化合物9(3.4g)。LC-MS:m/z＝402[(M⁺+1)]。

将化合物9(3.4g,8.5mmol)于浓HCl(50mL)中的溶液回流2天。然后在减压下浓缩混合物且通过使用EtOAc(20mL)洗涤来纯化残余物以得到灰白色固体HCl盐形式的化合物10(2.2g)。LC-MS:m/z＝336[(M⁺+1)]。

将化合物10(2.2g,5.9mmol)于4M HCl(于EtOH中，15mL)中的溶液在室温下搅拌2小时。然后在减压下浓缩混合物且通过使用EtOAc(20mL)洗涤来纯化残余物以得到灰白色固体形式的化合物11(2.3g)。LC-MS:m/z＝364[(M⁺+1)]¹H NMR(300MHz,DMSO)δ7.61-7.52(m,3H),7.47(ddd,J＝8.7,4.3,2.7Hz,1H),7.38(dd,J＝13.5,5.5Hz,3H),3.98(q,J＝7.1Hz,2H),3.37(d,J＝11.1Hz,1H),3.11(dd,J＝13.7,5.1Hz,1H),2.90-2.67(m,2H),1.85(ddd,J＝14.0,9.3,4.8Hz,1H),1.68-1.54(m,1H),1.13-0.99(m,6H)。

实例3：(2R,4S)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-4-[(2-乙基恶唑-5-羰基)氨基]-2- 甲基戊酸(对比化合物C3)

将DIPEA(228μL,1.3mmol)添加到2-乙基恶唑-5-甲酸(67.9mg,481μmol)、化合物11(175mg,437μmol)和HATU(249mg,656μmol)于DMF(2.0mL)中的溶液中，并在室温下搅拌15分钟。添加5.0M LiOH水溶液(699μL,3.5mmol)且将混合物在室温下搅拌1.5小时。添加浓HCl(约0.5mL)直到混合物变成酸性为止且通过制备型HPLC(20-80％MeCN，于水中且含有0.05％TFA)纯化粗制混合物以得到白色固体形式的对比化合物C3(170mg)。C₂₄H₂₄ClFN₂O₄的MS m/z[M+H]⁺计算值：459.14；实验值：459.05。

对比化合物C3描述于颁予科波拉等人的美国专利第8,263,629号的实例71-1中。

实例4：(2R,4S)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-甲基-4-[(恶唑-5-羰基)氨基]戊酸(对比化合物C4)

将DIPEA(228μL,1.3mmol)添加到恶唑-5-甲酸(49.4mg,437μmol)、化合物11(HCl；175mg,437μmol)和HATU(249mg,656μmol)于DMF(2mL)中的溶液中。将所得混合物在室温下搅拌10分钟，此时LC/MS展示反应已完成。添加5.0M LiOH水溶液(699μL,3.5mmol)且将混合物在室温下搅拌1小时。添加浓HCl(约0.5mL)直到反应混合物变成酸性为止且通过制备型HPLC(20-80％MeCN，于水中且含有0.05％TFA)纯化粗制混合物以得到白色固体形式的对比化合物C4(103mg)。C₂₂H₂₀ClFN₂O₄的MS m/z[M+H]⁺计算值：431.11；实验值：431.1。

对比化合物C4描述于颁予科波拉等人的美国专利第8,263,629号的实例68-1中。

分析

在下文所描述的分析中评估化合物1和对比化合物C2、C3和C4。

分析1：量化对人类NEP的抑制剂功效的活体外分析

如下所述来测定对人类肾胰岛素残基溶酶(EC 3.4.24.11；NEP)的抑制活性。

在商业上获得重组人类NEP(研发***(R&D Systems)，明尼阿波利斯，明尼苏达州，目录编号：1182-ZN)。使用荧光肽底物Mca-D-Arg-Arg-Leu-Dap-(Dnp)-OH(梅代罗斯(Medeiros)等人(1997)巴西医学生物研究期刊(Braz.J.Med.Biol.Res.)30:1157-62；安肽(Anaspec)，圣约瑟，加利福尼亚州)。

在37℃下于384孔白色不透明板中使用荧光肽底物以10μM的浓度于分析缓冲液(50mM HEPES、pH 7.5、100mM NaCl、0.01％聚乙二醇山梨醇酐单月桂酸酯(吐温-20(Tween-20))、10μM ZnSO₄)中进行分析。以使得1μM底物在37℃下于20分钟之后发生定量蛋白分解的浓度使用酶。

