CN106701584B

CN106701584B - 一种微藻采收方法及其应用

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Publication number: CN106701584B
Application number: CN201510436988.0A
Authority: CN
Inventors: 刘伟; 孙春燕
Original assignee: Sinopec Research Institute of Petroleum Processing; China Petrochemical Corp
Current assignee: Sinopec Research Institute of Petroleum Processing; China Petrochemical Corp
Priority date: 2015-07-23
Filing date: 2015-07-23
Publication date: 2019-11-15
Anticipated expiration: 2035-07-23
Also published as: CN106701584A

Abstract

本发明涉及微藻生物领域，公开了一种微藻采收方法及其应用。所述方法包括：当培养微藻至培养液的OD₆₈₀值为1‑10、pH值为7.5‑14时，向培养液中补加作为微藻培养营养成分的三价铁离子化合物，待培养液中的微藻分层沉降后分离微藻。本发明的方法对培养液性质不会产生影响，使得培养液(包括培养液中的藻种)能够重复利用且不会产生废液排放，而且有利于微藻的聚集、采收，使得微藻收集简单且能够降低微藻收集成本。

Description

一种微藻采收方法及其应用

技术领域

本发明涉及微藻生物领域，具体地，涉及一种微藻采收方法及其应用。

背景技术

微藻是一种分布广、生长速度快、结构简单的单细胞生物。通过自身特有的代谢过程，可以生成多种结构独特的有价值化合物，包括多糖、蛋白质、维生素、脂肪酸及脂肪酸脂，是很有前景的经济作物。在微藻生长的同时，还可以固定大量的二氧化碳，对减排大气中的二氧化碳意义重大。

由于微藻体积较小，在水中的浓度低，通常浓度不超过百分之一，使得在微藻养殖过程中，收集困难，成本也十分巨大。

目前，现有常用的微藻收集的方法包括离心过滤法、絮凝剂沉淀法和pH 调节法等。离心过滤法虽然能达到收集微藻的目的，但需要除去大量水分，运行能耗大，成本高，操作繁琐，劳动强度大。

絮凝剂沉淀法操作简便、易行，不需要专门的设备，采收过程能耗低。但需要加入各种不同的无机或有机絮凝剂。无机絮凝剂如硫酸铝、硫酸铁等，会造成大量的废水排放，造成环境污染。有机絮凝剂则往往用量较大，成本较高。CN103484371A公开了一种加入阳离子淀粉絮凝剂的收集方法，但加入量较大，为微藻干重的1-20％，影响微藻的质量。CN103881922A公开了以巨大芽孢杆菌发酵产物为絮凝剂，对海洋微藻具有明显的絮凝作用，絮凝剂添加浓度为每毫升藻液0.3-3.0毫克，与微藻干重相比，用量较大。而且不能忽略的是，絮凝剂沉淀法由于在培养液中引入了其他的物质，不利于培养液的重复利用。

pH调节法是通过改变培养液的pH值范围，诱导微藻原位絮凝，实现沉降分离，但往往需要将pH回复到养殖需要的pH范围，操作较为繁琐且由于引入了其他离子不利于培养液的重复利用。pH调节包括酸性调节和碱性调节。CN103266063A公开了通过向培养液中加入酸液，调节培养液pH至 3.7-4.3的范围使微藻自絮凝沉降，沉降后的清液再加碱使其回复到养殖需要的pH范围。CN102492624A公开了通过氨调节培养液pH，待微藻沉降后，通过加热和二氧化碳回复培养液pH值到正常范围。

在微藻培养研究中，如何在保证培养液(包括培养液中的藻种)能够重复利用且不会产生废液排放的前提下，使得微藻收集简单并降低微藻收集的成本，是当前致力于微藻培养的研究人员关注的热门课题，但是，至今仍未获得一种能够有效实现上述目的的微藻采收方法。

