CN106831904A

CN106831904A - 一种化合物及其制备方法、制剂与应用

Info

Publication number: CN106831904A
Application number: CN201710052217.0A
Authority: CN
Inventors: 李剑峰; 坝德伟; 周思雨; 黄茜; 杨兆祥; 张建文
Original assignee: KPC Pharmaceuticals Inc
Current assignee: KPC Pharmaceuticals Inc
Priority date: 2017-01-24
Filing date: 2017-01-24
Publication date: 2017-06-13
Anticipated expiration: 2037-01-24
Also published as: CN106831904B

Abstract

本发明公开了一种化合物及其制备方法、制剂与应用。所述的化合物的结构如下：

Description

一种化合物及其制备方法、制剂与应用

技术领域

本发明属于药物制备技术领域，具体涉及一种化合物及其制备方法、制剂与应用。

背景技术

心脑血管疾病是一种严重威胁人类，特别是中老年人健康的常见病，全世界每年死于心脑血管疾病的人数高达1500万人，居各种死因首位。目前，我国心脑血管疾病患者已经超过2.7亿人，我国每年死于心脑血管疾病近300万人，占我国每年总死亡病因的51%。心脑血管疾病已成为人类死亡病因最高的头号杀手，也是人们健康的“无声凶煞”。心脑血管疾病具有“发病率高、致残率高、死亡率高、复发率高，并发症多” ，即“四高一多”的特点。即使应用目前最先进、完善的治疗手段，仍可有50%以上的脑血管意外幸存者生活不能完全自理，而幸存下来的患者75%不同程度丧失劳动能力，40%重残，由此导致的家庭、医疗和经济负担已成为不可小觑的社会问题。因此研制更多疗效显著、安全的心脑血管疾病治疗药物是极为迫切的事情。

在中国血栓性疾病已经成为了各种疾病中最主要至残和致死的的病因之一。这些疾病包括：急性冠脉综合征：包括不稳定心绞痛和心肌梗死，心脏猝死，外周动脉阻塞，缺血性中风，深静脉血栓(DVT)，肺动脉栓塞等。尽管目前对以上血栓性疾病的治疗手段和药物上有了长足的进步，但由于这些药物均存在不同程度的缺陷，如抗血栓作用不强或因完全阻断了机体的抗凝机制而触发内出血现象。因此临床上可以选择的治疗手段和药物仍然十分有限，急需更有效而且安全性更高的抗血栓新药来替代现有的治疗方法，以满足目前日益增长的临床需求。

分子病理学研究显示体内血栓的形成过程主要有血小板聚集激活和血液凝固反应激活两大机制参与。两个机制各有不同的调节环节。阿司匹林和雷比格雷是强烈的血小板聚集抑制剂，在临床上常用于血栓防治。而肝素钠，磺达肝素和法华林则属于抗凝剂，作用于血液凝集通路，在临床上也广泛使用于各种血栓性疾病的预防与治疗。但上述两大常规抗血栓药物的一个主要副作用就是部分患者使用之后引发内出血。

血小板活化和聚集在血栓的形成中发挥着重要作用，因此抗血小板治疗仍是临床上预防和治疗血栓性疾病的重要手段。

血小板活化聚集形成血栓分为3个阶段：首先经血管性血友病因子(vWF)介导糖蛋白GPIb-IX复合物将血小板黏附于血管内皮下；血小板沉积并黏附于受损血管壁上，并释放出一系列诸如血栓素A2(TXA2)、二磷酸腺苷(ADP)等生理性血小板活性因子进一步激活血小板，并使得血小板膜上以GPIIb/IIIa复合物为主的众多黏附受体发生构象转变，暴露出结合位点，通过纤维蛋白原的“桥联”作用使血小板聚集，进而导致早期血栓的形成；通过血小板的释放产物，可进一步引起血管收缩，刺激白细胞，损伤内皮细胞，促进血液凝固，导致血栓形成。

血小板可由一系列血浆活性因子激活和聚集，如AA、5-HT、凝血酶等。凝血和血小板聚集共同促进血栓形成。我们欲筛选出抑制血小板活化聚集的样品，减少血栓形成的途径。实验采用比浊法测定血小板聚集率，其原理是离心制备PPP和PRP，将PPP所测得的透光率视为100%，PRP的透光率视为0%。将PRP置于比色管中，加入诱导剂，在搅拌的条件下，诱导剂与血小板膜受体之间相互作用，引起血小板逐渐聚集，血浆浊度下降，透光率增加，光电池迅速将光浊度的信号转换为电讯号，血小板聚集仪自动地进行动态测量和记录，从而描绘出血小板聚集曲线。此法利用血小板聚集仪能够比较方便地获得血小板聚集情况，从而评价血小板的聚集功能。

