CN106562078A - 防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的金银花茎叶饲料添加剂、及其制备方法和应用 - Google Patents
防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的金银花茎叶饲料添加剂、及其制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供一种防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的饲料添加剂，该饲料添加剂原料由金银花茎叶组成。本发明的饲料添加剂能够有效的防治家禽类细菌及病毒感染性疾病，避免抗生素药物的使用，且无药物残留、无耐药性、无毒副作用的优点。本发明提供的金银花茎叶饲料添加剂的制备工艺简单、耗能低、无污染，安全方便，易储存，药效确切，容易实现产业，具有很好的经济和社会效益。
Description
技术领域
本发明属于家禽类养殖技术领域，本发明具体涉及防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的饲料添加剂、饲料及其制备方法和应用。
背景技术
近年来，随着人民生活水平的提高，对家禽类的消费量也逐年增加，进而有力的带动了国内家禽集约化养殖业的不断发展。然而在家禽养殖业中，由于高密度饲养及多种病原菌引起的家禽疾病日益严重，尤其是大肠杆菌，沙门氏菌等病原菌诱发的家禽疾病，严重危害养殖业的发展。其中，鸡沙门氏菌是鸡伤寒、鸡白痢、鸡副伤寒等多种疾病的病原体。至今为止的研究证明，鸡白痢是多发生于雏鸡的感染性疾病，常表现为下痢、畏寒，体质衰弱。鸡大肠杆菌病是由致病性埃希氏大肠杆菌引起的一种疾病，常发生于春季，尤为在饲养条件较差的鸡舍发生，且多与其他疾病并发。
目前对家禽类疾病的防治主要采用抗生素药物治疗。由于长期使用或滥用抗生素，其负面效应也日益显露，不仅影响家畜禽养殖效率，同时也能够引起细菌产生耐药性和抗生素残留等问题，当人们长期食用含有抗生素残留的家禽，不仅容易诱发过敏反应等临床症状，危害健康，同时也引起环境污染等社会问题。
因此，一种安全、高效、无抗菌素残留、无耐药、具有抗菌及抗感染作用的防治家禽疾病药物或饲料添加剂，无论是对于家禽养殖业自身的可持续发展，还是对消费者的健康，都是至关重要，且具有着巨大的市场空间。
发明内容
本发明涉及一种防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的饲料添加剂，其中，所述饲料添加剂原料由金银花茎叶组成。
本发明提供的饲料添加剂原料为金银花茎叶，具有有效防治家禽类疾病的作用。该饲料添加剂采用金银花茎叶为原料，成本低廉、安全可靠，可以避免抗生素所引发的诸多安全问题。金银花茎叶中富含绿原酸、异绿原酸及木犀草素等多种具有抗菌作用的活性化合物，抗菌作用确切，且安全性较高。
此外，与金银花相比，金银花茎叶不仅富含绿原酸等活性化合物而且也富含植物纤维，因此有益于制备用于防治家禽类疾病的饲料添加剂。
本发明提供的防治家禽类疾病饲料添加剂是以金银花茎叶为原料，经机械粉碎或制备提取物而制成，具有抗菌、抗病毒和抗感染作用。在本发明中，上述提及粉末粒径小于0.85mm(20目)，以便于家禽养殖生物的消化吸收，并能够减少对养殖家禽等消化***的损害。
金银花茎叶来源稳定及成本低廉，其理由为所述的金银花茎叶是在有益于提高金银花产量而季节性修剪植物时获得的。至今为止，所修剪下来的金银花茎叶大多做为废物处理，本发明将其用于防治家禽类疾病饲料添加剂，有效的降低成本、提高了市场竞争力。
该饲料添加剂能对集约化家禽养殖业的发展能够起到一定的促进作用。本发明涉及原料来源广泛、制备工艺简单、生产成本低、应用可行、效果确切、不会产生耐药性，可安全有效的防治家禽类疾病。
尽管金银花的抗菌，抗病毒和抗感染等作用被人们所知，但至今为止尚未见到利用该植物茎叶为原料的微粉及提取物用于家禽类疾病的防治作用。
本发明还涉及所述防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的饲料添加剂的制备方法。
本发明还涉及所述饲料添加剂在制备防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的药物中的应用。
附图说明
图1为金银花茎、叶及花中绿原酸液相分析对比；
图2为金银花叶中各主峰的分子量；
图3为金银花叶中含有的活性成分。
具体实施方式
以下，对本发明的实施方式进行说明。
