CN106923334A - 一种虾青素软胶囊配方及其制备方法 - Google Patents

一种虾青素软胶囊配方及其制备方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种虾青素软胶囊配方,其胶囊内容物配方由如下原料组成：虾青素纳米乳液110‑130g；不饱和脂肪酸370‑390g；其囊皮配方按照重量百分比有如下原料组成：甘油43‑47％；明胶17‑21％；纯化水34‑38％其制备方法为：制备虾青素纳米：将雨生红球藻通过化学工艺提取及乳化后得到虾青素纳米；将得到的虾青素纳米和不饱和脂肪酸混合均匀，得到溶液I；将明胶、甘油、纯化水按照比例混合，并经过溶胶和过滤工艺处理得到溶液II；将上述溶液I和溶液II经过压丸工艺处理，再依次经过定型、洗丸、干燥、选丸、包装、检验工艺之后入库，以虾青素纳米乳液、红花籽油、明胶、甘油、纯化水为主要原料制成的保健食品，具有增强免疫力和抗氧化的保健功能。

Description

一种虾青素软胶囊配方及其制备方法
技术领域
本发明涉及虾青素软胶囊制备技术领域，具体为一种虾青素软胶囊配方及其制备方法。
背景技术
虾青素又名虾黄质、龙虾壳色素，是一种类胡萝卜素，也是类胡萝卜素合成的最高级别产物，呈深粉红色，化学结构类似于β-胡萝卜素，而β-胡萝卜素、叶黄素、角黄素、番茄红素等都是类胡萝卜素合成的中间产物，因此在自然界，虾青素具有最强的抗氧化性。广泛存在于生物界，特别是虾、蟹、鱼、藻体、酵母和鸟类的羽毛中含量较高，是海洋生物体内主要的类胡萝卜素之一。虾青素世界上最强的抗氧化剂之一，有效清除细胞内的氧自由基，增强细胞再生能力，维持机体平衡和减少衰老细胞的堆积，由内而外保护细胞和DNA健康，从而保护皮肤健康，促进毛发生长，抗衰老、缓解运动疲劳、增强活力。自2008年以来，国内外大量研究证实虾青素具有较强的抗氧化活性，在提高免疫力，预防肿瘤、心血管疾病、糖尿病等慢性疾病的发生发展，延缓衰老等方面具有积极的促进作用，设计了一种虾青素软胶囊配方及其制作方法具有一定的意义。
发明内容
针对以上问题，本发明提供了一种虾青素软胶囊配方及其制备方法，以虾青素纳米乳液、红花籽油、明胶、甘油、纯化水为主要原料制成的保健食品，具有增强免疫力和抗氧化的保健功能。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种虾青素软胶囊配方，
其胶囊内容物配方由如下原料组成：
虾青素纳米乳液 110-130g；
不饱和脂肪酸 370-390g；
其囊皮配方按照重量百分比有如下原料组成：
甘油 43-47％；
明胶 17-21％；
纯化水 34-38％。
作为本发明一种优选的方案，其胶囊内容物配方由如下原料组成：
虾青素纳米乳液 120g；
不饱和脂肪酸 380g；
其囊皮配方按照重量百分比有如下原料组成：
甘油 45％；
明胶 19％；
纯化水 36％。
作为本发明一种优选的方案，所述虾青素纳米乳液采用虾青素纳米乳液。
作为本发明一种优选的方案，所述不饱和脂肪酸采用富含亚油酸的红花籽油、棕榈油等。
另外本发明还设计了一种虾青素软胶囊的制备方法，包括如下步骤：
(1)制备虾青素纳米：将雨生红球藻通过化学工艺提取及乳化后得到虾青素纳米；
(2)将得到的虾青素纳米和不饱和脂肪酸混合均匀，得到溶液I；
(3)将明胶、甘油、纯化水按照比例混合，并经过溶胶和过滤工艺处理得到溶液II；
(4)将上述溶液I和溶液II经过压丸工艺处理，再依次经过定型、洗丸、干燥、选丸、包装、检验工艺之后入库。
作为本发明一种优选的方案，所述步骤(4)中包装工艺分为内包装和外包装，并且先进行内包装工艺，再进行外包装工艺。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明通过橡胶材料的设计，使得设备在使用的时候，可以很好的自动恢复到正常的位置，在跨栏训练中能够快速的回正，减少了跨栏倒地扶起来浪费的时间与精力，很好的保护了跨栏训练者的安全，能够调节适应不同的训练要求，值得推广。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
一种虾青素软胶囊配方，其胶囊内容物配方由如下原料组成：
虾青素纳米乳液 110g；
不饱和脂肪酸 370g；
其囊皮配方按照重量百分比有如下原料组成：
甘油 43％；
明胶 17％；
纯化水 34％。
所述虾青素纳米乳液采用虾青素纳米乳液；所述不饱和脂肪酸采用富含亚油酸的红花籽油、棕榈油等。
其制备方法包括如下步骤：
(1)制备虾青素纳米：将雨生红球藻通过化学工艺提取及乳化后得到虾青素纳米；
(2)将得到的虾青素纳米和不饱和脂肪酸混合均匀，得到溶液I；
(3)将明胶、甘油、纯化水按照比例混合，并经过溶胶和过滤工艺处理得到溶液II；
(4)将上述溶液I和溶液II经过压丸工艺处理，再依次经过定型、洗丸、干燥、选丸、包装、检验工艺之后入库。
所述步骤(4)中包装工艺分为内包装和外包装，并且先进行内包装工艺，再进行外包装工艺。
实施例2：
与实施例1不同之处在于：
一种虾青素软胶囊配方，其胶囊内容物配方由如下原料组成：
虾青素纳米乳液 120g；
不饱和脂肪酸 380g；
其囊皮配方按照重量百分比有如下原料组成：
甘油 45％；
明胶 19％；
纯化水 36％。
实施例3：
与实施例1不同之处在于：
一种虾青素软胶囊配方，其胶囊内容物配方由如下原料组成：
虾青素纳米乳液 130g；
不饱和脂肪酸 390g；
其囊皮配方按照重量百分比有如下原料组成：
甘油 47％；
明胶 21％；
纯化水 38％。
A、虾青素软胶囊毒理学安全性评价试验：
1材料和方法
1.1样品：由W公司送检的Q品牌虾青素软胶囊，规格：0.5g/粒，产品批号：SZ20140101，置阴凉干燥处保存。人口服推荐用量为每人(成人)每日2次，每次1粒，成人体重按60kg计算，折合剂量为16.7mg/kg BW。取胶囊内容物进行试验，测得内容物的比重为0.9。
1.2实验动物及环境：SPF级健康昆明种小鼠，由广西医科大学实验动物中心繁殖，实验动物生产许可证号：SCXK(桂)2009-0002，实验动物质量合格证号：0006676； SPF级健康SD种大鼠，由广东省医学实验动物中心繁殖，实验动物生产许可证号：SCXK (粤)2013-0002，实验动物质量合格证号：44007200011650。动物实验室为屏障***，使用许可证号：SYXK(桂)2011-0005。动物实验室温度：22～25℃，相对湿度：55～ 70％。