在10μM到20pM的浓度范围内分析测试化合物。将测试化合物添加到酶中且在37℃下培育30分钟，然后通过添加底物来引发反应。在37℃下在培育20分钟之后通过添加冰乙酸直到最终浓度为3.6％(v/v)来终止反应。

在荧光计上使用设定于320nm的激发和发射波长来读取板。通过数据的非线性回归使用以下方程式(格拉夫派得软件公司(GraphPad Software,Inc)，圣地亚哥，加利福尼亚州)来获得抑制常数：

v＝v₀/[1+(I/K′)]

其中v是反应速率，v₀是未抑制反应速率，I是抑制剂浓度且K′是表观抑制常数。

在所述分析中测试化合物且发现对人类NEP的pK_i值如下。

化合物	pK_i
		1	9.7
C2	9.9
		C3	9.1
C4	9.3

分析2：大鼠和狗中的IV/PO药物代谢动力学研究

使用测试化合物的调配物开始每一大鼠或狗PK研究。将适当质量的每一测试化合物添加到一定体积的媒剂(例如H₂O中的5％碳酸氢钠、5％右旋糖)中，从而每一化合物的最终浓度适于以2mL/kg投用。尽管均质悬浮液可接受用于口服投药，但在投药之前无菌过滤(0.2μm)静脉内投药溶液以确保并不投与微粒。

在大鼠研究中，从哈兰(Harlan)实验室(印第安纳波利斯，印地安纳州)获得8到10周龄的预插套管雄性斯普拉-道来(Sprague-Dawley)大鼠(3只/途径)。大鼠接受单一口服胃管灌食或单一静脉内(通过侧尾静脉)剂量的投药溶液。最终剂量通常为0.5-3mg/kg。通过植入颈静脉中的套管在投药后3分钟、15分钟、30分钟、1小时、2小时、4小时、6小时和24小时收获连续血样。人工或使用自动化血液采样仪进行采样。将试样收集到含有EDTA作为抗凝剂的微量采血管中且通过冷冻离心加工成血浆。

在狗研究中，使安置于安哲列克斯实验室(Agilux Laboratories)(伍斯特，马萨诸塞州)且重7-12kg的雄性小猎犬(3只/途径)接受单一口服胃管灌食或单一静脉内(通过留置导管)剂量的投药溶液。最终剂量通常为0.1-2mg/kg。通过直接静脉穿刺在投药后3分钟、15分钟、30分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、8小时、12小时和24小时收获连续血样。将所有试样人工收集到含有EDTA作为抗凝剂的微量采血管中且通过冷冻离心加工成血浆。

使用3体积含有适宜内标准品的MeCN萃取血样。将萃取物重构到3体积含有1％甲酸的水中，并且通过HPLC耦联MS/MS分析。使用菲尼斯(Phoenix)软件(法赛特公司(Pharsight Corp.)，圣路易斯，密苏里州)分析血浆浓度-时间数据以计算药物代谢动力学参数。

血浆清除率是从静脉内研究组测定，并且代表血浆清除药物的速率。其等于剂量除以血浆浓度-时间曲线下面积。除血浆清除率外，口服投与的药物在口服递送后还需要实现有效全身性含量。口服生物利用度是相对于静脉内投与后的暴露的口服投与后的血浆暴露的量度。

大鼠药物代谢动力学数据

^a AUC_最后是从时间0到在投药后观察到最后可量化浓度的时间的血浆浓度对时间曲线下面积，其是通过线性梯形方法来估计

^b CL_最后是剂量除以AUC_最后

^c口服生物利用度计算为口服投与后的AUC_最后除以静脉内投与后的AUC_最后，出于所投与剂量的任一差异将其正规化且表示为百分比形式

所述大鼠数据展示，本发明化合物(化合物1)具有高口服生物利用度(67％)。对比化合物C3和C4展现类似口服生物利用度(分别为60％和60％)。然而，对比化合物C2具有较低口服生物利用度(20％)。所述大鼠数据还展示，化合物1与对比化合物C3和C4相比具有类似的较低清除率(分别为0.83、0.60和0.67)。然而，对比化合物C2远更快地清除(平均CL_最后为1.7)。