血栓可发生于循环***的各个部位，如静脉、动脉、心腔和微循环，其是由纤维蛋白和血细胞组成的。在血栓形成过程中，血小板活化与凝血***激活具有重要作用，两者在体内紧密联系，凝血***激活后产生的凝血酶，是一个强有力的血小板活化因子，血小板活化后又将促进凝血过程。抗栓治疗主要针对凝血***和血小板两个环节，分别称为抗凝治疗和抗血小板治疗。

人体内凝血***和抗凝***处于一个动态平衡的状态，过度凝血会导致心肌梗死、脑血栓等严重疾病。血液凝固需要有内源性和外源性两条凝血途径同时参与。APTT 和PT 是临床凝血功能检测中最常用的两个参数。其中APTT 主要用于检测机体的内源性凝血***，其延长或缩短分别反映凝血因子II、V、VIII、X、XI 和VII 的血浆活性降低或增加。PT则检测机体的外源性凝血***，其延长或缩短分别反映凝血因子I、II、V、VII 和X 的血浆活性降低或增加。

血液凝固即液体状态血液变成固体凝胶或凝块的过程。其主要机制为凝血酶将可溶性纤维蛋白原转化为不溶性铰链状纤维蛋白丝，这是复杂的凝血级联反应中的最后一步。凝血酶主要通过两条激活通路形成：1、内源性通路：引发于因子十二( XIIa )的活化；2、外源性通路：引发于分布在血管内壁细胞表面的组织因子与因子七的结合。凝血因子 Xa(Factor Xa、Xa因子、FXa)，又称凝血十因子,是一种丝氨酸蛋白酶 , 位于血液凝集级联的上游 , 处在连接内源性和外源性激活途径共同通路的中心位置 , 它既能阻断内源性凝血亦能抑制外源性凝血的发生，是当今抗血栓药物研究的的最新靶点。研究表明在凝集通路中一个分子的Xa可以激活并产生出数百个分子的凝血酶，因此抗Xa活性是一种比抑制凝血酶更有效的阻止纤维蛋白形成的手段。已有大量的体内、体外实验证据表明Xa抑制对阻止纤维蛋白的形成比抑制凝血酶的作用要强，而且持续时间要长得多。此外Xa特异性抑制剂对凝血酶无抑制作用，因而不会影响到已经形成的凝血酶的活性，从而减少了患者使用后潜在的内出血风险。因此针对Xa抑制剂的研究已经成为当代抗血栓新药研究公认的潮流。例如2008年上市的利伐沙班、2011年上市的依杜沙斑以及2012年上市的阿哌沙班。其他新的Xa因子抑制剂如 letaxaban，darexaban， eribaxaban LY517717等相继进入了不同阶段的试验。

天麻素(Gastrodin)，别名4-羟甲基苯基-β-D-吡喃葡萄糖甙，分子式为C₁₃H₁₈O₇，分子量为286，化学结构式为：

。

天麻素于兰科植物天麻的干燥根块中提取分离得到。现代药理学研究表明，天麻素具有较好的镇静和安眠作用，对神经衰弱、失眠、头痛症状有缓解作用。中药天麻可治疗痛眩晕、肢体麻木、惊痛抽搐。临床天麻素主要用于治疗椎一基底动脉供血不足、前庭神经元炎、眩晕症等症。

尹述凡等人报道了围绕与天麻素具有相同碳骨架的豆腐果苷所做的一系列衍生，以及它们在镇静催眠方面的用途(陈华凤、陈华文、尹述凡等.豆腐果苷-吡唑啉衍生物的合成及镇静活性研究。有机化学.2011(02))。申请号为CN200710027503.8的中国专利同样围绕豆腐果苷进行了一系列的衍生，并保护了其在治疗老年痴呆症方面的用途。但目前围绕天麻素苷元进行结构修饰，开发具有心脑血管方面用途的药物却鲜有报道。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种化合物；第二目的在于所述的化合物的制备方法；第三目的在于提供所述的化合物的制剂；第四目的在于提供所述的化合物的应用。