1.3小鼠急性经口毒性试验：采用最大耐受剂量(MTD)试验法，选体重18～22g 的昆明种小鼠20只，雌雄各半。试验前动物禁食16小时，不限饮水。按0.4mL/20g BW的体积给动物灌胃样品一次，按0.9比重计算，剂量为18000mg/kg BW。灌胃后观察、记录动物的中毒表现。每周称重一次，观察两周时间，试验结束解剖动物进行大体观察。按毒性分级标准评价受试物的急性毒性。
1.4Ames试验：采用经鉴定符合要求的鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型TA97a、TA98、TA100、TA102四种菌株进行试验。称取5.0g样品，加二甲基亚砜至100mL，混匀，配成50mg/mL浓度溶液，再依次5倍稀释(取10mL加二甲基亚砜至50mL)，分别配成10、2、0.4、0.08mg/mL浓度溶液，受试溶液经高压灭菌(0.103Mpa 20min) 处理后供试验用。以多氯联苯诱导的大鼠肝微粒体酶(S-9)作为体外代谢活化***。采用平板掺入法，在保温的顶层培养基中依次加入0.1mL试验菌株增菌液、0.1mL受试物溶液和0.5mL S-9混合液(当需要代谢活化时)，混匀后倒入底层培养基平板上。 5个试验剂量分别为5000、1000、200、40、8μg/皿，同时设自发回变对照、溶剂对照和阳性突变剂对照。自发回变对照除不加样品外，其余条件与样品组相同。溶剂对照用二甲基亚砜替代样品，其余条件与样品组相同。每个剂量组的各种菌株均做3个平行皿。在37℃下培养48小时，计数每皿的菌落数。整套试验在相同条件下重复做两次。如果受试物的回变菌落数增加超过自发回变菌落数的2倍以上，并具有剂量-反应关系者，即为诱变试验阳性。
1.5小鼠骨髓细胞微核试验：采用间隔24小时两次经口灌胃法进行试验。选体重为25～30g的昆明种小鼠50只，随机分成5组，每组10只，雌雄各半。试验组 3个剂量分别设10000、5000、2500mg/kg BW，以玉米油为阴性对照，40mg/kg BW剂量的环磷酰胺(cp)作阳性对照。分别称取40.0、20.0、10.0g样品，各加玉米油至 80mL，混匀、配成500、250、125mg/mL浓度溶液，然后按0.4mL/20g BW的体积给动物灌胃，阴性对照组灌给等体积的玉米油，阳性对照组灌给等体积的2mg/mL环磷酰胺溶液。第二次给样后6小时颈椎脱臼处死动物，取胸骨骨髓用小牛血清稀释涂片，甲醇固定，Giemsa染色。在光学显微镜下，每只动物计数1000个嗜多染红细胞(PCE)，观察含微核的PCE数，微核率以含微核的PCE千分率计；同时计数200个嗜多染红细胞，计算嗜多染红细胞与成熟红细胞的比值(PCE/NCE)。应用SPSS统计软件中的泊松分布均数比较法统计处理。如试验组的微核率比阴性对照组增高，并有明显的剂量-反应关系和统计学意义，即为阳性结果。
1.6小鼠***畸形试验：选体重为25～35g的昆明种雄性小鼠50只，随机分成 5组，每组10只。试验组3个剂量分别设10000、5000、2500mg/kg BW，以玉米油为阴性对照，40mg/kg BW剂量的环磷酰胺(cp)作阳性对照。分别称取40.0、20.0、 10.0g样品，各加玉米油至80mL，混匀、配成500、250、125mg/mL浓度溶液，然后按0.4mL/20g BW的体积给动物灌胃，阴性对照组灌给等体积的玉米油，阳性对照组灌给等体积的2mg/mL环磷酰胺溶液。每天灌胃一次，连续5天。末次给样后第30 天处死动物，取副睾的***涂片，甲醇固定，伊红染色。在光学显微镜下，每只动物计数完整***1000个，计算***畸形率。应用SPSS统计软件中的Wilcoxon秩和检验统计处理。如试验组的***畸形率比阴性对照组增高，经统计有显著意义，并有剂量反应关系，即为阳性结果。
1.7大鼠30天喂养试验
1.7.1剂量选择与受试物给予方式：选SD种大鼠80只，雌、雄性各半，体重为 60～80g。将动物随机分为4组，即阴性对照组和3个试验组，每组20只，雌、雄各半。3个试验组剂量分别设为1670、835、418mg/kg BW，分别相当于人体推荐用量100、50、25倍。分别称取33.40、16.70、8.35g样品，各加玉米油至100mL，混匀，配成334.0、167.0、83.5mg/mL浓度溶液，按0.5mL/100g BW的体积给相应剂量组动物灌胃，阴性对照组灌给等量的玉米油，每天灌胃一次，连续灌胃30天。
1.7.2实验方法：实验期间所有动物给予普通饲料，单笼饲养，自由摄食饮水。每天观察动物的活动和生长情况，每周加食2次，记录给食量和剩食量，每周称一次体重，计算每周进食量和食物利用率。实验结束动物隔夜禁食(禁食16h，不限饮水)，然后称动物空腹体重，处死大鼠，采2份血样，一份血抗凝用血球计数仪检测Hb、 RBC、WBC及其分类、PLT等；另一份血不抗凝分离血清，用试剂盒和全自动生化分析仪检测血清AST、ALT、BUN、Cr、TC、TG、Glu、TP、Alb等项目。采血后解剖动物，进行大体观察，取肝脏、肾脏、脾脏和睾丸等脏器进行称重，计算脏/体比值，取肝脏、肾脏、脾脏、胃、十二指肠、睾丸和卵巢等脏器进行病理组织学检查。在对各剂量组动物作大体检查未发现明显病变和生化指标改变时，只进行高剂量组和对照组动物的主要脏器的组织病理学检查，如发现病变则对中、低剂量组相应器官及组织进行检查。
1.7.3实验数据统计：应用SPSS统计软件进行单因素方差分析。在统计分析时，先对数据进行方差齐性检验，若方差齐，采用单因素方差分析进行总体比较，发现差异再用Dunnett检验进行多个剂量组与对照组均数间的两两比较。若方差不齐则对数据进行适当的变量转换，满足方差齐性检验后，用转换后的数据进行统计；若转换数据仍未达到方差齐要求，改用秩和检验进行统计分析。
2结果
2.1急性经口毒性试验
表1 Q品牌虾青素软胶囊对小鼠的急性毒性试验结果
从表1可见，以18000mg/kg BW剂量的样品给予小鼠灌胃后，动物生长良好，未见体重受到影响。受试小鼠均未见有中毒症状，观察14天无动物死亡。试验结束解剖动物、大体观察，肝、肾、脾、心、肺、胃、肠等主要脏器均未见明显异常改变。结果表明，该样品对小鼠的急性经口毒性MTD大于18000mg/kg BW，急性经口毒性属无毒级。
