CN107074934A - 在乳杆菌中表达针对沙门氏菌的单链抗体 - Google Patents

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Abstract

本公开内容涉及抑制沙门氏菌(Salmonella)血清变型的生长和群集的骆驼科抗体。本公开内容还涉及经修饰的乳杆菌(Lactobacillus),其作为用于控制宿主生物体中的沙门氏菌的递送媒介物。

Description

在乳杆菌中表达针对沙门氏菌的单链抗体
技术领域
本公开内容涉及微生物学和基因工程的领域。本公开内容提供了针对沙门氏菌(salmonella)的重组嵌合蛋白和抗体。
发明背景
借助于乳酸细菌(LAB),人类已经开发和使用发酵过的食品,所述乳酸细菌(LAB)已经被归类为益生菌(probiotics)且被美国食品和药品管理局(USFDA)分类为公认为安全的(GRAS)。除了被认为在食品工业具有强大作用(powerhouses)以外,LAB作为益生菌生物继续成为大量兴趣的焦点,因为它们还已经被赋予特定的健康促进功能,它们通过调节宿主的肠环境来执行所述功能。
它们的附着于胃肠道的某些区域的能力已经引起挖掘这样的微生物作为递送生物活性化合物和疫苗的媒介物的潜力的兴趣(Pouwels等人,Int J Food Microbiol.,1998,41,155-157)。
大多数传染性生物在粘膜表面处进入,在开发引起针对各种病原体的有效粘膜免疫应答的疫苗中存在大量兴趣。LAB(其为安全的和非病原性的)对于异种抗原和治疗性蛋白是优良粘膜递送媒介物。许多LAB产生细胞外多糖,并且在它们的生物合成、结构和功能以及工程化(包括这些分子在宿主微生物相互作用中的重要性)方面,这些已经得到广泛研究(Leeber等人,Microbial Biotechnology,2011,4(3),368-374)。
骆驼科产生缺乏轻链的功能性抗体,其单个N-端结构域完全能够结合抗原并可以被乳酸细菌递送到粘膜表面上以用于各种治疗干预。这些骆驼科重链抗体(VHH)片段的独特物理化学和药理学性能已经导致它作为新生代治疗剂的预期应用。VHH片段的结合蛋白表面上的裂缝和空洞的显著偏好提供通过细胞表面蛋白(诸如在不同生物活性中涉及的受体、离子通道)的活性调节(Wei等人,PLoS ONE,2011,6(12))而开发选择性治疗剂(Paalanen等人,Eur J Pharm Sci.,2011,月(4),332-9)的可能性。此外,VHH片段分子识别深深隐藏在各种病原体的裂缝中的隐藏表位(Forsman等人,J.Virol.,2008,82(24),12069-12081)且具有高结构稳定性和可溶性(Muyldermans等人,Biochem Sci.,2001,26,230-235;Philipp等人,Nat.Biotechnol.,2005,23(9),1126-1136)。
沙门菌病(Salmonellosis)是全世界最常见的食物传播的疾病和胃肠感染。沙门氏菌是美国、欧洲和世界上食品传播的疾病的第二大原因,每年造成多达13亿病例。除了健康后果以外,具有约2600个已有血清变型的沙门氏菌种被鉴别为属于6个亚种(Coburn等人,Immunology and Cell Biology,2007,85,112-118;Ochman等人,EXS,1994,69,479-493)。亚种进一步细分成通过它们的鞭毛、碳水化合物和脂多糖(LPS)结构来区分的血清变型。肠道沙门氏菌(S.enteric)种是通常经口获得的病原体,其造成四种主要综合征之一:肠热病(Enteric fever)(伤寒(typhoid))、小肠结肠炎(enterocolitis)/腹泻(diarrhea)、菌血症(bacteremia)和慢性无症状的携带者(carriage)。疾病表现依赖于宿主易感性和传染性的肠道沙门氏菌血清变型(Fierer等人,J Clin Invest.,2001,107,775-780)。突出的炎症性疾病结果是伤寒和小肠结肠炎的一个共同特征。感染的不同病理-生物学结果主要是由于在感染的不同阶段沙门氏菌种与不同组织处的宿主防御机制的相互作用。这导致显著的宿主免疫病理学、发病率和死亡率。
沙门氏菌是食品生产动物的一种重要病原体,并且这些动物是沙门菌病的主要来源。它是与家禽、生肉、蛋、奶和乳制品、新鲜农产品如水果和蔬菜等有关的最常分离的食品传播的病原体之一。近年来,由新鲜水果和蔬菜的污染造成的食品传播的暴发的发生率已经增加且成为工业化国家中的一个巨大担忧。
用于控制沙门菌病的疫苗的主要类型是杀死的细菌疫苗、亚单位疫苗和活减毒疫苗。活疫苗和杀死的疫苗的对比分析揭示,杀死的疫苗经常不太有效,因为它们包含导致不适当保护性免疫应答的表面抗原,它们不能在粘膜表面处引起分泌型免疫应答,所述分泌型免疫应答在抑制病原体在粘膜表面处的群集方面是关键性的。通过使用不同佐剂克服所有这些缺点的尝试仅导致部分成功(Smith,J Hyg.,1956,54,419-432;Singh等人,HaryanaVet.,2005,44,1-12;Baljer等人,J Med Vet.,1986,33,206-212)。
活疫苗在沙门菌病的根除中的效用是有限的,因为存在沙门氏菌的多种血清变型,并且从任何一种血清变型制成的疫苗不会赋予针对另一种血清变型的交叉保护。所述生物能够在不同的动物物种中适应,同时仍然维持它们的动物传染潜力和种间转移潜力。此外,已经开发了针对一些适应宿主的和常见的血清变型(在宿主主要来源中)的有效疫苗,但是它们的应用已经导致其它血清变型的出现。这已经被动物和农产品的国际贸易和运输进一步复杂化(compound),其已经导致多种血清变型跨过大陆边界。因而,本领域中需要开发抗-沙门氏菌生物制品,且合乎需要的是开发和提供通过治疗和/或预防来控制和掌控肠病原性沙门氏菌的替代方式。
EP1066375B1涉及转化的乳杆菌(Lactobacillus)种作为疫苗递送媒介物的用途。
US2008/0206233 A1涉及适合用于控制感染、特别是胃肠道感染的VHH或VNAR型的重链免疫球蛋白或其片段或结构域抗体(dAb)。
US2009/0226418 A1涉及食品或药物制剂,其包含在肠中有活性的抗体或抗体片段和独立于它们的抗体或抗体片段的益生菌微生物。
发明概述
本公开内容的一个方面涉及包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段。
本公开内容的一个方面涉及在表面上表达一种或多种嵌合蛋白的重组宿主细胞,其中所述嵌合蛋白包含(a)至少一种包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,和(b)至少一种在所述重组宿主细胞的表面上表达的蛋白,其中所述在重组宿主细胞中表达的表面蛋白是MuB或CnBP。
本公开内容的一个方面涉及包含多核苷酸序列的重组DNA构建体,所述多核苷酸序列编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段。
本公开内容的一个方面涉及包含重组DNA构建体的重组DNA载体,所述重组DNA构建体包含编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表 面蛋白的单链抗体或其片段的多核苷酸序列。
本公开内容的一个方面涉及包含重组DNA构建体的重组宿主细胞,所述重组DNA构建体包含编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段的多核苷酸序列。
本公开内容的一个方面涉及一种重组宿主细胞,其包含含有重组DNA构建体的重组DNA载体,所述重组DNA构建体包含编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段的多核苷酸序列。
本公开内容的一个方面涉及嵌合蛋白,其包含选自由SEQ ID NO:93、95、97、99、101、130、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159、161、163、165、167、169、171、173、175、177、179、181、183、185、187、189、191、193、195、197、199、201、203、205、207、209、211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、241和243组成的组的氨基酸序列。
本公开内容的一个方面涉及包含重组宿主细胞的食品,所述重组宿主细胞包含含有3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段。
本公开内容的一个方面涉及包含重组宿主细胞的食品,所述重组宿主细胞包含含有重组DNA构建体的重组DNA载体,所述重组DNA构建体包含编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段的多核苷酸序列。
本公开内容的一个方面涉及包含重组宿主细胞的食品,所述重组宿主细胞包含重组DNA构建体,所述重组DNA构建体包含编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段的多核苷酸序列。
以下公开内容的一个方面涉及一种制剂,所述制剂包含含有3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,另外由稀释剂、赋形剂或载体组成。
本公开内容的一个方面涉及抑制沙门氏菌的生长的方法,所述方法包括使包含单链抗体或其片段的食品与含有沙门氏菌的样品接触。
本公开内容的一个方面涉及抑制沙门氏菌的活性的方法,所述方法包 括使包含单链抗体或其片段的食品与含有沙门氏菌的样品接触。
本公开内容的一个方面涉及分离的乳杆菌菌株罗伊乳杆菌(Lactobacillusreuteri)1LB7,其保藏在微生物典型培养物中心和基因库(Microbial Type CultureCollection and Gene Bank,MTCC),登录号为5894,保藏日期为2014年2月26日,其用于控制畜牧业中的肠沙门氏菌群体。
本概述不意在鉴别要求保护的主题的基本特征,也不意在用于确定或限制要求保护的主题的范围。
附图简述
以下附图形成本说明书的部分,且为了进一步举例说明本公开内容的方面而包括在内。通过参考附图并结合本文提供的具体实施方案的详细描述,可以更好地理解本公开内容。
图1描绘了根据本公开内容的一个实施方案,基于奶的制剂中分泌型抗-沙门氏菌骆驼科VHH抗体片段对沙门氏菌的生长的影响。
图2描绘了根据本公开内容的一个实施方案,基于蛋的制剂中分泌型抗-沙门氏菌骆驼科VHH抗体片段对沙门氏菌的生长的影响。
图3描绘了根据本公开内容的一个实施方案,热灭活的经修饰的罗伊乳杆菌(在其表面上表达抗-沙门氏菌骆驼科VHH抗体片段)对沙门氏菌的生长的影响。
图4描绘了根据本公开内容的一个实施方案,分泌型抗-沙门氏菌骆驼科VHH抗体片段对鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)的生长的影响。
图5描绘了根据本公开内容的一个实施方案,分泌型抗-沙门氏菌骆驼科VHH抗体片段对鸡沙门氏菌(Salmonella gallinarium)的生长的影响。
图6描绘了根据本公开内容的一个实施方案,分泌型抗-沙门氏菌骆驼科VHH抗体片段对新港沙门氏菌(Salmonella newport)的生长的影响。
图7描绘了根据本公开内容的一个实施方案,分泌型抗-沙门氏菌骆驼科VHH抗体片段对奥博尼沙门氏菌(Salmonella abony)的生长的影响。
图8描绘了根据本公开内容的一个实施方案,用于克隆的载体图谱。
发明的详细描述
本领域技术人员将意识到,本文描述的发明可以进行不同于具体描述的那些的变化和改变。要理解,本文描述的发明包括所有这样的变化和改变。本发明还包括个别地或共同地在本说明书中提及或指示的所有这样的步骤、特征、组合物和化合物,以及所述步骤或特征中的任意两个或多个的任意组合与所有组合。
定义
为了方便,在进一步描述本发明之前,将在说明书、实施例中采用的某些术语汇集在这里。这些定义应当考虑本公开内容的其它部分并如本领域技术人员所理解的进行解读。除非另外定义,在本文中使用的所有技术和科学术语都具有与本领域普通技术人员通常理解的含义相同的含义。贯穿本说明书使用的术语如下定义,除非在特定实例中另有限制。
如在本说明书和权利要求书中使用的,单数形式“一个(a)”、“一个(an)”和“所述(the)”包括复数指示物,除非上下文另外明确指明。
本公开内容的范围不被本文描述的具体实施方案限制,所述具体实施方案仅意在用于例证的目的。
在功能上等同的过程和方法显然是在如本文中所述的本公开内容的范围内。
序列的简单描述
SEQ ID NO:1显示了抗体A、I、J、K和L的CDR1氨基酸序列。
SEQ ID NO:2显示了抗体A的CDR2氨基酸序列。
SEQ ID NO:3显示了抗体A、B、I、J、K和L的CDR3氨基酸序列。
SEQ ID NO:4显示了抗体B的CDR1氨基酸序列。
SEQ ID NO:5显示了抗体B的CDR2氨基酸序列。
SEQ ID NO:6显示了抗体C的CDR1氨基酸序列。
SEQ ID NO:7显示了抗体C、E、F和G的CDR2氨基酸序列。
SEQ ID NO:8显示了抗体C、E、F和G的CDR3氨基酸序列。
SEQ ID NO:9显示了抗体D的CDR1氨基酸序列。
SEQ ID NO:10显示了抗体D的CDR2氨基酸序列。
SEQ ID NO:11显示了抗体D的CDR3氨基酸序列。
SEQ ID NO:12显示了抗体E、F和G的CDR1氨基酸序列。
SEQ ID NO:13显示了抗体H、N和O的CDR1氨基酸序列。
SEQ ID NO:14显示了抗体H、N和O的CDR2氨基酸序列。
SEQ ID NO:15显示了抗体H、N和O的CDR3氨基酸序列。
SEQ ID NO:16显示了抗体I的CDR2氨基酸序列。
SEQ ID NO:17显示了抗体J和L的CDR2氨基酸序列。
SEQ ID NO:18显示了抗体K的CDR2氨基酸序列。
SEQ ID NO:19显示了抗体M的CDR1氨基酸序列。
SEQ ID NO:20显示了抗体M的CDR2氨基酸序列。
SEQ ID NO:21显示了抗体M的CDR3氨基酸序列。
SEQID NO:22显示了抗体P的CDR1氨基酸序列。
SEQID NO:23显示了抗体P的CDR2氨基酸序列。
SEQID NO:24显示了抗体P的CDR3氨基酸序列。
SEQ ID NO:25显示了抗体Q、R和S的CDR1氨基酸序列。
SEQ ID NO:26显示了抗体Q、R和S的CDR2氨基酸序列。
SEQ ID NO:27显示了抗体Q、R和S的CDR3氨基酸序列。
SEQ ID NO:28显示了抗体A、I、J、K和L的CDR1核苷酸序列。
SEQ ID NO:29显示了抗体A的CDR2核苷酸序列。
SEQ ID NO:30显示了抗体A、B、I、J、K和L的CDR3核苷酸序列。
SEQ ID NO:31显示了抗体B的CDR1核苷酸序列。
SEQ ID NO:32显示了抗体B的CDR2核苷酸序列。
SEQ ID NO:33显示了抗体C的CDR1核苷酸序列。
SEQ ID NO:34显示了抗体C、E、F和G的CDR2核苷酸序列。
SEQ ID NO:35显示了抗体C、E、F和G的CDR3核苷酸序列。
SEQ ID NO:36显示了抗体D的CDR1核苷酸序列。
SEQ ID NO:37显示了抗体D的CDR2核苷酸序列。
SEQ ID NO:38显示了抗体D的CDR3核苷酸序列。
SEQ ID NO:39显示了抗体E、F和G的CDR1核苷酸序列。
SEQ ID NO:40显示了抗体H、N和O的CDR1核苷酸序列。
SEQ ID NO:41显示了抗体H、N和O的CDR2核苷酸序列。
SEQ ID NO:42显示了抗体H、N和O的CDR3核苷酸序列。
SEQ ID NO:43显示了抗体I的CDR2核苷酸序列。
SEQ ID NO:44显示了抗体J和L的CDR2核苷酸序列。
SEQ ID NO:45显示了抗体K的CDR2核苷酸序列。
SEQ ID NO:46显示了抗体M的CDR1核苷酸序列。
SEQ ID NO:47显示了抗体M的CDR2核苷酸序列。
SEQ ID NO:48显示了抗体M的CDR3核苷酸序列。
SEQ ID NO:49显示了抗体P的CDR1核苷酸序列。
SEQ ID NO:50显示了抗体P的CDR2核苷酸序列。
SEQID NO:51显示了抗体P的CDR3核苷酸序列。
SEQ ID NO:52显示了抗体Q、R和S的CDR1核苷酸序列。
SEQ ID NO:53显示了抗体Q、R和S的CDR2核苷酸序列。
SEQ ID NO:54显示了抗体Q、R和S的CDR3核苷酸序列。
SEQ ID NO:55显示了抗体A的氨基酸序列。
SEQ ID NO:56显示了抗体A的核苷酸序列。
SEQ ID NO:57显示了抗体B的氨基酸序列。
SEQ ID NO:58显示了抗体B的核苷酸序列。
SEQ ID NO:59显示了抗体C的氨基酸序列。
SEQ ID NO:60显示了抗体C的核苷酸序列。
SEQ ID NO:61显示了抗体D的氨基酸序列。
SEQ ID NO:62显示了抗体D的核苷酸序列。
SEQ ID NO:63显示了抗体E的氨基酸序列。
SEQ ID NO:64显示了抗体E的核苷酸序列。
SEQ ID NO:65显示了抗体F的氨基酸序列。
SEQ ID NO:66显示了抗体F的核苷酸序列。
SEQ ID NO:67显示了抗体G的氨基酸序列。
SEQ ID NO:68显示了抗体G的核苷酸序列。
SEQ ID NO:69显示了抗体H的氨基酸序列。
SEQ ID NO:70显示了抗体H的核苷酸序列。
SEQ ID NO:71显示了抗体I的氨基酸序列。
SEQ ID NO:72显示了抗体I的核苷酸序列。
SEQ ID NO:73显示了抗体J的氨基酸序列。
SEQ ID NO:74显示了抗体J的核苷酸序列。
SEQ ID NO:75显示了抗体K的氨基酸序列。
SEQ ID NO:76显示了抗体K的核苷酸序列。
SEQ ID NO:77显示了抗体L的氨基酸序列。
SEQ ID NO:78显示了抗体L的核苷酸序列。
SEQ ID NO:79显示了抗体M的氨基酸序列。
SEQ ID NO:80显示了抗体M的核苷酸序列。
SEQ ID NO:81显示了抗体N的氨基酸序列。
SEQ ID NO:82显示了抗体N的核苷酸序列。
SEQ ID NO:83显示了抗体O的氨基酸序列。
SEQ ID NO:84显示了抗体O的核苷酸序列。
SEQ ID NO:85显示了抗体P的氨基酸序列。
SEQ ID NO:86显示了抗体P的核苷酸序列。
SEQ ID NO:87显示了抗体Q的氨基酸序列。
SEQ ID NO:88显示了抗体Q的核苷酸序列。
SEQ ID NO:89显示了抗体R的氨基酸序列。
SEQ ID NO:90显示了抗体R的核苷酸序列。
SEQ ID NO:91显示了抗体S的氨基酸序列。
SEQ ID NO:92显示了抗体S的核苷酸序列。
SEQ ID NO:93、131和169显示了包含抗体A和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:94、132和170显示了编码包含抗体A和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:95、133和171显示了包含抗体B和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:96、134和172显示了编码包含抗体B和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:97、135和173显示了包含抗体C和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:98、136和174显示了编码包含抗体C和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:99、137和175显示了包含抗体D和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:100、138和176显示了编码包含抗体D和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:101、139和177显示了包含抗体E和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:102、140和178显示了编码包含抗体E和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:103、141和179显示了包含抗体F和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:104、142和180显示了编码包含抗体F和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:105、143和181显示了包含抗体G和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:106、144和182显示了编码包含抗体G和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:107、145和183显示了包含抗体H和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:108、146和184显示了编码包含抗体H和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:109、147和185显示了包含抗体I和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:110、148和186显示了编码包含抗体I和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:111、149和187显示了包含抗体J和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:112、150和188显示了编码包含抗体J和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:113、151和189显示了包含抗体K和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:114、152和190显示了编码包含抗体K和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:115、153和191显示了包含抗体L和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:116、154和192显示了编码包含抗体L和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:117、155和193显示了包含抗体M和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:118、156和194显示了编码包含抗体M和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:119、157和195显示了包含抗体N和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:120、158和196显示了编码包含抗体N和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:121、159和197显示了包含抗体O和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:122、160和198显示了编码包含抗体O和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:123、161和199显示了包含抗体P和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:124、162和200显示了编码包含抗体P和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:125、163和201显示了包含抗体Q和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:126、164和202显示了编码包含抗体Q和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:127、165和203显示了包含抗体R和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:128、166和204显示了编码包含抗体R和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:129、167和205显示了包含抗体S和MuB的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:130、168和206显示了编码包含抗体S和MuB的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:207显示了包含抗体A和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:208显示了编码包含抗体A和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:209显示了包含抗体B和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:210显示了编码包含抗体B和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:211显示了包含抗体C和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:212显示了编码包含抗体C和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:213显示了包含抗体D和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:214显示了编码包含抗体D和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:215显示了包含抗体E和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:216显示了编码包含抗体E和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:217显示了包含抗体F和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:218显示了编码包含抗体F和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:219显示了包含抗体G和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:220显示了编码包含抗体G和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:221显示了包含抗体H和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:222显示了编码包含抗体H和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:223显示了包含抗体I和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:224显示了编码包含抗体I和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:225显示了包含抗体J和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:226显示了编码包含抗体J和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:227显示了包含抗体K和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:228显示了编码包含抗体K和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:229显示了包含抗体L和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:230显示了编码包含抗体L和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:231显示了包含抗体M和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:232显示了编码包含抗体M和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:233显示了包含抗体N和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:234显示了编码包含抗体N和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:235显示了包含抗体O和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:236显示了编码包含抗体O和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:237显示了包含抗体P和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:237显示了编码包含抗体P和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:239显示了包含抗体Q和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:240显示了编码包含抗体Q和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:241显示了包含抗体R和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:242显示了编码包含抗体R和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:243显示了包含抗体S和CnBP的嵌合蛋白内的连续氨基酸序列。
SEQ ID NO:244显示了编码包含抗体S和CnBP的嵌合蛋白的核苷酸序列内的连续核苷酸序列。
SEQ ID NO:245显示了用于鉴别乳杆菌的正向引物序列。
SEQ ID NO:246显示了用于鉴别乳杆菌的反向引物序列。
SEQ ID NO:247显示了用于鉴别罗伊乳杆菌的正向引物序列。
SEQ ID NO:248显示了用于鉴别罗伊乳杆菌的反向引物序列。
SEQ ID NO:249显示了用于扩增1.7kb部分MuB基因片段的正向引物序列。
SEQ ID NO:250显示了用于扩增1.7kb部分MuB基因片段的反向引物序列。
SEQ ID NO:251显示了用于扩增整个1.08kb CnBP基因的正向引物序列。
SEQ ID NO:252显示了用于扩增整个1.08kb CnBP基因的反向引物序列。
SEQ ID NO:253显示了用于扩增900bp VHH大***片段的正向引物序列。
SEQ ID NO:254显示了用于扩增900bp VHH大***片段的反向引物序列。
SEQ ID NO:255显示了4.7kb MuB基因反向PCR产物的正向引物序列。
SEQ ID NO:256显示了4.7kb MuB基因反向PCR产物的反向引物序列。
SEQ ID NO:257显示了***MuB基因中的400bp VHH***片段的正向引物序列。
SEQ ID NO:258显示了***MuB基因中的400bp VHH***片段的反向引物序列。
SEQ ID NO:259显示了没有限制位点的1.7kb罗伊乳杆菌(L.reuteri)MuB基因片段的正向引物序列。
SEQ ID NO:260显示了没有限制位点的1.7kb罗伊乳杆菌MuB基因片段的反向引物序列。
SEQ ID NO:261显示了4.1kb CnBP基因反向PCR产物的正向引物序列。
SEQ ID NO:262显示了4.1kb CnBP基因反向PCR产物的反向引物序列。
SEQ ID NO:263显示了***CnBP基因中的400bp VHH***片段的正向引物序列。
SEQ ID NO:264显示了***CnBP基因中的400bp VHH***片段的反向引物序列。
SEQ ID NO:265显示了1.4kb CnBP基因的磷酰化正向引物序列。
SEQ ID NO:266显示了1.4kb CnBP基因的磷酰化反向引物序列。
SEQ ID NO:267显示了编码沙门氏菌FimH蛋白的1kb核苷酸片段的正向引物序列。
SEQ ID NO:268显示了编码沙门氏菌FimH蛋白的1kb核苷酸片段序列的反向引物序列。
SEQ ID NO:269显示了编码沙门氏菌OmPD蛋白的1.1kb核苷酸片段的正向引物序列。
SEQ ID NO:270显示了编码沙门氏菌OmPD蛋白的1.1kb核苷酸片段的反向引物序列。
SEQ ID NO:271显示了SEQ ID NO:267和268中所示的引物产生的扩增子的核苷酸序列。
SEQ ID NO:272显示了SEQ ID NO:269和270中所示的引物产生的扩增子的核苷酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,所述互补决定区具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:2和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:4、对于CDR2为SEQ ID NO:5和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(c)对于CDR1为SEQ ID NO:6、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:9、对于CDR2为SEQ ID NO:10和对于CDR3为SEQ ID NO:11;(e)对于CDR1为SEQID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15;(g)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:16和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(h)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQID NO:18和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:19、对于CDR2为SEQ IDNO:20和对于CDR3为SEQ ID NO:21;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:22,对于CDR2为SEQ ID NO:23和对于CDR3为SEQ ID NO:24;和(1)对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,所述互补决定区由选自由以下各项组成的组的多核苷酸序列编码:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:29和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:31、对于CDR2为SEQ ID NO:32和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(c)对于CDR1为SEQ ID NO:33、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:36、对于CDR2为SEQ ID NO:37和对于CDR3为SEQ ID NO:38;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42;(g)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:43和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(h)对于CDR1为SEQID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:44和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(i)对于CDR1为SEQ IDNO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:45和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:46、对于CDR2为SEQ ID NO:47和对于CDR3为SEQ ID NO:48;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:49、对于CDR2为SEQ ID NO:50和对于CDR3为SEQ ID NO:51;和(1)对于CDR1为SEQ ID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体A的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体A具有由如SEQ ID NO:56所示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:55所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体B的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体B具有由如SEQ ID NO:58所示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:57所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体C的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体C具有由如SEQ ID NO:60所 示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:59所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体D的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体D具有由如SEQ ID NO:62所示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:61所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体E的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体E具有由如SEQ ID NO:64所示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:63所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体E的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体E具有由如SEQ ID NO:66所示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:65所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体F的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体F具有由如SEQ ID NO:68所示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:67所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体G的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体G具有由如SEQ ID NO:70所示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:69所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体H的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体H具有由如SEQ ID NO:72所示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:71所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体I的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体I具有由如SEQ ID NO:74所示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:73所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体J的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体J具有由如SEQ ID NO:76所示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:75所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体K的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体K具有由如SEQ ID NO:78所示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:77所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体L的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体L具有由如SEQ ID NO:80所 示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:79所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体M的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体M具有由如SEQ ID NO:82所示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:81所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体N的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体N具有由如SEQ ID NO:84所示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:83所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体O的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体O具有由如SEQ ID NO:86所示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:85所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体P的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体P具有由如SEQ ID NO:88所示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:87所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体Q的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体Q具有由如SEQ ID NO:90所示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:89所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体R的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体R具有由如SEQ ID NO:92所示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:91所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了命名为抗体S的、针对全细胞沙门氏菌的单链抗体或其片段,所述抗体S具有由如SEQ ID NO:94所示的多核苷酸序列编码的如SEQID NO:93所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了结合沙门氏菌的FimH蛋白的、具有如SEQID NO:55、57、59、63、65、67、71、73、75、77或79所示的氨基酸序列的单链抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了结合沙门氏菌的FimH蛋白的、由如SEQID NO:56、58、60、64、66、68、72、74、76、78或80所示的核苷酸序列编码的单链抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了结合沙门氏菌的OmPD蛋白的、具有如SEQID NO:61、69、81、83或85所示的氨基酸序列的单链 抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了结合沙门氏菌的OmPD蛋白的、由如SEQID NO:62、70、82、84或86所示的核苷酸序列编码的单链抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了结合全细胞沙门氏菌的、具有如SEQ IDNO:87、89或91所示的氨基酸序列的单链抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了结合全细胞沙门氏菌的、由如SEQ IDNO:88、90或92所示的核苷酸序列编码的单链抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有选自由SEQ ID NO:55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89和91组成的组的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由选自由SEQ ID NO:56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90和92组成的组的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:55所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:2和对于CDR3为SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:57所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:4、对于CDR2为SEQ ID NO:5和对于CDR3为SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:59所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:6、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:61所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:9、对于CDR2为SEQ ID NO:10和对于CDR3为SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:63所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:65所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:67所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:69所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:71所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:16和对于CDR3为SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:73所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:75所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:18和对于CDR3为SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:77所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:79所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:19、对于CDR2为SEQ ID NO:20和对于CDR3为SEQ ID NO:21所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:81所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:83所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:85所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:22、对于CDR2为SEQ ID NO:23和对于CDR3为SEQ ID NO:24所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:87所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:89所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有如SEQ ID NO:91所示的氨基酸序列的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27所示的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:56所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:29和对于CDR3为SEQ ID NO:30所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:58所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:31、对于CDR2为SEQ ID NO:32和对于CDR3为SEQ ID NO:30所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:60所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:33、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:62所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:36、对于CDR2为SEQ ID NO:37和对于CDR3为SEQ ID NO:38所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:64所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:66所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:68所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:70所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:72所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:43和对于CDR3为SEQ ID NO:30所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:74所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:44和对于CDR3为SEQ ID NO:30所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:76所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:45和对于CDR3为SEQ ID NO:30所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:78所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:44和对于CDR3为SEQ ID NO:30所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:80所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:46、对于CDR2为SEQ ID NO:47和对于CDR3为SEQ ID NO:48所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:82所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:84所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:86所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:49、对于CDR2为SEQ ID NO:50和对于CDR3为SEQ ID NO:51所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:88所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:90所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由如SEQ ID NO:92所示的多核苷酸序列编码的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段具有3个互补决定区,所述互补决定区由如对于CDR1为SEQ ID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54所示的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了结合沙门氏菌的单链抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了结合沙门氏菌中的FimH蛋白的单链抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有选自由SEQ ID NO:55、57、59、63、65、67、71、73、75、77和79组成的组的氨基酸序列的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段结合沙门氏菌中的FimH蛋白。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由选自由SEQ ID NO:56、58、60、64、66、68、72、76、78和80组成的组的多核苷酸序列编码的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段结合沙门氏菌中的FimH蛋白。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了结合沙门氏菌中的OmPD蛋白的单链抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了具有选自由SEQ ID NO:61、69、81、83和85组成的组的氨基酸序列的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段结合沙门氏菌中的OmPD蛋白。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了由选自由SEQ ID NO:62、70、82、84和86组成的组的多肽序列编码的单链抗体或其片段,其中所述单链抗体或其片段结合沙门氏菌中的OmPD蛋白。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了结合沙门氏菌中的表面蛋白的单链抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了在表面上表达一种或多种嵌合蛋白的重组宿主细胞,所述嵌合蛋白包含:(a)至少一种包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,和(b)至少一种在所述重组宿主细胞的表面上表达的表面蛋白,其中所述在重组宿主细胞中表达的表面蛋白是MuB或CnBP。