本发明的第一目的是这样实现的，所述的化合物的结构如下：

其中：X为卤素，R为其他化合物残基。

本发明的第二目的是这样实现的，是以2-氯-4羟基苯甲醛或2-溴-4羟基苯甲醛为原料与四乙酰葡萄糖三氯乙酰亚胺酯发生Schmidt反应，然后与NaBH4或DAST进行反应得到目标化合物。

本发明的第三目的是这样实现的，所述的化合物中加入药学上可接受的辅料制备成片剂、胶囊剂、注射剂或冻干粉针剂。

本发明的第四目的是这样实现的，所述的化合物在制备抗凝血药物中的应用。

本发明所述的化合物是全新结构的化合物，具有明显的抗凝血作用，可用于作为潜在的先导化合物，在制备治疗深静脉血栓和肺血栓栓塞、心脑血管疾病、中风和其他与血液凝集相关的疾病的药物中运用；本发明所示化合物的制备方法简单易行，重现性好，环境污染小，可用于所示化合物的大量制备。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。

本发明所述的化合物的结构如下：

其中：X为卤素，R为其他化合物残基。

所述的化合物， X为F、Cl或Br，R为CHO、CH₂OH,CHF₂或CH₂F。

本发明所述的化合物的制备方法，是以2-氯-4羟基苯甲醛或2-溴-4羟基苯甲醛为原料与四乙酰葡萄糖三氯乙酰亚胺酯发生Schmidt反应，然后与NaBH4或DAST进行反应得到目标化合物。

该反应的反应式为：

在实施例中，所述反应具体为2-氯-4-羟基苯甲醛，2-溴-4-羟基苯甲醛等与四乙酰葡萄糖三氯乙酰亚胺酯在有机溶剂和催化剂的条件下发生Schmidt反应，然后与NaBH₄, DAST等进行反应即得所述的化合物。

有机溶剂是指溶剂中包含碳原子的能溶解不溶于水的物质的一类有机化合物，包括链烷烃、烯烃、醇、醛、胺、酯、醚、酮、芳香烃、氢化烃、萜烯烃、卤代烃、杂环化物、含氮化合物及含硫化合物等多类物质，在常温常压下呈液态，具有较大的挥发性，在溶解过程中，溶质与溶剂的性质均无改变。

其中，作为优选，本发明所述制备方法所述有机溶剂为二氯甲烷、甲醇、乙醇、叔丁基甲基醚或四氢呋喃中的一种。

催化剂是指能提高化学反应速率，而本身结构不发生永久性改变的物质，本发明所述制备方法以三氟化硼***作为催化剂。

本发明实施例中，测试本发明所示天麻素衍生物对ADP诱导家兔体外血小板聚集抑制率的的影响，AT-III依赖的抗凝血因子Xa活性的影响以及对APTT的影响。

本发明所述的化合物的制剂为所述的化合物中加入药学上可接受的辅料制备成片剂、胶囊剂、注射剂或冻干粉针剂。

本发明所述的化合物可以和常规的辅料组合制成治疗深静脉血栓和肺血栓栓塞、心脑血管疾病、中风和其他与血液凝集相关的疾病的药物，包括口服液、颗粒剂、片剂、丸剂、散剂、胶囊剂和滴丸剂等。

本发明还提供了一种药物制剂，包括治疗有效量的本发明所述化合物（天麻素衍生物）和药学上可接受的辅料。本领域技术人员可将所述化合物（天麻素衍生物）直接或间接加入制备不同剂型时所需的药学上可接受的各种常用辅料，如填充剂、崩解剂、润滑剂、粘合剂等，以常规药物制剂方法，制成常用制剂如片剂、胶囊剂、注射液、口服液、颗粒剂、丸剂、散剂和滴丸剂等。其中，填充剂如淀粉，乳糖，蔗糖，葡萄糖，甘露醇和硅酸；崩解剂如琼脂，碳酸钙，土豆淀粉或木薯淀粉，海藻酸，某些硅酸盐和碳酸钠，低取代羟丙基纤维素；润滑剂如滑石粉，硬脂酸钙，硬脂酸镁，固体聚乙二醇，月桂硫酸钠；粘合剂如羧甲基纤维素，藻酸盐，明胶，聚乙烯吡咯酮，蔗糖和***胶。

本发明所述的化合物的应用为所述的化合物在制备抗凝血药物中的应用。

所述的化合物在制备预防和/或治疗心脑血管疾病药物中的应用。

综上所述，本发明所示化合物具有明显的抗凝血的作用，可用于作为潜在的先导化合物，在制备治疗深静脉血栓和肺血栓栓塞、心脑血管疾病、中风和其他与血液凝集相关的疾病的药物中运用。

