CN107011170A - 岩藻黄质衍生物及其制备方法和应用 - Google Patents

岩藻黄质衍生物及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN107011170A
CN107011170A CN201710378531.8A CN201710378531A CN107011170A CN 107011170 A CN107011170 A CN 107011170A CN 201710378531 A CN201710378531 A CN 201710378531A CN 107011170 A CN107011170 A CN 107011170A
Authority
CN
China
Prior art keywords
fucoxanthine
derivative
cancer
preparation
formula
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201710378531.8A
Other languages
English (en)
Other versions
CN107011170B (zh
Inventor
张怡评
洪专
方华
谢全灵
郭洪辉
晋文慧
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Third Institute of Oceanography SOA
Original Assignee
Third Institute of Oceanography SOA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Third Institute of Oceanography SOA filed Critical Third Institute of Oceanography SOA
Priority to CN201710378531.8A priority Critical patent/CN107011170B/zh
Publication of CN107011170A publication Critical patent/CN107011170A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN107011170B publication Critical patent/CN107011170B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
    • C07C67/48—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C29/00—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom not belonging to a six-membered aromatic ring
    • C07C29/74—Separation; Purification; Use of additives, e.g. for stabilisation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C29/00—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom not belonging to a six-membered aromatic ring
    • C07C29/74—Separation; Purification; Use of additives, e.g. for stabilisation
    • C07C29/76—Separation; Purification; Use of additives, e.g. for stabilisation by physical treatment
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C29/00—Preparation of compounds having hydroxy or O-metal groups bound to a carbon atom not belonging to a six-membered aromatic ring
    • C07C29/74—Separation; Purification; Use of additives, e.g. for stabilisation
    • C07C29/88—Separation; Purification; Use of additives, e.g. for stabilisation by treatment giving rise to a chemical modification of at least one compound