本发明涉及一种防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的饲料添加剂，其中，所述饲料添加剂原料由金银花茎叶组成；所述饲料添加剂中含重量百分比50～100％的金银花茎叶微粉或提取物。
本发明研究结果提示金银花茎叶机械粉碎微粉或提取物添加入饲料后，对家禽类疾病具有显著的防治效果，可以作为饲料添加剂防治家禽类细菌及病毒感染性疾病。
作为本发明的一种实施方式，所述饲料添加剂含100％金银花茎叶微粉，所述金银花茎叶微粉粉末的粒径小于0.85mm。
本发明提供的防治家禽类细菌及病毒感染性疾病饲料添加剂以季节修剪金银花植物时获得的茎叶作为原料，经过机械粉碎成粉末而制成，粉末的粒径小于0.85mm(20目)，以便于家禽类消化吸收，并减少对家禽类消化***的损害。在使用时，将粉末状的饲料添加剂混合入饲料中并搅拌均匀，所述饲料防霉添加剂与饲料的重量比1～5％为适宜。
作为本发明的一种实施方式，所述饲料添加剂含重量百分比50～100％的金银花茎叶水提取物，所述金银花茎叶水提取物每克含生药>3g。
本发明涉及一种制备所述的防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的饲料添加剂的方法，其中，所述方法包括：将所述原料经过机械粉碎成粒径小于0.85mm的粉末，得到所述饲料添加剂。
本发明涉及一种制备所述的防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的饲料添加剂的方法，其中，所述方法包括：步骤(1)，将所述原料粉碎成粉末；步骤(2)，将所述步骤(1)获得的原料粉末添加溶剂，所述溶剂为水、乙醇或含水乙醇，所述的原料粉末与溶剂的重量比在1:1～20，获得的溶液通过加热提取、微波提取或超声提取获得所述饲料添加剂。
本发明涉及一种制备所述的防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的饲料添加剂的方法，其中，所述方法包括：步骤(1)，将所述原料粉碎成粉末；步骤(2)，将所述步骤(1)获得的原料粉末添加水，所述的原料粉末与水的重量比为1:1～20，加热提取，提取时间为30分钟至24小时，过滤所述提取液；步骤(3)，将所述步骤(2)中的过滤后的滤渣添加水，所述的滤渣与水的重量比为1:1～20，加热第二次提取，提取时间为30分钟至24小时，过滤所述第二次提取液；以及步骤(4)，合并所述步骤(2)和步骤(3)得到的滤液，浓缩得到所述的饲料添加剂。
作为本发明的一种实施方式，本发明制备所述的饲料添加剂的方法中，所述步骤(2)和步骤(3)中加热温度为沸腾温度，加热时间为30分钟。
本发明中提及的金银花茎叶提取物的制备方法有以下两种：1、将金银花茎叶经机械粉碎成粉末后添加溶剂形成溶液，将溶液通过加热提取、微波提取或超声提取获得提取物，所述的原料粉末与溶剂的重量比在1:1～10；为适宜，所述溶剂一般为水或乙醇或含水乙醇。2、将金银花茎、叶经机械粉碎成粉末后添加适量水中形成一次溶液，将一次溶液加热预定时间后，过滤一次溶液得到一次滤渣和一次滤液；将一次滤渣再次添加适量水中形成二次溶液，将二次溶液加热预定时间后，过滤二次溶液得到二次滤渣和二次滤液，合并一次滤液和二次滤液，进行浓缩、冷冻、干燥得到提取物。
本发明涉及一种防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的饲料，其中，所述饲料包括重量比1～5％所述的饲料添加剂。
施用时，本发明经机械粉碎成粒径小于0.85mm的粉末，及提取制备方法获取金银花茎叶提取物为粉末状时，将饲料添加剂混合入饲料中并搅拌均匀即可，所述饲料添加剂与饲料的重量比为1～5％；当饲料添加剂为液态提取物时，先将饲添加剂稀释到体积倍数的40倍后，再洒入饲料中并搅拌均匀，所述饲料添加剂生药材原料与饲料的重量比仍为1～5％为适宜。
作为本发明的一种实施方式，所述饲料添加剂通过与所述饲料混合添加，或所述饲料添加剂通过涂覆到所述饲料表面添加。
本发明还涉及所述的饲料添加剂在制备预防和治疗所述家禽类细菌及病毒感染性疾病的药物中的应用。
作为本发明的一种实施方式，所述家禽类细菌及病毒感染性疾病包括鸡白痢和大肠杆菌病，所述感染性的家禽类细菌及病毒包括沙门氏菌和大肠杆菌感染。
本发明利用金银花修剪植物获得的茎叶为质量稳定、易获得的原料来制备饲料添加剂，本发明利用金银花茎、叶富含绿原酸等活性成分，避免了抗生素药物的使用，具有成本低、无药物残留、无耐药性、无毒副作用的优点，制备时工艺简单、耗能低、无污染，非常容易实现产业化，为金银花产区提供了新的用途，具有很好的经济和社会效益。
下面结合具体实施实例对本发明做进一步的描述。