本发明所示化合物是全新结构的化合物，具有明显的抗凝血作用，可用于作为潜在的先导化合物，在制备治疗深静脉血栓和肺血栓栓塞、心脑血管疾病、中风和其他与血液凝集相关的疾病的药物中运用。本发明所示化合物的制备方法简单易行，重现性好，环境污染小，可用于本发明所示化合物的大量制备。

本发明实施例公开了一种含萘环类天麻素衍生物及其制备方法与应用。本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的产品、方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的产品、方法及应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

下面以具体实施案例对本发明做进一步说明：

实施例1

KPC-4000020的制备：

在一个25 ml 的双口烧瓶中加化合物1(400mg，1.99 mmol，1.0 eq), 化合物2(1.76g，3.58 mmol，1.8 eq）和分子筛（3.0 g，4A）。置换氮气。往烧瓶中依次加入二氯甲烷 (5mL)，将烧瓶置于冰浴中，搅拌30分钟。用注射器缓缓滴入三氟化硼合*** (0.28 mL, 2.19mmol，1.1 eq)。滴加完毕以后继续搅拌30分钟。然后撤去冰浴，令反应液自然升温至室温（20℃）。用TLC检测反应进8程，直至原料消失（2小时）。将反应液缓缓倒入一个盛有碎冰（20g）的烧杯淬灭。待冰块完全融化，对生成的混合液的水相用乙酸乙酯进行萃取（20 mL ×3）。将有机相合并，用无水硫酸钠干燥。将混合物过滤。在旋蒸上除去溶剂。用硅胶柱对粗产物进行纯化。洗脱液比例：乙酸乙酯/石油醚= 30%。得到白色固体183 mg，产率：60 %。

1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.88 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.80 (d, J =8.1 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.27 (ddd, J = 33.6, 31.6, 8.0 Hz,4H), 4.25 – 3.88 (m, 3H), 2.07 (d, J = 13.3 Hz, 12H).。

实施例2

KPC-4000021的制备：

将化合物KPC-4000020 (300 mg，0.56 mmol，1.0 eq)溶在2.0 mL 甲醇中，氮气保护下降温至0 ℃，分批加入硼氢化钠 (21 mg，0.56 mmol，1.0 eq)。然后撤去冰浴，令反应液自然升温至室温（20 ℃）。用TLC检测反应进程，直至原料消失（1小时）。将反应液缓缓倒入NH4Cl的饱和溶液中(20 mL)。对生成的混合液的水相用乙酸乙酯进行萃取（10 mL × 3）。将有机相合并，用无水硫酸钠干燥。将混合物过滤。在旋蒸上除去溶剂。用硅胶柱对粗产物进行纯化。洗脱液比例：乙酸乙酯/石油醚= 60 %。得到白色固体221 mg，产率：73 %。

1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.57 (s, 1H), 7.24 (s, 1H), 7.14 (d, J =8.4 Hz, 1H), 5.42 – 5.33 (m, 1H), 5.29 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 5.18 (t, J = 9.5Hz, 1H), 5.00 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.29 (dd, J = 12.2, 5.2 Hz,1H), 4.23 – 4.16 (m, 1H), 3.85 (dd, J = 9.9, 2.7 Hz, 1H), 2.14 – 2.01 (m,12H)。

实施例3

KPC-4000022的制备

将化合物KPC-4000021 (150 mg，0.28 mmol，1.0 eq)溶在2.0 mL 二氯甲烷中，氮气保护下降温至0 ℃，用注射器缓缓滴入二乙胺基三氟化硫 (68 mg，0.42mmol，1.5 eq)。然后撤去冰浴，令反应液自然升温至室温（20 ℃）。用TLC检测反应进程，直至原料消失（3小时）。将反应液缓缓倒入NaHCO3的饱和溶液中(20 mL)。对生成的混合液的水相用乙酸乙酯进行萃取（10 mL × 3）。将有机相合并，用无水硫酸钠干燥。将混合物过滤。在旋蒸上除去溶剂。用硅胶柱对粗产物进行纯化。洗脱液比例：乙酸乙酯/石油醚= 30 %。得到白色固体72 mg，产率：48 %。