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C35/00—Compounds having at least one hydroxy or O-metal group bound to a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring
    • C07C35/21—Compounds having at least one hydroxy or O-metal group bound to a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring polycyclic, at least one hydroxy group bound to a non-condensed ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/78—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/78—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
    • C07C45/79—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by solid-liquid treatment; by chemisorption
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/78—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
    • C07C45/85—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by treatment giving rise to a chemical modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/04—Saturated compounds containing keto groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C49/17—Saturated compounds containing keto groups bound to acyclic carbon atoms containing hydroxy groups
    • C07C49/172—Saturated compounds containing keto groups bound to acyclic carbon atoms containing hydroxy groups containing rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/20—Unsaturated compounds containing keto groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C49/255—Unsaturated compounds containing keto groups bound to acyclic carbon atoms containing ether groups, groups, groups, or groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
    • C07C67/48—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
    • C07C67/56—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by solid-liquid treatment; by chemisorption
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
    • C07C67/48—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
    • C07C67/60—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by treatment giving rise to chemical modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/02—Esters of acyclic saturated monocarboxylic acids having the carboxyl group bound to an acyclic carbon atom or to hydrogen
    • C07C69/12—Acetic acid esters
    • C07C69/21—Acetic acid esters of hydroxy compounds with more than three hydroxy groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D301/00—Preparation of oxiranes
    • C07D301/32—Separation; Purification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D303/00—Compounds containing three-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D303/02—Compounds containing oxirane rings
    • C07D303/12—Compounds containing oxirane rings with hydrocarbon radicals, substituted by singly or doubly bound oxygen atoms
    • C07D303/14—Compounds containing oxirane rings with hydrocarbon radicals, substituted by singly or doubly bound oxygen atoms by free hydroxyl radicals

Abstract

本发明涉及五种岩藻黄质衍生物，所述衍生物的制备方法是以岩藻黄质为原料，加入还原剂反应后通过浓缩获得岩藻黄质衍生物粗提物；将岩藻黄质衍生物粗提物通过硅胶柱色谱初步分离,分成不同组分,再通过半制备/制备型高效液相色谱进行分离纯化。本发明制备的岩藻黄质衍生物具有较强的抑制肿瘤细胞增殖的作用，具有良好的临床应用前景。

Description

岩藻黄质衍生物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及化合物及其制备方法，具体涉及一种岩藻黄质衍生物及其制备方法和应用，尤其涉及岩藻黄质衍生物在制备治疗癌症的药物中应用。
背景技术
岩藻黄质(fucoxanthin)亦称褐藻黄素，是自可食用褐藻中，如裙带菜(翅藻科，Undaria pinnatifida)，海带(Laminaria japonica Aresch)中提取出来的天然类胡萝卜素，在其刚性全反式长链的两端分别有一个化学性质活泼的5，6-环氧非饱和丙二烯键结构，因而又异于其他类胡萝卜素分子，具有很强的生物活性。近年来它的多种生物学活性已被证实，一些潜在的活性也正在被科学家们积极探求之中，目前己成为当今海洋药物研究与开发的主攻热点之一。
中药或天然药物在化合物类型、结构上表现出多样性和复杂性，是一个天然形成的“组合化学样品库”，已成为新药研发中发现先导化合物的重要来源。我国拥有丰富的中草药资源，从中提取分离得到的先导化合物，并对其进行结构修饰，增强药理活性、降低毒副作用，改善药代动力学性质，是实现中药现代化和创新新药的有效途径。
目前，国内外关于岩藻黄质衍生物的报道较少。岩藻黄醇是目前已知的岩藻黄质衍生物之一，是其脱去一个乙酰基的代谢产物，其结构与岩藻黄质的结构类似，具有很强的生物活性。近年来研究表明，小鼠口服岩藻黄质后可将其转化为岩藻黄质衍生物而得到利用。Hayato Maeda等研究也发现3T3-L1细胞系中的岩藻黄质代谢产物岩藻黄质衍生物可以通过减少PPARγ(过氧化物酶体增殖激活受体)从而达到抑制3T3-L1前成脂肪细胞系到脂肪细胞系分化的目的，从而达到减肥的效果。目前国内外尚未见到岩藻黄质系列衍生物批量制备研究的报道，不能对岩藻黄质系列衍生物产品进行高值化开发应用，因此，有必要发明一种高纯岩藻黄质系列衍生物的制备方法，研究系列岩藻黄质衍生物的生物活性，为系列衍生物功能性产品的开发应用提供重要基础。
发明内容
本发明的目的在于提供一系列岩藻黄质衍生物及其制备方法和应用，通过半合成制备了五种岩藻黄质衍生物，并阐明其生物活性，证明其具有显著的抑制肿瘤细胞活性，在制备治疗癌症药物中具有广阔的应用前景。
具体而言，本发明一方面涉及岩藻黄质衍生物或其盐，其特征在于，结构如下式(Ⅰ)-式(Ⅴ)所示：
本发明中所述的衍生物的盐包括但不限于，无机酸盐，无机酸例如为盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、碳酸、硼酸、氨基磺酸和氢溴酸，或有机酸的盐，有机酸例如为乙酸、丙酸、丁酸、酒石酸、马来酸、羟基马来酸、富马酸、苹果酸、柠檬酸、乳酸、粘酸、葡糖酸、苯甲酸、琥珀酸、草酸、苯乙酸、甲磺酸、甲苯磺酸、苯磺酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、天门冬氨酸、谷氨酸、依地酸、硬脂酸、棕榈酸、油酸、月桂酸、泛酸、鞣酸、抗坏血酸和戊酸。