2.2Ames试验
表2 Q品牌虾青素软胶囊第一次Ames试验结果
注：1、以上结果(菌落数)均为3个平皿的均值±标准差。
2、阳性对照：TA97a+S9、TA98+S9、TA100+S9采用2-氨基芴(剂量为10μg/皿)；TA98－S9采用柔毛霉素(剂量为6μg/皿)；TA97a－S9、TA102－S9采用敌克松(剂量为50μg/ 皿)；TA100－S9采用叠氮钠(剂量为1.5μg/皿)；TA102+S9采用1,8-二羟基蒽醌(剂量为 50μg/皿)。表3同。
从表2、表3可见，对TA97a、TA98、TA100、TA102四种试验菌株，无论是否加入S-9，样品各剂量组的回变菌落数均未超过自发回变菌落数的两倍，亦无剂量-反应关系，表明该受试物诱变试验结果为阴性。
注：以上结果(菌落数)均为3个平皿的均值±标准差。
表4芝墉堂牌天然虾青素软胶囊对小鼠的骨髓细胞微核发生率的影响
注：**与阴性对照组比较，P＜0.01；cp为环磷酰胺。
从表4可见，样品各剂量组小鼠的骨髓细胞微核率与阴性对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)，各剂量的PCE/NCE值均在正常值范围内，各剂量组PCE/NCE值均不少于阴性对照组的20％，与阴性对照组比较也无明显差异，而环磷酰胺阳性对照组的微核率与阴性对照组的差异有非常显著性(P＜0.01)，提示未见该样品对小鼠的骨髓细胞有损伤和抑制作用。
表5 Q品牌虾青素软胶囊对小鼠***畸形发生率的影响
注：**与阴性对照组比较，P＜0.01；cp为环磷酰胺。
从表5可见，样品对小鼠***畸形发生率未产生明显改变，样品各剂量组的***畸形率与阴性对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)，而环磷酰胺阳性对照组与阴性对照组的差异有非常显著性(P＜0.01)，提示该样品对雄性小鼠的***未产生畸变作用。
2.5大鼠30天喂养试验
2.5.1动物一般表现：实验期间，各组动物生长发育良好，未见动物有异常行为和中毒表现，各组动物均无死亡
2.5.2样品对大鼠体重及食物利用率的影响
结果见表6～表11，以1670、835、418mg/kg BW剂量的Q品牌虾青素软胶囊给大鼠灌胃30天，实验期间，样品各剂量组雌雄鼠每周的体重、增重量、每周进食量及总进食量、每周食物利用率及总食物利用率与对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)，表明该样品对大鼠的体重增长和食物利用率无明显影响。
表6 Q品牌虾青素软胶囊对大鼠体重的影响
注：表中各剂量组与阴性对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)。
表7 Q品牌虾青素软胶囊对大鼠第1周体重增长和食物利用率的影响
注：表中各剂量组与阴性对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)。
表8 Q品牌虾青素软胶囊对大鼠第2周体重增长和食物利用率的影响
注：表中各剂量组与阴性对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)。
表9 Q品牌虾青素软胶囊对大鼠第3周体重增长和食物利用率的影响
注：表中各剂量组与阴性对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)。
表10 Q品牌虾青素软胶囊对大鼠第4周体重增长和食物利用率的影响
注：第4周的天数为9天。表中各剂量组与阴性对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)。
表11 Q品牌虾青素软胶囊对大鼠总食物利用率的影响
注：表中各剂量组与阴性对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)。
2.5.3样品对大鼠血常规指标的影响
表12 Q品牌虾青素软胶囊30天喂养试验结束大鼠血常规指标检查结果
注：表中各剂量组与阴性对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)。
表13 Q品牌虾青素软胶囊30天喂养试验结束大鼠血常规指标检查结果
注：表中各剂量组与阴性对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)。
从表12、表13可见，以1670、835、418mg/kg BW剂量的Q品牌虾青素软胶囊给大鼠灌胃30天，样品各剂量组雌、雄性大鼠的血红蛋白、红细胞总数、白细胞总数及其分类、血小板数与对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)，表明该样品对大鼠的血常规指标无明显影响。
2.5.4样品对大鼠血液生化指标的影响
结果见表14、表15，以1670、835、418mg/kg BW剂量的Q品牌虾青素软胶囊给大鼠灌胃30天，样品各剂量组雌、雄性大鼠的血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶、尿素氮、肌酐、胆固醇、甘油三酯、总蛋白、白蛋白、血糖与对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)，表明该样品对大鼠的血液生化指标无明显影响。
表14 Q品牌虾青素软胶囊30天喂养试验结束大鼠血液生化指标检查结果
注：表中各剂量组与阴性对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)。
表15 Q品牌虾青素软胶囊30天喂养试验结束大鼠血液生化指标检查结果
注：表中各剂量组与阴性对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)。
2.5.5样品对大鼠脏器重量及脏器/体重比值的影响
结果见表16、表17，以1670、835、418mg/kg BW剂量的Q品牌虾青素软胶囊给大鼠灌胃30天，样品各剂量组大鼠的肝、肾、脾、雄鼠睾丸重量和肝/体、肾/ 体、脾/体、雄鼠睾/体比值与对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)，表明该样品对大鼠的脏器重量及脏器/体重比值无明显影响。