为获得化合物在人类中的行为方式(例如安全性和效能)的更具预测性测定，在第二动物物种中进行评估。

狗药物代谢动力学数据

*大于100％的生物利用度可涉及吸收、分布和/或消除过程。

所述狗数据展示，本发明化合物(化合物1)具有高口服生物利用度(>100％)和低血浆清除率。尽管对比化合物C2展现类似口服生物利用度(99％)，但对比化合物C3和C4展现远更低的口服生物利用度(分别为64％和42％)。另外，所述狗数据还展示，化合物1的清除率(0.29)低于所有三种对比化合物C2、C3和C4(分别为0.65、0.59和1.54)。

总的来说，化合物1在大鼠和狗中始终展现高口服生物利用度和低血浆清除率。与之相比，对比化合物C2在大鼠中展现低于化合物1的生物利用度且在大鼠和狗中展现高于化合物1的血浆清除率。对比化合物C3和C4尽管在大鼠中的口服生物利用度和清除率与化合物1相当，但在狗中较化合物1展现较低口服生物利用度和较高清除率。

分析3：清醒的血压正常的斯普拉-道来大鼠中的NEP活性的药物代谢动力学/药效学(PK-PD)分析

将适当质量的每一测试化合物添加到一定体积的媒剂(例如H₂O中的5％碳酸氢钠、5％右旋糖)中，从而每一化合物的最终浓度适于以2mL/kg投用。应注意，均质悬浮液可视为可接受用于口服投药。

从哈兰实验室(印第安纳波利斯，印地安纳州)获得8到10周龄的预插套管雄性斯普拉-道来大鼠(3只/所评估化合物)。大鼠接受投药溶液的单一口服胃管灌食。最终剂量通常在3-30mg/kg范围内。通过植入颈静脉中的套管在投药后3分钟、15分钟、35分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时和24小时收获连续血样。将试样收集到含有EDTA作为抗凝剂的微量采血管中且通过冷冻离心加工成血浆。在45分钟、2小时、4小时、6小时和24小时试样之前15分钟，投与心房利钠肽(ANP)的静脉内浓注(30μg/kg)。如果测试化合物成功地抑制肾胰岛素残基溶酶(ANP清除的一种关键媒介)，那么所投与ANP将增加ANP的基础含量，由此强化下游信号传导。如果测试化合物并不成功地抑制肾胰岛素残基溶酶，那么循环ANP和下游信号传导级联的含量将在投与ANP浓注与获取血样的时间点之间的15分钟期间返回其基础状态。因ANP与其受体的结合使得鸟苷酸环化酶发生活化且随后产生环单磷酸鸟苷(cGMP)，故在经静脉内投与ANP浓注之后15分钟在血浆中观察到升高的cGMP含量(>20nM)可诠释为进行性肾胰岛素残基溶酶抑制的证据。在投药之后24小时升高的血浆cGMP含量可指示持续时间药理学效应，此类似于使用血浆清除值作为药物代谢动力学持续性的指示。

使用3体积含有适宜内标准品的MeCN萃取血样。将萃取物重构到3体积含有1％甲酸的水中。通过HPLC耦联质谱检测量化血样中的血浆cGMP和测试化合物浓度。

^a三个测定的平均值

因此，与针对现有技术化合物C2、C3和C4所观察相比，本发明化合物(化合物1)展现在投药之后24hr cGMP的强化大2倍以上。

分析4：化合物1在猴中的静脉内/口服药物代谢动力学研究

使用一定体积媒剂(例如，对于口服途径来说，H₂O中的5％碳酸氢钠、5％右旋糖，pH 7.4；且对于静脉内途径来说，PEG200:EtOH:水(40:10:50)，pH 7.0，通过0.22μM PDVF注射器过滤)中的适当质量的化合物1进行猴PK研究，从而以0.5mL/kg(静脉内)或2.0mL/kg(口服)投用最终浓度。

