CN106942288B - 一种具有杀菌消毒作用的中药挥发油组合物以及空气杀菌消毒剂 - Google Patents

一种具有杀菌消毒作用的中药挥发油组合物以及空气杀菌消毒剂 Download PDF

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Abstract

本发明涉及化工技术领域，具体公开了一种具有杀菌消毒作用的中药挥发油组合物以及空气杀菌消毒剂。所述中药挥发油组合物包含苍术挥发油和艾叶挥发油；所述的苍术挥发油和艾叶挥发油的质量比为1~3:1~3。所述空气杀菌消毒剂包含所述的中药挥发油组合物的质量百分比为0.1~20%。通过本发明所述方法制备得到的苍术挥发油和艾叶挥发油具有非常好的抗菌消毒作用；尤其是将其二者混合后能够产生协同抗菌消毒作用；使用二者天然成分为原料配制空气杀菌消毒剂效果显著且不会对人体产生危害。

Description

一种具有杀菌消毒作用的中药挥发油组合物以及空气杀菌消 毒剂
技术领域
本发明涉及化工技术领域，具体涉及一种具有杀菌消毒作用的中药挥发油组合物以及空气杀菌消毒剂。
背景技术
目前国内常用的空气消毒方法有化学试剂法，如过氧乙酸、过氧化氢、甲醛、84消毒液、戊二醛等，以及紫外线照射、臭氧发生器等物理方法。这些方法虽然能够杀灭致病微生物，作用迅速，有效浓度低，但各有一定的缺陷，如毒性、刺激性、金属腐蚀性、持续效果差；许多本身又构成污染物，不同程度地影响人体健康，不适合有人环境；消毒时所有人员必须离场，操作***要有防护措施；消毒后异味不能很快消除，长期使用会对人体有蓄积中毒的危险等。
经空气传播致病菌所引发的传染性疾病属中医“温病”范畴，治疗药物以清热解毒和芳香化湿两类中药为主。而苍术和艾叶属芳香化湿类中药。现代研究表明，两种中药均有较强的体外抗菌作用，对环境及人体皮肤黏膜消毒或者清洁卫生具有广泛的使用价值。以苍术和艾叶为原料开发空气杀菌消毒剂目前尚无文献报道。
苍术现载入《中国药典》2015年版一部，为菊科植物茅苍术Atractylodes Lancea(Thunb.) DC.或北苍术Atractylodes chinensis (DC.) Koidz.的干燥根茎。具有燥湿健脾，祛风散寒、明目的功效。研究表明，苍术提取液对金黄色葡萄球菌的抑菌作用较明显，对白色念珠菌和大肠杆菌的抑菌作用次之。艾叶现载入《中国药典》2015年版一部，为菊科植物艾Artemisia argyi Levl. et Van. var. argyi的干燥叶。具有散寒止痛，温经止血的功效。研究表明，艾叶挥发油体外对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌具有抑菌作用，其抑菌作用优于或等同于红霉素。以苍术和艾叶为原料，利用中药现代化技术手段开发出其中的抗菌成分，然后应用于空气杀菌消毒剂中，具有广阔的市场前景。
发明内容
本发明为了克服现有技术中天然活性来源的空气杀菌消毒剂种类稀少的问题，提供一种具有杀菌消毒作用的中药挥发油组合物以及包含该组合物的空气杀菌消毒剂。
本发明所要解决的上述技术问题，通过以下技术方案予以实现：
一种具有杀菌消毒作用的中药挥发油组合物，包含苍术挥发油和艾叶挥发油；所述的苍术挥发油和艾叶挥发油的质量比为1~3:1~3。
发明人经大量实验表明，将苍术挥发油和艾叶挥发油混合后能产生协同的抗菌消毒作用。
优选地，所述的苍术挥发油和艾叶挥发油的质量比为2:1。
优选地，所述的苍术挥发油为从中药茅苍术或北苍术中提取的挥发油。
优选地，所述的苍术挥发油通过包含如下步骤的方法制备得到：