1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.58 (s, 1H), 7.27 (d, J = 8.3 Hz, 1H),7.15 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.41-5.33 (m, 2H), 5.30 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 5.20(dd, J = 19.2, 9.5 Hz, 2H), 5.02 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.29 (dd, J = 12.3, 5.2Hz, 1H), 4.20 (dd, J = 12.3, 2.4 Hz, 1H), 3.87 (ddd, J = 9.9, 5.2, 2.4 Hz,1H), 2.12 – 2.02 (m, 12H)。

实施例4

KPC-40000023的制备：

将化合物KPC-4000020 (50 mg，0.09 mmol，1.0 eq)溶在2.0 mL 二氯甲烷中，氮气保护下降温至0 ℃，用注射器缓缓滴入二乙胺基三氟化硫 (38 mg，0.23mmol，2.5 eq)。然后撤去冰浴，令反应液自然升温至室温（20 ℃）。用TLC检测反应进程，直至原料消失（3小时）。将反应液缓缓倒入NaHCO3的饱和溶液中(20 mL)。对生成的混合液的水相用乙酸乙酯进行萃取（10 mL × 3）。将有机相合并，用无水硫酸钠干燥。将混合物过滤。在旋蒸上除去溶剂。用硅胶柱对粗产物进行纯化。洗脱液比例：乙酸乙酯/石油醚= 40 %。得到白色固体24 mg，产率：48 %。

1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.70 (s, 1H), 7.40 (d, J = 8.4 Hz, 1H),7.17 (t, J = 12.8 Hz, 1H), 6.56 (dd, J = 69.0, 43.6 Hz, 1H), 5.43 – 5.35 (m,1H), 5.30 (t, J = 9.3 Hz, 1H), 5.19 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 5.06 (d, J = 7.7 Hz,1H), 4.25 (ddd, J = 28.5, 12.3, 7.8 Hz, 2H), 3.93 – 3.83 (m, 1H), 2.11 – 2.02(m, 12H)。

实施例5

KPC-40000024的制备：

在一个25 mL 的双口烧瓶中加入化合物3(1.200 mg，7.66 mmol，1.0 eq), 化合物2(4.530 g，9.20 mmol，1.2 eq）和分子筛（3.0 g，4A）。置换氮气。往烧瓶中依次加入二氯甲烷 (40 mL)，将烧瓶置于冰浴中，搅拌30 分钟。用注射器缓缓滴入三氟化硼合*** (1.06mL, 8.43 mmol，1.1 eq)。滴加完毕以后继续搅拌30 分钟。然后撤去冰浴，令反应液自然升温至室温（20 ℃）。用TLC检测反应进程，直至原料消失（2小时）。将反应液缓缓倒入一个盛有碎冰（20 g）的烧杯淬灭。待冰块完全融化，对生成的混合液的水相用乙酸乙酯进行萃取（20 mL × 3）。将有机相合并，用无水硫酸钠干燥。将混合物过滤。在旋蒸上除去溶剂。用硅胶柱对粗产物进行纯化。洗脱液比例：乙酸乙酯/石油醚= 40%。得到白色固体1.870 g，产率：50 %。

1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.90 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 1.9Hz, 1H), 7.75 (dd, J = 8.5, 1.9 Hz, 1H), 7.30–7.20 (m, 1H), 5.39 (dd, J =9.4, 7.6 Hz, 1H), 5.31 (dd, J = 11.8, 6.7 Hz, 1H), 5.19 (dd, J = 11.6, 7.4Hz, 1H), 5.13 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.10 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.92 (ddd, J =9.9, 5.2, 2.5 Hz, 1H), 2.05 (dd, J = 7.9, 4.3 Hz, 12H)。

实施例6

KPC-40000025的制备：

在将化合物KPC-400024 (200 mg，0.41 mmol，1.0 eq)溶在2.0 mL 甲醇中，氮气保护下降温至0 ℃，分批加入硼氢化钠 (16 mg，0.41 mmol，1.0 eq)。然后撤去冰浴，令反应液自然升温至室温（20 ℃）。用TLC检测反应进程，直至原料消失（1小时）。将反应液缓缓倒入NH4Cl的饱和溶液中(20 mL)。对生成的混合液的水相用乙酸乙酯进行萃取（10 mL × 3）。将有机相合并，用无水硫酸钠干燥。将混合物过滤。在旋蒸上除去溶剂。用硅胶柱对粗产物进行纯化。洗脱液比例：乙酸乙酯/石油醚= 50 %。得到白色固体120 mg，产率：60 %。

