CN107245153B - 一种无菌检测反应膜及制备方法及应用该反应膜的培养管 - Google Patents

一种无菌检测反应膜及制备方法及应用该反应膜的培养管 Download PDF

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Abstract

本发明公开一种无菌检测反应膜及应用该反应膜的培养管，涉及药品检测领域，本发明还公开了一种无菌检测反应膜的制备方法，具体地说，是一种通过微生物生长过程中产生二氧化碳，二氧化碳溶于水使溶液pH值下降，进而使反应膜颜色发生变化，通过颜色变化判断有无微生物生长，克服了传统方法通过浑浊判断微生物污染的延迟及不准确的缺陷。

Description

一种无菌检测反应膜及制备方法及应用该反应膜的培养管
技术领域
本发明涉及药品无菌检测技术领域，具体地说涉及一种无菌检测反应膜及制备方法及应用该反应膜的培养管。
背景技术
药品直接关系着人民群众的身体健康和生命安全，确保药品安全就是最大的民生。药品是预防、治疗、诊断人的疾病，有目的地调节人的生理机能并规定有适应证或者功能主治、用法和用量的物质作为一种特殊的商品，药品的质量安全直接关系到人们的健康和生命。
药品的双重性，即治病又致病，致病的首要因素是药品的不合格，在药品不合格的因素中微生物不合格又是首要，因为微生物看不着摸不着，微乎其微，一旦增值就有致命危害，比如前几年的乌苏里江双黄连注射液致死事故等，不仅表明了药品安全方面存在着问题。更重要的是对人民的生命造成了损失。
尽管微生物指标在药品质量中的重要性，但是历次的药典修订中，无菌检测依然采用连续14天目测浑浊的方法，对于生长快的微生物尚可易于观察，但对于大部分生长缓慢的微生物不利于尽早观察出微生物生长，以至于出现假阴性的可能性，甚至造成不合格产品按合格产品放行，并严重危害服用者的健康。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术中对药品无菌检测方法的缺陷，而提供了一种无菌检测反应膜及应用该反应膜的培养管，基于微生物在生长代谢过程中，分解碳源，产出二氧化碳，二氧化碳溶于水，使溶液PH值降低，利用酸碱指示剂的颜色变化，进而判断有无微生物生长繁殖，由此进行无菌检测，可以更早、更快捷、更准确的检测出样品的带菌情况。
本发明的另一目的是提供一种无菌检测反应膜的制备方法。
本发明的另一目的是提供一种药品无菌检测的方法。
本发明的目的通过以下技术方案来实现：
一种无菌检测培养管，其内壁附着无菌检测反应膜；无菌检测反应膜先固化在无菌检测培养管内壁，不覆盖全部培养管，留有一部分便于观察检测液体是否浑浊。
作为本发明的进一步改进，所述无菌检测培养管具有圆筒形或方形的结构。
作为本发明的进一步改进，所述无菌检测培养管为聚苯乙烯材质或玻璃材质。
本发明还进一步提供了一种无菌检测反应膜，其为可变色的无菌检测反应膜。
本发明还进一步提供了无菌检测反应膜的制备方法：
（1）将80-120份的聚甲基硅氧烷、80-120份的正己烷，充分搅拌混合均匀，得到检测液A；
（2）向上述检测液A中，依次加入1-50g/L的显色剂， 0.2-1.5份的催化剂，2-10份的交联剂，调pH值为6.5-7.5，搅拌均匀，得到检测液B；
（3）将上述检测液B注入倾斜的培养管，使之附着在培养管内壁，形成无菌检测反应膜。
作为上述制备方法的进一步改进，所述显色剂为对-硝基酚、酚酞、百里酚酞、α-萘酚酞、酚红、溴酚蓝、百里酚蓝、溴甲酚紫、溴甲酚绿、麝香草酚蓝、甲酚红、二甲苯酚蓝或间甲酚紫。
进一步地，所述催化剂为二丁基锡二月桂酸酯、二(十二烷基硫)二丁基锡、二辛基锡、二丁基锡、二烷基锡二马来酸酯、二硫醇烷基锡或硫醇二辛基锡。
进一步地，所述偶联剂为正硅酸乙酯、正硅酸甲酯、三甲氧基硅烷、对甲苯磺酸、对甲苯磺酰氯、二丙烯酸-1，4-丁二醇酯、二甲基丙烯酸乙二醇酯或丙烯酸丁酯。
本发明还进一步提供了一种对药品无菌检测的方法：向本发明的无菌检测培养管中装入相应的液体培养基，高温灭菌后，加入检测样品，所述无菌检测反应膜随着培养基的pH值变化，其颜色发生变化；当pH值变化，引起无菌检测反应膜颜色变化时，表明培养基中有微生物生长，即所加样品无菌检测不合格；当无菌检测反应膜颜色无变化时，表明培养基中无微生物生长，即所加样品无菌检测合格。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
（1）方便快捷、利于观察，无菌检测反应膜的颜色变化比检测液浑浊度变化更明显；