发明内容

本发明的目的是为了克服现有技术中的上述缺陷，提供一种微藻采收方法及其应用，该方法对培养液性质不会产生影响，使得培养液(包括培养液中的藻种)能够重复利用而不会产生废液排放，而且有利于微藻的聚集、采收，使得微藻收集简单且能够降低微藻收集成本。

本发明的发明人在研究中发现，当培养微藻至培养液的OD₆₈₀值为1-10、 pH值为7.5-14时，向培养液中补加作为微藻培养营养成分的三价铁离子化合物，待培养液中的微藻分层沉降后分离微藻，能够使培养液中的微藻自然分层沉降，不仅对培养液的性质不会产生影响，使得培养液(包括培养液中的藻种)能够重复利用而不会产生废液排放，而且有利于微藻的聚集、采收，使得微藻收集简单且能够降低微藻收集成本。

因此，为了实现上述目的，第一方面，本发明提供了一种微藻采收方法，所述方法包括：当培养微藻至培养液的OD₆₈₀值为1-10、pH值为7.5-14时，向培养液中补加作为微藻培养营养成分的三价铁离子化合物，待培养液中的微藻分层沉降后分离微藻。

第二方面，本发明提供了一种上述方法在微藻培养中的应用。

本发明的微藻采收方法，对培养液性质不会产生影响，使得培养液(包括培养液中的藻种)能够重复利用而不会产生废液排放，而且有利于微藻的聚集、采收，使得微藻收集简单(只需过滤分离或分液分离即可，而无需进行离心分离)且能够降低微藻收集成本，采用本发明的方法采收微藻，培养液中的微藻自然分层沉降1h后沉降率高达83％，自然分层沉降12h后沉降率高达97％。根据本发明的一种优选的实施方式，当三价铁离子化合物为柠檬酸铁铵和EDTA铁的混合物，且柠檬酸铁铵和EDTA铁的摩尔比为2-1：1 时，能够进一步提高微藻的沉降率，更有利于微藻的聚集、采收。

本发明的其它特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。

附图说明

图1是本发明实施例1中单针藻聚集前分散在培养液中的状态图。

图2是本发明实施例1中分层沉降12h后的培养液中的单针藻的状态图。

具体实施方式

以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。

第一方面，本发明提供了一种微藻采收方法，该方法包括：当培养微藻至培养液的OD₆₈₀值为1-10、pH值为7.5-14时，向培养液中补加作为微藻培养营养成分的三价铁离子化合物，待培养液中的微藻分层沉降后分离微藻。

本发明方法中，为了进一步提高微藻聚集的效果，优选情况下，向培养液中补加三价铁离子化合物时培养液的pH值为8-11。

本发明方法中，对于微藻的种类没有特别的限定，可以为本领域常规的培养体系为碱性的各种微藻，优选情况下，微藻为单针藻(Monoraphidium ) 和/或小球藻(Chlorella )。

本发明方法中，对培养时采用的培养基、培养条件及光生物反应器等没有特别的限定，可以分别为本领域常规使用的各种培养基、培养条件及光生物反应器等，其中，单针藻和小球藻的培养条件可以包括：温度为15-35℃、光照强度为1000-5000Lux、pH值为7.5-13。本领域技术人员应该理解的是，在实际的微藻培养过程中，培养温度、光照强度和培养液的pH值往往无法控制在一个精确的点值，而是在一个范围内进行波动。

本发明方法中，当培养微藻至培养液的OD₆₈₀值为1-10时，微藻培养进入培养周期的后期，即进入平台期，然后聚集进入平台期的微藻并进行分离采收。

本发明方法中，三价铁离子化合物的补加量的可选择范围较宽，综合考虑微藻聚集的效果、重复利用的方便性和成本，优选情况下，以三价铁离子计，对于每升培养液，三价铁离子化合物的补加量为0.001-0.1mmol。为了进一步提高微藻聚集的效果，进一步优选地，以三价铁离子计，对于每升培养液，所述三价铁离子化合物的补加量为0.01-0.05mmol。