1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.37 (s, 1H), 7.22–7.10 (m, 2H), 5.34- 5.23(m, 2H), 5.15 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 4.95 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.61 (s, 2H),4.29 – 4.14 (m, 2H), 3.82 (ddd, J = 9.8, 5.0, 2.4 Hz, 1H), 2.05 (dd, J =18.0, 2.7 Hz, 12H)。

实施例7

KPC-40000026的制备：

将化合物KPC-400025 (80 mg，0.16 mmol，1.0 eq)溶在1.0 ml 二氯甲烷中，氮气保护下降温至0 ℃，用注射器缓缓滴入二乙胺基三氟化硫 (32 mg，0.20mmol，1.2 eq)。然后撤去冰浴，令反应液自然升温至室温（20 ℃）。用TLC检测反应进程，直至原料消失（3小时）。将反应液缓缓倒入NaHCO3的饱和溶液中(20 mL)。对生成的混合液的水相用乙酸乙酯进行萃取（10 mL × 3）。将有机相合并，用无水硫酸钠干燥。将混合物过滤。在旋蒸上除去溶剂。用硅胶柱对粗产物进行纯化。洗脱液比例：乙酸乙酯/石油醚= 50 %。得到白色固体57 mg，产率：71 %。

1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.41 (s, 1H), 7.24 – 7.16 (m, 2H), 5.39 –5.22 (m, 5H), 5.18 (dd, J = 12.2, 6.7 Hz, 1H), 5.00 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.28(dd, J = 12.3, 5.2 Hz, 1H), 4.20 (dd, J = 12.3, 2.4 Hz, 1H), 3.85 (ddd, J =9.9, 5.1, 2.4 Hz, 1H), 2.09 – 2.04 (m, 12H)。

实施例8

KPC-40000027的制备：

在将化合物KPC-400027 (100 mg，0.20 mmol，1.0 eq)溶在2.0 mL 二氯甲烷中，氮气保护下降温至0 ℃，用注射器缓缓滴入二乙胺基三氟化硫 (83 mg，0.51mmol，2.5 eq)。然后撤去冰浴，令反应液自然升温至室温（20 ℃）。用TLC检测反应进程，直至原料消失（3小时）。将反应液缓缓倒入NaHCO3的饱和溶液中(20 mL)。对生成的混合液的水相用乙酸乙酯进行萃取（10 mL × 3）。将有机相合并，用无水硫酸钠干燥。将混合物过滤。在旋蒸上除去溶剂。用硅胶柱对粗产物进行纯化。洗脱液比例：乙酸乙酯/石油醚= 40 %。得到白色固体75mg，产率：72 %。

1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.54 (s, 1H), 7.36 (d, J = 8.3 Hz, 1H),7.23 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.58 (t, J = 56.2 Hz, 1H), 5.38 – 5.17 (m, 3H),5.04 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.23 (dd, J = 19.0, 9.9 Hz, 2H), 3.89 (s, 1H), 2.09–2.03 (m, 12H)。

上述实施例制得的化合物见表1：

表1实施例1~8制得的化合物

实施例9

本发明所示的天麻素衍生物对ADP诱导家兔体外血小板聚集抑制率的测定

实验试剂：乙醇消毒液(批号160406)，云南象山医用材料有限公司； ADP (批号3449)，为美国Chronolog公司产品；替卡格雷(Ticagrelor，批号：20151126)，上海冠东生物科技有限公司。

实验动物：日本大耳白兔，许可证号：SCXK(川)2013-24，购自成都达硕生物科技有限公司。

仪器器材：Chronolog-700型血小板聚集仪，一次性比色杯 (批号416022)，搅拌子(批号072312)，均为美国Chronolog公司产品； 5804R型低速冷冻离心机，eppendorf；一次性4ml枸橼酸钠抗凝真空采血管 (批号20150618)，武汉致远医疗科技有限公司；医用一次性采血针(批号20150420)，江西洪达医疗器械集团有限公司；VORTEX-5旋涡混匀器，江苏海门市其林贝尔仪器制造有限公司；METTLER TOLEDO XS105型电子天平，瑞士梅特勒-托利多；移液枪，eppendorfresearch plus，德国艾本德。

供试品按以下方法配制：

样品溶液配制：样品精确称取KPC-4000020等8个样品，加DMSO溶解，配制成30 mg/ml溶液备用。

试液配制：二磷酸腺苷(ADP)试液按说明书方法配制成浓度1mmol/L溶液，按100μl/管分装后冷藏(-80℃) 备用；替卡格雷(Ticagrelor)用DMSO溶解配制成0.5mg/ml溶液备用。