表16 Q品牌虾青素软胶囊对大鼠脏器重量的影响
注：表中各剂量组与阴性对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)。
表17 Q品牌虾青素软胶囊对大鼠脏器/体重比值的影响
注：表中各剂量组与阴性对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)。
2.5.6解剖大体观察及组织学检查结果
实验结束解剖动物，大体观察各组动物均未发现明显病变。故只选样品的高剂量组和阴性对照组动物的主要脏器进行组织病理切片检查，结果见表18～表24。结果显示，高剂量组有1只雄性和2只雌性、对照组有2只雄性和2只雌性大鼠的肝小叶组织可见轻度的肝细胞脂肪变性，高剂量组有1只雄性、对照组有1 只雄性和1只雌性大鼠的肝小叶可见肝细胞点状坏死，高剂量组和对照组均有1 只雄性和1只雌性大鼠的肝脏汇管区可见少量炎细胞浸润；高剂量组有1只雄性和1只雌性、对照组有1只雄性和2只雌性大鼠的肾脏皮质部间质可见少量炎细胞浸润。以上组织病变属动物的自发轻型病变，且两组动物的组织病变程度相似，故可以排除是样品所致，其他脏器组织未见病理组织学改变，表明该样品对大鼠的上述脏器组织无损害作用。
表18 Q品牌虾青素软胶囊30天喂养试验大鼠肝脏组织病理学检查结果
表19 Q品牌虾青素软胶囊30天喂养试验大鼠肾脏细织病理学检查结果
表20 Q品牌虾青素软胶囊30天喂养试验大鼠脾脏组织病理学检查结果
表21 Q品牌虾青素软胶囊30天喂养试验大鼠胃组织病理学检查结果
表22 Q品牌虾青素软胶囊30天喂养试验大鼠十二指肠组织病理学检查结果
表23 Q品牌虾青素软胶囊30天喂养试验大鼠雄鼠睾丸组织病理学检查结果
表24 Q品牌虾青素软胶囊30天喂养试验大鼠雌鼠卵巢组织病理学检查结果
3小结
以18000mg/kg BW剂量的样品给予小鼠灌胃后，未见动物有中毒症状和死亡，该样品对小鼠的急性经口毒性MTD大于18000mg/kg BW，急性经口毒性属无毒级。三项遗传毒性试验(Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠***畸形试验)结果均为阴性。30 天喂养试验，以1670、835、418mg/kg BW(分别相当于人体推荐用量100、50、25倍) 3个剂量的样品连续给大鼠灌胃30天，实验期间动物生长发育良好，各剂量组大鼠的体重、增重量、进食量、食物利用率、血常规指标、血液生化指标、脏器重量及脏器/体重比值等与对照组比较，均无显著性差异(P>0.05)；大体解剖观察和组织病理学检查未见与样品有关的异常改变。在受试剂量范围内未见该样品对大鼠各项观察指标产生毒副作用。
B、Q品牌虾青素软胶囊抗氧化功能动物实验报告
1材料和方法
1.1样品：由W公司送检的Q品牌虾青素软胶囊，规格：0.5g/粒，产品批号：SZ20140101，置阴凉干燥处保存。人口服推荐用量为每人(成人)每日2次，每次1粒，成人体重按60kg计算，折合剂量为16.7mg/kg BW。取胶囊内容物进行试验。
1.2实验动物及环境：选用广西医科大学实验动物中心繁殖的SPF级10月龄以上SD种雄性大鼠40只，体重591.1±26.6g，实验动物生产许可证号：SCXK(桂)2009-0002，实验动物质量合格证号：0006243。动物实验室为屏障***，使用许可证号：SYXK (桂)2011-0005。动物实验室温度：22～25℃，相对湿度：55～75％。
1.3剂量选择与受试物给予方式：根据样品的人体推荐量设334、167、84mg/kg BW(分别相当于人体推荐用量的20、10、5倍)3个剂量组，同时设一个阴性对照组，每组10只动物。分别取送检样品6.68、3.34、1.68g，各加玉米油至100mL，混匀，配成66.8、 33.4、16.8mg/mL浓度的溶液，采用经口方式，分别给予相应剂量组动物灌胃，灌胃体积为0.5mL/100g BW，阴性对照组给予等体积的玉米油，每天灌胃一次，连续灌胃30天。
1.4仪器与试剂
1.4.1仪器：日立KY2000型半自动生化分析仪、电子分析天平、低温离心机、恒温水浴箱、旋涡混匀器等。
1.4.2试剂：生理盐水，MDA、蛋白质羰基、SOD、GSH试剂盒(南京建成生物工程研究所提供)等。
1.5实验方法：依据国家食品药品监督管理局发布的国食药监保化[2012]107号《关于印发抗氧化功能评价方法等9个保健功能评价方法的通知》的附件1—抗氧化功能评价方法。受试老龄大鼠在SPF级动物实验室内喂养观察7天，未见异常后眼内眦取血测定血清丙二醛(MDA)含量。根据MDA含量将大鼠分层随机分成4个组，每组10 只，并适当调整，使各组的平均体重也尽可能的均衡。按0.5mL/100g BW的体积，分别给予各剂量组动物灌胃相应浓度的样品溶液，阴性对照组给予等体积的玉米油，每天灌胃一次，连续灌胃30天，然后处死动物，取血、肝组织进行观察指标测定。
1.5.1大鼠血清和肝组织匀浆液中LPO含量测定(以MDA含量计)。
1.5.2大鼠血清和肝组织匀浆液中蛋白质氧化产物(蛋白质羰基)含量测定。
1.5.3大鼠血清和肝组织匀浆液中抗氧化酶(SOD)活力测定。
1.5.4大鼠血清和肝组织匀浆液中抗氧化物质(GSH)含量测定。
1.6实验数据统计：实验数据用方差分析进行统计处理。
1.7结果判定：过氧化脂质含量、蛋白质羰基、抗氧化酶活性、抗氧化物质四项指标中三项指标阳性，可判定该受试样品抗氧化动物实验结果阳性。
2试验结果
2.1样品对大鼠体重的影响
试验前各组大鼠的体重无明显差异，试验过程及结束样品各剂量组的大鼠体重及增重量与阴性对照组比较，差异均无显著性(P>0.05)，表明该样品对老龄大鼠的体重无明显影响，见表1。
表1实验期间各组大鼠的体重变化
注：表中各时期各组大鼠的体重及增重量比较，差异均无显著性(P＞0.05)。
注：表中各时期各组大鼠的体重及增重量比较，差异均无显著性(P>0.05)。
2.2样品对大鼠血清及组织过氧化脂质(LPO)含量的影响