（1）将中药茅苍术或北苍术粉碎，然后使用超临界二氧化碳萃取方法萃取得茅苍术或北苍术超临界二氧化碳萃取物；所述的超临界二氧化碳萃取方法的具体条件为：萃取压力为40～60兆帕，萃取温度为50～60℃，流速为30~40升/小时，提取时间为1～3小时，同时加入乙醇作为提携剂；
（2）将步骤（1）得到的茅苍术或北苍术超临界二氧化碳萃取物上硅胶柱，用体积比为98:2~90:10的石油醚和丙酮组成的混合溶剂体系进行洗脱；收集洗脱液浓缩干燥即得所述的苍术挥发油。
最优选地，所述的苍术挥发油通过包含如下步骤的方法制备得到：
（1）将中药茅苍术或北苍术粉碎，然后使用超临界二氧化碳萃取方法萃取得茅苍术或北苍术超临界二氧化碳萃取物；所述的超临界二氧化碳萃取方法的具体条件为：萃取压力为50兆帕，萃取温度为55℃，流速为35升/小时，提取时间为2小时，同时加入乙醇作为提携剂；
（2）将步骤（1）得到的茅苍术或北苍术超临界二氧化碳萃取物上硅胶柱，用体积比为95:5的石油醚和丙酮组成的混合溶剂体系进行洗脱；收集洗脱液浓缩干燥即得所述的苍术挥发油。
优选地，所述的艾叶挥发油通过包含如下步骤的方法制备得到：
（1）将艾叶粉碎，然后使用超临界二氧化碳萃取方法萃取得艾叶超临界二氧化碳萃取物；所述的超临界二氧化碳萃取方法的具体条件为：萃取压力为20～30兆帕，萃取温度为30～40℃，流速为20~30升/小时，提取时间为1～3小时，同时加入乙醇作为提携剂；
（2）将步骤（1）得到的艾叶超临界二氧化碳萃取物上硅胶柱，用体积比为99:1~95:5的氯仿和甲醇组成的混合溶剂体系进行洗脱；收集洗脱液浓缩干燥即得所述的艾叶挥发油。
最优选地，所述的艾叶挥发油通过包含如下步骤的方法制备得到：
（1）将艾叶粉碎，然后使用超临界二氧化碳萃取方法萃取得艾叶超临界二氧化碳萃取物；所述的超临界二氧化碳萃取方法的具体条件为：萃取压力为25兆帕，萃取温度为35℃，流速为25升/小时，提取时间为2小时，同时加入乙醇作为提携剂；
（2）将步骤（1）得到的艾叶超临界二氧化碳萃取物上硅胶柱，用体积比为97:3的氯仿和甲醇组成的混合溶剂体系进行洗脱；收集洗脱液浓缩干燥即得所述的艾叶挥发油。
发明人经大量的实验研究表明在上述方法下制备得到的苍术挥发油和艾叶挥发油能够最大程度的富集苍术和艾叶中的抗菌消毒成分。
一种空气杀菌消毒剂，包含权利要求1~7任一项所述的中药挥发油组合物。
优选地，空气杀菌消毒剂中所述的中药挥发油组合物的质量百分比为0.1~20%。
优选地，所述的空气杀菌消毒剂为液体杀菌剂，还包含酒精。
有益效果：本发明提供了一种具有全新杀菌消毒作用的中药组合物，通过本发明所述方法制备得到的苍术挥发油和艾叶挥发油具有非常好的抗菌和抗流感病毒作用；尤其是将其二者混合后能够产生协同抗菌消毒作用；使用二者天然成分为原料配制空气杀菌消毒剂效果显著且不会对人体产生危害。
具体实施方式
以下结合具体实施例来进一步解释本发明，但实施例对本发明不做任何形式的限定。
实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。其中，所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1 原料挥发油的制备
1、茅苍术挥发油的制备
（1）将中药茅苍术粉碎，然后使用超临界二氧化碳萃取方法萃取得茅苍术超临界二氧化碳萃取物；所述的超临界二氧化碳萃取方法的具体条件为：萃取压力为50兆帕，萃取温度为55℃，流速为35升/小时，提取时间为2小时，同时加入乙醇作为提携剂；
（2）将步骤（1）得到的茅苍术超临界二氧化碳萃取物上硅胶柱，用体积比为95:5的石油醚和丙酮组成的混合溶剂体系进行洗脱；收集洗脱液浓缩干燥即得所述的茅苍术挥发油。
2、北苍术挥发油的制备