本发明第二方面在于提供一种药物组合物，其中包含上述岩藻黄质衍生物或其盐作为活性成分，以及可作为药用辅料。
所述可作为药用辅料为药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。
优选地，剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、散剂、口服液。
本发明第三方面涉及所述的岩藻黄质衍生物或其盐在制备治疗癌症的药物中的应用。
其中所述的癌症包括但不限于恶性黑色素瘤、胰腺癌、甲状腺未分化癌、转移性骨恶性肿瘤、白血病、淋巴癌、骨瘤、软骨肉瘤、***癌、食道癌、胃癌、肝癌、胆囊癌、直肠癌、大肠癌、结肠癌、肺癌、鼻咽癌、神经***癌、乳腺癌、卵巢癌、***、子宫癌。
本发明第四方面在于提供所述岩藻黄质衍生物的制备方法，包括以下步骤：
1)、以岩藻黄质或者含岩藻黄质的提取物为原料；
2)、将原料用溶剂溶解,加入一定比例还原剂还原反应得含有岩藻黄质衍生物的反应液；
3)、将反应液浓缩至干，采用硅胶柱色谱进行初步分离，得到含不同岩藻黄质衍生物的组分；
4)、将各部分分离液浓缩至干，加入流动相溶解，采用半制备/制备型液相色谱分离纯化得到制备液相纯化液；
5)将各部分制备液相纯化液分别浓缩，后将浓缩液进行干燥，得到岩藻黄质衍生物各组分,进行结构解析,确定化合物分别为:式(Ⅰ)、式(Ⅱ)、式(Ⅲ)、式(Ⅳ)、式(Ⅴ)所示。
优选地，步骤2)中所述的溶剂为有机溶剂，优选甲醇、乙醇、四氢呋喃。
优选地，步骤2)中所述原料与还原剂的重量比为50：1至1：1。可选自50:1，40:1，30:1，20:1,10:1，5:1,1:1。
优选地，还原剂为硼氢化钠、氢化铝锂、氯化亚锡、草酸、硼氢化钾、硫酸亚铁、亚硫酸钠等的一种或者几种组合；其中最优选氢化铝锂。
优选地，步骤2)中所述的反应温度为20-50℃，可选自25℃、30℃、35℃、40℃、45℃、50℃；反应时间为0.5-48h，可选自0.5h、1h、2h、4h、8h、10h、12h、16h、20h、24h、48h。
优选地，步骤3)中所述的硅胶柱色谱进行初步分离，硅胶柱可选择正相硅胶和反相硅胶。
优选地，步骤3)中所述的采用正相硅胶柱层析时，洗脱剂可选石油醚-乙酸乙酯或石油醚-丙酮为洗脱剂，比例为20：1-1：1，采用反相硅胶柱色谱柱层析时，洗脱剂可选甲醇-水或乙醇-水，比例为7：3至10：0。
优选地，步骤4)中所述的流动相为甲醇-水、乙腈-水、乙醇-水三种体系溶剂以及该三种体系溶剂以任意比例混合的溶剂。
优选地，所述的岩藻黄质衍生物的制备方法，步骤4)为，将步骤3)获得的岩藻黄质衍生物系列衍生物组分用流动相溶解，转入半制备/制备型高效液相色谱进样瓶中，启动半制备/制备型高效液相色谱进行分离纯化，通过紫外在线检测信号触发馏分收集器自动收集岩藻黄质衍生物纯化液。
优选地，步骤4)所述半制备/制备型高效液相色谱采用的半制备/制备柱填料为C8柱或C18柱。
优选地，步骤4)所述半制备/制备型高效液相色谱采用的半制备/制备柱的直径为10-50mm。
优选地，步骤4)所述的半制备/制备型高效液相色谱采用的进样量为100μL/次-20mL/次。
优选地，步骤4)所述的半制备/制备型高效液相色谱采用的流动相流速为5-200mL/min，优选5、6、10、20、28、50、80、100、120、150、180、200mL/min。
优选地，步骤4)所述的半制备/制备型高效液相色谱采用的检测器为紫外检测器或二极管阵列检测器，检测波长为400-500nm，优选450nm。
优选地，步骤5)中的系列岩藻黄质衍生物纯化液进行减压浓缩后，取浓缩液进行冷冻干燥，获得五种高纯岩藻黄质衍生物，分别为式(Ⅰ)、式(Ⅱ)、式(Ⅲ)、式(Ⅳ)、式(Ⅴ)。
附图说明
图1表示岩藻黄质衍生物混合物色谱图
图2表示表示式(Ⅰ)化合物的图谱，其中图2-1表示式(Ⅰ)化合物的液相色谱图，图2-2表示式(Ⅰ)化合物的氢谱图，图2-3表示式(Ⅰ)化合物的碳谱图；
图3表示式(Ⅱ)化合物的图谱，其中图3-1表示式(Ⅱ)化合物的液相色谱图，图3-2表示式(Ⅱ)化合物的氢谱图，图3-3表示式(Ⅱ)化合物的碳谱图；
图4表示式(Ⅲ)化合物的图谱，其中图4-1表示式(Ⅲ)化合物的液相色谱图，图4-2表示式(Ⅲ)化合物的氢谱图，图4-3表示式(Ⅲ)化合物的碳谱图；
图5表示式(Ⅳ)化合物的图谱，其中图5-1表示式(Ⅳ)化合物的液相色谱图，图5-2表示式(Ⅳ)化合物的氢谱图，图5-3表示式(Ⅳ)化合物的碳谱图；
图6表示式(Ⅴ)化合物的图谱，其中图6-1表示式(Ⅴ)化合物的液相色谱图，图6-2表示式(Ⅴ)化合物的氢谱图，图6-3表示式(Ⅴ)化合物的碳谱图；
具体实施方式
实施例1