试验前各组动物的血清LPO含量较均衡，各组之间差异无显著性(P>0.05)。试验终末，样品各剂量组大鼠的血清和肝组织的过氧化脂质(LPO)含量均低于阴性对照组，但各剂量组与对照组比较，差异无显著性(P>0.05)，见表2，表明该样品对老龄大鼠的血清和组织过氧化脂质含量无明显的降低作用。
表2各组大鼠的血清和肝组织过氧化脂质(LPO以MDA计)含量
2.3样品对大鼠血清及组织蛋白质羰基含量的影响
表3各组大鼠的血清和肝组织蛋白质羰基含量
试验终末，样品各剂量组大鼠的血清和肝组织的蛋白质羰基含量均低于阴性对照组，其中高、中剂量组血清蛋白质羰基含量与阴性对照组的差异具有极显著性 (P＜0.01)，见表3，表明该样品具有降低老龄大鼠血清中蛋白质羰基含量的作用。
2.4样品对大鼠血清及组织中超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响
试验终末，样品各剂量组大鼠的血清和肝组织中SOD活力均高于阴性对照组，其中高剂量组血清和肝组织SOD活力与阴性对照组的差异有显著性(P＜0.01或 P＜0.05)，见表4，表明该样品能够提高老龄大鼠血清和肝组织中的超氧化物歧化酶 (SOD)的活性。
表4各组大鼠的血清和肝组织SOD活性
2.5样品对大鼠血清及组织中谷胱甘肽(GSH)含量的影响
试验终末，样品各剂量组大鼠的血清和肝组织中GSH含量均高于阴性对照组，其中高剂量组肝组织GSH含量与阴性对照组的差异具有显著性(P<0.05)，见表5，表明该样品能够提高老龄大鼠肝组织中的谷胱甘肽(GSH)含量。
表5各组大鼠的血清和肝组织GSH含量
3小结
分别以334、167、84mg/kg BW剂量(分别相当于人体推荐用量的20、10、5倍) 的Q品牌虾青素软胶囊给予老龄大鼠连续灌胃30天，能够降低大鼠的血清中蛋白质羰基的含量，提高大鼠的血清和肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性，提高大鼠的肝组织中谷胱甘肽(GSH)的含量，对大鼠的体重无明显影响，表明该样品具有抗氧化功能。
C、Q品牌虾青素软胶囊抗氧化功能－人体试食试验报告
1材料和方法
1.6样品：由W公司送检的Q品牌虾青素软胶囊，规格为0.5g/粒，产品批号：SZ20140101，置阴凉干燥处保存。人体推荐用量为每人(成人)每日2次，每次1 粒。
1.7受试对象
1.2.1受试者纳入标准：年龄在40～65岁，身体健康状况良好，无明显脑、心、肝、肺、肾、血液疾患，无长期服药史，志愿受试并保证配合者。本次试验初始共有120位符合纳入条件者志愿参加试验。
1.2.2受试者排除标准：(1)妊娠或哺乳期妇女及对本品过敏者；(2)合并有心、脑血管、肝、肾和造血***等严重疾病及精神病患者；(3)短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判断者；(4)不符合纳入标准，未按规定食用受试样品，无法判定功效或资料不全影响功效或安全性判断者。
3试验设计与分组：采用自身和组间两种对照设计。以受试者血液丙二醛(MDA) 含量为主，兼顾超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性进行分层，然后随机分为试食组和对照组，每组各60人；尽可能考虑影响结果的主要因素如年龄、性别、生活饮食习惯等，进行均衡性检验，以保证组间的可比性。
4食用剂量及时间：试食组试食样品每人每日服食2次，每次1粒，连续服用3个月，对照组采用空白对照。试验期间两组人群原生活、饮食习惯不变。
5主要仪器及试剂：心电图、X线透视机、B超扫描仪、生化分析仪、血球计数仪、血压计等。MDA、SOD、GSH-PX测定试剂盒均由南京建成生物工程研究所生产。
6观察指标
1.6.1安全性指标
2.6一般情况：包括精神状况、睡眠、饮食、大小便等，每天由受试者记录。
2.7血常规检查：应用全自动血球计数仪检测血常规指标，试验前、试验末各验一次。
2.8大、小便常规检查：试验前、试验末各检一次。
2.9血压和肝、肾功能检查：用血压计测量血压，应用全自动生化分析仪测定血液主要肝、肾功能指标，试验前、试验末各测一次。
2.10胸透、心电图、腹部B超：在试验开始前进行一次胸部透视、心电图和腹部B超检查。试验前、试验末各测一次。
1.6.2功效性指标
1.6.2.1过氧化脂质含量：观察试验前后MDA的变化及MDA下降百分率。
1.6.2.2超氧化物歧化酶活性：观察试验前后SOD的变化及SOD升高百分率。
1.6.2.3谷胱甘肽过氧化物酶活性：观察试验前后GSH-PX的变化及GSH-PX升高百分率。
1.7试验数据统计处理：自身对照资料采用配对t检验，两组均数比较采用成组t检验。百分率用χ2检验进行检验。在试验前两组间比较差异无显著性的前提下，可进行试验后两组间比较。
1.8结果判定：各功效观察指标试验前后自身比较和试食后组间比较有统计学意义，方可判定该指标阳性。
过氧化脂质含量、超氧化物歧化酶活性、谷胱甘肽过氧化物酶活性三项指标中任两项实验结果阳性，可判定该受试样品具有抗氧化功能。
2结果
2.1一般情况：试验中失访7例，失访率为5.8％，最终对照组和试食组分别56例和57例进入有效统计。试食前，试食组与对照组人群的年龄、精神状况、睡眠情况、饮食情况等基本一致；两组人群的胸部透视、心电图及腹部B超检查结果均未见明显异常。试食前两组人群的血液过氧化脂质含量、超氧化物歧化酶活性和谷胱甘肽过氧化物酶活性比
较，均没有明显差异(P>0.05)，见表1。
表1试食前两组人群基本情况
2.2样品对血液过氧化脂质含量的影响
试食前两组人群的血液过氧化脂质(MDA)含量无明显差异(P>0.05)。试食后，试食组的MDA含量低于对照组，差异有显著性(P<0.01)；试食组的MDA含量平均下降 14.96％，大于对照组的0.77％，差异有显著性(P<0.01)；试食组的MDA试验前后自身比较差异也有显著性(P<0.01)，对照组前后自身比较差异则无显著性(P>0.05)，见表 2，
表明该样品具有降低试食者的血液过氧化脂质含量的作用。
表2试食前后两组人群的血液过氧化脂质含量变化
2.3样品对血液超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响
试食前两组人群的血液超氧化物歧化酶(SOD)活性无明显差异(P>0.05)。试食后，试食组人群的血液SOD活性平均升高12.24％，大于对照组的0.16％，差异有显著性(P＜0.01)；试食组的血液SOD试验前后自身比较差异也有显著性(P＜0.01)，对照组前后自身比较差异则无显著性(P＞0.05)，见表3，表明该样品具有升高试食者血液SOD