（2）更早得知无菌检测结果，浑浊变化是菌体大量繁殖后浓度增加引起的，而颜色变化是液体pH值的变化引起的，如有微生物生长，时间缩短，提前得知无菌检测结果；
（3）交联剂的加入使无菌检测反应膜附壁效果更好，不宜脱落；
（4）催化剂的加入使无菌检测反应膜变色速度更快，由微生物生长产生的二氧化碳引起的pH值变化，更快反应到无菌检测反应膜。
具体实施方式
下面结合具体实施例，对本发明的内容做进一步的解释和说明。
一种圆筒形无菌检测培养管，其为玻璃材质，其内壁附着无菌检测反应膜；无菌检测反应膜先固化在无菌检测培养管内壁，不覆盖全部培养管，留有一部分便于观察检测液体是否浑浊。
一种无菌检测反应膜，其为可变色的无菌检测反应膜。
此外，所述无菌检测培养管还可是方形结构，不应限于上述的圆筒形结构；其材质还可是聚苯乙烯材质，不应限于上述玻璃材质。
无菌检测反应膜制备实施例
本发明无菌检测反应膜的制备方法：
实施例1
（1）将100份的聚甲基硅氧烷、100份的正己烷，充分搅拌混合均匀，得到检测液A；
（2）向上述检测液A中，依次加入20g/L的对-硝基酚，1份的二月桂肉酸丁基锡，6份的正硅酸乙酯，调pH值为6.5-7.5，搅拌均匀，得到检测液B；
（3）将上述检测液B注入倾斜的培养管，使之附着在培养管内壁，得到无菌检测反应膜，为样品1。
实施例2
（1）将80份的聚甲基硅氧烷、80份的正己烷，充分搅拌混合均匀，得到检测液A；
（2）向上述检测液A中，依次加入50g/L的酚酞，1.5份的二丁基锡二月桂酸酯，10份的正硅酸甲酯，调pH值为6.5-7.5，搅拌均匀，得到检测液B；
（3）将上述检测液B注入倾斜的培养管，使之附着在培养管内壁，得到无菌检测反应膜，为样品2。
实施例3
（1）将120份的聚甲基硅氧烷、120份的正己烷，充分搅拌混合均匀，得到检测液A；
（2）向上述检测液A中，依次加入30g/L的百里酚酞，0.2份的二(十二烷基硫)二丁基锡，2份的三甲氧基硅烷，调pH值为6.5-7.5，搅拌均匀，得到检测液B；
（3）将上述检测液B注入倾斜的培养管，使之附着在培养管内壁，得到无菌检测反应膜，为样品3。
实施例4
（1）将90份的聚甲基硅氧烷、90份的正己烷，充分搅拌混合均匀，得到检测液A；
（2）向上述检测液A中，依次加入10g/L的α-萘酚酞，0.8份的二辛基锡，6份的对甲苯磺酸，调pH值为6.5-7.5，搅拌均匀，得到检测液B；
（3）将上述检测液B注入倾斜的培养管，使之附着在培养管内壁，得到无菌检测反应膜，为样品4。
实施例5
（1）将110份的聚甲基硅氧烷、110份的正己烷，充分搅拌混合均匀，得到检测液A；
（2）向上述检测液A中，依次加入1g/L的酚红，0.2份的二丁基锡，2份的对甲苯磺酰氯，调pH值为6.5-7.5，搅拌均匀，得到检测液B；
（3）将上述检测液B注入倾斜的培养管，使之附着在培养管内壁，得到无菌检测反应膜，为样品5。
此外，聚甲基硅氧烷在80-120份的范围内取任意值、正己烷在80-120份的范围内取任意值、显色剂在1-50g/L的范围内取任意值、催化剂在0.2-1.5份的范围内取任意值、交联剂在2-10份的范围内取任意值均可形成其他新的实施例，不应局限于上述实施例列举的情况；显色剂还可选自甲酚红、溴酚蓝、百里酚蓝、溴甲酚紫、溴甲酚绿、麝香草酚蓝、甲酚红、二甲苯酚蓝或间甲酚紫中的任一个；催化剂还可选自二烷基锡二马来酸酯、二硫醇烷基锡、二丁基锡二月桂酸酯或硫醇二辛基锡中的任一个；偶联剂还可选自二丙烯酸-1，4-丁二醇酯、二甲基丙烯酸乙二醇酯或丙烯酸丁酯中的任一个，不应局限于上述实施例中列举的情况。
无菌检测实施例
向本发明的样品1-5的无菌检测培养管中装入相应的液体培养基，形成样品瓶1-5，高温灭菌后，加入检测样品，培养管中的无菌检测反应膜随着培养基的pH值变化，其颜色由原始的蓝黑色向棕黄色变化；当pH值变化，引起无菌检测反应膜颜色变化时，表明培养基中有微生物生长，即所加样品无菌检测不合格；当无菌检测反应膜颜色无变化时，表明培养基中无微生物生长，即所加样品无菌检测合格。
本发明中药品无菌检测实验的观察时间为7天，具体无菌检测结果见表1。
表1 实施例1-5无菌检测结果
Figure DEST_PATH_IMAGE001
由表1无菌检测现象及结果可知，本发明的无菌检测反应膜附着在无菌检测培养管中，利用本发明的无菌检测方法，对药品带菌情况的检测，无论是检测时间，还是检测准确度上都明显好于现有技术中的浑浊度判断法。
需要注意的上述实施例仅是本发明的较佳实施例，并不是全部的实施例，应当理解，上述实施例仅是对本发明的进一步解释和说明，并不是用于限制本发明；凡是在本发明的构思基础上，进行的任何不具创造性的简单修改或替换，均应视为落入本发明的保护范围内。