1)岩藻黄质衍生物混合物的制备：取岩藻黄质(纯度为99％)500mg，用甲醇200mL溶解，加入氢化铝锂100mg，于37℃下反应10h后，液相色谱检测有多个岩藻黄质衍生物色谱峰，浓缩至近干，备用；
2)岩藻黄质衍生物混合物初步分离：取岩藻黄质衍生物浓缩物，采用硅胶柱色谱分离，洗脱剂为石油醚-乙酸乙酯(20：1-2:1)，得到岩藻黄质衍生物硅胶柱层析分离物1-A、1-B、1-C、1-D、1-E、1-F，分别浓缩，备用；
3)岩藻黄质衍生物(Ⅰ)分离制备：
a)原料的配置：将1-A岩藻黄质衍生物粗品配置成5mg/mL的溶液；
b)仪器：半制备型高效液相色谱；
c)色谱条件：半制备色谱柱为C8柱(250mm×10mm)，流动相***为85％
甲醇水溶液，流动相流速为3mL/min，检测波长为450nm；
d)进样体积：100μL；
通过运行半制备型高效液相色谱获得岩藻黄质衍生物制备液80mL，在30℃下减压浓缩，将浓缩液进行冷冻干燥，即得岩藻黄质衍生物23mg，经结构鉴定确定该化合物为式(Ⅰ)。
4)岩藻黄质衍生物(Ⅱ)分离制备：
a)原料的配置：将1-B岩藻黄质衍生物粗品配置成5mg/mL的溶液；
b)仪器：半制备型高效液相色谱；
c)色谱条件：半制备色谱柱为C8柱(250mm×10mm)，流动相***为85％
甲醇水溶液，流动相流速为3mL/min，检测波长为450nm；
d)进样体积：100μL；
通过运行半制备型高效液相色谱获得岩藻黄质衍生物制备液60mL，在30℃下减压浓缩，将浓缩液进行冷冻干燥，即得岩藻黄质衍生物18mg，经结构鉴定确定该化合物为式(Ⅱ)。
5)岩藻黄质衍生物(Ⅲ)分离制备：
a)原料的配置：将1-C岩藻黄质衍生物粗品配置成5mg/mL的溶液；
b)仪器：半制备型高效液相色谱；
c)色谱条件：半制备色谱柱为C8柱(250mm×10mm)，流动相***为85％甲醇水溶液，流动相流速为3mL/min，检测波长为450nm；
d)进样体积：100μL；
通过运行半制备型高效液相色谱获得岩藻黄质衍生物制备液80mL，在30℃下减压浓缩，将浓缩液进行冷冻干燥，即得岩藻黄质衍生物23mg，经结构鉴定确定该化合物为式(Ⅲ)。
6)岩藻黄质衍生物(Ⅳ)、(Ⅴ)分离制备：
a)原料的配置：将1-B岩藻黄质衍生物粗品配置成5mg/mL的溶液；
b)仪器：半制备型高效液相色谱；
c)色谱条件：半制备色谱柱为C8柱(250mm×10mm)，流动相***为90％甲醇水溶液，流动相流速为3mL/min，检测波长为450nm；
d)进样体积：100μL；
通过运行半制备型高效液相色谱，分别获得岩藻黄质衍生物(Ⅳ)、(Ⅴ)制备液，在30℃下减压浓缩，将浓缩液进行冷冻干燥，分别即得岩藻黄质衍生物(Ⅳ)、(Ⅴ)25mg、29mg，经结构鉴定确定该化合物为式(Ⅳ)、(Ⅴ)。
实施例2
1)岩藻黄质衍生物混合物的制备：取岩藻黄质(纯度为90％)1000mg，用甲醇500mL溶解，加入氢化铝锂150mg，于37℃下反应10h后，液相色谱检测有多个岩藻黄质衍生物色谱峰，浓缩至近干，备用；
2)岩藻黄质衍生物混合物初步分离：取岩藻黄质衍生物浓缩物，采用反相硅胶柱色谱分离，洗脱剂为60％、70％、80％、90、100％甲醇水溶液，梯度洗脱，收集到得到岩藻黄质衍生物反相柱层析分离物2-A、2-B、2-C、2-D、2-E，分别浓缩，备用；
3)岩藻黄质衍生物(Ⅰ)、(Ⅱ)(Ⅳ)分离制备：
a)原料的配置：将2-C岩藻黄质衍生物粗品配置成5mg/mL的溶液；
b)仪器：制备型高效液相色谱；
c)色谱条件：半制备色谱柱为C18柱(250mm×20mm)，流动相***为80％甲醇水溶液，流动相流速为10mL/min，检测波长为450nm；
d)进样体积：500μL；
通过运行制备型高效液相色谱获得岩藻黄质衍生物(Ⅰ)、(Ⅱ)(Ⅳ)制备液分别为210mL、250mL、170mL，在30℃下减压浓缩，将浓缩液进行冷冻干燥，分别得岩藻黄质衍生物23mg、17mg、38mg，经结构鉴定确定化合物结构式分别为：(Ⅰ)、(Ⅱ)(Ⅳ)。
4)岩藻黄质衍生物(Ⅴ)分离制备：
a)原料的配置：将2-D岩藻黄质衍生物粗品配置成5mg/mL的溶液；
b)仪器：半制备型高效液相色谱；
c)色谱条件：制备色谱柱为C18柱(250mm×20mm)，流动相***为85％甲醇水溶液，流动相流速为10mL/min，检测波长为450nm；
d)进样体积：500μL；
通过运行半制备型高效液相色谱获得岩藻黄质衍生物制备液300mL，在30℃下减压浓缩，将浓缩液进行冷冻干燥，即得岩藻黄质衍生物78mg，经结构鉴定确定该化合物为式(Ⅴ)。
5)岩藻黄质衍生物(Ⅲ)分离制备：
a)原料的配置：将2-E岩藻黄质衍生物粗品配置成5mg/mL的溶液；
b)仪器：制备型高效液相色谱；
c)色谱条件：制备色谱柱为C18柱(250mm×20mm)，流动相***为90％甲醇水溶液，流动相流速为10mL/min，检测波长为450nm；
d)进样体积：500μL；
通过运行半制备型高效液相色谱获得岩藻黄质衍生物制备液330mL，在30℃下减压浓缩，将浓缩液进行冷冻干燥，即得岩藻黄质衍生物33mg，经结构鉴定确定该化合物为式(Ⅲ)。