活性的作用。
表3试食前后两组人群的血液超氧化物歧化酶活性变化
2.4样品对血液谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性的影响
试食前两组人群的血液谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)含量无明显差异(P＞0.05)。试食后，试食组的GSH-Px活性明显高于对照组，差异有显著性(P＜0.05)；试食组GSH-Px 活性平均升高10.89％，大于对照组的0.14％，差异有显著性(P＜0.01)；试食组GSH-Px 自身前后比较差异也有显著性(P＜0.01)，对照组自身比较差异则无显著性(P＞0.05)，见表4，表明该样品具有升高试食者血液GSH-Px活性的作用。
表4试食前后两组人群的血液谷胱甘肽过氧化物酶活性变化
2.5样品对安全性指标的影响
表5试验前后两组人群血压、心率的测量结果
试食前后，两组人群的血压、心率均在正常范围，试食组血压、心率的试食前后自身前后比较和试食后的组间比较，差异均无显著性差异(P＞0.05)，表明该样品对受试者的血压和心率无不良影响，见表5。
2.5.2样品对尿、便常规的影响结果见表6和表7，试食前后，试食组与对照组人群的尿液酸碱度、透明度、颜色和尿沉渣镜检均未见异常，蛋白均为阴性。两组的粪便颜色、性状和镜检均未见异常，表明该样品对受试者的大、小便常规无不良影响。
表6试验前后两组人群尿常规的检验结果
表7试验前后两人群大便常规的检验结果
2.5.3样品对血常规的影响试食前后，试食组与对照组人群的血红细胞数、白细胞数及血红蛋白含量均在正
常值范围内，见表8，表明该样品对受试者的血常规无不良影响。
表8试验前后两组人群血常规的检验结果
2.5.4样品对血液生化功能指标的影响
表9实验前后两组人群血液生化指标的检验结果
从表9可见，试食前后，两组人群的肝肾功能血液学指标检查结果均在正常值范围内，表明该样品对受试者的肝、肾功能无不良影响。
2.5.5样品的不良反应试验过程中两组志愿者均未出现恶心、胀气、腹泻及过敏等不良反应。
3小结
1.4符合本试验受试入选标准的志愿者113例(对照组56例：男29例，女27例；试食组57例：男27例，女30例)。其中试食组人群连续服用Q品牌虾青素软胶囊3 个月后，血液MDA含量平均下降14.96％，显著大于对照组的0.77％(P＜0.01)，试食组自身前后比较及试食后与对照组的组间比较差异均有显著性(P＜0.01)；试食组人群血液中SOD活性平均升高12.24％，显著大于对照组的0.16％ (P＜0.01)，试食组自身前后比较差异有显著性(P＜0.01)；试食组人群血液GSH-Px 活性平均升高10.89％，显著高于对照组的0.14％(P＜0.01)，试食组自身前后比较及试食后与对照组的组间比较差异均有显著性(P＜0.01和P＜0.05)也有显著性差异(P＜0.05)；而对照组人群的MDA、SOD及GSH-Px，试验前后自身比较均没有显著性差异(P＞0.05)。据此判定，该样品具有抗氧化功能。试验前后，试食样品组人群的血红细胞数、白细胞数、血红蛋白、大小便常规、血清总蛋白、白蛋白、谷草转氨酶、谷丙转氨酶、尿素氮、肌酐、血糖等各项检查结果均在正常值范围内，且试验前后无明显变化，表明该样品对受试者健康无不良影响。
D、Q品牌虾青素软胶囊增强免疫力功能实验报告
1材料和方法
1.4.1样品：由W公司送检的Q品牌虾青素软胶囊，规格：0.5g/粒，产品批号：SZ20140101，置阴凉干燥处保存。人口服推荐用量为每人(成人)每日2次，每次1 粒，成人体重按60kg计算，折合剂量为16.7mg/kg BW。
1.4.2实验动物与分组：SPF级健康昆明种雄性小鼠240只，体重为18～22克，由广西医科大学实验动物中心繁殖，实验动物生产许可证号： SCXK(桂)2009-0002，实验动物质量合格证号：0006739。每40只小鼠为一组，共6组。免疫I组，进行ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验；免疫Ⅱ组，进行迟发型***反应实验；免疫Ⅲ组，进行脏/体比值测定，血清溶血素测定和抗体生成细胞数测定；免疫Ⅳ～Ⅵ组，分别进行碳廓清实验、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验和NK细胞活性测定。
1.4.3实验动物房环境条件：动物实验室为屏障***，使用许可证号： SYXK(桂)2011-0005。动物实验室温度：22～25℃，相对湿度：55～70％。
1.4.4剂量选择与受试物给予方式：根据人口服推荐用量，设样品低、中、高剂量组分别为84、167、334mg/kg BW(分别相当于人体推荐用量的5、10、20倍)，设一个阴性对照组，每组10只动物。分别称取样品内容物0.84、1.67、3.34g，各加玉米油至200mL，混匀、配成4.20、8.35、16.70mg/mL浓度溶液，按0.2mL/10g BW的体积给予相应剂量组动物灌胃，阴性对照组予以等体积的玉米油，每天灌胃一次，连续灌胃30～35天。
1.4.5主要仪器与试剂：动物天平、电子分析天平、离心机、洁净工作台、二氧化碳培养箱、恒温水浴箱、显微镜、半自动生化分析仪、酶标仪等。
无菌手术器械、微量注射器、细胞计数器、24孔和96孔平底细胞培养板、96 孔U型细胞培养板、玻璃平皿、纱布、载玻片、试管、200目筛网、计时器、血色素吸管等。
RPMI1640培养液、小牛血清、2-ME、青霉素、链霉素、ConA、1mol/L的HCL 溶液、异丙醇、MTT、Hank’s液(pH 7.2～7.4)、PBS缓冲液(Ph7.2～7.4)、台酚蓝、DNFB、丙酮、硫化钡、补体(豚鼠血清)、SA缓冲液、琼脂糖、绵羊红细胞(SRBC)、生理盐水、印度墨汁、0.1％的碳酸钠、鸡红细胞、甲醇、Gimsa染液、YAC-1细胞、乳酸锂、硝基氯化四氮唑、吩嗪二甲酯硫酸盐、氧化型辅酶I、0.2mol/L的 Tris-HCL缓冲液、1％冰醋酸、1％的NP40等。
1.4.6实验方法
脏器/体重比值测定：称重后处死小鼠，取出胸腺和脾脏，在电子分析天平上称重，计算脏/体比值。
ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化实验(MTT法) 无菌取脾，置于盛有适量无菌Hank’s液的平皿中，制成细胞悬液，经200目筛网过滤。用Hank’s液洗2次，每次离心10min(1000r/min)。然后将细胞悬浮于1mL 完全培养液中，计数活细胞数，用RPMI1640培养液调整细胞浓度为3×106个 /mL。再将细胞悬液分两孔加入24孔培养板中，每孔1mL，在其中一孔加75μL ConA液(相当于7.5μg/mL)，另一孔作为对照，置5％CO2，37℃二氧化碳孵箱中培养72h。培养结束前4h，每孔轻轻吸去上清液0.7mL，加入0.7mL不含小牛血清的RPMI1640培养液，同时加入MTT(5mg/mL)50μL/孔，继续培养4h。培养结束后，每孔加入1mL酸性异丙醇，吹打混匀，使紫色结晶完全溶解。然后分装到96孔培养板中，每个孔作3个平行孔，用酶标仪，以570nm波长测定光密度值。淋巴细胞的增殖能力用加ConA孔的光密度值减去不加ConA孔的光密度值表示。
1.6.3二硝基氟苯诱导的小鼠DTH实验(耳肿胀法)
实验结束前5天用硫化钡将小鼠腹部皮肤脱毛约3cm×3cm范围，用50μL DNFB溶液均匀涂抹致敏，5天后将10μL DNFB均匀涂抹于小鼠右耳两面进行攻击，24小时后颈椎脱臼处死小鼠，剪下左右耳壳，用打孔器取下8mm直径的耳片、称重，以左右耳重量之差值表示DTH的程度。
1.6.4抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)
取脱纤维的羊血，用生理盐水洗涤3次，每次离心10min(2000r/min)，用生理盐水将压积SRBC配成2％(v/v)的细胞悬液，每鼠腹腔注射0.2mL。将免疫后 5天的小鼠处死，取脾脏置盛有Hank’s液的平皿内，轻轻磨碎脾脏，制成细胞悬液，经200目筛网过滤，离心10min(1000r/min)，用Hank’s液洗涤2遍，最后将细胞悬浮在5mL RPMI1640 培养液中。将表层培养基(1g琼脂糖加双蒸水至100mL)加热溶解后，放45～50℃水浴保温，与等量Ph7.2～7.4、2倍浓度的Hank’s液混合，分装小试管，每管 0.5mL，再向管内加入50μL10％SRBC(v/v，用SA缓冲液配制)、25μL脾细胞悬液，迅速混匀后倾倒于已刷琼脂糖薄层的玻片上，做平行片，待琼脂凝固后，将玻片平扣放在玻片架上，放入二氧化碳培养箱中孵育1.5h，用SA缓冲液稀释的补体(1:8)加入玻片架凹槽内，继续孵育1.5h，计数溶血空斑数。用空斑数/106脾细胞表示抗体生成细胞数。
1.6.5血清溶血素的测定(血凝法)
取脱纤维的羊血，用生理盐水洗涤3次，每次离心10min(2000r/min)，用生理盐水将压积SRBC配成2％(v/v)的细胞悬液，每鼠腹腔注射0.2mL。免疫5天后，摘除小鼠的眼球，取血于离心管内，放置约1h，2000r/min离心10min，分离、收集血清。用生理盐水将血清倍比稀释，将不同稀释度的血清分别置于微量血凝板内，每孔100μL，再加入100μL 0.5％(v/v)的SRBC悬液，混匀，装入湿润的平盘内加盖，于37℃温箱孵育3h，观察血球凝集程度。按下式计算抗体积数：
抗体积数＝(S1+2S2+3S3……nSn)
式中1、2、3……n为对倍稀释的指数，S为凝集程度的级别。1.6.6小鼠碳廓清实验
经尾静脉给小鼠注射用生理盐水稀释4倍的印度墨汁，每10g体重注射0.1 mL，墨汁注入后立即计时，于注入墨汁后第2、10min，分别从内眦静脉丛取血 20μL，加入到2mL0.1％Na2CO3溶液中，摇匀。以Na2CO3溶液作空白对照，以600nm波长测光密度值(OD)。将小鼠处死，取肝、脾脏，称重。按下式计算吞噬指数a。
a＝K1/3×体重/(肝重+脾重) 式中K＝(lgOD1－lgOD2)/(t2-t1)
1.6.7小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验(半体内法)
给小鼠腹腔注射20％(v/v，用生理盐水配制)的压积鸡红细胞悬液，每鼠1mL，间隔30min，颈椎脱臼处死小鼠，正中剪开腹壁皮肤，腹腔注入2mL生理盐水，转动鼠板1min，吸出腹腔洗液1mL，平均滴于2片载玻片上，放入垫有湿纱布的搪瓷盒内，置37℃孵箱温育30min。孵毕，取出玻片于生理盐水中漂洗后晾干，用甲醇:丙酮(1:1)溶液固定，4％(v/v)Giemsa-磷酸缓冲液染色，再用纯水漂洗、晾干。油镜下每片计数100个巨噬细胞，按下式计算吞噬率和吞噬指数。
吞噬率(％)＝吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/计数的巨噬细胞数×100吞噬指数＝被吞噬的鸡红细胞总数/计数的巨噬细胞数
1.6.8NK细胞活性测定(LDH测定法)
将小鼠颈椎脱臼处死，无菌取脾，制成脾细胞悬液，用Hank’s液洗2次，每次离心10min(1000r/min)。弃上清，将细胞浆弹起，加入0.5mL灭菌纯水20秒，裂解红细胞后再加入0.5mL 2倍Hank’s液及8mL Hank’s液，1000r/min离心10min，用1mL含10 ％小牛血清的RPMI1640完全培养液重悬，用1％冰醋酸稀释后计数(活细胞数应在95％以上)，用台酚兰染色计数活细胞数，最后用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为2×107个 /mL，此为效应细胞。取传代后24h生长良好的YAC-1细胞，用RPMI1640完全培养液调整细胞浓度为4×105个/mL，此为靶细胞。取靶细胞和效应细胞各100μL(效靶比50:1)，加入U型96孔培养板中；靶细胞自然释放孔加靶细胞和培养液各100μL，靶细胞最大释放孔加靶细胞和1％NP40各100μL。上述各项各设3个平行孔，置5％CO2、37℃二氧化碳孵箱中培养4h。然后将96孔培养板以1500r/min离心5min，每孔吸取上清100μL 置平底96孔培养板中，同时加入LDH基质液100μL，反应8分钟，每孔加入1mol/L的 HCL30μL，在酶标仪490nm处测定光密度(OD)值。按下式计算NK细胞活性。