（1）将中药北苍术粉碎，然后使用超临界二氧化碳萃取方法萃取得北苍术超临界二氧化碳萃取物；所述的超临界二氧化碳萃取方法的具体条件为：萃取压力为50兆帕，萃取温度为55℃，流速为35升/小时，提取时间为2小时，同时加入乙醇作为提携剂；
（2）将步骤（1）得到的北苍术超临界二氧化碳萃取物上硅胶柱，用体积比为95:5的石油醚和丙酮组成的混合溶剂体系进行洗脱；收集洗脱液浓缩干燥即得所述的北苍术挥发油。
3、艾叶挥发油的制备
（1）将艾叶粉碎，然后使用超临界二氧化碳萃取方法萃取得艾叶超临界二氧化碳萃取物；所述的超临界二氧化碳萃取方法的具体条件为：萃取压力为25兆帕，萃取温度为35℃，流速为25升/小时，提取时间为2小时，同时加入乙醇作为提携剂；
（2）将步骤（1）得到的艾叶超临界二氧化碳萃取物上硅胶柱，用体积比为97:3的氯仿和甲醇组成的混合溶剂体系进行洗脱；收集洗脱液浓缩干燥即得所述的艾叶挥发油。
实施例2 本发明挥发油抑菌实验
待测样品：茅苍术挥发油、北苍术挥发油、艾叶挥发油、茅苍术挥发油：艾叶挥发油=2:1、茅苍术挥发油：艾叶挥发油=1:1、茅苍术挥发油：艾叶挥发油=1:3、北苍术挥发油：艾叶挥发油=2:1、乳酸诺氟沙星。上述比例为质量比。
在无菌条件下在培养基中加入0.2mL浓度为1×107个/mL的菌液（具体菌种见表1），用灭菌的L型涂抹棒涂抹均匀，在室温下干燥5min，用无菌镊子将牛津杯放入培养皿中，然后在牛津杯中加入200μL浓度为1g/mL的待测样品溶液
，将培养皿放入培养箱中，在37℃中培养24h，测量抑菌圈圈直径。测试效果见表1所示。
表1 本发明提取抑菌实验结果(单位mm)
白葡萄球菌 结核杆菌 肺炎球菌 大肠杆菌
茅苍术挥发油 28.43±1.15 25.33±1.78 21.11±1.12 20.01±1.25
北苍术挥发油 27.12±1.21 26.12±1.82 22.03±1.20 20.75±1.33
艾叶挥发油 29.01±1.30 26.82±1.94 22.81±1.25 21.12±1.45
茅苍术挥发油：艾叶挥发油=2:1 14.43±0.87 11.33±1.01 8.14±0.67 9.44±0.86
茅苍术挥发油：艾叶挥发油=1:1 16.26±0.93 12.16±1.12 8.87±0.72 9.75±1.03
茅苍术挥发油：艾叶挥发油=1:3 17.12±0.99 13.44±1.21 9.02±0.86 10.24±1.12
北苍术挥发油：艾叶挥发油=2:1 15.28±0.88 11.12±1.09 8.34±0.71 9.48±0.97
乳酸诺氟沙星 29.12±1.22 26.33±2.43 22.34±1.46 21.17±1.52
从表1数据体外抗菌数据可以看出，按本发明所述方法制备得到的茅苍术挥发油、北苍术挥发油和艾叶挥发油具有非常好的抗菌效果，其对白葡萄球菌、结核杆菌、肺炎球菌和大肠杆菌的抑菌效果与阳性对照药乳酸诺氟沙星相当。这说明将茅苍术、北苍术和艾叶在本发明所述方法参数下先进行二氧化碳超临界萃取再进行硅胶柱层析富集能够得到具有非常优异抗菌效果的有效成分。
此外，从表1数据中可以看出，茅苍术挥发油或北苍术挥发油和艾叶挥发油组合后的到的组合物的抗菌效果进一步加强，表1数据显示，茅苍术挥发油或北苍术挥发油和艾叶挥发油组合后的抗菌作用都远远强于单独一种挥发油的抗菌作用，这说明茅苍术挥发油或北苍术挥发油和艾叶挥发油组合后再抗菌作用上发生了协同作用，从而进一步提高了抗菌效果。其中，从表1数据中还可以看出将茅苍术挥发油或北苍术挥发油与艾叶挥发油以质量比2:1组合后的协同效果更明显。
实施例3 本发明挥发油抗甲型流感病毒活性测试