Claims (9)

1.一种无菌检测培养管，其特征在于：其内壁附着无菌检测反应膜；
所述无菌检测反应膜通过如下方法制备：
（1）将80-120份的聚甲基硅氧烷、80-120份的正己烷，充分搅拌混合均匀，得到检测液A；
（2）向上述检测液A中，依次加入1-50g/L的显色剂，0.2-1.5份的催化剂，2-10份的交联剂，调pH值为6.5-7.5，搅拌均匀，得到检测液B；
（3）将上述检测液B注入倾斜的培养管，使之附着在培养管内壁，形成无菌检测反应膜；
所述交联剂为正硅酸乙酯、正硅酸甲酯、三甲氧基硅烷，对甲苯磺酸、对甲苯磺酰氯、二丙烯酸-1，4-丁二醇酯、二甲基丙烯酸乙二醇酯或丙烯酸丁酯。
2.根据权利要求1所述的一种无菌检测培养管，其特征在于：所述无菌检测培养管具有圆筒形或方形的结构。
3.根据权利要求1所述的一种无菌检测培养管，其特征在于：所述无菌检测培养管为聚苯乙烯材质或玻璃材质。
4.一种权利要求1-3任一所述无菌检测培养管中的无菌检测反应膜，其特征在于：其为可变色的无菌检测反应膜。
5.一种如权利要求4所述无菌检测反应膜的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）将80-120份的聚甲基硅氧烷、80-120份的正己烷，充分搅拌混合均匀，得到检测液A；
（2）向上述检测液A中，依次加入1-50g/L的显色剂，0.2-1.5份的催化剂，2-10份的交联剂，调pH值为6.5-7.5，搅拌均匀，得到检测液B；
（3）将上述检测液B注入倾斜的培养管，使之附着在培养管内壁，形成无菌检测反应膜。
6.根据权利要求5所述的无菌检测反应膜的制备方法，其特征在于：所述显色剂为对-硝基酚、酚酞、百里酚酞、α-萘酚酞、酚红、甲酚红、溴酚蓝、百里酚蓝、溴甲酚紫、溴甲酚绿、麝香草酚蓝、二甲苯酚蓝或间甲酚紫。
7.根据权利要求5所述的无菌检测反应膜的制备方法，其特征在于：所述催化剂为二丁基锡二月桂酸酯、二(十二烷基硫)二丁基锡、二辛基锡、二丁基锡、二烷基锡二马来酸酯、二硫醇烷基锡或硫醇二辛基锡。
8.根据权利要求5所述的无菌检测反应膜的制备方法，其特征在于：所述交联剂为正硅酸乙酯、正硅酸甲酯、三甲氧基硅烷，对甲苯磺酸、对甲苯磺酰氯、二丙烯酸-1，4-丁二醇酯、二甲基丙烯酸乙二醇酯或丙烯酸丁酯。
9.一种用权利要求1-3任一所述无菌检测培养管进行无菌检测的方法，其特征在于：向所述无菌检测培养管中装入相应的液体培养基，高温灭菌后，加入检测样品，所述无菌检测反应膜随着培养基的pH值变化，其颜色发生变化；当pH值变化，引起无菌检测反应膜颜色变化时，表明培养基中有微生物生长，即所加样品无菌检测不合格；当无菌检测反应膜颜色无变化时，表明培养基中无微生物生长，即所加样品无菌检测合格。
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