CN106749322B - 分离氧氟沙星对映异构体的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种分离氧氟沙星对映异构体的方法。该方法包括：(1)将氧氟沙星样品进行溶解，以便得到氧氟沙星溶液；(2)利用模拟移动床色谱***分离所述氧氟沙星溶液中的氧氟沙星对映异构体，色谱条件如下：色谱柱：Chiralcel OD‑H手性柱；固定相：表面涂布有纤维素‑三[3,5‑二甲苯基氨基甲酸酯]的硅胶；流动相：含有乙醇、正己烷和磷酸的混合液。本发明工艺简单，产品稳定可靠，可用于工业化大生产。

Description

分离氧氟沙星对映异构体的方法

技术领域

本发明涉及药学领域，具体地，涉及手性药物拆分，更具体地，涉及一种分离氧氟沙星对映异构体的方法。

背景技术

氧氟沙星(式1所示化合物)是一类喹诺酮类广谱抗菌药物，主要通过选择性抑制细菌DNA回旋酶的活性，阻碍细菌DNA的合成，从而达到杀菌的效果。药品氧氟沙星是其左旋和右旋异构体的消旋体化合物，其中左旋的抗菌活性更强。左氧氟沙星最早于1993年在日本上市，该药治疗呼吸道感染、泌尿生殖***感染和皮肤软组织感染等。

目前尚未见到有关模拟移动床色谱拆分制备氧氟沙星的技术方法。

发明内容

本发明旨在至少在一定程度上解决相关技术中的技术问题之一。为此，本发明的一个目的在于提出一种分离氧氟沙星对映异构体的方法，该方法可以将氧氟沙星的左旋体与右旋体分开，纯度可达到90％以上。本发明工艺简单，产品药物的成份和含量更准确，药物的效果更稳定可靠，可用于工业化大生产。

在本发明的一个方面，本发明提供了一种分离氧氟沙星对映异构体的方法。根据本发明的实施例，该方法包括：(1)将氧氟沙星样品进行溶解，以便得到氧氟沙星溶液；(2)利用模拟移动床色谱***分离所述氧氟沙星溶液中的氧氟沙星对映异构体，色谱条件如下：色谱柱：Chiralcel OD-H手性柱；固定相：表面涂布有纤维素-三[3,5-二甲苯基氨基甲酸酯]的硅胶；流动相：含有乙醇、正己烷和磷酸的混合液。

根据本发明实施例的分离氧氟沙星对映异构体的方法，能够使左旋氧氟沙星和右旋氧氟沙星得以高效拆分，左旋氧氟沙星和右旋氧氟沙星的纯度高。并且，该方法的工艺十分简便，可实现连续生产，产品质量稳定好。此外，采用乙醇、正己烷和磷酸的混合物作为流动相，无毒无害，流动相可充分回收利用，绿色环保，节约成本。

另外，根据本发明实施例的模拟移动床色谱分离制备氧氟沙星的方法，还可以具有以下附加技术特征：

在本发明的一些实施例中，所述含有乙醇、正己烷和磷酸的混合液中，所述乙醇、所述正己烷和所述磷酸的体积比为(0-100)：(0-100)：(0-100)，优选为(80-100)：(0-20)：(0.5-1)，更优选为95；5：0.5。由此有利于分离。

在本发明的一些实施例中，所述模拟移动床色谱***包括：色谱柱区：所述色谱柱区由4～12根色谱柱组成，并且所述色谱柱区分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ区，其中，每区均包括：1～3根色谱柱；进样泵；洗脱泵；萃取泵；以及电磁阀。色谱柱的数目越多，分离效果越好，但分离时间也更长，发明人大量研究发现，色谱柱区由4～12根色谱柱组成，达到分离效果和分离时间的最佳组合。

参考图1，在本发明的一些实施例中，所述模拟移动床色谱***由4～12根色谱柱组成，分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ区，每区有1～3根色谱柱。其中，Ⅰ区位于洗脱液入口与萃取液出口之间，在Ⅰ区主要实现右旋氧氟沙星的解吸；Ⅱ区位于萃取液出口与进样口之间，在Ⅱ区使右旋氧氟沙星反复吸附、解析、浓缩；Ⅲ区位于进样口和萃余液出口之间，在Ⅲ区得到左旋氧氟沙星；Ⅳ区位于萃余液出口得洗脱液入口之间，一方面Ⅲ区的洗脱液进入Ⅳ区可循环利用，另一方面，Ⅳ区将Ⅲ区和Ⅰ区隔开，从而防止萃余液中的左旋氧氟沙星进入Ⅰ区。

在本发明的一些实施例中，该方法包括：(1)将所述氧氟沙星样品溶于流动相，以便得到所述氧氟沙星溶液，其中，所述氧氟沙星溶液中氧氟沙星的浓度为0.1～200mg/ml；(2)根据所述电磁阀的切换时间的调整，以便分离得到左旋氧氟沙星和右旋氧氟沙星产品。

在本发明的一些实施例中，根据模拟移动床色谱***中电磁阀的切换时间调整，分离得到左旋氧氟沙星和右旋氧氟沙星产品。

在本发明的一些实施例中，所述色谱柱中填料的粒径为10～60μm，优选为20～30μm。由此，可以进一步提高氧氟沙星中各手性组分的分离度。粒径越小，分离效果越好。但粒径过小，会增加柱压。当填料的粒径为10～60μm，尤其是20～30μm时，分离效果好，柱压适当。

在本发明的一些实施例中，步骤(3)可分别对左旋氧氟沙星溶液和右旋氧氟沙星溶液进行进一步浓缩、重结晶、过滤、干燥，以便得到纯度在95％以上的左旋氧氟沙星与右旋氧氟沙星。

在本发明的一些实施例中，所述模拟移动床色谱***中洗脱泵流量为0ml/min～100ml/min，压力0～10MPa；进样泵流量为0ml/min～50ml/min，压力0～10MPa；萃取泵流量为0ml/min～100ml/min，压力0～10MPa。由此，可以进一步提高氧氟沙星中各手性组分的分离度。

在本发明的一些实施例中，所述电磁阀的切换时间为5min～20min。由此，便于得到高纯度的左旋氧氟沙星与右旋氧氟沙星。

在本发明的一些实施例中，所述模拟移动床色谱***的操作温度为20～40℃，优选25～30℃。由此，可以进一步提高氧氟沙星中各手性组分的分离度。

在本发明的一些实施例中，所述模拟移动床色谱***由PLC程序控制实现连续进料、连续出料。

本发明实施例的分离氧氟沙星对映异构体的方法，至少具有以下有益效果之一：

(1)利用模拟移动床色谱技术将氧氟沙星的左旋体与右旋体分开，氧氟沙星的左旋体与右旋体纯度可达到90％以上。

(2)工艺流程十分简便，可实现连续生产，产品中氧氟沙星的左旋体与右旋体的含量准确，药物的质量更稳定。

(3)整个工艺不涉及有毒有害物质，采用乙醇、正己烷和磷酸的混合物作为流动相，可充分回收利用，绿色环保、节约成本。

本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

附图说明

图1显示了根据本发明的实施例的模拟移动床色谱***的结构示意图。

具体实施方式

下面详细描述本发明的实施例。下面描述的实施例是示例性的，仅用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。实施例中未注明具体技术或条件的，按照本领域内的文献所描述的技术或条件或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。

本发明实施例中所用的氧氟沙星原料为申请人自制。

一般方法：

1、设备及条件选择

采用模拟移动床色谱***，该***由洗脱泵、进样泵、萃取泵、色谱柱、电磁阀、单向阀、控温器和PLC***控制器及计算机组成。样品溶液和洗脱液分别从样品液入口和洗脱液入口注入***，氧氟沙星的两个对映体单体分别从萃余液和萃取液两个出口中流出，每隔一定的时间，样品液和洗脱液入口、萃取液和萃余液出口沿流动相流动的方向切换至下一支色谱柱。

2、色谱柱填料及流动相(溶剂)选择

以纤维素-三[3,5-二甲苯基氨基甲酸酯]的硅胶为手性固定相，填料粒度为10～60μm，流动相为乙醇、正己烷和磷酸的混合物。

3、分离步骤

(1)样品用流动相溶解后，通过进样泵进入***，***分为4个区，色谱柱数目越多分离纯度越高，但***的复杂度及***压力越高，最适合的是4～16支，通过模拟移动床色谱***的控制器，定期控制电磁阀的开闭，使洗脱口、进样口、萃取液和萃余液出口沿流动相方向定时切换，使氧氟沙星的两个对映体单体从萃取液和萃余液出口流出***；

(2)得到的产品溶液，经过浓缩、重结晶得到纯度在90％以上的合格产品；

(3)成品分析

流动相：乙醇：正己烷：磷酸＝95：5：0.5

流速：0.5mL/min

泵：10ml分析泵

色谱柱：Chiralcel OD-H(4.6*250mm，20μm)