待测样品：茅苍术挥发油、北苍术挥发油、艾叶挥发油、茅苍术挥发油：艾叶挥发油=2:1、茅苍术挥发油：艾叶挥发油=1:1、茅苍术挥发油：艾叶挥发油=1:3、北苍术挥发油：艾叶挥发油=2:1、利巴韦林。上述比例为质量比。
取MDCK细胞生长至单层的96孔细胞培养板，弃去上清液，用PBS洗两遍，每孔分别加入用MEM二倍稀释的药液与病毒液100 µL，另外设细胞对照组、病毒对照组，置于37℃、饱和湿度、5% CO2培养箱中孵育。72 h后，0.5 mM WST-1溶液加入到每孔中(WST-1的浓度为0.25 mM)。4小时后，用酶标仪在450 nm测吸光度。IC50计算方式如下：细胞存活率=（细胞对照孔OD值－加药孔OD值）×100%；以药物浓度为X轴，细胞存活率为Y轴，在Origin作图，求出50%细胞存活率对应的浓度则为IC50。将待测样品进行抗甲型流感病毒活性测试，结果见表2。
表2. 本发明挥发油抗甲型流感病毒活性测试结果
H1N1病毒IC<sub>50</sub>（μg/mL）
茅苍术挥发油 45.3±9.6
北苍术挥发油 46.3±9.8
艾叶挥发油 48.2±10.3
茅苍术挥发油：艾叶挥发油=2:1 24.1±7.1
茅苍术挥发油：艾叶挥发油=1:1 25.2±7.5
茅苍术挥发油：艾叶挥发油=1:3 25.9±7.9
北苍术挥发油：艾叶挥发油=2:1 24.5±7.8
利巴韦林 42.5±9.0
从表2数据体外抗H1N1流感病毒数据可以看出，按本发明所述方法制备得到的茅苍术挥发油、北苍术挥发油和艾叶挥发油具有非常好的抗H1N1流感病毒效果，其抗H1N1流感病毒的效果与阳性对照药利巴韦林相当。此外，从表2数据中可以看出，茅苍术挥发油或北苍术挥发油和艾叶挥发油组合后的到的组合物的抗H1N1流感病毒效果进一步加强，表2数据显示，茅苍术挥发油或北苍术挥发油和艾叶挥发油组合后的抗H1N1流感病毒作用都远远强于单独一种挥发油的抗H1N1流感病毒作用，这说明茅苍术挥发油或北苍术挥发油和艾叶挥发油组合后再抗H1N1流感病毒作用上发生了协同作用，从而进一步提高了抗H1N1流感病毒效果。
实施例4 一种空气杀菌消毒剂
组成：中药挥发油占10重量%，余量为乙醇；所述的中药挥发油由实施例1制备得到的茅苍术挥发油和艾叶挥发油按质量比2:1混合而成。
制备方法：将中药挥发油溶于乙醇中即得所述的空气杀菌消毒剂。
实施例5 一种空气杀菌消毒剂
组成：中药挥发油占10重量%，余量为乙醇；所述的中药挥发油由实施例1制备得到的北苍术挥发油和艾叶挥发油按质量比2:1混合而成。
制备方法：将中药挥发油溶于乙醇中即得所述的空气杀菌消毒剂。
实施例6 一种空气杀菌消毒剂
组成：中药挥发油占5重量%，余量为乙醇；所述的中药挥发油由实施例1制备得到的北苍术挥发油和艾叶挥发油按质量比2:1混合而成。
制备方法：将中药挥发油溶于乙醇中即得所述的空气杀菌消毒剂。
实施例7 一种空气杀菌消毒剂
组成：中药挥发油占1重量%，余量为乙醇；所述的中药挥发油由实施例1制备得到的北苍术挥发油和艾叶挥发油按质量比2:1混合而成。
制备方法：将中药挥发油溶于乙醇中即得所述的空气杀菌消毒剂。
实施例8 一种空气杀菌消毒剂
组成：中药挥发油占20重量%，余量为乙醇；所述的中药挥发油由实施例1制备得到的北苍术挥发油和艾叶挥发油按质量比2:1混合而成。
制备方法：将中药挥发油溶于乙醇中即得所述的空气杀菌消毒剂。
实施例9 空气杀菌消毒剂杀菌效果测试
选择25m2的密闭房间，在室内无人情况下进行杀菌效果观察。
采样：（1）消毒前采样：用六级筛孔空气撞击式采样器进行空气中自然菌采样，作为消毒前样本。（2）消毒后采样：取实施例6制备的空气杀菌消毒剂，对密闭房间进行消毒，喷雾量均为1ml/m3，15min后采样，作为消毒后样本。