使安置于山莫曲斯(Xenometrics)(斯蒂尔韦尔，堪萨斯)的雄性食蟹猴(3只/途径)以1mg/kg接受静脉内或口服剂量的化合物1。使投与静脉内剂量的动物随意进食且使投与口服剂量的那些禁食过夜且在剂量投与之后大约4小时接受食物。在每一时间点(投药前、0.083小时、0.25小时、0.5小时、1小时、2小时、4小时、6小时、8小时、12小时和24小时)通过头静脉、股静脉或大隐静脉在48小时内从每一动物收集血样。将所有试样收集到K₂EDTA管中且置于冰上。通过离心(3200rpm，10分钟，5℃)将试样加工成血浆，并且使用最终浓度为2％的乙酸酸化。将血浆等分试样转移到96孔板管中且在生物分析之前冷冻(-70℃)存储。通过LC/MS/MS测定化合物1的血浆浓度。对血浆研究试样实施涡旋且置于96孔板中。使用200μL于乙腈中且含有内标准品的0.2％甲酸萃取试样。将萃取物以3700RPM离心10分钟且将上清液与水中的0.2％甲酸混合。将试样(15μL)以0.3mL/min的流速注入到赛默(Thermo)(C18 50×2.1mm)管柱上。流动相A是由水中的0.2％甲酸组成且流动相B是由乙腈中的0.2％甲酸组成。梯度洗脱始于从0.5min.到1.5min.0％到95％B，从1.5min.到1.85min.保持于95％B，随后从1.85min.到1.86min.是95％到0％B的梯度且止于2.6min。化合物1分析范围为0.0005μg/mL到5μg/mL。通过非分室分析(静脉内和口服投与分别是201型和200型)使用菲尼斯文南林(Phoenix WinNonlin)6.3版(赛他拉(Certara)，桑尼维尔，加利福尼亚州)且使用来自3只动物的个别血浆浓度时间曲线来测定化合物1的药物代谢动力学参数。

猴药物代谢动力学数据

所述数据展示，本发明化合物(化合物1)在雄性食蟹猴中具有高口服生物利用度(大约60％)和低血浆清除率(大约0.36)。此与从大鼠和狗物种所生成的生物利用度和清除率数据一致且类似。

分析5：化合物1在大鼠、狗和猴物种中的肾***

用于确保患者中的适当长期药物投用和正确稳态药物浓度的重要因素是药物清除率。一般来说，较低药物清除率产生较高药物浓度和较大药物效应。为理解化合物1的肾清除率，在三种动物物种中评价在单一静脉内剂量后在尿液中回收的所投与剂量的百分比。分别在雄性斯普拉-道来大鼠、雄性小猎犬和雄性食蟹猴中实施三个单独研究且程序和实验结果描述于下文中。

使体重为0.348kg到0.362kg的雄性斯普拉-道来大鼠(N＝3)接受0.5mg/kg静脉内剂量的化合物1作为投药盒的一部分。将化合物1溶于D5W(水中的5％右旋糖中，pH 7.4)中的5％NaHCO₃中并通过0.22μM聚二氟乙烯(PVDF)注射器过滤器过滤，然后投与。使大鼠在投与化合物1之前和之后随意进食。在代谢笼中收集尿样且在收集期间维持于冷冻干冰上。将试样解冻且和记录尿液体积。将尿样的等分试样转移到聚丙烯存储管中，冷冻且存储(-80℃)，然后进行生物分析。

通过LC/MS/MS测定化合物1的大鼠尿液浓度。将尿样解冻且在大鼠K₂EDTA血浆中稀释5倍。将经稀释尿液的50μL等分试样转移到96孔板中并使用200μL体积存于乙腈中且含有内标准品的2％甲酸萃取。将96孔板以3700RPM离心10分钟且将上清液转移到新96孔板中。在水中的0.2％甲酸中稀释上清液(4倍稀释)。将10μL或20μL体积注入苯基X桥(Xbridgephenyl)(21×50mm；5μ)管柱中。流动相A是由水中的0.2％甲酸组成且流动相B是由乙腈中的0.2％甲酸组成。梯度洗脱始于从0.5min到2.0min的20％到95％B，从2.0min.到2.2min.保持于95％B，随后从2.2min.到2.3min.是95％到20％B的梯度且止于3.3min。化合物1分析范围为0.00125μg/mL到25μg/mL。

使体重为9.04-10.2kg和10.8-11.5kg的雄性小猎犬(N＝6，两组，每组3只)以0.1mg/kg(组I)和1.255mg/kg(组II)接受化合物1的静脉内剂量作为投药盒的一部分。将化合物1溶于PEG-200:乙醇:水(40:10:50)中并通过0.22mM聚二氟乙烯(PVDF)注射器过滤器过滤，然后投与。使狗在投与化合物1之前和之后随意进食。将尿样收集于预填充0.5mL冰乙酸的预称重容器中的冷装中。将试样再次称重且视需要添加额外冰乙酸直到最终浓度为2％。将试样冷冻且存储(-80℃)，然后进行生物分析。