在本公开内容的一个实施方案中,如本文中所述的嵌合蛋白在宿主基因组内编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了如本文中所述的重组宿主细胞,所述重组宿主细胞还包含一种或多种外源核酸序列,所述外源核酸序列编码另一种针对沙门氏菌表面蛋白的抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,所述在重组宿主细胞的表面上表达的蛋白是包含MuB和如本文中所述的抗体或其片段的嵌合蛋白。
在本公开内容的一个实施方案中,所述在重组宿主细胞的表面上表达的蛋白是包含CnBP和如本文中所述的抗体或其片段的嵌合蛋白。
在本公开内容的一个实施方案中,所述在重组宿主细胞的表面上表达的蛋白是两种不同的嵌合蛋白,各自包含CnBP或MuB和如本文中所述的抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,所述在表面上表达一种或多种嵌合蛋白的重组宿主细胞是乳杆菌属的成员。
在本公开内容的一个实施方案中,所述在表面上表达一种或多种嵌合蛋白的重组宿主细胞选自不限于以下各项的组:嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、嗜酸乳杆菌LAFTI L10、干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、干酪乳杆菌LAFTI L26、嗜酸乳杆菌DDS-1、嗜酸乳杆菌LA-5、嗜酸乳杆菌NCFM、嗜酸乳杆菌CD 1285、干酪乳杆菌431、干酪乳杆菌F19、干酪乳杆菌代田株(Lactobacillus casei Shirota)、类干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)、类干酪乳杆菌St11、约汉逊氏乳杆菌(Lactobacillusjohnsonii)、约汉逊氏乳杆菌Lal、乳酸乳杆菌(Lactobacillus lactis)、乳酸乳杆菌L1A、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、植物乳杆菌299v、罗伊乳杆菌、罗伊乳杆菌ATCC55730、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、鼠李糖乳杆菌ATCC53013、鼠李糖乳杆菌LB21、鼠李糖乳杆菌GR-1、罗伊乳杆菌RC-14、鼠李糖乳杆菌R011、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)和瑞士乳杆菌R0052。
在本公开内容的一个优选实施方案中,提供了在表面上表达一种或多种嵌合蛋白的重组宿主细胞,所述重组宿主细胞是罗伊乳杆菌。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含多核苷酸序列的重组DNA构建体,所述多核苷酸序列编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,所述互补决定区具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:2和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:4、对于CDR2为SEQ ID NO:5和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(c)对于CDR1为SEQ ID NO:6、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:9、对于CDR2为SEQ IDNO:10和对于CDR3为SEQ ID NO:11;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15;(g)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:16和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(h)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:18和对于CDR3为SEQ IDNO:3;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:19、对于CDR2为SEQ ID NO:20和对于CDR3为SEQ ID NO:21;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:22,对于CDR2为SEQ ID NO:23和对于CDR3为SEQ ID NO:24;和(1)对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含多核苷酸序列的重组DNA构建体,所述多核苷酸序列编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,所述互补决定区由选自由以下各项组成的组的多核苷酸序列编码:(a)对于CDR1为SEQ IDNO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:29和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:31、对于CDR2为SEQ ID NO:32和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(c)对于CDR1为SEQ ID NO:33、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:36、对于CDR2为SEQ ID NO:37和对于CDR3为SEQ ID NO:38;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42;(g)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQID NO:43和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(h)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ IDNO:44和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:45和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:46、对于CDR2为SEQ ID NO:47和对于CDR3为SEQ ID NO:48;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:49、对于CDR2为SEQ ID NO:50和对于CDR3为SEQ ID NO:51;和(1)对于CDR1为SEQ ID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含重组DNA构建体的重组DNA载体,所述重组DNA构建体包含编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段的多核苷酸序列,所述互补决定区具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:2和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:4、对于CDR2为SEQ ID NO:5和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(c)对于CDR1为SEQID NO:6、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:9、对于CDR2为SEQ ID NO:10和对于CDR3为SEQ ID NO:11;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15;(g)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQID NO:16和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(h)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:18和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:19、对于CDR2为SEQ ID NO:20和对于CDR3为SEQ ID NO:21;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:22,对于CDR2为SEQ ID NO:23和对于CDR3为SEQ ID NO:24;和(1)对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含重组DNA构建体的重组DNA载体,所述重组DNA构建体含有编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段的多核苷酸序列,所述互补决定区由选自由以下各项组成的组的多核苷酸序列编码:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:29和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:31、对于CDR2为SEQ ID NO:32和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(c)对于CDR1为SEQ ID NO:33、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:36、对于CDR2为SEQ ID NO:37和对于CDR3为SEQ ID NO:38;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;(f)对于CDR1为SEQID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42;(g)对于CDR1为SEQ IDNO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:43和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(h)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:44和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:45和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:46、对于CDR2为SEQ ID NO:47和对于CDR3为SEQ ID NO:48;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:49、对于CDR2为SEQ ID NO:50和对于CDR3为SEQ ID NO:51;和(l)对于CDR1为SEQ ID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含重组DNA构建体的重组宿主细胞,所述重组DNA构建体含有编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段的多核苷酸序列,所述互补决定区具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:2和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:4、对于CDR2为SEQ ID NO:5和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(c)对于CDR1为SEQID NO:6、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:9、对于CDR2为SEQ ID NO:10和对于CDR3为SEQ ID NO:11;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15;(g)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQID NO:16和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(h)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:18和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:19、对于CDR2为SEQ ID NO:20和对于CDR3为SEQ ID NO:21;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:22,对于CDR2为SEQ ID NO:23和对于CDR3为SEQ ID NO:24;和(l)对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含重组DNA构建体的重组宿主细胞,所述重组DNA构建体含有编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段的多核苷酸序列,所述互补决定区由选自由以下各项组成的组的多核苷酸序列编码:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:29和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:31、对于CDR2为SEQ ID NO:32和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(c)对于CDR1为SEQ ID NO:33、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:36、对于CDR2为SEQ ID NO:37和对于CDR3为SEQ ID NO:38;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;(f)对于CDR1为SEQID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42;(g)对于CDR1为SEQ IDNO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:43和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(h)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:44和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:45和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:46、对于CDR2为SEQ ID NO:47和对于CDR3为SEQ ID NO:48;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:49、对于CDR2为SEQ ID NO:50和对于CDR3为SEQ ID NO:51;和(1)对于CDR1为SEQ ID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54。
在本公开内容的一个实施方案中,所述包含重组DNA构建体(其含有编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段的多核苷酸序列)的重组宿主细胞选自不限于以下各项的组:嗜酸乳杆菌、嗜酸乳杆菌LAFTI L10、干酪乳杆菌、干酪乳杆菌LAFTI L26、嗜酸乳杆菌DDS-1、嗜酸乳杆菌LA-5、嗜酸乳杆菌NCFM、嗜酸乳杆菌CD1285、干酪乳杆菌431、干酪乳杆菌F19、干酪乳杆菌代田株、类干酪乳杆菌、类干酪乳杆菌St11、约汉逊氏乳杆菌、约汉逊氏乳杆菌La1、乳酸乳杆菌、乳酸乳杆菌L1A、植物乳杆菌、植物乳杆菌299v、罗伊乳杆菌、 罗伊乳杆菌ATCC55730、鼠李糖乳杆菌、鼠李糖乳杆菌ATCC53013、鼠李糖乳杆菌LB21、鼠李糖乳杆菌GR-1、罗伊乳杆菌RC-14、鼠李糖乳杆菌R011、瑞士乳杆菌和瑞士乳杆菌R0052。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了重组宿主细胞,其含有包含重组DNA构建体的重组DNA载体,所述重组DNA构建体含有编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段的多核苷酸序列,所述互补决定区具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:2和对于CDR3为SEQ IDNO:3;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:4、对于CDR2为SEQ ID NO:5和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(c)对于CDR1为SEQ ID NO:6、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:9、对于CDR2为SEQ ID NO:10和对于CDR3为SEQ ID NO:11;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(f)对于CDR1为SEQID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15;(g)对于CDR1为SEQ IDNO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:16和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(h)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:18和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:19、对于CDR2为SEQ ID NO:20和对于CDR3为SEQ ID NO:21;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:22,对于CDR2为SEQ ID NO:23和对于CDR3为SEQ ID NO:24;和(l)对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了重组宿主细胞,其含有包含重组DNA构建体的重组DNA载体,所述重组DNA构建体含有编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段的多核苷酸序列,所述互补决定区由选自由以下各项组成的组的多核苷酸序列编码:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:29和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:31、对于CDR2为SEQ ID NO:32和对于CDR3为SEQID NO:30;(c)对于CDR1 为SEQ ID NO:33、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ IDNO:35;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:36、对于CDR2为SEQ ID NO:37和对于CDR3为SEQ ID NO:38;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42;(g)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:43和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(h)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:44和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:45和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:46、对于CDR2为SEQ ID NO:47和对于CDR3为SEQ ID NO:48;(k)对于CDR1为SEQID NO:49、对于CDR2为SEQ ID NO:50和对于CDR3为SEQ ID NO:51;和(1)对于CDR1为SEQ IDNO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54。
在本公开内容的一个实施方案中,所述含有包含重组DNA构建体(其含有编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段的多核苷酸序列)的重组DNA载体的重组宿主细胞选自不限于以下各项的组:嗜酸乳杆菌、嗜酸乳杆菌LAFTI L10、干酪乳杆菌、干酪乳杆菌LAFTI L26、嗜酸乳杆菌DDS-1、嗜酸乳杆菌LA-5、嗜酸乳杆菌NCFM、嗜酸乳杆菌CD 1285、干酪乳杆菌431、干酪乳杆菌F19、干酪乳杆菌代田株、类干酪乳杆菌、类干酪乳杆菌St11、约汉逊氏乳杆菌、约汉逊氏乳杆菌La1、乳酸乳杆菌、乳酸乳杆菌L1A、植物乳杆菌、植物乳杆菌299v、罗伊乳杆菌、罗伊乳杆菌ATCC55730、鼠李糖乳杆菌、鼠李糖乳杆菌ATCC53013、鼠李糖乳杆菌LB21、鼠李糖乳杆菌GR-1、罗伊乳杆菌RC-14、鼠李糖乳杆菌R011、瑞士乳杆菌和瑞士乳杆菌R0052。
在本公开内容的一个优选实施方案中,提供了重组宿主细胞,其分泌具有选自由SEQ ID NO:55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89和91组成的组的氨基酸序列的单链抗体或其片段,其中所述重组宿主细胞是枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了重组宿主细胞,其表达由选 自由SEQ IDNO:56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90和92组成的组的多核苷酸序列编码的单链抗体或其片段,其中所述重组宿主细胞在细胞外分泌所述单链抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了单链抗体或其片段,所述单链抗体或其片段是骆驼科抗体。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了嵌合蛋白,其具有至少如SEQ ID NO:93、95、97、99、101、130、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159、161、163、165、167、169、171、173、175、177、179、181、183、185、187、189、191、193、195、197、199、201、203、205、207、209、211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、241和243所示的连续氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了嵌合蛋白,其具有至少如SEQ ID NO:94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154、156、158、160、162、164、166、168、170、172、174、176、178、180、182、184、186、188、190、192、194、196、198、200、202、204、206、208、210、212、214、216、218、220、222、224、226、228、230、232、234、236、238、240、242和244所示的连续多核苷酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了含有包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段的嵌合蛋白,所述互补决定区具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:2和对于CDR3为SEQID NO:3;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:4、对于CDR2为SEQ ID NO:5和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(c)对于CDR1为SEQ ID NO:6、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:9、对于CDR2为SEQ ID NO:10和对于CDR3为SEQ ID NO:11;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3 为SEQ ID NO:8;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15;(g)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:16和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(h)对于CDR1为SEQ IDNO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:18和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:19、对于CDR2为SEQ ID NO:20和对于CDR3为SEQ ID NO:21;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:22,对于CDR2为SEQ ID NO:23和对于CDR3为SEQ ID NO:24;和(l)对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了含有包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段的嵌合蛋白,所述互补决定区由选自由以下各项组成的组的多核苷酸序列编码:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:29和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:31、对于CDR2为SEQ ID NO:32和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(c)对于CDR1为SEQ ID NO:33、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQID NO:35;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:36、对于CDR2为SEQ ID NO:37和对于CDR3为SEQ IDNO:38;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42;(g)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:43和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(h)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:44和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:45和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:46、对于CDR2为SEQ ID NO:47和对于CDR3为SEQ ID NO:48;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:49、对于CDR2为SEQ ID NO:50和对于CDR3为SEQ ID NO:51;和(l)对于CDR1为SEQ ID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含重组宿主细胞的食 品,所述重组宿主细胞含有重组DNA构建体,所述重组DNA构建体含有编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段的多核苷酸序列,所述互补决定区具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:2和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:4、对于CDR2为SEQ ID NO:5和对于CDR3为SEQID NO:3;(c)对于CDR1为SEQ ID NO:6、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:9、对于CDR2为SEQ ID NO:10和对于CDR3为SEQ ID NO:11;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15;(g)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:16和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(h)对于CDR1为SEQID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:18和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:19、对于CDR2为SEQ ID NO:20和对于CDR3为SEQ ID NO:21;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:22,对于CDR2为SEQ ID NO:23和对于CDR3为SEQ ID NO:24;和(1)对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含重组宿主细胞的食品,所述重组宿主细胞含有重组DNA构建体,所述重组DNA构建体含有编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段的多核苷酸序列,所述互补决定区由选自由以下各项组成的组的多核苷酸序列编码:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:29和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:31、对于CDR2为SEQ ID NO:32和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(c)对于CDR1为SEQ ID NO:33、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:36、对于CDR2为SEQ ID NO:37和对于CDR3为SEQ ID NO:38;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQID NO:35;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ IDNO:42;(g)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:43和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(h)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:44和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:45和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:46、对于CDR2为SEQ ID NO:47和对于CDR3为SEQ ID NO:48;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:49、对于CDR2为SEQ ID NO:50和对于CDR3为SEQ ID NO:51;和(l)对于CDR1为SEQ ID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含重组宿主细胞的食品,所述重组宿主细胞含有包含重组DNA构建体的重组DNA载体,所述重组DNA构建体含有编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段的多核苷酸序列,所述互补决定区具有选自以下的氨基酸序列:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:2和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:4、对于CDR2为SEQ ID NO:5和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(c)对于CDR1为SEQ ID NO:6、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ IDNO:8;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:9、对于CDR2为SEQ ID NO:10和对于CDR3为SEQ ID NO:11;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15;(g)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:16和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(h)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(i)对于CDR1为SEQ IDNO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:18和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:19、对于CDR2为SEQ ID NO:20和对于CDR3为SEQ ID NO:21;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:22,对于CDR2为SEQ ID NO:23和对于CDR3为SEQ ID NO:24;和(l)对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含重组宿主细胞的食品,所述重组宿主细胞含有包含重组DNA构建体的重组DNA载体,所述重组DNA构建体含有编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段的多核苷酸序列,所述互补决定区由选自由以下各项组成的组的多核苷酸序列编码:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:29和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:31、对于CDR2为SEQ ID NO:32和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(c)对于CDR1为SEQ ID NO:33、对于CDR2为SEQID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:36、对于CDR2为SEQ IDNO:37和对于CDR3为SEQ ID NO:38;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42;(g)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:43和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(h)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:44和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:45和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:46、对于CDR2为SEQ ID NO:47和对于CDR3为SEQID NO:48;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:49、对于CDR2为SEQ ID NO:50和对于CDR3为SEQ IDNO:51;和(l)对于CDR1为SEQ ID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ IDNO:54。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含单链抗体或其片段的食品,所述单链抗体或其片段具有选自由SEQ ID NO:55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89和91组成的组的氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含单链抗体或其片段的食品,所述单链抗体或其片段由选自由SEQ ID NO:56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90和92组成的组 的多核苷酸序列编码。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含嵌合蛋白的食品,所述嵌合蛋白至少具有选自由SEQ ID NO:93、95、97、99、101、130、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159、161、163、165、167、169、171、173、175、177、179、181、183、185、187、189、191、193、195、197、199、201、203、205、207、209、211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、241和243组成的组的连续氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含嵌合蛋白的食品,所述嵌合蛋白至少具有选自由SEQ ID NO:94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154、156、158、160、162、164、166、168、170、172、174、176、178、180、182、184、186、188、190、192、194、196、198、200、202、204、206、208、210、212、214、216、218、220、222、224、226、228、230、232、234、236、238、240、242和244组成的组的连续多核苷酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含嵌合蛋白的食品,所述嵌合蛋白含有包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,所述互补决定区具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQID NO:2和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:4、对于CDR2为SEQ ID NO:5和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(c)对于CDR1为SEQ ID NO:6、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:9、对于CDR2为SEQ ID NO:10和对于CDR3为SEQ ID NO:11;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQID NO:8;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ IDNO:15;(g)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:16和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(h)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:18和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:19、对于CDR2为SEQ ID NO:20和对于CDR3为SEQ ID NO:21;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:22,对于CDR2为SEQ ID NO:23和对于CDR3为SEQ ID NO:24;和(1)对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含嵌合蛋白的食品,所述嵌合蛋白含有包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,所述互补决定区由选自由以下各项组成的组的多核苷酸序列编码:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:29和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:31、对于CDR2为SEQID NO:32和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(c)对于CDR1为SEQ ID NO:33、对于CDR2为SEQ IDNO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;(d)对于CDR1为SEQID NO:36、对于CDR2为SEQ ID NO:37和对于CDR3为SEQ ID NO:38;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42;(g)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:43和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(h)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:44和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:45和对于CDR3为SEQID NO:30;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:46、对于CDR2为SEQ ID NO:47和对于CDR3为SEQ IDNO:48;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:49、对于CDR2为SEQ ID NO:50和对于CDR3为SEQ ID NO:51;和(l)对于CDR1为SEQ ID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含嵌合蛋白的食品,所述食品还包含选自由以下各项组成的组的载体:润滑剂、表面活性剂、溶剂、乳化剂、润湿剂、动物饲料、染料或口服溶液。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含单链抗体或其片段的食 品,所述食品还包含选自由以下各项组成的组的载体:润滑剂、表面活性剂、溶剂、乳化剂、润湿剂、动物饲料、染料或口服溶液。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了制剂,所述制剂包含具有选自由SEQ IDNO:55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89和91组成的组的氨基酸序列的单链抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了制剂,所述制剂包含由选自由SEQ IDNO:56、58、60、62、64、66、68、70、72、74、76、78、80、82、84、86、88、90和92组成的组的多核苷酸序列编码的单链抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了制剂,所述制剂含有包含3个互补决定区的单链抗体或其片段,所述互补决定区具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:2和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:4、对于CDR2为SEQ ID NO:5和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(c)对于CDR1为SEQID NO:6、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:9、对于CDR2为SEQ ID NO:10和对于CDR3为SEQ ID NO:11;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15;(g)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQID NO:16和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(h)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:18和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:19、对于CDR2为SEQ ID NO:20和对于CDR3为SEQ ID NO:21;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:22,对于CDR2为SEQ ID NO:23和对于CDR3为SEQ ID NO:24;和(l)对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了制剂,所述制剂含有包含3 个互补决定区的单链抗体或其片段,所述互补决定区由选自由以下各项组成的组的多核苷酸序列编码:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:29和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:31、对于CDR2为SEQ ID NO:32和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(c)对于CDR1为SEQ ID NO:33、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:36、对于CDR2为SEQ ID NO:37和对于CDR3为SEQ ID NO:38;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42;(g)对于CDR1为SEQID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:43和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(h)对于CDR1为SEQ IDNO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:44和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:45和对于CDR3为SEQ ID NO:30;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:46、对于CDR2为SEQ ID NO:47和对于CDR3为SEQ ID NO:48;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:49、对于CDR2为SEQ ID NO:50和对于CDR3为SEQ ID NO:51;和(1)对于CDR1为SEQ ID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含单链抗体或其片段的制剂,所述制剂还由稀释剂或赋形剂或载体组成。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了抑制沙门氏菌的生长的方法,所述方法包括使含有沙门氏菌的样品与包含单链抗体或其片段的食品接触,所述单链抗体或其片段包含3个互补决定区,所述互补决定区具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:2和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:4、对于CDR2为SEQ ID NO:5和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(c)对于CDR1为SEQID NO:6、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:9、对于CDR2为SEQ ID NO:10和对于CDR3为SEQ ID NO:11;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15;(g)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQID NO:16和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(h)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:18和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:19、对于CDR2为SEQ ID NO:20和对于CDR3为SEQ ID NO:21;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:22,对于CDR2为SEQ ID NO:23和对于CDR3为SEQ ID NO:24;和(l)对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了抑制沙门氏菌的生长的方法,所述方法包括使含有沙门氏菌的样品与包含嵌合蛋白的食品接触,所述嵌合蛋白具有至少选自由SEQ ID NO:93、95、97、99、101、130、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159、161、163、165、167、169、171、173、175、177、179、181、183、185、187、189、191、193、195、197、199、201、203、205、207、209、211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、241和243组成的组的连续氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了抑制沙门氏菌的活性的方法,所述方法包括使含有沙门氏菌的样品与包含单链抗体或其片段的食品接触,所述单链抗体或其片段包含3个互补决定区,所述互补决定区具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:(a)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:2和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(b)对于CDR1为SEQ ID NO:4、对于CDR2为SEQ ID NO:5和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(c)对于CDR1为SEQID NO:6、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(d)对于CDR1为SEQ ID NO:9、对于CDR2为SEQ ID NO:10和对于CDR3为SEQ ID NO:11;(e)对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;(f)对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14 和对于CDR3为SEQ ID NO:15;(g)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:16和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(h)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ IDNO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(i)对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:18和对于CDR3为SEQ ID NO:3;(j)对于CDR1为SEQ ID NO:19、对于CDR2为SEQ ID NO:20和对于CDR3为SEQ ID NO:21;(k)对于CDR1为SEQ ID NO:22,对于CDR2为SEQ ID NO:23和对于CDR3为SEQ ID NO:24;和(l)对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了抑制沙门氏菌的活性的方法,所述方法包括使含有沙门氏菌的样品与包含嵌合蛋白的食品接触,所述嵌合蛋白具有至少选自由SEQ ID NO:93、95、97、99、101、130、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159、161、163、165、167、169、171、173、175、177、179、181、183、185、187、189、191、193、195、197、199、201、203、205、207、209、211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、241和243组成的组的连续氨基酸序列。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了抑制卵内沙门氏菌的活性的方法,所述方法包括使具有选自由SEQ ID NO:55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89和91组成的组的氨基酸序列的单链抗体或其片段与存在于卵内的沙门氏菌接触。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了抑制卵内沙门氏菌的生长的方法,所述方法包括使具有选自由SEQ ID NO:55、57、59、61、63、65、67、69、71、73、75、77、79、81、83、85、87、89和91组成的组的氨基酸序列的单链抗体或其片段与存在于卵内的沙门氏菌接触。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链抗体A或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:2和对于CDR3为SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDR1为SEQ ID NO:28、对 于CDR2为SEQ ID NO:29和对于CDR3为SEQ ID NO:30中所示,其中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:55中所示,且编码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:56中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链抗体B或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:4、对于CDR2为SEQ ID NO:5和对于CDR3为SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDR1为SEQ ID NO:31、对于CDR2为SEQ ID NO:32和对于CDR3为SEQ ID NO:30中所示,其中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:57中所示,且编码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:58中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链抗体C或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:6、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDR1为SEQ ID NO:33、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35中所示,其中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:59中所示,且编码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:60中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链抗体D或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:9、对于CDR2为SEQ ID NO:10和对于CDR3为SEQ ID NO:11所示的氨基酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDR1为SEQ IDNO:36、对于CDR2为SEQ ID NO:37和对于CDR3为SEQ ID NO:38中所示,其中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:61中所示,且编码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:62中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链抗体E或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35中所示,其中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:63中所示,且编 码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:64中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链抗体F或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35中所示,其中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:65中所示,且编码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:66中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链抗体G或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35中所示,其中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:67中所示,且编码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:68中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链抗体H或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDR1为SEQID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42中所示,其中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:69中所示,且编码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:70中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链抗体I或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:16和对于CDR3为SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:43和对于CDR3为SEQ ID NO:30中所示,其中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:71中所示,且编码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:72中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链 抗体J或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDR1为SEQ IDNO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:44和对于CDR3为SEQ ID NO:30中所示,其中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:73中所示,且编码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:74中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链抗体K或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:18和对于CDR3为SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:45和对于CDR3为SEQ ID NO:30中所示,其中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:75中所示,且编码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:76中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链抗体L或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:44和对于CDR3为SEQ ID NO:30中所示,其中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:77中所示,且编码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:78中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链抗体M或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:19、对于CDR2为SEQ ID NO:20和对于CDR3为SEQ ID NO:21所示的氨基酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDR1为SEQID NO:46、对于CDR2为SEQ ID NO:47和对于CDR3为SEQ ID NO:48中所示,其中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:79中所示,且编码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:80中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链抗体N或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15所示的氨基 酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDR1为SEQID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42中所示,其中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:81中所示,且编码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:82中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链抗体O或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15所示的氨基酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDR1为SEQID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42中所示,其中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:83中所示,且编码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:84中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链抗体P或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:22、对于CDR2为SEQ ID NO:23和对于CDR3为SEQ ID NO:24所示的氨基酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDRl为SEQID NO:49、对于CDR2为SEQ ID NO:50和对于CDR3为SEQ ID NO:51中所示,其中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:85中所示,且编码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:86中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链抗体Q或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27所示的氨基酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDR1为SEQID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54中所示,其中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:87中所示,且编码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:88中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链抗体R或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27所示的氨基酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDR1为SEQID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54中所示,其 中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:89中所示,且编码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:90中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了包含3个互补决定区的单链抗体S或其片段,所述互补决定区具有如对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27所示的氨基酸序列,其中编码CDR的核苷酸序列如在对于CDR1为SEQID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54中所示,其中所述单链抗体A或其片段的氨基酸序列如在SEQ ID NO:91中所示,且编码单链抗体A或其片段的核苷酸序列如在SEQ ID NO:92中所示。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了分离的乳杆菌菌株罗伊乳杆菌1LB7,其保藏在微生物典型培养物中心和基因库(Microbial Type Culture Collection and GeneBank,MTCC),具有登录号(5894),其用于控制畜牧业中的肠沙门氏菌群体。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了食品制剂,所述食品制剂包含抑制沙门氏菌生长的如本文中所述的抗-沙门氏菌VHH抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了基于奶的制剂,所述制剂包含抑制沙门氏菌生长的如本文中所述的抗-沙门氏菌VHH抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了基于蛋黄的制剂,所述制剂包含抑制沙门氏菌生长的如本文中所述的抗-沙门氏菌VHH抗体或其片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了在热灭活后抑制沙门氏菌生长的经修饰的罗伊乳杆菌,其如本文中所述在MuB基因中具有抗-沙门氏菌骆驼科VHH抗体基因***物。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了在热灭活后抑制沙门氏菌生长的经修饰的罗伊乳杆菌,其如本文中所述在CnBP基因中具有抗-沙门氏菌骆驼科VHH抗体基因***物。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了抑制沙门氏菌血清变型的生长的如本文中所述的骆驼科VHH抗体片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了抑制鼠伤寒沙门氏菌的生长的如本文中所述的骆驼科VHH抗体片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了抑制鸡沙门氏菌(Salmonellagallinarum)的生长的如本文中所述的骆驼科VHH抗体片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了抑制新港沙门氏菌的生长的如本文中所述的骆驼科VHH抗体片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了抑制奥博尼沙门氏菌的生长的如本文中所述的骆驼科VHH抗体片段。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了如本文中所述的针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段、或如本文中所述的重组宿主细胞、或如本文中所述的重组DNA构建体、或如本文中所述的重组DNA载体、或如本文中所述的嵌合蛋白、或如本文中所述的食品、或如本文中所述的制剂、或如本文中所述的分离的乳杆菌菌株,其用于抑制沙门氏菌生长或感染。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了如本文中所述的针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,其用于抑制沙门氏菌生长或感染。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了如本文中所述的重组宿主细胞,其用于抑制沙门氏菌生长或感染。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了如本文中所述的重组DNA构建体,其用于抑制沙门氏菌生长或感染。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了如本文中所述的重组DNA构建体,其用于抑制沙门氏菌生长或感染。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了如本文中所述的嵌合蛋白,其用于抑制沙门氏菌生长或感染。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了如本文中所述的食品,其用于抑制沙门氏菌生长或感染。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了如本文中所述的制剂,其用于抑制沙门氏菌生长或感染。
在本公开内容的一个实施方案中,提供了如本文中所述的分离的乳杆菌菌株,其用于抑制沙门氏菌生长或感染。
实施例
现在将用工作实施例来举例说明本公开内容,所述工作实施例意在举 例说明公开内容的工作,且无意限制性地用于暗示对本公开内容的范围的任何限制。除非另外定义,在本文中使用的所有技术和科学术语具有与本公开内容所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。
实施例1
乳杆菌的分离和表征
从后院家禽禽类收集各种器官(气管、嗉囊、砂囊、小肠、大肠和盲肠(ceacum))。通过将野外样品接种在乳杆菌选择性液体培养基(LSB)(HiMedia/M1166-500G)中并在厌氧条件下在37℃温育,分离乳杆菌。将选择的菌落在MRS液体培养基(HiMedia/M369-500G)上富集。通过革兰氏染色(革兰氏阳性的短杆)检查选择的菌落的纯度。通过进行900bp扩增子的测序反应来证实乳杆菌的遗传同一性,所述900bp扩增子通过使用如SEQ ID NO:245(正向引物)和SEQ ID NO:246(反向引物)所示的引物扩增16S RNA基因而产生。通过进行303bp扩增子的测序反应来证实罗伊乳杆菌的遗传同一性,所述303bp扩增子由如SEQ ID NO:247(正向引物)和SEQ ID NO:248(反向引物)所示的物种特异性的引物产生。选择从家禽禽类嗉囊分离出并在整个胃肠道中发现的罗伊乳杆菌1LB7菌株作为用于骆驼科重链抗体或其片段的表面展示的宿主菌株。1LB7菌株不含有任何质粒。
实施例2
罗伊乳杆菌MuB和CnBP的分离
通过将细菌沉淀物重悬在5ml含有溶菌酶(10mg/ml的浓度)的TNE缓冲液中,从1LB7菌株分离基因组DNA。加入500μl 10%SDS和250μl蛋白酶K(10mg/ml的浓度),并在间歇摇动下在55℃温育2小时。使用苯酚氯仿提取方法(Raya等人,Food MicrobiologyProtocols,2001,14,135-139)分离基因组DNA。
使用如SEQ ID NO:249(正向引物)和SEQ ID NO:250(反向引物)所示的引物,PCR扩增MuB基因的部分1.7kb区域。该1.7kb区域包含LPTQG基序。随后按照生产商的说明书(目录号:K1231,Thermo Scientific)将扩增子克隆进pJet载体中并测序。
使用如SEQ ID NO:251(正向引物)和SEQ ID NO:252(反向引物)所示的引物,PCR扩增完整CnBP基因(1.08kb)。随后按照生产商的说明书 将扩增子克隆进pJet载体中并测序。
实施例3
针对全细胞沙门氏菌的骆驼科抗体的产生
用全细胞灭活肠道沙门氏菌免疫骆驼:简而言之,通过加入0.5%的***,将活跃生长的肠道沙门氏菌培养物(对数期)在37℃灭活24小时。将培养物保持在20rpm的恒定摇动下。随后将培养物在4℃保存,并在富集的生长培养基中测试代表性样品的无害性(innocuity)。证实灭活后,将细菌培养物在1X PBS缓冲液中洗涤3次,并以200μg/ml的浓度重悬。将5ml混悬液与佐剂(Montanide ISA 206V)混合以形成乳剂。
在免疫后60天,进行免疫的骆驼的最终取血。从分离的外周血淋巴细胞分离总RNA。使用如SEQ ID NO:253(正向引物)和SEQ ID NO:254(反向引物)所示的引物进行用于扩增重链抗体片段的PCR反应{扩增子大小:900bp(包含与轻链配对的骆驼科常规重链抗体的框架区和CDR区以及包括铰链区的CH1、CH2、CH3),690bp(包含骆驼科重链VHH抗体的框架区和CDR区以及长铰链、CH2、CH3区域),620bp(包含骆驼科重链VHH抗体的框架区和CDR区以及短铰链、CH2、CH3区域)}。在下面表1中给出了使用的PCR条件:
表1
随后将扩增子克隆进枯草芽孢杆菌分泌载体3VE载体中(图8)。通过有限稀释铺板来分离单个菌落。将单个菌落铺板在2XYT琼脂平板上进行生长。为了分泌抗体,通过用IPTG处理3VE芽孢杆菌载体培养物进行克隆的抗体的诱导。
通过测定抗-沙门氏菌生物活性和沙门氏菌细胞侵入抑制测定,针对抗-沙门氏菌活性筛选分泌的抗体。
将来自表现出抗-沙门氏菌活性的克隆的质粒分离,并将编码表现出抗-沙门氏菌活性的重链抗体片段的多核苷酸用BamHI和AatII限制性酶消化并随后克隆进pJet载体中。将重链抗体片段进一步测序以鉴定互补决定区。
将表现出抗-沙门氏菌活性的鉴别的重链抗体片段进一步用于在罗伊乳杆菌MuB和CnBP基因中的位点特异性***。
实施例4
嵌合蛋白的制备
将特定骆驼科重链抗体(VHH)***pJet中的克隆的MuB基因的MuB重复R-VI内
使用如SEQ ID NO:255和SEQ ID NO:256所示的引物进行克隆在pJet中的MuB基因的反向PCR以将侧接酶NdeI和BamHI引入在VHH抗体***位点处(扩增子大小4.7kb)。在下面表2中给出了PCR条件:
表2
具有侧接限制性酶位点BamHI和NdeI(用于拉出克隆进分泌载体3VE中的选择的VHH)的PCR引物如SEQ ID NO:257(正向引物)和SEQ ID NO:258(反向引物)所示(扩增子大小400bp)。将具有BamHI和NdeI限制位点的VHH PCR片段连接至MuB基因反向PCR产物(pJet载体)并转化进大肠杆菌中。将携带MuB基因(骆驼科VHH工程改造在所述MuB基因内)的克隆筛选并测序。在下面表3中给出了PCR条件:
表3
使用缺少BamHI或NdeI限制位点的如SEQ ID NO:259(正向引物)和SEQ ID NO:260(反向引物)中所示的引物得到携带骆驼科VHH的MuB基因的PCR产物(扩增子大小2.1kb)。在下面表4中给出了PCR条件:
表4
将得到的扩增子电穿孔进罗伊乳杆菌菌株1LB7中用于通过双交换(double-crossover)进行宿主基因组整合。
将特定骆驼科重链抗体(VHH)***pJet中的克隆的CnBP基因内
使用如SEQ ID NO:261和SEQ ID NO:262所示的引物进行克隆在pJet中的CnBP基因的反向PCR以将侧接酶NdeI和BamHI引入在VHH抗体***位点处(扩增子大小4.2kb)。在下面表5中给出了PCR条件:
表5
具有侧接限制性酶位点BamHI和NdeI(用于拉出克隆进分泌载体3VE中的选择的VHH)的PCR引物如SEQ ID NO:263(正向引物)和SEQ ID NO:264(反向引物)所示(扩增子大小400bp)。在下面表6中给出了PCR条件:
表6
将具有BamHI和NdeI限制位点的VHH PCR片段连接至CnBP基因反向PCR产物(pJet载体)并转化进大肠杆菌中。将携带CnBP基因(骆驼科VHH工程改造在MuB基因内)的克隆筛选并测序。
使用缺少BamHI或NdeI限制位点的如SEQ ID NO:265(正向引物)和SEQ ID NO:266(反向引物)(磷酸化的寡聚核苷酸(oligos))所示的引物得到携带骆驼科VHH的CnBP基因的PCR产物以形成环形的DNA产物(扩增子大小1.4kb)。在下面表7中给出了PCR条件:
表7
将具有VHH***片段的环形DNA产物(全长CnBP基因)用于电穿孔进罗伊乳杆菌菌株1LB7中,用于通过单个Campbell样交换进行宿主基因组整合。
实施例5
抗原性沙门氏菌表面蛋白的鉴别
使用如SEQ ID NO:267(正向引物)和SEQ ID NO:268(反向引物)所示的引物扩增编码沙门氏菌FimH蛋白的多核苷酸。扩增子的多核苷酸序列如在SEQ ID NO:271中所示。
使用如SEQ ID NO:269(正向引物)和SEQ ID NO:270(反向引物)所示的引物扩增编码沙门氏菌OmPD蛋白的多核苷酸。扩增子的多核苷酸序列如在SEQ ID NO:272中所示。
全细胞(罗伊乳杆菌)ELISA结果
简而言之,将罗伊乳杆菌亲本宿主菌株转化并修饰用于在存在于细菌细胞表面的MuB和CnBP蛋白上表面展示抗-沙门氏菌特异的骆驼科重链抗体。基于所述克隆相对于固定在硝酸纤维素膜上的重组FimH和OmPD蛋白的结合/附着/引诱,选择具有特异性地针对沙门氏菌FimH和OmPD蛋白的表面展示抗体的克隆/构建体。
随后,对阳性结合子(binder)进行乳杆菌全细胞ELISA,其中使用组氨酸标记的重组沙门氏菌FimH和OmPD作为细胞表面展示的特异性抗体示踪剂或结合子。随后,用小鼠单克隆抗-His抗体追踪经修饰的罗伊乳杆菌细胞表面展示的抗体分子与重组沙门氏菌FimH和OmPD蛋白的特异性结合。表8和9显示了ELISA的结果。
表8
表9
基于表8中的结果,具有如SEQ ID NO:55、57、59、63、65、67、71、73、75、77和79所示的氨基酸序列的骆驼科抗体结合沙门氏菌FimH蛋白。
基于表9中的结果,具有如SEQ ID NO:61、69、81、83和85所示的氨基酸序列的骆驼科抗体结合沙门氏菌OmPD蛋白。
具有如SEQ ID NO:87、89和91所示的氨基酸序列的骆驼科抗体结合全细胞沙门氏菌。
实施例6
抗-沙门氏菌生物活性
简而言之,用IPTG(1mM,在37℃在振荡器上以180RPM保持12小时)诱导具有抗体基因片段(编码具有如SEQ ID NO:61所示的氨基酸序列的抗体的多核苷酸)的枯草芽孢杆菌载体克隆,并将培养上清液通过离心(5000RPM保持10分钟)进行收集和经0.45um过滤器过滤。对诱导的没有任何骆驼科重链抗体基因片段***物的质粒的上清液和在其中培养芽孢杆菌培养物的2xYT生长培养基进行类似的处理,并将这些用作对照。
随后将试验上清液和两个对照用25,000个细胞的沙门氏菌细菌接种物(在2mL的总试验体积中)进行攻击(challenge),并在180RPM摇动下在37℃温育。在温育的2、4、6、8和24小时从试验和两个对照反应取代表性样品,并铺板在选择性XLT琼脂培养基上以计数沙门氏菌菌落形成单位。结果总结在下面表10中。
表10
TNTC:菌落太多难以计数.
Mat:在平板上的完全细菌生长,具有合并的菌落.
实施例7
抗-沙门氏菌生物活性滴定
用IPTG(1mM,在37℃在振荡器上在180RPM保持12小时)诱导具有抗体基因片段(编码具有如SEQ ID NO:61所示的氨基酸序列的抗体的多核苷酸)的枯草芽孢杆菌载体克隆,并将培养物上清液通过离心(5000RPM保持10分钟)进行收集并经0.45um过滤器过滤。然后将其在2xYT细菌生长培养基中2倍稀释,并将1∶2和1∶4连同纯的上清进行抗-沙门氏菌生物活性试验。对诱导的没有任何骆驼科重链抗体基因片段***物的质粒的上清液和在其中培养芽孢杆菌培养物的2xYT生长培养基进行类似的处理,并将这些用作对照。
随后将试验上清液和两个对照用25,000个细胞的沙门氏菌细菌接种物(在2mL的总试验体积中)进行攻击,并在180RPM摇动下在37℃温育。在温育的2小时从试验和两个对照反应取代表性样品,并铺板在选择性XLT琼脂培养基上以计数沙门氏菌菌落形成单位。结果总结在下面表11中。
表11
沙门氏菌细胞侵入抑制测定
针对沙门氏菌细胞侵入抑制特性,试验了来自诱导的具有骆驼科重链抗体基因片段(编码具有如SEQ ID NO:61所示的氨基酸序列的抗体的多核苷酸)***物的质粒的上清液以及来自诱导的不具有任何抗体基因片段***物的质粒的上清液(作为对照)以及2xYT细菌生长培养基(作为对照)。使用的细胞培养基是INT 407肠细胞系。
将攻击剂量的在1ml MEM(Himedia目录号:AL047S)中的2.5X108沙门氏菌细菌加入1ml试验和对照上清液中。加入攻击细菌后,将上清液混合物在180rpm摇动下在37℃温育1小时。随后将每个2ml体积的试验和对照的整个内容物接种到每个六孔培养板中的至少90%汇合的INT 407 细胞单层上,并在37℃进一步温育2小时以允许细菌侵入发生。
温育结束后,将每个孔中的INT 407单层细胞用PBS洗涤2次,并通过用2ml/孔的庆大霉素(100微克/ml的浓度)处理2小时,将INT 407细胞附着的细菌细胞(包括剩余的细胞外细菌)杀死。庆大霉素处理结束后,将每个孔中的细胞单层再次用PBS洗涤3次,并通过以400ul/孔的总体积用PBS中1%的Triton X-100在37℃处理10分钟,将受感染的INT 407细胞裂解,以释放细胞内细菌。随后通过铺板在选择性XLT琼脂培养基上,计数释放的细菌。样品数据给出在表14中。
表14
TNTC:菌落太多难以计数
实施例9
经修饰的罗伊乳杆菌的沙门氏菌抑制
将大约1.25x108CFU(菌落形成单位)的经修饰的罗伊乳杆菌(其具有表面表达的沙门氏菌特异的骆驼科重链抗体)与大约1.25x108CFU的沙门氏菌攻击剂量混合。
两个对照之一包含与大约1.25x108CFU的沙门氏菌攻击剂量混合的大约1.25x108CFU的罗伊乳杆菌宿主亲本菌株,且第二个对照仅包含与空白细胞培养基混合的相同沙门氏菌攻击剂量,没有任何乳杆菌细菌,都以各2ml的总体积。
将试验细菌混合物(包括两个对照)在37℃以110RPM温育2小时。随后,将2ml每个试验混合物(包括两个对照)的整个内容物接种到六孔培养板的每个孔中的至少90%汇合的INT 407细胞单层上,并在37℃进一 步温育2小时以允许细菌侵入发生。
温育结束后,将每个孔中的INT 407单层细胞用1XPBS洗涤2次,并通过用2ml/孔的庆大霉素(Abbott Healthcare Pvt.Ltd.)(100μg/ml的浓度)处理2小时,将INT 407细胞附着的细菌细胞(包括剩余的细胞外细菌)杀死。庆大霉素处理结束后,将每个孔中的细胞单层用1XPBS洗涤3次,并通过以400ul/孔的总体积用PBS中的1%的Triton X-100在37℃处理10分钟,将受感染的INT 407细胞裂解,以释放细胞内细菌。随后通过铺板在选择性XLT琼脂培养基上,计数释放的细菌。结果总结在下面的表15(编码具有如SEQ ID NO:55所示的氨基酸序列的抗体的多核苷酸)、表16(编码具有如SEQ ID NO:61所示的氨基酸序列的抗体的多核苷酸)、和表17(编码具有如SEQ ID NO:63或69所示的氨基酸序列的抗体的多核苷酸)中。
表15
表16
表17
实施例10
在MuB中具有VHH抗体***物的沙门氏菌和罗伊乳杆菌修饰的菌 株的共培养测定
基于当与乳杆菌培养物一起生长(共培养)时沙门氏菌菌落形成单位(CFU)的减少,观察了经修饰的罗伊乳杆菌构建体与亲本菌株1LB7罗伊乳杆菌菌株相比对沙门氏菌的拮抗、聚集和生长抑制作用。将生长中的沙门氏菌和乳杆菌的培养物与固定CFU的1.5x104沙门氏菌和5x106乳杆菌一起在等体积的PBS中培养。每2小时执行取样直到6小时,并将样品铺板在沙门氏菌选择性XLT琼脂培养基上,以计数试验混合物的样品中存活的沙门氏菌细菌。将生长抑制作用与未转化的亲本宿主罗伊乳杆菌1LB7和培养基对照进行对比。表18(编码具有如SEQ ID NO:55所示的氨基酸序列的抗体的多核苷酸)显示了结果。
表18
实施例11
在MuB和CnBP中具有VHH抗体***物的沙门氏菌和罗伊乳杆菌修饰的菌株的共培养测定。
表19描绘了在MuB和CnBP(编码具有如SEQ ID NO:63或69所示的氨基酸序列的抗体的多核苷酸)中具有表面展示的骆驼科抗体的经修饰的罗伊乳杆菌菌株的作用的结果。
表19
24小时观察:-
实施例12
在CnBP中具有VHH抗体***物的沙门氏菌和罗伊乳杆菌修饰的菌株的共培养测定.
表20描绘了在CnBP(编码具有如SEQ ID NO:61所示的氨基酸序列的抗体的多核苷酸)中具有表面展示的骆驼科抗体的经修饰的罗伊乳杆菌菌株的作用的结果。
表20
实施例13
抗-沙门氏菌VHH抗体及其片段在基于奶的食品制备物中的用途
为了试验如本公开内容所述的抗-沙门氏菌VHH抗体及其片段在不同的食品制备物制剂中的用途,通过将VHH抗体片段(得自诱导的分泌型芽孢杆菌载体的培养物上清液)掺入溶解在超纯水中的70%脱脂奶粉末中来制备制剂。将诱导的分泌型芽孢杆菌载体培养物上清液溶液用作纯的和作为在PBS中的1∶2稀释液。以10%的比率将抗体溶液加入1.5ml体积的70%脱脂奶溶液中。加入抗体溶液以后,将脱脂奶溶液在500rpm涡旋30秒5次。阴性对照包含10%的诱导的不含抗体基因片段***物的分泌型芽孢杆菌载体的培养物上清液。
随后,以10,000个生物体/10μl的攻击剂量将沙门氏菌细菌加入具有抗体的脱脂奶溶液以及不含抗体的对照。将来自脱脂奶试验溶液(其中以两种浓度加入抗体,即纯溶液和1∶2稀释的溶液)的代表性样品以及对照取样,并铺板在XLT4琼脂培养基上以计数沙门氏菌菌落形成单位。表21以表格形式显示了测定的结果。
表21
TNTC:菌落太多难以计数
图1描绘了在不同时间点沙门氏菌菌落形成单位的图解表示。从图1可以推断出,与不含抗体的样品相比,在含有来自诱导的具有骆驼科抗体的分泌载体的上清液的样品中的沙门氏菌菌落形成单位的数目显著更小。不含抗体的培养物中的菌落的数目太多难以计数(TNTC)。如图1提示的,在4小时时,在含有来自诱导的分泌载体的上清液的培养物中的沙门氏菌菌落形成单位的抑制倍数至少超过4倍。该数据提示,所述抗体片段当掺入食品制备物中时是稳定的且保留它们的功能,并且能够实质上减小沙门氏菌菌落形成单位。
实施例14
抗-沙门氏菌VHH抗体及其片段在基于蛋的食品制备物中的用途
用诱导的具有骆驼科VHH基因的分泌型芽孢杆菌载体的培养物上清液开发了蛋黄制剂。将蛋黄在包含2%吐温80的PBS溶液中1∶2稀释。向该蛋黄溶液中,以20%的比率加入VHH抗体试验溶液,并将混合物在1000rpm涡旋30秒5次。使用来自诱导的空分泌型芽孢杆菌载体的培养物上清液作为对照。从开始直到4小时以2小时间隔从试验蛋黄制剂和对照取代表性样品,并立即铺板在XLT4琼脂培养基中以计数沙门氏菌菌落形成单位。表22以表格形式显示了结果。
表22
图2描绘了在不同时间点沙门氏菌菌落形成单位的图解表示。从图2可以推断出,在4小时时,在包含上清液(其来自诱导的在质粒中具有骆驼科抗体片段***物的分泌载体)的培养物的情况下,沙门氏菌菌落形成单位减少了超过2倍。该数据提示,所述抗体片段当掺入食品制备物中时是稳定的且保留它们的功能,并且能够实质上减小沙门氏菌菌落形成单位。
实施例15
热灭活的经修饰的罗伊乳杆菌对沙门氏菌生长抑制的效力
基于在共培养过程中沙门氏菌菌落形成单位(CFU)的减少,观察了热灭活的经修饰的乳杆菌构建体和亲本罗伊乳杆菌菌株1LB7对沙门氏菌的拮抗、聚集和生长抑制作用。
通过在85℃加热30分钟,将生长中的乳杆菌培养物灭活。通过进行灭活的培养物在MRS生长培养基中的3个盲传(blind passages),检查完全灭活。以1x104CFU的沙门氏菌细菌与1.5x106CFU的乳杆菌细菌的比率,将生长中的沙门氏菌培养物和灭活的经修饰的乳杆菌(包括对照宿主亲本菌株1LB7)混合在一起。从0小时开始,每2小时取代表性培养物样品直到6小时,然后在24小时取样。将样品铺板在XLT4琼脂培养基上以计数存在于样品中的沙门氏菌细菌。将灭活的修饰的和转化的罗伊乳杆菌菌株对沙门氏菌的拮抗、聚集和生长抑制作用与灭活的未转化的亲本宿主菌株1LB7进行对比。
表23以表格形式显示了结果。
表23
Mat:在平板上的完全细菌生长,具有合并的菌落
图3描绘了当与热灭活的经修饰的乳杆菌共培养时沙门氏菌菌落形成单位的图解表示。从图3可以推断,甚至直到24小时,灭活的经修饰的乳杆菌菌株(其在它的表面上展示骆驼科VHH抗体)能够有效地抑制沙门氏菌的生长。该数据提示,经修饰的乳杆菌甚至在它被热灭活时是有效的且不能生长和自我复制。
实施例16
骆驼科VHH抗体针对沙门氏菌血清变型的抗-沙门氏菌活性
用IPTG(1mM,在37℃在振荡器上以180RPM保持12小时)诱导具有克隆的骆驼科抗体基因片段的枯草芽孢杆菌分泌载体,并将培养物上清液通过离心进行收集和经0.45um过滤器过滤。对诱导的没有骆驼科重链抗体基因片段***物的质粒的上清液和在其中培养芽孢杆菌培养物的2xYT生长培养基进行类似的处理,并将这些用作对照。
随后将试验上清液和两个对照用具有大约10,000个细胞的细菌接种物的沙门氏菌血清变型(在2mL的总试验体积中)进行攻击,并在180r.p.m摇动下在37℃温育。在温育的0、2、4、6和24小时从试验和两个对照反应取代表性样品,并铺板在选择性XLT4琼脂培养基上以计数沙门氏菌菌落形成单位。表24-27表示使用不同的沙门氏菌血清变型的结果。
表24
TNTC:菌落太多难以计数。
Mat:在平板上的完全细菌生长,具有合并的菌落。
表25
TNTC:菌落太多难以计数.
Mat:在平板上的完全细菌生长,具有合并的菌落.
表26
TNTC:菌落太多难以计数.
Mat:在平板上的完全细菌生长,具有合并的菌落.
表27
TNTC:菌落太多难以计数.
Mat:在平板上的完全细菌生长,具有合并的菌落.
图4表明含有分泌的骆驼科VHH抗体的上清液有效地抑制鼠伤寒沙门氏菌生长直到24小时。
图5表明含有分泌的骆驼科VHH抗体的上清液有效地抑制鸡沙门氏菌生长直到24小时。
图6表明含有分泌的骆驼科VHH抗体的上清液有效地抑制新港沙门 氏菌生长直到24小时。
图7表明含有分泌的骆驼科VHH抗体的上清液有效地抑制奥博尼沙门氏菌生长直到24小时。
总之,图4-7共同表明,骆驼科VHH抗体对宽范围的沙门氏菌种成员是有效的,且可以用作沙门氏菌生长和感染的泛(pan)抑制剂。
序列表
<110> AbGenics
Ghosh, Sambuddha
<120> 在乳杆菌属中表达针对沙门氏菌属的单链抗体
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
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<400> 1
Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro
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<211> 7
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<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体C CDR1
<400> 6
Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe Pro
1 5
<210> 7
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体C CDR2
<400> 7
Ile Gly Ser Asp Tyr Thr Thr His
1 5
<210> 8
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体CDR3
<400> 8
Asp Val Leu Asp Tyr His Pro Asp Leu
1 5
<210> 9
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体D CDR1
<400> 9
Lys Trp Ser Tyr Thr Tyr Tyr Cys
1 5
<210> 10
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体D CDR2
<400> 10
Ile Asp Ser Glu Gly Thr
1 5
<210> 11
<211> 16
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体D CDR3
<400> 11
Gly Gly Tyr Cys Leu Arg Pro Arg Gln Leu Ala Ala Asp Tyr Glu Tyr
1 5 10 15
<210> 12
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体E CDR1
<400> 12
Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe Ala
1 5
<210> 13
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体H CDR1
<400> 13
Gly Asp Ser Ile Thr Thr Tyr His
1 5
<210> 14
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体H CDR2
<400> 14
Ile Asn Asp Asp Ala Asn Ser Arg
1 5
<210> 15
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体H CDR3
<400> 15
Asp Leu Arg Cys Val Pro Gly Thr Asp Ser Gly His Pro Tyr Ser Tyr
1 5 10 15
Asn Tyr
<210> 16
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体I CDR2
<400> 16
Ile Ser Pro Ile Gly Gly Ser
1 5
<210> 17
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体J CDR2
<400> 17
Ile Pro Ile Gly Gly Ser
1 5
<210> 18
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体K CDR2
<400> 18
Ile Pro Ile Gly Gly Ser
1 5
<210> 19
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体M CDR1
<400> 19
Ser Glu Tyr Thr Ala Ile Thr Tyr Cys
1 5
<210> 20
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体M CDR2
<400> 20
Ile Asn Arg Gly Gly Gly Ser Thr Tyr
1 5
<210> 21
<211> 14
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体M CDR3
<400> 21
Lys Gln Thr Gly Asp Cys Gly Ile Phe Gln Phe Phe Gly Asn
1 5 10
<210> 22
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体P CDR1
<400> 22
Gly Ser Thr Ala Ser Met Tyr Cys
1 5
<210> 23
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体M CDR2
<400> 23
Ile Ser Gly Asp Asp Lys Gly
1 5
<210> 24
<211> 18
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体P CDR3
<400> 24
Asp Ala Arg Ala Thr Thr Thr Gly Glu Arg Leu His Ala Arg Thr Tyr
1 5 10 15
Glu Phe
<210> 25
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体Q CDR1
<400> 25
Gly Asp Thr Leu Ser Thr Tyr Cys
1 5
<210> 26
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体Q CDR2
<400> 26
Ile Tyr Arg Leu Arg Asp Met Thr
1 5
<210> 27
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体Q CDR3
<400> 27
Arg Cys Val Arg Leu Phe Gly Thr Cys Gln Leu Val Glu Asp Phe Glu
1 5 10 15
Leu
<210> 28
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体A CDR1
<400> 28
ggtcatacgt attatggacc ttgt 24
<210> 29
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体A CDR2
<400> 29
attagtccta gtggtgggag 20
<210> 30
<211> 45
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体A CDR3
<400> 30
gattcagggg gactctgcag ccatcgtgag cgcgactatg acatt 45
<210> 31
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体B CDR1
<400> 31
gggttccgaa tattatggtt ccc 23
<210> 32
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体B CDR2
<400> 32
attgttccta ttggtgggag t 21
<210> 33
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体C CDR1
<400> 33
ggattcggaa tcggtagttt cccc 24
<210> 34
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体C CDR2
<400> 34
attggtagtg attatacg 18
<210> 35
<211> 26
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体C CDR3
<400> 35
gacgtacttg actaccaccc agattt 26
<210> 36
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体D CDR1
<400> 36
aaatggagct acacgtacta ttgt 24
<210> 37
<211> 17
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体D CDR2
<400> 37
attgatagtg aaggcac 17
<210> 38
<211> 52
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体D CDR3
<400> 38
caatggtggt tattgcctca gaccccgtca actcgccgcg gattatgagt at 52
<210> 39
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体E CDR1
<400> 39
ggattcggaa tcggtagttt cgcc 24
<210> 40
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体H CDR1
<400> 40
ggagattcca tcactaccta ccac 24
<210> 41
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体H CDR2
<400> 41
ataaatgatg atgctaattc 20
<210> 42
<211> 52
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体H CDR3
<400> 42
tttgaggtgc gtccctggga ccgactctgg tcatccttat tcgtataact ac 52
<210> 43
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体I CDR2
<400> 43
attagtccta ttggtgggag t 21
<210> 44
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体J CDR2
<400> 44
atgattccta ttggtgggag t 21
<210> 45
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体K CDR2
<400> 45
attattccta ttggtgggag t 21
<210> 46
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体M CDR1
<400> 46
gaatacaccg ctattaccta ctgt 24
<210> 47
<211> 18
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体M CDR2
<400> 47
atcaatcgcg gtggtggt 18
<210> 48
<211> 46
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体M CDR3
<400> 48
gtacaaacag accggtgatt gtgggatctt ccaattcttt ggaaac 46
<210> 49
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体P CDR1
<400> 49
ggatcgaccg ccagtatgta ctgc 24
<210> 50
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体P CDR2
<400> 50
attagtggag atgataaagg g 21
<210> 51
<211> 49
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体P CDR3
<400> 51
cgcgagcgac aacaactggt gaacgtctac acgcccggac gtacgaatt 49
<210> 52
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体Q CDR1
<400> 52
ggagataccc tcagtaccta ctgc 24
<210> 53
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体Q CDR2
<400> 53
atttatcgtc ttagggatat g 21
<210> 54
<211> 48
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体Q CDR3
<400> 54
tgtgtgcgac tattcggtac ttgtcagcta gtcgaagatt ttgaacta 48
<210> 55
<211> 126
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体A
<400> 55
Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro
20 25 30
Cys Val Gly Trp Phe Arg Gln Arg Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile
35 40 45
Ala Gln Ile Ser Pro Ser Gly Gly Ser Val Ser Tyr Ser Gly Gly Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala
65 70 75 80
Leu Ile Met Asn Asp Leu Val Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Asp Ser Gly Gly Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp
100 105 110
Ile Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Arg
115 120 125
<210> 56
<211> 379
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体A
<400> 56
atgtgcagct gcaggagtct gggggaggct cggtgcaggc tggaggctcc ctgacgctct 60
cttgtttaat gtctggtcat acgtattatg gaccttgtgt gggttggttc cgccagcgtc 120
cagggaaagc gcgtgaggga atcgcacaga ttagtcctag tggtgggagt gttagttaca 180
gtggtggcgt gaagggccga ttcaccattt cccgagacaa ctccaagaat actattgctc 240
tcataatgaa cgacctcgtg cctgaagaca cggccactta ttattgcgca gcagattcag 300
ggggactctg cagccatcgt gagcgcgact atgacatttg gggccagggg acccaggtca 360
ccgtctgcag cggccgcac 379
<210> 57
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体B
<400> 57
Asp Pro Asp Val His Leu Gln Asp Ser Gly Gly Gly Trp Val His Pro
1 5 10 15
Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys Leu Met Ser Gly Ser Glu Tyr Tyr
20 25 30
Gly Ser Pro Val Gly Trp Phe Pro Gln Pro Pro Gly Lys Gly Arg Glu
35 40 45
Glu Ile Ala Glu Ile Val Pro Ile Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly
50 55 60
Gly Val Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr
65 70 75 80
Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu Leu Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr
85 90 95
Tyr Cys Ala Ala Asp Ser Gly Gly Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp
100 105 110
Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys
115 120 125
<210> 58
<211> 375
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体B
<400> 58
gatccagatg tgcacctgca ggattcggga ggaggctggg tgcacccggg gggctccctg 60
accctctctt gtttaatgtc gggttccgaa tattatggtt cccctgtggg ttggttcccc 120
cagcccccag gaaaggggcg tgaggaaatc gcggaaattg ttcctattgg tgggagtgtt 180
atttacattg gtggcgtgga gggccgattc accatttccc gagacaactc caagaatact 240
attgctctca taatgaacga cctcctgcct gaagacacgg ccacttatta ttgcgcagca 300
gattcagggg gactctgcag ccatcgtgag cgcgactatg acatttgggg ccaggggacc 360
caggtcaccg tctgc 375
<210> 59
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体C
<400> 59
Asp Val Gln Leu Pro Glu Ser Gly Arg Thr Leu Val Pro Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Lys Leu Ser Trp Ala Thr His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe
20 25 30
Pro Met Leu Trp Val Pro Pro Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Ser Asp Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu
65 70 75 80
Arg Met Asp Asp Leu Leu Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Lys Asp Val Leu Asp Tyr His Pro Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Gln
100 105 110
Val Thr Val Cys Arg Gly Arg
115
<210> 60
<211> 359
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体C
<400> 60
agatgtgcag ctgccagaat ccggaagaac gttggtgcca cccggggggt ccctgaagct 60
ctcctgggca acgcacggat tcggaatcgg tagtttcccc atgctgtggg tccccccggc 120
ccccggaaaa gggctcgaat atattgcggg cattggtagt gattatacga cacactattc 180
aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc taaagacatt gccaagaata cactagatct 240
gcgcatggac gacctactgc ctgaagacac ggccaattat tattgtgcga aagacgtact 300
tgactaccac ccagatttgt ggggccgggg aacccaggtc accgtctgca ggggccgca 359
<210> 61
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体D
<400> 61
Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Asp Gly Gly Thr
1 5 10 15
Leu Gln Leu Ser Cys Glu Asp Ser Lys Trp Ser Tyr Thr Tyr Tyr Cys
20 25 30
Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Pro Val Ala
35 40 45
His Ile Asp Ser Glu Gly Thr Val Ala Tyr Ala Asp Thr Val Lys Gly
50 55 60
Arg Phe Thr Ile Ser Arg Gly Asp Ala Lys His Arg Val Tyr Leu Gln
65 70 75 80
Met Asn Asn Leu Lys Ala Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Ala
85 90 95
Asn Gly Gly Tyr Cys Leu Arg Pro Arg Gln Leu Ala Ala Asp Tyr Glu
100 105 110
Tyr Trp Gly Gln Gly Ala Gln Val Thr Val Ser Ser Gly
115 120 125
<210> 62
<211> 381
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体D
<400> 62
aagtgcagct gcaggagtct gggggaggct cggtgcagga tggagggact ttacaactct 60
cttgtgaaga ctctaaatgg agctacacgt actattgtat ggggtggttc cgccaggctc 120
cagggaagga gcgagagccg gtcgcgcaca ttgatagtga aggcactgtc gcttacgccg 180
acaccgtgaa gggccgattc accatctccc ggggggacgc caagcatagg gtttacctgc 240
aaatgaataa cttgaaggct gatgacacgg ccatctatta ttgtgcggcc aatggtggtt 300
attgcctcag accccgtcaa ctcgccgcgg attatgagta ttggggccag ggggcccagg 360
tcaccgtctc cagcggccgc a 381
<210> 63
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体E
<400> 63
Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Thr Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Ala Ala His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe
20 25 30
Ala Met Leu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Ser Asp Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu
65 70 75 80
Arg Met Asp Asp Leu Val Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Lys Asp Val Leu Asp Tyr His Pro Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln
100 105 110
Val Thr Val Cys Ser Gly Arg
115
<210> 64
<211> 361
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体E
<400> 64
agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggaac attggtgcag cccggggggt ctctgacgct 60
ctcctgtgca gcgcatggat tcggaatcgg tagtttcgcc atgctgtggg tccgccaggc 120
cccaggaaag gggctcgagt atattgcggg cattggtagt gattatacga cacactattc 180
aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc taaagacatt gccaagaata cactagatct 240
gcgcatggac gacctagtgc ctgaagacac ggccaattat tattgtgcga aagacgtact 300
tgactaccac ccagatttgt ggggccaggg aacccaggtc accgtctgca gcggccgcac 360
t 361
<210> 65
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体F
<400> 65
Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Thr Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Ala Ala His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe
20 25 30
Ala Met Leu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Ser Asp Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu
65 70 75 80
Arg Met Asp Asp Leu Val Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Lys Asp Val Leu Asp Tyr His Pro Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln
100 105 110
Val Thr Val Cys Ser Gly Arg
115
<210> 66
<211> 358
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体F
<400> 66
agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggaac attggtgcag cccggggggt ctctgacgct 60
ctcctgtgca gcgcatggat tcggaatcgg tagtttcgcc atgctgtggg tccgccaggc 120
cccaggaaag gggctcgagt atattgcggg cattggtagt gattatacga cacactattc 180
aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc taaagacatt gccaagaata cactagatct 240
gcgcatggac gacctagtgc ctgaagacac ggccaattat tattgtgcga aagacgtact 300
tgactaccac ccagatttgt ggggccaggg aacccaggtc accgtctgca gcggccgc 358
<210> 67
<211> 119
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体G
<400> 67
Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Thr Leu Val Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Ala Ala His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe
20 25 30
Ala Met Leu Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile
35 40 45
Ala Gly Ile Gly Ser Asp Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser
50 55 60
Gly Arg Phe Thr Ile Ser Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu
65 70 75 80
Arg Met Asp Asp Leu Val Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala
85 90 95
Lys Asp Val Leu Asp Tyr His Pro Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln
100 105 110
Val Thr Val Cys Ser Gly Arg
115
<210> 68
<211> 361
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体G
<400> 68
agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggaac attggtgcag cccggggggt ctctgacgct 60
ctcctgtgca gcgcatggat tcggaatcgg tagtttcgcc atgctgtggg tccgccaggc 120
cccaggaaag gggctcgagt atattgcggg cattggtagt gattatacga cacactattc 180
aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc taaagacatt gccaagaata cactagatct 240
gcgcatggac gacctagtgc ctgaagacac ggccaattat tattgtgcga aagacgtact 300
tgactaccac ccagatttgt ggggccaggg aacccaggtc accgtctgca gcggccgcac 360
t 361
<210> 69
<211> 128
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体H
<400> 69
Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Thr Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Asp Ser Ile Thr Thr Tyr
20 25 30
His Met Ala Trp Phe Arg Gln Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Glu Val
35 40 45
Ala Val Ile Asn Asp Asp Ala Asn Ser Arg Ile Tyr Val Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Lys Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Tyr Leu Thr Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Asp Leu Arg Cys Val Pro Gly Thr Asp Ser Gly His Pro Tyr
100 105 110
Ser Tyr Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly
115 120 125
<210> 70
<211> 386
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体H
<400> 70
agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggagg ttcggtgcag actggaggat ctctgagact 60
ctcctgtgca gcctctggag attccatcac tacctaccac atggcctggt tccgccagac 120
tccagggaag gagcgtgagg aggtcgcagt tataaatgat gatgctaatt cgagaatcta 180
tgtcgactcc gtgaagggcc gattcaccat ctcccaagac aaggccaaga acacggtgta 240
tctgcaaatg aactacctga cgcctgagga cacggccatc tactactgtg cggcagattt 300
gaggtgcgtc cctgggaccg actctggtca tccttattcg tataactact ggggccaggg 360
gacccaggtc accgtctgca gcggcc 386
<210> 71
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体I
<400> 71
Asp Val His Leu Gln Asp Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Trp Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro
20 25 30
Cys Val Gly Trp Phe Arg Gln Pro Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile
35 40 45
Pro Gln Ile Ser Pro Ile Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala
65 70 75 80
Leu Ile Met Asn Asp Leu Leu Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Asp Ser Gly Gly Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp
100 105 110
Ile Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly
115 120 125
<210> 72
<211> 374
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体I
<400> 72
agatgtgcac ctgcaggatt ctggaggagg ctcggtgcag gctggaggct ccctgacgct 60
ctcttggtta atgtcgggtc atacgtatta tggaccttgt gtgggttggt tccgccagcc 120
cccagggaaa gcgcgtgagg gaatcccaca gattagtcct attggtggga gtgttattta 180
cattggtggc gtgaagggcc gattcaccat ttcccgagac aactccaaga atactattgc 240
tctcataatg aacgacctcc tgcctgaaga cacggccact tattattgcg cagcagattc 300
agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt 360
caccgtctgc ggcc 374
<210> 73
<211> 125
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体J
<400> 73
Asp Val His Leu Gln Asp Ser Gly Glu Gly Trp Gly His Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro
20 25 30
Cys Gly Gly Gly Phe Pro Gln Pro Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile
35 40 45
Pro Gln Met Ile Pro Ile Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala
65 70 75 80
Leu Ile Met Asn Asp Leu Val Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Asp Ser Gly Gly Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp
100 105 110
Ile Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly
115 120 125
<210> 74
<211> 374
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体J
<400> 74
agatgtgcac ctgcaggatt cgggagaagg ctgggggcac gctggaggct ccctgaccct 60
ctcttgttta atgtcgggtc atacgtatta tggaccttgt gggggtgggt tcccccagcc 120
cccagggaaa gcccgtgagg gaatcccaca aatgattcct attggtggga gtgttattta 180
cattggtggc gtgaagggcc gattcaccat ttcccgagac aactccaaga atactattgc 240
tctcataatg aacgacctcg tgcctgaaga cacggccact tattattgcg caacagattc 300
agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt 360
caccgtctgc ggcc 374
<210> 75
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体K
<400> 75
Asp Val His Leu Gln Asp Ser Gly Gly Gly Ser Val His Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro
20 25 30
Cys Gly Gly Gly Phe Pro Arg Pro Pro Gly Lys Gly Arg Glu Gly Ile
35 40 45
Ala Gln Ile Ile Pro Ile Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Tyr Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala
65 70 75 80
Leu Ile Met Asn Asp Leu Val Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Cys Ala
85 90 95
Thr Asp Ser Gly Gly Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile
100 105 110
Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly
115 120
<210> 76
<211> 377
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体K
<400> 76
agatgtgcac ctgcaggatt ctggaggagg ctcggtgcac gctgggggct ccctgacgct 60
ctcttgttta atgtcgggtc atacgtatta tggaccttgt gggggtgggt tcccccggcc 120
cccaggaaaa gggcgtgagg gaatcgcaca aattattcct attggtggga gtgttattta 180
cattggtggc gtgaagggcc gattcaccat ttcccgatac aactccaaga atactattgc 240
tctcataatg aacgacctcg tgcctgaaga cacggccact tattattgcg caacagattc 300
agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt 360
caccgtctgc agcggcc 377
<210> 77
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体L
<400> 77
Asp Val His Leu Gln Asp Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Thr Leu Ser Cys Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro
20 25 30
Cys Val Gly Trp Phe Pro Gln Arg Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile
35 40 45
Ala Gln Met Ile Pro Ile Gly Gly Ser Val Ser Tyr Ser Gly Gly Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala
65 70 75 80
Leu Ile Met Asn Asp Leu Val Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Thr Asp Ser Gly Gly Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp
100 105 110
Ile Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser
115 120
<210> 78
<211> 373
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体L
<400> 78
agatgtgcac ctgcaggatt ctggaggagg ctcggtgcag gctggaggct ccctgaccct 60
ctcttgttta atgtcgggtc atacgtatta tggaccttgt gtgggttggt tcccccagcg 120
tccagggaaa gcgcgtgagg gaatcgcaca aatgattcct attggtggga gtgttagtta 180
cagtggtggc gtgaagggcc gattcaccat ttcccgagac aactccaaga atactattgc 240
tctcataatg aacgacctcg tgcctgaaga cacggccact tattattgcg caacagattc 300
agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt 360
caccgtctgc agc 373
<210> 79
<211> 127
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体M
<400> 79
Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Glu Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Glu Tyr Thr Ala Ile Thr Tyr
20 25 30
Cys Met Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val
35 40 45
Ala Ala Ile Asn Arg Gly Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Leu Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Gly Met Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Tyr Lys Gln Thr Gly Asp Cys Gly Ile Phe Gln Phe Phe Gly Asn
100 105 110
Tyr Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Arg Thr His
115 120 125
<210> 80
<211> 379
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体M
<400> 80
gatccagatg tgcagctgca ggagtctggg ggaggctcgg tgcaggaggg agggtctctg 60
agactctcct gtgcagcctc tgaatacacc gctattacct actgtatggc ctggttccgc 120
caggctccag ggaaggagcg tgagggggtc gcggctatca atcgcggtgg tggtagtaca 180
tattacgccg actccgtgaa gggccgattc accatctccc aggacaacgc caagaacacg 240
gtgtatctcc taatgaacag cctgaaacct gaggacactg gcatgtacta ctgtgcgtac 300
aaacagaccg gtgattgtgg gatcttccaa ttctttggaa actatggcca ggggacccag 360
gtcaccgtct ccagcggcc 379
<210> 81
<211> 128
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体N
<400> 81
Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Thr Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Asp Ser Ile Thr Thr Tyr
20 25 30
His Met Ala Trp Phe Arg Gln Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Glu Val
35 40 45
Ala Val Ile Asn Asp Asp Ala Asn Ser Arg Ile Tyr Val Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Lys Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Tyr Leu Thr Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Asp Leu Arg Cys Val Pro Gly Thr Asp Ser Gly His Pro Tyr
100 105 110
Ser Tyr Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Ala Ser Ser Gly
115 120 125
<210> 82
<211> 386
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体N
<400> 82
agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggagg ttcggtgcag actggaggat ctctgagact 60
ctcctgtgca gcctctggag attccatcac tacctaccac atggcctggt tccgccagac 120
tccagggaag gagcgtgagg aggtcgcagt tataaatgat gatgctaatt cgagaatcta 180
tgtcgactcc gtgaagggcc gattcaccat ctcccaagac aaggccaaga acacggtgta 240
tctgcaaatg aactacctga cgcctgagga cacggccatc tactactgtg cggcagattt 300
gaggtgcgtc cctgggaccg actctggtca tccttattcg tataactact ggggccaggg 360
gacccaggtc accgcctcca gcggcc 386
<210> 83
<211> 129
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体O
<400> 83
Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Thr Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Asp Ser Ile Thr Thr Tyr
20 25 30
His Met Ala Trp Phe Arg Gln Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Glu Val
35 40 45
Ala Val Ile Asn Asp Asp Ala Asn Ser Arg Ile Tyr Val Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asp Lys Ala Lys Asn Thr Val Tyr
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Tyr Leu Thr Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Asp Leu Arg Cys Val Pro Gly Thr Asp Ser Gly His Pro Tyr
100 105 110
Ser Tyr Asn Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Ala Ser Ser Gly
115 120 125
Arg
<210> 84
<211> 386
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体O
<400> 84
agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggagg ttcggtgcag actggaggat ctctgagact 60
ctcctgtgca gcctctggag attccatcac tacctaccac atggcctggt tccgccagac 120
tccagggaag gagcgtgagg aggtcgcagt tataaatgat gatgctaatt cgagaatcta 180
tgtcgactcc gtgaagggcc gattcaccat ctcccaagac aaggccaaga acacggtgta 240
tctgcaaatg aactacctga cgcctgagga cacggccatc tactactgtg cggcagattt 300
gaggtgcgtc cctgggaccg actctggtca tccttattcg tataactact ggggccaggg 360
gacccaggtc accgcctcca gcggcc 386
<210> 85
<211> 130
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体P
<400> 85
Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser Gly Gly Gly Ser Ala Gln Pro Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Val Ser Gly Ser Thr Ala Ser Met Tyr
20 25 30
Cys Leu Ala Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Glu Pro Glu Gly Val
35 40 45
Ala Ala Ile Ser Gly Asp Asp Lys Gly Phe Thr Asn Tyr Ala Asp Ser
50 55 60
Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Gln Asn Lys Ala Asn Lys Thr Val
65 70 75 80
Asn Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr
85 90 95
Cys Ala Val Asp Ala Arg Ala Thr Thr Thr Gly Glu Arg Leu His Ala
100 105 110
Arg Thr Tyr Glu Phe Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser
115 120 125
Gly Arg
130
<210> 86
<211> 390
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体P
<400> 86
gatgtgcagc tgcaggagtc tgggggaggc tcggcgcagc ctggagggtc tctgagactc 60
tcctgtgcag tctctggatc gaccgccagt atgtactgct tggcctggtt ccgccaggct 120
ccagggaagg agcctgaggg ggttgctgct attagtggag atgataaagg gtttacgaat 180
tacgccgact ccgtgaaggg ccggttcacc atctcccaaa acaaggccaa taaaacggtg 240
aatctgcaaa tgaacagcct gaaacctgaa gacacggcca tttattactg tgccgttgat 300
gcgcgagcga caacaactgg tgaacgtcta cacgcccgga cgtacgaatt ctggggccag 360
gggacccagg tcaccgtctg cagcggccgc 390
<210> 87
<211> 128
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体Q
<400> 87
Asp Val Gln Met Gln Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Asp Thr Leu Ser Thr Tyr
20 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Asp Arg Glu Gly Val
35 40 45
Ala Ala Ile Tyr Arg Leu Arg Asp Met Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Asn Asp Thr Val Asp
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Cys Val Arg Leu Phe Gly Thr Cys Gln Leu Val Glu Asp
100 105 110
Phe Glu Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Leu
115 120 125
<210> 88
<211> 382
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体Q
<400> 88
agatgtgcag atgcaggagt ctgggggagg gtcggtgcag gctggagggt ctctgagact 60
ctcctgtgca gcctctggag ataccctcag tacctactgc atgggctggt tccgccaagt 120
tccagggaag gaccgtgagg gggtcgcagc gatttatcgt cttagggata tgacgttcta 180
tgccgactcc gtgaagggcc gattcaccat ttcccgtgac aacgccaacg acacggtaga 240
tctgcaaatg aacagcctga aacctgagga cacagccgtg tactactgtg cagcaagatg 300
tgtgcgacta ttcggtactt gtcagctagt cgaagatttt gaactatggg gccaggggac 360
ccaggtcacc gtctccagcg gc 382
<210> 89
<211> 129
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体R
<400> 89
Asp Val Gln Met Gln Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Asp Thr Leu Ser Thr Tyr
20 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Ala Pro Gly Lys Asp Arg Glu Gly Val
35 40 45
Ala Ala Ile Tyr Arg Leu Arg Asp Met Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Asn Asp Thr Val Asp
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Cys Val Arg Leu Phe Gly Thr Cys Gln Leu Val Glu Asp
100 105 110
Phe Glu Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Leu
115 120 125
Thr
<210> 90
<211> 382
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体R
<400> 90
agatgtgcag atgcaggagt ctgggggagg gtcggtgcag gctggagggt ctctgagact 60
ctcctgtgca gcctctggag ataccctcag tacctactgc atgggctggt tccgccaagt 120
tccagggaag gaccgtgagg gggtcgcagc gatttatcgt cttagggata tgacgttcta 180
tgccgactcc gtgaagggcc gattcaccat ttcccgtgac aacgccaacg acacggtaga 240
tctgcaaatg aacagcctga aacctgagga cacagccgtg tactactgtg cagcaagatg 300
tgtgcgacta ttcggtactt gtcagctagt cgaagatttt gaactatggg gccaggggac 360
ccaggtcacc gtctccagcg gc 382
<210> 91
<211> 129
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体S
<400> 91
Asp Val Gln Met Gln Glu Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly
1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Asp Thr Leu Ser Thr Tyr
20 25 30
Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln Val Pro Gly Lys Asp Arg Glu Gly Val
35 40 45
Ala Ala Ile Tyr Arg Leu Arg Asp Met Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val
50 55 60
Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Asn Asp Thr Val Asp
65 70 75 80
Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys
85 90 95
Ala Ala Arg Cys Val Arg Leu Phe Gly Thr Cys Gln Leu Val Glu Asp
100 105 110
Phe Glu Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Leu
115 120 125
Thr
<210> 92
<211> 383
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 抗体S
<400> 92
agatgtgcag atgcaggagt ctgggggagg gtcggtgcag gctggagggt ctctgagact 60
ctcctgtgca gcctctggag ataccctcag tacctactgc atgggctggt tccgccaagt 120
tccagggaag gaccgtgagg gggtcgcagc gatttatcgt cttagggata tgacgttcta 180
tgccgactcc gtgaagggcc gattcaccat ttcccgtgac aacgccaacg acacggtaga 240
tctgcaaatg aacagcctga aacctgagga cacagccgtg tactactgtg cagcaagatg 300
tgtgcgacta ttcggtactt gtcagctagt cgaagatttt gaactatggg gccaggggac 360
ccaggtcacc gtctccagcg gcc 383
<210> 93
<211> 148
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体A
<400> 93
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Val Gly Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Arg Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile Ala Gln Ile Ser Pro Ser
50 55 60
Gly Gly Ser Val Ser Tyr Ser Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Glu Thr Asn
85 90 95
Asp Leu Val Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Ser
100 105 110
Gly Gly Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Arg Gly Tyr Val Leu Val Ser
130 135 140
Asp Gly Phe Lys
145
<210> 94
<211> 439
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体A
<400> 94
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac atgtgcagct gcaggagtct gggggaggct 60
cggtgcaggc tggaggctcc ctgacgctct cttgtttaat gtctggtcat acgtattatg 120
gaccttgtgt gggttggttc cgccagcgtc cagggaaagc gcgtgaggga atcgcacaga 180
ttagtcctag tggtgggagt gttagttaca gtggtggcgt gaagggccga ttcaccattt 240
cccgagacaa ctccaagaat actattgctc tcataatgaa cgacctcgtg cctgaagaca 300
cggccactta ttattgcgca gcagattcag ggggactctg cagccatcgt gagcgcgact 360
atgacatttg gggccagggg acccaggtca ccgtctgcag cggccgcacg ctacgttctg 420
gtatcggacg gcttcaagc 439
<210> 95
<211> 145
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体B
<400> 95
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Asp Pro Asp Val His Leu
1 5 10 15
Gln Asp Ser Gly Gly Gly Trp Val His Pro Gly Gly Ser Leu Thr Leu
20 25 30
Ser Cys Leu Met Ser Gly Ser Glu Tyr Tyr Gly Ser Pro Val Gly Trp
35 40 45
Phe Pro Gln Pro Pro Gly Lys Gly Arg Glu Glu Ile Ala Glu Ile Val
50 55 60
Pro Ile Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val Glu Gly Arg Phe
65 70 75 80
Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn
85 90 95
Asp Leu Leu Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Ser
100 105 110
Gly Gly Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Gly Tyr Val Leu Val Ser Asp Gly Phe
130 135 140
Lys
145
<210> 96
<211> 435
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体B
<400> 96
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac gatccagatg tgcacctgca ggattcggga 60
ggaggctggg tgcacccggg gggctccctg accctctctt gtttaatgtc gggttccgaa 120
tattatggtt cccctgtggg ttggttcccc cagcccccag gaaaggggcg tgaggaaatc 180
gcggaaattg ttcctattgg tgggagtgtt atttacattg gtggcgtgga gggccgattc 240
accatttccc gagacaactc caagaatact attgctctca taatgaacga cctcctgcct 300
gaagacacgg ccacttatta ttgcgcagca gattcagggg gactctgcag ccatcgtgag 360
cgcgactatg acatttgggg ccaggggacc caggtcaccg tctgcgctac gttctggtat 420
cggacggctt caagc 435
<210> 97
<211> 139
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体C
<400> 97
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Asp Val Gln Leu Pro Glu
1 5 10 15
Ser Gly Arg Thr Leu Val Pro Pro Gly Gly Ser Leu Lys Leu Ser Trp
20 25 30
Ala Thr His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe Pro Met Leu Trp Val Pro
35 40 45
Pro Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Ala Gly Ile Gly Ser Asp
50 55 60
Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu Arg Met Asp Asp Leu Leu
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Val Leu Asp Tyr
100 105 110
His Pro Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Arg Gly
115 120 125
Arg Gly Tyr Val Leu Val Ser Asp Gly Phe Lys
130 135
<210> 98
<211> 419
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体C
<400> 98
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac agatgtgcag ctgccagaat ccggaagaac 60
gttggtgcca cccggggggt ccctgaagct ctcctgggca acgcacggat tcggaatcgg 120
tagtttcccc atgctgtggg tccccccggc ccccggaaaa gggctcgaat atattgcggg 180
cattggtagt gattatacga cacactattc aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc 240
taaagacatt gccaagaata cactagatct gcgcatggac gacctactgc ctgaagacac 300
ggccaattat tattgtgcga aagacgtact tgactaccac ccagatttgt ggggccgggg 360
aacccaggtc accgtctgca ggggccgcag ctacgttctg gtatcggacg gcttcaagc 419
<210> 99
<211> 147
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体D
<400> 99
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Val Gln Asp Gly Gly Thr Leu Gln Leu Ser Cys Glu
20 25 30
Asp Ser Lys Trp Ser Tyr Thr Tyr Tyr Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln
35 40 45
Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Pro Val Ala His Ile Asp Ser Glu Gly
50 55 60
Thr Val Ala Tyr Ala Asp Thr Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg
65 70 75 80
Gly Asp Ala Lys His Arg Val Tyr Leu Gln Met Glu Thr Asn Asn Leu
85 90 95
Lys Ala Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Ala Asn Gly Gly Tyr
100 105 110
Cys Leu Arg Pro Arg Gln Leu Ala Ala Asp Tyr Glu Tyr Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Ala Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Tyr Val Leu Val Ser Asp
130 135 140
Gly Phe Lys
145
<210> 100
<211> 441
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体D
<400> 100
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac aagtgcagct gcaggagtct gggggaggct 60
cggtgcagga tggagggact ttacaactct cttgtgaaga ctctaaatgg agctacacgt 120
actattgtat ggggtggttc cgccaggctc cagggaagga gcgagagccg gtcgcgcaca 180
ttgatagtga aggcactgtc gcttacgccg acaccgtgaa gggccgattc accatctccc 240
ggggggacgc caagcatagg gtttacctgc aaatgaataa cttgaaggct gatgacacgg 300
ccatctatta ttgtgcggcc aatggtggtt attgcctcag accccgtcaa ctcgccgcgg 360
attatgagta ttggggccag ggggcccagg tcaccgtctc cagcggccgc agctacgttc 420
tggtatcgga cggcttcaag c 441
<210> 101
<211> 139
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体E
<400> 101
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Thr Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe Ala Met Leu Trp Val Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Ala Gly Ile Gly Ser Asp
50 55 60
Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu Arg Met Asp Asp Leu Val
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Val Leu Asp Tyr
100 105 110
His Pro Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly
115 120 125
Arg Gly Tyr Val Leu Val Ser Asp Gly Phe Lys
130 135
<210> 102
<211> 421
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点抗体E
<400> 102
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggaac 60
attggtgcag cccggggggt ctctgacgct ctcctgtgca gcgcatggat tcggaatcgg 120
tagtttcgcc atgctgtggg tccgccaggc cccaggaaag gggctcgagt atattgcggg 180
cattggtagt gattatacga cacactattc aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc 240
taaagacatt gccaagaata cactagatct gcgcatggac gacctagtgc ctgaagacac 300
ggccaattat tattgtgcga aagacgtact tgactaccac ccagatttgt ggggccaggg 360
aacccaggtc accgtctgca gcggccgcac tgctacgttc tggtatcgga cggcttcaag 420
c 421
<210> 103
<211> 139
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体F
<400> 103
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Thr Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe Ala Met Leu Trp Val Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Ala Gly Ile Gly Ser Asp
50 55 60
Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu Arg Met Asp Asp Leu Val
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Val Leu Asp Tyr
100 105 110
His Pro Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly
115 120 125
Arg Gly Tyr Val Leu Val Ser Asp Gly Phe Lys
130 135
<210> 104
<211> 418
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体F
<400> 104
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggaac 60
attggtgcag cccggggggt ctctgacgct ctcctgtgca gcgcatggat tcggaatcgg 120
tagtttcgcc atgctgtggg tccgccaggc cccaggaaag gggctcgagt atattgcggg 180
cattggtagt gattatacga cacactattc aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc 240
taaagacatt gccaagaata cactagatct gcgcatggac gacctagtgc ctgaagacac 300
ggccaattat tattgtgcga aagacgtact tgactaccac ccagatttgt ggggccaggg 360
aacccaggtc accgtctgca gcggccgcgc tacgttctgg tatcggacgg cttcaagc 418
<210> 105
<211> 139
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体G
<400> 105
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Thr Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe Ala Met Leu Trp Val Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Ala Gly Ile Gly Ser Asp
50 55 60
Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu Arg Met Asp Asp Leu Val
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Val Leu Asp Tyr
100 105 110
His Pro Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly
115 120 125
Arg Gly Tyr Val Leu Val Ser Asp Gly Phe Lys
130 135
<210> 106
<211> 421
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体G
<400> 106
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggaac 60
attggtgcag cccggggggt ctctgacgct ctcctgtgca gcgcatggat tcggaatcgg 120
tagtttcgcc atgctgtggg tccgccaggc cccaggaaag gggctcgagt atattgcggg 180
cattggtagt gattatacga cacactattc aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc 240
taaagacatt gccaagaata cactagatct gcgcatggac gacctagtgc ctgaagacac 300
ggccaattat tattgtgcga aagacgtact tgactaccac ccagatttgt ggggccaggg 360
aacccaggtc accgtctgca gcggccgcac tgctacgttc tggtatcgga cggcttcaag 420
c 421
<210> 107
<211> 148
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体H
<400> 107
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Thr Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Ser Ile Thr Thr Tyr His Met Ala Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Glu Val Ala Val Ile Asn Asp Asp
50 55 60
Ala Asn Ser Arg Ile Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Gln Asp Lys Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Tyr Leu
85 90 95
Thr Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Leu Arg Cys
100 105 110
Val Pro Gly Thr Asp Ser Gly His Pro Tyr Ser Tyr Asn Tyr Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Gly Tyr Val Leu Val Ser
130 135 140
Asp Gly Phe Lys
145
<210> 108
<211> 446
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体H
<400> 108
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggagg 60
ttcggtgcag actggaggat ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag attccatcac 120
tacctaccac atggcctggt tccgccagac tccagggaag gagcgtgagg aggtcgcagt 180
tataaatgat gatgctaatt cgagaatcta tgtcgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ctcccaagac aaggccaaga acacggtgta tctgcaaatg aactacctga cgcctgagga 300
cacggccatc tactactgtg cggcagattt gaggtgcgtc cctgggaccg actctggtca 360
tccttattcg tataactact ggggccaggg gacccaggtc accgtctgca gcggccgcta 420
cgttctggta tcggacggct tcaagc 446
<210> 109
<211> 145
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体I
<400> 109
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Asp Val His Leu Gln Asp
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Trp
20 25 30
Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Val Gly Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Pro Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile Pro Gln Ile Ser Pro Ile
50 55 60
Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu
85 90 95
Leu Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Ser Gly Gly
100 105 110
Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr
115 120 125
Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Gly Tyr Val Leu Val Ser Asp Gly Phe
130 135 140
Lys
145
<210> 110
<211> 434
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体I
<400> 110
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac agatgtgcac ctgcaggatt ctggaggagg 60
ctcggtgcag gctggaggct ccctgacgct ctcttggtta atgtcgggtc atacgtatta 120
tggaccttgt gtgggttggt tccgccagcc cccagggaaa gcgcgtgagg gaatcccaca 180
gattagtcct attggtggga gtgttattta cattggtggc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgagac aactccaaga atactattgc tctcataatg aacgacctcc tgcctgaaga 300
cacggccact tattattgcg cagcagattc agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga 360
ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt caccgtctgc ggccgctacg ttctggtatc 420
ggacggcttc aagc 434
<210> 111
<211> 145
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体J
<400> 111
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Asp Val His Leu Gln Asp
1 5 10 15
Ser Gly Glu Gly Trp Gly His Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Gly Gly Gly Phe Pro
35 40 45
Gln Pro Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile Pro Gln Met Ile Pro Ile
50 55 60
Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu
85 90 95
Val Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Asp Ser Gly Gly
100 105 110
Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr
115 120 125
Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Gly Tyr Val Leu Val Ser Asp Gly Phe
130 135 140
Lys
145
<210> 112
<211> 434
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体J
<400> 112
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac agatgtgcac ctgcaggatt cgggagaagg 60
ctgggggcac gctggaggct ccctgaccct ctcttgttta atgtcgggtc atacgtatta 120
tggaccttgt gggggtgggt tcccccagcc cccagggaaa gcccgtgagg gaatcccaca 180
aatgattcct attggtggga gtgttattta cattggtggc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgagac aactccaaga atactattgc tctcataatg aacgacctcg tgcctgaaga 300
cacggccact tattattgcg caacagattc agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga 360
ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt caccgtctgc ggccgctacg ttctggtatc 420
ggacggcttc aagc 434
<210> 113
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体K
<400> 113
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Asp Val His Leu Gln Asp
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val His Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Gly Gly Gly Phe Pro
35 40 45
Arg Pro Pro Gly Lys Gly Arg Glu Gly Ile Ala Gln Ile Ile Pro Ile
50 55 60
Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Tyr Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu
85 90 95
Val Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Cys Ala Thr Asp Ser Gly Gly Leu
100 105 110
Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Gln
115 120 125
Val Thr Val Cys Ser Gly Gly Tyr Val Leu Val Ser Asp Gly Phe Lys
130 135 140
<210> 114
<211> 437
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体K
<400> 114
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac agatgtgcac ctgcaggatt ctggaggagg 60
ctcggtgcac gctgggggct ccctgacgct ctcttgttta atgtcgggtc atacgtatta 120
tggaccttgt gggggtgggt tcccccggcc cccaggaaaa gggcgtgagg gaatcgcaca 180
aattattcct attggtggga gtgttattta cattggtggc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgatac aactccaaga atactattgc tctcataatg aacgacctcg tgcctgaaga 300
cacggccact tattattgcg caacagattc agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga 360
ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt caccgtctgc agcggccgct acgttctggt 420
atcggacggc ttcaagc 437
<210> 115
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点抗体L
<400> 115
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Asp Val His Leu Gln Asp
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Val Gly Trp Phe Pro
35 40 45
Gln Arg Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile Ala Gln Met Ile Pro Ile
50 55 60
Gly Gly Ser Val Ser Tyr Ser Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu
85 90 95
Val Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Asp Ser Gly Gly
100 105 110
Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr
115 120 125
Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Tyr Val Leu Val Ser Asp Gly Phe Lys
130 135 140
<210> 116
<211> 433
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体L
<400> 116
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac agatgtgcac ctgcaggatt ctggaggagg 60
ctcggtgcag gctggaggct ccctgaccct ctcttgttta atgtcgggtc atacgtatta 120
tggaccttgt gtgggttggt tcccccagcg tccagggaaa gcgcgtgagg gaatcgcaca 180
aatgattcct attggtggga gtgttagtta cagtggtggc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgagac aactccaaga atactattgc tctcataatg aacgacctcg tgcctgaaga 300
cacggccact tattattgcg caacagattc agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga 360
ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt caccgtctgc agcgctacgt tctggtatcg 420
gacggcttca agc 433
<210> 117
<211> 147
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体M
<400> 117
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Glu Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Glu Tyr Thr Ala Ile Thr Tyr Cys Met Ala Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala Ile Asn Arg Gly
50 55 60
Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Gln Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Leu Met Asn Ser Leu
85 90 95
Lys Pro Glu Asp Thr Gly Met Tyr Tyr Cys Ala Tyr Lys Gln Thr Gly
100 105 110
Asp Cys Gly Ile Phe Gln Phe Phe Gly Asn Tyr Gly Gln Gly Thr Gln
115 120 125
Val Thr Val Ser Ser Gly Arg Thr His Gly Tyr Val Leu Val Ser Asp
130 135 140
Gly Phe Lys
145
<210> 118
<211> 439
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体M
<400> 118
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac gatccagatg tgcagctgca ggagtctggg 60
ggaggctcgg tgcaggaggg agggtctctg agactctcct gtgcagcctc tgaatacacc 120
gctattacct actgtatggc ctggttccgc caggctccag ggaaggagcg tgagggggtc 180
gcggctatca atcgcggtgg tggtagtaca tattacgccg actccgtgaa gggccgattc 240
accatctccc aggacaacgc caagaacacg gtgtatctcc taatgaacag cctgaaacct 300
gaggacactg gcatgtacta ctgtgcgtac aaacagaccg gtgattgtgg gatcttccaa 360
ttctttggaa actatggcca ggggacccag gtcaccgtct ccagcggccg ctacgttctg 420
gtatcggacg gcttcaagc 439
<210> 119
<211> 148
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体N
<400> 119
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Thr Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Ser Ile Thr Thr Tyr His Met Ala Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Glu Val Ala Val Ile Asn Asp Asp
50 55 60
Ala Asn Ser Arg Ile Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Gln Asp Lys Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Tyr Leu
85 90 95
Thr Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Leu Arg Cys
100 105 110
Val Pro Gly Thr Asp Ser Gly His Pro Tyr Ser Tyr Asn Tyr Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Gln Val Thr Ala Ser Ser Gly Gly Tyr Val Leu Val Ser
130 135 140
Asp Gly Phe Lys
145
<210> 120
<211> 446
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体N
<400> 120
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggagg 60
ttcggtgcag actggaggat ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag attccatcac 120
tacctaccac atggcctggt tccgccagac tccagggaag gagcgtgagg aggtcgcagt 180
tataaatgat gatgctaatt cgagaatcta tgtcgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ctcccaagac aaggccaaga acacggtgta tctgcaaatg aactacctga cgcctgagga 300
cacggccatc tactactgtg cggcagattt gaggtgcgtc cctgggaccg actctggtca 360
tccttattcg tataactact ggggccaggg gacccaggtc accgcctcca gcggccgcta 420
cgttctggta tcggacggct tcaagc 446
<210> 121
<211> 149
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体O
<400> 121
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Thr Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Ser Ile Thr Thr Tyr His Met Ala Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Glu Val Ala Val Ile Asn Asp Asp
50 55 60
Ala Asn Ser Arg Ile Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Gln Asp Lys Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Tyr Leu
85 90 95
Thr Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Leu Arg Cys
100 105 110
Val Pro Gly Thr Asp Ser Gly His Pro Tyr Ser Tyr Asn Tyr Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Gln Val Thr Ala Ser Ser Gly Arg Gly Tyr Val Leu Val
130 135 140
Ser Asp Gly Phe Lys
145
<210> 122
<211> 446
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体O
<400> 122
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggagg 60
ttcggtgcag actggaggat ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag attccatcac 120
tacctaccac atggcctggt tccgccagac tccagggaag gagcgtgagg aggtcgcagt 180
tataaatgat gatgctaatt cgagaatcta tgtcgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ctcccaagac aaggccaaga acacggtgta tctgcaaatg aactacctga cgcctgagga 300
cacggccatc tactactgtg cggcagattt gaggtgcgtc cctgggaccg actctggtca 360
tccttattcg tataactact ggggccaggg gacccaggtc accgcctcca gcggccgcta 420
cgttctggta tcggacggct tcaagc 446
<210> 123
<211> 150
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体P
<400> 123
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Ala Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Val Ser Gly Ser Thr Ala Ser Met Tyr Cys Leu Ala Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Glu Pro Glu Gly Val Ala Ala Ile Ser Gly Asp
50 55 60
Asp Lys Gly Phe Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr
65 70 75 80
Ile Ser Gln Asn Lys Ala Asn Lys Thr Val Asn Leu Gln Met Asn Ser
85 90 95
Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Val Asp Ala Arg
100 105 110
Ala Thr Thr Thr Gly Glu Arg Leu His Ala Arg Thr Tyr Glu Phe Trp
115 120 125
Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Arg Gly Tyr Val Leu
130 135 140
Val Ser Asp Gly Phe Lys
145 150
<210> 124
<211> 450
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体P
<400> 124
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac gatgtgcagc tgcaggagtc tgggggaggc 60
tcggcgcagc ctggagggtc tctgagactc tcctgtgcag tctctggatc gaccgccagt 120
atgtactgct tggcctggtt ccgccaggct ccagggaagg agcctgaggg ggttgctgct 180
attagtggag atgataaagg gtttacgaat tacgccgact ccgtgaaggg ccggttcacc 240
atctcccaaa acaaggccaa taaaacggtg aatctgcaaa tgaacagcct gaaacctgaa 300
gacacggcca tttattactg tgccgttgat gcgcgagcga caacaactgg tgaacgtcta 360
cacgcccgga cgtacgaatt ctggggccag gggacccagg tcaccgtctg cagcggccgc 420
gctacgttct ggtatcggac ggcttcaagc 450
<210> 125
<211> 150
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体Q
<400> 125
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Asp Val Gln Met Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Thr Leu Ser Thr Tyr Cys Met Gly Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Val Pro Gly Lys Asp Arg Glu Gly Val Ala Ala Ile Tyr Arg Leu
50 55 60
Arg Asp Met Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ala Asn Asp Thr Val Asp Leu Gln Met Glu Thr Asn
85 90 95
Ser Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Cys
100 105 110
Val Arg Leu Phe Gly Thr Cys Gln Leu Val Glu Asp Phe Glu Leu Trp
115 120 125
Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Leu Gly Tyr Val Leu
130 135 140
Val Ser Asp Gly Phe Lys
145 150
<210> 126
<211> 442
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体Q
<400> 126
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac agatgtgcag atgcaggagt ctgggggagg 60
gtcggtgcag gctggagggt ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag ataccctcag 120
tacctactgc atgggctggt tccgccaagt tccagggaag gaccgtgagg gggtcgcagc 180
gatttatcgt cttagggata tgacgttcta tgccgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgtgac aacgccaacg acacggtaga tctgcaaatg aacagcctga aacctgagga 300
cacagccgtg tactactgtg cagcaagatg tgtgcgacta ttcggtactt gtcagctagt 360
cgaagatttt gaactatggg gccaggggac ccaggtcacc gtctccagcg gcgctacgtt 420
ctggtatcgg acggcttcaa gc 442
<210> 127
<211> 149
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体R
<400> 127
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Asp Val Gln Met Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Thr Leu Ser Thr Tyr Cys Met Gly Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Asp Arg Glu Gly Val Ala Ala Ile Tyr Arg Leu
50 55 60
Arg Asp Met Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ala Asn Asp Thr Val Asp Leu Gln Met Asn Ser Leu
85 90 95
Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Cys Val Arg
100 105 110
Leu Phe Gly Thr Cys Gln Leu Val Glu Asp Phe Glu Leu Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Leu Thr Gly Tyr Val Leu Val
130 135 140
Ser Asp Gly Phe Lys
145
<210> 128
<211> 442
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体R
<400> 128
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac agatgtgcag atgcaggagt ctgggggagg 60
gtcggtgcag gctggagggt ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag ataccctcag 120
tacctactgc atgggctggt tccgccaagt tccagggaag gaccgtgagg gggtcgcagc 180
gatttatcgt cttagggata tgacgttcta tgccgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgtgac aacgccaacg acacggtaga tctgcaaatg aacagcctga aacctgagga 300
cacagccgtg tactactgtg cagcaagatg tgtgcgacta ttcggtactt gtcagctagt 360
cgaagatttt gaactatggg gccaggggac ccaggtcacc gtctccagcg gcgctacgtt 420
ctggtatcgg acggcttcaa gc 442
<210> 129
<211> 149
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体S
<400> 129
Ala Glu Gly Ile Lys Lys Phe Glu Gly Asp Asp Val Gln Met Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Thr Leu Ser Thr Tyr Cys Met Gly Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Val Pro Gly Lys Asp Arg Glu Gly Val Ala Ala Ile Tyr Arg Leu
50 55 60
Arg Asp Met Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ala Asn Asp Thr Val Asp Leu Gln Met Asn Ser Leu
85 90 95
Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Cys Val Arg
100 105 110
Leu Phe Gly Thr Cys Gln Leu Val Glu Asp Phe Glu Leu Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Leu Thr Gly Tyr Val Leu Val
130 135 140
Ser Asp Gly Phe Lys
145
<210> 130
<211> 443
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点1抗体S
<400> 130
gctgaaggca tcaagaagtt cgaaggcgac agatgtgcag atgcaggagt ctgggggagg 60
gtcggtgcag gctggagggt ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag ataccctcag 120
tacctactgc atgggctggt tccgccaagt tccagggaag gaccgtgagg gggtcgcagc 180
gatttatcgt cttagggata tgacgttcta tgccgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgtgac aacgccaacg acacggtaga tctgcaaatg aacagcctga aacctgagga 300
cacagccgtg tactactgtg cagcaagatg tgtgcgacta ttcggtactt gtcagctagt 360
cgaagatttt gaactatggg gccaggggac ccaggtcacc gtctccagcg gccgaagtcg 420
tcaaggaact cgaaaagcag ggt 443
<210> 131
<211> 146
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体A
<400> 131
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Val Gly Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Arg Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile Ala Gln Ile Ser Pro Ser
50 55 60
Gly Gly Ser Val Ser Tyr Ser Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu
85 90 95
Val Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Ser Gly Gly
100 105 110
Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr
115 120 125
Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Arg Val Val Tyr Val Gly Asn Pro Gln
130 135 140
Glu Ala
145
<210> 132
<211> 439
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体A
<400> 132
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg atgtgcagct gcaggagtct gggggaggct 60
cggtgcaggc tggaggctcc ctgacgctct cttgtttaat gtctggtcat acgtattatg 120
gaccttgtgt gggttggttc cgccagcgtc cagggaaagc gcgtgaggga atcgcacaga 180
ttagtcctag tggtgggagt gttagttaca gtggtggcgt gaagggccga ttcaccattt 240
cccgagacaa ctccaagaat actattgctc tcataatgaa cgacctcgtg cctgaagaca 300
cggccactta ttattgcgca gcagattcag ggggactctg cagccatcgt gagcgcgact 360
atgacatttg gggccagggg acccaggtca ccgtctgcag cggccgcacg tcgtttatgt 420
tgggaatcct caagaagct 439
<210> 133
<211> 145
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体B
<400> 133
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Asp Pro Asp Val His Leu
1 5 10 15
Gln Asp Ser Gly Gly Gly Trp Val His Pro Gly Gly Ser Leu Thr Leu
20 25 30
Ser Cys Leu Met Ser Gly Ser Glu Tyr Tyr Gly Ser Pro Val Gly Trp
35 40 45
Phe Pro Gln Pro Pro Gly Lys Gly Arg Glu Glu Ile Ala Glu Ile Val
50 55 60
Pro Ile Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val Glu Gly Arg Phe
65 70 75 80
Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn
85 90 95
Asp Leu Leu Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Ser
100 105 110
Gly Gly Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Val Val Tyr Val Gly Asn Pro Gln Glu
130 135 140
Ala
145
<210> 134
<211> 435
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体B
<400> 134
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg gatccagatg tgcacctgca ggattcggga 60
ggaggctggg tgcacccggg gggctccctg accctctctt gtttaatgtc gggttccgaa 120
tattatggtt cccctgtggg ttggttcccc cagcccccag gaaaggggcg tgaggaaatc 180
gcggaaattg ttcctattgg tgggagtgtt atttacattg gtggcgtgga gggccgattc 240
accatttccc gagacaactc caagaatact attgctctca taatgaacga cctcctgcct 300
gaagacacgg ccacttatta ttgcgcagca gattcagggg gactctgcag ccatcgtgag 360
cgcgactatg acatttgggg ccaggggacc caggtcaccg tctgcgtcgt ttatgttggg 420
aatcctcaag aagct 435
<210> 135
<211> 139
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体C
<400> 135
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Asp Val Gln Leu Pro Glu
1 5 10 15
Ser Gly Arg Thr Leu Val Pro Pro Gly Gly Ser Leu Lys Leu Ser Trp
20 25 30
Ala Thr His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe Pro Met Leu Trp Val Pro
35 40 45
Pro Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Ala Gly Ile Gly Ser Asp
50 55 60
Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu Arg Met Asp Asp Leu Leu
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Val Leu Asp Tyr
100 105 110
His Pro Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Arg Gly
115 120 125
Arg Val Val Tyr Val Gly Asn Pro Gln Glu Ala
130 135
<210> 136
<211> 419
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体C
<400> 136
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg agatgtgcag ctgccagaat ccggaagaac 60
gttggtgcca cccggggggt ccctgaagct ctcctgggca acgcacggat tcggaatcgg 120
tagtttcccc atgctgtggg tccccccggc ccccggaaaa gggctcgaat atattgcggg 180
cattggtagt gattatacga cacactattc aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc 240
taaagacatt gccaagaata cactagatct gcgcatggac gacctactgc ctgaagacac 300
ggccaattat tattgtgcga aagacgtact tgactaccac ccagatttgt ggggccgggg 360
aacccaggtc accgtctgca ggggccgcag tcgtttatgt tgggaatcct caagaagct 419
<210> 137
<211> 145
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体D
<400> 137
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Val Gln Leu Gln Glu Ser
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Val Gln Asp Gly Gly Thr Leu Gln Leu Ser Cys Glu
20 25 30
Asp Ser Lys Trp Ser Tyr Thr Tyr Tyr Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln
35 40 45
Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Pro Val Ala His Ile Asp Ser Glu Gly
50 55 60
Thr Val Ala Tyr Ala Asp Thr Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg
65 70 75 80
Gly Asp Ala Lys His Arg Val Tyr Leu Gln Met Asn Asn Leu Lys Ala
85 90 95
Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Ala Asn Gly Gly Tyr Cys Leu
100 105 110
Arg Pro Arg Gln Leu Ala Ala Asp Tyr Glu Tyr Trp Gly Gln Gly Ala
115 120 125
Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Val Val Tyr Val Gly Asn Pro Gln Glu
130 135 140
Ala
145
<210> 138
<211> 441
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体D
<400> 138
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg aagtgcagct gcaggagtct gggggaggct 60
cggtgcagga tggagggact ttacaactct cttgtgaaga ctctaaatgg agctacacgt 120
actattgtat ggggtggttc cgccaggctc cagggaagga gcgagagccg gtcgcgcaca 180
ttgatagtga aggcactgtc gcttacgccg acaccgtgaa gggccgattc accatctccc 240
ggggggacgc caagcatagg gtttacctgc aaatgaataa cttgaaggct gatgacacgg 300
ccatctatta ttgtgcggcc aatggtggtt attgcctcag accccgtcaa ctcgccgcgg 360
attatgagta ttggggccag ggggcccagg tcaccgtctc cagcggccgc agtcgtttat 420
gttgggaatc ctcaagaagc t 441
<210> 139
<211> 139
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体E
<400> 139
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Thr Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe Ala Met Leu Trp Val Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Ala Gly Ile Gly Ser Asp
50 55 60
Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu Arg Met Asp Asp Leu Val
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Val Leu Asp Tyr
100 105 110
His Pro Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly
115 120 125
Arg Val Val Tyr Val Gly Asn Pro Gln Glu Ala
130 135
<210> 140
<211> 421
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体E
<400> 140
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggaac 60
attggtgcag cccggggggt ctctgacgct ctcctgtgca gcgcatggat tcggaatcgg 120
tagtttcgcc atgctgtggg tccgccaggc cccaggaaag gggctcgagt atattgcggg 180
cattggtagt gattatacga cacactattc aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc 240
taaagacatt gccaagaata cactagatct gcgcatggac gacctagtgc ctgaagacac 300
ggccaattat tattgtgcga aagacgtact tgactaccac ccagatttgt ggggccaggg 360
aacccaggtc accgtctgca gcggccgcac tgtcgtttat gttgggaatc ctcaagaagc 420
t 421
<210> 141
<211> 139
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体F
<400> 141
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Thr Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe Ala Met Leu Trp Val Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Ala Gly Ile Gly Ser Asp
50 55 60
Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu Arg Met Asp Asp Leu Val
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Val Leu Asp Tyr
100 105 110
His Pro Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly
115 120 125
Arg Val Val Tyr Val Gly Asn Pro Gln Glu Ala
130 135
<210> 142
<211> 418
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体F
<400> 142
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggaac 60
attggtgcag cccggggggt ctctgacgct ctcctgtgca gcgcatggat tcggaatcgg 120
tagtttcgcc atgctgtggg tccgccaggc cccaggaaag gggctcgagt atattgcggg 180
cattggtagt gattatacga cacactattc aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc 240
taaagacatt gccaagaata cactagatct gcgcatggac gacctagtgc ctgaagacac 300
ggccaattat tattgtgcga aagacgtact tgactaccac ccagatttgt ggggccaggg 360
aacccaggtc accgtctgca gcggccgcgt cgtttatgtt gggaatcctc aagaagct 418
<210> 143
<211> 139
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体G
<400> 143
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Thr Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe Ala Met Leu Trp Val Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Ala Gly Ile Gly Ser Asp
50 55 60
Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu Arg Met Asp Asp Leu Val
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Val Leu Asp Tyr
100 105 110
His Pro Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly
115 120 125
Arg Val Val Tyr Val Gly Asn Pro Gln Glu Ala
130 135
<210> 144
<211> 421
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体G
<400> 144
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggaac 60
attggtgcag cccggggggt ctctgacgct ctcctgtgca gcgcatggat tcggaatcgg 120
tagtttcgcc atgctgtggg tccgccaggc cccaggaaag gggctcgagt atattgcggg 180
cattggtagt gattatacga cacactattc aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc 240
taaagacatt gccaagaata cactagatct gcgcatggac gacctagtgc ctgaagacac 300
ggccaattat tattgtgcga aagacgtact tgactaccac ccagatttgt ggggccaggg 360
aacccaggtc accgtctgca gcggccgcac tgtcgtttat gttgggaatc ctcaagaagc 420
t 421
<210> 145
<211> 148
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体H
<400> 145
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Thr Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Ser Ile Thr Thr Tyr His Met Ala Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Glu Val Ala Val Ile Asn Asp Asp
50 55 60
Ala Asn Ser Arg Ile Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Gln Asp Lys Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Tyr Leu
85 90 95
Thr Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Leu Arg Cys
100 105 110
Val Pro Gly Thr Asp Ser Gly His Pro Tyr Ser Tyr Asn Tyr Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Val Val Tyr Val Gly Asn
130 135 140
Pro Gln Glu Ala
145
<210> 146
<211> 446
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体H
<400> 146
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggagg 60
ttcggtgcag actggaggat ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag attccatcac 120
tacctaccac atggcctggt tccgccagac tccagggaag gagcgtgagg aggtcgcagt 180
tataaatgat gatgctaatt cgagaatcta tgtcgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ctcccaagac aaggccaaga acacggtgta tctgcaaatg aactacctga cgcctgagga 300
cacggccatc tactactgtg cggcagattt gaggtgcgtc cctgggaccg actctggtca 360
tccttattcg tataactact ggggccaggg gacccaggtc accgtctgca gcggccgtcg 420
tttatgttgg gaatcctcaa gaagct 446
<210> 147
<211> 145
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体I
<400> 147
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Asp Val His Leu Gln Asp
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Trp
20 25 30
Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Val Gly Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Pro Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile Pro Gln Ile Ser Pro Ile
50 55 60
Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu
85 90 95
Leu Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Ser Gly Gly
100 105 110
Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr
115 120 125
Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Val Val Tyr Val Gly Asn Pro Gln Glu
130 135 140
Ala
145
<210> 148
<211> 434
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体I
<400> 148
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg agatgtgcac ctgcaggatt ctggaggagg 60
ctcggtgcag gctggaggct ccctgacgct ctcttggtta atgtcgggtc atacgtatta 120
tggaccttgt gtgggttggt tccgccagcc cccagggaaa gcgcgtgagg gaatcccaca 180
gattagtcct attggtggga gtgttattta cattggtggc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgagac aactccaaga atactattgc tctcataatg aacgacctcc tgcctgaaga 300
cacggccact tattattgcg cagcagattc agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga 360
ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt caccgtctgc ggccgtcgtt tatgttggga 420
atcctcaaga agct 434
<210> 149
<211> 145
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体J
<400> 149
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Asp Val His Leu Gln Asp
1 5 10 15
Ser Gly Glu Gly Trp Gly His Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Gly Gly Gly Phe Pro
35 40 45
Gln Pro Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile Pro Gln Met Ile Pro Ile
50 55 60
Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu
85 90 95
Val Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Asp Ser Gly Gly
100 105 110
Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr
115 120 125
Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Val Val Tyr Val Gly Asn Pro Gln Glu
130 135 140
Ala
145
<210> 150
<211> 434
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体J
<400> 150
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg agatgtgcac ctgcaggatt cgggagaagg 60
ctgggggcac gctggaggct ccctgaccct ctcttgttta atgtcgggtc atacgtatta 120
tggaccttgt gggggtgggt tcccccagcc cccagggaaa gcccgtgagg gaatcccaca 180
aatgattcct attggtggga gtgttattta cattggtggc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgagac aactccaaga atactattgc tctcataatg aacgacctcg tgcctgaaga 300
cacggccact tattattgcg caacagattc agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga 360
ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt caccgtctgc ggccgtcgtt tatgttggga 420
atcctcaaga agct 434
<210> 151
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体K
<400> 151
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Asp Val His Leu Gln Asp
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val His Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Gly Gly Gly Phe Pro
35 40 45
Arg Pro Pro Gly Lys Gly Arg Glu Gly Ile Ala Gln Ile Ile Pro Ile
50 55 60
Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Tyr Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu
85 90 95
Val Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Cys Ala Thr Asp Ser Gly Gly Leu
100 105 110
Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Gln
115 120 125
Val Thr Val Cys Ser Gly Val Val Tyr Val Gly Asn Pro Gln Glu Ala
130 135 140
<210> 152
<211> 437
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体K
<400> 152
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg agatgtgcac ctgcaggatt ctggaggagg 60
ctcggtgcac gctgggggct ccctgacgct ctcttgttta atgtcgggtc atacgtatta 120
tggaccttgt gggggtgggt tcccccggcc cccaggaaaa gggcgtgagg gaatcgcaca 180
aattattcct attggtggga gtgttattta cattggtggc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgatac aactccaaga atactattgc tctcataatg aacgacctcg tgcctgaaga 300
cacggccact tattattgcg caacagattc agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga 360
ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt caccgtctgc agcggccgtc gtttatgttg 420
ggaatcctca agaagct 437
<210> 153
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体L
<400> 153
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Asp Val His Leu Gln Asp
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Val Gly Trp Phe Pro
35 40 45
Gln Arg Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile Ala Gln Met Ile Pro Ile
50 55 60
Gly Gly Ser Val Ser Tyr Ser Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu
85 90 95
Val Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Asp Ser Gly Gly
100 105 110
Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr
115 120 125
Gln Val Thr Val Cys Ser Val Val Tyr Val Gly Asn Pro Gln Glu Ala
130 135 140
<210> 154
<211> 433
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体L
<400> 154
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg agatgtgcac ctgcaggatt ctggaggagg 60
ctcggtgcag gctggaggct ccctgaccct ctcttgttta atgtcgggtc atacgtatta 120
tggaccttgt gtgggttggt tcccccagcg tccagggaaa gcgcgtgagg gaatcgcaca 180
aatgattcct attggtggga gtgttagtta cagtggtggc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgagac aactccaaga atactattgc tctcataatg aacgacctcg tgcctgaaga 300
cacggccact tattattgcg caacagattc agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga 360
ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt caccgtctgc agcgtcgttt atgttgggaa 420
tcctcaagaa gct 433
<210> 155
<211> 147
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体M
<400> 155
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Glu Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Glu Tyr Thr Ala Ile Thr Tyr Cys Met Ala Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala Ile Asn Arg Gly
50 55 60
Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Gln Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Leu Met Asn Ser Leu
85 90 95
Lys Pro Glu Asp Thr Gly Met Tyr Tyr Cys Ala Tyr Lys Gln Thr Gly
100 105 110
Asp Cys Gly Ile Phe Gln Phe Phe Gly Asn Tyr Gly Gln Gly Thr Gln
115 120 125
Val Thr Val Ser Ser Gly Arg Thr His Val Val Tyr Val Gly Asn Pro
130 135 140
Gln Glu Ala
145
<210> 156
<211> 439
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体M
<400> 156
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg gatccagatg tgcagctgca ggagtctggg 60
ggaggctcgg tgcaggaggg agggtctctg agactctcct gtgcagcctc tgaatacacc 120
gctattacct actgtatggc ctggttccgc caggctccag ggaaggagcg tgagggggtc 180
gcggctatca atcgcggtgg tggtagtaca tattacgccg actccgtgaa gggccgattc 240
accatctccc aggacaacgc caagaacacg gtgtatctcc taatgaacag cctgaaacct 300
gaggacactg gcatgtacta ctgtgcgtac aaacagaccg gtgattgtgg gatcttccaa 360
ttctttggaa actatggcca ggggacccag gtcaccgtct ccagcggccg tcgtttatgt 420
tgggaatcct caagaagct 439
<210> 157
<211> 148
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体N
<400> 157
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Thr Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Ser Ile Thr Thr Tyr His Met Ala Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Glu Val Ala Val Ile Asn Asp Asp
50 55 60
Ala Asn Ser Arg Ile Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Gln Asp Lys Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Tyr Leu
85 90 95
Thr Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Leu Arg Cys
100 105 110
Val Pro Gly Thr Asp Ser Gly His Pro Tyr Ser Tyr Asn Tyr Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Gln Val Thr Ala Ser Ser Gly Val Val Tyr Val Gly Asn
130 135 140
Pro Gln Glu Ala
145
<210> 158
<211> 446
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体N
<400> 158
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggagg 60
ttcggtgcag actggaggat ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag attccatcac 120
tacctaccac atggcctggt tccgccagac tccagggaag gagcgtgagg aggtcgcagt 180
tataaatgat gatgctaatt cgagaatcta tgtcgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ctcccaagac aaggccaaga acacggtgta tctgcaaatg aactacctga cgcctgagga 300
cacggccatc tactactgtg cggcagattt gaggtgcgtc cctgggaccg actctggtca 360
tccttattcg tataactact ggggccaggg gacccaggtc accgcctcca gcggccgtcg 420
tttatgttgg gaatcctcaa gaagct 446
<210> 159
<211> 149
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体O
<400> 159
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Thr Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Ser Ile Thr Thr Tyr His Met Ala Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Glu Val Ala Val Ile Asn Asp Asp
50 55 60
Ala Asn Ser Arg Ile Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Gln Asp Lys Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Tyr Leu
85 90 95
Thr Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Leu Arg Cys
100 105 110
Val Pro Gly Thr Asp Ser Gly His Pro Tyr Ser Tyr Asn Tyr Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Gln Val Thr Ala Ser Ser Gly Arg Val Val Tyr Val Gly
130 135 140
Asn Pro Gln Glu Ala
145
<210> 160
<211> 446
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体O
<400> 160
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggagg 60
ttcggtgcag actggaggat ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag attccatcac 120
tacctaccac atggcctggt tccgccagac tccagggaag gagcgtgagg aggtcgcagt 180
tataaatgat gatgctaatt cgagaatcta tgtcgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ctcccaagac aaggccaaga acacggtgta tctgcaaatg aactacctga cgcctgagga 300
cacggccatc tactactgtg cggcagattt gaggtgcgtc cctgggaccg actctggtca 360
tccttattcg tataactact ggggccaggg gacccaggtc accgcctcca gcggccgtcg 420
tttatgttgg gaatcctcaa gaagct 446
<210> 161
<211> 150
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体P
<400> 161
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Ala Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Val Ser Gly Ser Thr Ala Ser Met Tyr Cys Leu Ala Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Glu Pro Glu Gly Val Ala Ala Ile Ser Gly Asp
50 55 60
Asp Lys Gly Phe Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr
65 70 75 80
Ile Ser Gln Asn Lys Ala Asn Lys Thr Val Asn Leu Gln Met Asn Ser
85 90 95
Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Val Asp Ala Arg
100 105 110
Ala Thr Thr Thr Gly Glu Arg Leu His Ala Arg Thr Tyr Glu Phe Trp
115 120 125
Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Arg Val Val Tyr Val
130 135 140
Gly Asn Pro Gln Glu Ala
145 150
<210> 162
<211> 450
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体P
<400> 162
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg gatgtgcagc tgcaggagtc tgggggaggc 60
tcggcgcagc ctggagggtc tctgagactc tcctgtgcag tctctggatc gaccgccagt 120
atgtactgct tggcctggtt ccgccaggct ccagggaagg agcctgaggg ggttgctgct 180
attagtggag atgataaagg gtttacgaat tacgccgact ccgtgaaggg ccggttcacc 240
atctcccaaa acaaggccaa taaaacggtg aatctgcaaa tgaacagcct gaaacctgaa 300
gacacggcca tttattactg tgccgttgat gcgcgagcga caacaactgg tgaacgtcta 360
cacgcccgga cgtacgaatt ctggggccag gggacccagg tcaccgtctg cagcggccgc 420
gtcgtttatg ttgggaatcc tcaagaagct 450
<210> 163
<211> 148
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体Q
<400> 163
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Asp Val Gln Met Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Thr Leu Ser Thr Tyr Cys Met Gly Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Val Pro Gly Lys Asp Arg Glu Gly Val Ala Ala Ile Tyr Arg Leu
50 55 60
Arg Asp Met Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ala Asn Asp Thr Val Asp Leu Gln Met Asn Ser Leu
85 90 95
Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Cys Val Arg
100 105 110
Leu Phe Gly Thr Cys Gln Leu Val Glu Asp Phe Glu Leu Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Leu Val Val Tyr Val Gly Asn
130 135 140
Pro Gln Glu Ala
145
<210> 164
<211> 442
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体Q
<400> 164
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg agatgtgcag atgcaggagt ctgggggagg 60
gtcggtgcag gctggagggt ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag ataccctcag 120
tacctactgc atgggctggt tccgccaagt tccagggaag gaccgtgagg gggtcgcagc 180
gatttatcgt cttagggata tgacgttcta tgccgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgtgac aacgccaacg acacggtaga tctgcaaatg aacagcctga aacctgagga 300
cacagccgtg tactactgtg cagcaagatg tgtgcgacta ttcggtactt gtcagctagt 360
cgaagatttt gaactatggg gccaggggac ccaggtcacc gtctccagcg gcgtcgttta 420
tgttgggaat cctcaagaag ct 442
<210> 165
<211> 149
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体R
<400> 165
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Asp Val Gln Met Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Thr Leu Ser Thr Tyr Cys Met Gly Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Asp Arg Glu Gly Val Ala Ala Ile Tyr Arg Leu
50 55 60
Arg Asp Met Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ala Asn Asp Thr Val Asp Leu Gln Met Asn Ser Leu
85 90 95
Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Cys Val Arg
100 105 110
Leu Phe Gly Thr Cys Gln Leu Val Glu Asp Phe Glu Leu Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Leu Thr Val Val Tyr Val Gly
130 135 140
Asn Pro Gln Glu Ala
145
<210> 166
<211> 442
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体R
<400> 166
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg agatgtgcag atgcaggagt ctgggggagg 60
gtcggtgcag gctggagggt ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag ataccctcag 120
tacctactgc atgggctggt tccgccaagt tccagggaag gaccgtgagg gggtcgcagc 180
gatttatcgt cttagggata tgacgttcta tgccgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgtgac aacgccaacg acacggtaga tctgcaaatg aacagcctga aacctgagga 300
cacagccgtg tactactgtg cagcaagatg tgtgcgacta ttcggtactt gtcagctagt 360
cgaagatttt gaactatggg gccaggggac ccaggtcacc gtctccagcg gcgtcgttta 420
tgttgggaat cctcaagaag ct 442
<210> 167
<211> 149
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体S
<400> 167
Thr Pro Asp Ser Lys Asp Ile Val Lys Thr Asp Val Gln Met Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Thr Leu Ser Thr Tyr Cys Met Gly Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Val Pro Gly Lys Asp Arg Glu Gly Val Ala Ala Ile Tyr Arg Leu
50 55 60
Arg Asp Met Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ala Asn Asp Thr Val Asp Leu Gln Met Asn Ser Leu
85 90 95
Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Cys Val Arg
100 105 110
Leu Phe Gly Thr Cys Gln Leu Val Glu Asp Phe Glu Leu Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Leu Thr Val Val Tyr Val Gly
130 135 140
Asn Pro Gln Glu Ala
145
<210> 168
<211> 443
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点2抗体S
<400> 168
acgccagatt caaaagacat tgtcaagacg agatgtgcag atgcaggagt ctgggggagg 60
gtcggtgcag gctggagggt ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag ataccctcag 120
tacctactgc atgggctggt tccgccaagt tccagggaag gaccgtgagg gggtcgcagc 180
gatttatcgt cttagggata tgacgttcta tgccgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgtgac aacgccaacg acacggtaga tctgcaaatg aacagcctga aacctgagga 300
cacagccgtg tactactgtg cagcaagatg tgtgcgacta ttcggtactt gtcagctagt 360
cgaagatttt gaactatggg gccaggggac ccaggtcacc gtctccagcg gccgtcgttt 420
atgttgggaa tcctcaagaa gct 443
<210> 169
<211> 146
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体A
<400> 169
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Pro Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Val Gly Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Arg Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile Ala Gln Ile Ser Pro Ser
50 55 60
Gly Gly Ser Val Ser Tyr Ser Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu
85 90 95
Val Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Ser Gly Gly
100 105 110
Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr
115 120 125
Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Arg Asn Glu Val Val Lys Glu Leu Glu
130 135 140
Lys Gln
145
<210> 170
<211> 439
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体A
<400> 170
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat atgtgcagct gcaggagtct gggggaggct 60
cggtgcaggc tggaggctcc ctgacgctct cttgtttaat gtctggtcat acgtattatg 120
gaccttgtgt gggttggttc cgccagcgtc cagggaaagc gcgtgaggga atcgcacaga 180
ttagtcctag tggtgggagt gttagttaca gtggtggcgt gaagggccga ttcaccattt 240
cccgagacaa ctccaagaat actattgctc tcataatgaa cgacctcgtg cctgaagaca 300
cggccactta ttattgcgca gcagattcag ggggactctg cagccatcgt gagcgcgact 360
atgacatttg gggccagggg acccaggtca ccgtctgcag cggccgcacg aagtcgtcaa 420
ggaactcgaa aagcagggt 439
<210> 171
<211> 145
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体B
<400> 171
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Pro Asp Pro Asp Val His Leu
1 5 10 15
Gln Asp Ser Gly Gly Gly Trp Val His Pro Gly Gly Ser Leu Thr Leu
20 25 30
Ser Cys Leu Met Ser Gly Ser Glu Tyr Tyr Gly Ser Pro Val Gly Trp
35 40 45
Phe Pro Gln Pro Pro Gly Lys Gly Arg Glu Glu Ile Ala Glu Ile Val
50 55 60
Pro Ile Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val Glu Gly Arg Phe
65 70 75 80
Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn
85 90 95
Asp Leu Leu Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Ser
100 105 110
Gly Gly Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Asn Glu Val Val Lys Glu Leu Glu Lys
130 135 140
Gln
145
<210> 172
<211> 435
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体B
<400> 172
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat gatccagatg tgcacctgca ggattcggga 60
ggaggctggg tgcacccggg gggctccctg accctctctt gtttaatgtc gggttccgaa 120
tattatggtt cccctgtggg ttggttcccc cagcccccag gaaaggggcg tgaggaaatc 180
gcggaaattg ttcctattgg tgggagtgtt atttacattg gtggcgtgga gggccgattc 240
accatttccc gagacaactc caagaatact attgctctca taatgaacga cctcctgcct 300
gaagacacgg ccacttatta ttgcgcagca gattcagggg gactctgcag ccatcgtgag 360
cgcgactatg acatttgggg ccaggggacc caggtcaccg tctgcgaagt cgtcaaggaa 420
ctcgaaaagc agggt 435
<210> 173
<211> 139
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体C
<400> 173
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Pro Asp Val Gln Leu Pro Glu
1 5 10 15
Ser Gly Arg Thr Leu Val Pro Pro Gly Gly Ser Leu Lys Leu Ser Trp
20 25 30
Ala Thr His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe Pro Met Leu Trp Val Pro
35 40 45
Pro Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Ala Gly Ile Gly Ser Asp
50 55 60
Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu Arg Met Asp Asp Leu Leu
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Val Leu Asp Tyr
100 105 110
His Pro Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Arg Gly
115 120 125
Arg Asn Glu Val Val Lys Glu Leu Glu Lys Gln
130 135
<210> 174
<211> 419
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体C
<400> 174
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat agatgtgcag ctgccagaat ccggaagaac 60
gttggtgcca cccggggggt ccctgaagct ctcctgggca acgcacggat tcggaatcgg 120
tagtttcccc atgctgtggg tccccccggc ccccggaaaa gggctcgaat atattgcggg 180
cattggtagt gattatacga cacactattc aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc 240
taaagacatt gccaagaata cactagatct gcgcatggac gacctactgc ctgaagacac 300
ggccaattat tattgtgcga aagacgtact tgactaccac ccagatttgt ggggccgggg 360
aacccaggtc accgtctgca ggggccgcag aagtcgtcaa ggaactcgaa aagcagggt 419
<210> 175
<211> 145
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体D
<400> 175
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Pro Val Gln Leu Gln Glu Ser
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Val Gln Asp Gly Gly Thr Leu Gln Leu Ser Cys Glu
20 25 30
Asp Ser Lys Trp Ser Tyr Thr Tyr Tyr Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln
35 40 45
Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Pro Val Ala His Ile Asp Ser Glu Gly
50 55 60
Thr Val Ala Tyr Ala Asp Thr Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg
65 70 75 80
Gly Asp Ala Lys His Arg Val Tyr Leu Gln Met Asn Asn Leu Lys Ala
85 90 95
Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Ala Asn Gly Gly Tyr Cys Leu
100 105 110
Arg Pro Arg Gln Leu Ala Ala Asp Tyr Glu Tyr Trp Gly Gln Gly Ala
115 120 125
Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Asn Glu Val Val Lys Glu Leu Glu Lys
130 135 140
Gln
145
<210> 176
<211> 441
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体D
<400> 176
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat aagtgcagct gcaggagtct gggggaggct 60
cggtgcagga tggagggact ttacaactct cttgtgaaga ctctaaatgg agctacacgt 120
actattgtat ggggtggttc cgccaggctc cagggaagga gcgagagccg gtcgcgcaca 180
ttgatagtga aggcactgtc gcttacgccg acaccgtgaa gggccgattc accatctccc 240
ggggggacgc caagcatagg gtttacctgc aaatgaataa cttgaaggct gatgacacgg 300
ccatctatta ttgtgcggcc aatggtggtt attgcctcag accccgtcaa ctcgccgcgg 360
attatgagta ttggggccag ggggcccagg tcaccgtctc cagcggccgc agaagtcgtc 420
aaggaactcg aaaagcaggg t 441
<210> 177
<211> 139
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体E
<400> 177
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Pro Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Thr Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe Ala Met Leu Trp Val Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Ala Gly Ile Gly Ser Asp
50 55 60
Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu Arg Met Asp Asp Leu Val
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Val Leu Asp Tyr
100 105 110
His Pro Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly
115 120 125
Arg Asn Glu Val Val Lys Glu Leu Glu Lys Gln
130 135
<210> 178
<211> 421
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体E
<400> 178
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggaac 60
attggtgcag cccggggggt ctctgacgct ctcctgtgca gcgcatggat tcggaatcgg 120
tagtttcgcc atgctgtggg tccgccaggc cccaggaaag gggctcgagt atattgcggg 180
cattggtagt gattatacga cacactattc aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc 240
taaagacatt gccaagaata cactagatct gcgcatggac gacctagtgc ctgaagacac 300
ggccaattat tattgtgcga aagacgtact tgactaccac ccagatttgt ggggccaggg 360
aacccaggtc accgtctgca gcggccgcac tgaagtcgtc aaggaactcg aaaagcaggg 420
t 421
<210> 179
<211> 139
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体F
<400> 179
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Pro Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Thr Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe Ala Met Leu Trp Val Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Ala Gly Ile Gly Ser Asp
50 55 60
Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu Arg Met Asp Asp Leu Val
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Val Leu Asp Tyr
100 105 110
His Pro Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly
115 120 125
Arg Asn Glu Val Val Lys Glu Leu Glu Lys Gln
130 135
<210> 180
<211> 418
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体F
<400> 180
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggaac 60
attggtgcag cccggggggt ctctgacgct ctcctgtgca gcgcatggat tcggaatcgg 120
tagtttcgcc atgctgtggg tccgccaggc cccaggaaag gggctcgagt atattgcggg 180
cattggtagt gattatacga cacactattc aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc 240
taaagacatt gccaagaata cactagatct gcgcatggac gacctagtgc ctgaagacac 300
ggccaattat tattgtgcga aagacgtact tgactaccac ccagatttgt ggggccaggg 360
aacccaggtc accgtctgca gcggccgcga agtcgtcaag gaactcgaaa agcagggt 418
<210> 181
<211> 139
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体G
<400> 181
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Pro Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Thr Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe Ala Met Leu Trp Val Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Ala Gly Ile Gly Ser Asp
50 55 60
Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu Arg Met Asp Asp Leu Val
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Val Leu Asp Tyr
100 105 110
His Pro Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly
115 120 125
Arg Asn Glu Val Val Lys Glu Leu Glu Lys Gln
130 135
<210> 182
<211> 421
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体G
<400> 182
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggaac 60
attggtgcag cccggggggt ctctgacgct ctcctgtgca gcgcatggat tcggaatcgg 120
tagtttcgcc atgctgtggg tccgccaggc cccaggaaag gggctcgagt atattgcggg 180
cattggtagt gattatacga cacactattc aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc 240
taaagacatt gccaagaata cactagatct gcgcatggac gacctagtgc ctgaagacac 300
ggccaattat tattgtgcga aagacgtact tgactaccac ccagatttgt ggggccaggg 360
aacccaggtc accgtctgca gcggccgcac tgaagtcgtc aaggaactcg aaaagcaggg 420
t 421
<210> 183
<211> 148
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体H
<400> 183
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Pro Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Thr Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Ser Ile Thr Thr Tyr His Met Ala Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Glu Val Ala Val Ile Asn Asp Asp
50 55 60
Ala Asn Ser Arg Ile Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Gln Asp Lys Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Tyr Leu
85 90 95
Thr Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Leu Arg Cys
100 105 110
Val Pro Gly Thr Asp Ser Gly His Pro Tyr Ser Tyr Asn Tyr Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Asn Glu Val Val Lys Glu
130 135 140
Leu Glu Lys Gln
145
<210> 184
<211> 446
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体H
<400> 184
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggagg 60
ttcggtgcag actggaggat ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag attccatcac 120
tacctaccac atggcctggt tccgccagac tccagggaag gagcgtgagg aggtcgcagt 180
tataaatgat gatgctaatt cgagaatcta tgtcgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ctcccaagac aaggccaaga acacggtgta tctgcaaatg aactacctga cgcctgagga 300
cacggccatc tactactgtg cggcagattt gaggtgcgtc cctgggaccg actctggtca 360
tccttattcg tataactact ggggccaggg gacccaggtc accgtctgca gcggccgaag 420
tcgtcaagga actcgaaaag cagggt 446
<210> 185
<211> 145
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体I
<400> 185
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Pro Asp Val His Leu Gln Asp
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Trp
20 25 30
Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Val Gly Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Pro Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile Pro Gln Ile Ser Pro Ile
50 55 60
Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu
85 90 95
Leu Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Ser Gly Gly
100 105 110
Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr
115 120 125
Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Asn Glu Val Val Lys Glu Leu Glu Lys
130 135 140
Gln
145
<210> 186
<211> 434
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体I
<400> 186
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat agatgtgcac ctgcaggatt ctggaggagg 60
ctcggtgcag gctggaggct ccctgacgct ctcttggtta atgtcgggtc atacgtatta 120
tggaccttgt gtgggttggt tccgccagcc cccagggaaa gcgcgtgagg gaatcccaca 180
gattagtcct attggtggga gtgttattta cattggtggc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgagac aactccaaga atactattgc tctcataatg aacgacctcc tgcctgaaga 300
cacggccact tattattgcg cagcagattc agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga 360
ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt caccgtctgc ggccgaagtc gtcaaggaac 420
tcgaaaagca gggt 434
<210> 187
<211> 145
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体J
<400> 187
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Pro Asp Val His Leu Gln Asp
1 5 10 15
Ser Gly Glu Gly Trp Gly His Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Gly Gly Gly Phe Pro
35 40 45
Gln Pro Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile Pro Gln Met Ile Pro Ile
50 55 60
Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu
85 90 95
Val Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Asp Ser Gly Gly
100 105 110
Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr
115 120 125
Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Asn Glu Val Val Lys Glu Leu Glu Lys
130 135 140
Gln
145
<210> 188
<211> 434
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体J
<400> 188
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat agatgtgcac ctgcaggatt cgggagaagg 60
ctgggggcac gctggaggct ccctgaccct ctcttgttta atgtcgggtc atacgtatta 120
tggaccttgt gggggtgggt tcccccagcc cccagggaaa gcccgtgagg gaatcccaca 180
aatgattcct attggtggga gtgttattta cattggtggc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgagac aactccaaga atactattgc tctcataatg aacgacctcg tgcctgaaga 300
cacggccact tattattgcg caacagattc agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga 360
ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt caccgtctgc ggccgaagtc gtcaaggaac 420
tcgaaaagca gggt 434
<210> 189
<211> 143
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体K
<400> 189
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Asp Val His Leu Gln Asp Ser
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Val His Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys Leu
20 25 30
Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Gly Gly Gly Phe Pro Arg
35 40 45
Pro Pro Gly Lys Gly Arg Glu Gly Ile Ala Gln Ile Ile Pro Ile Gly
50 55 60
Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Arg Tyr Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu Val
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Cys Ala Thr Asp Ser Gly Gly Leu Cys
100 105 110
Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val
115 120 125
Thr Val Cys Ser Gly Asn Glu Val Val Lys Glu Leu Glu Lys Gln
130 135 140
<210> 190
<211> 437
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体K
<400> 190
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat agatgtgcac ctgcaggatt ctggaggagg 60
ctcggtgcac gctgggggct ccctgacgct ctcttgttta atgtcgggtc atacgtatta 120
tggaccttgt gggggtgggt tcccccggcc cccaggaaaa gggcgtgagg gaatcgcaca 180
aattattcct attggtggga gtgttattta cattggtggc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgatac aactccaaga atactattgc tctcataatg aacgacctcg tgcctgaaga 300
cacggccact tattattgcg caacagattc agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga 360
ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt caccgtctgc agcggccgaa gtcgtcaagg 420
aactcgaaaa gcagggt 437
<210> 191
<211> 143
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体L
<400> 191
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Asp Val His Leu Gln Asp Ser
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys Leu
20 25 30
Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Val Gly Trp Phe Pro Gln
35 40 45
Arg Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile Ala Gln Met Ile Pro Ile Gly
50 55 60
Gly Ser Val Ser Tyr Ser Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu Val
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Asp Ser Gly Gly Leu
100 105 110
Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Gln
115 120 125
Val Thr Val Cys Ser Asn Glu Val Val Lys Glu Leu Glu Lys Gln
130 135 140
<210> 192
<211> 433
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体L
<400> 192
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat agatgtgcac ctgcaggatt ctggaggagg 60
ctcggtgcag gctggaggct ccctgaccct ctcttgttta atgtcgggtc atacgtatta 120
tggaccttgt gtgggttggt tcccccagcg tccagggaaa gcgcgtgagg gaatcgcaca 180
aatgattcct attggtggga gtgttagtta cagtggtggc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgagac aactccaaga atactattgc tctcataatg aacgacctcg tgcctgaaga 300
cacggccact tattattgcg caacagattc agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga 360
ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt caccgtctgc agcgaagtcg tcaaggaact 420
cgaaaagcag ggt 433
<210> 193
<211> 146
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体M
<400> 193
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Val Gln Glu Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala
20 25 30
Ala Ser Glu Tyr Thr Ala Ile Thr Tyr Cys Met Ala Trp Phe Arg Gln
35 40 45
Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala Ile Asn Arg Gly Gly
50 55 60
Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Gln Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Leu Met Asn Ser Leu Lys
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Gly Met Tyr Tyr Cys Ala Tyr Lys Gln Thr Gly Asp
100 105 110
Cys Gly Ile Phe Gln Phe Phe Gly Asn Tyr Gly Gln Gly Thr Gln Val
115 120 125
Thr Val Ser Ser Gly Arg Thr His Asn Glu Val Val Lys Glu Leu Glu
130 135 140
Lys Gln
145
<210> 194
<211> 439
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体M
<400> 194
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat gatccagatg tgcagctgca ggagtctggg 60
ggaggctcgg tgcaggaggg agggtctctg agactctcct gtgcagcctc tgaatacacc 120
gctattacct actgtatggc ctggttccgc caggctccag ggaaggagcg tgagggggtc 180
gcggctatca atcgcggtgg tggtagtaca tattacgccg actccgtgaa gggccgattc 240
accatctccc aggacaacgc caagaacacg gtgtatctcc taatgaacag cctgaaacct 300
gaggacactg gcatgtacta ctgtgcgtac aaacagaccg gtgattgtgg gatcttccaa 360
ttctttggaa actatggcca ggggacccag gtcaccgtct ccagcggccg aagtcgtcaa 420
ggaactcgaa aagcagggt 439
<210> 195
<211> 147
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体N
<400> 195
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Val Gln Thr Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala
20 25 30
Ala Ser Gly Asp Ser Ile Thr Thr Tyr His Met Ala Trp Phe Arg Gln
35 40 45
Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Glu Val Ala Val Ile Asn Asp Asp Ala
50 55 60
Asn Ser Arg Ile Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Gln Asp Lys Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Tyr Leu Thr
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Leu Arg Cys Val
100 105 110
Pro Gly Thr Asp Ser Gly His Pro Tyr Ser Tyr Asn Tyr Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Thr Gln Val Thr Ala Ser Ser Gly Asn Glu Val Val Lys Glu Leu
130 135 140
Glu Lys Gln
145
<210> 196
<211> 446
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体N
<400> 196
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggagg 60
ttcggtgcag actggaggat ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag attccatcac 120
tacctaccac atggcctggt tccgccagac tccagggaag gagcgtgagg aggtcgcagt 180
tataaatgat gatgctaatt cgagaatcta tgtcgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ctcccaagac aaggccaaga acacggtgta tctgcaaatg aactacctga cgcctgagga 300
cacggccatc tactactgtg cggcagattt gaggtgcgtc cctgggaccg actctggtca 360
tccttattcg tataactact ggggccaggg gacccaggtc accgcctcca gcggccgaag 420
tcgtcaagga actcgaaaag cagggt 446
<210> 197
<211> 148
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体O
<400> 197
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Val Gln Thr Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala
20 25 30
Ala Ser Gly Asp Ser Ile Thr Thr Tyr His Met Ala Trp Phe Arg Gln
35 40 45
Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Glu Val Ala Val Ile Asn Asp Asp Ala
50 55 60
Asn Ser Arg Ile Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Gln Asp Lys Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Tyr Leu Thr
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Leu Arg Cys Val
100 105 110
Pro Gly Thr Asp Ser Gly His Pro Tyr Ser Tyr Asn Tyr Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Thr Gln Val Thr Ala Ser Ser Gly Arg Asn Glu Val Val Lys Glu
130 135 140
Leu Glu Lys Gln
145
<210> 198
<211> 446
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体O
<400> 198
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggagg 60
ttcggtgcag actggaggat ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag attccatcac 120
tacctaccac atggcctggt tccgccagac tccagggaag gagcgtgagg aggtcgcagt 180
tataaatgat gatgctaatt cgagaatcta tgtcgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ctcccaagac aaggccaaga acacggtgta tctgcaaatg aactacctga cgcctgagga 300
cacggccatc tactactgtg cggcagattt gaggtgcgtc cctgggaccg actctggtca 360
tccttattcg tataactact ggggccaggg gacccaggtc accgcctcca gcggccgaag 420
tcgtcaagga actcgaaaag cagggt 446
<210> 199
<211> 149
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体P
<400> 199
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Ala Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala
20 25 30
Val Ser Gly Ser Thr Ala Ser Met Tyr Cys Leu Ala Trp Phe Arg Gln
35 40 45
Ala Pro Gly Lys Glu Pro Glu Gly Val Ala Ala Ile Ser Gly Asp Asp
50 55 60
Lys Gly Phe Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Gln Asn Lys Ala Asn Lys Thr Val Asn Leu Gln Met Asn Ser Leu
85 90 95
Lys Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Val Asp Ala Arg Ala
100 105 110
Thr Thr Thr Gly Glu Arg Leu His Ala Arg Thr Tyr Glu Phe Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Arg Asn Glu Val Val Lys
130 135 140
Glu Leu Glu Lys Gln
145
<210> 200
<211> 450
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体P
<400> 200
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat gatgtgcagc tgcaggagtc tgggggaggc 60
tcggcgcagc ctggagggtc tctgagactc tcctgtgcag tctctggatc gaccgccagt 120
atgtactgct tggcctggtt ccgccaggct ccagggaagg agcctgaggg ggttgctgct 180
attagtggag atgataaagg gtttacgaat tacgccgact ccgtgaaggg ccggttcacc 240
atctcccaaa acaaggccaa taaaacggtg aatctgcaaa tgaacagcct gaaacctgaa 300
gacacggcca tttattactg tgccgttgat gcgcgagcga caacaactgg tgaacgtcta 360
cacgcccgga cgtacgaatt ctggggccag gggacccagg tcaccgtctg cagcggccgc 420
gaagtcgtca aggaactcga aaagcagggt 450
<210> 201
<211> 147
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体Q
<400> 201
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Asp Val Gln Met Gln Glu Ser
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala
20 25 30
Ala Ser Gly Asp Thr Leu Ser Thr Tyr Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln
35 40 45
Val Pro Gly Lys Asp Arg Glu Gly Val Ala Ala Ile Tyr Arg Leu Arg
50 55 60
Asp Met Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Arg Asp Asn Ala Asn Asp Thr Val Asp Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Cys Val Arg Leu
100 105 110
Phe Gly Thr Cys Gln Leu Val Glu Asp Phe Glu Leu Trp Gly Gln Gly
115 120 125
Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Leu Asn Glu Val Val Lys Glu Leu
130 135 140
Glu Lys Gln
145
<210> 202
<211> 442
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体Q
<400> 202
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat agatgtgcag atgcaggagt ctgggggagg 60
gtcggtgcag gctggagggt ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag ataccctcag 120
tacctactgc atgggctggt tccgccaagt tccagggaag gaccgtgagg gggtcgcagc 180
gatttatcgt cttagggata tgacgttcta tgccgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgtgac aacgccaacg acacggtaga tctgcaaatg aacagcctga aacctgagga 300
cacagccgtg tactactgtg cagcaagatg tgtgcgacta ttcggtactt gtcagctagt 360
cgaagatttt gaactatggg gccaggggac ccaggtcacc gtctccagcg gcgaagtcgt 420
caaggaactc gaaaagcagg gt 442
<210> 203
<211> 148
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体R
<400> 203
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Asp Val Gln Met Gln Glu Ser
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala
20 25 30
Ala Ser Gly Asp Thr Leu Ser Thr Tyr Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln
35 40 45
Ala Pro Gly Lys Asp Arg Glu Gly Val Ala Ala Ile Tyr Arg Leu Arg
50 55 60
Asp Met Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Arg Asp Asn Ala Asn Asp Thr Val Asp Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Cys Val Arg Leu
100 105 110
Phe Gly Thr Cys Gln Leu Val Glu Asp Phe Glu Leu Trp Gly Gln Gly
115 120 125
Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Leu Thr Asn Glu Val Val Lys Glu
130 135 140
Leu Glu Lys Gln
145
<210> 204
<211> 442
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体R
<400> 204
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat agatgtgcag atgcaggagt ctgggggagg 60
gtcggtgcag gctggagggt ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag ataccctcag 120
tacctactgc atgggctggt tccgccaagt tccagggaag gaccgtgagg gggtcgcagc 180
gatttatcgt cttagggata tgacgttcta tgccgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgtgac aacgccaacg acacggtaga tctgcaaatg aacagcctga aacctgagga 300
cacagccgtg tactactgtg cagcaagatg tgtgcgacta ttcggtactt gtcagctagt 360
cgaagatttt gaactatggg gccaggggac ccaggtcacc gtctccagcg gcgaagtcgt 420
caaggaactc gaaaagcagg gt 442
<210> 205
<211> 148
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体S
<400> 205
Asp Glu Thr Ile Ser Phe Ala Lys Asp Asp Val Gln Met Gln Glu Ser
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala
20 25 30
Ala Ser Gly Asp Thr Leu Ser Thr Tyr Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln
35 40 45
Val Pro Gly Lys Asp Arg Glu Gly Val Ala Ala Ile Tyr Arg Leu Arg
50 55 60
Asp Met Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Arg Asp Asn Ala Asn Asp Thr Val Asp Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Cys Val Arg Leu
100 105 110
Phe Gly Thr Cys Gln Leu Val Glu Asp Phe Glu Leu Trp Gly Gln Gly
115 120 125
Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Leu Thr Asn Glu Val Val Lys Glu
130 135 140
Leu Glu Lys Gln
145
<210> 206
<211> 443
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> mub***位点3抗体S
<400> 206
gaaacgatca gctttgccaa ggatccaaat agatgtgcag atgcaggagt ctgggggagg 60
gtcggtgcag gctggagggt ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag ataccctcag 120
tacctactgc atgggctggt tccgccaagt tccagggaag gaccgtgagg gggtcgcagc 180
gatttatcgt cttagggata tgacgttcta tgccgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgtgac aacgccaacg acacggtaga tctgcaaatg aacagcctga aacctgagga 300
cacagccgtg tactactgtg cagcaagatg tgtgcgacta ttcggtactt gtcagctagt 360
cgaagatttt gaactatggg gccaggggac ccaggtcacc gtctccagcg gccgaagtcg 420
tcaaggaact cgaaaagcag ggt 443
<210> 207
<211> 146
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体A
<400> 207
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Val Gly Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Arg Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile Ala Gln Ile Ser Pro Ser
50 55 60
Gly Gly Ser Val Ser Tyr Ser Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu
85 90 95
Val Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Ser Gly Gly
100 105 110
Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr
115 120 125
Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Arg Gly Thr Val Lys Lys Leu Ser Glu
130 135 140
Lys Tyr
145
<210> 208
<211> 439
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体A
<400> 208
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta atgtgcagct gcaggagtct gggggaggct 60
cggtgcaggc tggaggctcc ctgacgctct cttgtttaat gtctggtcat acgtattatg 120
gaccttgtgt gggttggttc cgccagcgtc cagggaaagc gcgtgaggga atcgcacaga 180
ttagtcctag tggtgggagt gttagttaca gtggtggcgt gaagggccga ttcaccattt 240
cccgagacaa ctccaagaat actattgctc tcataatgaa cgacctcgtg cctgaagaca 300
cggccactta ttattgcgca gcagattcag ggggactctg cagccatcgt gagcgcgact 360
atgacatttg gggccagggg acccaggtca ccgtctgcag cggccgcact ctgaaaagta 420
cttcggtgca gatattact 439
<210> 209
<211> 145
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体B
<400> 209
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Asp Pro Asp Val His Leu
1 5 10 15
Gln Asp Ser Gly Gly Gly Trp Val His Pro Gly Gly Ser Leu Thr Leu
20 25 30
Ser Cys Leu Met Ser Gly Ser Glu Tyr Tyr Gly Ser Pro Val Gly Trp
35 40 45
Phe Pro Gln Pro Pro Gly Lys Gly Arg Glu Glu Ile Ala Glu Ile Val
50 55 60
Pro Ile Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val Glu Gly Arg Phe
65 70 75 80
Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn
85 90 95
Asp Leu Leu Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Ser
100 105 110
Gly Gly Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Gly Thr Val Lys Lys Leu Ser Glu Lys
130 135 140
Tyr
145
<210> 210
<211> 435
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体B
<400> 210
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta gatccagatg tgcacctgca ggattcggga 60
ggaggctggg tgcacccggg gggctccctg accctctctt gtttaatgtc gggttccgaa 120
tattatggtt cccctgtggg ttggttcccc cagcccccag gaaaggggcg tgaggaaatc 180
gcggaaattg ttcctattgg tgggagtgtt atttacattg gtggcgtgga gggccgattc 240
accatttccc gagacaactc caagaatact attgctctca taatgaacga cctcctgcct 300
gaagacacgg ccacttatta ttgcgcagca gattcagggg gactctgcag ccatcgtgag 360
cgcgactatg acatttgggg ccaggggacc caggtcaccg tctgctctga aaagtacttc 420
ggtgcagata ttact 435
<210> 211
<211> 139
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体C
<400> 211
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Asp Val Gln Leu Pro Glu
1 5 10 15
Ser Gly Arg Thr Leu Val Pro Pro Gly Gly Ser Leu Lys Leu Ser Trp
20 25 30
Ala Thr His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe Pro Met Leu Trp Val Pro
35 40 45
Pro Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Ala Gly Ile Gly Ser Asp
50 55 60
Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu Arg Met Asp Asp Leu Leu
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Val Leu Asp Tyr
100 105 110
His Pro Asp Leu Trp Gly Arg Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Arg Gly
115 120 125
Arg Gly Thr Val Lys Lys Leu Ser Glu Lys Tyr
130 135
<210> 212
<211> 419
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体C
<400> 212
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta agatgtgcag ctgccagaat ccggaagaac 60
gttggtgcca cccggggggt ccctgaagct ctcctgggca acgcacggat tcggaatcgg 120
tagtttcccc atgctgtggg tccccccggc ccccggaaaa gggctcgaat atattgcggg 180
cattggtagt gattatacga cacactattc aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc 240
taaagacatt gccaagaata cactagatct gcgcatggac gacctactgc ctgaagacac 300
ggccaattat tattgtgcga aagacgtact tgactaccac ccagatttgt ggggccgggg 360
aacccaggtc accgtctgca ggggccgcat ctgaaaagta cttcggtgca gatattact 419
<210> 213
<211> 145
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体D
<400> 213
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Val Gln Leu Gln Glu Ser
1 5 10 15
Gly Gly Gly Ser Val Gln Asp Gly Gly Thr Leu Gln Leu Ser Cys Glu
20 25 30
Asp Ser Lys Trp Ser Tyr Thr Tyr Tyr Cys Met Gly Trp Phe Arg Gln
35 40 45
Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Pro Val Ala His Ile Asp Ser Glu Gly
50 55 60
Thr Val Ala Tyr Ala Asp Thr Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg
65 70 75 80
Gly Asp Ala Lys His Arg Val Tyr Leu Gln Met Asn Asn Leu Lys Ala
85 90 95
Asp Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Ala Asn Gly Gly Tyr Cys Leu
100 105 110
Arg Pro Arg Gln Leu Ala Ala Asp Tyr Glu Tyr Trp Gly Gln Gly Ala
115 120 125
Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Gly Thr Val Lys Lys Leu Ser Glu Lys
130 135 140
Tyr
145
<210> 214
<211> 441
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体D
<400> 214
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta aagtgcagct gcaggagtct gggggaggct 60
cggtgcagga tggagggact ttacaactct cttgtgaaga ctctaaatgg agctacacgt 120
actattgtat ggggtggttc cgccaggctc cagggaagga gcgagagccg gtcgcgcaca 180
ttgatagtga aggcactgtc gcttacgccg acaccgtgaa gggccgattc accatctccc 240
ggggggacgc caagcatagg gtttacctgc aaatgaataa cttgaaggct gatgacacgg 300
ccatctatta ttgtgcggcc aatggtggtt attgcctcag accccgtcaa ctcgccgcgg 360
attatgagta ttggggccag ggggcccagg tcaccgtctc cagcggccgc atctgaaaag 420
tacttcggtg cagatattac t 441
<210> 215
<211> 138
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体E
<400> 215
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Thr Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe Ala Met Leu Trp Val Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Ala Gly Ile Gly Ser Asp
50 55 60
Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu Arg Met Asp Asp Leu Val
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Val Leu Asp Tyr
100 105 110
His Pro Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly
115 120 125
Gly Thr Val Lys Lys Leu Ser Glu Lys Tyr
130 135
<210> 216
<211> 421
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体E
<400> 216
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggaac 60
attggtgcag cccggggggt ctctgacgct ctcctgtgca gcgcatggat tcggaatcgg 120
tagtttcgcc atgctgtggg tccgccaggc cccaggaaag gggctcgagt atattgcggg 180
cattggtagt gattatacga cacactattc aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc 240
taaagacatt gccaagaata cactagatct gcgcatggac gacctagtgc ctgaagacac 300
ggccaattat tattgtgcga aagacgtact tgactaccac ccagatttgt ggggccaggg 360
aacccaggtc accgtctgca gcggccgcac ttctgaaaag tacttcggtg cagatattac 420
t 421
<210> 217
<211> 139
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体F
<400> 217
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Thr Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe Ala Met Leu Trp Val Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Ala Gly Ile Gly Ser Asp
50 55 60
Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu Arg Met Asp Asp Leu Val
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Val Leu Asp Tyr
100 105 110
His Pro Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly
115 120 125
Arg Gly Thr Val Lys Lys Leu Ser Glu Lys Tyr
130 135
<210> 218
<211> 418
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体F
<400> 218
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggaac 60
attggtgcag cccggggggt ctctgacgct ctcctgtgca gcgcatggat tcggaatcgg 120
tagtttcgcc atgctgtggg tccgccaggc cccaggaaag gggctcgagt atattgcggg 180
cattggtagt gattatacga cacactattc aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc 240
taaagacatt gccaagaata cactagatct gcgcatggac gacctagtgc ctgaagacac 300
ggccaattat tattgtgcga aagacgtact tgactaccac ccagatttgt ggggccaggg 360
aacccaggtc accgtctgca gcggccgctc tgaaaagtac ttcggtgcag atattact 418
<210> 219
<211> 138
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体G
<400> 219
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Thr Leu Val Gln Pro Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala His Gly Phe Gly Ile Gly Ser Phe Ala Met Leu Trp Val Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Tyr Ile Ala Gly Ile Gly Ser Asp
50 55 60
Tyr Thr Thr His Tyr Ser Asn Ser Leu Ser Gly Arg Phe Thr Ile Ser
65 70 75 80
Lys Asp Ile Ala Lys Asn Thr Leu Asp Leu Arg Met Asp Asp Leu Val
85 90 95
Pro Glu Asp Thr Ala Asn Tyr Tyr Cys Ala Lys Asp Val Leu Asp Tyr
100 105 110
His Pro Asp Leu Trp Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly
115 120 125
Gly Thr Val Lys Lys Leu Ser Glu Lys Tyr
130 135
<210> 220
<211> 421
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体G
<400> 220
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggaac 60
attggtgcag cccggggggt ctctgacgct ctcctgtgca gcgcatggat tcggaatcgg 120
tagtttcgcc atgctgtggg tccgccaggc cccaggaaag gggctcgagt atattgcggg 180
cattggtagt gattatacga cacactattc aaattccctc tcgggccgct tcaccatctc 240
taaagacatt gccaagaata cactagatct gcgcatggac gacctagtgc ctgaagacac 300
ggccaattat tattgtgcga aagacgtact tgactaccac ccagatttgt ggggccaggg 360
aacccaggtc accgtctgca gcggccgcac ttctgaaaag tacttcggtg cagatattac 420
t 421
<210> 221
<211> 148
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体H
<400> 221
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Thr Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Ser Ile Thr Thr Tyr His Met Ala Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Glu Val Ala Val Ile Asn Asp Asp
50 55 60
Ala Asn Ser Arg Ile Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Gln Asp Lys Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Tyr Leu
85 90 95
Thr Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Leu Arg Cys
100 105 110
Val Pro Gly Thr Asp Ser Gly His Pro Tyr Ser Tyr Asn Tyr Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Gly Thr Val Lys Lys Leu
130 135 140
Ser Glu Lys Tyr
145
<210> 222
<211> 446
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体H
<400> 222
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggagg 60
ttcggtgcag actggaggat ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag attccatcac 120
tacctaccac atggcctggt tccgccagac tccagggaag gagcgtgagg aggtcgcagt 180
tataaatgat gatgctaatt cgagaatcta tgtcgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ctcccaagac aaggccaaga acacggtgta tctgcaaatg aactacctga cgcctgagga 300
cacggccatc tactactgtg cggcagattt gaggtgcgtc cctgggaccg actctggtca 360
tccttattcg tataactact ggggccaggg gacccaggtc accgtctgca gcggcctctg 420
aaaagtactt cggtgcagat attact 446
<210> 223
<211> 145
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体I
<400> 223
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Asp Val His Leu Gln Asp
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Trp
20 25 30
Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Val Gly Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Pro Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile Pro Gln Ile Ser Pro Ile
50 55 60
Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu
85 90 95
Leu Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Ser Gly Gly
100 105 110
Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr
115 120 125
Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Gly Thr Val Lys Lys Leu Ser Glu Lys
130 135 140
Tyr
145
<210> 224
<211> 434
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体I
<400> 224
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta agatgtgcac ctgcaggatt ctggaggagg 60
ctcggtgcag gctggaggct ccctgacgct ctcttggtta atgtcgggtc atacgtatta 120
tggaccttgt gtgggttggt tccgccagcc cccagggaaa gcgcgtgagg gaatcccaca 180
gattagtcct attggtggga gtgttattta cattggtggc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgagac aactccaaga atactattgc tctcataatg aacgacctcc tgcctgaaga 300
cacggccact tattattgcg cagcagattc agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga 360
ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt caccgtctgc ggcctctgaa aagtacttcg 420
gtgcagatat tact 434
<210> 225
<211> 145
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体J
<400> 225
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Asp Val His Leu Gln Asp
1 5 10 15
Ser Gly Glu Gly Trp Gly His Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Gly Gly Gly Phe Pro
35 40 45
Gln Pro Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile Pro Gln Met Ile Pro Ile
50 55 60
Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu
85 90 95
Val Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Asp Ser Gly Gly
100 105 110
Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr
115 120 125
Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Gly Thr Val Lys Lys Leu Ser Glu Lys
130 135 140
Tyr
145
<210> 226
<211> 434
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体J
<400> 226
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta agatgtgcac ctgcaggatt cgggagaagg 60
ctgggggcac gctggaggct ccctgaccct ctcttgttta atgtcgggtc atacgtatta 120
tggaccttgt gggggtgggt tcccccagcc cccagggaaa gcccgtgagg gaatcccaca 180
aatgattcct attggtggga gtgttattta cattggtggc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgagac aactccaaga atactattgc tctcataatg aacgacctcg tgcctgaaga 300
cacggccact tattattgcg caacagattc agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga 360
ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt caccgtctgc ggcctctgaa aagtacttcg 420
gtgcagatat tact 434
<210> 227
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体K
<400> 227
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Asp Val His Leu Gln Asp
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val His Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Gly Gly Gly Phe Pro
35 40 45
Arg Pro Pro Gly Lys Gly Arg Glu Gly Ile Ala Gln Ile Ile Pro Ile
50 55 60
Gly Gly Ser Val Ile Tyr Ile Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Tyr Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu
85 90 95
Val Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Cys Ala Thr Asp Ser Gly Gly Leu
100 105 110
Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr Gln
115 120 125
Val Thr Val Cys Ser Gly Gly Thr Val Lys Lys Leu Ser Glu Lys Tyr
130 135 140
<210> 228
<211> 437
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体K
<400> 228
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta agatgtgcac ctgcaggatt ctggaggagg 60
ctcggtgcac gctgggggct ccctgacgct ctcttgttta atgtcgggtc atacgtatta 120
tggaccttgt gggggtgggt tcccccggcc cccaggaaaa gggcgtgagg gaatcgcaca 180
aattattcct attggtggga gtgttattta cattggtggc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgatac aactccaaga atactattgc tctcataatg aacgacctcg tgcctgaaga 300
cacggccact tattattgcg caacagattc agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga 360
ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt caccgtctgc agcggcctct gaaaagtact 420
tcggtgcaga tattact 437
<210> 229
<211> 144
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体L
<400> 229
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Asp Val His Leu Gln Asp
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Thr Leu Ser Cys
20 25 30
Leu Met Ser Gly His Thr Tyr Tyr Gly Pro Cys Val Gly Trp Phe Pro
35 40 45
Gln Arg Pro Gly Lys Ala Arg Glu Gly Ile Ala Gln Met Ile Pro Ile
50 55 60
Gly Gly Ser Val Ser Tyr Ser Gly Gly Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Ile Ala Leu Ile Met Asn Asp Leu
85 90 95
Val Pro Glu Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr Cys Ala Thr Asp Ser Gly Gly
100 105 110
Leu Cys Ser His Arg Glu Arg Asp Tyr Asp Ile Trp Gly Gln Gly Thr
115 120 125
Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Thr Val Lys Lys Leu Ser Glu Lys Tyr
130 135 140
<210> 230
<211> 433
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体L
<400> 230
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta agatgtgcac ctgcaggatt ctggaggagg 60
ctcggtgcag gctggaggct ccctgaccct ctcttgttta atgtcgggtc atacgtatta 120
tggaccttgt gtgggttggt tcccccagcg tccagggaaa gcgcgtgagg gaatcgcaca 180
aatgattcct attggtggga gtgttagtta cagtggtggc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgagac aactccaaga atactattgc tctcataatg aacgacctcg tgcctgaaga 300
cacggccact tattattgcg caacagattc agggggactc tgcagccatc gtgagcgcga 360
ctatgacatt tggggccagg ggacccaggt caccgtctgc agctctgaaa agtacttcgg 420
tgcagatatt act 433
<210> 231
<211> 147
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体M
<400> 231
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Glu Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Glu Tyr Thr Ala Ile Thr Tyr Cys Met Ala Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Glu Arg Glu Gly Val Ala Ala Ile Asn Arg Gly
50 55 60
Gly Gly Ser Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Gln Asp Asn Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Leu Met Asn Ser Leu
85 90 95
Lys Pro Glu Asp Thr Gly Met Tyr Tyr Cys Ala Tyr Lys Gln Thr Gly
100 105 110
Asp Cys Gly Ile Phe Gln Phe Phe Gly Asn Tyr Gly Gln Gly Thr Gln
115 120 125
Val Thr Val Ser Ser Gly Arg Thr His Gly Thr Val Lys Lys Leu Ser
130 135 140
Glu Lys Tyr
145
<210> 232
<211> 439
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体M
<400> 232
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta gatccagatg tgcagctgca ggagtctggg 60
ggaggctcgg tgcaggaggg agggtctctg agactctcct gtgcagcctc tgaatacacc 120
gctattacct actgtatggc ctggttccgc caggctccag ggaaggagcg tgagggggtc 180
gcggctatca atcgcggtgg tggtagtaca tattacgccg actccgtgaa gggccgattc 240
accatctccc aggacaacgc caagaacacg gtgtatctcc taatgaacag cctgaaacct 300
gaggacactg gcatgtacta ctgtgcgtac aaacagaccg gtgattgtgg gatcttccaa 360
ttctttggaa actatggcca ggggacccag gtcaccgtct ccagcggcct ctgaaaagta 420
cttcggtgca gatattact 439
<210> 233
<211> 148
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体N
<400> 233
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Thr Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Ser Ile Thr Thr Tyr His Met Ala Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Glu Val Ala Val Ile Asn Asp Asp
50 55 60
Ala Asn Ser Arg Ile Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Gln Asp Lys Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Tyr Leu
85 90 95
Thr Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Leu Arg Cys
100 105 110
Val Pro Gly Thr Asp Ser Gly His Pro Tyr Ser Tyr Asn Tyr Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Gln Val Thr Ala Ser Ser Gly Gly Thr Val Lys Lys Leu
130 135 140
Ser Glu Lys Tyr
145
<210> 234
<211> 446
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体N
<400> 234
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggagg 60
ttcggtgcag actggaggat ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag attccatcac 120
tacctaccac atggcctggt tccgccagac tccagggaag gagcgtgagg aggtcgcagt 180
tataaatgat gatgctaatt cgagaatcta tgtcgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ctcccaagac aaggccaaga acacggtgta tctgcaaatg aactacctga cgcctgagga 300
cacggccatc tactactgtg cggcagattt gaggtgcgtc cctgggaccg actctggtca 360
tccttattcg tataactact ggggccaggg gacccaggtc accgcctcca gcggcctctg 420
aaaagtactt cggtgcagat attact 446
<210> 235
<211> 149
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体O
<400> 235
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Thr Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Ser Ile Thr Thr Tyr His Met Ala Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Thr Pro Gly Lys Glu Arg Glu Glu Val Ala Val Ile Asn Asp Asp
50 55 60
Ala Asn Ser Arg Ile Tyr Val Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Gln Asp Lys Ala Lys Asn Thr Val Tyr Leu Gln Met Asn Tyr Leu
85 90 95
Thr Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Ala Asp Leu Arg Cys
100 105 110
Val Pro Gly Thr Asp Ser Gly His Pro Tyr Ser Tyr Asn Tyr Trp Gly
115 120 125
Gln Gly Thr Gln Val Thr Ala Ser Ser Gly Arg Gly Thr Val Lys Lys
130 135 140
Leu Ser Glu Lys Tyr
145
<210> 236
<211> 446
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体O
<400> 236
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta agatgtgcag ctgcaggagt ctggaggagg 60
ttcggtgcag actggaggat ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag attccatcac 120
tacctaccac atggcctggt tccgccagac tccagggaag gagcgtgagg aggtcgcagt 180
tataaatgat gatgctaatt cgagaatcta tgtcgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ctcccaagac aaggccaaga acacggtgta tctgcaaatg aactacctga cgcctgagga 300
cacggccatc tactactgtg cggcagattt gaggtgcgtc cctgggaccg actctggtca 360
tccttattcg tataactact ggggccaggg gacccaggtc accgcctcca gcggcctctg 420
aaaagtactt cggtgcagat attact 446
<210> 237
<211> 150
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体P
<400> 237
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Asp Val Gln Leu Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Ala Gln Pro Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Val Ser Gly Ser Thr Ala Ser Met Tyr Cys Leu Ala Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Glu Pro Glu Gly Val Ala Ala Ile Ser Gly Asp
50 55 60
Asp Lys Gly Phe Thr Asn Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr
65 70 75 80
Ile Ser Gln Asn Lys Ala Asn Lys Thr Val Asn Leu Gln Met Asn Ser
85 90 95
Leu Lys Pro Glu Asp Thr Ala Ile Tyr Tyr Cys Ala Val Asp Ala Arg
100 105 110
Ala Thr Thr Thr Gly Glu Arg Leu His Ala Arg Thr Tyr Glu Phe Trp
115 120 125
Gly Gln Gly Thr Gln Val Thr Val Cys Ser Gly Arg Gly Thr Val Lys
130 135 140
Lys Leu Ser Glu Lys Tyr
145 150
<210> 238
<211> 450
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体P
<400> 238
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta gatgtgcagc tgcaggagtc tgggggaggc 60
tcggcgcagc ctggagggtc tctgagactc tcctgtgcag tctctggatc gaccgccagt 120
atgtactgct tggcctggtt ccgccaggct ccagggaagg agcctgaggg ggttgctgct 180
attagtggag atgataaagg gtttacgaat tacgccgact ccgtgaaggg ccggttcacc 240
atctcccaaa acaaggccaa taaaacggtg aatctgcaaa tgaacagcct gaaacctgaa 300
gacacggcca tttattactg tgccgttgat gcgcgagcga caacaactgg tgaacgtcta 360
cacgcccgga cgtacgaatt ctggggccag gggacccagg tcaccgtctg cagcggccgc 420
tctgaaaagt acttcggtgc agatattact 450
<210> 239
<211> 148
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体Q
<400> 239
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Asp Val Gln Met Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Thr Leu Ser Thr Tyr Cys Met Gly Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Val Pro Gly Lys Asp Arg Glu Gly Val Ala Ala Ile Tyr Arg Leu
50 55 60
Arg Asp Met Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ala Asn Asp Thr Val Asp Leu Gln Met Asn Ser Leu
85 90 95
Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Cys Val Arg
100 105 110
Leu Phe Gly Thr Cys Gln Leu Val Glu Asp Phe Glu Leu Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Leu Gly Thr Val Lys Lys Leu
130 135 140
Ser Glu Lys Tyr
145
<210> 240
<211> 442
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体Q
<400> 240
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta agatgtgcag atgcaggagt ctgggggagg 60
gtcggtgcag gctggagggt ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag ataccctcag 120
tacctactgc atgggctggt tccgccaagt tccagggaag gaccgtgagg gggtcgcagc 180
gatttatcgt cttagggata tgacgttcta tgccgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgtgac aacgccaacg acacggtaga tctgcaaatg aacagcctga aacctgagga 300
cacagccgtg tactactgtg cagcaagatg tgtgcgacta ttcggtactt gtcagctagt 360
cgaagatttt gaactatggg gccaggggac ccaggtcacc gtctccagcg gctctgaaaa 420
gtacttcggt gcagatatta ct 442
<210> 241
<211> 149
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体R
<400> 241
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Asp Val Gln Met Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Thr Leu Ser Thr Tyr Cys Met Gly Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Ala Pro Gly Lys Asp Arg Glu Gly Val Ala Ala Ile Tyr Arg Leu
50 55 60
Arg Asp Met Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ala Asn Asp Thr Val Asp Leu Gln Met Asn Ser Leu
85 90 95
Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Cys Val Arg
100 105 110
Leu Phe Gly Thr Cys Gln Leu Val Glu Asp Phe Glu Leu Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Leu Thr Gly Thr Val Lys Lys
130 135 140
Leu Ser Glu Lys Tyr
145
<210> 242
<211> 442
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体R
<400> 242
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta agatgtgcag atgcaggagt ctgggggagg 60
gtcggtgcag gctggagggt ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag ataccctcag 120
tacctactgc atgggctggt tccgccaagt tccagggaag gaccgtgagg gggtcgcagc 180
gatttatcgt cttagggata tgacgttcta tgccgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgtgac aacgccaacg acacggtaga tctgcaaatg aacagcctga aacctgagga 300
cacagccgtg tactactgtg cagcaagatg tgtgcgacta ttcggtactt gtcagctagt 360
cgaagatttt gaactatggg gccaggggac ccaggtcacc gtctccagcg gctctgaaaa 420
gtacttcggt gcagatatta ct 442
<210> 243
<211> 149
<212> PRT
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体S
<400> 243
Asn Lys Ala Leu Lys Glu Leu Gln Gln Asp Asp Val Gln Met Gln Glu
1 5 10 15
Ser Gly Gly Gly Ser Val Gln Ala Gly Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys
20 25 30
Ala Ala Ser Gly Asp Thr Leu Ser Thr Tyr Cys Met Gly Trp Phe Arg
35 40 45
Gln Val Pro Gly Lys Asp Arg Glu Gly Val Ala Ala Ile Tyr Arg Leu
50 55 60
Arg Asp Met Thr Phe Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile
65 70 75 80
Ser Arg Asp Asn Ala Asn Asp Thr Val Asp Leu Gln Met Asn Ser Leu
85 90 95
Lys Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Ala Arg Cys Val Arg
100 105 110
Leu Phe Gly Thr Cys Gln Leu Val Glu Asp Phe Glu Leu Trp Gly Gln
115 120 125
Gly Thr Gln Val Thr Val Ser Ser Gly Leu Thr Gly Thr Val Lys Lys
130 135 140
Leu Ser Glu Lys Tyr
145
<210> 244
<211> 443
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> cnbp***位点抗体S
<400> 244
cttcaacaag atggaacagt caagaagcta agatgtgcag atgcaggagt ctgggggagg 60
gtcggtgcag gctggagggt ctctgagact ctcctgtgca gcctctggag ataccctcag 120
tacctactgc atgggctggt tccgccaagt tccagggaag gaccgtgagg gggtcgcagc 180
gatttatcgt cttagggata tgacgttcta tgccgactcc gtgaagggcc gattcaccat 240
ttcccgtgac aacgccaacg acacggtaga tctgcaaatg aacagcctga aacctgagga 300
cacagccgtg tactactgtg cagcaagatg tgtgcgacta ttcggtactt gtcagctagt 360
cgaagatttt gaactatggg gccaggggac ccaggtcacc gtctccagcg gcctctgaaa 420
agtacttcgg tgcagatatt act 443
<210> 245
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 乳杆菌属鉴别正向
<400> 245
agagtttgat cctggctcag 20
<210> 246
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 乳杆菌属鉴别反向
<400> 246
ccgtcaattc ctttgagttt 20
<210> 247
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 罗伊乳杆菌鉴别正向
<400> 247
gccgcctaag gtgggacaga t 21
<210> 248
<211> 20
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 罗伊乳杆菌鉴别反向
<400> 248
aacactcaag gattgtctga 20
<210> 249
<211> 32
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> MuB部分基因正向
<400> 249
gctctagaac ggttcactac aagtacgcag at 32
<210> 250
<211> 34
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> MuB部分基因反向
<400> 250
cgagctctgc gaaaaaagac aaaaaggctc aacc 34
<210> 251
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> CnBP完全正向
<400> 251
gctctagaac tcataatatg gtctttg 27
<210> 252
<211> 28
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> CnBP完全反向
<400> 252
cgagctcata atttaacatt aatttgtg 28
<210> 253
<211> 22
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> VHH大***物正向
<400> 253
gtcctggatc ccttctacaa gg 22
<210> 254
<211> 23
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> VHH大***物反向
<400> 254
gggacgtcct gttgaactgt tcc 23
<210> 255
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> MuB反转正向
<400> 255
gacgacttca tttggatcct tggt 24
<210> 256
<211> 37
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> MuB反转反向
<400> 256
acgcgtcgac catatggaag tcgtcaagga actcgaa 37
<210> 257
<211> 38
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> MuB正向的VHH***物
<400> 257
cgggatccag atgtgcagct gcaggagtct ggaggagg 38
<210> 258
<211> 43
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> MuB反向的VHH***物
<400> 258
ggaattccat atgagtgcgg ccgctggaga cggtgacctg ggt 43
<210> 259
<211> 24
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 没有限制位点的罗伊乳杆菌MuB基因
<400> 259
acggttcact acaagtacgc agat 24
<210> 260
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 没有限制位点的罗伊乳杆菌MuB基因
<400> 260
tgcgaaaaaa gacaaaaagg ctcaacc 27
<210> 261
<211> 31
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> CnBP反转正向
<400> 261
ggaattccat atgtctgaaa agtacttcgg t 31
<210> 262
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> CnBP反转反向
<400> 262
tagcttcttg acggatccat c 21
<210> 263
<211> 37
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> CnBP正向的VHH***物
<400> 263
cgggatccga tgtgcagctg caggagtctg gaggagg 37
<210> 264
<211> 43
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> CnBP反向的VHH***物
<400> 264
ggaattccat atgagtgcgg ccgctggaga cggtgacctg ggt 43
<210> 265
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> CnBP磷酸化寡物正向
<400> 265
actctagata tggtctttgc g 21
<210> 266
<211> 21
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> CnBP磷酸化寡物反向
<400> 266
ataatttaac actagtttgt g 21
<210> 267
<211> 27
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 沙门氏菌属FimH正向
<400> 267
ggaattccat atgaaaatat actcagc 27
<210> 268
<211> 30
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 沙门氏菌属FimH反向
<400> 268
ccgctcgagt tactaatcat aatcgactcg 30
<210> 269
<211> 29
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 沙门氏菌属OmPD正向
<400> 269
ggaattccat atgaaactta agttagtgg 29
<210> 270
<211> 32
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 沙门氏菌属OmPD反向
<400> 270
ccgctcgagt tactagaact ggtagttcag ac 32
<210> 271
<211> 696
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 罗伊乳杆菌FimH序列
<400> 271
atgggcagca gccatcatca tcatcatcac agcagcggcc tggtgccgcg cggcagccat 60
atgaaaatat actcagcgct attgctggcg gggaccgcgc tctttttcac ccatcccgcg 120
ctggcgacgg tttgccgtaa ttcaaacggg acggcgaccg atatctttta cgacctgtca 180
gatgttttca ccagtggcaa taatcagccg ggacaggtgg ttacgctgcc ggaaaaatct 240
ggttgggtcg gcgtaaacgc gacgtgcccg gcggggacaa cggtaaatta tatctaccga 300
agctatgtat cagaattacc ggtacaaagc accgaaggaa attttaaata cctcaagctg 360
aatgactacc ttctgggcgc gatgagcatc accgatagtg tcgctggcgt attttatccg 420
ccccgtaact atattcgcat gggcgtcgac tctaacgtgt cgcagcaaat gccgtttggc 480
gtgcaggact caaagctggt ttttaaatta aaagtgatac ggccttttat taatatggtg 540
acgatccctc gccagacaat gtttactgtc tatgtgacga cctctaccgg cgacgcgttg 600
agcacgccgg tatataccat tagctacagc ggcaaagtgg aagtgccgca aaactgcgaa 660
gtgaatgccg gacaggtcgt ggagtttgat ttcggc 696
<210> 272
<211> 1089
<212> DNA
<213> 人工序列
<220>
<223> 罗伊乳杆菌OmPD序列
<400> 272
atgaaactta agttagtagc agtggcagtg acttccctgt tggcagcagg cgttgtaaat 60
gcagccgagg tatataacaa agacggcaat aaactggatc tgtacggtaa agttcacgct 120
cagcattatt tctctgatga taacggaagt gatggtgaca aaacttacgc gcgtctgggc 180
tttaaaggcg aaactcagat caacgatcag ttaaccggtt ttggccagtg ggaatatgaa 240
ttcaaaggca accgtactga aagccagggc gctgacaaag acaaaacccg tctggcgttt 300
gctggtctga aattcgctga ctacggttct ttcgactacg gtcgtaacta cggcgttgct 360
tacgacatcg gcgcatggac cgacgttcta ccagagttcg gtggcgatac ctggactcag 420
actgacgtct tcatgactgg ccgtactact ggtgttgcca cctaccgtaa cactgacttc 480
tttggcctgg ttgaaggtct gaactttgcc gcgcagtacc agggcaaaaa cgaccgtgac 540
ggcgcgtacg agtctaacgg cgacggtttc ggtctgtccg caacgtatga gtacgaaggt 600
tttggcgtag gtgcggccta tgcgaagtct gaccgtacta acaaccaggt gaaagcagcg 660
agcaacctga atgctgcggg taaaaacgct gaagtctggg ctgctggtct gaaatatgat 720
gcgaacaaca tctacctggc gaccacctac tccgaaacgc tgaacatgac cacctttggt 780
gaagattcag cgggtgatgc gtttatcgcg aataaaaccc agaactttga agcagttgct 840
cagtatcagt ccgacttcgg tctgcgtccg tccatcgctt acctgaaatc caaaggtaaa 900
aacctgggta cttacggcga ccaggatctg gttgagtaca tcgatgtcgg tgctacctac 960
tacttcaaca aaaacatgtc caccttcgtt gattacaaaa tcaacctgct ggacgacagc 1020
gacttcacca aagcggctaa agtgtctacc gacaacatcg ttgctgttgg tctgaactac 1080
cagttctaa 1089

Claims (25)

1.包含3个互补决定区(CDR)的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,所述互补决定区具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:
a.对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:2和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
b.对于CDR1为SEQ ID NO:4、对于CDR2为SEQ ID NO:5和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
c.对于CDR1为SEQ ID NO:6、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;
d.对于CDR1为SEQ ID NO:9、对于CDR2为SEQ ID NO:10和对于CDR3为SEQ ID NO:11;
e.对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;
f.对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15;
g.对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:16和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
h.对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
i.对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:18和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
j.对于CDR1为SEQ ID NO:19、对于CDR2为SEQ ID NO:20和对于CDR3为SEQ ID NO:21;
k.对于CDR1为SEQ ID NO:22、对于CDR2为SEQ ID NO:23和对于CDR3为SEQ ID NO:24;和
l.对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27。
2.权利要求1中所述的单链抗体或其片段,其中编码3个互补决定区的cDNA序列选自由以下各项组成的组:
a.对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:29和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
b.对于CDR1为SEQ ID NO:31、对于CDR2为SEQ ID NO:32和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
c.对于CDR1为SEQ ID NO:33、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;
d.对于CDR1为SEQ ID NO:36、对于CDR2为SEQ ID NO:37和对于CDR3为SEQ ID NO:38;
e.对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;
f.对于CDR1为SEQ ID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42;
g.对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:43和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
h.对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:44和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
i.对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:45和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
j.对于CDR1为SEQ ID NO:46、对于CDR2为SEQ ID NO:47和对于CDR3为SEQ ID NO:48;
k.对于CDR1为SEQ ID NO:49、对于CDR2为SEQ ID NO:50和对于CDR3为SEQ ID NO:51;和
l.对于CDR1为SEQ ID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54。
3.在表面上表达一种或多种嵌合蛋白的重组宿主细胞,其中所述嵌合蛋白包含:
a.至少一种如在权利要求1-2中的任一项中所述的包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段;和
b.至少一种在所述重组宿主细胞的表面上表达的表面蛋白,
其中所述在所述重组宿主细胞中表达的表面蛋白是MuB或CnBP。
4.权利要求3中所述的重组宿主细胞,其中所述宿主细胞是乳杆菌属(Lactobacillusspp.)。
5.如权利要求3-4中的任一项中所述的重组宿主细胞,其中所述嵌合蛋白在宿主基因组内编码。
6.如权利要求3-5中的任一项中所述的重组宿主细胞,所述重组宿主细胞还包含一种或多种外源核酸序列,所述外源核酸序列编码另一种针对沙门氏菌表面蛋白的抗体或其片段。
7.如权利要求3-6中的任一项中所述的重组宿主细胞,其中所述单链抗体或其片段包含3个互补决定区,所述互补决定区具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:
a.对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:2和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
b.对于CDR1为SEQ ID NO:4、对于CDR2为SEQ ID NO:5和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
c.对于CDR1为SEQ ID NO:6、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;
d.对于CDR1为SEQ ID NO:9、对于CDR2为SEQ ID NO:10和对于CDR3为SEQ ID NO:11;
e.对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;
f.对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15;
g.对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:16和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
h.对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
i.对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:18和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
j.对于CDR1为SEQ ID NO:19、对于CDR2为SEQ ID NO:20和对于CDR3为SEQ ID NO:21;
k.对于CDR1为SEQ ID NO:22、对于CDR2为SEQ ID NO:23和对于CDR3为SEQ ID NO:24;和
l.对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27。
8.如在权利要求3-7中的任一项中所述的重组宿主细胞,其中所述cDNA序列编码3个选自以下的互补决定区:
a.对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:29和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
b.对于CDR1为SEQ ID NO:31、对于CDR2为SEQ ID NO:32和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
c.对于CDR1为SEQ ID NO:33、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;
d.对于CDR1为SEQ ID NO:36、对于CDR2为SEQ ID NO:37和对于CDR3为SEQ ID NO:38;
e.对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;
f.对于CDR1为SEQ ID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42;
g.对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:43和对于CDR3为SEO ID NO:30;
h.对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:44和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
i.对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:45和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
j.对于CDR1为SEQ ID NO:46、对于CDR2为SEQ ID NO:47和对于CDR3为SEQ ID NO:48;
k.对于CDR1为SEQ ID NO:49、对于CDR2为SEQ ID NO:50和对于CDR3为SEQ ID NO:51;和
l.对于CDR1为SEQ ID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54。
9.如权利要求3-8中的任一项中所述的重组宿主细胞,其中所述重组宿主细胞的表面蛋白是MuB或CnBP。
10.包含多核苷酸序列的重组DNA构建体,所述多核苷酸序列编码包含3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,所述互补决定区具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:
a.对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:2和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
b.对于CDR1为SEQ ID NO:4、对于CDR2为SEQ ID NO:5和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
c.对于CDR1为SEQ ID NO:6、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;
d.对于CDR1为SEQ ID NO:9、对于CDR2为SEQ ID NO:10和对于CDR3为SEQ ID NO:11;
e.对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;
f.对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15;
g.对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:16和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
h.对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEO ID NO:3;
i.对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:18和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
j.对于CDR1为SEQ ID NO:19、对于CDR2为SEQ ID NO:20和对于CDR3为SEQ ID NO:21;
k.对于CDR1为SEQ ID NO:22、对于CDR2为SEQ ID NO:23和对于CDR3为SEQ ID NO:24;和
l.对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27。
11.权利要求10中所述的重组DNA构建体,其中编码3个互补决定区的cDNA序列选自由以下各项组成的组:
a.对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:29和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
b.对于CDR1为SEQ ID NO:31、对于CDR2为SEQ ID NO:32和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
c.对于CDR1为SEQ ID NO:33、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;
d.对于CDR1为SEQ ID NO:36、对于CDR2为SEQ ID NO:37和对于CDR3为SEQ ID NO:38;
e.对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;
f.对于CDR1为SEQ ID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42;
g.对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:43和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
h.对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:44和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
i.对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:45和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
j.对于CDR1为SEQ ID NO:46、对于CDR2为SEQ ID NO:47和对于CDR3为SEQ ID NO:48;
k.对于CDR1为SEQ ID NO:49、对于CDR2为SEQ ID NO:50和对于CDR3为SEQ ID NO:51;和
l.对于CDR1为SEQ ID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54。
12.一种重组DNA载体,其包含如在权利要求10-11中的任一项中所述的重组DNA构建体。
13.一种重组宿主细胞,其包含如在权利要求10-11中的任一项中所述的重组DNA构建体。
14.一种重组宿主细胞,其包含如在权利要求12中所述的重组DNA载体。
15.一种嵌合蛋白,其包含选自由SEQ ID NO:93、95、97、99、101、130、105、107、109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141、143、145、147、149、151、153、155、157、159、161、163、165、167、169、171、173、175、177、179、181、183、185、187、189、191、193、195、197、199、201、203、205、207、209、211、213、215、217、219、221、223、225、227、229、231、233、235、237、239、241和243组成的组的氨基酸序列。
16.如权利要求15中所述的嵌合蛋白,其中所述嵌合蛋白多核苷酸序列包含选自由SEQID NO:94、96、98、100、102、104、106、108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140、142、144、146、148、150、152、154、156、158、160、162、164、166、168、170、172、174、176、178、180、182、184、186、188、190、192、194、196、198、200、202、204、206、208、210、212、214、216、218、220、222、224、226、228、230、232、234、236、238、240、242和244组成的组的多核苷酸序列。
17.如权利要求15-16中的任一项中所述的嵌合蛋白,其中所述嵌合蛋白包含含有3个互补决定区的、针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段,所述互补决定区具有选自由以下各项组成的组的氨基酸序列:
a.对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:2和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
b.对于CDR1为SEQ ID NO:4、对于CDR2为SEQ ID NO:5和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
c.对于CDR1为SEQ ID NO:6、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;
d.对于CDR1为SEQ ID NO:9、对于CDR2为SEQ ID NO:10和对于CDR3为SEQ ID NO:11;
e.对于CDR1为SEQ ID NO:12、对于CDR2为SEQ ID NO:7和对于CDR3为SEQ ID NO:8;
f.对于CDR1为SEQ ID NO:13、对于CDR2为SEQ ID NO:14和对于CDR3为SEQ ID NO:15;
g.对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:16和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
h.对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:17和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
i.对于CDR1为SEQ ID NO:1、对于CDR2为SEQ ID NO:18和对于CDR3为SEQ ID NO:3;
j.对于CDR1为SEQ ID NO:19、对于CDR2为SEQ ID NO:20和对于CDR3为SEQ ID NO:21;
k.对于CDR1为SEQ ID NO:22、对于CDR2为SEQ ID NO:23和对于CDR3为SEQ ID NO:24;和
l.对于CDR1为SEQ ID NO:25、对于CDR2为SEQ ID NO:26和对于CDR3为SEQ ID NO:27。
18.如权利要求15-17中的任一项中所述的嵌合蛋白,其中所述3个互补决定区的多核苷酸序列选自由以下各项组成的组:
a.对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:29和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
b.对于CDR1为SEQ ID NO:31、对于CDR2为SEQ ID NO:32和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
c.对于CDR1为SEQ ID NO:33、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;
d.对于CDR1为SEQ ID NO:36、对于CDR2为SEQ ID NO:37和对于CDR3为SEQ ID NO:38;
e.对于CDR1为SEQ ID NO:39、对于CDR2为SEQ ID NO:34和对于CDR3为SEQ ID NO:35;
f.对于CDR1为SEQ ID NO:40、对于CDR2为SEQ ID NO:41和对于CDR3为SEQ ID NO:42;
g.对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:43和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
h.对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:44和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
i.对于CDR1为SEQ ID NO:28、对于CDR2为SEQ ID NO:45和对于CDR3为SEQ ID NO:30;
j.对于CDR1为SEQ ID NO:46、对于CDR2为SEQ ID NO:47和对于CDR3为SEQ ID NO:48;
k.对于CDR1为SEQ ID NO:49、对于CDR2为SEQ ID NO:50和对于CDR3为SEQ ID NO:51;和
l.对于CDR1为SEQ ID NO:52、对于CDR2为SEQ ID NO:53和对于CDR3为SEQ ID NO:54。
19.一种食品,其包含如权利要求13-14中的任一项中所述的重组宿主细胞、或如权利要求1-2中的任一项中所述的单链抗体或其片段、或如权利要求15-18中的任一项中所述的嵌合蛋白。
20.如权利要求19中所述的食品,所述食品还由选自由以下各项组成的组的载体组成:润滑剂、表面活性剂、溶剂、乳化剂、润湿剂、动物饲料、染料或口服溶液。
21.一种制剂,其包含如权利要求1-2中的任一项中所述的单链抗体或其片段,另外由稀释剂、赋形剂或载体组成。
22.一种抑制沙门氏菌的生长的方法,所述方法包括使如权利要求19-20中的任一项中所述的食品或如权利要求21中所述的制剂与含有沙门氏菌的样品接触。
23.一种抑制沙门氏菌的活性的方法,所述方法包括使如权利要求19-20中的任一项中所述的食品或如权利要求21中所述的制剂与含有沙门氏菌的样品接触。
24.一种分离的乳杆菌菌株罗伊乳杆菌(Lactobacillus reuteri)1LB7,其保藏在微生物典型培养物中心和基因库(Microbial Type Culture Collection and Gene Bank,MTCC),登录号为5894,其用于在畜牧业中控制肠道沙门氏菌群体。
25.如权利要求1-2中的任一项中所述的针对沙门氏菌表面蛋白的单链抗体或其片段、或如权利要求3-9中的任一项中所述的重组宿主细胞、或如权利要求10-11中的任一项中所述的重组DNA构建体、或如权利要求12中所述的重组DNA载体、或如权利要求13-14中的任一项中所述的重组宿主细胞、或如权利要求15-18中的任一项中所述的嵌合蛋白、或如权利要求19-20中的任一项中所述的食品、或如权利要求21中所述的制剂、或如权利要求24中所述的分离的乳杆菌菌株,其用于抑制沙门氏菌生长或感染。
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