实施例3岩藻黄质衍生物抗肿瘤细胞活性筛选
1)五种岩藻黄质衍生物5个浓度梯度配制
将分别将五种岩藻黄质衍生物粉末加DMSO配成20mg/mL作为母液，分装-20℃保存。用1640培养基将母液稀释成20μg/mL，并梯度稀释为10μg/mL、5μg/mL、2.5μg/mL、1.25μg/mL。
2)细胞培养分别按照相应细胞培养方法，培养H460、A549、MCF-7细胞；
3)铺板取正常培养的处于对数期的H460、A549、MCF-7细胞，用0.25％Typsin+0.02％EDTA消化，1500rpm离心5min，计数板下计数，铺96孔板，每孔加入5×103个细胞，放入培养箱中静置24h。分别加入不同浓度的岩藻黄质衍生物溶液。
4)CCK8检测细胞活力不同浓度岩藻黄醇溶液作用不同时间点后，吸走培养基，每孔加入含10μL CCK8的1640检测液100μL，设置空白对照孔，37℃避光反应2h，450nm处读取各孔OD值。
表1岩藻黄质衍生物对H460、A549、MCF-7的IC50值

Claims (10)

1.岩藻黄质衍生物或其盐，其特征在于，结构如下式(Ⅰ)-式(Ⅴ)所示：
2.一种药物组合物，其特征在于，包含权利要求1所述的岩藻黄质衍生物或其盐作为活性成分，以及可药用辅料。
3.如权利要求2所述的药物组合物，剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、散剂、口服液。
4.如权利要求1所述的岩藻黄质衍生物或其盐在制备治疗癌症的药物中的应用。
5.如权利要求4所述的应用，其中所述的癌症包括恶性黑色素瘤Ps、胰腺癌、甲状腺未分化癌、转移性骨恶性肿瘤、白血病、淋巴癌、骨瘤、软骨肉瘤、***癌、食道癌、胃癌、肝癌、胆囊癌、直肠癌、大肠癌、结肠癌、肺癌、鼻咽癌、神经***癌、乳腺癌、卵巢癌、***、子宫癌。
6.权利要求1所述的岩藻黄质衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)、以岩藻黄质或者含岩藻黄质的提取物为原料；
2)、将原料用溶剂溶解,加入一定比例还原剂还原反应得含有岩藻黄质衍生物的反应液；
3)、将反应液浓缩至干，采用硅胶柱色谱进行初步分离，得到含不同岩藻黄质衍生物的组分；
4)、将各部分分离液浓缩至干，加入流动相溶解，采用半制备/制备型液相色谱分离纯化得到制备液相纯化液；
5)将各部分制备液相纯化液分别浓缩，后将浓缩液进行干燥，得到岩藻黄质衍生物各组分,进行结构解析,确定化合物分别为:式(Ⅰ)、式(Ⅱ)、式(Ⅲ)、式(Ⅳ)、式(Ⅴ)所示。
7.如权利要求6所述的岩藻黄质衍生物的制备方法，其特征在于步骤2)中所述的溶剂为有机溶剂，优选甲醇、乙醇、四氢呋喃。
8.如权利要求6所述的岩藻黄质衍生物的制备方法，其特征在于步骤2)中所述原料与还原剂的重量比为50：1至1：1。
9.如权利要求6所述的岩藻黄质衍生物的制备方法，其特征在于步骤2)中所述的还原剂为硼氢化钠、氢化铝锂、氯化亚锡、草酸、硼氢化钾、硫酸亚铁、亚硫酸钠等的一种或者几种组合。
10.如权利要求6所述的岩藻黄质衍生物的制备方法，其特征在于步骤2)中所述的反应温度为20-50℃，反应时间为0.5-48h。
CN201710378531.8A 2017-05-25 2017-05-25 岩藻黄质衍生物及其制备方法和应用 Active CN107011170B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710378531.8A CN107011170B (zh) 2017-05-25 2017-05-25 岩藻黄质衍生物及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710378531.8A CN107011170B (zh) 2017-05-25 2017-05-25 岩藻黄质衍生物及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN107011170A true CN107011170A (zh) 2017-08-04
CN107011170B CN107011170B (zh) 2020-05-01

Family

ID=59452506

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710378531.8A Active CN107011170B (zh) 2017-05-25 2017-05-25 岩藻黄质衍生物及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN107011170B (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109876079A (zh) * 2019-04-24 2019-06-14 上海市皮肤病医院 海藻玉壶汤及其活性成分岩藻黄质在制备治疗肝癌的药物中的应用