PRP和PPP制备：日本大耳白兔耳中央用乙醇消毒液擦拭后，用医用一次性采血针经耳中央动脉抽取血液(枸橼酸钠真空抗凝采血管，全血:枸橼酸钠为9:1)，轻轻颠倒采血管数次使血液和抗凝剂混合均匀。

所得抗凝血离心 (200×g, 10min)，收集上清液为富血小板血浆 (PRP)；剩余血液再次离心 (2400×g, 20min)，收集上清液为贫血小板血浆 (PPP)，以PPP调PRP血小板计数为500×109个/L[1-3]。

受试样品抗ADP诱导家兔血小板聚集实验

将带搅拌子的比色杯与不带搅拌子的比色杯分别置于血小板聚集仪预温孔，37℃预温10min。向预温好的带搅拌子的比色杯中加入250μlPRP，同时加入2.5μl受试样品；不带搅拌子的比色杯中加入250μl PPP，同时加入2.5μl受试样品溶解所用的溶媒。然后继续预温5min后，将两比色杯分别放入PRP测试位和PPP测试位。调整记录曲线的基线，按表2所示剂量加入诱导剂，记录血小板聚集曲线并计算最大聚集率，同时计算受试样品对ADP诱导家兔血小板聚集的抑制率。

实验结果：受试样品对ADP诱导家兔血小板聚集的影响如表2所示。

表2.KPC-400020等8个样品对ADP诱导家兔血小板聚集的影响（n=3）

注：与CON.比较，*P < 0.05，**P < 0.01，***P < 0.001

实施例10

本发明所示的天麻素衍生物AT-III依赖的抗凝血因子Xa活性检测

实验试剂：BIOPHEN Heparin Anti-Xa试剂盒：HYPHEN BioMed公司生产，批号：F1500031。

实验仪器：酶标仪：Thermo公司产品，型号MULTISKAN FC

样品溶液配制：用适量DMSO溶解样品(30 mg/mL)，再用0.02M, pH7.4的Tris-HCl缓冲液（含5% Tween80）将样品稀释至待测浓度(1 mg/mL)。

试验检测：参考试剂盒说明书方法进行检测。采用96孔板，各孔分别加入系列浓度的30 μl受试品溶液或对照品溶液后，加入30 μl R1(1 IU/ml AT)，振板混合，37℃孵育1min；然后加入30 μl R2(8 μg /ml FXa溶液)，振板混合，37℃精确孵育1 min；最后加入30μl 预热的R3(1.2 mM FXa特异性生色底物)；另设阴性对照孔，其以0.02M, pH7.4的Tris-HCl缓冲液（含5% Tween80，3.33%DMSO）等体积溶液代替被检样品加入反应体系。在酶标仪混匀后每隔30s读取405nm处吸光值(OD405)，连续检测7.5 min，酶活用吸光值的变化率表示。

阳性对照：肝素（Heparin, Sigma公司，Lot:119K1581）。

空白对照（溶剂对照）：0.02M, pH7.4的Tris-HCl缓冲液（含5% Tween80，3.33%DMSO）。

检测结果：样品对AT-III依赖的抗凝血因子Xa活性（单浓度筛选）：用吸光值的变化率(OD405/min)表示酶的活性，样品对AT-III依赖的抗凝血因子Xa活性的抑制率=〔溶剂对照(OD405/min) - 样品(OD405/min)〕/ 溶剂对照(OD405/min) × 100% 。结果见表3.

表3. KPC-4000020等8个样品对AT-III依赖的抗凝血因子Xa活性的影响（n=2）

与Con比较：*** P< 0.001, **P< 0.01, *P<0.05

实施例11

本发明所示的天麻素衍生物对APTT的影响

实验试剂：

凝血质控血浆：德国TECO公司生产，批号：047B-E1371A

APTT试液：德国TECO公司生产，批号：11265637

CaCl2：德国TECO公司生产，批号：11239717

Tris-HCl：美国Amresco公司，批号20160118

实验仪器：德国美创MC-4000血凝仪

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

样品溶液配制：样品用DMSO溶解成100mM，然后再用pH7.4 0.02M Tris-HCl(含5%Tween80)稀释至10mM。

阳性对照：依诺肝素(LMWH, 葛兰素史克，批号4SH69)

空白对照：样品溶剂(0.02M Tris-HCl, 含5% Tween80和10% DMSO)。

试验检测：在37℃预温比色杯中加入5 μL待测样品溶液或对照品溶液，然后加入45 μL人质控血浆，37℃下预热2 min，加入50 μL APTT试剂，37℃下孵育3 min后，加入50 μL 0.02 M CaCl2(37℃预温)，记录凝血时间。

检测结果：样品对APTT测试结果见表4.