采样平板直接放入37℃培养箱中培养48h，计数生长菌落数以及消毒率。消毒效率＝(消毒前样本菌数-消毒后样本菌数)/消毒前样本菌数×100％。
结果显示：消毒前样本菌数为24615cfu/m3，消毒后的样本菌数为48cfu/m3，消毒率为99.80％，上述结果表明，本发明制备的空气杀菌消毒剂具有非常好的除菌效果。

Claims (8)

1.一种具有杀菌消毒作用的中药挥发油组合物，其特征在于，包含苍术挥发油和艾叶挥发油；所述的苍术挥发油和艾叶挥发油的质量比为1~3:1~3；
所述的苍术挥发油为从中药茅苍术或北苍术中提取的挥发油；
所述的苍术挥发油通过包含如下步骤的方法制备得到：
（1）将中药茅苍术或北苍术粉碎，然后使用超临界二氧化碳萃取方法萃取得茅苍术或北苍术超临界二氧化碳萃取物；所述的超临界二氧化碳萃取方法的具体条件为：萃取压力为40～60兆帕，萃取温度为50～60℃，流速为30~40升/小时，提取时间为1～3小时，同时加入乙醇作为提携剂；
（2）将步骤（1）得到的茅苍术或北苍术超临界二氧化碳萃取物上硅胶柱，用体积比为98:2~90:10的石油醚和丙酮组成的混合溶剂体系进行洗脱；收集洗脱液浓缩干燥即得所述的苍术挥发油。
2.根据权利要求1所述的中药挥发油组合物，其特征在于，所述的苍术挥发油和艾叶挥发油的质量比为2:1。
3.根据权利要求1所述的中药挥发油组合物，其特征在于，所述的苍术挥发油通过包含如下步骤的方法制备得到：
（1）将中药茅苍术或北苍术粉碎，然后使用超临界二氧化碳萃取方法萃取得茅苍术或北苍术超临界二氧化碳萃取物；所述的超临界二氧化碳萃取方法的具体条件为：萃取压力为50兆帕，萃取温度为55℃，流速为35升/小时，提取时间为2小时，同时加入乙醇作为提携剂；
（2）将步骤（1）得到的茅苍术或北苍术超临界二氧化碳萃取物上硅胶柱，用体积比为95:5的石油醚和丙酮组成的混合溶剂体系进行洗脱；收集洗脱液浓缩干燥即得所述的苍术挥发油。
4.根据权利要求1所述的中药挥发油组合物，其特征在于，所述的艾叶挥发油通过包含如下步骤的方法制备得到：
（1）将艾叶粉碎，然后使用超临界二氧化碳萃取方法萃取得艾叶超临界二氧化碳萃取物；所述的超临界二氧化碳萃取方法的具体条件为：萃取压力为20～30兆帕，萃取温度为30～40℃，流速为20~30升/小时，提取时间为1～3小时，同时加入乙醇作为提携剂；
（2）将步骤（1）得到的艾叶超临界二氧化碳萃取物上硅胶柱，用体积比为99:1~95:5的氯仿和甲醇组成的混合溶剂体系进行洗脱；收集洗脱液浓缩干燥即得所述的艾叶挥发油。
5.根据权利要求4所述的中药挥发油组合物，其特征在于，所述的艾叶挥发油通过包含如下步骤的方法制备得到：
（1）将艾叶粉碎，然后使用超临界二氧化碳萃取方法萃取得艾叶超临界二氧化碳萃取物；所述的超临界二氧化碳萃取方法的具体条件为：萃取压力为25兆帕，萃取温度为35℃，流速为25升/小时，提取时间为2小时，同时加入乙醇作为提携剂；
（2）将步骤（1）得到的艾叶超临界二氧化碳萃取物上硅胶柱，用体积比为97:3的氯仿和甲醇组成的混合溶剂体系进行洗脱；收集洗脱液浓缩干燥即得所述的艾叶挥发油。
6.一种空气杀菌消毒剂，其特征在于，包含权利要求1~5任一项所述的中药挥发油组合物。
7.根据权利要求6所述的空气杀菌消毒剂，其特征在于，空气杀菌消毒剂中所述的中药挥发油组合物的质量百分比为0.1~20%。
8.根据权利要求7所述的空气杀菌消毒剂，其特征在于，所述的空气杀菌消毒剂为液体杀菌剂，还包含酒精。
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