CN110092766A (zh) * 2019-04-18 2019-08-06 自然资源部第三海洋研究所 具有抗炎作用的岩藻黄质衍生物及其制备方法
CN112804996A (zh) * 2019-03-05 2021-05-14 加特治疗有限公司 类胡萝卜素在衰老相关疾病的治疗中的用途

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
K.BERNARD 等: "Absolute configuration of fucoxanthin", 《TETRAHEDRON LETTERS》 *
王中奇: "《抗肿瘤中药临床应用手册》", 30 June 2013, 中国中医药出版社 *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112804996A (zh) * 2019-03-05 2021-05-14 加特治疗有限公司 类胡萝卜素在衰老相关疾病的治疗中的用途
CN110092766A (zh) * 2019-04-18 2019-08-06 自然资源部第三海洋研究所 具有抗炎作用的岩藻黄质衍生物及其制备方法
CN109876079A (zh) * 2019-04-24 2019-06-14 上海市皮肤病医院 海藻玉壶汤及其活性成分岩藻黄质在制备治疗肝癌的药物中的应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN107011170B (zh) 2020-05-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN109897077B (zh) 马齿苋中化合物Oleraciamide E及其提取分离方法与应用
CN106946766A (zh) 马齿苋中生物碱化合物及其提取分离方法
CN112094176B (zh) 一种从山橿中提取的二苯乙烯类化合物及其制备方法与应用
CN107011170A (zh) 岩藻黄质衍生物及其制备方法和应用
US9453041B2 (en) Method for preparing albiflorin and paeoniflorin
CN106008445A (zh) 一类黄酮并木脂素化合物及其提取方法
CN106279305B (zh) 马齿苋中酰胺类生物碱化合物及其提取分离方法
Liu et al. Preparative isolation and purification of acetophenones from the Chinese medicinal plant Cynanchum bungei Decne. by high-speed counter-current chromatography
CN105837506B (zh) 毛序准噶尔乌头中二萜类生物碱的制备方法和用途
CN105503810B (zh) 一种具有醛基的新萜类化合物及其制备方法和应用
CN102389456A (zh) 一种提取蓝萼香茶菜总二萜或蓝萼甲素的方法
CN107325069B (zh) 一种倍半萜类化合物的提取方法
CN101940615A (zh) 尾叶香茶菜总二萜的制备新方法
CN102718827B (zh) 一种分离和纯化人参皂苷Rb3的方法
CN107043383B (zh) 阿朴啡生物碱Illigerine A及其制备方法和应用
CN101830997B (zh) 一种东北铁线莲三萜皂苷对照品的制备方法
CN107074798B (zh) 红景天中提取草质素的方法
CN109824685A (zh) 马齿苋中化合物oleracone G及其提取分离方法与应用
CN110092766B (zh) 具有抗炎作用的岩藻黄质衍生物及其制备方法
CN104557824B (zh) 荸荠皮提取金鱼草素的方法
CN112480203B (zh) 一种醉茄内酯类化合物及其制备方法和应用
CN106188178A (zh) 一种制备原薯蓣皂苷的方法
Pan et al. An efficient high‐speed counter‐current chromatography method for the preparative separation of sesquiterpenoids from the rhizomes of Cyperus rotundus L. combined with evaluation of the anti‐inflammation activity in vitro and molecular docking
CN113620834B (zh) 一种薤白药材提取物、提取方法及制备方法和应用
CN104861035A (zh) 一种制备原薯蓣皂苷的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant