CN106727797B - 一种提取刺五加的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种提取刺五加的方法，该方法包括以下步骤：1)粉碎；2)酶解；3)超声波提取；4)过滤；5)醇沉；6)大孔树脂吸附；7)非极性树脂吸附；8)色谱柱分离；9)灭菌超滤。该工艺使得刺五加的提取效率更高，还能够显著减少刺五加提取物中的极性和非极性杂质，并且减少病人因注射该刺五加提取物制成的刺五加注射液引起的皮疹、瘙痒、头晕、头痛和心悸等症状，提高注射药物的安全性。

Description

一种提取刺五加的方法
技术领域
本申请属于药用植物提取技术，具体涉及一种提取刺五加的方法。
背景技术
刺五加为五加科植物。
刺五加Acanthopanaxsenticosus(Rupr.et Maxim.)Harms的干燥根和根茎或茎，具有益气健脾，补肾安神的功效。其性辛、微苦，温。刺五加注射液为刺五加经提取加工制成的灭菌水溶液，功效为平补肝肾，益精壮骨。用于治疗肝肾不足所致的短暂性脑缺血发作，脑动脉硬化，脑血栓形成，脑栓塞等，亦用于治疗冠心病，心绞痛合并神经衰弱和更年期综合症等。
刺五加中的主要活性成分为黄酮类、皂苷类及多糖类化合物，皂苷类化合物含量最高的是紫丁香苷和刺五加苷E。
包括刺五加注射液在内的中药注射剂，作为现代科学技术发展而产生的中药新剂型，克服了传统中药生物利用度低、起效慢等缺点，逐渐受到广大患者的青睐。然而，临床使用过程中，中药注射液不良反应的报道日益增多，其安全性也越加受到重视，例如在2008年10月就有报道，中国某药厂生产的刺五加注射液导致多人死亡，并有多人产生严重不良的反应。
在一篇申请号为CN20140508745.9的专利申请中，提到一种低毒的刺五加注射液及其制备方法，该刺五加注射液含有以下活性成分：含总黄酮1.8-5.5mg/mL、紫丁香苷0.13-0.70mg/mL和刺五加苷E0.06-0.34mg/mL，钾离子的数量≤800μg/mL。制备方法是提取、第一次醇沉、石硫法处理、大孔树脂吸附、二次醇沉及热压超滤。该专利申请中，通过刺五加注射液的制备方法降低注射液中K离子的含量，因为K离子含量比较高时，能够导致心脏扩张和无力，甚至导致死亡。
在一篇申请号为CN201310743674.6的专利申请中，提到一种刺五加提取物、其制备方法和制剂，该制备方法包括以下步骤：
(1)用水提取刺五加药材，提取液经过浓缩，得到刺五加水煎膏；
(2)步骤(1)得到的刺五加水煎膏经过一次醇沉、浓缩，得到刺五加提取物一次醇沉膏；
(3)步骤(2)得到的刺五加提取物一次醇沉膏用石灰乳和硫酸调节pH，再静置、浓缩，得到浓缩膏；
(4)步骤(3)得到的浓缩膏经过二次醇沉、浓缩，得到刺五加提取物二次醇沉膏；
(5)步骤(4)得到的刺五加提取物二次醇沉膏经稀释后，经过大孔吸附树脂吸附、洗脱，洗脱液经过二级超滤，再进行浓缩，得到刺五加提取物。
该专利申请中提供的刺五加提取物的制备方法来减少刺五加提取物中的杂质含量，提高刺五加提取物中的有效成分纯度。
由于现在市场上生产的刺五加注射液都是从刺五加植物中提取精制出来的，所以其本身就是含有多种成分的混合物，这些成分不仅由于加工工艺的不同而不同，而且也跟原料的产地不同而不同，这些成分中不仅含有上述提到的活性成分，如黄酮类、皂苷类及多糖类化合物，还含有许多对治疗疾病没有作用的成分，甚至部分对身体有害的成分，假如患者注射了这些刺五加注射液，很可能产生皮疹、瘙痒、头晕、头痛和心悸等症状，严重了还可能引起心脏骤停，以至死亡等严重后果，所以有必要进一步研究刺五加的提纯工艺，控制其注射液中的杂质含量，来尽量减少病人的不良反应。
发明内容
在刺五加中，除了含有黄酮类、皂苷类和多糖类化合物，还含有硬脂酸、丁香苷、蔗糖、胡萝卜苷、氨基酸、芪类化合物、脂肪酸类成分和酯类化合物等，这些成分经过浓缩以后组成复杂，有的对疾病的治疗效果尚未研究清楚，有的成分对于疾病没有治疗效果，在考虑到刺五加注射液疗效的同时，尽量减少其副作用的发生是很有必要的。
本发明的目的是提供一种提取刺五加的方法，该方法能够显著提高刺五加的提取效率，并且能够显著减少刺五加提取物中的极性和非极性杂质，有效成分得到进一步提纯，减少病人皮疹、瘙痒、头晕、头痛和心悸等不良反应症状，从而增加注射药物的安全性。本发明申请的提纯工艺是在低温条件下进行，有效避免高温引起的药物变性损失。
一种提取刺五加的方法，该方法包括以下步骤：
1)粉碎：粉碎刺五加的根和茎，制成粉碎料，称取粉碎料；
2)超声波提取：超声波提取前述酶解料，获得超声波提取料；
3)过滤：过滤超声波提取料，之后向滤料中加入5倍体积纯化水，继续过滤，滤液合并，得到混合滤液；
4)醇沉：减压蒸馏浓缩混合滤液，之后向浓缩液中加入5倍体积95％乙醇，搅拌后室温静置4h，过滤得到醇沉滤液，减压蒸馏回收乙醇，得到醇沉膏；
5)大孔树脂吸附：将醇沉膏用纯化水稀释至黄酮类、皂苷类和多糖类化合物成分含量总和为8-12mg/mL，超声震荡后过滤，调节pH值5-7，组装大孔树脂柱进行吸附，上液量流速为2BV/h吸附，收集尾液；然后用60％的乙醇洗脱，洗脱液用量为2BV，流速为1.5BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，得到一次浓缩膏；其中，黄酮类、皂苷类和多糖类化合物的含量使用气相或液相色谱仪检测；
6)非极性树脂吸附：使用非极性树脂对步骤5)中的尾液进行吸附，洗脱液选用己烷或丙酮，洗脱液用量为2BV，流速为1.5BV/h，回收洗脱液，减压蒸馏得到二次浓缩膏，并将其同一次浓缩膏混合得到浓缩膏；
7)色谱柱分离：采用高效液相色谱柱对两次混合得到的浓缩膏进行分离，柱温20-35℃，流速为3L/min，同时连接近红外色谱仪，检测各个不同时间段的药物含量成分，并将黄酮类、皂苷类和多糖类化合物萃取浓缩并混合在一起得到刺五加提取物粗品；
8)灭菌超滤：调节刺五加提取物粗品pH到4.5-5.0，加纯化水后灭菌过滤后，进行10万级和3万级二级超滤，浓缩滤液至密度为1.1-1.25g/mL,即得刺五加提取物。
进一步地，步骤1)中粉碎料的粒度为60-100目。
进一步地，本申请使用酶液对粉碎料进行酶解。
进一步地，酶解条件为温度：35-45℃，酶液浓度：0.45-0.75g/mL，pH值：4.5-5.5，料液比，1:10-20，时间2-4h。
进一步地，酶液中的酶为纤维素酶和果胶酶中的一种或两种。
更进一步地，所述酶液中的酶为纤维素酶和果胶酶，并且纤维素酶和果胶酶的重量比为1：0.5-2。
进一步地，步骤2)中超声波提取条件为温度30-50℃，料液比：1：10-20，时间：2h，超声波功率：450-600W。
进一步地，大孔树脂吸附和非极性树脂吸附的吸附温度为20-25℃。
进一步地，所述的大孔树脂用的是AB-8树脂；非极性树脂用的是D-101树脂或NKA树脂。
进一步地，步骤7)中的高效液相色谱柱中的流动相A为0.5％甲酸-40％乙腈溶液(V/V)，流动相B为0.5％的甲酸溶液(V/V)。
进一步地，步骤7)中，所述的近红外色谱仪检测所用的预处理方式为：黄酮类化合物：MSC处理；皂苷类和多糖类化合物：SG平滑处理；近红外色谱检测所用的波段为：黄酮类化合物：4000-6000cm-1；皂苷类和多糖类化合物：8000-10000cm-1。
其中，提取液中的有效成分：黄酮类、皂苷类和多糖类化合物的比例为1:0.2-2:0.1-0.3，总有效成分含量为2-8mg/mL。
本发明的有益效果为：
1)刺五加的提取效率更高，传统的提取方法的提取效率大概在30-40％，本发明的提取效率能提高到60-80％。
2)本申请的提取刺五加的方法能够显著减少刺五加提取物中的极性和非极性杂质，减少病人因注射该提取物制备的刺五加注射液引起的皮疹、瘙痒、头晕、头痛和心悸等症状，提高注射药物的安全性。
3)本申请的提取刺五加的方法都是在低温条件下进行的，降低了由于高温引起的药物变性损失。
4)本申请的提取刺五加的方法能够显著降低刺五加中K+含量，防止因K+含量过高引起的心脏扩张和无力，提高刺五加的用药安全性。
5)本申请的提取刺五加的方法使得在生产过程中，能够显著提高刺五加中有效成分的监控程度，使得能够更加集中的提取有效成分，
具体实施方式
实施例1
本申请中，刺五加产自长白山地区。
刺五加的提纯工艺步骤如下：
1)粉碎：粉碎刺五加的根和茎，制成粉碎料，粉碎料的粒度为60目，称取粉碎料5kg。
2)酶解：使用酶液将前述称取的粉碎料酶解，其酶解条件为：温度：30℃，酶液浓度：0.45g/mL，pH值：4.5，料液比，1:10，时间2h，获得酶解料；所述酶液中的酶为纤维素酶。
3)超声波提取：超声波提取前述酶解料，获得超声波提取料；所述的超声波提取条件为温度：30℃，料液比：1：10，时间：2h，超声波功率：450W。
4)过滤：过滤超声波提取料，之后向滤料中加入5倍体积纯化水，继续过滤，滤液合并，得到混合滤液；
5)醇沉：减压蒸馏浓缩混合滤液，之后向浓缩液中加入5倍体积95％乙醇，搅拌后室温静置4h，过滤得到醇沉滤液，减压蒸馏回收乙醇，得到醇沉膏；
6)大孔树脂吸附：将醇沉膏用纯化水稀释至黄酮类、皂苷类和多糖类化合物成分含量总和为8mg/mL，超声震荡后过滤，调节pH值为5，组装大孔树脂柱进行吸附，上液量流速为2BV/h吸附，收集尾液；然后用60％的乙醇洗脱，洗脱液用量为2BV，流速为1.5BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，得到一次浓缩膏；大孔树脂用的是AB-8树脂；其中，黄酮类、皂苷类和多糖类化合物的含量使用液相色谱仪检测；
7)非极性树脂吸附：使用非极性树脂对步骤6)中的尾液进行吸附，洗脱液选用己烷或丙酮，洗脱液用量为2BV，流速为1.5BV/h，回收洗脱液，减压蒸馏得到二次浓缩膏，并将其同一次浓缩膏混合得到浓缩膏；所述的非极性树脂用的是NKA树脂；
8)色谱柱分离：采用高效液相色谱柱对两次混合得到的浓缩膏进行分离，柱温20-35℃，流速为3L/min，同时连接近红外色谱仪，检测各个不同时间段的药物含量成分，其中，近红外色谱仪检测所用的预处理方式为：黄酮类化合物：MSC处理；皂苷类和多糖类化合物：SG平滑处理；近红外色谱检测所用的波段为：黄酮类化合物：4000-6000cm-1；皂苷类和多糖类化合物：8000-10000cm-1。并将黄酮类、皂苷类和多糖类化合物萃取浓缩并混合在一起得到刺五加提取物粗品；高效液相色谱柱中的流动相A为0.5％甲酸-40％乙腈溶液(V/V)，流动相B为0.5％的甲酸溶液(V/V)；
9)灭菌超滤：调节刺五加提取物粗品pH到4.5，加纯化水后灭菌过滤后，进行10万级和3万级二级超滤，浓缩滤液至密度为1.1g/mL，即得刺五加提取物。
其中，提取液中有效成分，黄酮类、皂苷类和多糖类化合物的比例为1:0.2:0.1，总含量为2mg/mL。
流动相A和流动相B的梯度按照表1进行：
表1流动相梯度
Figure BDA0001150627230000061
实施例2
刺五加的提纯工艺步骤如下：
1)粉碎：粉碎刺五加的根和茎，制成粉碎料，粉碎料的粒度为100目，称取粉碎料15kg。
2)超声波提取：超声波提取前述酶解料，获得超声波提取料；所述的超声波提取条件为温度：40℃，料液比：1：20，时间：2h，超声波功率：550W。
3)过滤：过滤超声波提取料，之后向滤料中加入5倍体积纯化水，继续过滤，滤液合并，得到混合滤液；
4)醇沉：减压蒸馏浓缩混合滤液，之后向浓缩液中加入5倍体积95％乙醇，搅拌后室温静置4h，过滤得到醇沉滤液，减压蒸馏回收乙醇，得到醇沉膏；
5)大孔树脂吸附：将醇沉膏用纯化水稀释至黄酮类、皂苷类和多糖类化合物成分含量总和为12mg/mL，超声震荡后过滤，调节pH值为7，组装大孔树脂柱进行吸附，上液量流速为2BV/h吸附，收集尾液；然后用60％的乙醇洗脱，洗脱液用量为2BV，流速为1.5BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，得到一次浓缩膏；大孔树脂用的是AB-8树脂；其中，黄酮类、皂苷类和多糖类化合物的含量使用液相色谱仪检测；
6)非极性树脂吸附：使用非极性树脂对步骤6)中的尾液进行吸附，洗脱液选用己烷或丙酮，洗脱液用量为2BV，流速为1.5BV/h，回收洗脱液，减压蒸馏得到二次浓缩膏，并将其同一次浓缩膏混合得到浓缩膏；所述的非极性树脂用的是NKA树脂；
7)色谱柱分离：采用高效液相色谱柱对两次混合得到的浓缩膏进行分离，柱温20-35℃，流速为3L/min，同时连接近红外色谱仪，检测各个不同时间段的药物含量成分，其中，近红外色谱仪检测所用的预处理方式为：黄酮类化合物：MSC处理；皂苷类和多糖类化合物：SG平滑处理；近红外色谱检测所用的波段为：黄酮类化合物：4000-6000cm-1；皂苷类和多糖类化合物：8000-10000cm-1。并将黄酮类、皂苷类和多糖类化合物萃取浓缩并混合在一起得到刺五加提取物粗品；高效液相色谱柱中的流动相A为0.5％甲酸-40％乙腈溶液(V/V)，流动相B为0.5％的甲酸溶液(V/V)。
8)灭菌超滤：调节刺五加提取物粗品pH到5.0，加纯化水后灭菌过滤后，进行10万级和3万级二级超滤，浓缩滤液至密度为1.25g/mL,即得刺五加提取物。
其中，提取液中有效成分，黄酮类、皂苷类和多糖类化合物的比例为1:2:0.3，总含量为8mg/mL。
其中，洗脱流动相A和流动相B的梯度按照表1进行。
实施例3
1)粉碎：粉碎刺五加的根和茎，制成粉碎料，粉碎料的粒度为80目，称取粉碎料10kg。
3)超声波提取：超声波提取前述粉碎料，获得超声波提取料；所述的超声波提取条件为温度：50℃，料液比：1：20，时间：2h，超声波功率：600W。
4)过滤：过滤超声波提取料，之后向滤料中加入5倍体积纯化水，继续过滤，滤液合并，得到混合滤液；
5)醇沉：减压蒸馏浓缩混合滤液，之后向浓缩液中加入5倍体积95％乙醇，搅拌后室温静置4h，过滤得到醇沉滤液，减压蒸馏回收乙醇，得到醇沉膏；
6)大孔树脂吸附：将醇沉膏用纯化水稀释至黄酮类、皂苷类和多糖类化合物成分含量总和为10mg/mL，超声震荡后过滤，调节pH值为7，组装大孔树脂柱进行吸附，上液量流速为2BV/h吸附，收集尾液；然后用60％的乙醇洗脱，洗脱液用量为2BV，流速为1.5BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，得到一次浓缩膏；大孔树脂用的是AB-8树脂；其中，黄酮类、皂苷类和多糖类化合物的含量使用液相色谱仪检测；
7)非极性树脂吸附：使用非极性树脂对步骤6)中的尾液进行吸附，洗脱液选用己烷或丙酮，洗脱液用量为2BV，流速为1.5BV/h，回收洗脱液，减压蒸馏得到二次浓缩膏，并将其同一次浓缩膏混合得到浓缩膏；所述的非极性树脂用的是D-101树脂；
8)色谱柱分离：采用高效液相色谱柱对两次混合得到的浓缩膏进行回流分离，柱温20-35℃，流速为3L/min，同时连接近红外色谱仪，检测各个不同时间段的药物含量成分，其中，近红外色谱仪检测所用的预处理方式为：黄酮类化合物：MSC处理；皂苷类和多糖类化合物：SG平滑处理；近红外色谱检测所用的波段为：黄酮类化合物：4000-6000cm-1；皂苷类和多糖类化合物：8000-10000cm-1。并将黄酮类、皂苷类和多糖类化合物萃取浓缩并混合在一起得到刺五加提取物粗品；高效液相色谱柱中的流动相A为0.5％甲酸-40％乙腈溶液(V/V)，流动相B为0.5％的甲酸溶液(V/V)；
9)灭菌超滤：调节刺五加提取物粗品pH到4.8，加纯化水后灭菌过滤后，进行10万级和3万级二级超滤，浓缩滤液至密度为1.20g/mL,即得刺五加提取物。
其中，提取液中有效成分，黄酮类、皂苷类和多糖类化合物的比例为1:0.5:0.2，总含量为6mg/mL。
其中，洗脱流动相A和流动相B的梯度按照表1进行。
实施例4
1)粉碎：粉碎刺五加的根和茎，制成粉碎料，粉碎料的粒度为100目，称取粉碎料12kg。
2)酶解：使用酶液将前述称取的粉碎料酶解，其酶解条件为：温度：42℃，酶液浓度：0.7g/mL，pH值：4.8，料液比：1:20，时间3h，获得酶解料。酶液中的酶为纤维素酶和果胶酶中，所述酶液中纤维素酶和果胶酶的比例为1：1。
3)超声波提取：超声波提取前述酶解料，获得超声波提取料；所述的超声波提取条件为温度：40℃，料液比：1：20，时间：2h，超声波功率：550W；
4)过滤：过滤超声波提取料，之后向滤料中加入5倍体积纯化水，继续过滤，滤液合并，得到混合滤液；
5)醇沉：减压蒸馏浓缩混合滤液，之后向浓缩液中加入5倍体积95％乙醇，搅拌后室温静置4h，过滤得到醇沉滤液，减压蒸馏回收乙醇，得到醇沉膏；
6)大孔树脂吸附：将醇沉膏用纯化水稀释至黄酮类、皂苷类和多糖类化合物成分含量总和为11mg/mL，超声震荡后过滤，调节pH值为6，组装大孔树脂柱进行吸附，上液量流速为2BV/h吸附，收集尾液；然后用60％的乙醇洗脱，洗脱液用量为2BV，流速为1.5BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，得到一次浓缩膏；大孔树脂用的是AB-8树脂；其中，黄酮类、皂苷类和多糖类化合物的含量使用液相色谱仪检测；
7)非极性树脂吸附：使用非极性树脂对步骤6)中的尾液进行吸附，洗脱液选用己烷或丙酮，洗脱液用量为2BV，流速为1.5BV/h，回收洗脱液，减压蒸馏得到二次浓缩膏，并将其同一次浓缩膏混合得到浓缩膏；所述的非极性树脂用的是NKA树脂；
8)色谱柱分离：采用高效液相色谱柱对两次混合得到的浓缩膏进行回流分离，柱温20-35℃，流速为3L/min，同时连接近红外色谱仪，检测各个不同时间段的药物含量成分，其中，近红外色谱仪检测所用的预处理方式为：黄酮类化合物：MSC处理；皂苷类和多糖类化合物：SG平滑处理；近红外色谱检测所用的波段为：黄酮类化合物：4000-6000cm-1；皂苷类和多糖类化合物：8000-10000cm-1。并将黄酮类、皂苷类和多糖类化合物萃取浓缩并混合在一起得到刺五加提取物粗品；高效液相色谱柱中的流动相A为0.5％甲酸-40％乙腈溶液(V/V)，流动相B为0.5％的甲酸溶液(V/V)；
9)灭菌超滤：调节刺五加提取物粗品pH到4.7，加纯化水后灭菌过滤后，进行10万级和3万级二级超滤，浓缩滤液至密度为1.15g/mL,即得刺五加提取物。
其中，提取液中有效成分，黄酮类、皂苷类和多糖类化合物的比例为1:1:0.2，总含量为5mg/mL。
其中，洗脱流动相A和流动相B的梯度按照表1进行。
实验例1
申请人外购市售的刺五加注射液，同本申请的实施例中的刺五加提取物制备的刺五加注射液进行对比试验，结果见下表1：
表2对比试验
1小白鼠试验，将小鼠分为4批，每批40只，每10只为一组，分别编号为组1、组2、组3和组4静脉注射刺五加注射液，每组注射剂量分别为4mL/kg、6mL/kg、8mL/kg和9mL/kg；
2人体试验，同样分为4批，每批16人，每4人为一组，静脉注射刺五加注射液，每组注射剂量分别为4mL/kg、6mL/kg、8mL/kg和9mL/kg；记录统计如下：
Figure BDA0001150627230000101
Figure BDA0001150627230000111
由以上试验可知，采用本实施例方法生产的刺五加提取物制备的刺五加注射液相比于市售产品，产生异常反应的小白鼠比较少，产生过敏反应的人也比较少，这说明本申请的工艺能够显著减少病人因注射该注射液引起的皮疹、瘙痒、头晕、头痛和心悸等症状，提高了注射药物的安全性。
实验例2
表3提取效率对比
传统工艺 实施例1 实施例2 实施例3 实施例4
提取效率 32％ 56％ 75％ 70％ 66％
本申请采用的工艺方法相比于传统工艺，其提取效率有了显著的增加，效率提高一倍有余；采用本工艺能够减少降低原料的用量，节省成本，在低温下进行操作也减少降低了有效成分的损失。
实验例3
表4刺五加提取物中K+含量对比
Figure BDA0001150627230000112
注：以上K+含量采用原子吸收法检测。
在国家标准中，制剂类K+含量控制在1000μg/mL以下，在传统工艺中，虽然能够控制K+含量在1000μg/mL以下，但是距离上限很接近，一旦在操作中出现失误或工艺不稳定出现波动的话，很容易超出国家标准限定的最高含量，即便有后期的质量检测，但是也无形中增加了流向市场的风险和工厂的生产成本(不合格产品回收销毁等)，而使用本方法可见其K+含量都在600μg/mL以下，相比于传统工艺，K+含量降低1/3，其有效防止因K+含量过高引起的心脏扩张和无力，导致病人身体不舒服，甚至死亡的风险，安全性能更高。