本发明方法中，对于三价铁离子化合物的种类没有特别的限定，可以为本领域常用的作为微藻培养营养成分的各种三价铁离子化合物，为了进一步提高微藻聚集的效果，优选情况下，三价铁离子化合物为柠檬酸铁铵和EDTA 铁(又称乙二胺四乙酸铁)中的一种或两种，本发明的发明人在研究中发现，当三价铁离子化合物为柠檬酸铁铵和EDTA铁的混合物时，能够进一步提高微藻聚集的效果，且当柠檬酸铁铵和EDTA铁的摩尔比为2-1：1时，能够更进一步提高微藻聚集的效果，因此，三价铁离子化合物进一步优选为柠檬酸铁铵和EDTA铁的混合物，更优选地，柠檬酸铁铵和EDTA铁的摩尔比为2-1：1。

本发明方法中，本发明的发明人在研究中进一步发现，在补加三价铁离子化合物后，降低培养液的混合强度，能够促进微藻聚集体进一步互相聚集，形成更大体积的聚集体，更有利于培养液中微藻的快速分层沉降。因此，优选情况下，在补加三价铁离子化合物后，降低培养液的混合强度。

本发明方法中，为了进一步提高微藻聚集的效果，优选情况下，降低后的混合强度为降低前混合强度的0％-99％，进一步优选为0％-80％，更优选为0％-50％。

本发明方法中，优选情况下，降低混合强度后，混合1-10天，进一步优选1-5天，然后停止混合。

本发明方法中，对于培养液的混合方式没有特别的限定，可以为本领域常用的各种方式，优选情况下，培养液的混合方式包括磁力搅拌、机械搅拌和气体鼓泡流化。

本发明方法中，将沉降后的微藻培养液进行微藻分离时，可以通过过滤分离或者分液分离的方式进行分离而无需进行离心分离。过滤分离可以为常压过滤分离、加压过滤分离或真空过滤分离，优选为常压过滤分离；分液分离可以为通过分液漏斗的方式进行分离。对于过滤分离(包括常压过滤分离、加压过滤分离和真空过滤分离)和分液分离(如通过分液漏斗的方式进行分离)的方法和条件没有特别的限定，可以为本领域公知的各种方法和条件，此为本领域技术人员所公知，在此不再赘述。

第二方面，本发明提供了上述方法在微藻培养中的应用。

实施例

以下将通过实施例和对比例对本发明进行详细描述。以下实施例和对比例中，微藻培养液的光密度值(OD值)测定：光密度值用分光光度计测定，以蒸馏水作对照，测定微藻培养液在波长680nm处的吸光值，作为微藻浓度的指标。

微藻培养液自然分层沉降T小时后的微藻沉降率的测定方法包括：测量 680nm波长下停止混合时微藻培养液的OD值OD₀，将微藻培养液自然分层沉降T小时后，测量680nm波长下上清液的OD值OD_T。则微藻培养液自然分层沉降T小时后的微藻沉降率的计算公式为：(OD₀-OD_T)/OD₀×100％。

微藻聚集状态通过光学显微镜观察，光学显微镜的型号为44X-9，购自上海永亨光学仪器制造有限公司。

单针藻(Monoraphidium )购自中科院武汉水生生物研究所，小球藻 (Chlorella )购自中科院武汉植物园。

炼厂制氢尾气为中国石化公司石家庄炼化分公司的炼厂制氢尾气，二氧化碳的含量为15-20重量％，使用前进行净化除去固体颗粒物并进行冷却。

微藻培养时使用的培养基A：培养基成份见表1-2，在培养基A中NaNO₃为氮源。

表1 培养基A

组分	含量，mg/L
		K<sub>2</sub>HPO<sub>4</sub>·3H<sub>2</sub>O	40
NaNO<sub>3</sub>	1500
		Na<sub>2</sub>CO<sub>3</sub>	20
MgSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O	75
		CaCl<sub>2</sub>·2H<sub>2</sub>O	36
柠檬酸	6
		柠檬酸铁铵	6
EDTA铁	3
		EDTA-2Na	1
微量元素A5	1

表2 微量元素A5

组分	组成，mg/L
		H<sub>3</sub>BO<sub>3</sub>	2860
MnCl<sub>2</sub>·4H<sub>2</sub>O	1810
		ZnSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O	222
CuSO<sub>4</sub>·5H<sub>2</sub>O	79
		NaMoO<sub>4</sub>·5H<sub>2</sub>O	390
Co(NO<sub>3</sub>)<sub>2</sub>·6H<sub>2</sub>O	50

微藻培养时使用的BG11培养基：培养基成份见表3-4，在BG11培养基中NaNO₃为氮源。

表3 BG11培养基

组分	含量，mg/L
		K<sub>2</sub>HPO<sub>4</sub>·3H<sub>2</sub>O	40
NaNO<sub>3</sub>	1500
		Na<sub>2</sub>CO<sub>3</sub>	20
MgSO<sub>4</sub>·7H<sub>2</sub>O	75
		CaCl<sub>2</sub>·2H<sub>2</sub>O	36
柠檬酸	6
		柠檬酸铁铵	6
EDTA-2Na	1
		微量元素A5	1

表4 微量元素A5

实施例1

本实施例用于说明本发明的微藻采收方法。

将单针藻藻种接种到装有1000mL培养液的2000mL三角瓶中，接种单针藻藻种后培养液的OD₆₈₀值为0.02。培养液由硝酸钠、碳酸氢钠和培养基 A复合组成，每升培养液中硝酸钠的含量为0.018mol，碳酸氢钠的含量为 1mol，柠檬酸铁铵的含量为0.013mmol，EDTA铁的含量为0.0065mmol。在 20-30℃、光照强度1800-2200Lux、pH值7.5-12下培养，pH值由高纯二氧化碳调节，并进行磁力搅拌，搅拌转速为300rpm。培养15天后，培养液的 OD₆₈₀值为3.1，pH值为8，对于每升培养液，向培养液中补加0.013mmol 柠檬酸铁氨和0.0065mmol EDTA铁的混合物，并将搅拌转速降为150rpm。5 天(5天内温度为20-30℃、光照强度为1800-2200Lux、pH值为8-10)后停止搅拌，测得培养液的OD₆₈₀值为3.3，培养液中的单针藻快速分层沉降，1 小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为0.56，即自然分层沉降1小时后的单针藻的沉降率为83％。12小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为0.1，即自然分层沉降12小时后的单针藻的沉降率为97％。不同阶段单针藻的形态如图1和图 2所示。将分层沉降12小时后的培养液用320目滤布过滤，得到30g单针藻藻泥。

实施例2

本实施例用于说明本发明的微藻采收方法。

将小球藻藻种接种到消毒后并装有28L培养液的封闭式光生物反应器中，接种小球藻藻种后培养液的OD₆₈₀值为0.08。封闭式光生物反应器为聚氯乙烯薄膜袋，直径为220mm、高为1500mm，无内导流筒。培养液由硝酸钠、碳酸氢钠和培养基A复合组成，每升培养液中硝酸钠的含量为0.018mol，碳酸氢钠的含量为1mol，柠檬酸铁铵的含量为0.013mmol，EDTA铁的含量为0.0065mmol。炼厂制氢尾气经净化并冷却至25℃后从光生物反应器底部通过气石分散以鼓泡形式进入，并产生流化搅动、混合，炼厂制氢尾气的进气流量为200L/h。在20-24℃、光照强度1800-5000Lux、pH值7.5-10.5下培养，pH值通过炼厂制氢尾气的进气流量和进气时间控制。培养15天后，培养液的OD₆₈₀值为3.7，pH值为9，对于每升培养液，向培养液中补加 0.005mmol柠檬酸铁氨和0.005mmol EDTA铁的混合物，并将进气流量降为40L/h。5天(5天内温度为20-24℃、光照强度为1800-5000Lux、pH值为 9-11)后停止进气，测得培养液的OD₆₈₀值为3.9，培养液中的小球藻快速分层沉降，1小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为0.74，即自然分层沉降1小时后的小球藻的沉降率为81％。12小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为0.19，即自然分层沉降12小时后的小球藻的沉降率为95.1％。将分层沉降12小时后的培养液用G3玻砂过滤，得到370g小球藻藻泥。

实施例3

本实施例用于说明本发明的微藻采收方法。

将单针藻藻种接种到装有10,000L培养液的开放式跑道池光生物反应器中，接种单针藻藻种后培养液的OD₆₈₀值为0.078。开放式跑道池光生物反应器的跑道池面积为50m²。培养液由硝酸钠、碳酸氢钠和培养基A复合组成，每升培养液中硝酸钠的含量为0.018mol，碳酸氢钠的含量为1mol，柠檬酸铁铵的含量为0.013mmol，EDTA铁的含量为0.0065mmol。炼厂制氢尾气经净化并冷却至25℃后从跑道池表面通过分散器鼓泡形式进入培养液中，炼厂制氢尾气的进气流量为2000L/h。在22-25℃、光照1800-5000Lux、pH 值8-12、搅拌转速200rpm下培养，pH值通过炼厂制氢尾气的进气流量和进气时间控制。培养15天后，培养液的OD₆₈₀值为1.8，pH值为9，对于每升培养液，向培养液中补加0.03mmol柠檬酸铁氨和0.02mmol的EDTA铁，并将进气流量降为1600L/h，将搅拌转速降为160rpm。5天(5天内温度为 22-25℃、光照强度为1800-5000Lux、pH值为9-11)后停止搅拌和进气，测得培养液的OD₆₈₀值为1.9，培养液中的单针藻快速分层沉降，1小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为0.34，即自然分层沉降1小时后的单针藻的沉降率为 82.1％。12小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为0.076，即自然分层沉降12小时后的单针藻的沉降率为96％。将分层沉降12小时后的培养液通过分液漏斗进行分离，得到22Kg单针藻藻泥。

实施例4

按照实施例1的方法，不同的是，向培养液中补加的三价铁离子化合物为0.005mmol柠檬酸铁铵和0.015mmol的EDTA铁。

5天后停止搅拌，测得培养液的OD₆₈₀值为3.24，培养液中的单针藻快速分层沉降，1小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为0.64，即自然分层沉降1 小时后的单针藻的沉降率为80.2％。12小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为 0.26，即自然分层沉降12小时后的单针藻的沉降率为92％。将分层沉降12 小时后的培养液用320目滤布过滤，得到28.4g单针藻藻泥。

实施例5

按照实施例1的方法，不同的是，向培养液中补加的三价铁离子化合物为0.02mmol柠檬酸铁氨。

5天后停止搅拌，测得培养液的OD₆₈₀值为3.2，培养液中的单针藻快速分层沉降，1小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为0.65，即自然分层沉降1小时后的单针藻的沉降率为79.7％。12小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为0.31，即自然分层沉降12小时后的单针藻的沉降率为90.3％。将分层沉降12小时后的培养液用320目滤布过滤，得到28g单针藻藻泥。

实施例6

按照实施例1的方法，不同的是，向培养液中补加的三价铁离子化合物为0.02mmol的EDTA铁。

5天后停止搅拌，测得培养液的OD₆₈₀值为3.21，培养液中的单针藻快速分层沉降，1小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为0.85，即自然分层沉降1 小时后的单针藻的沉降率为73.5％。12小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为 0.47，即自然分层沉降12小时后的单针藻的沉降率为85.4％。将分层沉降 12小时后的培养液用320目滤布过滤，得到26.4g单针藻藻泥。

实施例7

按照实施例1的方法，不同的是，向培养液中补加的三价铁离子化合物为0.002mmol柠檬酸铁氨和0.001mmol的EDTA铁。

5天后停止搅拌，测得培养液的OD₆₈₀值为3.19，培养液中的单针藻快速分层沉降，1小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为0.80，即自然分层沉降1 小时后的单针藻的沉降率为74.9％。12小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为 0.34，即自然分层沉降12小时后的单针藻的沉降率为89.3％。将分层沉降 12小时后的培养液用320目滤布过滤，得到27.6g单针藻藻泥。

实施例8

按照实施例1的方法，不同的是，用BG11培养基代替培养基A，且每升培养液中柠檬酸铁铵的含量为0.02mmol；培养15天后，对于每升培养液，向培养液中补加0.02mmol柠檬酸铁铵。

5天后停止搅拌，测得培养液的OD₆₈₀值为3.27，培养液中的单针藻快速分层沉降，1小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为0.75，即自然分层沉降1 小时后的单针藻的沉降率为77.1％。12小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为0.33，即自然分层沉降12小时后的单针藻的沉降率为89.9％。将分层沉降 12小时后的培养液用320目滤布过滤，得到27.8g单针藻藻泥。

实施例9

按照实施例1的方法，不同的是，培养15天后，向培养液中补加柠檬酸铁铵和EDTA铁后，保持搅拌转速不变。

5天后停止搅拌，测得培养液的OD₆₈₀值为3.28，培养液中的单针藻快速分层沉降，1小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为0.61，即自然分层沉降1 小时后的单针藻的沉降率为81.4％。12小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为 0.29，即自然分层沉降12小时后的单针藻的沉降率为91.2％。将分层沉降 12小时后的培养液用320目滤布过滤，得到28.2g单针藻藻泥。

实施例10

按照实施例1的方法，不同的是，在20-30℃、光照强度1800-2200Lux、 pH值11-13.5下培养，培养15天后，培养液的OD₆₈₀值为2.7，pH值为13。

5天后停止搅拌，测得培养液的OD₆₈₀值为2.8，培养液中的单针藻快速分层沉降，1小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为0.72，即自然分层沉降1小时后的单针藻的沉降率为74.3％。12小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为0.38，即自然分层沉降12小时后的单针藻的沉降率为86.4％。将分层沉降12小时后的培养液用320目滤布过滤，得到26.7g单针藻藻泥。

对比例1

按照实施例1的方法，不同的是，培养15天后，并不向培养液中补加柠檬酸铁铵和EDTA铁，且保持搅拌转速不变(300rpm)。

5天后停止搅拌，测得培养液的OD₆₈₀值为3.17，培养液中的单针藻快速分层沉降，1小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为1.32，即自然分层沉降1 小时后的单针藻的沉降率为58.4％。12小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为 0.98，即自然分层沉降12小时后的单针藻的沉降率为69.1％。将分层沉降 12小时后的培养液用320目滤布过滤，得到21.4g单针藻藻泥。

对比例2

按照实施例1的方法，不同的是，培养15天后，将搅拌转速降为150rpm，但并不向培养液中补加柠檬酸铁铵和EDTA铁。

5天后停止搅拌，测得培养液的OD₆₈₀值为3.18，培养液中的单针藻快速分层沉降，1小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为1.28，即自然分层沉降1 小时后的单针藻的沉降率为59.7％。12小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为 0.88，即自然分层沉降12小时后的单针藻的沉降率为72.3％。将分层沉降 12小时后的培养液用320目滤布过滤，得到22.4g单针藻藻泥。

对比例3

按照实施例1的方法，不同的是，培养15天后，向培养液中补加0.02mmol 的三氯化铁，替代0.013mmol柠檬酸铁铵和0.0065mmol的EDTA铁，并将搅拌转速降为150rpm。