表4.KPC-4000020等8个样品对APTT的影响（n=3）

与Con比较：*** P< 0.001, **P< 0.01, *P<0.05

实施例12

本发明所示结构天麻素衍生物片剂的制备

取本发明所示结构天麻素衍生物与常规辅料混合，按照常规方法制备获得本发明所示结构天麻素衍生物片剂。

实施例13

本发明所示结构天麻素衍生物口服液的制备

取本发明所示结构天麻素衍生物与常规辅料混合，按照常规方法制备获得本发明所示结构天麻素衍生物口服液。

实施例14

本发明所示结构天麻素衍生物丸剂的制备

取本发明所示结构天麻素衍生物与常规辅料混合，按照常规方法制备获得本发明所示结构天麻素衍生物丸剂。

实施例15

本发明所示结构天麻素衍生物胶囊剂的制备

取本发明所示结构天麻素衍生物与常规辅料混合，按照常规方法制备获得本发明所示结构天麻素衍生物胶囊剂。

实施例16

本发明所示结构天麻素衍生物颗粒剂的制备

取本发明所示结构天麻素衍生物与常规辅料混合，按照常规方法制备获得本发明所示结构天麻素衍生物颗粒剂。

实施例17

本发明所示结构天麻素衍生物膏剂的制备

取本发明所示结构天麻素衍生物与常规辅料混合，按照常规方法制备获得本发明所示结构天麻素衍生物膏剂。

实施例18

本发明所示结构天麻素衍生物滴丸剂的制备

取本发明所示结构天麻素衍生物与常规辅料混合，按照常规方法制备获得本发明所示结构天麻素衍生物滴丸剂。

实施例19

本发明所示结构天麻素衍生物糖浆剂的制备

取本发明所示结构天麻素衍生物与常规辅料混合，按照常规方法制备获得本发明所示结构天麻素衍生物糖浆剂。

实施例20

本发明所示结构天麻素衍生物散剂的制备

取本发明所示结构天麻素衍生物与常规辅料混合，按照常规方法制备获得本发明所示结构天麻素衍生物散剂。

实施例21

本发明所示结构天麻素衍生物冲剂的制备

取本发明所示结构天麻素衍生物与常规辅料混合，按照常规方法制备获得本发明所示结构天麻素衍生物冲剂。

实施例22

本发明所示结构天麻素衍生物酊剂的制备

取本发明所示结构天麻素衍生物与常规辅料混合，按照常规方法制备获得本发明所示结构天麻素衍生物酊剂。

实施例23

本发明所示结构天麻素衍生物粉针剂的制备

取本发明所示结构天麻素衍生物与常规辅料混合，按照常规方法制备获得本发明所示结构天麻素衍生物粉针剂。

实施例 24

本发明所示结构天麻素衍生物注射液的制备

取本发明所示结构天麻素衍生物与常规辅料混合，按照常规方法制备获得本发明所示结构天麻素衍生物注射液。

以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。

Claims

1.一种化合物，其特征在于所述的化合物的结构如下：

其中：X为卤素，R为其他化合物残基。

2.根据权利要求1所述的化合物，其特征在于X为F、Cl或Br，R为CHO、CH₂OH,CHF₂或CH₂F。

3.一种权利要求1或2所述的化合物的制备方法，其特征在于是以2-氯-4羟基苯甲醛或2-溴-4羟基苯甲醛为原料与四乙酰葡萄糖三氯乙酰亚胺酯发生Schmidt反应，然后与NaBH4或DAST进行反应得到目标化合物。

4.一种权利要求1或2所述的化合物的制剂，其特征在于所述的化合物中加入药学上可接受的辅料制备成片剂、胶囊剂、注射剂或冻干粉针剂。

5.一种权利要求1或2所述的化合物的应用，其特征在于所述的化合物在制备抗凝血药物中的应用。

6.根据权利要求5所述的化合物的应用，其特征在于所述的化合物在制备预防和/或治疗心脑血管疾病药物中的应用。