对所公开的实施例的上述说明，使本领域专业技术人员能够实现或使用本发明。对这些实施例的多种修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，本文中所定义的一般原理可以在不脱离本发明的精神或范围的情况下，在其它实施例中实现。因此，本发明将不会被限制于本文所示的这些实施例，而是要符合与本文所公开的原理和新颖特点相一致的最宽的范围。

Claims (3)

1.一种提取刺五加的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：
1)粉碎：粉碎刺五加的根和茎，制成粉碎料，称取粉碎料；
2)超声波提取：超声波提取前述粉碎料，获得超声波提取料；
3)过滤：过滤超声波提取料，之后向滤料中加入5倍体积纯化水，继续过滤，滤液合并，得到混合滤液；
4)醇沉：减压蒸馏浓缩混合滤液，之后向浓缩液中加入5倍体积95％乙醇，搅拌后室温静置4h，过滤得到醇沉滤液，减压蒸馏回收乙醇，得到醇沉膏；
5)大孔树脂吸附：将醇沉膏用纯化水稀释至黄酮类、皂苷类和多糖类化合物成分含量总和为8-12mg/mL，超声震荡后过滤，调节pH值5-7，组装大孔树脂柱进行吸附，上液量流速为2BV/h吸附，收集尾液；然后用60％的乙醇洗脱，洗脱液用量为2BV，流速为1.5BV/h，收集洗脱液，减压浓缩，得到一次浓缩膏；其中，黄酮类、皂苷类和多糖类化合物的含量使用气相或液相色谱仪检测；所述大孔树脂为AB-8树脂；
6)非极性树脂吸附：使用非极性树脂对步骤5)中的尾液进行吸附，洗脱液选用己烷或丙酮，洗脱液用量为2BV，流速为1.5BV/h，回收洗脱液，减压蒸馏得到二次浓缩膏，并将其同一次浓缩膏混合得到浓缩膏；所述非极性树脂为NKA树脂或D-101树脂；
7)色谱柱分离：采用高效液相色谱柱对两次混合得到的浓缩膏进行分离，柱温20-35℃，流速为3L/min，同时连接近红外色谱仪，检测各个不同时间段的药物含量成分，并将黄酮类、皂苷类和多糖类化合物萃取浓缩并混合在一起得到刺五加提取物粗品；
8)灭菌超滤：调节刺五加提取物粗品pH到4.5-5.0，加纯化水后灭菌过滤后，进行10万级和3万级二级超滤，浓缩滤液至密度为1.1-1.25g/mL,即得刺五加提取物；
其中，步骤1)中所述粉碎料使用酶液对其进行酶解；所述酶液中的酶为纤维素酶和果胶酶中的一种或两种；所述酶解的条件为温度：35-45℃，酶液浓度：0.45-0.75g/mL，pH值：4.5-5.5，料液比，1:10-20，时间2-4h；
步骤2)中所述超声波提取条件为温度30-50℃，料液比1:10-20，时间2h，超声波功率450-600W；
所述大孔树脂吸附和非极性树脂吸附的吸附温度为20-25℃；
步骤7)中，所述高效液相色谱柱中的流动相A为0.5％甲酸-40％乙腈溶液(V/V)，流动相B为0.5％的甲酸溶液(V/V)；所述近红外色谱仪检测所用的预处理方式为：黄酮类化合物：MSC处理；皂苷类和多糖类化合物：SG平滑处理；近红外色谱检测所用的波段为：黄酮类化合物：4000-6000cm-1；皂苷类和多糖类化合物：8000-10000cm-1。
2.根据权利要求1所述的提取刺五加的方法，其特征在于，步骤1)中粉碎料的粒度为60-100目。
3.根据权利要求1所述的提取刺五加的方法，其特征在于，所述的大孔树脂采用AB-8树脂；非极性树脂采用D-101树脂或NKA树脂。
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