检测器：紫外检测器

柱温：25℃

检测波长：294nm。

实施例1

流动相：乙醇：正己烷：磷酸＝95：5：0.5

流速：1ml/min

进样浓度：氧氟沙星消旋体：0.2mg/ml

进样液流速：V1＝0.1ml/min

流动相流速：V2＝1.0ml/min

冲洗液流速：V3＝2.0ml/min

F泵压力：6.8MPa

P泵压力：7.5MPa

D泵压力：6.8MPa

切换时间：8.5min

柱温：25℃

成品分析

采用手性柱Chiralcel OD-H分析萃取液和萃余液组成，其中，左旋氧氟沙星或右旋氧氟沙星的含量分别为100％，98％。

实施例2

流动相：乙醇：正己烷：磷酸＝85：15：1

流速：1ml/min

进样浓度：氧氟沙星消旋体：0.2mg/ml

进样液流速：V1＝0.1ml/min

流动相流速：V2＝1.0ml/min

冲洗液流速：V3＝0.5ml/min

F泵压力：6.5MPa

P泵压力：4.5MPa

D泵压力：6.5MPa

切换时间：8.5min

柱温：25℃

成品分析

采用手性柱Chiralcel OD-H分析萃取液和萃余液组成，其中，左旋氧氟沙星或右旋氧氟沙星的含量分别为90％，100％。

实施例3

流动相：乙醇：正己烷：磷酸＝90：10：0.5

流速：1ml/min

进样浓度：氧氟沙星消旋体：0.2mg/ml

进样液流速：V1＝0.1ml/min

流动相流速：V2＝1.0ml/min

冲洗液流速：V3＝2.0ml/min

F泵压力：6.8MPa

P泵压力：7.5MPa

D泵压力：7.0MPa

切换时间：8.5min

柱温：25℃

成品分析

采用手性柱Chiralcel OD-H分析萃取液和萃余液组成，其中，左旋氧氟沙星或右旋氧氟沙星的含量分别为100％，90％。

对比实施例1

流动相：乙醇：正己烷：磷酸＝75：5：0.5

流速：1ml/min

进样浓度：氧氟沙星消旋体：0.2mg/ml

进样液流速：V1＝0.1ml/min

流动相流速：V2＝1.0ml/min

冲洗液流速：V3＝2.0ml/min

F泵压力：6.1MPa

P泵压力：8.2MPa

D泵压力：6.6MPa

切换时间：9min

柱温：25℃

成品分析

采用手性柱Chiralcel OD-H分析萃取液和萃余液组成，其中，左旋氧氟沙星或右旋氧氟沙星的含量分别为75％，85％，左旋氧氟沙星或右旋氧氟沙星的纯度低，分离效果显著低于实施例1-3的分离效果。

在本发明的描述中，需要理解的是，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括一个或者更多个该特征。在本发明的描述中，“多个”的含义是两个或两个以上，除非另有明确具体的限定。

在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。

尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

Claims (7)

1.一种分离氧氟沙星对映异构体的方法，其特征在于，包括：

(1)将所述氧氟沙星样品溶于流动相，以便得到所述氧氟沙星溶液，其中，所述氧氟沙星溶液中氧氟沙星的浓度为0.1～200mg/ml；

(2)利用模拟移动床色谱***分离所述氧氟沙星溶液中的氧氟沙星对映异构体，其中，根据所述电磁阀的切换时间的调整，以便分离得到左旋氧氟沙星和右旋氧氟沙星，色谱条件如下：

色谱柱：Chiralcel OD-H手性柱；

固定相：表面涂布有纤维素-三[3,5-二甲苯基氨基甲酸酯]的硅胶；

流动相：含有乙醇、正己烷和磷酸的混合液，所述含有乙醇、正己烷和磷酸的混合液中，所述乙醇、所述正己烷和所述磷酸的体积比为(80-100)：(0-20)：(0.5-1)；

所述模拟移动床色谱***包括：

色谱柱区：所述色谱柱区由4～12根色谱柱组成，并且所述色谱柱区分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ区，其中，每区均包括：

1～3根色谱柱；

进样泵，所述进样泵流量为0ml/min～50ml/min，压力0～10MPa；

洗脱泵，所述洗脱泵流量为0ml/min～100ml/min，压力0～10MPa；

萃取泵，所述萃取泵流量为0ml/min～100ml/min，压力0～10MPa；以及

电磁阀，所述电磁阀的切换时间为5min～20min；

所述模拟移动床色谱***的操作温度为20～40℃。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述含有乙醇、正己烷和磷酸的混合液中，所述乙醇、所述正己烷和所述磷酸的体积比为95：5：0.5。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱中填料的粒径为10～60μm。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述色谱柱中填料的粒径为20～30μm。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，进一步包括：

将所述左旋氧氟沙星和所述右旋氧氟沙星进行浓缩、重结晶、过滤和干燥，以便得到左旋氧氟沙星纯品与右旋氧氟沙星纯品，其中，所述左旋氧氟沙星纯品与所述右旋氧氟沙星纯品的纯度均不低于90％。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述模拟移动床色谱***的操作温度为25～30℃。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述模拟移动床色谱***由PLC程序控制，以便实现连续进料和连续出料。

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