5天后停止搅拌，测得培养液的OD₆₈₀值为3.28，培养液中的单针藻快速分层沉降，1小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为0.98，即自然分层沉降1 小时后的单针藻的沉降率为70.1％。12小时后，测得上清液的OD₆₈₀值为 0.58，即自然分层沉降12小时后的单针藻的沉降率为82.3％。将分层沉降 12小时后的培养液用320目滤布过滤，得到25.4g单针藻藻泥。

将实施例1与实施例4-8比较可知，以三价铁离子计，对于每升培养液，三价铁离子化合物的补加量为0.01-0.05mmol时，能够进一步提高微藻的沉降率，更有利于微藻的聚集、采收；而且当向培养液中补加三价铁离子化合物为柠檬酸铁铵和EDTA铁的混合物，且柠檬酸铁铵和EDTA铁的摩尔比为 2-1：1时，能够更进一步提高微藻的沉降率，更有利于微藻的聚集、采收。

将实施例1与实施例9比较可知，在向培养液中补加三价铁离子化合物后，降低培养液的混合强度，能够进一步提高微藻的沉降率，更有利于微藻的聚集、采收。

将实施例1与实施例10比较可知，向培养液中补加三价铁离子化合物时培养液的pH值为8-11时，能够进一步提高微藻的沉降率，更有利于微藻的聚集、采收。

将实施例1与对比例1-3比较可知，培养15天后，向培养液中补加作为微藻培养营养成分的三价铁离子化合物，能够明显提高微藻的沉降率，更有利于微藻的聚集、采收。而且本领域技术人员可以理解的是，当向培养液中补加的三价铁离子化合物不是作为微藻培养营养成分的三价铁离子化合物时(本领域技术人员应公知三氯化铁不能作为微藻培养的营养成分)，在不利于微藻聚集(即不利于微藻沉降率的提高)、采收的同时，因引入了新的离子也不利于培养液的重复利用。

以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。

另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。

此外，本发明的各种不同的实施方式之间也可以进行任意组合，只要其不违背本发明的思想，其同样应当视为本发明所公开的内容。

Claims

1.一种微藻采收方法，其特征在于，所述方法包括：当培养微藻至培养液的OD₆₈₀值为1-10、pH值为7.5-14时，向培养液中补加作为微藻培养营养成分的三价铁离子化合物，待培养液中的微藻分层沉降后分离微藻；

所述三价铁离子化合物为柠檬酸铁铵和EDTA铁的混合物；

所述柠檬酸铁铵和EDTA铁的摩尔比为2-1：1。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，以三价铁离子计，对于每升培养液，所述三价铁离子化合物的补加量为0.001-0.1mmol。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，在补加三价铁离子化合物后，降低培养液的混合强度。

4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中，向培养液中补加三价铁离子化合物时培养液的pH值为8-11。

5.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中，以三价铁离子计，对于每升培养液，所述三价铁离子化合物的补加量为0.01-0.05mmol。

6.根据权利要求3所述的方法，其中，降低后的混合强度为降低前混合强度的0％-99％。

7.根据权利要求6所述的方法，其中，降低后的混合强度为降低前混合强度的0％-80％。

8.根据权利要求7所述的方法，其中，降低后的混合强度为降低前混合强度的0％-50％。

9.根据权利要求3所述的方法，其中，降低混合强度后，混合1-10天，然后停止混合。

10.根据权利要求9所述的方法，其中，降低混合强度后，混合1-5天，然后停止混合。

11.根据权利要求3或6-8中任意一项所述的方法，其中，所述培养液的混合方式包括磁力搅拌、机械搅拌和气体鼓泡流化。

12.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中，所述分离微藻的方式为过滤分离或者分液分离；所述过滤分离为常压过滤分离、加压过滤分离或真空过滤分离。

13.根据权利要求12所述的方法，其中，所述过滤分离为常压过滤分离。

14.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中，所述微藻为适应碱性体系培养的藻种。

15.根据权利要求14所述的方法，其中，所述微藻为单针藻(Monoraphidium )和/或小球藻(Chlorella )。

16.权利要求1-15中任意一项所述的方法在微藻培养中的应用。