通过LC/MS/MS测定化合物1的狗尿液浓度。对尿液研究试样(稀释于血浆K₂EDTA中(1:9))实施涡旋且将25μL置于96孔板中。使用100μL具有内标准品格列本脲(Glyburide)的乙腈萃取试样。将萃取物以3100RPM离心5分钟且转移75μL上清液并与150μL水混合。将试样(12μL)以0.9mL/min的流速注入沃特兹安奎替(Waters Acquity)UPLC BEH C18(50×2.1mm,1.7μm)管柱中。流动相A是由95:5:0.1(v:v:v)水:乙腈:甲酸组成且流动相B是由50:50:0.1(v:v:v)甲醇:乙腈:甲酸组成。梯度洗脱始于从0.2min到1.6min的35％到90％B，从1.7min.到2.2min.保持于95％B，随后从2.20min到2.30min是95％到35％B的步骤。化合物1分析范围为0.000100μg/mL到1.00μg/mL。

使体重为4.42-5.81kg的雄性食蟹猴(N＝3)接受1mg/kg静脉内剂量的化合物1。将化合物1溶于PEG-200:乙醇:水(40:10:50)中并通过0.22mM聚二氟乙烯(PVDF)注射器过滤器过滤，然后投与。使猴在投与化合物1之前和之后随意进食。在收集间隔时段期间将尿样收集于干冰上，记录试样体积，并且使用乙酸将尿液酸化到最终乙酸浓度为大约2％。获得等分试样且冷冻(-70℃)，然后进行生物分析。

通过LC/MS/MS测定化合物1的猴尿液浓度。将尿样解冻且稀释于血浆K₂EDTA中(1:4)。使用200μL存于乙腈中且含有内标准品的0.2％甲酸萃取试样。将萃取物以3700RPM离心10分钟且将上清液与水中的0.2％甲酸混合。将试样(15μL)以0.3mL/min的流速注入赛默(C18 50×2.1mm)管柱中。流动相A是由水中的0.2％甲酸组成且流动相B是由乙腈中的0.2％甲酸组成。梯度洗脱始于从0.5min到1.5min的0％到95％B，从1.5min到1.85min保持于95％B，随后从1.85min.到1.86min.是95％到0％B的梯度且止于2.6min。化合物1分析范围为0.0025到25μg/mL。

在24hr收集时段中***的尿液的平均量和在尿液中***的所投与剂量的近似％报告于下表中。

^a三个测定的平均值

化合物1在大鼠中的肾***大约为所投与剂量的0.03％，在狗中大约为所投与剂量的1％到1.5％且在猴中大约为所投与剂量的3％。所述数据指示，化合物1在所测试的三种物种中具有低肾***。

Claims

1.一种化合物，其具有以下结构：

或其药学上可接受的盐。

2.一种(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基-恶唑-2-羰基)氨基]戊酸。

3.一种(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基-恶唑-2-羰基)氨基]戊酸的结晶型。

4.根据权利要求3所述的结晶型，其中所述结晶型的特征在于在以下2θ值处包括衍射峰的粉末x射线衍射图案：8.48±0.20、14.19±0.20、17.03±0.20、21.15±0.20和25.41±0.20。

5.根据权利要求3所述的结晶型，其中所述结晶型的特征在于在以下2θ值处包括衍射峰的粉末x射线衍射图案：7.51±0.20、8.48±0.20、14.19±0.20、17.03±0.20、17.62±0.20、17.87±0.20、20.59±0.20、21.15±0.20、21.88±0.20、24.45±0.20、24.78±0.20、25.41±0.20、25.67±0.20、27.67±0.20和28.22±0.20。

6.根据权利要求5所述的结晶型，其中所述结晶型的特征进一步在于在选自以下的2θ值处具有一或多个额外衍射峰：16.09±0.20、18.70±0.20、19.21±0.20、19.40±0.20、21.64±0.20、22.25±0.20、26.43±0.20、28.55±0.20、30.73±0.20、31.10±0.20、32.64±0.20、33.14±0.20和34.46±0.20。

7.根据权利要求3所述的结晶型，其中所述结晶型的特征在于峰位置大体上与在图1中所展示图案的峰位置一致的粉末x射线衍射图案。

8.根据权利要求3所述的结晶型，其中所述结晶型的特征在于以10℃/分钟的加热速率记录的差示扫描量热法迹线，其在介于约165℃与169℃之间的温度下展示最大吸热热流。