NK细胞活性(％)＝(反应孔OD－自然释放孔OD)/(最大释放孔OD－自然释放孔OD)×100％
实验数据统计：应用SPSS统计软件进行方差分析统计处理。
1.5.5结果判定：在细胞免疫功能、体液免疫功能、单核-巨噬细胞功能、NK细胞活性四方面任两个方面结果阳性，可判定该受试样品具有增强免疫力功能作用。
2结果
1.8样品对小鼠体重的影响
表1 Q品牌虾青素软胶囊增强免疫力功能实验小鼠体重
表2 Q品牌虾青素软胶囊增强免疫力功能实验小鼠体重
注：免疫II～VI组各剂量组的小鼠初始、中期和末期体重及增重与阴性对照组比较，差异均无显著性(P＞0.05)。
由表1、表2可见，实验初、实验中期和实验末期，样品各剂量组的小鼠体重及实验期间小鼠的体重增长与阴性对照组间比较，差异均无显著性(P＞0.05)，表明该样品对小鼠的体重增长无明显影响。
2.2样品对小鼠免疫器官脏器/体重比值的影响
表3 Q品牌虾青素软胶囊增强免疫力功能实验小鼠的免疫器官脏器/体重比值
由表3可见，样品各剂量组的小鼠胸腺/体重及脾脏/体重比值与阴性对照组比较，均无显著性差异(P＞0.05)，表明该样品对小鼠的免疫器官重量无明显影响。
2.3样品对小鼠的细胞免疫的影响
2.4样品对ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化能力的影响
表4 Q品牌虾青素软胶囊的小鼠脾淋巴细胞转化实验结果
从表4可见，样品各剂量组的小鼠脾淋巴细胞转化能力高于阴性对照组，且高剂量组与阴性对照组的差异具有显著性(P＜0.05)，表明该样品具有促进小鼠的脾淋巴细胞增殖、转化能力的作用。
2.3.2样品对小鼠迟发型***反应(DTH)的影响
表5 Q品牌虾青素软胶囊的小鼠迟发型***反应(DTH)实验结果
从表5可见，样品各剂量组的小鼠左右耳片重量差值高于阴性对照组，且高剂量组与阴性对照组的差异具有显著性(P＜0.05)，表明该样品具有促进小鼠的迟发型***反应的作用。
2.4样品对小鼠的体液免疫的影响
2.4.1样品对小鼠的抗体生成细胞数的影响
表6 Q品牌虾青素软胶囊的小鼠抗体生成细胞检测实验结果
从表6可见，样品各剂量组的小鼠溶血空斑数高于阴性对照组，且高剂量组与阴性对照组的差异具有显著性(P＜0.05)，表明该样品具有促进小鼠的抗体生成细胞增殖的作用。
2.4.2样品对小鼠血清溶血素的影响
表7 Q品牌虾青素软胶囊的小鼠溶血素测定实验结果
从表7可见，样品各剂量组的小鼠抗体积数高于阴性对照组，且高、中剂量组与阴性对照组的差异具有显著性(P＜0.01或P＜0.05)，表明该样品具有提高小鼠的血清溶血素水平的作用。
2.5样品对小鼠的单核-巨噬细胞吞噬功能的影响
2.5.1样品对小鼠的单核-巨噬细胞碳廓清的影响
表8 Q品牌虾青素软胶囊的小鼠单核-巨噬细胞碳廓清实验结果
从表8可见，样品各剂量组的小鼠吞噬指数高于阴性对照组，且高剂量组与阴性对照组的差异具有显著性(P＜0.05)，表明该样品具有促进小鼠的单核-巨噬细胞碳廓清功能的作用。
2.5.2样品对小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力的影响
表9 Q品牌虾青素软胶囊的小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验结果
从表9可见，样品各剂量组的小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率及吞噬指数高于阴性对照组，但各剂量组与阴性对照组的差异均无显著性(P＞0.05)，表明该样品无明显促进小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬能力的作用。
2.6样品对小鼠的NK细胞活性的影响
表10 Q品牌虾青素软胶囊的小鼠NK细胞活性测定结果
从表10可见，样品各剂量组的小鼠NK细胞活性与阴性对照组接近，各剂量组与阴性对照组的差异均无显著性(P＞0.05)，表明该样品对小鼠的NK细胞活性无明显的促进作用。
3小结
经口给予小鼠84、167、334mg/kg BW(相当于人体推荐量5、10、20倍) 剂量的Q品牌虾青素软胶囊30～35天，能促进小鼠的细胞免疫(脾淋巴细胞增殖、转化和迟发型***反应)、体液免疫(抗体生成细胞增殖和血清溶血素水平)，促进小鼠的单核-巨噬细胞碳廓清功能，对小鼠的体重增长、胸腺/体重比值、脾脏/ 体重比值、腹腔巨噬细胞的吞噬能力和NK细胞活性无明显影响，提示该样品具有增强免疫力功能。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (6)

1.一种虾青素软胶囊配方，其特征在于：
其胶囊内容物配方由如下原料组成：
虾青素纳米乳液 110-130g；
不饱和脂肪酸 370-390g；
其囊皮配方按照重量百分比有如下原料组成：
甘油 43-47％；
明胶 17-21％；
纯化水 34-38％。
2.根据权利要求1所述的一种虾青素软胶囊配方，其特征在于：
其胶囊内容物配方由如下原料组成：
虾青素纳米乳液 120g；
不饱和脂肪酸 380g；
其囊皮配方按照重量百分比有如下原料组成：
甘油 45％；
明胶 19％；
纯化水 36％。
3.根据权利要求1所述的一种虾青素软胶囊配方，其特征在于：所述虾青素纳米乳液采用虾青素纳米乳液。
4.根据权利要求1所述的一种虾青素软胶囊配方，其特征在于：所述不饱和脂肪酸采用富含亚油酸的红花籽油、棕榈油等。
5.一种虾青素软胶囊的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)制备虾青素纳米：将雨生红球藻通过化学工艺提取及乳化后得到虾青素纳米；
(2)将得到的虾青素纳米和不饱和脂肪酸混合均匀，得到溶液I；
(3)将明胶、甘油、纯化水按照比例混合，并经过溶胶和过滤工艺处理得到溶液II；
(4)将上述溶液I和溶液II经过压丸工艺处理，再依次经过定型、洗丸、干燥、选丸、包装、检验工艺之后入库。
6.根据权利要求5所述的一种虾青素软胶囊的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中包装工艺分为内包装和外包装，并且先进行内包装工艺，再进行外包装工艺。
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