实例1金银花茎、叶及花的活性成分分析
分析仪器和原料：
恒温干燥箱为德国Memmert型
电子天平Sartorius BP211D，精密度十万分之一
粉碎机杭州熊火科技有限公司
超纯水仪Merck millipore公司
分析型高效液相色谱仪Dionex Ultimate 3000系列
低分辨质谱仪Bruker amazon SL离子阱质谱仪
分析色谱柱为Phenomenex Gemini 5μC18 110A(5μm,250×4.6mm)实验样品由巨鹿京鼎穆拉德金银花产业园提供。
金银花茎叶的活性成分分析采用HPLC-MS法。供试品溶液的制备为分别取金银花粉末、金银花叶粉末、金银花茎粉末0.5g，精密称定，置于锥形瓶中，精密加水50ml，称定质量，浸泡30min后，通过加热回流提取法煎煮使之沸腾15min，放冷，再称定质量，加水补足减失的质量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，水浴蒸干，用1ml蒸馏水溶解，离心之后经0.45μm水膜过滤用于HPLC-MS仪器分析。绿原酸对照品为0.46mg，加甲醇配制成46.0μg/ml对照品溶液用于本实验。实验检测波长为365nm，柱温为40℃，进样量为20μl，流动相：乙腈—0.05％冰醋酸，采用线性梯度洗脱程序：0-60min乙腈1％—30％，0.05％冰醋酸99％—70％，流速为0.9ml/min。实验结果如图1所示。
从图1可见，在金银花茎、叶和花的提取物的成分比较中可以看出，金银花叶中的化学成分含量显著高于花和茎的提取物，金银花叶提取物中含有多种活性成分(参见图2)，其中主要为咖啡酰奎宁酸(caffeoylquinic acid)、绿原酸(chlorogenic acid)、当药甙(sweroside)及木犀草苷(galuteolin)等均为抗菌、抗病毒及抗氧化活性成分(参见图3)，适用于饲料防治家禽类疾病用途，且不会对家禽类的健康形成负面作用。
此外，根据HPLC液相色谱图面积比，金银花花、茎、叶中的绿原酸和木犀草苷含量如表1所示。
表1金银花茎叶中绿原酸及木犀草苷的含量
| 实验组别 | 金银花 | 金银花叶 | 金银花茎 |
| 绿原酸(％) | 6.17±0.12 | 5.89±0.15 | 4.60±0.32 |
| 木犀草苷(％) | 0.11±0.02 | 0.35±0.01 | 0.16±0.01 |
因此，金银花茎叶具有相当的药用价值。
实例2本发明的饲料添加剂的制备
本发明的饲料添加剂可以为机械微粉和提取物两种形式。
2.1金银花茎叶微粉的制备
以季节修剪金银花植物时获得的茎叶作为原料，清洗，干燥，经过机械粉碎成粉末而制成，粉末的粒径小于0.85mm(20目)，得到本发明金银花茎叶微粉。
2.2金银花茎叶水提取物的制备
以季节修剪金银花植物时获得的茎叶作为原料，按以下步骤制备而成：
步骤(1)，将所述原料粉碎成粉末；步骤(2)，将步骤(1)获得的原料粉末添加10倍量的水，加热至沸腾，提取30分钟，过滤所述提取液；步骤(3)，将步骤(2)中的过滤后的滤渣添加10倍量的水，加热至沸腾，第二次提取，提取30分钟，过滤所述第二次提取液；以及步骤(4)，合并步骤(2)和步骤(3)得到的滤液，每克浓缩物中含有生药3.2g，得到本发明金银花茎叶水提取物。
本发明的金银花茎叶也可以使用乙醇、含水乙醇作为溶剂进行提取，提取时金银花茎叶与溶剂的比例在1:1～20范围为宜；提取温度从室温到溶剂沸点范围都可适用。提取方法可以采用加热提取、超声提取、微波提取等，也可多种方法结合起来应用。提取时间从30分钟到24小时范围均可以。
本发明所述的饲料添加剂一般以微粉、浸膏及微粒等形式用于防治家禽类细菌及病毒感染性疾病，其产品在制备过程中可以添加常规的赋形剂、抗氧化剂、防腐剂、着色剂等添加剂。其中，赋形剂可选用淀粉、纤维素等；优选的抗氧化剂有亚硫酸盐、抗坏血酸等；二羟基乙酸、氯丁醇等可作为防腐剂使用。所述饲料添加剂中金银花茎叶微粉或提取物的含量在50～100％为适宜。
实例3本发明的金银花茎叶饲料添加剂的抗病原菌作用
大肠杆菌标准质控菌株ATCC25922(购自广东省微生物研究所)及分离获得的四个埃希菌株用于本实验。实施例2中1000μg/ml金银花茎叶机械粉碎微粉、提取物及诺氟沙星溶液置于冰箱内低温保存。细菌悬液制备为琼脂培养基平板上获取的菌落，接种于Mueller-Hinton(MH)琼脂培养液中培养6小时后，稀释至1.5×105CFU/ml用于本实验。检测样品以灭菌培养液按比例稀释成不同浓度，分别以100μl依次添加到96孔细胞培养板中，再分别将100μl菌液添加培养孔内，37℃条件下培养24小时，检测最小抑菌浓度MIC。
表1金银花茎叶微粉及提取物对大肠杆菌的抑菌活性(MICμg/ml)
| 实验组别 | ATCC25922 | E.coli-1 | E.coli-2 | E.coli-3 | E.coli-4 |
| 诺氟沙星 | 0.5 | 10 | 25 | 10 | 30 |
| 金银花茎叶提取物 | 150 | 150 | 150 | 150 | 150 |
| 金银花茎叶微粉 | 150 | 150 | 150 | 150 | 150 |
实施例4本发明的金银花茎叶饲料添加剂对鸡病原菌感染的保护作用
金银花茎叶饲料添加剂以1.25％与家禽基础饲料混合，基础饲料基本组成成分为，玉米45.0％、豆粕25.0％、次粉25.0％、鱼粉2.0％、磷酸二氢钙1.0％、食盐0.4％、赖氨酸盐酸盐0.3％、DL-蛋白酸0.1％、维生素微量元素混合物1.2％、其中，每1千克饲料中维生素微量元素混合物含Zn 180.0mg、Mn 50.0mg、Se 0.3mg、Fe 150.0mg、Cu 150.0mg、I0.3mg、VD 20IU、VA 6500IU、VB1 2.8mg、VB2 6.2mg、VB6 1.1mg、VB12 35mg、VK3 3.5mg、烟酸33.0mg、叶酸0.83mg、泛酸18.0mg等。
金银花茎叶饲料添加剂使用效果实验选用钜河养殖场实施。实验分别以培养液将鸡白痢沙门氏菌C79-13和大肠杆菌O78(购自广东省微生物研究所)稀释为6×1011菌/L浓度用于本实验。一周龄雏鸡每只肌注0.25ml鸡白痢菌液,二周龄雏鸡每只腹腔注射1.0ml大肠杆菌菌液。病原菌接种当日开始连续5天给药50mg/L诺氟沙星，金银花茎叶饲料添加剂、绿原酸粗提物(>10％)、木犀草苷粗提物(>10％)用于整个实验过程。实验每组50只，并观察饲养状态和记录死亡率和治愈率。实验结果如表2和表3所示，金银花茎叶对鸡白痢和大肠杆菌病具有显著的治疗效果。其治疗效果较更高含量的绿原酸、木犀草苷纯品效果更好。
表2金银花茎叶饲料添加剂对雏鸡白痢病原菌感染的防治作用
| 实验组别 | 感染鸡羽数 | 死亡数 | 死亡率(％) | 保护率(％) |
| 对照组 | 50 | 28 | 56 | - |
| 诺氟沙星50mg/L | 50 | 10 | 20 | 64.2 |
| 金银花茎叶提取物 | 50 | 8 | 16 | 71.4 |
| 金银花茎叶微粉 | 50 | 10 | 20 | 64.2 |
| 绿原酸对照组 | 50 | 20 | 40 | 28.6 |
| 木犀草苷对照组 | 50 | 21 | 42 | 25.0 |
表3金银花茎叶饲料添加剂对鸡大肠杆菌病原菌感染的防治作用
| 实验组别 | 感染鸡羽数 | 死亡数 | 死亡率(％) | 保护率(％) |
| 对照组 | 50 | 39 | 78 | - |
| 诺氟沙星50mg/L | 50 | 18 | 36 | 53.8 |
| 金银花茎叶提取物 | 50 | 16 | 32 | 58.9 |
| 金银花茎叶微粉 | 50 | 18 | 36 | 53.8 |
| 绿原酸对照组 | 50 | 24 | 48 | 38.5 |
| 木犀草苷对照组 | 50 | 27 | 54 | 30.8 |
以上所述仅是本发明的优选实施例而已，并非对本发明做任何形式上的限制，虽然本发明已以优选实施例揭露如上，然而并非用以限定本发明，任何熟悉本专业的技术人员，在不脱离本发明技术方案的范围内，当可利用上述揭示的技术内容作出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明技术方案的范围内。
Claims (10)
1.一种防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的饲料添加剂，其中，所述饲料添加剂原料由金银花茎叶组成；所述饲料添加剂中含重量百分比50～100％的金银花茎叶微粉或提取物。
2.根据权利要求1所述的防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的饲料添加剂，其中，所述饲料添加剂含100％金银花茎叶微粉，所述金银花茎叶微粉粉末的粒径小于0.85mm；或所述饲料添加剂含重量百分比50～100％的金银花茎叶水提取物，所述金银花茎叶水提取物每克含生药>3g。
3.一种制备权利要求1所述的防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的饲料添加剂的方法，其中，所述方法包括：将所述原料经过机械粉碎成粒径小于0.85mm的粉末，得到所述饲料添加剂。
4.一种制备权利要求1所述的防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的饲料添加剂的方法，其中，所述方法包括：
步骤(1)，将所述原料粉碎成粉末；
步骤(2)，将所述步骤(1)获得的原料粉末添加溶剂，所述溶剂为水、乙醇或含水乙醇，所述的原料粉末与溶剂的重量比在1:1～20，获得的溶液通过加热提取、微波提取或超声提取获得所述饲料添加剂。
5.一种制备权利要求1所述的防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的饲料添加剂的方法，其中，所述方法包括：
步骤(1)，将所述原料粉碎成粉末；
步骤(2)，将所述步骤(1)获得的原料粉末添加水，所述的原料粉末与水的重量比为1:1～20，加热提取，提取时间为30分钟至24小时，过滤所述提取液；
步骤(3)，将所述步骤(2)中的过滤后的滤渣添加水，所述的滤渣与水的重量比为1:1～20，加热第二次提取，提取时间为30分钟至24小时，过滤所述第二次提取液；以及
步骤(4)，合并所述步骤(2)和步骤(3)得到的滤液，浓缩得到所述的饲料添加剂。
6.根据权利要求5所述的方法，其中，所述步骤(2)和步骤(3)中加热温度为沸腾温度，加热时间为30分钟。
7.一种防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的饲料，其中，所述饲料包括重量比1～5％的权利要求1所述的饲料添加剂。
8.根据权利要求7所述的饲料，其中，所述饲料添加剂通过与所述饲料混合添加，或所述饲料添加剂通过涂覆到所述饲料表面添加。
9.根据权利要求1所述的饲料添加剂在制备预防和治疗所述家禽类细菌及病毒感染性疾病的药物中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其中，所述家禽类细菌及病毒感染性疾病包括鸡白痢和大肠杆菌病，所述感染性的家禽类细菌及病毒包括沙门氏菌和大肠杆菌感染。
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| CN201610820511.7A CN106562078A (zh) | 2016-09-13 | 2016-09-13 | 防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的金银花茎叶饲料添加剂、及其制备方法和应用 |
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| CN201610820511.7A Pending CN106562078A (zh) | 2016-09-13 | 2016-09-13 | 防治家禽类细菌及病毒感染性疾病的金银花茎叶饲料添加剂、及其制备方法和应用 |
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108142654A (zh) * | 2017-11-27 | 2018-06-12 | 河北京阳生物医药科技有限公司 | 一种混合饲料添加剂及其制备方法 |
| CN117016675A (zh) * | 2023-07-26 | 2023-11-10 | 四川农业大学 | 一种川银花叶提取物及其制备方法和应用 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102144728A (zh) * | 2010-02-08 | 2011-08-10 | 上海朝翔生物技术有限公司 | 一种金银花提取物饲料添加剂的制备方法 |
-
2016
- 2016-09-13 CN CN201610820511.7A patent/CN106562078A/zh active Pending
Patent Citations (1)
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| CN102144728A (zh) * | 2010-02-08 | 2011-08-10 | 上海朝翔生物技术有限公司 | 一种金银花提取物饲料添加剂的制备方法 |
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| CN117016675A (zh) * | 2023-07-26 | 2023-11-10 | 四川农业大学 | 一种川银花叶提取物及其制备方法和应用 |
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