9.根据权利要求3所述的结晶型，其中所述结晶型的特征在于大体上与在图2中所展示者一致的差示扫描量热法迹线。

10.一种医药组合物，其包括根据权利要求1到9中任一权利要求所述的化合物和一或多种药学上可接受的载剂。

11.根据权利要求10所述的医药组合物，其中所述药学上可接受的载剂是硬脂酸镁。

12.一种医药组合物，其包括根据权利要求1到9中任一权利要求所述的化合物和AT₁受体拮抗剂、血管收缩肽转化酶抑制剂、磷酸二酯酶PDE抑制剂、肾素抑制剂、利尿剂或其组合和任选地一或多种药学上可接受的载剂。

13.一种包括根据权利要求1到9中任一权利要求所述的化合物的口服剂型，其呈胶囊、片剂、液体或悬浮液形式。

14.根据权利要求13所述的口服剂型，其中所述化合物在个体中的释放是立即、受控或延迟释放。

15.根据权利要求13所述的口服剂型，其中所述胶囊材料是明胶、多糖、几丁聚糖或合成聚合物。

16.根据权利要求13所述的口服剂型，其中所述硬质胶囊包括明胶、多糖或合成聚合物。

17.根据权利要求13所述的口服剂型，其中所述胶囊包括羟丙基甲基纤维素。

18.一种包括根据权利要求1到9中任一权利要求所述的化合物的静脉内剂型，其呈缓冲溶液形式。

19.一种制备根据权利要求1所述的化合物的方法，所述方法包括

使(2R,4R)-4-氨基-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯与2-甲基恶唑-2-甲酸进行偶合以得到根据权利要求1所述的化合物。

20.一种制备根据权利要求1所述的化合物的方法，所述方法包括：

(a)在N,N-二甲基甲酰胺DMF中组合2-甲基恶唑-2-甲酸和六氟磷酸N,N,N’,N’-四甲基-O-(7-氮杂苯并***-1-基)脲鎓HATU并且在室温下搅拌；

(b)添加(2R,4R)-4-氨基-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯和N,N-二异丙基乙胺并且在室温下搅拌；

(c)分离所得固体并且然后溶于无水乙醇和无水四氢呋喃中；

(d)添加氢氧化锂水溶液；和

(e)分离所述所得固体以得到根据权利要求1所述的化合物。

21.根据权利要求20所述的方法，其中通过色谱纯化步骤(c)和(e)中的所述所得固体。

22.一种制备根据权利要求3所述的结晶型的方法，所述方法包括：

(a)将(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基恶唑-2-羰基)氨基]戊酸溶于乙酸乙酯和己烷中直到完全溶解；和

(b)分离所得固体以得到所述结晶型。

23.一种制备根据权利要求3所述的结晶型的方法，所述方法包括：

(a)使(2R,4R)-4-氨基-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基戊酸乙酯与5-甲基恶唑-2-甲酸钠进行偶合以得到(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基恶唑-2-羰基)氨基]戊酸；

(b)使用乙酸乙酯和己烷处理(2R,4R)-5-(5'-氯-2'-氟联苯-4-基)-2-羟基-4-[(5-甲基恶唑-2-羰基)氨基]戊酸直到完全溶解；和

(c)分离所得固体以得到所述结晶型。

24.根据权利要求1到9中任一权利要求所述的化合物，其用于疗法中。

25.根据权利要求24所述的化合物，其用于治疗高血压、肺高血压、心脏衰竭或肾病。

26.一种根据权利要求1到9中任一权利要求所述的化合物的用途，其用于制造用以治疗高血压、心脏衰竭或肾病的药剂。

27.一种用于治疗高血压、心脏衰竭或肾病的方法，所述方法包括向患者投与治疗有效量的根据权利要求1到9中任一权利要求所述的化合物。

28.一种治疗肾受损个体的方法，所述方法包括向所述个体投与治疗有效量的根据权利要求1到9中任一权利要求所述的化合物。

29.根据权利要求28所述的方法，其中所述肾受损个体患有所估算肾小球滤过率eGFR介于60mL/min/1.73m²与15mL/min/1.73m²之间的慢性肾病。

30.一种增加患有高血压、心脏衰竭或肾病的个体中的心房利钠肽ANP或环单磷酸鸟苷cGMP含量的方法，所述方法包括向个体投与治疗有效量的根据权利要求1到9中任一权利要求所述的化合物。

31.根据权利要求30所述的方法，其中在个体的尿液或血浆或二者中测量ANP和cGMP的含量。